JP7287741B2 - 疲労対象の注意機能および判断機能の低下抑制用組成物 - Google Patents

Description

本発明は、疲労対象の注意機能および判断機能の低下抑制等のための組成物に関する。

現代社会においては若年層から老年層まで幅広い世代が日常的に疲労を感じているとされる。脳機能では、疲労に従って注意力の低下が起こり、脳タスクにおいてエラーが増加することが知られている（例えば、非特許文献１）。

ところで、ビール中の苦味成分の起源であるホップは、古くから民間薬としても用いられており、鎮静効果、健胃効果等の様々な健康機能が知られている。このホップから得られる抽出物を飲食品に対して一定量以上配合すると独特の強烈な苦味が生じてしまい、嗜好性を損なう恐れがあるが、ホップを酸化処理することにより、ホップ特有の苦味を抑制しつつ、その脂質代謝改善機能を維持しうることが報告されている（特許文献１）。しかし、ホップ由来成分やその酸化処理物と疲労に起因する注意機能および判断機能の低下との関係についてはこれまで報告がなされていない。

国際公開第２０１２／０８１６７５号

生物学的精神医学会誌２４（４）：２００－２１０、２０１３年

本発明者らは、今般、ホップ酸化反応産物が、ＰＯＭＳ２検査により選定された日常的に疲労を感じやすい者に対して、注意機能および判断機能の改善に有効であることを見出した。本発明はこの知見に基づくものである。

すなわち、本発明は疲労に起因する注意機能および判断機能の低下抑制等に有効な新規な組成物を提供することを目的とする。

本発明によれば以下の発明が提供される。
［１］ホップ酸化反応産物を含んでなる、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制用組成物（以下、「本発明の組成物」ということがある）および疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制剤（以下、「本発明の用剤」ということがある）。
［２］疲労した対象および／または疲労しやすい対象に摂取させるための、上記［１］に記載の組成物および用剤。
［３］食品組成物である、上記［１］または２に記載の組成物および用剤。
［４］１回摂取に適した単位包装形態である、上記［１］～［３］のいずれかに記載の組成物および用剤。
［５］ホップ酸化反応産物がＳ－フラクションである、上記［１］～［４］のいずれかに記載の組成物および用剤。
［６］Ｓ－フラクションを乾燥質量換算で１回当たりの摂取量で１～５００ｍｇで含んでなる、上記［５］に記載の組成物および用剤。

本発明によれば、疲労に起因する注意機能および判断機能の低下抑制等の機能を発揮することができるホップ酸化反応産物を含有する組成物が提供される。ホップ酸化反応産物はヒトが食品として長年摂取してきたホップ由来の成分を利用することから、本発明はヒトを含む哺乳類に安全な機能性素材として利用できる点で有利である。

図１は、参考例１におけるホップ酸化反応産物についてのＨＰＬＣ分析結果（ＨＰＬＣクロマトグラム）を示した図である。

発明の具体的説明

ホップ酸化反応産物
本発明において、ホップ酸化反応産物とは、ホップまたはその加工物（ホップペレット、ホップエキス等）を酸化処理して得られるものをいう。本発明により提供されるホップ酸化反応産物は、例えば、ホップを空気中の酸素に接触させて酸化することにより得ることができる。

ホップ酸化反応産物は、例えば、特許文献１に記載の方法に従い、ホップを酸化処理することにより製造することができる。酸化処理は、好ましくはホップを空気中で加熱することにより行われる。加熱温度は特に限定されないが、好ましい上限は１００℃であり、より好ましい上限は８０℃である。加熱温度を１００℃以下とする場合には異性化よりも酸化を優先的に進行させる上で有利である。また、好ましい加熱温度の下限は６０℃である。加熱温度を６０℃以上とする場合には酸化反応を効率的に進行させる上で有利である。また、反応期間も特に限定されるものではなく、ホップの品種や反応温度により適宜決定することができる。例えば、６０℃であれば４８～１２０時間、８０℃であれば８～２４時間が好ましい。酸化反応に付される際のホップの形態は空気中の酸素と接触できれば特に限定されるものではないが、好ましくは粉末状にすることにより、反応時間を短縮できる。

