JP7327899B2 - 分岐リンカーを含む抗体-薬物複合体及びそれらに関連する方法 - Google Patents
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- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Description
本出願は、2015年11月25日に出願されている米国仮出願第62/260,006号に対する優先権の利益を主張し、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
i)各分岐リンカーは、一次リンカー(PL)によりリガンドに共有結合で連結する分岐ユニット(BR)を含み、
ii)各分岐リンカーは、第1の分岐(B1)を含み、第1の活性剤は、二次リンカー(SL)及び切断基(CG)により分岐ユニットに共有結合で連結し、
iii)各分岐リンカーは、第2の分岐(B2)をさらに含み、a)第2の活性剤は、二次リンカー(SL)及び切断基(CG)により分岐ユニットに共有結合で連結し、又はb)ポリエチレングリコール部分は、分岐ユニットに共有結合で連結し、
各切断基は、リガンド-薬物複合体から活性剤を放出するように、加水分解することができる。
i)分岐リンカーは、一次リンカー(PL)により反応性部分に共有結合で連結する分岐ユニット(BR)を含み、
ii)分岐ユニットは、第1の分岐(B1)に共有結合で連結し、これは、二次リンカー(SL)及び切断基(CG)に共有結合で連結する第1の活性剤を含み、
iii)分岐ユニットは、第2の分岐(B2)に共有結合で連結し、これは、a)二次リンカー(SL)及び切断基(CG)に共有結合で連結する第2の活性剤、又はb)ポリエチレングリコール部分を含み、
各切断基は、リガンド-活性剤化合物から活性剤を放出するように、加水分解することができる。
Gは、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Wは、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O)2NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO2NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''は、それぞれ独立して、水素、(C1-C8)アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C1~C8)アルキル、(C3~C8)シクロアルキル、(C1~C8)アルコキシ、(C1~C8)アルキルチオ、モノ若しくはジ(C1~C8)アルキルアミノ、(C3~C20)ヘテロアリール又は(C6~C20)アリールであり、Wは、分岐ユニットに直接的又は間接的に連結し、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数であり、
mは0又は1、好ましくは1であり、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Bは、活性剤に共有結合しているユニットであり、
Wは、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O)2NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO2NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル、(C3~C8)シクロアルキル、(C1~C8)アルコキシ、(C1~C8)アルキルチオ、モノ若しくはジ(C1~C8)アルキルアミノ、(C3~C20)ヘテロアリール又は(C6~C20)アリールであり、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数、好ましくは3であり、
Lは、リンカー又は分岐ユニットへの結合を表し、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、
式中:
rは0から10の整数であり、
pは1から10の整数であり、
qは1から20の整数であり、
V及びYは、それぞれ独立して、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-であり、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールである。
R4は、水素又は-L4-COOR5であり、L4は、直接結合又は-CnH2n-であり、nは、1から10の整数であり、R5は、水素又はC1~C30アルキルである。
L1は、単結合、又は1から30個の炭素原子、好ましくは10、11、12、13、14、15又は16個の炭素原子を有するアルキレンであり、
R11は、水素、又は1から10個の炭素原子を有するアルキル、好ましくはメチルであり、
L2は、1から30個の炭素原子、好ましくは10、11、12、13、14、15又は16個の炭素原子を有するアルキレンである。
Gは、糖、糖酸又は修飾糖を表し、
Aはリガンドを表し、
Bは活性剤を表し、
Wは、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O)2NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO2NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル、(C3~C8)シクロアルキル、(C1~C8)アルコキシ、(C1~C8)アルキルチオ、モノ若しくはジ(C1~C8)アルキルアミノ、(C3~C20)ヘテロアリール又は(C6~C20)アリールであり、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数、好ましくは3であり、
mは0又は1、好ましくは1であり、
Lは、少なくとも1個の分岐ユニット(BR)及び少なくとも1つの一次リンカー(PL)を含むリンカーでありであり、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、糖又は糖酸、好ましくはグルクロン酸を表し、
Bは活性剤を表し、
Wは、電子求引性基、好ましくは-C(O)NR'-を表し、C(O)はフェニル環に結合しており、NR'(アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸のアミノ基であってよい)は、Lに結合しており、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、nは1から3の整数であり、
Lは、抗体へのつながりを表し、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは
Gはグルクロン酸であり、
Wは-C(O)NR'-であり、C(O)は、フェニル環に結合しており、NR'はLに結合しており、
Zは水素を表し、
nは3であり、
R1及びR2は、それぞれ水素を表す。
アルキレンは、少なくとも1つの不飽和結合を含む、
アルキレンは、少なくとも1つのヘテロアリーレンを含む、
アルキレンの炭素原子は、窒素(N)、酸素(O)及び硫黄(S)から選択される1個以上のヘテロ原子により置き換えられている、又は、
アルキレンは、1から20個の炭素原子を有する1つ以上のアルキルでさらに置換されている
のいずれかである。
Cはシステインを表し、
Yは、それぞれの発生に対して独立して、脂肪族アミノ酸を表し、
Xは、それぞれの発生に対して独立して、グルタミン、グルタメート、セリン、システイン、メチオニン、アラニン又はロイシンを表し、
チオエーテル結合は、アミノ酸モチーフのシステインの硫黄原子を含む。
配列CYYXであり、
Yは、それぞれの発生に対して独立して、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン又はバリンを表す。
rは1から10の整数、好ましくは2であり、
pは0から12の整数、好ましくは2であり、
qは1から20の整数であり、
Vは、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-、好ましくは-O-であり、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールである。
式中:
rは0から10の整数であり、
pは1から10の整数であり、
qは1から20の整数であり、
V及びYは、それぞれ独立して、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-であり、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールである。
rは2であり、
pは2であり、
qは、2、5又は11であり、
Vは-O-である。
Xは、-O-、(C1~C8)アルキレン又は-NR21-、好ましくは-O-を表し、
R21は、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリール、好ましくは水素を表し、
wは、1から12の整数、好ましくは1、3、6又は12である。
L1は、単結合又は1から30個、好ましくは12個の炭素原子を有するアルキレンであり、
R11は、水素、又は1から10個の炭素原子を有するアルキル、好ましくはメチルであり、
L2は、1から30個、好ましくは11個の炭素原子を有するアルキレンである。
Vは、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-、好ましくは-O-であり、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールであり、
rは1から10の整数、好ましくは2又は3であり、
pは0から10の整数、好ましくは1又は2であり、
qは1から20、好ましくは1から6の整数であり、
L1は単結合である。
a)オキシムの酸素原子は、オキシムを活性剤に共有結合で、例えば分岐ユニットを経由してつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子は、オキシムを抗体に共有結合でつなげる基で置換され、又は
b)オキシムの酸素原子は、オキシムを抗体に共有結合でつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子は、オキシムを活性剤に共有結合で、例えば分岐ユニットを経由してつなげる基で置換されている。
B及びB'は、同一であっても、又は異なっていてもよい活性剤を表し、
nは、それぞれの発生に対して独立して、0から30の整数を表し、
fは、それぞれの発生に対して独立して、0から30の整数を表し、
Lは、抗体へのつながりを表す。
(a) エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、PTK787/ZK 222584、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、AG1478、AG1571、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファン、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、ウレドーパ、エチレンイミン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、トリメチロールメラミン(trimethylolomelamine)、ブラタシン、ブラタシノン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体及び代謝産物(SN-38)、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、CC-1065、アドゼレシン、カルゼルシン、ビゼレシン(bizelesin)、クリプトフィシン1、クリプトフィシン8、ドラスタチン、デュオカルマイシン、KW-2189、CB1-TM1、エリュテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン、スポンジスタチン、クロランブシル、クロルナファジン、コロホスファミド(cholophosphamide)、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン(ranimnustine)、カリケアミシン、カリケアミシンガンマ1、カリケアミシンオメガ1、ジネミシン、ジネミシンA、クロドロネート(clodronate)、エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア、アクラシノマイシン(aclacinomysin)、アクチノマイシン、アンチマイシン(antrmycin)、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルニノマイシン(carninomycin)、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルブシン(detorubucin)、6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、2-ピロリノ-ドキソルビシン(doxorubucin)、リポソームドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン(esorubicin)、マルセロマイシン、マイトマイシンC、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ぺプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン(streptomigrin)、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、5-フルオロウラシル、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート、フルダラビン、6-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン(thiguanine)、アンシタビン、アザシチジン、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フォリン酸、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトレキサート(edatraxate)、デフォファミン、デメコルシン、ジアジコン、エフロルニチン(elfornithine)、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダイニン、メイタンシン、アンサミトシン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンモール、ニトラリン(nitraerine)、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、2-エチルヒドラジド、プロカルバジン、ポリサッカリド-k、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、2,2',2''-トリクロロトリエチルアミン、T-2毒素、ベラキュリンA、ロリジンA及びアングイジン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルのアルブミン改変ナノ粒子製剤、ドセタキセル(doxetaxel)、クロランブシル、ゲムシタビン、6-チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン、テニポシド、エダトレキサート、ダウノマイシン、アミノプテリン、ゼローダ、イバンドロネート、CPT-11、トポイソメラーゼ阻害剤RFS2000、ジフルオロメチルオルニチン、レチノイン酸、カペシタビン又は先述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物又は酸、
(b)モノカイン、リンフォカイン、従来からのポリペプチドホルモン、上皮小体ホルモン、チロキシン、リラキシン、プロリラキシン、糖タンパク質ホルモン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、肝細胞増殖因子、線維芽細胞増殖因子、プロラクチン、胎盤性ラクトゲン、腫瘍壊死因子-α、腫瘍壊死因子-β、ミュラー管阻害物質、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮増殖因子、トロンボポエチン、エリスロポエチン、骨誘導因子、インターフェロン、インターフェロン-α、インターフェロン-β、インターフェロン-γ、コロニー刺激因子(「CSF」)、マクロファージ-CSF、顆粒球-マクロファージ-CSF、顆粒球-CSF、インターロイキン(「IL」)、IL-1、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、腫瘍壊死因子、TNF-α、TNF-β、ポリペプチド因子、LIF、kitリガンド又は先述のいずれかの組合せ、
(c)ジフテリア毒素、ボツリヌス(botulium)毒素、破傷風毒素、赤痢毒素、コレラ毒素、アマニチン、アマニチン誘導体、α-アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、テトロドトキシン、ブレベトキシン、シガトキシン、リシン、AM毒素、チューブリシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、カリケアミシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキサート、ビンデシン、SG2285、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、オーリスタチン、クリプトフィシン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体及び代謝産物(SN-38)、リゾキシン、リゾキシン誘導体、CC-1065、CC-1065類似体若しくは誘導体、デュオカルマイシン、エンジイン抗生物質、エスペラミシン、エポチロン、アゾナフィド、アプリジン、トキソイド又は先述のいずれかの組合せ、
(d)親和性リガンドであって、基質、阻害剤、刺激剤、神経伝達物質、放射性同位体又は先述のいずれかの組合せである、親和性リガンド、
(e)放射性標識、32P、35S、蛍光色素、電子密度試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン(dioxigenin)、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に相補的な配列を有する核酸分子、又は先述のいずれかの組合せ、
(f)免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、抗菌剤及び抗寄生虫剤又は先述のいずれかの組合せ、
(g)タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、LY117018、オナプリストン又はトレミフェン、
(h)4(5)-イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール又はアナストロゾール、
(i)フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン又はトロキサシタビン、
(j)アロマターゼ阻害剤、
(k)タンパク質キナーゼ阻害剤、
(l)脂質キナーゼ阻害剤、
(m)アンチセンスオリゴヌクレオチド、
(n)リボザイム、
(o)ワクチン、並びに
(p)抗血管形成剤から独立して選択される。
生体分子は、抗体、及びケトン又はアルデヒドを含み、
プロドラッグは、アルコキシアミンを含み、
反応により、オキシムが生成され、それにより、抗体をプロドラッグに共有結合でつなげる。
抗体は、イソプレニル化配列を含み、
抗体をイソプレニル化するステップは、抗体をイソプレノイド転移酵素及びイソプレノイド転移酵素基質とインキュベートするステップを含み、
基質は、ケトン又はアルデヒドを含む。
Gは、糖又は糖酸、好ましくはグルクロン酸を表し、
Bは活性剤を表し、
Wは、電子求引性基、好ましくは-C(O)NR'-を表し、C(O)はフェニル環に結合しており、NR'(アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸のアミノ基であってよい)は、Lに結合しており、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数であり、
Lは、抗体へのつながりを表し、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Wは、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O)2NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO2NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C1~C8)アルキル、(C3~C8)シクロアルキル、(C1~C8)アルコキシ、(C1~C8)アルキルチオ、モノ若しくはジ(C1~C8)アルキルアミノ、(C3~C20)ヘテロアリール又は(C6~C20)アリールであり、Wは、分岐ユニットに直接的又は間接的に連結し、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数であり、
mは0又は1、好ましくは1であり、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Bは、活性剤に共有結合しているユニットであり、
Wは、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O)2NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO2NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル、(C3~C8)シクロアルキル、(C1~C8)アルコキシ、(C1~C8)アルキルチオ、モノ若しくはジ(C1~C8)アルキルアミノ、(C3~C20)ヘテロアリール又は(C6~C20)アリールであり、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数、好ましくは3であり、
Lは、リンカー又は分岐ユニットへの結合を表し、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、
Gはグルクロン酸であり、
Wは-C(O)NR'-であり、C(O)は、フェニル環に結合しており、NR'はLに結合しており、
Zは水素を表し、
nは3であり、
R1及びR2は、それぞれ水素を表す。
アルキレンは、少なくとも1つの不飽和結合を含む、
アルキレンは、少なくとも1つのヘテロアリーレンを含む、
アルキレンの炭素原子は、窒素(N)、酸素(O)及び硫黄(S)から選択される1個以上のヘテロ原子により置き換えられている、又は
アルキレンは、1から20個の炭素原子を有する1つ以上のアルキルでさらに置換されている
のいずれかである。そのような一部の実施形態では、アルキレンの少なくとも1個の炭素原子は、窒素により置き換えられ、一次リンカーは、親水性アミノ酸の少なくとも2個の原子を含み、窒素は、親水性アミノ酸の骨格カルボニルとペプチド結合を形成する。親水性アミノ酸は、アルギニン、アスパルテート、アスパラギン、グルタメート、グルタミン、ヒスチジン、リシン、オルニチン、プロリン、セリン又はトレオニンである。
Cはシステインを表し、
Yは、それぞれの発生に対して独立して、脂肪族アミノ酸を表し、
Xは、それぞれの発生に対して独立して、グルタミン、グルタメート、セリン、システイン、メチオニン、アラニン又はロイシンを表し、
チオエーテル結合は、アミノ酸モチーフのシステインの硫黄原子を含む。
配列CYYXであり、
Yは、それぞれの発生に対して独立して、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン又はバリンを表す。
rは1から10の整数、好ましくは2であり、
pは0から12の整数、好ましくは2であり、
qは1から20の整数であり、
Vは、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-、好ましくは-O-であり、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールである。
式中:
rは0から10の整数であり、
pは1から10の整数であり、
qは1から20の整数であり、
V及びYは、それぞれ独立して、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-であり、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールである。
rは2であり、
pは2であり、
qは、2、5又は11であり、
Vは-O-である。
R3は、水素又はC1~C30アルキルであり、
R4は、水素又は-L4-COOR5であり、L4は、直接結合又は-CnH2n-であり、nは、1から10の整数であり、R5は、水素又はC1~C30アルキルである。
R11は、水素、又は1から10個の炭素原子を有するアルキル、好ましくはメチルであり、
L2は、1から30個の炭素原子、好ましくは10、11、12、13、14、15又は16個の炭素原子を有するアルキレンである。
Xは、-O-、(C1~C8)アルキレン又は-NR21-、好ましくは-O-を表し、
R21は、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリール、好ましくは水素を表し、
wは、1から12の整数、好ましくは1、3、6又は12である。
L1は、単結合、又は1から30個、好ましくは12個の炭素原子を有するアルキレンであり、
R11は、水素、又は1から10個の炭素原子を有するアルキル、好ましくはメチルであり、
L2は、1から30個、好ましくは11個の炭素原子を有するアルキレンである。
Vは、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-、好ましくは-O-であり、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールであり、
rは1から10の整数、好ましくは2又は3であり、
pは0から10の整数、好ましくは1又は2であり、
qは1から20、好ましくは1から6の整数であり、
L1は単結合である。
a)オキシムの酸素原子は、オキシムを活性剤に共有結合で、例えば分岐ユニットを経由してつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子は、オキシムを抗体に共有結合でつなげる基で置換され、又は
b)オキシムの酸素原子は、オキシムを抗体に共有結合でつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子は、オキシムを活性剤に共有結合で、例えば分岐ユニットを経由してつなげる基で置換されている。
(a) エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、PTK787/ZK 222584、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、AG1478、AG1571、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファン、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、ウレドーパ、エチレンイミン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、トリメチロールメラミン、ブラタシン、ブラタシノン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体及び代謝産物(SN-38)、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、CC-1065、アドゼレシン、カルゼルシン、ビゼレシン(bizelesin)、クリプトフィシン1、クリプトフィシン8、ドラスタチン、デュオカルマイシン、KW-2189、CB1-TM1、エリュテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン、スポンジスタチン、クロランブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、カリケアミシン、カリケアミシンガンマ1、カリケアミシンオメガ1、ジネミシン、ジネミシンA、クロドロネート(clodronate)、エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アンチマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルニノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルブシン(detorubucin)、6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、2-ピロリノ-ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン(esorubicin)、マルセロマイシン、マイトマイシンC、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ぺプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、5-フルオロウラシル、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート、フルダラビン、6-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、アンシタビン、アザシチジン、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フォリン酸、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトレキサート、デフォファミン、デメコルシン、ジアジコン、エフロルニチン、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダイニン、メイタンシン、アンサミトシン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンモール、ニトラリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、2-エチルヒドラジド、プロカルバジン、ポリサッカリド-k、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、2,2',2''-トリクロロトリエチルアミン、T-2毒素、ベラキュリンA、ロリジンA及びアングイジン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルのアルブミン改変ナノ粒子製剤、ドセタキセル、クロランブシル、ゲムシタビン、6-チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン、テニポシド、エダトレキサート、ダウノマイシン、アミノプテリン、ゼローダ、イバンドロネート、CPT-11、トポイソメラーゼ阻害剤RFS2000、ジフルオロメチルオルニチン、レチノイン酸、カペシタビン又は薬学的に許容される塩、溶媒和物又は先述のいずれかの酸、
(b)モノカイン、リンフォカイン、従来からのポリペプチドホルモン、上皮小体ホルモン、チロキシン、リラキシン、プロリラキシン、糖タンパク質ホルモン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、肝細胞増殖因子、線維芽細胞増殖因子、プロラクチン、胎盤性ラクトゲン、腫瘍壊死因子-α、腫瘍壊死因子-β、ミュラー管阻害物質、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮増殖因子、トロンボポエチン、エリスロポエチン、骨誘導因子、インターフェロン、インターフェロン-α、インターフェロン-β、インターフェロン-γ、コロニー刺激因子(「CSF」)、マクロファージ-CSF、顆粒球-マクロファージ-CSF、顆粒球-CSF、インターロイキン(「IL」)、IL-1、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、腫瘍壊死因子、TNF-α、TNF-β、ポリペプチド因子、LIF、kitリガンド又は先述のいずれかの組合せ、
(c)ジフテリア毒素、ボツリヌス毒素、破傷風毒素、赤痢毒素、コレラ毒素、アマニチン、アマニチン誘導体、α-アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、テトロドトキシン、ブレベトキシン、シガトキシン、リシン、AM毒素、チューブリシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、カリケアミシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキサート、ビンデシン、SG2285、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、オーリスタチン、クリプトフィシン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体及び代謝産物(SN-38)、リゾキシン、リゾキシン誘導体、CC-1065、CC-1065類似体若しくは誘導体、デュオカルマイシン、エンジイン抗生物質、エスペラミシン、エポチロン、アゾナフィド、アプリジン、トキソイド又は先述のいずれかの組合せ、
(d)親和性リガンドであって、基質、阻害剤、刺激剤、神経伝達物質、放射性同位体又は先述のいずれかの組合せである、親和性リガンド、
(e)放射性標識、32P、35S、蛍光色素、電子密度試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に相補的な配列を有する核酸分子、又は先述のいずれかの組合せ、
(f)免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、抗菌剤及び抗寄生虫剤又は先述のいずれかの組合せ、
(g)タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、LY117018、オナプリストン又はトレミフェン、
(h)4(5)-イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール又はアナストロゾール、
(i)フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン又はトロキサシタビン、
(j)アロマターゼ阻害剤、
(k)タンパク質キナーゼ阻害剤、
(l)脂質キナーゼ阻害剤、
(m)アンチセンスオリゴヌクレオチド、
(n)リボザイム、
(o)ワクチン、並びに
(p)抗血管形成剤から選択される。
i)分岐リンカーは、一次リンカー(PL)によりリガンドに共有結合で連結する分岐ユニット(BR)を含み、
ii)分岐ユニットは、第1の分岐(B1)に共有結合で連結し、切断基(CG)は、二次リンカー(SL)に共有結合で連結し、
iii)分岐ユニットは、第2の分岐(B2)に共有結合で連結し、これは、a)二次リンカー(SL)に共有結合で連結する第2の切断基(CG)、又はb)ポリエチレングリコール部分のいずれかを含む。
i)分岐リンカーは、一次リンカー(PL)によりリガンドに共有結合で連結する分岐ユニット(BR)を含み、
ii)分岐ユニットは、第1の分岐(B1)に共有結合で連結し、これは、二次リンカー(SL)に共有結合で連結する切断基(CG)と反応させることが可能である末端反応基を有し、
iii)分岐ユニットは、第2の分岐(B2)に共有結合で連結し、これは、a)二次リンカー(SL)に共有結合で連結する切断基(CG)と反応させることが可能である第2の末端反応基、又はb)ポリエチレングリコール部分を含む。
Gは、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Wは、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O)2NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO2NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C1~C8)アルキル、(C3~C8)シクロアルキル、(C1~C8)アルコキシ、(C1~C8)アルキルチオ、モノ若しくはジ(C1~C8)アルキルアミノ、(C3~C20)ヘテロアリール又は(C6~C20)アリールであり、Wは、分岐ユニットに直接的又は間接的に連結し、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数であり、
mは0又は1、好ましくは1であり、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、糖又は糖酸、好ましくはグルクロン酸を表し、
Bは、活性剤に取って代わることが可能である脱離基、例えばハロゲン(とりわけCl若しくはBr)、又は、活性剤に連結することが可能である反応性部分を含むユニット、例えばイソシアネート、酸塩化物、クロロホルメートなどを表し、
Wは、電子求引性基、好ましくは-C(O)NR'-を表し、C(O)はフェニル環に結合しており、NR'(アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸のアミノ基であってよい)は、Lに結合しており、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数であり、
Lは、分岐ユニットへのつながりを表し、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Bは、活性剤に連結することが可能である反応性部分を含むユニットであり、
Wは、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O)2NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO2NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル、(C3~C8)シクロアルキル、(C1~C8)アルコキシ、(C1~C8)アルキルチオ、モノ若しくはジ(C1~C8)アルキルアミノ、(C3~C20)ヘテロアリール又は(C6~C20)アリールであり、
各Zは、独立して、水素、(C1~C8)アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数、好ましくは3であり、
Lは、分岐ユニットへの結合を表し、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
Gは、糖又は糖酸、好ましくはグルクロン酸又はそれらの誘導体であり、
Bは、活性剤、例えば薬物を表し、
Wは、電子求引性基、好ましくは-C(O)NR'-を表し、C(O)はフェニル環に結合しており、NR'はLに結合しており、
各Zは、独立して、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、好ましくは水素を表し、
nは1から3の整数、好ましくは3であり、
Lは、抗体をWに共有結合でつなげる20から100個の原子の鎖を含み、
R1及びR2は、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR1及びR2は、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成する。
(i)アルキレンが、少なくとも1つの不飽和結合、好ましくは3又は4つの二重結合を含み、三重結合を含まない、
(ii)アルキレンが、少なくとも1つのヘテロアリーレンを含む、
(iii)アルキレンの少なくとも1個の炭素原子が、窒素(N)、酸素(O)及び硫黄(S)から選択される1個以上のヘテロ原子、好ましくは少なくとも1つの窒素及び少なくとも1つの酸素(例えば、オキシムに見られる)により置き換えられている、及び
(iv)アルキレンが、1から20個の炭素原子を有する1つ以上のアルキル、好ましくは2又は3個のメチルで置換されている。
L1は、単結合、又は1から30個の炭素原子、好ましくは12個の炭素原子を有するアルキレンであり、
R11は、水素、又は1から10個の炭素原子を有するアルキル、好ましくはメチルであり、
L2は、1から30個の炭素原子、例えば、10又は11個、好ましくは11個の炭素原子を有するアルキレンである。
Vは、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-、好ましくは-O-であり、
Xは、-O-、(C1~C8)アルキレン又は-NR21-、好ましくは-O-であり、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリール、好ましくは水素であり、
rは、1から10の整数、好ましくは2又は3であり、
pは、0から12の整数、好ましくは1又は2であり、
qは、1から20の整数であり、
wは、1から20、好ましくは4から20の整数である。
Vは、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-、好ましくは-O-を表し、
R21からR25は、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールを表し、
rは、1から10の整数、好ましくは2又は3であり、
pは、0から10の整数、好ましくは1又は2であり、
qは、1から20、好ましくは1から6の整数であり、
L1は単結合である。
B及びB'は、同一であっても、又は異なっていてもよい活性剤を表し、
nは、それぞれの発生に対して独立して、0から30の整数を表し、
fは、それぞれの発生に対して独立して、0から30の整数を表し、
Lは、抗体へのつながりを表す。
化合物1iの調製
5-ホルミルサリチル酸1a(10.0g、60.1mmol)のTHF(30mL)中懸濁液に、室温でDIPEA(29.8mL、180mmol)及び臭化ベンジル(7.15mL、60.1mmol)を加えた。次いで反応混合物を加熱還流した。還流下18時間後、反応混合物を2N HCl水溶液(100mL)で希釈した。得られた混合物をEtOAc(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物1b(12.9g、83%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.38 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.44 (m, 5H), 7.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.42 (s, 2H).
化合物1b(5.0g、19.5mmol)及び化合物M(8.5g、21.4mmol、実施例66参照)のMeCN(100mL)中溶液に、4Åモレキュラーシーブ(10g)及びAg2O(18.0g、78.0mmol)を加えた。N2下室温で12時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。次いで濃縮した反応混合物をH2O(100mL)で希釈し、EtOAc(2×200mL)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物1c(8.63g、77%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.94 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.46-7.28 (m, 6H), 5.41-5.32 (m, 6H), 4.27 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.05 (m, 9H).
化合物1c(3.10g、5.41mmol)のi-PrOH/CHCl3(9mL/45mL)中溶液に、0℃でシリカゲル(3g)及びNaBH4(0.41g、10.82mmol)を加えた。N2下0℃で2時間撹拌した後、反応混合物をH2O(100mL)でクエンチし、EtOAc(200mL)で抽出した。有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物1d(2.73g、87%)を白色固体として得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.74 (s, 1H), 7.48-7.34 (m, 6H), 7.16 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.35-5.26 (m, 5H), 5.15 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.04 (s, 9H), 1.73 (t, 1H).
化合物1d(2.40g、4.17mmol)のEtOH(150mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、240mg)を加えた。反応混合物を水素下室温で10分間撹拌した。次いで反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、EtOH(100mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、粗生成物1eを白色固体(2.10g)として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H) 7.61 (dd, J = 8.8 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz 1H), 5.43-5.29 (m, 5H), 4.17 (s, 2H), 4.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H) 3.69 (s, 3H), 2.11-2.08 (t, 9H), 1.24 (t, 1H).
粗製の化合物1e(2.10g、4.33mmol)のDMF(50mL)中溶液に、室温でK2CO3(1.79g、13.01mmol)及び臭化アリル(0.41mL、4.76mmol)を加えた。室温で3時間撹拌した後、反応混合物を2N HCl水溶液(100mL)で希釈した。得られた混合物をEtOAc(200mL)で抽出した。有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物1f(1.55g、2ステップで70%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.74 (s, 1H), 7.45 (dd, J = 8.0 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.02 (m, 1H), 5.40-5.26 (m, 5H), 5.16 (m, 1H), 4.76 (m, 2H), 4.66 (s, 2H), 4.19 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.07-2.05 (m, 9H), 1.68 (t, 1H).
化合物1f(2.50g、4.77mmol)のDMF(20mL)中溶液に、N2下0℃でビス(4-ニトロフェニル)カーボネート(1.30g、4.29mmol)及びDIPEA(0.80mL4.77mmol)を加えた。反応混合物を0℃で30分間撹拌し、室温に1時間加温した。反応混合物をH2O(100mL)で希釈し、EtOAc(200mL)で抽出した。有機層をブライン(100mL)で洗浄し、無水MgSO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物1g(2.80g、85%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.28 (d, J = 15.2 Hz, 2H), 7.85 (d, J = 2.4 Hz ,1H), 7.55 (dd, J = 3.2 Hz, 2.4 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 15.2 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 8.8 Hz, 1H) 6.03 (m, 1H), 5.42-5.19 (m, 8H), 4.78 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 4.12 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H).
化合物1g(528mg、0.77mmol)、MMAE(500mg、0.7mmol)及び無水HOBt(19mg、0.14mmol)を0℃でDMF(3mL)に溶解した。次いでピリジン(0.7mL)及びDIPEA(0.24mL、1.39mmol)を加えた。N2下室温で24時間撹拌した後、反応混合物をH2O/飽和NH4Cl水溶液(100mL/50mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物1h(600mg、67%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1269.5, [M+Na]+ 1291.5.
化合物1h(600mg、0.47mmol)及びトリフェニルホスフィン(31mg、0.12mmol)のDCM(10mL)中溶液に、室温でピロリジン(0.047mL、0.57mmol)及びPd(PPh3)4(27mg、0.02mmol)を加えた。2時間撹拌した後、反応混合物をH2O/1N HCl水溶液(50mL/50mL)で希釈し、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(Hex/EtOAc 1/1からEtOAc)により精製して、化合物1i(480mg、82%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1228.4, [M+Na]+ 1250.4.
化合物1jの調製
化合物2gの調製
2-(2-(2-クロロエトキシ)エトキシ)エタノール(10g、59.3mmol)を窒素下室温でDMF(90mL)に溶解し、次いでNaN3(5.78g、88.9mmol)をこれに加えた。100℃で13時間撹拌した後、クロロホルム(200mL)及び蒸留水(300mL)をこれに加えて有機層を抽出し、抽出した有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物2a(10.3g、99%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 3.75-3.73 (m, 2H), 3.70-3.68 (m, 6H), 3.63-3.61 (m, 2H), 3.40 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.20 (t, J = 6.0 Hz, 1H).