本発明においてホップは、ルプリン部を含有するものであれば任意の形態のものでよく、収穫して乾燥させる前のもの、収穫して乾燥したもの、圧縮したもの、粉砕したもの、またはペレット状に加工したもの等用いてもよいが、好ましくはホップペレットの形態である。ホップペレットは、市販品を使用してもよく、例えば、ホップ毬花を圧縮しペレット状にしたもの（Type90ペレット）、ルプリン部分が選択的に濃縮されたペレット（Type45ペレット）、または異性化処理したホップペレット（例えば、Isomerized Pellets (HopSteiner社)）等が挙げられる。

ホップエキスを酸化処理に付すことにより生成したホップエキス酸化反応物を本発明におけるホップ酸化反応産物として提供してもよい。ホップエキス酸化反応物は、例えば、特許文献１記載の方法に従い、ホップエキスを酸化処理することにより製造することができる。

ホップには、α酸（フムロン類）、β酸（ルプロン類）、イソα酸（イソフムロン類）等の酸性樹脂成分が含まれている。本発明において「フムロン類」は、フムロン、アドフムロン、コフムロン、ポストフムロン、およびプレフムロンを含む意味で用いられる。また、本発明において「ルプロン類」はルプロン、アドルプロン、コルプロン、ポストルプロンおよびプレルプロンを含む意味で用いられる。さらに、本発明において「イソフムロン類」は、イソフムロン、イソアドフムロン、イソコフムロン、イソポストフムロン、イソプレフムロン、Ｒｈｏ－イソフムロン、Ｒｈｏ－イソアドフムロン、Ｒｈｏ－イソコフムロン、Ｒｈｏ－イソポストフムロン、Ｒｈｏ－イソプレフムロン、テトラハイドロイソフムロン、テトラハイドロイソアドフムロン、テトラハイドロイソコフムロン、テトラハイドロイソプレフムロン、テトラハイドロイソポストフムロン、ヘキサハイドロイソフムロン、ヘキサハイドロイソアドフムロン、ヘキサハイドロイソコフムロン、ヘキサハイドロイソポストフムロン、ヘキサハイドロイソプレフムロンを含む意味で用いられる。なお、イソフムロン類にはシスおよびトランス立体異性体が存在するが、特に断りがない限りその両者を含む意味で用いられる。

ホップを酸化処理に付すことによりα酸、β酸、イソα酸の含有量が低減され、これら以外の成分の含有量が増加する。このようなホップ酸化反応産物の例としては、実施例１と同様のＨＰＬＣ分析を実施した場合に、酸化反応産物のうちＨＰＬＣ総ピーク面積に対するα酸、β酸およびイソα酸のピーク面積の割合が２０％以下、好ましくは１０％以下であるものが挙げられる。

本発明の酸化反応産物に含まれるα酸、β酸、イソα酸以外の成分は、ＨＰＬＣ等の周知の分析手段により容易に検出することができる。例えば、特許文献１の実施例１と同様の手順で調製されるホップ酸化反応産物には、α酸、β酸およびイソα酸以外の成分が含まれており、この成分に対応するピーク（本明細書において「Ｓ－フラクション（Ｓ－Ｆｒ）」ともいう）は生理活性を奏しうる。特許文献１における実施例１の図１Ａにおいて矢印で示される範囲のピーク（α酸、β酸のピークを除く）がＳ－フラクションに該当する。