CBr4(21.4g、64.6mmol)を窒素下0℃でDCM(100mL)に溶解し、次いでDCM(100mL)中のトリフェニルホスフィン(16.9g、64.6mmol)及び化合物2a(10.3g、58.7mmol)をこれに加え、混合物を室温で13時間撹拌した。反応完結後、DCM(300mL)及び蒸留水(300mL)をこれに加えて有機層を抽出し、抽出した有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物2b(12g、85%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.83 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.72-3.67 (m, 6H), 3.48 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.40 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
化合物2b(1g、4.20mmol)を窒素下室温でMeCNに溶解し、次いでN-Boc-ヒドロキシルアミン(643mg、4.82mmol)及びDBU(0.66mL、4.41mmol)をこれに加えた。60℃で13時間撹拌した後、DCM(300mL)及び蒸留水(300mL)をこれに加えて有機層を抽出し、抽出した有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物2c(748mg、70%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.55 (s, 1H), 4.05-4.03 (m, 2H), 3.76-3.74 (m, 2H), 3.74-3.69 (m, 6H), 3.42 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H).
化合物2c(200mg、0.688mmol)をMeOH(5mL)に溶解し、次いでPd/C(10重量%、70mg)をこれに加え、水素下3時間撹拌した。反応完結後、反応混合物をセライト濾過し、減圧下で濃縮して、化合物2d(180mg、98%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.04-4.01 (m, 2H), 3.74-3.62 (m, 7H), 3.55 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 2.88 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 2.81 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 1.64 (s, 2H), 1.48 (s, 9H).
DIPEA(0.042mL、0.32mmol)及びPyBOP(126mg、0.24mmol)を、化合物1i(200mg、0.16mmol)及び化合物2d(51mg、0.19mmol)のDMF(4mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で4時間撹拌した後、反応混合物をH2O(100mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物2e(142mg、60%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1474.7.
化合物2e(142mg、0.096mmol)のMeOH(2mL)中溶液に、-20℃でH2O(2mL)中のLiOH一水和物(36mg、0.86mmol)を加えた。0℃で1時間撹拌した後、反応混合物をH2O/2N HCl水溶液(50mL/2mL)で希釈し、CHCl3(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、濃縮して、粗製の化合物2f(128mg)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1334.5.
粗製の化合物2f(105mg、0.08mmol)のDCM(3mL)中溶液に、HCl(1,4-ジオキサン中4M、1mL)を0℃で加えた。1時間後、溶媒及び過剰のHClをN2流により除去し、次いで残留物をHPLCにより精製して、化合物2g(47mg、46%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1234.4.
化合物2hの調製
化合物3fの調製
ヘキサエチレングリコール(1.0g、3.54mmol)、Ag2O(1.23g、5.31mmol)及びKI(117mg、0.71mmol)のDCM(10mL)中混合物を、15分間超音波処理した。懸濁液を-30℃に冷却し、p-トルエンスルホニルクロリド(688mg、3.61mmol)のDCM(13mL)中溶液を滴下添加した。次いで混合物を0℃に徐々に加温し、この温度で15分間維持した。次いで反応混合物を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮して、シロップ状残留物を得た。次いで、シロップ状残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製した。純粋なフラクションを真空で蒸発させて、化合物3a(1.18g、77%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.80 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.16 (m, 2H), 3.72-3.58 (m, 22H), 2.97 (br, 1H), 2.45 (s, 3H).
化合物3a(1.18g、2.71mmol)及びNaN3(264mg、4.07mmol)をDMF(3mL)に溶解した。次いで反応混合物を100℃で加熱した。100℃で15時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物3b(728mg、87%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.75-3.70 (m, 2H), 3.69-3.63 (m, 18H), 3.62-3.60 (m, 2H), 3.39 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.07 (br, 1H).
化合物3b(728mg、2.36mmol)のTHF(10mL)中撹拌溶液に、0℃でトリエチルアミン(0.73mL、5.21mmol)及びメタンスルホン酸無水物(619mg、3.55mmol)を加えた。2時間後、LiBr(1.03g、11.8mmol)を撹拌溶液に加え、得られた反応混合物を5時間還流した。室温に冷却した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物3c(810mg、92%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.81 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.69-3.65 (m, 18H), 3.47 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.39 (t, J = 5.2 Hz, 2H).
NaH(油中60%、564mg、12.9mmol)を、0℃で化合物3c(3.42g、9.24mmol)及びN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミン(2.80g、12.0mmol、国際公開番号WO2004/018466A2における手順により合成され、これは本明細書の一部として援用する)のDMF(20mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物を室温に加温し、この温度で2時間維持した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAc/Hex 1/20から1/5)により精製して、化合物3d(3.51g、73%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.08 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.73 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.69-3.62 (m, 18H), 3.39 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.53 (s, 18H).
化合物3d(123mg、0.23mmol)及びPd/C(10重量%、25mg)のMeOH(5mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.05mL、0.21mmol)を加えた。水素下室温で5時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(100mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物3e(118mg、95%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.98 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.61-3.51 (m, 22H), 2.95 (br, 3H), 1.46 (s, 18H). EI-MS m/z: [M+H]+ 497.6.
化合物3gの調製
化合物4fの調製
ドデカエチレングリコール(1.8g、3.2mmol)のDCM(18mL)中撹拌溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド(656mg、3.4mmol)、Ag2O(1.13g、4.9mmol)及びKI(108mg、0.65mmol)を加えた。室温で30分間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、DCM(50mL)で洗浄した。濾液を濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物4a(490mg、21%)を薄黄色油状物として得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.81 (d, 2H), 7.35 (d, 2H), 4.16 (t, 2H), 3.72-3.58 (m, 46H), 2.82 (br s, 1H), 2.45 (s, 3H).
化合物4a(490mg、0.69mmol)及びNaN3(68mg、1.04mmol)をDMF(16mL)に溶解し、反応混合物を100℃で3時間加熱した。反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物4b(267mg、67%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.72-3.60 (m, 46H), 3.39 (t, 2H), 2.84 (t, 1H), 3.40 (m, 2H).
化合物4b(265mg、0.46mmol)のTHF(10mL)中撹拌溶液に、0℃で4-メチルモルホリン(0.066mL、0.60mmol)及びメタンスルホン酸無水物(121mg、0.69mmol)を加えた。2時間後、LiBr(120mg、1.38mmol)を撹拌溶液に加え、得られた反応混合物を6時間還流した。室温に冷却した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物4c(178mg、60%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.81 (t, 2H), 3.65 (m, 42H), 3.47 (t, 2H), 3.39 (t, 2H).
NaH(油中60%、14mg、0.33mmol)を、0℃で化合物4c(175mg、0.27mmol)及びN-Boc-ヒドロキシルアミン(47mg、0.35mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物を室温に加温し、この温度で12時間維持した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー(MeOH/CHCl31/20から1.5/20)により精製して、化合物4d(148mg、78%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.00 (t, 2H), 3.66 (m, 44H), 3.39 (t, 2H), 1.47 (d, 9H).
化合物4d(148mg、0.21mmol)及びPd/C(10重量%、28mg)のMeOH(5mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.053mL、0.21mmol)を加えた。水素下室温で30分間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物4e(142mg、96%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.00 (t, 2H), 3.92 (t, 2H), 3.76-3.64 (m, 42H), 3.18 (t, 2H) 1.47 (s, 9H).
化合物4gの調製
化合物5eの調製
2-アミノエタノール(10g、164mmol)のDCM(70mL)中溶液に、N2下0℃でDCM(30mL)中のトリエチルアミン(3.9mL、28.1mmol)及びクロロギ酸ベンジル(30mL、213mmol)を加えた。24時間後、反応混合物を濃縮した。得られた残留物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物5a(17g、53%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40-7.27 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.56 (s, 2H), 2.13 (br s, 1H).
化合物5a(5.0g、25.6mmol)のDCM(70mL)中溶液に、トリエチルアミン(3.9mL、28.1mmol)を加え、N2下0℃でDCM(30mL)中のDMAP(100mg、5.12mmol)及びp-トルエンスルホニルクロリド(5.4g、28.1mmol)を加えた。0℃で15時間後、反応混合物を飽和NH4Cl水溶液(100mL)で希釈し、DCM(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物5b(8.29g、92%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.77 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.40-7.28 (m, 7H), 5.07 (s, 3H), 4.09 (s, 2H), 3.45 (s, 2H), 2.43 (s, 3H).
化合物5b(2.0g、7.23mmol)のTHF(20mL)中溶液に、N2下0℃でN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミン(1.7g、7.44mmol)及びNaH(300mg、6.86mmol)を加えた。室温で17時間撹拌した後、反応混合物を飽和NH4Cl水溶液(50mL)で希釈し、EtOAc(3×50mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物5c(375mg、16%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.27 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 4.01 (br s, 2H), 3.44 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 1.52 (s, 18H). EI-MS m/z: [M+H]+ 410.7.
化合物5c(187mg、0.45mmol)のMeOH(20mL)中溶液に、Pd/C(10%重量%、20mg)を加え、次いで反応混合物を水素下室温で4時間撹拌した。反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(20mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物5d(120mg)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。
化合物5fの調製
化合物6eの調製
DIPEA(1.2mL、9.96mmol)及びHBTU(1.69g、6.22mmol)を、Z-Asp(OMe)-OH(500mg、1.78mmol)及び化合物2d(642mg、2.98mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物をN2下室温で22時間撹拌した。反応混合物をH2O(100mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物6a(368mg、40%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.85-7.70 (m, 1 H), 7.45-7.28 (m, 5H), 7.04 (s, 1H), 6.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.65-4.50 (m, 1H), 4.00 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 3.72-3.30 (m, 10H), 2.80 (dd, J = 5.6 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H).
化合物6a(150mg、0.28mmol)及びPd/C(10重量%、20mg)のMeOH(5mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.07mL、0.28mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(20mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物6b(169mg)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+1]+ 393.7.
DIPEA(0.022mL、0.12mmol)及びHBTU(20mg、0.05mmol)を、化合物1i(50mg、0.04mmol)及び化合物6b(22mg、0.05mmol)のDMF(1mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物をN2下室温で14時間撹拌した。次いで、反応混合物をH2O(10mL)で希釈し、EtOAc(2×20mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物6c(38mg、60%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1604.5.
化合物6c(38mg、0.023mmol)のMeOH(1mL)中溶液に、0℃でH2O(1mL)中のLiOH一水和物(5mg、0.118mmol)を加えた。0℃で2時間後、溶液のpHをAcOHで4~5に調節し、減圧下で濃縮した。残留物をDMSO(1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物6d(26mg、78%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1450.5.
TFA(0.3mL)を、化合物6d(26mg、0.018mmol)のDCM(1.5mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で2時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物6e(19.5mg、80%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1350.6.
化合物7eの調製
NaH(60重量%、500mg、12.49mmol)を、0℃で化合物4c(6.10g、9.61mmol)及びN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミン(2.69g、11.53mmol)のDMF(90mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物を室温に加熱し、この温度で12時間維持した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製した。純粋なフラクションを真空で蒸発させて、化合物7a(5.70g、75%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.05 (t, 2H), 3.71 (t, 2H), 3.64 (m, 42H), 3.37 (t, 2H), 1.51 (d, 18H).
化合物7a(5.70g、7.21mmol)及びPd/C(10重量%、570mg)のMeOH(100mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、1.9mL、7.2mmol)を加えた。水素下室温で30分間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物7b(5.10g、87%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.21 (t, 2H), 4.07 (s, 2H), 3.95-3.78 (m, 42H), 3.32 (s, 2H) 1.63 (s, 18H).
DIPEA(0.25mL、1.42mmol)及びHBTU(337g、0.89mmol)を、Z-Asp(OMe)-OH(100mg、0.36mmol)及び化合物7b(340mg、0.43mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物をN2下室温で20時間撹拌した。次いで、反応混合物をH2O(100mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物7c(123mg、58%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1024.2.
化合物7c(120mg、0.12mmol)及びPd/C(10重量%、20mg)のMeOH(5mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.03mL、0.12mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(20mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物7d(120mg)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。
化合物8fの調製
2-(2-(2-クロロエトキシ)エトキシ)エタノール(5.0g、29.6mmol)のアセトン(30mL)中溶液に、NaI(13.3g、88.9mmol)を加えた。反応混合物を12時間還流した。反応完結後、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物8a(7.0g、91%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.80-3.73 (m, 4H), 3.72-3.65 (m, 4H), 3.63-3.61 (m, 2H), 3.27 (t, J = 6.4 Hz, 2H).
NaH(500mg、12.49mmol)を、N2下0℃で化合物8a(2.0g、7.69mmol)及びN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミン(2.33g、10.00mmol)のDMF(20mL)中撹拌混合物に加えた。室温で17時間撹拌した後、反応混合物を飽和NH4Cl水溶液(50mL)で希釈し、EtOAc(3×50mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物8b(1.54g、54%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.27 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 4.01 (br s, 2H), 3.44 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 1.52 (s, 18H). EI-MS m/z: [M+H]+ 410.7.
化合物8b(123mg、0.242mmol)のDMSO(2mL)及びDCM(2mL)中撹拌溶液に、N2下0℃でSO3・ピリジン錯体(116mg、0.726mmol)及びトリエチルアミン(0.17mL、1.21mmol)を加えた。1時間後、反応混合物を飽和NH4Cl水溶液(10mL)で希釈し、DCM(2×10mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過した。減圧下で濃縮して化合物8c(88mg)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.74 (s, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.77-3.69 (m, 6H), 3.42 (m, 2H).
□-グルタミン酸(500mg、0.339mmol)のMeOH(10mL)中溶液に、N2下0℃で塩化チオニル(0.148mL、2.04mmol)を加えた。24時間後、反応混合物を濃縮して化合物8d(697mg)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40-7.27 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.56 (s, 2H), 2.13 (br s, 1H).
化合物8d(34mg、0.16mmol)及び化合物8c(88mg、0.24mmol)のMeOH(5mL)中溶液に、N2下室温でNaCNBH3(10mg、0.16mmol)を加えた。3時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物8e(53mg、63%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 10H), 5.60 (br s, 2H), 5.03 (s, 4H), 3.80-3.25 (m, 20H), 2.81 (s, 4H).
化合物9jの調製
ヘキサエチレングリコール(10.48g、37.12mmol)のDCM(400mL)中溶液に、N2下0℃でイミダゾール(3.20g、44.54mmol)を加えた。5分後、反応混合物をN2雰囲気下同一温度でTBSCl(5.60g、37.12mmol)のDCM(50mL)中溶液に滴下添加した。反応混合物を0℃で撹拌し、N2下室温に21時間加温した。反応完結後、反応混合物を水(200mL)で希釈し、DCM(2×100mL)で抽出した。有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製した。純粋なフラクションを真空で蒸発させて、化合物9a(6.70g、46%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.77-3.71 (m, 4H), 3.66-3.60 (m, 18H), 3.56-3.54 (t, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.06 (s, 6H).
化合物9a(3.32g、8.37mmol)の乾燥THF(40mL)中溶液に、N2下0℃でNaH(油中55%、438mg、10.05mmol)を加えた。30分後、MeI(0.78mL、12.56mmol)をN2下同一温度で反応混合物に加えた。反応混合物を撹拌し、N2下室温に18時間加温した。反応完結後、H2O(10mL)でクエンチし、EA(3×10mL)で抽出した。有機層を合わせ、飽和NH4Cl水溶液(5mL)及びブライン(10mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水し、減圧下で蒸発させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製した。純粋なフラクションを真空で蒸発させて、化合物9b(3.16g、92%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.78-3.75 (t, 2H), 3.65 (s, 20H), 3.57-3.54 (t, 4H), 3.38 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.06 (s, 6H).
化合物9b(3.16g、7.69mmol)のアセトン(100mL)中溶液に、N2下0℃でジョーンズ試薬(10mL)を加えた。反応混合物を撹拌し、N2下室温に17時間加温した。反応完結後、反応混合物を濾過し、減圧下で蒸発させた。残留物をH2O(100mL)で希釈し、CHCl3(3×50mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水Na2SO4で脱水し、減圧下で蒸発させた。得られた粗製の化合物9c(2.28g、95%)を更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.16 (s, 2H), 3.76-3.75 (t, 2H), 3.69-3.67 (m, 16H), 3.57-3.55 (t, 2H), 3.38 (s, 3H).
DIPEA(3.8mL、22.03mmol)、HOBt(1.29g、9.55mmol)及びEDC・HCl(1.83g、9.55mmol)を、化合物9c(2.28g、7.34mmol)及びH-Lys(Z)-OMe塩酸塩(2.91g、8.81mmol)のDMF(30mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物9d(1.23g、72%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.31 (m, 5H), 5.10 (s, 2H), 5.00 (s, 1H) 4.68-4.62 (m, 1H), 4.03 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.68-3.64 (m, 16H), 3.56 (t, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.20 (m, 2H), 1.89 (m, 1H), 1.74 (m, 1H), 1.55(m, 1H), 1.40 (m, 1H). EI-MS m/z: [M+H]+586.8, [M+Na]+ 608.9.
化合物9d(2.16g、3.68mmol)のTHF/MeOH/H2O(18mL/6mL/6mL)中溶液に、N2下0℃でLiOH一水和物(307mg、7.31mmol)を加えた。反応混合物を室温で1時間撹拌した。次いで溶液のpHを1N HCl水溶液で2~3に調節した。反応混合物をH2O(20mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×50mL)で抽出した。有機層を合わせ、Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮して化合物9e(2.28g、99%)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.34-7.30 (m, 5H), 5.08 (s, 2H), 4.66-4.60 (q, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.67-3.55 (m, 18H), 3.37 (s, 3H), 3.20 (m, 2H), 1.87 (m, 1H), 1.72 (m, 1H), 1.53(m, 1H), 1.38 (m, 1H).
DIPEA(0.45mL、2.63mmol)、HOBt(154mg、0.11mmol)及びEDC・HCl(218mg、0.11mmol)を、化合物9e(502mg、0.88mmol)及び化合物7b(700mg、0.88mmol)のDMF(8mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(20mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をNaHCO3水溶液(20mL)及びブライン(20mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物9f(499mg、43%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.35-7.30 (m, 5H), 6.83 (s, 1H), 5.15 (s, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.43 (q, 1H) 4.07 (t, 1H), 3.65-3.60 (m, 54H), 3.55-3.53 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 3.16 (m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.53-1.52 (d, 19H), 1.38(m, 2H). EI-MS m/z: [M+H]+ 1337.5.
化合物9f(499mg、0.37mmol)及びPd/C(10重量%、50mg)のMeOH(20mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.1mL、0.37mmol)を加えた。水素下室温で90分間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(10mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物9g(458mg、98%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1218.6.
DIPEA(0.019mL、0.11mmol)及びHBTU(18mg、0.05mmol)を、化合物1i(45mg、0.04mmol)及び化合物9g(57mg、0.05mmol)のDMF(0.5mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物をN2下室温で14時間撹拌した。反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)で希釈し、HPLCにより精製して、化合物9h(65mg、57%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1181.7.
化合物9h(65mg、0.03mmol)のMeOH(1.5mL)中溶液に、0℃でH2O(1.5mL)中のLiOH一水和物(10mg、0.24mmol)を加えた。0℃で1時間後、溶液のpHをAcOHで4~5に調節し、減圧下で濃縮した。次いで反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物9i(45mg、55%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+Na]+ 1098.7.
TFA(0.2mL)を、化合物9i(45mg、0.02mmol)のDCM(1mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で30分間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をH2O/DMSO(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物9j(14mg、32%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1026.3.
化合物10cの調製
DIPEA(0.03mL、0.17mmol)、HOBt(10mg、0.075mmol)及びEDC・HCl(14mg、0.075mmol)を、化合物9e(33mg、0.058mmol)及び化合物7d(54mg、0.058mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(10mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(8mL)、飽和NaHCO3水溶液(8mL)及びブライン(8mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物10a(61mg、73%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1445.0, [M+H-Boc]+ 1344.9.
化合物10a(60mg、0.04mmol)及びPd/C(10重量%、30mg)のMeOH(10mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.01mL、0.01mmol)を加えた。水素下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物10b(56mg、100%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1311.0, [M+Na+]+ 1332.9.
化合物10dの調製
化合物11jの調製
化合物3a(8.0g、18.3mmol)のTHF(50mL)中溶液に、室温でLiBr(7.9g、91.6mmol)を加えた。還流下17時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物11a(3.2g、50%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.95-3.50 (m, 24H).
化合物11a(3.2g、12.3mmol)のアセトン(20mL)中溶液に、0℃でジョーンズ試薬(20mL)を加えた。0℃で15時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物11b(3.2g、72%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.16 (s, 2H), 3.95-3.30 (m, 20H).
化合物11b(3.2g、8.90mmol)のMeOH(30mL)中溶液に、N2下0℃で塩化オキサリル(1.15mL、13.3mmol)を加えた。16時間後、反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物11c(2.7g、81%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 3.80-3.60 (m, 21H), 3.47 (t, J = 6.4 Hz, 2H).
化合物11c(1.0g、2.67mmol)及びNaN3(261mg、4.01mmol)をDMF(3mL)に溶解した。反応混合物を100℃で5時間加熱した。反応完結後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物11d(854mg、95%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 3.76-3.64 (m, 21H), 3.39 (t, J = 5.2 Hz, 2H).
化合物11d(854mg、2.54mmol)のMeOH(25mL)中撹拌溶液に、0℃で2M NaOH水溶液(6.3mL、12.64mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間撹拌した。次いで溶液を減圧下で濃縮した。得られた懸濁液を0℃で冷却しながら2N HCl水溶液で酸性化した。残留物をCHCl3(8×50mL)により抽出した。有機層を合わせ、Na2SO4で脱水し、濃縮して、化合物11e(783mg、96%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.16 (s, 2H), 3.76-3.65 (m, 18H), 3.40 (t, J = 5.2 Hz, 2H).
DIPEA(0.47mL、2.72mmol)、HOBt(160mg、1.18mmol)及びEDC・HCl(226mg、1.18mmol)を、化合物9e(520mg、0.91mmol)及び化合物2d(270mg、0.91mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(20mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(15mL)、飽和NaHCO3水溶液(15mL)及びブライン(15mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物11f(631mg、85%)を得た。
EI-MS m/z: [M+H]+ 819.1, [M+H-Boc]+719.1 [M+Na+]+ 841.1.
化合物11f(300mg、0.36mmol)及びPd/C(10重量%、70mg)のMeOH(20mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.08mL、0.08mmol)を加えた。水素下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物11g(200mg、99%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 685.1, [M+Na]+ 707.1.
DIPEA(0.024mL、0.41mmol)、HOBt(24mg、0.18mmol)及びEDC・HCl(34mg、0.18mmol)を、化合物11g(100mg、0.14mmol)及び化合物11e(44mg、0.14mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(10mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物11h(73mg、53%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 988.4, [M+Na-Boc]+ 888.2, [M+Na]+ 1010.4.
化合物11h(73mg、0.07mmol)及びPd/C(10重量%、10mg)のMeOH(7mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.018mL、0.018mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物11i(72mg、99%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 962.4, [M+Na]+ 984.4.
化合物11kの調製
化合物12cの調製
DIPEA(0.13mL、0.77mmol)及びHBTU(110mg、0.35mmol)を、化合物9g(235mg、0.1929mmol)及びZ-Asp(OMe)-OH(54mg、0.212mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(20mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(7mL)、飽和NaHCO3水溶液(7mL)及びブライン(7mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物12a(260mg、93%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (t, 1H), 7.62 (t, 1H), 7.54-7.52 (m, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.27-4.25 (q, 1H), 3.96 (t, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.58-3.48 (m, 52H), 3.19-3.18 (m, 3H), 3.04-3.03 (m, 3H), 1.44 (s, 18H), 1.39-1.37 (m, 3H), 1.21-1.19 (m, 3H). EI-MS m/z: [M+H-2Boc]+ 1031.6.
化合物12a(260mg、0.179mmol)及びPd/C(10重量%、72mg)のMeOH(20mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.040mL、0.179mmol)を加えた。水素下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物12b(242mg、100%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 625.0, [M+H-Boc]+ 525.0, [M+H-2Boc]+ 424.9.
化合物12dの調製
化合物13eの調製
DIPEA(0.22mL、1.25mmol)及びHBTU(356mg、0.94mmol)を、Z-Glu(OMe)-OH(222mg、0.75mmol)及び化合物7b(500mg、0.62mmol)のDMF(5.0mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物をN2下室温で14時間撹拌した。反応混合物を水(200mL)で希釈し、EA(3×100mL)で抽出した。有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物13a(370mg、57%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.34 (br, 5H), 6.73 (br, 1H), 5.72 (d, J=7.6Hz, 1H), 5.06 (br, 2H), 4.28-4.18 (m, 1H), 4.07 (t, J=4.4Hz, 2H), 3.76-3.71 (m, 2H), 3.70-3.50 (m, 45H), 3.48-3.42 (m, 2H), 2.53-2.36 (m, 2H), 2.20-2.08 (m, 1H), 2.00-1.88 (m, 1H), 1.53 (s, 18H). EI-MS m/z: [M+Na]+ 1061.2.
1,4-ジオキサン中4N HCl(0.08mL、0.32mmol)を、0℃で化合物13a(370mg、0.35mmol)及びPd/C(38mg)のMeOH(8mL)中撹拌混合物に加えた。水素下室温で20時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(400mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物13b(301mg、90%)を黄色液体として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (br, 1H), 8.09 (br, 3H), 4.13 (br, 1H), 3.85-3.56 (m, 51H), 2.55 (br, 2H), 2.38-2.18 (m, 2H), 1.53 (s, 18H). EI-MS m/z: [M+H]+ 905.0.
DIPEA(0.165mL、0.96mmol)及びHBTU(279mg、0.74mmol)を、化合物13b(300mg、0.32mmol)及び化合物9e(366mg、0.64mmol)のDMF(5.0mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物をN2下室温で14時間撹拌した。反応混合物を水(200mL)で希釈し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物13c(290mg、62%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40-7.32 (m, 7H), 7.00 (br, 1H), 6.73 (br, 1H), 5.07 (br, 2H), 4.44-4.36 (m, 2H), 4.07 (t, J=4.8Hz, 2H), 4.02 (br, 2H), 3.73 (t, J = 5.2Hz, 2H), 3.71-3.52 (m, 68H), 3.24-3.14 (m, 2H), 2.52-2.34 (m, 3H), 2.18-2.06 (m, 2H), 1.98-1.82 (m, 4H), 1.76-1.64 (m, 3H), 1.53 (s, 18H). EI-MS m/z: [M+H]+1459.7.
Pd/C(21mg)を、0℃で化合物13c(290mg、0.19mmol)のMeOH(5mL)中撹拌混合物に加えた。水素下室温で20時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(400mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物13c(247mg、94%)を黄色液体として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.20 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.74 (br, 1H), 7.30 (br, 1H), 4.66-4.48 (m, 2H), 4.07 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 4.01 (br, 2H), 3.74-3.62 (m, 70H), 3.57-3.53 (m, 2H), 3.04-2.98 (m, 2H), 2.24-2.15 (m, 2H), 2.14-2.06 (m, 2H), 1.99-1.86 (m, 4H), 1.84-1.74 (m, 2H), 1.53 (s, 18H). EI-MS m/z: [M+H]+ 1325.5.
化合物13fの調製
化合物14mの調製
6-アミノ-1-ヘキサノール(5.0g、42.6mmol)のDCM(30mL)中溶液に、室温でジ-tert-ブチルジカーボネート(9.3g、42.6mmol)を加えた。18時間撹拌した後、トリエチルアミン(8.7mL、63.9mmol)及びt-ブチルジメチルシリルクロリド(7.7g、51.2mmol)を0℃で反応混合物に加えた。室温で24時間後、反応混合物を飽和NH4Cl水溶液(200mL)で希釈した。得られた混合物をEtOAc(100mL)で抽出した。有機層をブライン(100mL)で洗浄し、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物14a(12g、84%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.50 (br s, 1H), 3.58 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.10 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.72-1.20 (m, 17H), 0.88 (s, 9H), 0.04 (s, 6H).
化合物14a(6.0g、18.1mmol)のTHF(30mL)中溶液に、N2下0℃でNaH(油中60%、2.4g、54.2mmol)及びヨウ化メチル(3.4mL、54.2mmol)を加えた。14時間後、反応混合物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物14b(4.3g、69%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.59 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.17 (br s, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.62-1.21 (m, 17H), 0.88 (s, 9H), 0.04 (s, 6H).
化合物14b(4.3g、12.4mmol)のTHF(15mL)中溶液に、N2下0℃でTBAF(THF中1M、15mL、14.9mmol)を加えた。5時間後、反応混合物をH2O(50mL)で希釈し、ジエチルエーテル(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物14c(3.0g、98%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.63 (br s, 2H), 3.20 (br s, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.65-1.23 (m, 17H).
化合物14c(3.0g、12.9mmol)のTHF(30mL)中溶液に、N2下0℃で四臭化炭素(6.4g、19.4mmol)及びトリフェニルホスフィン(5.1g、19.4mmol)を加えた。2時間後、反応混合物をシリカゲルに通して濾過し、ジエチルエーテル(100mL)で洗浄した。濾液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物14d(3.3g、86%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.40 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.19 (br s, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.90-1.70 (m, 2H), 1.65-1.40 (m, 13H), 1.38-1.25 (m, 2H).
DIPEA(53.0mL、302.5mmol)及びEDC・HCl(35.7g、186.2mmol)を、0℃で化合物2d(35.0g、116.4mmol)及び5-ホルミルサリチル酸(21.3g、128.0mmol)のDCM(1.6L)中撹拌混合物に加えた。反応混合物をN2下室温で20時間撹拌した。反応混合物を飽和NH4Cl水溶液(1.5L)で希釈し、DCM(2×1.5L)で抽出した。合わせた有機層をブライン(1.5L)で洗浄し、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物14e(28.2g、59%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 13.37 (br s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.07 (br s, 2H), 7.90 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.06-4.01 (m, 2H), 3.79-3.66 (m, 10H), 1.47 (s, 9H).
化合物14e(28.0g、67.9mmol)のMeCN(500mL)中溶液に、化合物M(29.7g、74.7mmol)、4Åモレキュラーシーブ(30g)及びAg2O(62.9g、272mmol)を加えた。N2下室温で12時間撹拌した後、反応混合物を濃縮し、H2O(800mL)で希釈し、EtOAc(1L)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物14f(30.1g、61%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.99 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.99 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.44 (br s, 1H), 7.18 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.45-5.30 (m, 4H), 4.26 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.02-3.97 (m, 2H), 3.80-3.55 (m, 13H), 2.06 (s, 9H), 1.46 (s, 9H).
化合物14f(29.0g、39.8mmol)のi-PrOH/CHCl3(90mL/450mL)中溶液に、0℃でシリカゲル(16.7g)及びNaBH4(3.70g、99.5mmol)を加えた。N2下0℃で2時間撹拌した後、反応混合物をH2O(500mL)でクエンチし、EtOAc(1L)で抽出した。有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物14g(24.1g、83%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.98 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.41 (br, 1H), 7.04 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.41-5.24 (m, 4H), 4.67 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 4.19 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.99-3.93 (m, 2H), 3.79-3.65 (m, 12H), 3.59-3.50 (m, 1H), 2.08-2.00 (m, 10H), 1.46 (s, 9H).
化合物14g(23.7g、31.5mmol)のDMF(50mL)中溶液に、N2下0℃でビス(4-ニトロフェニル)カーボネート(8.9g、29.3mmol)及びDIPEA(5.65mL、31.5mmol)を加えた。反応混合物を0℃で30分間撹拌し、室温に1時間加温した。反応混合物をH2O(500mL)で希釈し、EtOAc(500mL)で抽出した。有機層をブライン(2×200mL)で洗浄し、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物14h(22.4g、77%)を白色泡状物として得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.28 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 8.13 (s, 1H), 7.68 (br s, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.47 (br, 1H), 7.38 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.08 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.44-5.24 (m, 6H), 4.21 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.00 (br s, 2H), 3.80-3.64 (m, 12 H), 3.64-3.54 (m, 1H), 2.06 (s, 9H), 1.47 (s, 9H).
α-アマニチン(60.0mg、0.065mmol)をDMSO(2mL)に溶解し、化合物14d(114mg、0.39mmol)及びカリウムtert-ブトキシド(0.065mL、0.065mmol)をN2下0℃で加えた。0℃で4時間後、溶液のpHを酢酸で4~5に調節した。残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物14i(29mg、39%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M-Boc]+ 1032.4.
化合物14i(29mg、0.026mmol)のDCM(3mL)中溶液に、0℃でTFA(0.5mL)を加えた。0℃で2時間後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去し、得られた残留物をHPLCにより精製して、化合物14j(26mg、99%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1032.3, [M+Na]+ 1054.3.
化合物14j(13mg、0.011mmol)、化合物14h(10mg、0.011mmol)及び無水HOBt(0.3mg、0.002mmol)を、0℃でDMF(0.5mL)に溶解した。次いでピリジン(0.2mL)及びDIPEA(0.004mL、0.023mmol)を加えた。N2下室温で24時間撹拌した後、反応混合物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物14k(11mg、54%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1788.1.
化合物14k(11mg、0.006mmol)のMeOH(0.2mL)中溶液に、-20℃でH2O(0.2mL)中のLiOH一水和物(1.3mg、0.03mmol)を加えた。0℃で1時間後、溶液のpHを酢酸で4~5に調節した。得られた溶液をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物14l(7.5mg、75%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1648.6.
化合物14l(7.5mg、0.0045mmol)のDCM(3mL)中溶液に、0℃でTFA(0.5mL)を加えた。0℃で2時間後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をHPLCにより精製して、化合物14m(6.2mg、85%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ : 1548.5.
化合物15bの調製
実施例23において化合物14hを調製する方法と同様の方法により、化合物3eから化合物15aを調製した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1128.3, [M+H-Boc]+ 1028.3, [M+H-2Boc]+ 928.2.
実施例23において化合物14mを調製する方法と同様の方法により、化合物14j及び化合物15aから化合物15bを調製した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1681.6.
化合物16fの調製
塩化オキサリル(2.8mL、32.5mmol)のDCM(5mL)中撹拌溶液に、DMSO(3.08mL、43.4mmol)をDCM(15mL)中で加え、次いで反応混合物を-78℃で30分間撹拌した。この溶液に-78℃で化合物2a(3.8g、21.7mmol)を加え、1時間撹拌した。DCM(20mL)中のトリエチルアミン(15.1mL、108mmol)を加え、次いで反応混合物を室温に加温し、H2O(100mL)で希釈し、DCM(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物16a(1.8g、48%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.74 (s, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.77-3.69 (m, 6H), 3.42 (m, 2H).
化合物16a(1.0g、3.32mmol)及び化合物2d(1.72g、9.96mmol)のMeOH(15mL)中溶液に、0℃でAcOH(0.19mL、3.32mmol)を加えた。0℃で30分間撹拌した後、NaCNBH3(658mg、9.96mmol)を加え、2時間かけて室温に加温した。反応完結後、反応混合物をH2O(50mL)で希釈し、次いでDCM(3×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物16b(800mg、41%)を薄黄色油状物として得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (brs, 1H), 4.01 (m, 2H), 3.69-3.65 (m, 24H), 3.39 (m, 4H), 3.04 (m, 6H), 1.47 (s, 9H).
化合物16b(350mg、0.60mmol)のMeOH(10mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、300mg)を加えた。水素下室温で8時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(100mL)で洗浄した。濃縮して、化合物16cを無色油状物として得(300mg、94%)、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.02 (m, 2H), 3.71 (m, 2H), 3.65-3.55 (m, 22H), 2.92 (m, 4H), 2.76 (t, J = 5.2 Hz, 6H), 1.47 (s, 9H). EI-MS m/z: [M+H]+ 527.6.
DIPEA(0.40mL、2.24mmol)及びPyBOP(711mg、1.34mmol)を、化合物1j(1.57g、1.23mmol)及び化合物16c(300mg、0.56mmol)のDMF(15mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で4時間撹拌した後、反応混合物をH2O(200mL)で希釈し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をH2O/DMSO(5mL/5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物16d(1.57g、91.8%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1502.7.
化合物16d(1.10g、0.36mmol)のMeOH/THF(5mL/10mL)中溶液に、NaOH(175mg、4.32mmol)を0℃でH2O(3mL)中にて滴下添加した。0℃で3時間後、溶液のpHを2N HCl水溶液を用いてpH4に調節し、濃縮した。残留物を0℃にてDCM(12mL)及びTFA(3mL)で希釈した。0℃で2時間後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。残留物をH2O/MeCN(7.5mL/7.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物16f(432mg、46%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1298.5.
化合物16gの調製
化合物17dの調製
塩化オキサリル(0.62mL、7.3mmol)のDCM(4mL)中撹拌溶液に、DMSO(1.04mL、14.6mmol)をDCM(10mL)中で加え、次いで反応混合物を-78℃で30分間撹拌した。この溶液に-78℃で化合物3b(1.5g、4.88mmol)を加え、1時間撹拌した。DCM(7mL)中のトリエチルアミン(2.72mL、19.50mmol)を加え、次いで反応混合物を室温に加温した。減圧下で濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物17a(1.23g、82%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.73 (s, 1H), 4.16 (s, 2H), 3.75-3.61 (m, 18H), 3.39 (t, J = 5.2 Hz, 2H).
NaCNBH3(257mg、4.09mmol)を、0℃で化合物17a(1.30g、4.25mmol)及び化合物2d(492mg、1.63mmol)のMeOH(5mL)中撹拌混合物に加えた。次いで反応混合物を2時間かけて室温に徐々に加熱した。反応完結後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物17b(620mg、45%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.96 (br, 1H), 3.79 (t, J = 4.8 Hz, 2H) 3.59 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.56-3.46 (m, 38H), 3.44-3.37 (m, 10H), 2.66-2.56 (m, 6H), 1.39 (s, 9H).
化合物17b(300mg、0.35mmol)のMeOH(7mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、38mg)を加えた。水素下室温で4時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(400mL)で洗浄した。濃縮して、化合物17cを無色油状物として得(253mg、90%)、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.79 (t, J=4.4Hz, 2H), 3.55-3.45 (m, 38H), 3.42 (t, J = 6.0 Hz, 10H), 2.66-2.56 (m, 10H), 1.39 (s, 9H). EI-MS m/z: [M+H]+ 791.0.
化合物18cの調製
NaCNBH3(197mg、3.14mmol)を、0℃で化合物17a(998mg、3.26mmol)及び化合物3e(670mg、1.25mmol)のMeOH(4mL)中撹拌混合物に加えた。次いで反応混合物を2時間かけて室温に徐々に加熱した。反応完結後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物18a(668mg、49%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.97 (m, 2H) 3.63-3.57 (m, 6H), 3.56-3.44 (m, 46H), 3.44-3.36 (m, 12H), 2.66-2.61 (m, 6H), 1.45 (s, 18H).
化合物18a(60mg、0.055mmol)のMeOH(1.2mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、6mg)を加えた。水素下室温で4時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(400mL)で洗浄した。濃縮して、化合物18b(55mg、96%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.97 (m, 2H), 3.62-3.57 (m, 4H), 3.54-3.45 (m, 50H), 3.45-3.39 (m, 10H), 2.66-2.61 (m, 10H), 1.46 (s, 18H). EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1023.3.
化合物19cの調製
NaCNBH3(197mg、3.14mmol)を、0℃で化合物17a(118mg、0.16mmol)及び化合物4e(232mg、0.76mmol)のMeOH(1mL)中撹拌混合物に加えた。次いで反応混合物を2時間かけて室温に徐々に加熱した。反応完結後、反応混合物を減圧下で蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物19a(135mg、68%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (br s, 1H) 4.02 (t, 2H), 3.72-3.53 (m, 86H), 3.39 (t, 4H), 2.77 (bs, 4H), 1.47 (s, 9H). EI-MS m/z: [M+H]+ 1239.6.
化合物19a(133mg、0.107mmol)のMeOH(2mL)中溶液に、0℃でPd/C(10重量%、26mg)及びHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.054mL、0.21mmol)を加えた。水素下室温で40分間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濃縮して、化合物19b(132mg、97%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.79 (s, 1H), 4.06-4.02 (m, 8H), 3.88 (m, 2H), 3.73-3.64 (m, 80H), 3.22 (s, 4H), 1.47 (s, 9H). EI-MS m/z: [M+H]+ : 1187.5.
化合物20qの調製
2-(2-(2-クロロエトキシ)エトキシ)エタノール(5.0g、29.6mmol)のアセトン(30mL)中溶液に、NaI(13.3g、88.9mmol)を加えた。反応混合物を12時間還流した。反応完結後、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20a(7.0g、91%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.80-3.73 (m, 4H), 3.72-3.65 (m, 4H), 3.63-3.61 (m, 2H), 3.27 (t, J = 6.4 Hz, 2H).
化合物20a(7.0g、26.9mmol)のアセトン(200mL)中溶液に、0℃でジョーンズ試薬(20mL)を加えた。0℃で15時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をH2O(150mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20b(7.0g、94%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.22 (s, 2H), 3.85-3.70 (m, 6H), 3.35-3.25 (m, 2H).
化合物20b(7.0g、25.5mmol)のMeOH(70mL)中溶液に、N2下0℃で塩化オキサリル(3.2mL、38.3mmol)を加えた。16時間後、反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20c(5.7g、77%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.19 (s, 2H), 3.80-3.67 (m, 9H), 3.27 (t, J = 6.8 Hz, 2H).
化合物20c(2.5g、8.67mmol)及びN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミン(2.6g、11.2mmol)のDMF(30mL)中溶液に、N2下0℃でNaH(油中60%、454mg、10.4mmol)を加えた。15時間後、反応混合物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20d(1.87g、73%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 4.08 (m, 2H), 3.78-3.65 (m, 9H), 1.53 (s, 18H).
化合物20d(1.87g、6.38mmol)のTHF/MeOH/H2O(45mL/15mL/15mL)中溶液に、N2下0℃でNaOH(600mg、15.9mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間撹拌した。次いで溶液のpHを1N HCl水溶液で4~5に調節した。反応混合物をH2O(100mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。化合物20e(1.6g、90%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 4.08-4.02 (m, 2H), 3.80-3.67 (m, 6H), 1.48 (s, 9H).
Pd/C(10重量%、1.0g)を、化合物2a(6.7g、38.2mmol)のMeOH(38mL)中溶液に加えた。水素下室温で8時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(100mL)で洗浄した。濃縮して、化合物20f(5.6g、99%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.95-3.25 (m, 12H), 2.90 (s, 2H).
クロロギ酸ベンジル(6mL、42.2mmol)を、N2下0℃で30分間化合物20f(5.6g、38.2mmol)及びトリエチルアミン(8mL、57.6mmol)のTHF(200mL)中溶液にゆっくり加えた。0℃で1時間撹拌した後、反応混合物を濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20g(5.7g、53%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.20 (m, 5H), 5.61 (br s, 1H), 5.07 (s, 2H), 3.85-3.20 (m, 12H).
化合物20g(2.7g、9.53mM)のDCM(30mL)中溶液に、N2下室温でトリエチルアミン(1.9mL、12.3mmol)及びp-トルエンスルホニルクロリド(2.3g、10.4mmol)を加えた。8時間後、反応混合物をH2O(50mL)で希釈し、DCM(3×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20h(3.51g、84%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.45-7.25 (m, 7H), 5.20 (br s, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.20-4.05 (m, 2H), 3.75-3.25 (m, 10H), 2.43 (s, 3H).
化合物20h(3.51g、8.02mmol)及びNaN3(3.8g、57.6mmol)のDMF(27mL)中溶液を、100℃で15時間加熱した。反応完結後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20i(2.05g、83%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 5H), 5.20 (br s, 1H), 5.10 (s, 2H), 3.80-3.25 (m, 12H).
トリフェニルホスフィン(2.09g、7.97mmol)を、室温で化合物20i(2.05g、6.64mmol)のTHF(27mL)中溶液に加えた。N2下2時間撹拌した後、H2O(0.6mL、33.2mmol)を加え、反応混合物を3時間還流した。次いで反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20j(1.78g、95%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 5H), 5.63 (br s, 1H), 5.10 (s, 2H), 3.80-3.25 (m, 10H), 2.88 (s, 2H).
塩化オキサリル(1.4mL、15.9mmol)のDCM(14mL)中撹拌溶液に、DCM(28mL)中のDMSO(2.3mL、31.9mmol)を加え、次いで反応混合物を-78℃で30分間撹拌した。この溶液に-78℃で化合物20g(3.01g、10.6mmol)を加えた。-78℃で1時間撹拌した後、トリエチルアミン(7.4mL、53.1mmol)を加え、反応物を室温に加温した。反応混合物をH2O(100mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、MgSO4で脱水した。濾過し、濃縮して化合物20k(2.6g)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.70 (s, 1H), 7.45-7.25 (m, 5 H), 5.25 (br s, 1 H), 5.10 (s, 2 H), 3.80-3.25 (m, 10 H).
化合物20j(1.78g、6.30mmol)及び化合物20k(2.13g、7.56mmol)のMeOH(63mL)中溶液に、N2下室温でNaCNBH3(674mg、10.7mmol)を加えた。3時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20l(2.01g、58%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 10H), 5.60 (br s, 2H), 5.03 (s, 4H), 3.80-3.25 (m, 20H), 2.81 (s, 4H).
DIPEA(0.4mL、2.28mmol)及びPyBOP(713mg、1.36mmol)を、化合物20l(500mg、0.91mmol)及び化合物20e(306mg、1.09mmol)のDMF(10mL)中撹拌溶液に加えた。N2下室温で6時間撹拌した後、反応混合物を水(100mL)で希釈し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物20m(318mg、43%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 10H), 5.47 (br s, 1H), 5.37 (br s, 1H), 5.09 (s, 4H), 3.80-3.25 (m, 34H), 1.46 (s, 9H). EI-MS m/z: [M+H]+ 808.9.
化合物20m(318mg、0.39mmol)のMeOH(30mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、1.0g)を加えた。水素下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(100mL)で洗浄した。濃縮して、化合物20n(180mg)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 541.2.
DIPEA(0.034mL、0.19mmol)及びPyBOP(63mg、0.12mmol)を、0℃で化合物1i(130mg、0.10mmol)及び化合物20n(26mg、0.04mmol)のDMF(3mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で30分間撹拌した後、反応物をN2下20時間かけて室温に加温した。反応混合物をH2O(50mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×50mL)で抽出した。有機層を合わせ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物20o(28mg、10%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1481.5, 1/2[M+Na]+ 1503.8.
化合物20o(28mg、0.009mmol)のMeOH(1mL)中溶液に、-5℃でH2O(1mL)中のLiOH一水和物(2mg、0.047mmol)を加えた。反応混合物を-5℃で1時間撹拌した。反応完結後、溶液のpHを酢酸で4~5に調節した。残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物20p(16mg、67%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ : 1341.4.
化合物20p(16mg、0.0059mmol)のDCM(2mL)中溶液に、0℃でTFA(0.2mL)を加えた。0℃で2時間後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物20q(8.5mg、56%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ : 1291.3.
化合物21iの調製
化合物3b(9.0g、29.2mmol)のMeOH(146mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、3.0g)を加え、反応混合物を水素下室温で5時間撹拌した。次いで反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(100mL)で洗浄した。濃縮して、化合物21a(8.2g、100%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ 3.80-3.60 (m, 24H), 3.01 (t, J = 4.8 Hz, 2H).
化合物21a(8.24g、29.2mmol)のTHF(190mL)中溶液に、N2下0℃でトリエチルアミン(6.1mL、43.9mmol)及びクロロギ酸ベンジル(4.6mL、32.2mmol)を加えた。反応混合物を濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物21b(5.59g、46%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.20 (m, 5H), 5.61 (br s, 1H), 5.09 (s, 2H), 3.85-3.50 (m, 22H), 3.39 (m, 2H).
化合物21b(3.09g、7.43mmol)のTHF(75mL)中溶液に、N2下0℃で4-メチルモルホリン(1.1mL、9.66mmol)及びメタンスルホン酸無水物(1.43g、8.18mmol)を加えた。0℃で5時間後、NaN3(969mg、14.9mmol)及びDMF(20mL)を加えた。還流下16時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物21c(2.62g、80%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.20 (m, 5 H), 5.45 (br s, 1 H), 5.09 (s, 2 H), 3.85-3.25 (m, 24 H).
トリフェニルホスフィン(1.87g、7.13mmol)を、室温で化合物21c(2.62g、5.94mmol)のTHF(30mL)中溶液に加えた。N2下2時間撹拌した後、H2O(0.54mL、29.7mmol)を加え、反応混合物を3時間還流した。反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物21d(2.47g、95%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 5 H), 5.63 (br s, 1 H), 5.09 (s, 2 H), 3.80-3.25 (m, 22 H), 3.00-2.80 (m, 2 H).
塩化オキサリル(0.78mL、9.02mmol)のDCM(14mL)中撹拌溶液に、DCM(6mL)中のDMSO(1.3mL、18.1mmol)を加え、次いで反応混合物を-78℃で30分間撹拌した。この溶液に-78℃で化合物21b(2.5g、6.01mmol)を加えた。-78℃で1時間撹拌した後、トリエチルアミン(4.2mL、30.1mmol)を加え、反応物を室温に加温した。反応混合物をH2O(100mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、MgSO4で脱水した。濾過し、濃縮して化合物21e(2.29g)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.70 (s, 1H), 7.45-7.25 (m, 5H), 5.25 (br s, 1H), 5.10 (s, 2H), 3.80-3.25 (m, 24H).
化合物21d(2.47g、5.95mmol)及び化合物21e(2.29g、5.52mmol)のMeOH(50mL)中溶液に、N2下室温でNaCNBH3(530mg、8.44mmol)を加えた。3時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物21f(2.05g、51%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 10H), 5.47 (br s, 1H), 5.37 (br s, 1H), 5.09 (s, 4H), 3.80-3.25 (m, 48H).
DIPEA(0.27mL、1.53mmol)及びHBTU(350mg、0.92mmol)を、化合物21f(380mg、0.61mmol)及び化合物20e(206mg、0.73mmol)のDMF(6mL)中撹拌溶液に加えた。N2下室温で6時間撹拌した後、反応混合物を水(100mL)で希釈し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物21g(210mg、42%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 10 H), 5.47 (br s, 1 H), 5.37 (br s, 1 H), 5.09 (s, 4 H), 3.80-3.25 (m, 34 H), 1.46 (s, 9 H).
化合物21g(210mg、0.19mmol)のMeOH(30mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、1.0g)を加え、次いで反応混合物を水素下室温で4時間撹拌した。反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(50mL)で洗浄した。濃縮して、化合物21h(30mg)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 805.2, [M+Na]+ 827.2.
化合物22hの調製
化合物3a(8.0g、18.3mmol)のTHF(50mL)中溶液に、室温でLiBr(7.9g、91.6mmol)を加えた。還流下17時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物22a(3.2g、50%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.95-3.50 (m, 24H).
化合物22a(3.2g、12.3mmol)のアセトン(20mL)中溶液に、0℃でジョーンズ試薬(20mL)を加えた。0℃で15時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物22b(3.2g、72%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.16 (s, 2H), 3.95-3.30 (m, 20H).
化合物22b(3.2g、8.90mmol)のMeOH(30mL)中溶液に、N2下0℃で塩化オキサリル(1.15mL、13.3mmol)を加えた。16時間後、反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物22c(2.7g、81%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 3.80-3.60 (m, 21H), 3.47 (t, J = 6.4 Hz, 2H).
NaH(油中60%、378mg、8.63mmol)を、N2下0℃で化合物22c(2.7g、7.23mmol)及びN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミン(2.2g、9.4mmol)のDMF(30mL)中溶液に加えた。17時間後、反応混合物を濃縮した。残留物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物22d(2.1g、55%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 4.08 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.78-3.60 (m, 21H), 1.53 (s, 18H).
化合物22d(2.1g、3.99mmol)のTHF/MeOH/H2O(30mL/10mL/10mL)中溶液に、N2下0℃でNaOH(400mg、9.98mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間撹拌した。次いで溶液のpHを1N HCl水溶液で4~5に調節した。反応混合物をH2O(50mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、MgSO4で脱水した。濾過し、濃縮して、化合物22e(1.6g)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90 (s, 1H), 4.15 (s, 2H), 4.03 (br s, 2H), 3.80-3.60 (m, 18H), 1.47 (s, 9H).
DIPEA(0.13mL、0.73mmol)及びHBTU(187mg、0.49mmol)を、化合物21f(200mg、0.24mmol)及び化合物22e(152mg、0.36mmol)のDMF(5mL)中撹拌溶液に加えた。反応混合物をN2下室温で6時間撹拌した。反応混合物をH2O(100mL)で希釈し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物22f(100mg、34%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1205.6.
化合物22f(100mg、0.08mmol)のMeOH(20mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、20mg)を加え、次いで反応混合物を水素下室温で4時間撹拌した。反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(20mL)で洗浄した。濃縮して、化合物22gを無色油状物(70mg)として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 937.4, [M+Na]+ 959.3.
化合物23hの調製
化合物4a(483mg、0.69mmol)のTHF(10mL)中溶液に、LiBr(180mg、2.06mmol)を加えた。反応混合物をN2下12時間還流した。次いで反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物23a(330mg、78%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.81 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.72-3.59 (m, 44H), 3.47 (t, J = 6.4 Hz, 2H).
化合物23a(330mg、0.54mmol)のアセトン(2mL)中溶液に、0℃でジョーンズ試薬(2mL)を加えた。0℃で15時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をH2O(15mL)で希釈し、EtOAc(2×20mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた粗製の化合物23bを更には精製せずに使用した。
粗製の化合物23b(266mg、0.43mmol)のMeOH(5mL)中溶液に、N2下0℃で塩化オキサリル(0.054mL、0.64mmol)を加えた。16時間後、反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物23c(200mg、2ステップで58%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 3.81 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.79-3.64 (m, 43H), 3.48 (t, J = 6.4 Hz, 2H).
化合物23c(200mg、0.31mmol)のDMF(3mL)中溶液に、N2下0℃でN,N-ジBoc-ヒドロキシルアミン(95mg、0.40mmol)及びNaH(油中60%、16mg、0.37mmol)を加えた。17時間後、反応混合物を濃縮した。残留物をH2O(5mL)で希釈し、EtOAc(3×10mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物23d(120mg、49%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 4.13 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.75-3.64 (m, 45H), 1.53 (s, 18H).
化合物23d(120mg、0.15mmol)のTHF/MeOH/H2O(3mL/1mL/1mL)中溶液に、N2下0℃でNaOH(15mg、0.38mmol)を加えた。反応混合物を室温で1時間撹拌した。次いで溶液のpHを1N HCl水溶液で4~5に調節した。反応混合物をH2O(10mL)中に注ぎ入れ、CHCl3(2×20mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮して、化合物23e(100mg)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.23 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.15 (s, 2H), 4.08 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 4.01 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 3.74-3.64 (m, 40H), 1.53 (s, 9H).
DIPEA(0.052mL、0.29mmol)及びHBTU(75mg、0.20mmol)を、化合物21f(80mg、0.09mmol)及び化合物23e(100mg、0.15mmol)のDMF(3mL)中撹拌溶液に加えた。N2下室温で6時間撹拌した後、反応混合物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物23f(140mg、97%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.31 (m, 10 H), 5.44 (br, 2 H), 5.09 (s, 4 H), 4.34 (s, 2 H), 4.26-4.17 (m, 4 H), 4.09-4.08 (m, 1 H), 4.07 (br, 1 H), 3.73-3.47 (m, 76 H), 3.39-3.38 (m, 4 H), 1.53 (s, 9 H). EI-MS m/z: [M+Na]+ 1491.6, [M+H-Boc]+: 1369.6.
化合物23f(140mg、0.09mmol)のMeOH(20mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、20mg)を加え、次いで反応混合物を水素下室温で4時間撹拌した。反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(20mL)で洗浄した。濃縮して、化合物23gを無色油状物(120mg)として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1201.7, [M+Na]+ 1223.7.
化合物24lの調製
ジョーンズ試薬(90mL)を、0℃で化合物2-[2-(2-クロロエトキシ)エトキシ]エタノール(15.0g、88.9mmol)のアセトン(600mL)中溶液にゆっくり加えた。0℃で15時間後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をH2O(200mL)で希釈し、CHCl3(5×300mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水した。濃縮して、化合物24a(20.0g)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.18 (s, 2H), 3.81-3.64 (m, 8H).
化合物24a(20.0g、88.9mmol)のMeOH(500mL)中溶液に、N2下0℃で30分間塩化オキサリル(11.5mL、133.4mmol)を加えた。16時間後、反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物24b(13.0g、75%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.18 (s, 2H), 3.78-3.67 (m, 9H), 3.65 (t, J = 5.6 Hz, 2H).
化合物24b(13.0g、66.1mmol)及びNaN3(6.4g、99.2mmol)をDMF(130mL)に溶解した。100℃で2時間撹拌した後、反応混合物をブライン(200mL)で希釈し、CHCl3(2×100mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で脱水した。濃縮して、化合物24c(11.7g、87%)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.18 (s, 2H), 3.76-3.67 (m, 9H), 3.41 (t, J = 5.6 Hz, 2H).
化合物24c(11.5g、56.6mmol)のTHF/MeOH/H2O(300mL/100mL/100mL)中溶液に、0℃でNaOH(4.53g、113.2mmol)を加えた。N2下0℃で2時間後、溶液のpHを4M HCl水溶液で2に調節した。反応混合物をH2O(100mL)中に注ぎ入れ、CHCl3(3×500mL)で抽出した。有機層を合わせ、MgSO4で脱水した。濾過し、濃縮して、化合物24d(10.7g、99%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.19 (s, 2H), 3.79-3.77 (m, 2H), 3.72-3.70 (m, 4H), 3.44 (t, J = 5.2 Hz, 2H).
3ッ口フラスコに、H2O(40mL)、1,4-ジオキサン(70mL)及びH-Lys(Z)-OH(10g、35.7mmol)を連続的に仕込んだ。混合物を完全に溶解するまで撹拌した。2M Na2CO3水溶液を加えることにより、pHを約10.5に調節した。2M Na2CO3水溶液を同時に加えることによりpHを約10~11で維持しながら、クロロギ酸ベンジル(6.69g、39.2mmol)を加えた。添加完了後、反応混合物を20℃で1時間撹拌した。次いでEtOAc(50mL)を加え、得られた混合物のpHをc-HClで2~3に調節した。有機層を分離し、水層をEtOAc(50mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(50mL)で洗浄し、Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮して、化合物24eを黄色油状物として得た(14.7g、99%)。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33-7.27 (m, 10H), 5.07-5.04 (d, 4H), 4.08 (m, 1H), 3.09 (t, 2H), 1.51 (br s, 1H), 1.49 (bs, 1H), 1.47-1.40 (m, 4H).
DIPEA(0.40mL、2.37mmol)、HOBt(143mg、1.06mmol)及びEDC・HCl(240mg、1.25mmol)を、化合物24e(400mg、0.96mmol)及び化合物2d(261mg、0.86mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(50mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×50mL)で抽出し、NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物24f(380mg、59%)を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.16 (s, 1H), 7.34-7.28 (m, 10H), 7.49 (s, 1H) 5.08-5.07 (m, 5H), 4.17 (m, 1H), 3.99 (t, 2H), 3.68-3.16 (m, 10H), 3.17 (d, 2H), 1.66 (m, 1H), 1.51-1.27 (m, 14H). EI-MS m/z: [M+H]+ 661.0.
化合物24f(370mg、0.55mmol)及びPd/C(10重量%、74mg)のMeOH(10mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.27mL、1.1mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物24g(223mg、87%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.02 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.22 (br, 2H), 7.90 (br, 2H), 3.81 (t, 2H), 3.56 (m, 4H), 3.46 (t, 2H), 3.39-3.27 (m, 26H), 2.75(m, 2H), 1.73 (q, 2H), 1.55 (p, 2H), 1.40-1.33 (m, 14H).
DIPEA(1.6mL、9.45mmol)、HOBt(746mg、5.52mmol)及びEDC・HCl(1.19g、6.42mmol)を、化合物24g(1.0g、5.29mmol)及び化合物24d(1.1g、2.35mmol)のDMF(15mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(20mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×50mL)で抽出し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物24h(1.25g、70%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.68 (t, 1H), 4.46 (q, 1H), 4.07-3.98-4.01 (m, 4H), 3.98 (s, 2H), 3.75-3.663 (m, H) 3.57(t, 2H), 3.44 (m, 6H), 3.28 (m, 2H), 1.87(m, 1H), 1.66 (m, 1H), 1.59-1.52 (p,2H), 1.48 (s, 9H), 1.41-1.33 (m, 2H). EI-MS m/z: [M+H]+ 735.0.
化合物24h(1.2g、0.163mmol)及びPd/C(10重量%、250mg)のMeOH(30mL)中撹拌混合物に、0℃で4N HCl(1,4-ジオキサン、0.81mL、3.26mmol)を加えた。水素下室温で1.5時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(100mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物24i(1.39g、99%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.99 (s, 1H), 8.22 (t 1H) 7.74 (t, 1H), 7.61 (d, 1H), 4.31, (q, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.79(t, 2H), 3.60-3.50 (m, 18H), 3.06 (q, 2H), 2.97 (p, 4H), 1.60-1.49 (m, 2H), 1.39 (m, 11H), 1.20 (m, 2H). EI-MS m/z: [M+H]+ 683.
DIPEA(0.021mL、0.125mmol)及びHBTU(29mg、0.078mmol)を、化合物1i(85mg、0.069mmol)及び化合物24i(23mg、0.031mmol)のDMF(0.7mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物24j(67mg、68%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1552.5.
化合物24j(67mg、0.021mmol)のMeOH(1.7mL)中溶液に、0℃でH2O(1.7mL)中のLiOH一水和物(16mg、0.388mmol)を加えた。0℃で2時間撹拌した後、反応混合物を酢酸(0.018mL)を用いて中和し、減圧下で濃縮した。反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物24k(37mg、62%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1412.3.
TFA(0.4mL)を、化合物24k(37mg、0.013mmol)のDCM(2.0mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で2時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2で吹き飛ばした。残留物をH2O/アセトニトリル(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物24l(19.8mg、53%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1362.3.
化合物25eの調製
化合物22c(1.0g、2.67mmol)及びNaN3(261mg、4.01mmol)をDMF(3mL)に溶解した。反応混合物を100℃で5時間加熱した。反応完結後、反応混合物を濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物25a(854mg、95%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17 (s, 2H), 3.76-3.64 (m, 21H), 3.39 (t, J = 5.2 Hz, 2H).
化合物25a(854mg、2.54mmol)のMeOH(25mL)中撹拌溶液に、0℃で2M NaOH水溶液(6.3mL、12.64mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間撹拌した。次いで溶液を減圧下で濃縮した。得られた懸濁液を0℃で冷却しながら2N HCl水溶液で酸性化した。残留物をCHCl3(8×500mL)により抽出した。有機層を合わせ、Na2SO4で脱水し、濃縮して、化合物25b(783mg、96%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.16 (s, 2H), 3.76-3.65 (m, 18H), 3.40 (t, J = 5.2 Hz, 2H).
DIPEA(0.30mL、1.70mmol)及びHBTU(483mg、1.27mmol)を、化合物25b(337mg、1.05mmol)及び化合物24g(198mg、0.42mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィー(EtOAcからEtOAc/MeOH 10/1)により精製して、化合物25c(358mg、84%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.98 (s, 1H), 8.09 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.63 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.31-4.25 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.62-3.46 (m, 34H), 3.42-3.36 (m, 6H), 3.25-3.17 (m, 2H), 3.08-3.03 (m, 2H), 1.61-1.51 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.26-1.10 (m, 7H). EI-MS m/z: [M+H]+999.1.
化合物25c(358mg、0.35mmol)のMeOH(7mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、38mg)及びHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.18mL、0.72mmol)を加えた。水素下室温で5時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(400mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物25d(314mg、93%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.98 (s, 1H), 8.10 (m, 1H), 7.68 (m, 1H), 7.57 (m, 1H), 4.31-4.25 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.62-3.46 (m, 30H), 3.42-3.36 (m, 10H), 3.45-3.16 (m, 4H), 3.08-3.03 (m, 3H), 2.72-2.66 (m, 3H), 1.61-1.51 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.26-1.10 (m, 6H). EI-MS m/z: [M+H]+ 947.1.
化合物25fの調製
化合物26eの調製
DIPEA(0.65mL、0.004mmol)、HOBt(218mg、1.61mmol)及びEDC・HCl(364mg、1.9mmol)を、化合物24e(1.0g、2.43mmol)及び化合物3e(810mg、1.52mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(50mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(30mL)、飽和NaHCO3水溶液(30mL)及びブライン(30mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物26a(988mg、73%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33-7.26 (m, 8 H), 6.85 (s, 1H), 5.63 (s, 1H), 5.08-5.02 (s, 4 H), 4.16-4.11 (m, 1 H), 4.09-4.05 (m, 2 H), 3.72-3.70 (m, 2 H), 3.62-3.59 (m, 14H), 3.53 (s, 2H), 3.44-3.43 (m, 2H), 3.18-3.16 (m, 2H), 1.82 (m, 1H), 1.72 (s, 7H), 1.66 (m, 1H), 1.52 (s, 18H), 1.38-1.36 (m, 2H), 1.24-1.27 (s, 1H). EI-MS m/z: [M+H-2Boc]+ 693.1.
化合物26a(988mg、1.1mmol)及びPd/C(10重量%、196mg)のMeOH(6mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.55mL、2.2mmol)を加えた。水素下室温で1.5時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物26b(767mg、99%)を黄色泡状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 625.0, [M+H-Boc]+ 525.0, [M+H-2Boc]+ 424.9.
DIPEA(0.2mL、1.14mmol)、HOBt(89mg、0.66mmol)及びEDC・HCl(142mg、0.74mmol)を、化合物26b(200mg、0.29mmol)及び化合物25b(202mg、0.63mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(10mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物26c(270mg、77%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (t, 1H), 7.62 (t, 1H), 7.54-7.52 (m, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.27-4.25 (q, 1H), 3.96 (t, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.58-3.48 (m, 52H), 3.19-3.18 (m, 3H), 3.04-3.03 (m, 3H), 1.44 (s, 18H), 1.39-1.37 (m, 3H), 1.21-1.19 (m, 3H). EI-MS m/z: [M+H-2Boc]+ 1031.6.
化合物26c(160mg、0.13mmol)及びPd/C(10重量%、28mg)のMeOH(20mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.07mL、0.28mmol)を加えた。水素下室温で30分間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物26d(140mg、91%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1179.7.
化合物27eの調製
DIPEA(0.19ml、1.1mmol)、HOBt(64mg、0.47mmol)及びEDC・HCl(91mg、0.47mmol)を、化合物24e(228mg、0.55mmol)及び化合物4e(256mg、0.36mmol)のDMF(4mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で4時間撹拌した後、反応混合物をH2O(10mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×15mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)及びブライン(10mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物27a(327mg、85%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.73 (s, 1H), 7.33-7.26 (m, 11 H), 6.91 (s, 1H), 5.67 (br, 1H) 5.08-5.07 (m, 5 H), 4.15 (m, 1 H), 4.02 (t, 2 H), 3.72-3.44 (m, 46H), 3.16 (d, 2H), 1.82 (m, 1H), 1.63 (m, 1H), 1.55-1.36 (m, 13H).
化合物27a(327mg、0.309mmol)及びPd/C(10重量%、65mg)のMeOH(6mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.15mL、0.618mmol)を加えた。水素下室温で1.5時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物27b(244mg、91%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 789.2.
DIPEA(0.19ml、1.13mmol)、HOBt(95mg、0.707mmol)及びEDC・HCl(135mg、0.707mmol)を、化合物25b(227mg、0.707mmol)及び化合物27b(244mg、0.283mmol)のDMF(6mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をH2O(5mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物27c(339mg、85%)を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.69 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 4.39 (q, 1H), 3.99-3.94 (m, 6H), 3.69-3.58 (m, 80H), 3.51 (t, 2H), 3.44-3.34 (m, 8H), 3.25 (m, 2H), 1.68-1.64 (m, 1H). 1.53-1.48 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.33 (m, 2H). EI-MS m/z: [M+H]+ 1395.6.
化合物27c(339mg、0.242mmol)及びPd/C(10重量%、67mg)のMeOH(6mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.12mL、0.484mmol)を加えた。水素下室温で30分間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物27d(300mg、87%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1343.5.
化合物28dの調製
化合物28cの調製
化合物28eの調製
化合物29jの調製
ヘキサエチレングリコール(25.0g、88.5mmol)のDCM(100mL)中溶液に、N2下0℃でトリエチルアミン(61.7mL、443mmol)及びp-トルエンスルホニルクロリド(50.6g、266mmol)を加えた。0℃で5時間後、反応混合物を1N HCl水溶液(200mL)中に注ぎ入れ、DCM(2×200mL)で抽出した。合わせた有機層を飽和NaHCO3水溶液(100mL)及びブライン(100mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物29a(45.0g、87%)を茶褐色油状物として得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.79 (d, J = 7.6 Hz, 4H), 7.34 (d, J = 7.6 Hz, 4H), 4.16-4.14 (m, 4H), 3.69-3.67 (m, 4H), 3.64-3.56 (m, 16H), 2.44 (s, 6H).
化合物29a(17.6g、29.7mmol)のDMF(100mL)中溶液に、NaN3(9.65g、148mmol)及びテトラブチルアンモニウムヨージド(550mg、1.49mmol)を加えた。反応混合物を80℃に加熱した。80℃で16時間撹拌した後、反応混合物を室温に冷却した。反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、DCM(100mL)で洗浄した。濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物29b(9.4g、94%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.68 (m, 20H), 3.39 (t, 4H).
29b(8.4g、24.9mmol)のDCM(24mL)及びトルエン(24mL)中溶液に、1N HCl水溶液(40.3mL)及びトリフェニルホスフィン(6.9g、23.6mmol)を加えた。反応混合物をN2下室温で16時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、H2O(20mL)を反応混合物中に加え、水層をEtOAc(20mL)で抽出した。次いで水相のpHを13に調節した。得られた水相をDCM(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物29c(6.6g、84%)を無色油状物として得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.67 (m, 20H), 3.52 (t, 2H), 3.39(t, 2H), 2.86(t, 2H). EI-MS m/z: [M+H]+ 306.9.
DIPEA(2.67mL、15.4mmol)及びHBTU(3.49g、9.21mmol)を、0℃でL-グルタミン酸ジメチルエステル塩酸塩(1.3g、6.14mmol)及び化合物20e(1.72g、6.14mmol)のDMF(15mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物を0℃で30分間撹拌し、N2下16時間かけて室温に加温した。反応混合物を水(50mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl(50mL)、飽和NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物29d(2.18g、81%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.00 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 4.34 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.77 (s, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.58 (s, 9H), 3.38-3.34 (t, 2H), 2.14(m, H), 1.90 (m, 1H), 1.39 (s, 9H). EI-MS m/z: [M+H]+ 437.35.
化合物29d(2.18g、4.99mmol)のTHF:MeOH:H2O(12mL:4mL:4mL)中溶液に、N2下室温でNaOH(499mg、12.5mmol)を加えた。3時間後、反応混合物のpHを4に調節し、濃縮した。次いで残留物をDCM/MeOH(80mL/20mL)で抽出した。濃縮して、化合物29e(1.0g、49%)を黄色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H-Boc]+ 309.20.
DIPEA(1.7mL、9.79mmol)及びHBTU(2.79g、7.35mmol)を、0℃で化合物29e(1.0g、2.45mmol)及び化合物29c(2.25g、7.35mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物を0℃で30分間撹拌し、N2下16時間かけて室温に加温した。反応混合物を水(50mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl水溶液(50mL)、飽和NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物29f(611mg、25%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.97 (s, 1H), 8.08 (t, 1H), 7.85 (t, 1H), 7.64 (d, 1H), 4.27 (m, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.82-3.61 (m, 2H), 3.61-3.50 (m, 42H), 3.42-3.37 (m, 8H), 3.28-3.15 (m, 4H), 2.90 (s, H), 2.08-2.04(m,2 H), 1.88 (m, 1H), 1.75 (m, 1H), 1.39 (s, 9H). EI-MS m/z: [M+H]+ 986.73.
化合物29f(611mg、0.62mmol)のMeOH(50mL)中撹拌混合物に、Pd/C(10重量%、132mg、0.62mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物29gを無色油状物として得(518mg、粗製物)、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 933.85.
DIPEA(0.026mL、0.150mmol)及びHBTU(40mg、0.105mmol)を、化合物29g(35mg、0.037mmol)及び化合物1i(106mg、0.086mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で16時間撹拌した後、反応混合物を水(20mL)で希釈し、EtOAc(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)及びブライン(20mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物29h(81.4mg、65%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1677.94, 1/3[M+H]+ 1119.03.
化合物29h(81mg、0.024mmol)のMeOH(1mL)中溶液に、-10℃でH2O(1mL)中のLiOH一水和物(8.1mg、0.19mmol)を加えた。-10℃で2時間撹拌した後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。次いで反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物29i(53mg、72%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1537.86, 1/3[M+H]+ 1025.66.
TFA(0.3mL)を、0℃で化合物29i(53mg、0.017mmol)のDCM(1.0mL)中撹拌溶液に加えた。1時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をH2O/MeCN(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物29j(23.1mg、43%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1487.99, 1/3[M+H]+ 992.40.
化合物29kの調製
化合物30bの調製
化合物30aの調製
化合物30cの調製
化合物31fの調製
3ッ口フラスコに、H2O(18mL)、1,4-ジオキサン(30mL)及びL-オルニチン一塩酸塩(3.0g、17.8mmol)を連続的に仕込んだ。混合物を完全に溶解するまで撹拌した。2M Na2CO3水溶液を加えることにより、pHを約10.5に調節した。2M Na2CO3水溶液を同時に加えることによりpHを約10~11で維持しながら、クロロギ酸ベンジル(6.37g、37.4mmol)を加えた。添加終了後、反応混合物を20℃で1時間撹拌した。次いでEtOAc(50mL)を加え、得られた混合物のpHをc-HClで2~3に調節した。有機層を分離し、水層をEtOAc(50mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(50mL)で洗浄し、Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮して、化合物31a(7.1g)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.54 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.44-7.29 (m, 10H), 7.24-7.22 (m, 1H), 5.16-5.00 (d, 4H), 3.95-3.89 (m, 1H), 3.00-2.96 (m, 2H), 1.98-1.57 (m, 1H), 1.56-1.46(m, 3H).
DIPEA(1.41mL、8.12mmol)及びHBTU(1.85g、4.87mmol)を、0℃で化合物31a(1.30g、3.25mmol)及び化合物2d(891mg、3.57mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物を0℃で30分間撹拌し、N2下16時間かけて室温に加温した。反応混合物を水(50mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl水溶液(50mL)、飽和NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物31b(1.2g、57%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 647.54, [M+H-Boc]+ 547.47
化合物31b(1.2g、1.86mmol)のMeOH(50mL)中撹拌混合物に、Pd/C(10重量%、59mg、5.57mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して化合物31c(717mg)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.93 (s, 1H), 3.81 (t, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.51 (s, 5H), 3.42-3.22 (m, 13H), 1.37 (s, 9H).
DIPEA(0.55mL、3.17mmol)及びHBTU(902mg、2.38mmol)を、0℃で化合物31c(300mg、0.79mmol)及び化合物25b(637mg、1.98mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。反応混合物を0℃で30分間撹拌し、N2下16時間かけて室温に加温した。反応混合物を水(30mL)中に注ぎ入れ、DCM(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl水溶液(30mL)、飽和NaHCO3水溶液(30mL)及びブライン(30mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物31d(551mg、71%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 985.87.
化合物31d(491mg、0.50mmol)のMeOH(30mL)中撹拌混合物に、Pd/C(10重量%、106mg1.00mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して化合物31e(452mg)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 933.94.
化合物31fの調製
化合物31gの調製
化合物32cの調製
DIPEA(0.6mL、7.07mmol)及びHBTU(972mg、5.30mmol)を、化合物24g(483mg、0.855mmol)及びFmoc-NH-PEG5-CH2CH2COOH(1.0g、3.89mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(30mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)及びブライン(10mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物32a(1.16g、90%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.77 (d, 4H), 7.60(d, 4H), 7.39 (t, 4H), 7.31 (t, 4H), 4.39 (d, 4H), 4.33 (m, 1H), 4.22 (m, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.71-3.39 (m, 52H), 3.19 (m, 2H), 2.51 (m, 4H), 1.50 (m, 1H), 1.46 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.25 (m, 2H). EI-MS m/z: [M+H]+ 1520.0.
化合物32a(500mg、0.328mmol)のTHF(8mL)中溶液に、室温でピペリジン(2mL)を加えた。20分間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物32b(175mg、50%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.41 (m, 1H), 4.01 (m, 2H), 3.75-3.56 (m, 43H), 3.54 (m, 2H), 3.24 (m, 2H), 2.89 (m, 3H), 2.52 (m, 4H), 1.83 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.53 (s, 9H), 1.39 (m, 2H). EI-MS m/z: [M+H]+ 975.5.
化合物32dの調製
化合物33eの調製
DIPEA(1.98mL、11.37mmol)及びHBTU(2.15g、5.68mmol)を、化合物24e(1.57g、3.79mmol)及び化合物6b(1.30g、3.15mmol)のDMF(37mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(40mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×40mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(40mL)、飽和NaHCO3水溶液(40mL)及びブライン(40mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物33a(2.2g、88%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.99 (s, 1H), 8.19 (d, 1H), 7.79 (t, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.34-7.31 (m, 5H), 7.24 (t, 1H), 5.01 (d, 4H), 4.55 (q, 1H), 3.91 (q, 1H), 3.79 (t, 2H), 3.55-3.48 (m, 9H), 3.24-3.11 (m, 2H), 2.75-2.54 (m, 2H), 1.57-1.49 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.25 (m, 2H). EI-MS m/z: [M+H]+ 790.47, [M+Na]+812.4.
化合物33a(2.2g、2.78mmol)及びPd/C(10重量%、400mg)のMeOH(60mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、1.39mL、5.56mmol)を加えた。水素下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(40mL)で洗浄した。濾液を濃縮して化合物33b(1.67g、99%)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.98 (s, 1H), 8.87 (d, 1H), 8.28 (bs, 3H), 8.12 (1H), 7.96 (bs, 3H), 4.51 (q, 1H), 3.77 (t, 2H), 3.72 (bs, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.52-3.47 (m, 7H), 3.12 (s, 3H), 2.76-2.61 (m,4H) 1.71 (q, 2H), 1.55 (q, 2H) 1.36 (s, 9H). EI-MS m/z: [M+H]+522.4, [M+Na]+ 544.3.
DIPEA(1.95mL、11.23mmol)及びHBTU(3.19g、8.42mmol)を、化合物25b(1.98g、6.17mmol)及び化合物33b(1.67g、2.80mmol)のDMF(20mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物33c(2g、63%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.97 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.82 (t, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 4.54 (q, 1H), 4.25 (q, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.80 (t, 2H), 3.60-3.49 (m, 48H), 3.26-3.12 (m,3H), 3.07 (q, 2H), 2.75-2.54 (m, 2H), 1.65-1.55 (m, 2H), 1.39 (s, 10H), 1.21 (m,3H). EI-MS m/z: [M+H]+ 1128.8, [M+Na]+ 1150.7.
化合物33c(1g、0.88mmol)及びPd/C(10重量%、200mg)のMeOH(20mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.44mL、0.88mmol)を加えた。水素下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(20mL)で洗浄した。濾液を濃縮して化合物33d(936mg、92%)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.98 (s 1H), 8.30 (d, 1H), 7.70 (t, 2H), 4.54 (q, 1H), 4.26 (q, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.80 (t, 2H), 3.61-3.49 (m, 46H), 3.22-3.12 (m, 4H), 3.06 (q, 2H), 2.97 (q, 4H), 2.76-2.54 (m, 2H), 1.64-1.55 (m, 2H), 1.39 (s, 10H), 1.26 (m, 3H). EI-MS m/z: [M+H]+ 1076.8.
化合物33fの調製
化合物34eの調製
DIPEA(0.8mL、4.56mmol)及びHBTU(1.3g、3.42mmol)を、化合物24g(530mg、1.14mmol)及びZ-Asp(OMe)-OH(704mg、2.5mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(50mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(40mL)、飽和NaHCO3水溶液(40mL)及びブライン(40mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物34a.(713mg、68%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 9.97 (s, 1H), 7.88 (m, 3H), 7.64 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 7.35 (m, 10H), 5.02 (m, 4H), 4.43-4.31 (m, 2H), 4.17 (m, 1H), 3.80 (t, 2H), 3.58-3.50 (m, 12H), 3.41-3.16 (m, 6H), 2.98 (m, 2H), 2.79-2.67 (m, 3H), 2.57 (m, 2H), 1.60-1.34 (m, 13H).
化合物34a(530mg、0.58mmol)のMeOH(5mL)中溶液に、Pd/C(20重量%、106mg)及びHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.29mL、1.16mmol)を加えた。水素下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物34b(420mg、100%)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.97 (s, 1H), 8.62 (d, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.27 (m, 4H), 7.02 (s, 1H), 4.17 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.76 (t, 2H), 3.61 (m, 4H), 3.51-3.11 (m, 12H), 3.09-2.77 (m, 8H), 1.60-1.24 (m, 13H). EI-MS m/z: [M+H]+ 651.5.
DIPEA(0.4mL、2.32mmol)及びHBTU(660mg、1.74mmol)を、化合物34b(420mg、0.58mmol)及び化合物25b(299mg、0.93mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(30mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)及びブライン(20mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物34c(466mg、70.8%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.28 (s, 1H), 7.78 (q, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.94 ( s, 1H), 4.85 (m, 2H), 4.35 (m, 1H), 4.07-4,03(m, 6H), 3.75-3.41 (m, 56H), 3.23 (q, 2H), 2.92-2.84 (m, 4H),1.91-1.32 (m, 15H). EI-MS m/z: [M+2H]+ 1158.1.
化合物34c(260mg、0.21mmol)及びPd/C(10重量%、52mg)のMeOH(20mL)中撹拌混合物に、0℃でHCl(1,4-ジオキサン中4N、0.10mL、0.41mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(50mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物34d(249mg、100%)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+2H]+ 1206.1.
化合物34fの調製
化合物35gの調製
DIPEA(0.61mL、3.52mmol)及びHBTU(665mg、1.175mmol)を、Fmoc-D-Glu(OtBu)-OH(500mg、1.17mmol)及び化合物2d(424mg、1.404mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(30mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)及びブライン(20mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物35a(708mg、89%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 672.7.
化合物35a(708mg、1.04mmol)のTHF(8mL)中溶液に、室温でピペリジン(2mL)を加えた。20分間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物35b(400mg、85%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 450.1.
DIPEA(0.19mL、1.1mmol)及びHBTU(253mg、0.66mmol)を、化合物28a(203mg、0.484mmol)及び化合物35b(200mg、0.44mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(30mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)及びブライン(10mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物35c(235mg、63%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 847.0.
化合物35c(235mg、0.277mmol)のMeOH(15mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、30mg)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(50mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物35d(160mg、100%)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 578.7.
DIPEA(0.145mL、1.758mmol)及びHBTU(262mg、1.465mmol)を、化合物35d(160mg、0.276mmol)及び化合物25b(187mg、0.581mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(30mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)及びブライン(10mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物35e(260mg、79%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1185.4.
化合物35e(70mg、0.059mmol)のMeOH(5mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、15mg)を加えた。水素下室温で90分間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して化合物35f(67mg、100%)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ : 1133.3.
化合物36eの調製
DIPEA(0.3mL、3.10mmol)及びHBTU(474mg、2.275mmol)を、Fmoc-D-Glu(OtBu)-OH(484mg、1.138mmol)及び化合物28b(223mg、0.569mmol)のDMF(7mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(30mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)及びブライン(20mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物36a(593mg、86%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1208.3.
化合物36a(593mg、0.49mmol)のTHF(8mL)中溶液に、室温でピペリジン(1mL)を加えた。20分間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物36b(166mg、44%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 763.9.
DIPEA(0.15mL、0.84mmol)及びHBTU(247mg、0.63mmol)を、化合物36b(166mg、0.21mmol)及び化合物25b(147mg、0.441mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(30mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)及びブライン(10mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物36c(195mg、68%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1370.6.
化合物36c(195mg、0.14mmol)のMeOH(10mL)中溶液に、Pd/C(10重量%、30mg)を加えた。次いで反応混合物を水素下室温で90分間撹拌した。反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して化合物36d(187mg、100%)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1318.6.
化合物37dの調製
DIPEA(0.083mL、0.71mmol)及びHBTU(136mg、0.36mmol)を、プロパルギルアミン(0.018mL、0.285mmol)及び化合物1j(300mg、0.238mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(10mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)及びブライン(10mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物37a(300mg、97%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1294.0.
化合物37a(300mg、0.24mmol)のTHF(2mL)及びMeOH(2mL)中溶液に、0℃でH2O(2mL)中のLiOH一水和物(50mg、1.20mmol)を加えた。0℃で2時間撹拌した後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。次いで残留物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物37b(165mg、60%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1140.8.
CuSO4 .5H2O(1mg)及びアスコルビン酸ナトリウム(2mg)を、化合物37b(50mg、0.042mmol)及び化合物25c(23mg、0.02mmol)のTHF(2mL)及びH2O(2mL)中撹拌混合物に加えた。1M Na2CO3水溶液を加えることにより、pHを約7に調節した。20℃で1時間撹拌した後、反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物37c(32.4mg、48%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1638.2.
TFA(0.4mL)を、化合物37c(32.4mg、0.01mmol)のDCM(2mL)中溶液に加えた。0℃で2時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をH2O/MeCN(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物37d(19.6mg、62%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1590.2.
化合物38bの調製
CuSO4 .5H2O(1mg)及びアスコルビン酸ナトリウム(2mg)を、化合物37b(60mg、0.052mmol)及び化合物16b(14mg、0.025mmol)のTHF(2mL)及びH2O(2mL)中撹拌混合物に加えた。1M Na2CO3水溶液を加えることにより、pHを約7に調節した。20℃で1時間撹拌した後、反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物38a(61mg、82%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1430.2.
TFA(0.4mL)を、化合物38a(59.8mg、0.02mmol)のDCM(2.0mL)中溶液に加えた。0℃で2時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をH2O/AN(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物38b(14.6mg、24%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1380.1.
化合物38eの調製
DIPEA(0.075mL、0.428mmol)及びHBTU(122mg、0.321mmol)を、プロパルギルアミン(0.016mL、0.256mmol)及び化合物1i(264mg、0.214mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(10mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)及びブライン(10mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮した後、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物38c(270mg、100%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1266.2.
化合物38c(270mg、0.213mmol)のTHF(2mL)及びMeOH(2mL)中溶液に、0℃でH2O(2mL)中のLiOH一水和物(36mg、0.853mmol)を加えた。0℃で2時間撹拌した後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。次いで残留物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物38d(168mg、70%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1126.1.
化合物39eの調製
化合物1g(27mg、0.039mmol)、化合物14j(45mg、0.039mmol)及び無水HOBt(1mg、0.0078mmol)を0℃でDMF(2mL)に溶解した。次いでピリジン(0.2mL)及びDIPEA(0.014mL、0.078mmol)を加えた。N2下0℃から室温で24時間撹拌した後、反応混合物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物39a(36mg、58%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1582.9, [M+Na]+ 1604.5.
化合物39a(35mg、0.022mmol)及びトリフェニルホスフィン(1.5mg、0.005mmol)をDCM(2mL)に溶解した。ピロリジン(0.0025mL、0.026mmol)及びPd(PPh3)4(1.3mg、0.001mmol)を室温で反応混合物に加え、次いで2時間撹拌した。反応混合物をH2O(50mL)で希釈し、n-ブタノール(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、減圧下で蒸発させた。得られた残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物39b(34mg、粗製物)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ : 1542.7.
DIPEA(0.0026mL、0.039mmol)及びPyBOP(4.7mg、0.023mmol)を、化合物39b(15mg、0.009mmol)及び化合物16c(2.0mg、0.0038mmol)のDMF(0.3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で13時間撹拌した後、反応混合物をDMSO(1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物39c(12mg、35%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1788.5.
化合物39c(12mg、0.0033mmol)のMeOH(1mL)中溶液に、0℃でH2O(1mL)中のLiOH一水和物(1.4mg、0.033mmol)を加えた。0℃で2時間後、溶液のpHを酢酸で4~5に調節し、反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残留物をDMSO(1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物39d(11mg、98%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1648.6.
TFA(0.5mL)を、0℃で化合物39d(11mg、0.003mmol)のDCM(3.0mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で2時間後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物39e(1.2mg、11%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1598.3.
化合物40cの調製
DIPEA(0.004mL、0.021mmol)及びHBTU(5.0mg、0.013mmol)を、化合物39b(20mg、0.012mmol)及び化合物25d(5.0mg、0.005mmol)のDMF(1.5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をDMSO(1.0mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物40a(14.5mg、30%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1998.8.
化合物40a(10mg、0.0025mmol)のMeOH(1mL)中溶液に、0℃でH2O(1mL)中のLiOH一水和物(1.0mg、0.025mmol)を加えた。0℃で2時間後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。次いで残留物をDMSO(1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物40b(6.9mg、74%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1858.3.
TFA(0.2mL)を、化合物40b(6.9mg、0.0018mmol)のDCM(2.0mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で2時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物40c(1.5mg、23%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1808.6.
化合物41cの調製
DIPEA(0.116mL、0.66mmol)及びPyBOP(127mg、0.24mmol)を、化合物16c(280mg、0.22mmol)及び化合物1j(587mg、1.10mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をH2O(200mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物41a(250mg、64%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 883.2, [M+H]+ 1766.
DIPEA(0.0017mL、0.0096mmol)及びPyBOP(2.0mg、0.0038mmol)を、化合物41a(5.7mg、0.0032mmol)及び化合物39b(5.0mg、0.0032mmol)のDMF(0.5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で3時間撹拌した後、反応混合物をMeCN(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物41b(8.0mg、75%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1645.
化合物41b(8.0mg、0.0024mmol)のMeOH(0.5mL)中溶液に、0℃でH2O(0.1mL)中のLiOH一水和物(1.2mg、0.028mmol)を加えた。0℃で2時間後、反応混合物を2N HCl水溶液を用いて中和し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をDCM(2mL)及びH2O(3滴)で希釈した。次いでTFA(0.1mL)を0℃で加えた。0℃で2時間後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物41c(3.1mg、44%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1448, 1/2[M+Na]+ 1459.
化合物42dの調製
DIPEA(0.026mL、0.23mmol)及びHBTU(22mg、0.06mmol)を、化合物1j(60mg、0.048mmol)及び化合物25d(214mg、0.19mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をDMSO(1.0mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物42a(64mg、58%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 2286.8.
DIPEA(0.011mL、0.06mmol)及びHBTU(14mg、0.036mmol)を、化合物42a(68mg、0.03mmol)及び化合物39b(46mg、0.03mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をDMSO(1.0mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物42b(60mg、52%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1906.3.
化合物42b(60mg、0.016mmol)のMeOH(2mL)中溶液に、0℃でH2O(2mL)中のLiOH一水和物(5mg、0.126mmol)を加えた。0℃で2時間後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。次いで残留物をDMSO(1mL)に溶解し、分取HPLCにより精製して、化合物42c(37mg、65%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1759.3.
TFA(0.3mL)を、化合物42c(37mg、0.01mmol)のDCM(3mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で2時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物42d(15mg、45%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 1659.6.
化合物43iの調製
DIPEA(10.4mL、23.8mmol)及びHBTU(13.5g、35.7mmol)を、H-Lys(z)-OMe塩酸塩(7.0g、23.8mmol)及び化合物24e(9.86mg、23.8mmol)のDMF(50mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で8時間撹拌した後、反応混合物を水(100mL)で希釈し、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl水溶液(50mL)、飽和NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物43a(9.3g、57%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (d, 1H), 7.37-7.29 (m, 15H), 7.22 (m, 2H), 5.00 (s, 6H), 4.18 (m, 1H), 4.00 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.96 (m, 4H), 1.67-1.50 (m, 4H), 1.38-1.29 (m, 4H), 1.19-1.18 (m, 4H). EI-MS m/z: [M+Na]+ 712.96.
化合物43a(9.3g、13.5mmol)のTHF:MeOH:H2O(60mL:30mL:30mL)中溶液に、N2下0℃でLiOH一水和物(1.13g、26.9mmol)を加えた。2時間後、反応混合物を1N HCl水溶液でpHを4にまで酸性化し、EtOAc(3×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮して、化合物43b(9.1g、粗製物)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 677.48, 2[M+H]+ 1353.82.
DIPEA(1.47mL、8.44mmol)、HOBt(484mg、3.58mmol)及びEDC・HCl(809mg、4.22mmol)を、化合物43b(2.5g、3.71mmol)及び化合物3e(1.8g、3.38mmol)のDMF(20mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物を水(50mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl水溶液(50mL)、飽和NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物43c(2.3g、59%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1155.92, [M+H-Boc]+ 1055.83.
化合物43c(2.3g、1.99mmol)及びPd/C(10重量%、424mg、3.98mmol)のMeOH(200mL)中撹拌混合物に、HCl(1,4-ジオキサン中4N、0.99mL、3.98mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(100mL)で洗浄した。濾液を濃縮して化合物43d(1.5g、粗製物)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 753.29.
DIPEA(0.14mL、0.80mmol)、HOBt(59mg、0.43mmol)及びEDC・HCl(102mg、0.53mmol)を、化合物43d(2.5g、3.71mmol)及び化合物25b(150g、0.46mmol)のDMF(5mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物を水(50mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を1N HCl水溶液(30mL)、飽和NaHCO3水溶液(30mL)及びブライン(30mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物43e(100mg、45%)を無色油状物として得た。EI-MS m/z: [M+Na]+ 1685.11, 1/2[M+H-Boc]+ 731.82.
化合物43e(100mg、0.06mmol)及びPd/C(10重量%、20mg、0.192mmol)のMeOH(20mL)中撹拌混合物に、HCl(1,4-ジオキサン中4N、0.045mL、0.18mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(30mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物43f(95mg)を茶褐色泡状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1586.30, 1/2[M+H]+ 793.02.
DIPEA(0.030mL、0.170mmol)及びHBTU(36mg、0.094mmol)を、化合物43f(45mg、0.028mmol)及び化合物1j(114mg、0.091mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で16時間撹拌した後、反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物43g(31mg、21%)を得た。EI-MS m/z: 1/3[M+H-Boc]+ 1705.74, 1/4[M+H-2Boc]+ 1254.79.
化合物43g(31mg、0.006mmol)のMeOH(1mL)中溶液に、-20℃でH2O(1mL)中のLiOH一水和物(3.7mg、0.088mmol)を加えた。-20℃で2時間撹拌した後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。次いで反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物43h(18mg、64%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/3[M+H-Boc]+ 1735.19, 1/4[M+H]+ 1301.95, 1/5[M+H-Boc]+ 1021.71.
TFA(0.3mL)を、0℃で化合物43h(18mg、0.004mmol)のDCM(1.0mL)中撹拌溶液に加えた。1時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をH2O/MeCN(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物43i(6mg、33%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/3[M+H]+ 1547.75, 1/4[M+H]+ 1161.14.
化合物43jの調製
化合物44iの調製
DIPEA(1.9mL、11.0mmol)及びHBTU(2.5g、6.64mmol)を、化合物H-Lys(z)-OMe塩酸塩(1.3g、4.43mmol)及び化合物43b(3.0g、4.43mmol)のDMF(30mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物を水(100mL)で希釈し、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl水溶液(50mL)、飽和NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物44a(3.9g、93%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 953.42.
化合物44a(2.1g、2.20mmol)のTHF:MeOH:H2O(24mL:8mL:8mL)中溶液に、N2下室温でLiOH一水和物(185mg、4.40mmol)を加えた。2時間後、反応混合物を1N HCl水溶液でpHを4にまで酸性化し、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮して化合物44b(2.0g)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 939.35, [M+Na]+ 961.37.
DIPEA(0.93mL、5.33mmol)及びHBTU(1.21g、3.20mmol)を、化合物44b(2.0g、2.13mmol)及び化合物3e(1.14g、2.13mmol)のDMF(20mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物を水(50mL)中に注ぎ入れ、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl水溶液(50mL)、飽和NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物44c(2.60g、86%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1418.44, [M+Na]+ 1440.39, [M+H-Boc]+ 1318.47.
化合物44c(2.60g、1.83mmol)及びPd/C(10重量%、781mg、7.34mmol)のMeOH(50mL)中撹拌混合物に、HCl(1,4-ジオキサン中4N、0.9mL、3.67mmol)を加えた。次いで反応物を水素下室温で2時間撹拌した。反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(50mL)で洗浄した。濾液を濃縮して、化合物44d(1.73g)を黄色泡状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+H]+ 881.90.
DIPEA(1.58mL、9.08mmol)及びHBTU(2.58g、6.81mmol)を、化合物44d(1.0g、1.13mmol)及び化合物25b(1.82g、5.67mmol)のDMF(20mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物を水(100mL)で希釈し、EtOAc(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を0.5N HCl(50mL)、飽和NaHCO3水溶液(50mL)及びブライン(50mL)で順次洗浄し、無水Na2SO4で脱水した。濾過し、減圧下で濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物44e(848mg、36%)を得た。EI-MS m/z: 1/2[M+H-2Boc]+ 947.63.
化合物44e(848mg、0.40mmol)及びPd/C(10重量%、172mg、1.62mmol)のMeOH(50mL)中撹拌混合物に、HCl(1,4-ジオキサン中4N、0.4mL、1.62mmol)を加えた。水素下室温で2時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、MeOH(50mL)で洗浄した。濾液を濃縮して化合物44f(625mg、粗製物)を得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: 1/2[M+H]+ 996.40, 1/3[M+H]+ 664.59
DIPEA(0.067mL、0.386mmol)及びHBTU(110mg、0.289mmol)を、化合物44f(96mg、0.048mmol)及び化合物1j(303mg、0.24mmol)のDMF(3mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で16時間撹拌した後、反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物44g(67mg、20%)を得た。EI-MS m/z: 1/3[M+H]+ 2315.93, 1/4[M+H]+ 1737.60, 1/5[M+H]+ 1390.37.
化合物44g(67mg、0.009mmol)のMeOH(1mL)中溶液に、-20℃でH2O(1mL)中のLiOH一水和物(8.1mg、0.192mmol)を加えた。-20℃で2時間撹拌した後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。次いで反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物44h(27.9mg、45%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/3[M+H]+ 2110.24, 1/4[M+H]+ 1582.97, 1/4[M+H-Boc]+ 1557.91.
TFA(0.3mL)を、0℃で化合物44h(27.9mg、0.004mmol)のDCM(1.0mL)中撹拌溶液に加えた。1時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をH2O/MeCN(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物44i(13.6mg、50%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: 1/3[M+H]+ 2043.49, 1/4[M+H]+ 1532.96, 1/5[M+H]+ 1226.62.
化合物44jの調製
化合物45kの調製
D-グルクロノ-6,3-ラクトン(25.0g、141.9mmol)を窒素下室温でMeOH(250mL)に溶解し、NaOH(141mg)のMeOH(100mL)中溶液をこれにゆっくり加えた。24時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、次いでピリジン(66mL)及び無水酢酸(71mL)を10℃未満で加えた。室温で4時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィーに供して、化合物L(41.6g、77%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 5.77 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.31 (t, J= 9.6 Hz, 1H), 5.24 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.17 (d, J = 9 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.04 (m, 9H).
化合物L(10.0g、26.6mmol)を窒素下0℃でHBr(AcOH中33%、20mL)に溶解した。反応混合物を室温に加温した。2時間撹拌した後、トルエン(50mL)をこれに加え、混合物を減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物M(10.9g、99%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 6.64 (d, J = 3.6Hz, 1H), 5.61 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 5.24 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 4.85 (m, 1H), 4.58 (d, d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.05 (s, 3H).
3-アミノ-1-プロパノール(3.0g、66.57mmol)を窒素下0℃でDCM(150mL)に溶解し、ジ-tert-ブチルジカーボネート(16g、73.23mmol)をこれに加えた。得られた混合物を室温で12時間撹拌した。反応完結後、溶媒を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45a(6.4g、92%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.78 (s, 1H), 3.65 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 2.90 (s, 1H), 1.68 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).
化合物45a(6.04g、34.47mmol)及びトリエチルアミン(14.4mL、103.4mmol)を、窒素下0℃でTHFに溶解し、次いでメタンスルホン酸無水物(7.21g、41.36mmol)でゆっくり処理した。得られた混合物を窒素下室温で12時間撹拌した。反応完結後、溶媒を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45b(9.01g、98%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.73 (s, 1H), 4.30 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.31-3.24 (m, 2H), 3.04 (s, 3H), 1.94 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H).
化合物45b(3.0g、11.84mmol)を窒素下室温でDMF(40mL)に溶解し、次いでNaN3(924mg、14.21mmol)で処理し、得られた混合物を60℃で12時間撹拌した。反応完結後、EtOAc(50mL)、蒸留水(50mL)及び1N HCl水溶液(5mL)をこれに加えた。有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45c(2.3g、99%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 4.63 (s, 1H), 3.36 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.24-3.18 (m, 2H), 1.80-1.75 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).
化合物45c(3.8g、18.98mmol)を窒素下0℃でDCM(10mL)に溶解し、次いでジオキサン中4M-HCl(10mL)をこれにゆっくり加えた。12時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮して、化合物45d(2.5g、99%)を得た。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.06 (s, 3H), 3.47 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.82 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.84-1.79 (m, 2H).
化合物45d(58mg、0.42mmol)及び5-ホルミルサリチル酸(100mg、0.60mmol)を、窒素下0℃でDMF(2mL)に溶解し、次いでDIPEA(0.2mL、1.20mmol)及びPyBop(375mg、0.72mmol)を反応混合物に加えた。室温で3時間撹拌した後、EtOAc(30mL)及び蒸留水(10mL)をこれに加えた。有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45e(82mg、79%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 13.39 (s, 1H), 9.87 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.89 (dd, J = 1.6, 7.2 Hz. 1H), 7.60 (s, 1H), 7.10 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.63-3.57 (m, 2H), 3.48 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.99-1.92 (m, 2H).
化合物45e(78mg、0.31mmol)及び化合物M(125mg、0.31mmol)を、窒素下室温でMeCN(3mL)に溶解し、次いで酸化銀(291mg、1.26mmol)及び4Åモレキュラーシーブ(125mg)をこれに加えた。室温で3時間撹拌した後、混合物をセライト濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45f(160mg、90%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.00 (s, 1H), 8.66 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.02 (dd, J = 2.0, 6.4 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.48-5.33 (m, 4H), 4.28 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.73-3.64 (m, 1H), 3.50-3.42 (m, 3H), 2.09-2.07 (m, 9H), 2.00-1.92(m, 2H).
化合物45f(160mg、1.51mmol)を窒素下0℃で2-プロパノール(0.4mL)及びクロロホルム(2mL)に溶解し、次いでシリカゲル(2g)及び水素化ホウ素ナトリウム(27mg、0.71mmol)をこれに加えた。0℃で2時間撹拌した後、反応物をセライト濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45g(115mg、71%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.06 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.50-7.44 (m, 2H), 7.01 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.45-5.31 (m, 4H), 4.38 (s, 2H), 4.22 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.67-3.61 (m, 1H), 3.46-3.41 (m, 3H), 2.07-2.04 (m, 9H), 1.97-1.91 (m, 2H).
化合物45g(100mg、0.18mmol)を窒素下0℃でDMF(1mL)に溶解し、次いでビス(4-ニトロフェニル)カーボネート(110mg、0.35mmol)及びDIPEA(0.050mL、0.27mmol)をこれに加えた。室温で2時間撹拌した後、EtOAc(30mL)及び蒸留水(10mL)をこれに加えた。有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45h(75mg、58%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.29-8.27 (m, 2H), 8.23 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 2.4, 6.6 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.39-7.37 (m, 2H), 7.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.45-5.29 (m, 4H), 5.28 (s, 2H), 4.23 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.68-3.64 (m, 1H), 3.46-3.42 (m, 3H), 2.08-2.05 (m, 9H), 1.98-1.93 (m, 2H).
化合物45h(50mg、0.068mmol)を窒素下室温でDMF(0.8mL)に溶解し、次いでMMAF-OMe(51mg、0.068mmol)をこれに加えた。得られた混合物をHOBT(2mg、0.013mmol)、ピリジン(0.24mL)及びDIPEA(0.012mL、0.068mmol)で処理した。室温で18時間撹拌した後、EtOAc(20mL)及び蒸留水(10mL)をこれに加えた。有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45i(71mg、78%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1339.
化合物45i(30mg、0.022mmol)及びフェニルアセチレン(3.7μL、0.033mmol)を、窒素下室温でEtOH(0.2mL)及び水(30μL)に溶解し、次いで0.1M CuSO4水溶液(30μL)及び1.0Mアスコルビン酸ナトリウム水溶液(30μL)をこれに加えた。得られた混合物をHOBT(2mg、0.013mmol)、ピリジン(0.24mL)及びDIPEA(12μL、0.068mmol)で処理した。室温で5時間撹拌した後、EtOAc(20mL)及び蒸留水(5mL)をこれに加えた。有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45j(26mg、81%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1441.
化合物45j(20mg、0.013mmol)を窒素下0℃でMeOH(0.2mL)に溶解し、次いで水(0.2mL)中のLiOH・H2O(6mg、0.14mmol)をこれに加えた。室温で1時間撹拌した後、クロロホルム(10mL)、MeOH(1mL)、蒸留水(10mL)及び0.5N HCl水溶液(1mL)をこれに加えた。有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物45k(17mg、87%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1286.
化合物46bの調製
5-ホルミルサリチル酸(1.0g、6.02mmol)を窒素下0℃でDMF(20mL)に溶解し、次いでN-ブロモスクシンイミド(1.07g、6.11mmol)をこれに加え、混合物を70℃で3時間撹拌した。反応完結後、EtOAc(100mL)、2N HCl水溶液(2mL)及び蒸留水(100mL)をこれに加えた。有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物46a(1.2g、84%)を得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.64 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.16 (s, 1H).
実施例4において化合物2hを調製する方法と同様の方法により、化合物46aから化合物46bを調製した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1328.
化合物47a、化合物48a及び化合物49aの調製
化合物47aの調製
化合物2h(20mg、0.014mmol)を窒素下室温でEtOH(0.7mL)に溶解し、次いで化合物N(3.7mg、0.017mmol)をこれに加え、混合物を45℃で2時間撹拌した。反応完結後、HPLCを用いて化合物47a(10.2mg、49%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1441.
化合物48a及び49aの調製
実施例68において化合物47aを調製する方法と同様の方法により、化合物48a(実施例69)及び化合物49a(実施例70)を調製した。化合物48aのEI-MS m/z: [M+H]+ 1353. 化合物49aのEI-MS m/z: [M+H]+ 1520.
化合物50kの調製
エチル4-ブロモブタノエート(5.0mL、34.6mmol)を窒素下室温でMeOH(75mL)に溶解し、次いで水(25mL)中のNaN3(4.5g、69.2mmol)をこれに加え、85℃で8時間撹拌した。反応完結後、溶媒を減圧下で濃縮し、クロロホルム(300mL)及び蒸留水(200mL)をこれに加えた。上記した通りに得られた有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50a(5.1g、94%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 4.15 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.36 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.41 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.94-1.89 (m, 2H), 1.28 (t, J = 8.4 Hz, 3H).
化合物50a(2.0g、12.7mmol)を窒素下0℃でMeOH(32mL)に溶解し、次いで水(26mL)中のKOH(3.56g、63.6mmol)をこれにゆっくり加えた。室温で6時間撹拌した後、溶媒を減圧下で濃縮し、クロロホルム(300mL)、1N HCl水溶液(100mL)及び蒸留水(100mL)をこれに加えた。上記した通りに得られた有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50b(1.28g、78%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 3.38 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.48 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.95-1.90 (m, 2H).
化合物50b(850mg、6.58mmol)を窒素下0℃でMeOH(10mL)に溶解し、次いで塩化オキサリル(1.1mL、13.2mmol)及びDMF(1滴)をこれに加え、室温で6時間撹拌した。反応完結後、溶媒を減圧下で濃縮して化合物50c(965mg)を得、これを更には精製せずに使用した。
4-ヒドロキシ-3-ニトロ安息香酸(5.0g、27.3mmol)を窒素下0℃でTHF(120mL)に溶解し、次いで1M BH3-THF錯体(54.6mL、54.6mmol)をこれに加え、室温で20時間撹拌した。反応完結後、EtOAc(200mL)、0.5N HCl水溶液(20mL)及び蒸留水(100mL)をこれに加えた。上記した通りに得られた有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50d(4.2g、91%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.06 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 1.2, 7.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.83 (s, 2H).
化合物50d(937mg、5.54mmol)を窒素下室温でMeCN(15mL)に溶解し、化合物M(2.0g、5.04mmol)、酸化銀(4.66g、20.1mmol)及び4Åモレキュラーシーブ(2.0g)をこれに加え、室温で14時間撹拌した。反応完結後、混合物をセライト濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50e(1.0g、40%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.81 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 1.8, 6.6 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.37-5.27 (m, 3H), 5.20 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.21 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.04-2.02 (m, 1H).
化合物50e(900mg、6.35mmol)をEtOAc(100mL)に溶解し、次いで酸化白金(IV)(84.2mg、0.370mmol)をこれに加え、水素下室温で3時間撹拌した。反応完結後、混合物をセライト濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、化合物50f(700mg、83%)を得、これを更には精製せずに使用した。
化合物50f(350mg、0.77mmol)を窒素下0℃でDCM(10mL)に溶解し、次いで化合物50c(136mg、0.92mmol)及びDIPEA(0.27mL、1.54mmol)をこれに加え、室温で20分間撹拌した。反応完結後、EtOAc(50mL)及び蒸留水(50mL)をこれに加えた。上記した通りに得られた有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50g(280mg、65%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.37 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.07 (dd, J = 1.8, 6.6 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.4Hz, 1H), 5.43-5.28 (m, 3H), 5.06 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.19 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.44-3.41 (m, 2H), 2.56 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.17-2.00 (m, 12H).
化合物50g(250mg、0.44mmol)を窒素下0℃でDMF(4mL)に溶解し、次いでビス(4-ニトロフェニル)カーボネート(270mg、0.88mmol)及びDIPEA(0.12mL、0.66mmol)をこれに加え、室温で1時間撹拌した。反応完結後、EtOAc(50mL)及び蒸留水(50mL)をこれに加えた。上記した通りに得られた有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50h(290mg、90%)を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.54 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.28-8.25 (m, 2H), 8.02 (s, 1H), 7.40-7.36 (m, 2H), 7.11 (dd, J = 1.8, 6.6 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.44-5.29 (m, 3H), 5.23 (s, 2H), 5.10 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.45-3.42 (m, 2H), 2.58 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.11-2.00 (m, 12H).
化合物50h(250mg、0.34mmol)を窒素下室温でDMF(4mL)に溶解し、次いでMMAF-OMe(255mg、0.34mmol)をこれに加えた。得られた混合物をHOBT(9mg、0.068mmol)、ピリジン(1.2mL)及びDIPEA(0.060mL、0.34mmol)で処理した。室温で2日間撹拌した後、EtOAc(50mL)、2N HCl水溶液(5mL)及び蒸留水(50mL)をこれに加えた。上記した通りに得られた有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50i(340mg、74%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1339.
化合物50i(210mg、0.156mmol)を窒素下0℃でMeOH(2mL)に溶解し、次いで水(2mL)中のLiOH・H2O(66mg、1.56mmol)をこれに加えた。室温で1.5時間撹拌した後、クロロホルム(50mL)、MeOH(5mL)、蒸留水(50mL)及び0.5N HCl水溶液(5mL)をこれに加えた。上記した通りに得られた有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50j(107mg、57%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1184.
化合物50j(10mg、0.008mmol)及びフェニルアセチレン(0.92μL、0.008mmol)を、窒素下室温でEtOH(0.15mL)及び水(10μL)に溶解し、次いで0.1M CuSO4水溶液(10μL)及び1.0Mアスコルビン酸ナトリウム水溶液(10μL)をこれに加えた。室温で5時間撹拌した後、EtOAc(10mL)及び蒸留水(5mL)をこれに加えた。上記した通りに得られた有機層を無水Na2SO4で脱水し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーに供して、化合物50k(5mg、46%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1286.
化合物51hの調製
実施例23の化合物14hを調製する方法と同様の方法により、化合物7bから化合物51aを調製した。EI-MS m/z: [M+H]+ 1392.8, [M+H-Boc]+ 1292.7, [M+Na]+ 1414.8.
化合物51a(1.8g、1.29mmol)、プロパルギルアミン(0.1mL、1.55mmol)及び無水HOBt(35mg、0.25mmol)を、0℃でDMF(5mL)に溶解した。次いでピリジン(0.2mL)及びDIPEA(0.45mL、2.59mmol)を加えた。N2下室温で24時間撹拌した後、反応混合物をH2O(100mL)及び飽和NH4Cl水溶液(50mL)で希釈した。EtOAc(2×100mL)で抽出した後、合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物51b(1.15g、68%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.01 (s, 1H), 7.48-7.31 (m, 2H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.45-5.20 (m, 4H), 5.09 (s, 2H), 4.19 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.10-4.05 (m, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.85-3.45 (m, 49H), 2.24 (s, 1H), 2.05 (s, 9H), 1.53 (s, 18H). EI-MS m/z: [M+Na]+ 1330.3.
化合物51b(1.15g、0.879mmol)のTHF/MeOH(20mL/20mL)中溶液に、0℃でH2O(20mL)中のLiOH一水和物(151mg、3.603mmol)を加えた。0℃で2時間後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をDMSO(5mL)に溶解し、分取HPLCにより精製して、化合物51c(600mg、60%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1169.2.
DIPEA(0.92mL、5.30mmol)及びHBTU(1.0g、2.64mmol)を、4-アジドブタン酸(228mg、1.76mmol)及びN-Me-Ala-OMe(298mg、1.94mmol)のDMF(10mL)中撹拌混合物に加えた。N2下室温で14時間撹拌した後、反応混合物をH2O(50mL)で希釈し、EtOAc(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物51d(310mg、77%)を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.22 (q, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.39 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.95 (s, 3H), 2.52-2.39 (m, 2H), 1.98-1.92 (m, 2H), 1.41 (d, 3H).
化合物51d(310mg、1.36mmol)のMeOH(3mL)中溶液に、-20℃でH2O(3mL)中のLiOH一水和物(114mg、2.72mmol)を加えた。0℃で1時間撹拌した後、反応混合物をH2O/2N HCl水溶液(50mL/2mL)で希釈し、Et2O(2×30mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水した。濾過し、濃縮して化合物51e(246mg)を得、これを更には精製せずに使用した。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.15 (q, 1H), 3.39 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.49-2.45 (m, 2H), 1.98-1.92 (m, 2H), 1.41 (d, 3H).
マイタンシノール(50mg、0.088mmol)及び化合物51e(113mg、0.528mmol)のDCM(6mL)中溶液に、N2下DIC(0.087mL、0.557mmol)のDCM(1.4mL)中溶液を加えた。1分後、ZnCl2の溶液(Et2O中1M、0.11mL、0.11mmol)を加えた。室温で2時間撹拌した後、反応混合物をEtOAc(10mL)で希釈した。有機層を飽和NaHCO3水溶液(4mL)及びブライン(2mL)で洗浄し、無水Na2SO4で脱水し、減圧下で蒸発させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、メイタンシノイド化合物のジアステレオマー混合物51f(50mg、74%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 761.7.
CuSO4 .5H2O(2mg)及びアスコルビン酸ナトリウム(10mg)を、化合物51f(78mg、0.102mmol)及び化合物51c(132mg、0.112mmol)のDMSO(4mL)及びH2O(1mL)中撹拌混合物に加えた。1M Na2CO3水溶液を加えることにより、pHを約7に調節した。20℃で1時間撹拌した後、反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、濃縮して、化合物51g(72.1mg、37%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1930.9, [M+H-Boc]+ 1830.9.
TFA(0.2mL)を、化合物51g(72.1mg、0.037mmol)のDCM(1mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で2時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をH2O/MeCN(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物51h(より極性の高い異性体17mg及びより極性の低い異性体6.0mg、36%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1730.8.
化合物52cの調製
タルトブリンエチルエステル(TFA塩、80mg、0.029mmol)、化合物14h(128mg、0.0142mmol)及び無水HOBt(3.5mg、0.026mmol)を、0℃でDMF(3mL)に溶解した。次いでピリジン(0.5mL)及びDIPEA(0.045mL、0.26mmol)を加えた。N2下室温で24時間撹拌した後、反応混合物をH2O(10mL)で希釈し、EtOAc(2×10mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物52a(70mg、43%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1258.6, [M+H-Boc]+ 1158.6.
化合物52a(70mg、0.055mmol)のMeOH(1.4mL)中溶液に、-20℃でH2O(1.4mL)中のLiOH一水和物(11.7mg、0.275mmol)を加えた。0℃で1時間後、溶液のpHを酢酸で4~5に調節した。得られた溶液をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物52b(4.5mg、8%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1090.4.
化合物52b(4.5mg、0.0041mmol)のDCM(1mL)中溶液に、0℃でTFA(0.2mL)を加えた。0℃で2時間後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をHPLCにより精製して、化合物52c(2.4mg、59%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 990.4.
化合物53fの調製
化合物53a(300mg、0.31mmol、化合物53aは特許WO2013/055987A1に開示されている方法により調製した)、化合物15a(355mg、0.31mmol)及び無水HOBt(10mg、0.06mmol)を、0℃でDMF(0.5mL)に溶解した。次いでピリジン(0.3mL)及びDIPEA(0.14mL、0.78mmol)を加えた。N2下室温で23時間撹拌した後、反応混合物をH2O/飽和NH4Cl水溶液(100mL/50mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物53b(250mg、41%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1943.6, [M+Na]+ 1965.6.
化合物53b(300mg、0.31mmol)のTHF/H2O(2mL/1mL)中溶液に、N2下0℃で酢酸(3mL)を加えた。22時間後、反応混合物をH2O(100mL)で希釈し、EtOAc(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で脱水し、濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物53c(140mg、68%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1713.6.
化合物53c(120mg、0.07mmol)のDCM(10mL)中溶液に、N2下室温でピリジニウムクロロクロメート(158mg、0.42mmol)及び4Åモレキュラーシーブ(50mg)を加えた。18時間撹拌した後、反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、減圧下で濃縮した。得られた化合物53d(95mg、75%)を無色油状物として得、これを更には精製せずに使用した。EI-MS m/z: [M+Na]+ 1732.8.
化合物53d(95mg、0.056mmol)のMeOH(1mL)中溶液に、0℃でH2O(1mL)中のLiOH一水和物(12mg、0.278mmol)を加えた。0℃で2時間後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をDMSO(1mL)に溶解し、分取HPLCにより精製して、化合物53e(6mg、7%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1569.7.
TFA(0.2mL)を、化合物53e(6mg、0.004mmol)のDCM(2mL)中撹拌溶液に加えた。0℃で2時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をDMSO(1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物53f(2.7mg、53%)を白色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1251.3.
化合物54aの調製
化合物55aの調製
化合物56dの調製
化合物56a(HCl塩、100mg、0.27mmol、化合物56aはCurr.Med.Chem.2009、16、1192-1213に開示されている方法により調製した。)、化合物14h(242mg、0.27mmol)及び無水HOBt(7.3mg、0.05mmol)を、0℃でDMF(3mL)に溶解した。次いでピリジン(0.4mL)及びDIPEA(0.09mL、0.60mmol)を加えた。N2下室温で16時間撹拌した後、反応混合物を飽和NH4Cl水溶液(10mL)で希釈し、EtOAc(2×20mL)で抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物56b(184mg、63%)を得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 1091.9, [M+H-Boc]+ 991.7.
化合物56b(90mg、0.08mmol)のMeOH(2mL)中溶液に、-20℃でH2O(2mL)中のLiOH一水和物(17mg、0.41mmol)を加えた。-20℃で2時間撹拌した後、反応混合物を酢酸を用いて中和し、減圧下で濃縮した。次いで反応混合物をH2O/DMSO(1.5mL/1.5mL)に溶解し、HPLCにより精製して、化合物56c(35mg、45%)を黄色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 951.7, [M+H-Boc]+851.5.
TFA(0.3mL)を、0℃で化合物56c(35mg、0.04mmol)のDCM(2.0mL)中撹拌溶液に加えた。1時間撹拌した後、溶媒及び過剰のTFAをN2流により除去した。次いで残留物をH2O/MeCN(1mL/1mL)に溶解し、HPLCにより精製した。同一の保持時間を有する純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥して、化合物56d(24.9mg、68%)を黄色固体として得た。EI-MS m/z: [M+H]+ 851.6.
化合物57aの調製
ADC2合成
ADC2合成
ADC86合成
ADC86合成
ADC4合成
ADC4合成
ADC75合成
ADC75合成
β-グルクロニダーゼに対する、実施例66の化合物45k及び比較例66の化合物50kの反応性を互いに比較するために、比較試験を以下のように行った。
実施例66の化合物45k及び比較例66の化合物50kの血漿安定性を比較した。
ステップ1.プレニル化抗体の方法(韓国特許出願公開公報第10-2014-0035393号の方法に従って調製した)
抗体のプレニル化反応混合物を調製し、30℃にて16時間反応させた。各軽鎖のc-末端に付加されているGGGGGGGCVIM配列(「G7CVIM」)を含む抗体を使用した。G7CVIM配列を、重鎖(ADC86-91)、又は重鎖及び軽鎖(ADC75-77)の両方のC-末端に付加した。使用される抗体の配列の供給源は、以下の表2と同様である。
プレニル化抗体とリンカー-毒素の間におけるオキシム結合形成反応混合物は、100mM Na-酢酸緩衝液(pH4.5、10%DMSO)、12μMプレニル化抗体及び120μMリンカー-毒素(所内)を混合することにより調製し、30℃にて静かに撹拌した。反応を24時間インキュベートした後で、FPLC及び疎水性相互作用クロマトグラフィー-HPLCで脱塩することにより、抗体-薬物複合体を精製した。
市販のヒト乳がん細胞株MCF-7(HER2陰性から正常)、OE-19 (HER2陽性)、NCI-N87 (HER2陽性)、SK-OV-3 (HER2陽性)、JIMT-1(HER2陽性)及びSK-BR-3(HER2陽性)を使用した。細胞株を、市販の細胞株で示されている推奨仕様に従って培養した。
高レベルのEGFRを発現するA431細胞、及び、低レベルのEGFRを発現するMCF-7細胞を、96ウェルプレート中のウェル当たり細胞約1000個で、100μLの培地に播種した。中レベルのEGFRを発現するHCC-827細胞を、96ウェルプレート中のウェル当たり細胞約5000個で、100μLの培地に播種した。細胞を、5%CO2中で37℃にて24時間インキュベートした。次いで、モノメチルオーリスタチンF-OMe(MMAF-OMe)、Erbitux(LC)-G7CVIM、並びに、Erbitux (LC)-G7CVIM及びMMAFを含む抗体薬物複合体ADC64の系列希釈物を、100から0.00128nMの濃度で細胞に添加した。細胞を72時間インキュベートし、次いで、100μLの氷冷10%トリクロロ酢酸を各ウェルに添加した後で、4℃にて1時間固定した。SRB色素(スルホローダミンB、Sigma S1402)、及び、Softmax Pro v5を実行するMolecular Devices SpectraMax 190プレートリーダーを使用して540nmで吸光度をモニタリングし、生存能力のある細胞を計数した(表14)。
Samsung Medical Center (Seoul、Republic of Korea)で樹立された患者由来細胞株に対して、ABT-806をベースとしたADCの細胞毒性を試験した。L-グルタミン(200nM)、bFGF(20ng/mL)、EGF(20ng/mL)、N2サプリメント及びB27サプリメントを補充したNeurobasal(登録商標)-A Media(Thermo Fisher Scientific)で細胞を維持した。生存能力試験に関しては、細胞を96ウェルプレートにアリコート(細胞5000個/ウェル)し、処置前に、5%CO2中で、37℃にて1日間インキュベートした。ADC処理後、細胞を72時間インキュベートした。100μLのCellTiter-Glo(登録商標)試薬(Promega)を各ウェルに添加して、細胞の生存能力を分析した。10分のインキュベーション後、Luminometerを使用して蛍光シグナルを分析した。
ヒトバーキットリンパ腫細胞であるRamos細胞を、100μLの増殖培地中に細胞20,000個/ウェルで、96ウェルプレートにシードした。細胞を、5%CO2中で、37℃にて1日間インキュベートした。100μL培地中の抗CD19抗体DI-B4-(LC)-G7CVIM及びADCの系列希釈物33.33nMから5.1pMをウェルに添加し、細胞を、抗体&ADCと72時間インキュベートした。WST-1(TaKaRa MK400)、及びSoftmax Pro v5を実行するMolecular Devices SpectraMax 190プレートリーダーを使用して450nmで吸光度をモニタリングし、細胞の生存能力を評価した(表16)。
ヒトバーキットリンパ腫細胞であるRamos細胞を、100μLの増殖培地中に細胞20,000個/ウェルで、96ウェルプレートにシードした。細胞を、5%CO2中で、37℃にて1日間インキュベートした。100μL培地中のRituxan (LC)-G7CVIM及びADCの系列希釈物33.33nMから5.1pMを、ウェルに添加し、細胞を、抗体&ADCと72時間インキュベートした。WST-1(TaKaRa MK400)、及びSoftmax Pro v5を実行するMolecular Devices SpectraMax 190プレートリーダーを使用して450nMで吸光度をモニタリングし、細胞の生存能力を評価した(表17)。
0.06M Na-酢酸緩衝液(pH5.2)中のADCを、1.5 mLマイクロチューブ中にアリコートした。混合物中でADCの最終濃度を12μMに調整した。0.001μgのヒトβ-グルクロニダーゼ(R&D systems:6144-GH-020)を各チューブに添加した。次いで、混合物を37℃の水浴で3時間インキュベートした。冷PBS緩衝液(pH7.4)を15倍に希釈されるまで添加することにより反応を終了させた。ベータ-グルクロニダーゼによるADC-パターンの変化をHIC-HPLCにより分析した。酵素活性の効き目を残りの%で視覚化した(図10)。
ADC2(Herceptin-LBG-MMAF、DAR2)とカドサイラの間における血漿安定性を比較するために、こうしたADCをマウス及びヒト血漿中で5秒間(0時間)又は96時間(96時間)インキュベートし、続いてSK-BR3細胞を使用してSRB in vitro細胞毒性試験を72時間行った。血漿-インキュベートしたADC2は、強力な細胞毒性を保つ(IC50に変化なし;MPに対して0.06(0時間)及び0.07nM(96時間)、HPに対して0.08(0時間)及び0.08nM(96時間))一方、血漿-インキュベートしたカドサイラは、0時間カドサイラと比較して、低下した細胞毒性を表した(IC50上昇;MPに対して0.26(0時間)及び1.59nM(96時間)、HPに対して0.29(0時間)及び4.21nM(96時間))(図11)。様々な抗体でできているADCの血漿安定性を特徴付けるために、ADCをヒト血漿中で5秒間(0時間)又は168時間(168時間)インキュベートし、続いてSK-BR3細胞を使用してSRB in vitro細胞毒性試験を72時間行った(表18~20及び図12)。
オスSprague Dawleyラットに、3mg/kgの抗体又は抗体-薬物複合体を静脈内投与した。投与の後で、血液試料を複数の時点において採取し、氷水で冷やし、血漿を単離した。後続のLC/MS/MS分析まで、血漿を-80℃にて冷凍した。
ADCのPKプロファイルに影響を与える重大な特質を特定するために、異なる長さ及び構造の接続ユニット(PEG数及び配置)を試験した。PK分析のための実験は、実験例9に記載されているように行った。ADC23(DAR4 ADC)は、in vitro及びin vivoでDAR2 ADCより強力な効き目を有していたが、PKプロファイルは、半減期及びAUCで低下した(図14)。リンカー-毒素を16fから25fに置き換える(追加の接続ユニット(3 PEG)を分岐ユニット(BR)の後に結合させる)ことにより、PKプロファイルは、Herceptinのものと同じ程度に回復した(図14)。こうした効果は、MMAEをベースとしたADC、ADC24及びADC33で正しく再現された(図15)。MMAEは、MMAFよりも疎水性であるため、MMAEをベースとしたADCは、ADC1及びADC24により示されているPKプロファイルで悪化した。長いPEGユニットを付加することは、半減期及びAUCを伸ばすための従来からの応用であった。しかし、ADC1とADC5を比較すると、PEGユニット数を3から12へと伸ばすだけでは、大きな差は示されなかった。一方、直鎖状リンカーユニット(化合物2g又は4f)を、分岐したもの(化合物11j、ADC15)に置き換えることにより、PKプロファイルは著しく改善され(図16)、PKに対する重大な特質は、単純な長さだけではなく、接続ユニットの構造であり得ることが指し示された。
ADCに使用される多くのペイロードは、疎水性を有し、PK特性は不十分となる。疎水性を相殺するために、親水性化合物を接続ユニットの一部として試験した。親水性化合物、例えばAspを挿入することにより、ADCのAUC及び半減期が向上した(図17、18、19)。DAR2のケースでは、Aspを含む接続ユニットを有するADCは、Herceptinより高いAUCを示した(図17、18)。極性アミノ酸、例えばAsp又はGluによる相殺効果は、DAR4を有するADCで観察できる(図19、20)。ADC49(2 Asp)及びADC52(2 D-Glu)は、AUC及び半減期に関して、ADC47(1 Asp)及びADC51(1D-Glu)よりそれぞれ優れている。
冷凍JIMT-1細胞ストックを解凍し、37℃、5%CO2の条件下で培養した。生存能力が95%を超える最適な状態のJIMT-1細胞を、埋め込みに使用した。50μL冷生理食塩水中で懸濁した5×106個の細胞を、balb/c-ヌードマウスの右後肢中に埋め込んだ。群当たり5匹のマウスを実験に使用した。腫瘍の形成及び増殖を周期的にモニターした。式;体積=(a2b)/2、「a」は、短い直径を意味し、「b」は、長い直径を意味する、により腫瘍体積を計算した。
本明細書に記載される特許、公表特許出願及び非特許参考文献のそれぞれは、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
当業者は、日常的実験を使用するだけで、本明細書に記載されている本発明の特定の実施形態の多くの等価物を認識すると考えられる、又は確かめることができる。そのような等価物は、添付する特許請求の範囲に包含されるよう意図されている。
本発明の実施形態として例えば以下を挙げることができる。
[実施形態1]
リガンド、及びリガンドに共有結合で連結する1つ以上の分岐リンカーを含むリガンド-薬物複合体であって、
i)各分岐リンカーが、一次リンカー(PL)によりリガンドに共有結合で連結する分岐ユニット(BR)を含み、
ii)各分岐リンカーが、第1の分岐(B1)を含み、第1の活性剤が、二次リンカー(SL)及び切断基(CG)により分岐ユニットに共有結合で連結し、
iii)各分岐リンカーが、第2の分岐(B2)をさらに含み、a)第2の活性剤が、二次リンカー(SL)及び切断基(CG)により分岐ユニットに共有結合で連結し、又はb)ポリエチレングリコール部分が、分岐ユニットに共有結合で連結し、
各切断基が、リガンド-薬物複合体から活性剤を放出するように、加水分解することができる、上記リガンド-薬物複合体。
[実施形態2]
切断基が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、Wが、分岐ユニットに直接的又は間接的に連結し、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
mが0又は1、好ましくは1であり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態1に記載の複合体。
[実施形態3]
活性剤が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Bが、活性剤に共有結合しているユニットであり、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数、好ましくは3であり、
Lが、リンカー又は分岐ユニットへの結合を表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態1に記載の複合体。
[実施形態4]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくはアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態2又は3に記載の複合体。
[実施形態5]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態4に記載の複合体。
[実施形態6]
Gが、
R 3 が、水素又はカルボキシル保護基であり、
各R 4 が、独立して、水素又はヒドロキシル保護基である、
先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態7]
少なくとも1つの一次又は二次リンカーが、構造-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q -、-((CH 2 ) p V) q -、-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q Y-、-((CH 2 ) p V) q (CH 2 ) r -、-Y(((CH 2 ) p V) q -又は-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q YCH 2 -を有し、
式中:
rが0から10の整数であり、
pが1から10の整数であり、
qが1から20の整数であり、
V及びYが、それぞれ独立して、単結合、-O-、-S-、-NR 21 -、-C(O)NR 22 -、-NR 23 C(O)-、-NR 24 SO 2 -又は-SO 2 NR 25 -であり、
R 21 からR 25 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリールである、先行する実施形態のいずれかに記載のリガンド-薬物複合体。
[実施形態8]
少なくとも1個の分岐ユニットが、構造
G 1 、G 2 、G 3 が、それぞれ独立して、直接結合、
式中、R 3 が、水素又はC 1 ~C 30 アルキルであり、
R 4 が、水素又は-L 4 -COOR 5 であり、L 4 が、直接結合又は-C n H 2n -であり、nが、1から10の整数であり、R 5 が、水素又はC 1 ~C 30 アルキルである、先行する実施形態のいずれかに記載のリガンド-薬物複合体。
[実施形態9]
リガンド、リンカー、及び活性剤を含み、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖を表し、
Aがリガンドを表し、
Bが活性剤を表し、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数、好ましくは3であり、
mが0又は1、好ましくは1であり、
Lが、少なくとも1個の分岐ユニット(BR)及び少なくとも1つの一次リンカー(PL)を含むリンカーであり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、先行する実施形態のいずれかに記載のリガンド-薬物複合体。
[実施形態10]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくはアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態9に記載の複合体。
[実施形態11]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態10に記載の複合体。
[実施形態12]
リガンド;リガンドに共有結合で連結する少なくとも1つの分岐リンカーであって、一次リンカーによりリガンドに共有結合で連結する分岐ユニットを含む分岐リンカー;第1の分岐により分岐ユニットに共有結合で連結する活性剤;及び、分岐ユニットに共有結合で連結するポリエチレングリコール部分を含む第2の分岐を含む、リガンド-薬物複合体。
[実施形態13]
リガンドが抗体である、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態14]
少なくとも2つの分岐リンカーが、リガンドに連結し、各分岐リンカーが、ちょうど1つの活性剤に連結する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態15]
3つの分岐リンカーがリガンドに連結する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態16]
4つの分岐リンカーがリガンドに連結する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態17]
ちょうど1つの分岐リンカーがリガンドに連結する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態18]
各分岐リンカーがちょうど1つの活性剤に連結する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態19]
活性剤が、切断(例えば、加水分解性)結合により、第1の分岐に連結する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態20]
少なくとも2つの異なる活性剤が、異なる分岐リンカーに連結する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態21]
分岐ユニットが、例えば、アミン又はアミドの窒素原子である、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態22]
分岐ユニットがアミドであり、一次リンカーがアミドのカルボニルを含む、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態23]
分岐ユニットがアミドであり、第1の分岐又は第2の分岐がアミドのカルボニルを含む、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態24]
分岐ユニットがリシンユニットである、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態25]
活性剤が、式:
Gが、糖又は糖酸、好ましくはグルクロン酸を表し、
Bが活性剤を表し、
Wが、電子求引性基、好ましくは-C(O)NR'-を表し、C(O)がフェニル環に結合しており、NR'(アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸のアミノ基であってよい)が、Lに結合しており、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
Lが、リガンドへのつながりを表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態26]
活性剤が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、Wが、分岐ユニットに直接的又は間接的に連結し、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
mが0又は1、好ましくは1であり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態12から24のいずれかに記載の複合体。
[実施形態27]
活性剤が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Bが、活性剤に共有結合しているユニットであり、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数、好ましくは3であり、
Lが、リンカー又は分岐ユニットへの結合を表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態12から24のいずれかに記載の複合体。
[実施形態28]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくはアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態25から27のいずれかに記載の複合体。
[実施形態29]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態28に記載の複合体。
[実施形態30]
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-であり、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールである、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態31]
Wが、-C(O)NR'-を表し、Wの窒素が、アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸の窒素である、実施形態25から30に記載の複合体。
[実施形態32]
Wが-C(O)NR'-であり、C(O)がフェニル環に結合しており、NR'がLに結合している、実施形態31に記載の複合体。
[実施形態33]
糖又は糖酸が単糖である、実施形態25から32のいずれかに記載の複合体。
[実施形態34]
Gが、
R 3 が、水素又はカルボキシル保護基であり、
各R 4 が、独立して、水素又はヒドロキシル保護基である、
先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態35]
R 3 が水素であり、各R 4 が水素である、実施形態34に記載の複合体。
[実施形態36]
各Zが水素を表し、nは3である、実施形態25から35のいずれかに記載の複合体。
[実施形態37]
Gがグルクロン酸であり、
Wが-C(O)NR'-であり、C(O)がフェニル環に結合しており、NR'がLに結合しており、
Zが水素を表し、
nが3であり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ、水素を表す、
実施形態25から36のいずれかに記載の複合体。
[実施形態38]
一次リンカーが、1から100個、好ましくは1から50個の炭素原子を有するアルキレンを含み、また:
アルキレンが、少なくとも1つの不飽和結合を含み;
アルキレンが、少なくとも1つのヘテロアリーレンを含み;
アルキレンの炭素原子が、窒素(N)、酸素(O)及び硫黄(S)から選択される1個以上のヘテロ原子により置き換えられ;又は
アルキレンが、1から20個の炭素原子を有する1つ以上のアルキルでさらに置換されている、
先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態39]
アルキレンの少なくとも1個の炭素原子が、窒素により置き換えられ、一次リンカーが、親水性アミノ酸の少なくとも2個の原子を含み、窒素が、親水性アミノ酸の骨格カルボニルとペプチド結合を形成する、実施形態38に記載の複合体。
[実施形態40]
少なくとも1個の分岐ユニットが親水性アミノ酸である、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態41]
親水性アミノ酸が、アルギニン、アスパルテート、アスパラギン、グルタメート、グルタミン、ヒスチジン、リシン、オルニチン、プロリン、セリン又はトレオニンである、実施形態39又は40に記載の複合体。
[実施形態42]
一次リンカーが、アミノ酸を含み、アミノ酸が、水溶液中で、中性pHにおいて電荷を持つ部分を有する側鎖を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態43]
アミノ酸が、アルギニン、アスパルテート、グルタメート、リシン又はオルニチンである、実施形態42に記載の複合体。
[実施形態44]
アミノ酸がアスパルテートである、実施形態42に記載の複合体。
[実施形態45]
アミノ酸がグルタメートである、実施形態42に記載の複合体。
[実施形態46]
アミノ酸がセリンである、実施形態42に記載の複合体。
[実施形態47]
アミノ酸がリシンである、実施形態42に記載の複合体。
[実施形態48]
アミノ酸がアルギニンである、実施形態42に記載の複合体。
[実施形態49]
アミノ酸が、分岐リンカーのオキシムを分岐リンカーのポリエチレングリコールユニットに共有結合でつなげる、実施形態42から48のいずれかに記載の複合体。
[実施形態50]
アミノ酸が、第1の分岐に存在する、実施形態40から49のいずれかに記載の複合体。
[実施形態51]
一次リンカーが、チオエーテル結合によりリガンドに共有結合しており、チオエーテル結合が、リガンドのシステインの硫黄原子を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態52]
リガンドが、イソプレノイド転移酵素により認識されるC-末端アミノ酸モチーフを含み、
チオエーテル結合が、アミノ酸モチーフのシステインの硫黄原子を含む、実施形態51に記載の複合体。
[実施形態53]
アミノ酸モチーフが、配列CYYXであり、
Cがシステインを表し、
Yが、それぞれの発生に対して独立して、脂肪族アミノ酸を表し、
Xが、それぞれの発生に対して独立して、グルタミン、グルタメート、セリン、システイン、メチオニン、アラニン又はロイシンを表し、
チオエーテル結合が、アミノ酸モチーフのシステインの硫黄原子を含む、実施形態52に記載の複合体。
[実施形態54]
アミノ酸モチーフが配列CYYXであり、
Yが、それぞれの発生に対して独立して、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン又はバリンを表す、実施形態52又は53に記載の複合体。
[実施形態55]
アミノ酸モチーフが、配列CVIM又はCVLLである、実施形態54に記載の複合体。
[実施形態56]
アミノ酸モチーフに先行するアミノ酸7個の少なくとも1個がグリシンである、実施形態52から55のいずれかに記載の複合体。
[実施形態57]
アミノ酸モチーフに先行するアミノ酸7個の少なくとも3個が、それぞれ独立して、グリシン及びプロリンから選択される、実施形態56に記載の複合体。
[実施形態58]
アミノ酸モチーフに先行するアミノ酸7個の少なくとも3個が、それぞれ独立して、グリシン、アルギニン、アスパルテート及びセリンから選択される、実施形態56に記載の複合体。
[実施形態59]
アミノ酸モチーフに先行するアミノ酸1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個又は10個のそれぞれが、グリシンである、実施形態57に記載の複合体。
[実施形態60]
アミノ酸モチーフに直接先行するアミノ酸1から10個が、グリシンであり、好ましくは、アミノ酸モチーフに直接先行するアミノ酸の少なくとも1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個又は10個が、グリシンである、実施形態58に記載の複合体。
[実施形態61]
リガンドのC-末端が、アミノ酸配列GGGGGGGCVIMを含む、実施形態59に記載の複合体。
[実施形態62]
チオエーテル結合が、
[実施形態63]
少なくとも1個のイソプレニルユニットが、イソプレノイド転移酵素に対する基質である、又はその生成物である、実施形態62に記載の複合体。
[実施形態64]
nが少なくとも2である、実施形態62又は63に記載の複合体。
[実施形態65]
一次リンカーが、オキシムを含み、少なくとも1個のイソプレニルユニットが、オキシムをリガンドに共有結合でつなげる、実施形態62から64のいずれかに記載の複合体。
[実施形態66]
リンカーが:
[実施形態67]
リンカーが:
[実施形態68]
リンカーが:
[実施形態69]
一次リンカー及び/又は第1の分岐が、
[実施形態70]
リンカーが、1から20個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、実施形態69に記載の複合体。
[実施形態71]
リンカーが、4から20個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、実施形態69に記載の複合体。
[実施形態72]
リンカーが、1から19個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、実施形態69に記載の複合体。
[実施形態73]
リンカーが、3から12個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、実施形態69に記載の複合体。
[実施形態74]
一次リンカー、第1の分岐又はその両方が、-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q -により表される接続ユニットを含み:
式中:
rが1から10の整数、好ましくは2であり、
pが0から12の整数、好ましくは2であり、
qが1から20の整数であり、
Vが、単結合、-O-、-S-、-NR 21 -、-C(O)NR 22 -、-NR 23 C(O)-、-NR 24 SO 2 -又は-SO 2 NR 25 -、好ましくは-O-であり、
R 21 からR 25 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリールである、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態75]
qが1から10の整数である、実施形態74に記載の複合体。
[実施形態76]
一次リンカー、第1の分岐又はその両方が、-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q -、-((CH 2 ) p V) q -、-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q Y-、-((CH 2 ) p V) q (CH 2 ) r -、-Y(((CH 2 ) p V) q -又は-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q YCH 2 -により表される接続ユニットを含み、
式中:
rが0から10の整数であり、
pが1から10の整数であり、
qが1から20の整数であり、
V及びYが、それぞれ独立して、単結合、-O-、-S-、-NR 21 -、-C(O)NR 22 -、-NR 23 C(O)-、-NR 24 SO 2 -又は-SO 2 NR 25 -であり、
R 21 からR 25 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリールである、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態77]
rが2である、実施形態74から76のいずれかに記載の複合体。
[実施形態78]
pが2である、実施形態74から77のいずれかに記載の複合体。
[実施形態79]
qが6から20の整数である、実施形態74から78のいずれかに記載の複合体。
[実施形態80]
qが2、5又は11である、実施形態74から78のいずれかに記載の複合体。
[実施形態81]
V及びYが、それぞれ独立して、-O-である、実施形態76から80のいずれかに記載の複合体。
[実施形態82]
rが2であり、
pが2であり、
qが2、5又は11であり、
Vが-O-である、実施形態74又は76に記載の複合体。
[実施形態83]
少なくとも1個の分岐ユニットが、
G 1 、G 2 、G 3 が、それぞれ独立して、直接結合、
R 4 が、水素又は-L 4 -COOR 5 であり、L 4 が、直接結合又は-C n H 2n -であり、nが、1から10の整数であり、R 5 が、水素又はC 1 ~C 30 アルキルである、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態84]
一次リンカー、第1の分岐又はその両方が、-(CH 2 CH 2 X) w -により表される接続ユニットを含み、式中:
Xが、-O-、(C 1 ~C 8 )アルキレン又は-NR 21 -、好ましくは-O-を表し、
R 21 が、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール、好ましくは水素を表し、
wが、1から12の整数、好ましくは1、3、6又は12である、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態85]
Xが-O-であり、wが6から12の整数である、実施形態84に記載の複合体。
[実施形態86]
一次リンカーが、1,3-双極子環状付加反応、ヘテロ-ディールス-アルダー反応、求核置換反応、非アルドール型カルボニル反応、炭素-炭素多重結合への付加、酸化反応又はクリック反応により形成される結合ユニットを含む、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態87]
結合ユニットが、アセチレンとアジドの間の反応、又はアルデヒド若しくはケトン基とヒドラジン若しくはアルコキシアミンの間の反応により形成される、実施形態86に記載の複合体。
[実施形態88]
結合ユニットが、式A、B、C又はDのいずれか1つ、好ましくはD:
L 1 が、単結合、又は1から30個、好ましくは12個の炭素原子を有するアルキレンであり、
R 11 が、水素、又は1から10個の炭素原子を有するアルキル、好ましくはメチルであり、 L 2 が、1から30個、好ましくは11個の炭素原子を有するアルキレンである、実施形態86に記載の複合体。
[実施形態89]
L 1 が、12個の炭素原子を有するアルキレンである、実施形態88に記載の複合体。
[実施形態90]
R 11 がメチルである、実施形態88に記載の複合体。
[実施形態91]
L 2 が11個の炭素原子を有するアルキレンである、実施形態88又は90に記載の複合体。
[実施形態92]
一次リンカーが、
Vが、単結合、-O-、-S-、-NR 21 -、-C(O)NR 22 -、-NR 23 C(O)-、-NR 24 SO 2 -又は-SO 2 NR 25 -、好ましくは-O-であり、
R 21 からR 25 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリールであり、
rが1から10の整数、好ましくは2又は3であり、
pが0から10の整数、好ましくは1又は2であり、
qが1から20、好ましくは1から6の整数であり、
L 1 が単結合である、実施形態88に記載の複合体。
[実施形態93]
一次リンカーがO-置換オキシムを含み、
a)オキシムの酸素原子が、オキシムを活性剤に共有結合でつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子が、オキシムをリガンドに共有結合でつなげる基で置換されている、又は
b)オキシムの酸素原子が、オキシムをリガンドに共有結合でつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子が、オキシムを活性剤に共有結合でつなげる基で置換されている、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態94]
構造:
Bが活性剤を表し、
xが1から3の整数を表し、
yが0から20の整数を表し、
zが1から20の整数を表し、
Lが、リガンドへのつながりを表す、実施形態93に記載の複合体。
[実施形態95]
y及びzが、独立して、2から20の整数を表す、実施形態94に記載の複合体。
[実施形態96]
y及びzが、独立して、1から20、好ましくは3から12の整数を表す、実施形態94に記載の複合体。
[実施形態97]
一次リンカー及び/又は第1の分岐が、1から20個の-OCH 2 CH 2 -ユニット、好ましくは4から20個の-OCH 2 CH 2 -ユニット、最も好ましくは3から12個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、少なくとも1つのポリエチレングリコール部分を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態98]
ポリエチレングリコール部分が、ヒドロキシル部分、アミノ基又はアルキルエーテルで終了する、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態99]
リガンドが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab') 2 、Fv、一本鎖Fv(「scFv」)、二特異性抗体、直鎖状抗体、二重特異性抗体、多重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体又は抗体の抗原結合性部分を含む融合タンパク質である、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態100]
リガンドが、ムロモナブ-CD3 アブシキシマブ、リツキシマブ、ダクリズマブ、パリビズマブ、インフリキシマブ、トラスツズマブ、エタネルセプト、バシリキシマブ、ゲムツズマブ、アレムツズマブ、イブリツモマブ、アダリムマブ、アレファセプト、オマリズマブ、エファリズマブ、トシツモマブ、セツキシマブ、ABT-806、ベバシズマブ、ナタリズマブ、ラニビズマブ、パニツムマブ、エクリズマブ、リロナセプト、セルトリズマブ、ロミプロスチム、AMG-531、ゴリムマブ、ウステキヌマブ、ABT-874、ベラタセプト、ベリムマブ、アタシセプト、抗CD20抗体、カナキヌマブ、トシリズマブ、アトリズマブ、メポリズマブ、ペルツズマブ、HuMax CD20、トレメリムマブ、チシリムマブ、イピリムマブ、IDEC-114、イノツズマブ、HuMax EGFR、アフリベルセプト、HuMax-CD4、テプリズマブ、オテリキシズマブ、カツマキソマブ、抗EpCAM抗体IGN101、アデカツムマブ、オレゴボマブ、ジヌツキシマブ、ギレンツキシマブ、デノスマブ、バピネウズマブ、モタビズマブ、エファングマブ、ラキシバクマブ、LY2469298及びベルツズマブから選択される、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態101]
少なくとも1つの活性剤が、化学療法剤及び毒素から選択される、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態102]
少なくとも1つの活性剤が:
(a)エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、PTK787/ZK 222584、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、AG1478、AG1571、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファン、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、ウレドーパ、エチレンイミン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、トリメチロールメラミン、ブラタシン、ブラタシノン、カンプトテシン、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、CC-1065、アドゼレシン、カルゼルシン、ビゼレシン、クリプトフィシン1、クリプトフィシン8、ドラスタチン、デュオカルマイシン、KW-2189、CB1-TM1、エリュテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン、スポンジスタチン、クロランブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、カリケアミシン、カリケアミシンガンマ1、カリケアミシンオメガ1、ジネミシン、ジネミシンA、クロドロネート、エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アンチマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルニノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルブシン、6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、2-ピロリノ-ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンC、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ぺプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、5-フルオロウラシル、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート、フルダラビン、6-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、アンシタビン、アザシチジン、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フォリン酸、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトレキサート、デフォファミン、デメコルシン、ジアジコン、エフロルニチン、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダイニン、メイタンシン、アンサミトシン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンモール、ニトラリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、2-エチルヒドラジド、プロカルバジン、ポリサッカリド-k、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、2,2',2''-トリクロロトリエチルアミン、T-2毒素、ベラキュリンA、ロリジンA及びアングイジン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルのアルブミン改変ナノ粒子製剤、ドセタキセル、クロランブシル、ゲムシタビン、6-チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン、テニポシド、エダトレキサート、ダウノマイシン、アミノプテリン、ゼローダ、イバンドロネート、CPT-11、トポイソメラーゼ阻害剤RFS2000、ジフルオロメチルオルニチン、レチノイン酸、カペシタビン又は先述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物又は酸、
(b)モノカイン、リンフォカイン、従来からのポリペプチドホルモン、上皮小体ホルモン、チロキシン、リラキシン、プロリラキシン、糖タンパク質ホルモン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、肝細胞増殖因子、線維芽細胞増殖因子、プロラクチン、胎盤性ラクトゲン、腫瘍壊死因子-α、腫瘍壊死因子-β、ミュラー管阻害物質、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮増殖因子、トロンボポエチン、エリスロポエチン、骨誘導因子、インターフェロン、インターフェロン-α、インターフェロン-β、インターフェロン-γ、コロニー刺激因子(「CSF」)、マクロファージ-CSF、顆粒球-マクロファージ-CSF、顆粒球-CSF、インターロイキン(「IL」)、IL-1、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、腫瘍壊死因子、TNF-α、TNF-β、ポリペプチド因子、LIF、kitリガンド又は先述のいずれかの組合せ、
(c)ジフテリア毒素、ボツリヌス毒素、破傷風毒素、赤痢毒素、コレラ毒素、アマニチン、アマニチン誘導体、α-アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、テトロドトキシン、ブレベトキシン、シガトキシン、リシン、AM毒素、チューブリシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、カリケアミシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキサート、ビンデシン、SG2285、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、オーリスタチン、クリプトフィシン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体及び代謝産物、リゾキシン、リゾキシン誘導体、CC-1065、CC-1065類似体若しくは誘導体、デュオカルマイシン、エンジイン抗生物質、エスペラミシン、エポチロン、アゾナフィド、アプリジン、トキソイド又は先述のいずれかの組合せ、
(d)親和性リガンドであって、基質、阻害剤、刺激剤、神経伝達物質、放射性同位体又は先述のいずれかの組合せである、親和性リガンド、
(e)放射性標識、 32 P、 35 S、蛍光色素、電子密度試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に相補的な配列を有する核酸分子、又は先述のいずれかの組合せ、
(f)免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、抗菌剤及び抗寄生虫剤又は先述のいずれかの組合せ、
(g)タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、LY117018、オナプリストン又はトレミフェン、
(h)4(5)-イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール又はアナストロゾール、
(i)フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン又はトロキサシタビン、
(j)アロマターゼ阻害剤、
(k)タンパク質キナーゼ阻害剤、
(l)脂質キナーゼ阻害剤、
(m)アンチセンスオリゴヌクレオチド、
(n)リボザイム、
(o)ワクチン、並びに
(p)抗血管形成剤
から選択される、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態103]
少なくとも1つの活性剤がタルトブリンである、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態104]
少なくとも1つの活性剤がアゾナフィドである、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態105]
少なくとも1つの活性剤が、アマニチン、オーリスタチン、カリケアミシン、カンプトテシン、クリプトフィシン、ダウノマイシン、ドラスタチン、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、エポチロン、エスペラミシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、メトトレキサート、モノメチルオーリスタチンE(「MMAE」)、モノメチルオーリスタチンF(「MMAF」)、ピロロベンゾジアゼピン、リゾキシン、SG2285、チューブリシン、ビンデシン、トキソイド、又は先述のいずれか1つの誘導体である、先行する実施形態のいずれかに記載の複合体。
[実施形態106]
複合体が:
[実施形態107]
活性剤が:
[実施形態108]
先行する実施形態のいずれかに記載の複合体を含む医薬組成物。
[実施形態109]
治療有効量の化学療法剤をさらに含む、実施形態108に記載の医薬組成物。
[実施形態110]
実施形態108又は109に記載の医薬組成物を対象に投与するステップを含む、対象におけるがんを処置する方法。
[実施形態111]
対象が哺乳動物である、実施形態110に記載の方法。
[実施形態112]
哺乳動物が、げっ歯類、ウサギ、ネコ、イヌ、ブタ、ヒツジ、ウシ、ウマ及び霊長類から選択される、実施形態111に記載の方法。
[実施形態113]
対象がヒトである、実施形態110に記載の方法。
[実施形態114]
リガンド-薬物複合体、例えば先行する実施形態のいずれかに記載の複合体を作るための方法であって、生体分子をプロドラッグと反応させるステップを含み、
生体分子が、リガンド、及びケトン又はアルデヒドを含み、
プロドラッグが、アルコキシアミンを含み、
反応により、オキシムが生成され、それにより、リガンドがプロドラッグに共有結合でつながる、上記方法。
[実施形態115]
リガンドが抗体である、実施形態114に記載の方法。
[実施形態116]
リガンドをイソプレニル化し、それにより、生体分子を生成するステップをさらに含み:
リガンドが、イソプレノイド転移酵素により認識されるアミノ酸モチーフを含み、
リガンドをイソプレニル化するステップが、リガンドをイソプレノイド転移酵素及びイソプレノイド転移酵素基質とインキュベートするステップを含み、
基質が、ケトン又はアルデヒドを含む、実施形態114又は実施形態115に記載の方法。
[実施形態117]
イソプレノイド転移酵素が、ファルネシル転移酵素又はゲラニルゲラニル転移酵素である、実施形態116に記載の方法。
[実施形態118]
リガンドをイソプレニル化するステップを含み:
リガンドが、イソプレノイド転移酵素により認識されるアミノ酸モチーフを含み、
リガンドをイソプレニル化するステップが、リガンドをイソプレノイド転移酵素及びイソプレノイド転移酵素基質とインキュベートするステップを含み、
基質が、活性剤を含む、実施形態1から107のいずれかに記載のリガンド-薬物複合体を作るための方法。
[実施形態119]
リガンドが抗体である、実施形態118に記載の方法。
[実施形態120]
i)分岐リンカーが、一次リンカー(PL)により反応性部分に共有結合で連結する分岐ユニット(BR)を含み、
ii)分岐ユニットが、第1の分岐(B1)に共有結合で連結し、これが、二次リンカー(SL)及び切断基(CG)に共有結合で連結する第1の活性剤を含み、
iii)分岐ユニットが、第2の分岐(B2)に共有結合で連結し、これが、a)二次リンカー(SL)及び切断基(CG)に共有結合で連結する第2の活性剤、又はb)ポリエチレングリコール部分のいずれかを含み、
各切断基が、リガンド-活性剤化合物から活性剤を放出するように、加水分解することができる、分岐リンカー-活性剤化合物。
[実施形態121]
切断基が、式(I):
Gが糖、糖酸又は糖誘導体を表し、
Bが活性剤へのつながりを表し、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、Wが、接続ユニット又は分岐ユニットに接続し;
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
mが0又は1であり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキルであり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態120に記載の分岐リンカー-活性剤化合物。
[実施形態122]
切断基が、式:
Gが、糖又は糖酸、好ましくはグルクロン酸を表し、
Bが活性剤へのつながりを表し、
Wが、電子求引性基、好ましくは-C(O)NR'-を表し、C(O)がフェニル環に結合しており、NR'(アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸のアミノ基であってよい)が、Lに結合しており、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
Lが、分岐ユニットへのつながりを表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態120に記載の分岐リンカー-活性剤化合物。
[実施形態123]
切断基が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、Wが、分岐ユニットに直接的又は間接的に連結し、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
mが0又は1、好ましくは1であり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態120に記載の分岐リンカー-活性剤化合物。
[実施形態124]
活性剤が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Bが、活性剤に共有結合しているユニットであり、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数、好ましくは3であり、
Lが、分岐ユニットへの結合を表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態120に記載の分岐リンカー-活性剤化合物。
[実施形態125]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又はアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロを表す、実施形態121から124のいずれかに記載の分岐リンカー-活性剤化合物
[実施形態126]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態125に記載の分岐リンカー-活性剤化合物。
[実施形態127]
i)分岐リンカーが、一次リンカー(PL)によりリガンドに共有結合で連結する分岐ユニット(BR)を含み、
ii)分岐ユニットが、第1の分岐(B1)に共有結合で連結し、切断基(CG)が、二次リンカー(SL)に共有結合で連結し、
iii)分岐ユニットが、第2の分岐(B2)に共有結合で連結し、これが、a)二次リンカー(SL)に共有結合で連結する第2の切断基(CG)、又はb)ポリエチレングリコール部分のいずれかを含む、リンカー化合物。
[実施形態128]
i)分岐リンカーが、一次リンカー(PL)によりリガンドに共有結合で連結する分岐ユニット(BR)を含み、
ii)分岐ユニットが、第1の分岐(B1)に共有結合で連結し、これが、二次リンカー(SL)に共有結合で連結する切断基(CG)と反応させることが可能である末端反応基を有し、
iii)分岐ユニットが、第2の分岐(B2)に共有結合で連結し、これが、a)二次リンカー(SL)に共有結合で連結する切断基(CG)と反応させることが可能である第2の末端反応基、又はb)ポリエチレングリコール部分のいずれかを含む、リンカー化合物。
[実施形態129]
切断基が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、Wが、分岐ユニットに直接的又は間接的に連結し、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
mが0又は1、好ましくは1であり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態127又は128に記載のリンカー化合物。
[実施形態130]
切断基が、式:
Gが、糖又は糖酸、好ましくはグルクロン酸を表し、
Bが、活性剤に取って代わることが可能である脱離基、例えばハロゲン(とりわけCl若しくはBr)、又は、活性剤に連結することが可能である反応性部分を含むユニット、例えばイソシアネート、酸塩化物、クロロホルメートなどを表し、
Wが、電子求引性基、好ましくは-C(O)NR'-を表し、C(O)がフェニル環に結合しており、NR'(アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸のアミノ基であってよい)が、Lに結合しており、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
Lが、分岐ユニットへのつながりを表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態127又は128に記載のリンカー化合物。
[実施形態131]
切断基が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Bが、活性剤に連結することが可能である反応性部分を含むユニットであり、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数、好ましくは3であり、
Lが、分岐ユニットへの結合を表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態127又は128に記載のリンカー化合物。
[実施形態132]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又はアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロを表す、実施形態129から131のいずれかに記載のリンカー化合物。
[実施形態133]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態132に記載のリンカー化合物。
[実施形態134]
Gが、
R 3 が、水素又はカルボキシル保護基であり、
各R 4 が、独立して、水素又はヒドロキシル保護基である、実施形態129から133のいずれかに記載のリンカー化合物。
[実施形態135]
少なくとも1つの一次又は二次リンカーが、構造-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q -、-((CH 2 ) p V) q -、-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q Y-、-((CH 2 ) p V) q (CH 2 ) r -、-Y(((CH 2 ) p V) q -又は-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q YCH 2 -を有し、
式中:
rが0から10の整数であり、
pが1から10の整数であり、
qが1から20の整数であり、
V及びYが、それぞれ独立して、単結合、-O-、-S-、-NR 21 -、-C(O)NR 22 -、-NR 23 C(O)-、-NR 24 SO 2 -又は-SO 2 NR 25 -であり、
R 21 からR 25 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリールである、実施形態127から134のいずれかに記載のリンカー化合物。
[実施形態136]
少なくとも1つの分岐ユニットが、構造
式中、L 1 、L 2 、L 3 が、それぞれ独立して、直接結合又は-C n H 2n -であり、nが1から30の整数であり、
G 1 、G 2 、G 3 が、それぞれ独立して、直接結合、
R 4 が、水素又は-L 4 -COOR 5 であり、L 4 が、直接結合又は-C n H 2n -であり、nが、1から10の整数であり、R 5 が、水素又はC 1 ~C 30 アルキルである、実施形態127から135のいずれかに記載のリンカー化合物。
[実施形態137]
切断基が、標的細胞内で切断することが可能である、先行する実施形態のいずれかに記載の化合物又は複合体。
[実施形態138]
切断基が、1つ以上の活性剤を放出することが可能である、先行する実施形態のいずれかに記載の化合物又は複合体。
[実施形態139]
リガンド、リガンドに共有結合で連結する少なくとも1つの分岐リンカー、及び分岐リンカーに共有結合で連結する少なくとも2つの活性剤を含むリガンド-薬物複合体。
[実施形態140]
リガンドが抗体である、実施形態139に記載の複合体。
[実施形態141]
少なくとも2つの分岐リンカーがリガンドに連結し、各分岐リンカーが、少なくとも2つの活性剤に連結する、実施形態139又は140に記載の複合体。
[実施形態142]
3つの分岐リンカーがリガンドに連結する、実施形態141に記載の複合体。
[実施形態143]
4つの分岐リンカーがリガンドに連結する、実施形態141に記載の複合体。
[実施形態144]
ちょうど1つの分岐リンカーが、リガンドに連結する、実施形態139又は140に記載の複合体。
[実施形態145]
各分岐リンカーが、ちょうど2つの活性剤に連結する、実施形態139から144のいずれかに記載の複合体。
[実施形態146]
複合体が、少なくとも2つの異なる活性剤を含む、実施形態139から145のいずれかに記載の複合体。
[実施形態147]
少なくとも1つの分岐リンカーが、2つの異なる活性剤に連結する、実施形態146に記載の複合体。
[実施形態148]
各活性剤が、切断(例えば、加水分解性)結合により、分岐リンカーに連結する、実施形態139から147のいずれかに記載の複合体。
[実施形態149]
各分岐リンカーが分岐ユニットを含み、各活性剤が、二次リンカーを介して分岐ユニットに連結し、分岐ユニットが、一次リンカーによりリガンドに連結する、実施形態139から148のいずれかに記載の複合体。
[実施形態150]
分岐ユニットが、例えば、アミン又はアミドの窒素原子である、実施形態149に記載の複合体。
[実施形態151]
分岐ユニットがアミドであり、一次リンカーが、アミドのカルボニルを含む、実施形態150に記載の複合体。
[実施形態152]
分岐ユニットがアミドであり、二次リンカーが、アミドのカルボニルを含む、実施形態150に記載の複合体。
[実施形態153]
分岐ユニットがリシンユニットである、実施形態149に記載の複合体。
[実施形態154]
リガンド、リンカー及び活性剤を含み、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖を表し、
Aがリガンドを表し、
Bが活性剤を表し、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数、好ましくは3であり、
mが0又は1、好ましくは1であり、
Lが、少なくとも1個の分岐ユニット(BR)及び少なくとも1つの一次リンカー(PL)を含むリンカーであり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態139から153のいずれかに記載の複合体。
[実施形態155]
各活性剤が、式:
Gが、糖又は糖酸、好ましくはグルクロン酸を表し、
Bが活性剤を表し、
Wが、電子求引性基、好ましくは-C(O)NR'-を表し、C(O)がフェニル環に結合しており、NR'(アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸のアミノ基であってよい)が、Lに結合しており、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
Lが、リガンドへのつながりを表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態139から153のいずれかに記載の複合体。
[実施形態156]
各活性剤が、式:
Gが、糖、糖酸又は修飾糖、好ましくは糖又は糖酸、最も好ましくはグルクロン酸を表し、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に、好ましくは直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、Wが、リガンド又は分岐ユニットに直接的又は間接的に連結し、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数であり、
mが0又は1、好ましくは1であり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態139から153のいずれかに記載の複合体。
[実施形態157]
各活性剤が、式:
Bが、活性剤に共有結合しているユニットであり、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールであり、
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル又は電子求引性基(例えばアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ若しくはニトロ)、好ましくは水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロ、最も好ましくは水素を表し、
nが1から3の整数、好ましくは3であり、
Lが、リンカー又は分岐ユニットへの結合を表し、
R 1 及びR 2 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくは(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、好ましくは水素であり、又はR 1 及びR 2 が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル環を形成する、実施形態139から153のいずれかに記載の複合体。
[実施形態158]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル若しくはアミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態154から157のいずれかに記載の複合体。
[実施形態159]
各Zが、独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、実施形態158に記載の複合体。
[実施形態160]
少なくとも1個の分岐ユニットが、構造
G 1 、G 2 、G 3 が、それぞれ独立して、直接結合、
R 3 が、水素又はC 1 ~C 30 アルキルであり、
R 4 が、水素又は-L 4 -COOR 5 であり、L 4 が、直接結合又は-C n H 2n -であり、nが、1から10の整数であり、R 5 が、水素又はC 1 ~C 30 アルキルである、実施形態139から159のいずれかに記載の複合体。
[実施形態161]
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O) 2 NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO 2 NR'-であり、各ケースでは、C(O)、S又はPが、好ましくはフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 8 )アルキル、(C 3 ~C 8 )シクロアルキル、(C 1 ~C 8 )アルコキシ、(C 1 ~C 8 )アルキルチオ、モノ若しくはジ(C 1 ~C 8 )アルキルアミノ、(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール又は(C 6 ~C 20 )アリールである、実施形態154から160のいずれかに記載の複合体。
[実施形態162]
Wが、-C(O)NR'-を表し、Wの窒素が、アミノ酸、好ましくは親水性アミノ酸の窒素である、実施形態154又は161に記載の複合体。
[実施形態163]
Wが-C(O)NR'-であり、C(O)がフェニル環に結合しており、NR'がLに結合している、実施形態162に記載の複合体。
[実施形態164]
糖又は糖酸が単糖である、実施形態154から163のいずれかに記載の複合体。
[実施形態165]
Gが、
R 3 が、水素又はカルボキシル保護基であり、
各R 4 が、独立して、水素又はヒドロキシル保護基である、
実施形態164に記載の複合体。
[実施形態166]
R 3 が水素であり、各R 4 が水素である、実施形態165に記載の複合体。
[実施形態167]
各Zが水素を表し、nは3である、実施形態154から166のいずれかに記載の複合体。
[実施形態168]
Gがグルクロン酸であり、
Wが-C(O)NR'-であり、C(O)がフェニル環に結合しており、NR'がLに結合しており、
Zが水素を表し、
nが3であり、
R 1 及びR 2 が、それぞれ、水素を表す、
実施形態154から167のいずれかに記載の複合体。
[実施形態169]
一次リンカーが、1から100個、好ましくは1から50個の炭素原子を有するアルキレンを含み、また:
アルキレンが、少なくとも1つの不飽和結合を含み;
アルキレンが、少なくとも1つのヘテロアリーレンを含み;
アルキレンの炭素原子が、窒素(N)、酸素(O)及び硫黄(S)から選択される1個以上のヘテロ原子により置き換えられ;又は
アルキレンが、1から20個の炭素原子を有する1つ以上のアルキルでさらに置換されている、
実施形態139から168のいずれかに記載の複合体。
[実施形態170]
アルキレンの少なくとも1個の炭素原子が、窒素により置き換えられ、一次リンカーが、親水性アミノ酸の少なくとも2個の原子を含み、窒素が、親水性アミノ酸の骨格カルボニルとペプチド結合を形成する、実施形態169に記載の複合体。
[実施形態171]
親水性アミノ酸が、アルギニン、アスパルテート、アスパラギン、グルタメート、グルタミン、ヒスチジン、リシン、オルニチン、プロリン、セリン又はトレオニンである、実施形態170に記載の複合体。
[実施形態172]
分岐リンカーが、アミノ酸を含み、アミノ酸が、水溶液中で、中性pHにおいて電荷を持つ部分を有する側鎖を含む、実施形態139から171のいずれかに記載の複合体。
[実施形態173]
アミノ酸が、アルギニン、アスパルテート、グルタメート、リシン又はオルニチンである、実施形態172に記載の複合体。
[実施形態174]
アミノ酸が、アスパルテート、グルタメート又はオルニチンである、実施形態172に記載の複合体。
[実施形態175]
アミノ酸がリシンである、実施形態172に記載の複合体。
[実施形態176]
アミノ酸がアルギニンである、実施形態172に記載の複合体。
[実施形態177]
アミノ酸が、分岐リンカーのオキシムを分岐リンカーのポリエチレングリコールユニットに共有結合でつなげる、実施形態172から176のいずれかに記載の複合体。
[実施形態178]
アミノ酸が、二次リンカー、任意選択で各二次リンカーに存在する、実施形態172から176のいずれかに記載の複合体。
[実施形態179]
分岐リンカーが、チオエーテル結合によりリガンドに共有結合しており、チオエーテル結合が、リガンドのシステインの硫黄原子を含む、実施形態139から178のいずれかに記載の複合体。
[実施形態180]
リガンドが、イソプレノイド転移酵素により認識されるC-末端アミノ酸モチーフを含み、
チオエーテル結合が、アミノ酸モチーフのシステインの硫黄原子を含む、実施形態179に記載の複合体。
[実施形態181]
アミノ酸モチーフが、配列CYYXであり、
Cがシステインを表し、
Yが、それぞれの発生に対して独立して、脂肪族アミノ酸を表し、
Xが、それぞれの発生に対して独立して、グルタミン、グルタメート、セリン、システイン、メチオニン、アラニン又はロイシンを表し、
チオエーテル結合が、アミノ酸モチーフのシステインの硫黄原子を含む、実施形態180に記載の複合体。
[実施形態182]
アミノ酸モチーフが配列CYYXであり、
Yが、それぞれの発生に対して独立して、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン又はバリンを表す、実施形態181に記載の複合体。
[実施形態183]
アミノ酸モチーフが、配列CVIM又はCVLLである、実施形態182に記載の複合体。
[実施形態184]
アミノ酸モチーフに先行するアミノ酸7個の少なくとも1個がグリシンである、実施形態180から183のいずれかに記載の複合体。
[実施形態185]
アミノ酸モチーフに先行するアミノ酸7個の少なくとも3個が、それぞれ独立して、グリシン及びプロリンから選択される、実施形態184に記載の複合体。
[実施形態186]
アミノ酸モチーフに直接先行するアミノ酸1から10個が、グリシンであり、好ましくは、アミノ酸モチーフに直接先行するアミノ酸の少なくとも1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個又は10個が、グリシンである、実施形態185に記載の複合体。
[実施形態187]
リガンドのC-末端が、アミノ酸配列GGGGGGGCVIMを含む、実施形態186に記載の複合体。
[実施形態188]
チオエーテル結合が、
[実施形態189]
nが少なくとも2である、実施形態188に記載の複合体。
[実施形態190]
分岐リンカーが、オキシムを含み、少なくとも1個のイソプレニルユニットが、オキシムをリガンドに共有結合でつなげる、実施形態188又は189に記載の複合体。
[実施形態191]
リンカーが:
[実施形態192]
リンカーが:
[実施形態193]
リンカーが:
[実施形態194]
一次リンカー及び/又は二次リンカー(好ましくは各二次リンカー)が、
[実施形態195]
ポリエチレングリコールユニットが、1から20個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、実施形態194に記載の複合体。
[実施形態196]
ポリエチレングリコールユニットが、1から19個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、実施形態194に記載の複合体。
[実施形態197]
ポリエチレングリコールユニットが、4から20個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、実施形態194に記載の複合体。
[実施形態198]
ポリエチレングリコールユニットが、3から12個の-OCH 2 CH 2 -ユニットを含む、実施形態194に記載の複合体。
[実施形態199]
一次リンカー、二次リンカー(好ましくは各二次リンカー)、又はその両方が、-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q -により表される接続ユニットを含み、式中:
rが1から10の整数、好ましくは2であり、
pが0から12の整数、好ましくは2であり、
qが1から20の整数であり、
Vが、単結合、-O-、-S-、-NR 21 -、-C(O)NR 22 -、-NR 23 C(O)-、-NR 24 SO 2 -又は-SO 2 NR 25 -、好ましくは-O-であり、
R 21 からR 25 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリールである、実施形態139から198のいずれかに記載の複合体。
[実施形態200]
一次リンカー、二次リンカー(好ましくは各二次リンカー)、又はその両方が、-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q -、-((CH 2 ) p V) q -、-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q Y-、-((CH 2 ) p V) q (CH 2 ) r -、-Y(((CH 2 ) p V) q -又は-(CH 2 ) r (V(CH 2 ) p ) q YCH 2 -により表される接続ユニットを含み、
式中:
rが0から10の整数であり、
pが1から10の整数であり、
qが1から20の整数であり、
V及びYが、それぞれ独立して、単結合、-O-、-S-、-NR 21 -、-C(O)NR 22 -、-NR 23 C(O)-、-NR 24 SO 2 -又は-SO 2 NR 25 -であり、
R 21 からR 25 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリールである、実施形態139から198のいずれかに記載の複合体。
[実施形態201]
qが4から20の整数である、実施形態199又は200に記載の複合体。
[実施形態202]
qが6から20の整数である、実施形態199又は200に記載の複合体。
[実施形態203]
qが1から10の整数である、実施形態199又は200に記載の複合体。
[実施形態204]
qが2から12の整数である、実施形態199又は200に記載の複合体。
[実施形態205]
qが2、5又は11である、実施形態199又は200に記載の複合体。
[実施形態206]
rが2である、実施形態199から205のいずれかに記載の複合体。
[実施形態207]
pが2である、実施形態199から206のいずれかに記載の複合体。
[実施形態208]
V及びYが、それぞれ独立して、-O-である、実施形態200から207のいずれかに記載の複合体。
[実施形態209]
rが2であり、
pが2であり、
qが2、5又は11であり、Vが-O-である、実施形態199又は200に記載の複合体。
[実施形態210]
一次リンカー、二次リンカー(好ましくは各二次リンカー)、又はその両方が、-(CH 2 CH 2 X) w -により表される接続ユニットを含み:式中、
Xが、-O-、(C 1 ~C 8 )アルキレン又は-NR 21 -、好ましくは-O-を表し、
R 21 が、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリール、好ましくは水素を表し、
wが、1から12の整数、好ましくは1、3、6又は12である、実施形態139から198のいずれかに記載の複合体。
[実施形態211]
Xが-O-であり、wが6から12の整数である、実施形態210に記載の複合体。
[実施形態212]
一次リンカーが、1,3-双極子環状付加反応、ヘテロ-ディールス-アルダー反応、求核置換反応、非アルドール型カルボニル反応、炭素-炭素多重結合への付加、酸化反応又はクリック反応により形成される結合ユニットを含む、実施形態139から211のいずれかに記載の複合体。
[実施形態213]
結合ユニットが、アセチレンとアジドの間の反応、又はアルデヒド若しくはケトン基とヒドラジン若しくはアルコキシアミンの間の反応により形成される、実施形態212に記載の複合体。
[実施形態214]
結合ユニットが、式A、B、C又はDのいずれか1つ、好ましくはD:
L 1 が、単結合、又は1から30個、好ましくは12個の炭素原子を有するアルキレンであり、
R 11 が、水素、又は1から10個の炭素原子を有するアルキル、好ましくはメチルであり、 L 2 が、1から30個、好ましくは11個の炭素原子を有するアルキレンである、実施形態213に記載の複合体。
[実施形態215]
一次リンカーが:
Vが、単結合、-O-、-S-、-NR 21 -、-C(O)NR 22 -、-NR 23 C(O)-、-NR 24 SO 2 -又は-SO 2 NR 25 -、好ましくは-O-であり、
R 21 からR 25 が、それぞれ独立して、水素、(C 1 ~C 6 )アルキル、(C 1 ~C 6 )アルキル(C 6 ~C 20 )アリール又は(C 1 ~C 6 )アルキル(C 3 ~C 20 )ヘテロアリールであり、
rが、1から10の整数、好ましくは2又は3であり、
pが、0から10の整数、好ましくは1又は2であり、
qが、1から20、好ましくは1から6の整数であり、
L 1 が単結合である、実施形態214に記載の複合体。
[実施形態216]
分岐リンカーが、O-置換オキシムを含み、
a)オキシムの酸素原子が、オキシムを活性剤に共有結合でつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子が、オキシムをリガンドに共有結合でつなげる基で置換されている、又は
b)オキシムの酸素原子が、オキシムをリガンドに共有結合でつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子が、オキシムを活性剤に共有結合でつなげる基で置換されている、実施形態139から215のいずれかに記載の複合体。
[実施形態217]
構造:
B及びB'が、同一であっても、又は異なっていてもよい活性剤を表し、
nが、それぞれの発生に対して独立して、0から30の整数を表し、
fが、それぞれの発生に対して独立して、0から30の整数を表し、
Lが、リガンドへのつながりを表す、実施形態216に記載の複合体。
[実施形態218]
nが1から10の整数である、実施形態217に記載の複合体。
[実施形態219]
nが4から20の整数である、実施形態217に記載の複合体。
[実施形態220]
リンカーが、オキシムを含み、少なくとも1個のポリエチレングリコールユニットが、オキシムを活性剤に共有結合でつなげる、実施形態217から219のいずれかに記載の複合体。
[実施形態221]
抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab') 2 、Fv、一本鎖Fv(「scFv」)、二特異性抗体、直鎖状抗体、二重特異性抗体、多重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体又は抗体の抗原結合性部分を含む融合タンパク質である、実施形態139から220のいずれかに記載の複合体。
[実施形態222]
抗体が、ムロモナブ-CD3 アブシキシマブ、リツキシマブ、ダクリズマブ、パリビズマブ、インフリキシマブ、トラスツズマブ、エタネルセプト、バシリキシマブ、ゲムツズマブ、アレムツズマブ、イブリツモマブ、アダリムマブ、アレファセプト、オマリズマブ、エファリズマブ、トシツモマブ、セツキシマブ、ABT-806、ベバシズマブ、ナタリズマブ、ラニビズマブ、パニツムマブ、エクリズマブ、リロナセプト、セルトリズマブ、ロミプロスチム、AMG-531、ゴリムマブ、ウステキヌマブ、ABT-874、ベラタセプト、ベリムマブ、アタシセプト、抗CD20抗体、カナキヌマブ、トシリズマブ、アトリズマブ、メポリズマブ、ペルツズマブ、HuMax CD20、トレメリムマブ、チシリムマブ、イピリムマブ、IDEC-114、イノツズマブ、HuMax EGFR、アフリベルセプト、HuMax-CD4、テプリズマブ、オテリキシズマブ、カツマキソマブ、抗EpCAM抗体IGN101、アデカツムマブ、オレゴボマブ、ジヌツキシマブ、ギレンツキシマブ、デノスマブ、バピネウズマブ、モタビズマブ、エファングマブ、ラキシバクマブ、LY2469298及びベルツズマブから選択される、実施形態139から221のいずれかに記載の複合体。
[実施形態223]
各活性剤が、独立して、化学療法剤及び毒素から選択される、実施形態139から222のいずれかに記載の複合体。
[実施形態224]
各活性剤が:
(a)エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、PTK787/ZK 222584、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、AG1478、AG1571、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファン、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、ウレドーパ、エチレンイミン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、トリメチロールメラミン、ブラタシン、ブラタシノン、カンプトテシン、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、CC-1065、アドゼレシン、カルゼルシン、ビゼレシン、クリプトフィシン1、クリプトフィシン8、ドラスタチン、デュオカルマイシン、KW-2189、CB1-TM1、エリュテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン、スポンジスタチン、クロランブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、カリケアミシン、カリケアミシンガンマ1、カリケアミシンオメガ1、ジネミシン、ジネミシンA、クロドロネート、エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アンチマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルニノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルブシン、6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、2-ピロリノ-ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンC、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ぺプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、5-フルオロウラシル、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート、フルダラビン、6-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、アンシタビン、アザシチジン、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フォリン酸、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトレキサート、デフォファミン、デメコルシン、ジアジコン、エフロルニチン、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダイニン、メイタンシン、アンサミトシン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンモール、ニトラリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、2-エチルヒドラジド、プロカルバジン、ポリサッカリド-k、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、2,2',2''-トリクロロトリエチルアミン、T-2毒素、ベラキュリンA、ロリジンA及びアングイジン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルのアルブミン改変ナノ粒子製剤、ドセタキセル、クロランブシル、ゲムシタビン、6-チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン、テニポシド、エダトレキサート、ダウノマイシン、アミノプテリン、ゼローダ、イバンドロネート、CPT-11、トポイソメラーゼ阻害剤RFS2000、ジフルオロメチルオルニチン、レチノイン酸、カペシタビン又は先述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物又は酸、
(b)モノカイン、リンフォカイン、従来からのポリペプチドホルモン、上皮小体ホルモン、チロキシン、リラキシン、プロリラキシン、糖タンパク質ホルモン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、肝細胞増殖因子、線維芽細胞増殖因子、プロラクチン、胎盤性ラクトゲン、腫瘍壊死因子-α、腫瘍壊死因子-β、ミュラー管阻害物質、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮増殖因子、トロンボポエチン、エリスロポエチン、骨誘導因子、インターフェロン、インターフェロン-α、インターフェロン-β、インターフェロン-γ、コロニー刺激因子(「CSF」)、マクロファージ-CSF、顆粒球-マクロファージ-CSF、顆粒球-CSF、インターロイキン(「IL」)、IL-1、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、腫瘍壊死因子、TNF-α、TNF-β、ポリペプチド因子、LIF、kitリガンド又は先述のいずれかの組合せ、
(c)ジフテリア毒素、ボツリヌス毒素、破傷風毒素、赤痢毒素、コレラ毒素、アマニチン、アマニチン誘導体、α-アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、テトロドトキシン、ブレベトキシン、シガトキシン、リシン、AM毒素、オーリスタチン、チューブリシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、カリケアミシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキサート、ビンデシン、SG2285、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、クリプトフィシン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体及び代謝産物、リゾキシン、リゾキシン誘導体、CC-1065、CC-1065類似体若しくは誘導体、デュオカルマイシン、エンジイン抗生物質、エスペラミシン、エポチロン、アゾナフィド、アプリジン、トキソイド又は先述のいずれかの組合せ、
(d)親和性リガンドであって、基質、阻害剤、刺激剤、神経伝達物質、放射性同位体又は先述のいずれかの組合せである、親和性リガンド、
(e)放射性標識、 32 P、 35 S、蛍光色素、電子密度試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に相補的な配列を有する核酸分子、又は先述のいずれかの組合せ、
(f)免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、抗菌剤及び抗寄生虫剤又は先述のいずれかの組合せ、
(g)タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、LY117018、オナプリストン又はトレミフェン、
(h)4(5)-イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール又はアナストロゾール、
(i)フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン又はトロキサシタビン、
(j)アロマターゼ阻害剤、
(k)タンパク質キナーゼ阻害剤、
(l)脂質キナーゼ阻害剤、
(m)アンチセンスオリゴヌクレオチド、
(n)リボザイム、
(o)ワクチン、並びに
(p)抗血管形成剤
から独立して選択される、実施形態139から223のいずれかに記載の複合体。
[実施形態225]
活性剤が、アマニチン、オーリスタチン、カリケアミシン、カンプトテシン、クリプトフィシン、ダウノマイシン、ドラスタチン、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、エポチロン、エスペラミシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、メトトレキサート、モノメチルオーリスタチンE(「MMAE」)、モノメチルオーリスタチンF(「MMAF」)、ピロロベンゾジアゼピン、リゾキシン、SG2285、チューブリシン、ビンデシン、トキソイド、又は先述のいずれか1つの誘導体である、実施形態139から224のいずれかに記載の複合体。
[実施形態226]
活性剤が、アマニチン、MMAE若しくはMMAF、又は先述のいずれか1つの誘導体である、実施形態225に記載の複合体。
[実施形態227]
少なくとも1つの活性剤がタルトブリンである、実施形態139から226のいずれかに記載の複合体。
[実施形態228]
少なくとも1つの活性剤がアゾナフィドである、実施形態139から227のいずれかに記載の複合体。
[実施形態229]
複合体が:
[実施形態230]
活性剤が:
[実施形態231]
実施形態139からの230のいずれかに記載の複合体を含む医薬組成物。
[実施形態232]
治療有効量の化学療法剤をさらに含む、実施形態231に記載の医薬組成物。
[実施形態233]
実施形態231又は232に記載の医薬組成物を対象に投与するステップを含む、対象におけるがんを処置する方法。
[実施形態234]
対象が哺乳動物である、実施形態233に記載の方法。
[実施形態235]
対象が、げっ歯類、ウサギ、ネコ、イヌ、ブタ、ヒツジ、ウシ、ウマ及び霊長類から選択される、実施形態234に記載の方法。
[実施形態236]
対象がヒトである、実施形態235に記載の方法。
[実施形態237]
生体分子をプロドラッグと反応させるステップを含み:
生体分子が、リガンド、及びケトン又はアルデヒドを含み、
プロドラッグがアルコキシアミンを含み、
反応により、オキシムが生成され、それにより、リガンドがプロドラッグに共有結合でつながる、実施形態139から230のいずれかに記載の複合体を作るための方法。
[実施形態238]
リガンドが抗体である、実施形態237に記載の方法。
[実施形態239]
リガンドをイソプレニル化し、それにより生体分子が生成されるステップをさらに含み:
リガンドがイソプレニル化配列を含み、
リガンドをイソプレニル化するステップが、リガンドをイソプレノイド転移酵素及びイソプレノイド転移酵素基質とインキュベートするステップを含み、
基質がケトン又はアルデヒドを含む、実施形態237又は238に記載の方法。
[実施形態240]
イソプレノイド転移酵素が、ファルネシル転移酵素又はゲラニルゲラニル転移酵素である、実施形態239に記載の方法。
[実施形態241]
リガンドをイソプレニル化するステップを含み:
リガンドが、イソプレノイド転移酵素により認識されるアミノ酸モチーフを含み、
リガンドをイソプレニル化するステップが、リガンドをイソプレノイド転移酵素及びイソプレノイド転移酵素基質とインキュベートするステップを含み、
基質が、活性剤を含む、実施形態139から230のいずれかに記載のリガンド-薬物複合体を作るための方法。
[実施形態242]
リガンドが抗体である、実施形態241に記載の方法。
Claims (42)
- リガンド、及びリガンドに共有結合で連結する分岐リンカーを含むリガンド-活性剤複合体であって、
前記分岐リンカーが、
i)一次リンカーによりリガンドに共有結合で連結する分岐ユニット、
ii)二次リンカー及び第1の切断基により分岐ユニットに共有結合で連結する第1の活性剤を含む第1の分岐、及び
iii) a)二次リンカー及び第2の切断基により分岐ユニットに共有結合で連結する第2の活性剤、又は
b)分岐ユニットに共有結合で連結するポリエチレングリコール部分
を含む第2の分岐
を含み、
一次リンカー及び二次リンカーが、それぞれ独立して、1から100個の炭素原子を有するアルキレンであり、又は、それぞれ独立して、i)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、少なくとも1つの不飽和結合を含む構造、ii)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、少なくとも1つのヘテロアリーレンを含む構造、iii)1から100個の炭素原子を有するアルキレンの少なくとも1つの炭素原子が、窒素(N)、酸素(O)及び硫黄(S)から選択されるヘテロ原子により置き換えられている構造、若しくはiv)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、1から20個の炭素原子を有する1つ以上のアルキルでさらに置換されている構造であり、
分岐ユニットが、
L11、L22、及びL33は、それぞれ独立して、結合又は-CnH2n-であり、nは1から30の整数であり、
G1、G2、及びG3は、それぞれ独立して、結合、
R33は、水素又はC1~C30アルキルであり、及び
R44は、水素又は-L4-COOR5であり、L4は、結合又は-CnH2n-であり、nは、1から10の整数であり、R5は、水素又はC1~C30アルキルであり、及び
各切断基が、式:
Bは、第1の活性剤又は第2の活性剤を表し、
式中:
Gが、
Wが、-C(O)-、-C(O)NR'-、-C(O)O-、-S(O)2NR'-、-P(O)R''NR'-、-S(O)NR'-又は-PO2NR'-を表し、各ケースでは、C(O)、S又はPがフェニル環に直接結合し、R'及びR''が、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル、モノ若しくはジカルボキシル(C1~C8)アルキル、(C3~C8)シクロアルキル、(C1~C8)アルコキシ、(C1~C8)アルキルチオ、モノ若しくはジ(C1~C8)アルキルアミノ、(C3~C20)ヘテロアリール又は(C6~C20)アリールであり、
各Zが、独立して、水素、(C1~C8)アルキル、アミド、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表し、
nが1から3の整数であり、
mが0又は1であり、
R1及びR2が、それぞれ独立して、水素、(C1~C8)アルキル若しくは(C3~C8)シクロアルキルであり、又はR1及びR2が、それらが結合する炭素原子と一緒になって、(C3~C8)シクロアルキル環を形成し、
R3が、水素又はカルボキシル保護基であり、
各R4が、独立して、水素又はヒドロキシル保護基であり、及び
- 各Zが、独立して、水素、(C1~C8)アルキル、ハロゲン、シアノ又はニトロを表す、請求項1に記載の複合体。
- Wが、-C(O)NR'-である、請求項1又は2に記載の複合体。
- Wが、-C(O)NR'-を表し、Wの窒素が、アミノ酸の窒素である、請求項1~3のいずれか一項に記載の複合体。
- R3及び各R4が、水素である、請求項1から4のいずれか一項に記載の複合体。
- 一次リンカーが、
i)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、少なくとも1つの不飽和結合を含む構造;
ii)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、少なくとも1つのヘテロアリーレンを含む構造;
iii)1から100個の炭素原子を有するアルキレンの少なくとも1つの炭素原子が、窒素(N)、酸素(O)及び硫黄(S)から選択されるヘテロ原子により置き換えられている構造;又は
iv)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、1から20個の炭素原子を有する1つ以上のアルキルでさらに置換されている構造
を含む、請求項1から5のいずれか一項に記載の複合体。 - iii)に記載されるアルキレンの少なくとも1個の炭素原子が、窒素により置き換えられている、請求項6に記載の複合体。
- 一次リンカーが、アミノ酸を含み、アミノ酸が、水溶液中で、中性pHにおいて電荷を持つ部分を有する側鎖を含む、請求項1から7のいずれか一項に記載の複合体。
- 二次リンカーが、
i)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、少なくとも1つの不飽和結合を含む構造;
ii)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、少なくとも1つのヘテロアリーレンを含む構造;
iii)1から100個の炭素原子を有するアルキレンの少なくとも1つの炭素原子が、窒素(N)、酸素(O)及び硫黄(S)から選択されるヘテロ原子により置き換えられている構造;又は
iv)1から100個の炭素原子を有するアルキレンが、1から20個の炭素原子を有する1つ以上のアルキルでさらに置換されている構造
を含む、請求項1から8のいずれか一項に記載の複合体。 - iii)に記載されるアルキレンの少なくとも1個の炭素原子が、窒素により置き換えられ、二次リンカーが、親水性アミノ酸の少なくとも2個の原子を含み、窒素が、親水性アミノ酸の骨格カルボニルとペプチド結合を形成する、請求項9に記載の複合体。
- 二次リンカーが、アミノ酸を含み、アミノ酸が、水溶液中で、中性pHにおいて電荷を持つ部分を有する側鎖を含む、請求項1から10のいずれか一項に記載の複合体。
- 分岐ユニットが一次リンカーにアミド部分により連結し、一次リンカーがアミドのカルボニルを含む、請求項1から11のいずれか一項に記載の複合体。
- 分岐ユニットが一次リンカーにアミド部分により連結し、第1の分岐又は第2の分岐がアミドのカルボニルを含む、請求項1から11のいずれか一項に記載の複合体。
- 少なくとも1つの分岐ユニットが親水性アミノ酸である、請求項1から13のいずれか一項に記載の複合体。
- 親水性アミノ酸が、アルギニン、アスパルテート、アスパラギン、グルタメート、グルタミン、ヒスチジン、リシン、オルニチン、プロリン、セリン又はトレオニンである、請求項14に記載の複合体。
- 2、3又は4つの分岐リンカーがリガンドに連結する、請求項1から15のいずれか一項に記載の複合体。
- 2つの分岐リンカーがリガンドに連結する、請求項1から15のいずれか一項に記載の複合体。
- 各分岐リンカーが1つの活性剤に連結する、請求項1から17のいずれか一項に記載の複合体。
- 少なくとも2つの異なる活性剤が、異なる分岐リンカーに連結する、請求項1から18のいずれか一項に記載の複合体。
- 一次リンカーが、チオエーテル結合によりリガンドに共有結合しており、チオエーテル結合が、リガンドのシステインの硫黄原子を含む、請求項1から19のいずれか一項に記載の複合体。
- リガンドが、イソプレノイド転移酵素により認識されるアミノ酸モチーフを含み、
チオエーテル結合が、アミノ酸モチーフのシステインの硫黄原子を含む、請求項20に記載の複合体。 - アミノ酸モチーフが、CYYXであり、さらに
Cがシステインを表し、
各Yが、それぞれ独立して、脂肪族アミノ酸であり、
Xが、グルタミン、グルタメート、セリン、システイン、メチオニン、アラニン又はロイシンであり、
チオエーテル結合が、アミノ酸モチーフのシステインの硫黄原子を含む、請求項21に記載の複合体。 - アミノ酸モチーフが、CysValIleMet又はCysValLeuLeuである、請求項21に記載の複合体。
- 一次リンカー、第1の分岐又はその両方が、-(CH2)r(V(CH2)p)q-、-((CH2)pV)q-、-(CH2)r(V(CH2)p)qY-、-((CH2)pV)q(CH2)r-、-Y(((CH2)pV)q-又は-(CH2)r(V(CH2)p)qYCH2-により表される接続ユニットを含み、
式中:
rが0から10の整数であり、
pが1から10の整数であり、
qが1から20の整数であり、
V及びYが、それぞれ独立して、単結合、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR24SO2-又は-SO2NR25-であり、
R21からR25が、それぞれ独立して、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルキル(C6~C20)アリール又は(C1~C6)アルキル(C3~C20)ヘテロアリールである、請求項1から25のいずれか一項に記載の複合体。 - 一次リンカー、第1の分岐又はその両方が、-((CH2)pV)q-により表される接続ユニットを含む、請求項26に記載の複合体。
- V及びYが、それぞれ独立して、-O-である、請求項26又は27に記載の複合体。
- rが2であり、
pが2であり、
qが2、5又は11であり、
Vが-O-である、請求項26から28のいずれか一項に記載の複合体。 - 一次リンカーがO-置換オキシムを含み、
i)オキシムの酸素原子が、オキシムを活性剤に共有結合でつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子が、オキシムをリガンドに共有結合でつなげる基で置換されている、又は
ii)オキシムの酸素原子が、オキシムをリガンドに共有結合でつなげる基で置換され、
オキシムの炭素原子が、オキシムを活性剤に共有結合でつなげる基で置換されている、請求項1から31のいずれか一項に記載の複合体。 - リガンドが抗体である、1から33のいずれか一項に記載の複合体。
- リガンドが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2、Fv、一本鎖Fv(「scFv」)、直鎖状抗体、二重特異性抗体、多重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体又は抗体の抗原結合性部分を含む融合タンパク質である、請求項1から34のいずれか一項に記載の複合体。
- リガンドが、ムロモナブ-CD3 アブシキシマブ、リツキシマブ、ダクリズマブ、パリビズマブ、インフリキシマブ、トラスツズマブ、エタネルセプト、バシリキシマブ、ゲムツズマブ、アレムツズマブ、イブリツモマブ、アダリムマブ、アレファセプト、オマリズマブ、エファリズマブ、トシツモマブ、セツキシマブ、ABT-806、ベバシズマブ、ナタリズマブ、ラニビズマブ、パニツムマブ、エクリズマブ、リロナセプト、セルトリズマブ、ロミプロスチム、AMG-531、ゴリムマブ、ウステキヌマブ、ABT-874、ベラタセプト、ベリムマブ、アタシセプト、抗CD20抗体、カナキヌマブ、トシリズマブ、アトリズマブ、メポリズマブ、ペルツズマブ、HuMax CD20、トレメリムマブ、チシリムマブ、イピリムマブ、IDEC-114、イノツズマブ、HuMax EGFR、アフリベルセプト、HuMax-CD4、テプリズマブ、オテリキシズマブ、カツマキソマブ、抗EpCAM抗体IGN101、アデカツムマブ、オレゴボマブ、ジヌツキシマブ、ギレンツキシマブ、デノスマブ、バピネウズマブ、モタビズマブ、エファングマブ、ラキシバクマブ、LY2469298及びベルツズマブから選択される、請求項1から35のいずれか一項に記載の複合体。
- 少なくとも1つの活性剤が、化学療法剤及び毒素から選択される、請求項1から36のいずれか一項に記載の複合体。
- 少なくとも1つの活性剤が:
(a)エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、PTK787/ZK 222584、オキサリプラチン、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、AG1478、AG1571、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファン、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、ウレドーパ、エチレンイミン、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、トリメチロールメラミン、ブラタシン、ブラタシノン、カンプトテシン、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、CC-1065、アドゼレシン、カルゼルシン、ビゼレシン、クリプトフィシン1、クリプトフィシン8、ドラスタチン、デュオカルマイシン、KW-2189、CB1-TM1、エリュテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン、スポンジスタチン、クロランブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、カリケアミシン、カリケアミシンガンマ1、カリケアミシンオメガ1、ジネミシン、ジネミシンA、クロドロネート、エスペラミシン、ネオカルジノスタチンクロモフォア、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アンチマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルニノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルブシン、6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、2-ピロリノ-ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンC、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ぺプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、5-フルオロウラシル、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート、フルダラビン、6-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、アンシタビン、アザシチジン、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フォリン酸、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトレキサート、デフォファミン、デメコルシン、ジアジコン、エフロルニチン、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダイニン、メイタンシン、アンサミトシン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンモール、ニトラリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、2-エチルヒドラジド、プロカルバジン、ポリサッカリド-k、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、2,2',2''-トリクロロトリエチルアミン、T-2毒素、ベラキュリンA、ロリジンA及びアングイジン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルのアルブミン改変ナノ粒子製剤、ドセタキセル、クロランブシル、ゲムシタビン、6-チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン、テニポシド、エダトレキサート、ダウノマイシン、アミノプテリン、ゼローダ、イバンドロネート、CPT-11、トポイソメラーゼ阻害剤RFS2000、ジフルオロメチルオルニチン、レチノイン酸、カペシタビン又は先述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物又は酸、
(b)モノカイン、リンフォカイン、ポリペプチドホルモン、上皮小体ホルモン、チロキシン、リラキシン、プロリラキシン、糖タンパク質ホルモン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、肝細胞増殖因子、線維芽細胞増殖因子、プロラクチン、胎盤性ラクトゲン、腫瘍壊死因子-α、腫瘍壊死因子-β、ミュラー管阻害物質、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮増殖因子、トロンボポエチン、エリスロポエチン、骨誘導因子、インターフェロン、インターフェロン-α、インターフェロン-β、インターフェロン-γ、コロニー刺激因子(「CSF」)、マクロファージ-CSF、顆粒球-マクロファージ-CSF、顆粒球-CSF、インターロイキン(「IL」)、IL-1、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、腫瘍壊死因子、TNF-α、TNF-β、ポリペプチド因子、LIF、kitリガンド又は先述のいずれかの組合せ、
(c)ジフテリア毒素、ボツリヌス毒素、破傷風毒素、赤痢毒素、コレラ毒素、アマニチン、アマニチン誘導体、α-アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、テトロドトキシン、ブレベトキシン、シガトキシン、リシン、AM毒素、チューブリシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、カリケアミシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキサート、ビンデシン、SG2285、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、オーリスタチン、クリプトフィシン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体及び代謝産物、リゾキシン、リゾキシン誘導体、CC-1065、CC-1065類似体若しくは誘導体、デュオカルマイシン、エンジイン抗生物質、エスペラミシン、エポチロン、アゾナフィド、アプリジン、トキソイド又は先述のいずれかの組合せ、
(d)親和性リガンドであって、基質、阻害剤、刺激剤、神経伝達物質、放射性同位体又は先述のいずれかの組合せである、親和性リガンド、
(e)放射性標識、32P、35S、蛍光色素、電子密度試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に相補的な配列を有する核酸分子、又は先述のいずれかの組合せ、
(f)免疫調節化合物、抗がん剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、抗菌剤及び抗寄生虫剤又は先述のいずれかの組合せ、
(g)タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、LY117018、オナプリストン又はトレミフェン、
(h)4(5)-イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール又はアナストロゾール、
(i)フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン又はトロキサシタビン、
(j)アロマターゼ阻害剤、
(k)タンパク質キナーゼ阻害剤、
(l)脂質キナーゼ阻害剤、
(m)アンチセンスオリゴヌクレオチド、
(n)リボザイム、
(o)ワクチン、並びに
(p)抗血管形成剤
から選択される、請求項1から37のいずれか一項に記載の複合体。 - 少なくとも1つの活性剤が、アマニチン、オーリスタチン、カリケアミシン、カンプトテシン、クリプトフィシン、ダウノマイシン、ドラスタチン、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、エポチロン、エスペラミシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、メトトレキサート、モノメチルオーリスタチンE(「MMAE」)、モノメチルオーリスタチンF(「MMAF」)、ピロロベンゾジアゼピン、リゾキシン、SG2285、チューブリシン、ビンデシン、トキソイド、又は先述のいずれか1つの誘導体である、請求項1から38のいずれか一項に記載の複合体。
- 請求項1から41のいずれか一項に記載の複合体、及び少なくとも1つの薬学的に許容される賦形剤を含む、がんの処置に使用するための医薬組成物。
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AU2022324456A1 (en) | 2021-08-05 | 2024-02-15 | Go Therapeutics, Inc. | Anti-glyco-muc4 antibodies and their uses |
CN113636931B (zh) * | 2021-08-05 | 2024-02-13 | 康龙化成(宁波)科技发展有限公司 | 基因编码化合物库起始头片段化合物及其在基因编码化合物库合成上的应用 |
CN113979889A (zh) * | 2021-11-09 | 2022-01-28 | 西安康福诺生物科技有限公司 | 一种双官能化聚乙二醇基胺的合成方法 |
WO2023107560A1 (en) * | 2021-12-07 | 2023-06-15 | The Regents Of The University Of California | Dlk1 antibodies and methods of treating cancer |
GB202203070D0 (en) | 2022-03-04 | 2022-04-20 | Iksuda Therapeutics Ltd | Anti-canag antibody conjugate |
WO2024006272A1 (en) * | 2022-06-27 | 2024-01-04 | Sutro Biopharma, Inc. | β-GLUCURONIDE LINKER-PAYLOADS, PROTEIN CONJUGATES THEREOF, AND METHODS THEREOF |
KR20240002204A (ko) * | 2022-06-27 | 2024-01-04 | 주식회사 트리오어 | 신규한 링커 화합물 및 이의 리간드-약물 접합체 |
CN115429890A (zh) * | 2022-08-04 | 2022-12-06 | 辽宁键凯科技有限公司 | 一种缀合物及用其制备的抗体药物偶联物 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014519492A (ja) | 2011-05-08 | 2014-08-14 | レゴケム バイオサイエンシズ, インク. | タンパク質−活性剤コンジュゲートおよびこれを調製するための方法 |
JP7120765B2 (ja) | 2015-11-25 | 2022-08-17 | レゴケム バイオサイエンシズ, インク. | ペプチド基を含む複合体及びそれに関連する方法 |
Family Cites Families (57)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5112739A (en) | 1988-08-02 | 1992-05-12 | Polaroid Corporation | Enzyme controlled release system |
DE19512484A1 (de) * | 1995-04-04 | 1996-10-17 | Bayer Ag | Kohlenhydratmodifizierte Cytostatika |
ES2257756T3 (es) | 1996-03-12 | 2006-08-01 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Nuevos profarmacos para la terapia de tumores y enfermedades inflamatorias. |
US6218519B1 (en) | 1996-04-12 | 2001-04-17 | Pro-Neuron, Inc. | Compounds and methods for the selective treatment of cancer and bacterial infections |
US6759509B1 (en) * | 1996-11-05 | 2004-07-06 | Bristol-Myers Squibb Company | Branched peptide linkers |
AU5159798A (en) * | 1996-11-05 | 1998-05-29 | Bristol-Myers Squibb Company | Branched peptide linkers |
JP2006510626A (ja) | 2002-12-05 | 2006-03-30 | シエーリング アクチエンゲゼルシャフト | 増殖疾患の処理における部位特異的供給のためのエポチロン類似体 |
PT2489364E (pt) | 2003-11-06 | 2015-04-16 | Seattle Genetics Inc | Compostos de monometilvalina conjugados com anticorpos |
CN101035564A (zh) | 2004-09-10 | 2007-09-12 | 惠氏公司 | 人源化的抗5t4抗体和抗5t4抗体/加利车霉素缀合物 |
SI1912671T1 (en) | 2005-07-18 | 2018-01-31 | Seattle Genetics, Inc. | Conjugates beta-glucuronide linker-drug |
CN101287500A (zh) * | 2005-08-19 | 2008-10-15 | 恩多塞特公司 | 多药物配体缀合物 |
KR20090057235A (ko) * | 2006-09-15 | 2009-06-04 | 엔존 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 | 리신계 폴리머 링커 |
CN103073641B (zh) | 2006-11-10 | 2015-01-21 | 株式会社立富泰克 | 在体内具有抗肿瘤活性的抗人Dlk-1抗体 |
CL2007003622A1 (es) | 2006-12-13 | 2009-08-07 | Medarex Inc | Anticuerpo monoclonal humano anti-cd19; composicion que lo comprende; y metodo de inhibicion del crecimiento de celulas tumorales. |
EP2188297B1 (en) | 2007-08-01 | 2012-02-01 | Council of Scientific & Industrial Research | Pyrrolo [2,1-c][1, 4] benzodiazepine-glycoside prodrugs useful as a selective anti tumor agent |
AR072804A1 (es) * | 2008-07-15 | 2010-09-22 | Genentech Inc | Conjugados derivados de antraciclina,proceso para su preparacion,composiciones farmaceuticas que los contienen y su uso como agentes antitumorales. |
EP2421899B1 (en) | 2009-04-23 | 2016-06-08 | The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services | Anti-human ror1 antibodies |
US9353140B2 (en) | 2009-11-25 | 2016-05-31 | Academia Sinica | BQC-G, a tumor-selective anti-cancer prodrug |
FR2960153B1 (fr) | 2010-05-20 | 2012-08-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux bras autoreactifs et prodrogues les comprenant |
US9591882B2 (en) | 2010-08-05 | 2017-03-14 | Robert LaGrand Duffin | Absorbent sleeve |
EP2621954A1 (en) | 2010-10-01 | 2013-08-07 | Oxford Biotherapeutics Ltd. | Anti-rori antibodies |
KR20120107741A (ko) | 2011-03-22 | 2012-10-04 | 한국생명공학연구원 | 패혈증 단백질 치료제의 효능 분석 및 스크리닝 방법 |
KR101438265B1 (ko) | 2011-04-04 | 2014-09-05 | 한국생명공학연구원 | Dlk1 특이적 인간 항체 및 이를 포함하는 약학적 조성물 |
EP2702522A4 (en) | 2011-04-29 | 2015-03-25 | Hewlett Packard Development Co | SYSTEMS AND METHOD FOR IN-STORAGE PROCESSING OF EVENTS |
CN103747807B (zh) * | 2011-07-05 | 2016-12-07 | 比奥阿赛斯技术有限公司 | P97‑抗体缀合物和使用方法 |
EP2755642B1 (en) | 2011-10-14 | 2018-07-18 | Seattle Genetics, Inc. | Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates |
US9884123B2 (en) * | 2012-01-03 | 2018-02-06 | Invictus Oncology Pvt. Ltd. | Ligand-targeted molecules and methods thereof |
JP6307519B2 (ja) | 2012-12-21 | 2018-04-04 | メドイミューン・リミテッドMedImmune Limited | ピロロベンゾジアゼピンおよびその結合体 |
ES2727134T3 (es) | 2013-03-15 | 2019-10-14 | Abbvie Deutschland | Formulaciones de conjugado de fármaco y anticuerpo anti-EGFR |
WO2014194030A2 (en) * | 2013-05-31 | 2014-12-04 | Immunogen, Inc. | Conjugates comprising cell-binding agents and cytotoxic agents |
US20160256561A1 (en) | 2013-10-11 | 2016-09-08 | Medimmune Limited | Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates |
EA201690780A1 (ru) | 2013-10-15 | 2016-08-31 | Сиэтл Дженетикс, Инк. | Пегилированные лекарственные средства-линкеры для улучшенной фармакокинетики конъюгатов лиганд-лекарственное средство |
EP3074048B1 (en) | 2013-11-26 | 2019-03-06 | Novartis AG | Methods for oxime conjugation to ketone-modified polypeptides |
KR102442906B1 (ko) | 2013-12-19 | 2022-09-14 | 씨젠 인크. | 표적화된-약물 컨쥬게이트와 함께 사용되는 메틸렌 카바메이트 링커 |
EP2913064A1 (en) | 2014-02-26 | 2015-09-02 | celares GmbH | Branched drug-linker conjugates for the coupling to biological targeting molecules |
KR101628872B1 (ko) | 2014-05-28 | 2016-06-09 | 주식회사 레고켐 바이오사이언스 | 자가-희생 기를 포함하는 화합물 |
TWI751102B (zh) | 2014-08-28 | 2022-01-01 | 美商奇諾治療有限公司 | 對cd19具專一性之抗體及嵌合抗原受體 |
CN113827737A (zh) | 2014-09-11 | 2021-12-24 | 西雅图基因公司 | 含叔胺药物物质的靶向递送 |
CA2970161A1 (en) | 2014-12-09 | 2016-06-16 | Abbvie Inc. | Bcl-xl inhibitory compounds and antibody drug conjugates including the same |
KR20160080832A (ko) | 2014-12-29 | 2016-07-08 | 주식회사 레고켐 바이오사이언스 | 리피바디 유도체-약물 복합체, 그 제조방법 및 용도 |
AR103442A1 (es) | 2015-01-16 | 2017-05-10 | Juno Therapeutics Inc | Anticuerpos y receptores de antígenos quiméricos específicos de ror1 |
EP3892305A1 (en) | 2015-01-30 | 2021-10-13 | Sutro Biopharma, Inc. | Hemiasterlin derivatives for conjugation and therapy |
WO2017051254A1 (en) | 2015-09-25 | 2017-03-30 | Legochem Biosciences, Inc. | Compositions and methods related to anti-egfr antibody drug conjugates |
WO2017051249A1 (en) | 2015-09-25 | 2017-03-30 | Legochem Biosciences, Inc. | Compositions and methods related to anti-cd19 antibody drug conjugates |
EP3362479A4 (en) | 2015-10-13 | 2019-05-15 | Eureka Therapeutics, Inc. | FOR HUMANESE CD19 SPECIFIC ANTIBODY AGENTS AND USES THEREOF |
CN113599533A (zh) * | 2015-11-25 | 2021-11-05 | 乐高化学生物科学股份有限公司 | 包含分支接头的抗体-药物缀合物及其相关方法 |
AU2016359230B2 (en) | 2015-11-25 | 2020-04-23 | Legochem Biosciences, Inc. | Conjugates comprising self-immolative groups and methods related thereto |
GB201617466D0 (en) | 2016-10-14 | 2016-11-30 | Medimmune Ltd | Pyrrolobenzodiazepine conjugates |
US20180142018A1 (en) | 2016-11-04 | 2018-05-24 | Novimmune Sa | Anti-cd19 antibodies and methods of use thereof |
KR101938800B1 (ko) | 2017-03-29 | 2019-04-10 | 주식회사 레고켐 바이오사이언스 | 피롤로벤조디아제핀 이량체 전구체 및 이의 리간드-링커 접합체 화합물 |
TWI804499B (zh) | 2017-06-23 | 2023-06-11 | 美商維洛斯生物公司 | Ror1抗體免疫接合物 |
KR20190018400A (ko) | 2017-08-14 | 2019-02-22 | 주식회사 레고켐 바이오사이언스 | EGFRvIII에 대한 항체를 포함하는 항체 약물 접합체 |
WO2019050362A2 (ko) | 2017-09-08 | 2019-03-14 | 주식회사 와이바이오로직스 | 인간 dlk1에 대한 항체 및 이의 용도 |
WO2019215510A2 (en) | 2018-05-09 | 2019-11-14 | Legochem Biosciences, Inc. | Compositions and methods related to anti-cd19 antibody drug conjugates |
WO2019225777A1 (ko) | 2018-05-23 | 2019-11-28 | 에이비엘바이오 주식회사 | 항-ror1 항체 및 그 용도 |
WO2020180121A1 (ko) | 2019-03-06 | 2020-09-10 | 주식회사 레고켐 바이오사이언스 | 인간 dlk1에 대한 항체를 포함하는 항체 약물 접합체 및 이의 용도 |
KR20210028544A (ko) | 2019-09-04 | 2021-03-12 | 주식회사 레고켐 바이오사이언스 | 인간 ror1에 대한 항체를 포함하는 항체 약물 접합체 및 이의 용도 |
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Patent Citations (2)
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---|---|---|---|---|
JP2014519492A (ja) | 2011-05-08 | 2014-08-14 | レゴケム バイオサイエンシズ, インク. | タンパク質−活性剤コンジュゲートおよびこれを調製するための方法 |
JP7120765B2 (ja) | 2015-11-25 | 2022-08-17 | レゴケム バイオサイエンシズ, インク. | ペプチド基を含む複合体及びそれに関連する方法 |
Non-Patent Citations (1)
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Angewante Communications、2015年8月、Vol.54、p.12020-12024 |
Also Published As
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