特許文献１と同様の条件で調製したホップ酸化反応産物について実施したＨＰＬＣ分析とその結果（ＨＰＬＣクロマトグラム）は参考例１および図１に示される通りである。矢印Ａ１およびＡ２で示される範囲のピーク（α酸、β酸のピークを除く）がＳ－フラクションに該当する。ここで、図１において、矢印Ａ１およびＡ２で分画される範囲のピーク面積値は、保持時間３分から２５分までのＡ１のピーク面積値と、保持時間３２分から３９分までのＡ２のピーク面積値（α酸、β酸のピークを除く）との総和である。ここで、Ａ１における「保持時間２５分まで」とは、ｔｒａｎｓ－イソコフムロンと同定されているピークの出現までを意味する。また、図１のＡ１で分画される範囲には、保持時間９．７分付近、保持時間１１．８分付近、保持時間１２．３分付近に特徴的なピークが認められた。また、図１のＡ２で分画される範囲には、ショルダーピークが認められ、その始点が保持時間３２分付近、そのトップ点（α酸、β酸のピークを除く）は保持時間３５分～３６分付近、終点は保持時間３９分付近であった。

ホップ酸化反応産物は、好ましくはα酸酸化物、イソα酸酸化物およびβ酸酸化物を含有しており、このような酸化物として、例えば、「トリシクロオキシイソフムロン類」を含有する。ここで、「トリシクロオキシイソフムロン類」とは、トリシクロオキシイソコフムロン A（tricyclooxyisocohumulone A）（TCOIcoH A：下記式１参照、IUPAC名：(3aS,5aS,7S,8aS)-3,3a-dihydroxy-7-(1-hydroxy-1-methylethyl)-6,6-dimethyl-2-(2-methylpropanoyl)-5a,6,7,8-tetrahydro-3aH,5H-cyclopenta[c]pentalene-1,4-dione）、トリシクロオキシイソフムロン A（tricyclooxyisohumulone A）（TCOIH A：下記式２参照、IUPAC名：(3aS,5aS,7S,8aS)-3,3a-dihydroxy-7-(1-hydroxy-1-methylethyl)-6,6-dimethyl-2-(3-methylbutyryl)-5a,6,7,8-tetrahydro-3aH,5H-cyclopenta[c]pentalene-1,4-dione）、トリシクロオキシイソアドフムロン A（tricyclooxyisoadhumulone A）（TCOIadH A：下記式３参照、IUPAC名：(3aS,5aS,7S,8aS)-3,3a-dihydroxy-7-(1-hydroxy-1-methylethyl)-6,6-dimethyl-2-(2-methylbutanoyl)-5a,6,7,8-tetrahydro-3aH,5H-cyclopenta[c]pentalene-1,4-dione）を含む化合物群である。本明細書では、以下、TCOIcoH A、TCOIH AおよびTCOIadH AをまとめてＴＣＯＩＨｓＡということがある。ＴＣＯＩＨｓＡの含有量は後記実施例１に記載の方法で測定する。

ホップ酸化反応産物（好ましくはＳ－フラクション）に含まれる「トリシクロオキシイソフムロン類」以外の酸化物としては、スコルピオフムリノールＡおよびスコルピオコフムリノールＡが挙げられる。

本発明においては、ホップ酸化反応産物を水性媒体抽出物として提供してもよい。水性媒体は通常食品製造に使用されるものであれば特に限定されるものではないが、好ましくは、水またはエタノールであり、より好ましくは水である。また、抽出温度は特に限定されないが、好ましくは６０℃以下であり、抽出効率を勘案すれば、５０～６０℃がより好ましい。

本発明に使用するホップ酸化反応産物（好ましくは、ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物）は、トリシクロオキシイソフムロンＡおよびトリシクロオキシイソコフムロンＡの合計量の、スコルピオフムリノールＡおよびスコルピオコフムリノールＡの合計量に対する比率（乾燥質量換算）で特徴付けることができ、例えば、この比率が１～３０の範囲であるホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を、好ましくは、２～２０の範囲であるホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物を用いることができる。

また、本発明に使用するホップ酸化反応産物は、Ｓ－フラクションに占める TCOIHsの含有比率（乾燥質量換算）により特徴付けることができ、例えば、この含有比率が５～１５質量％、好ましくは５～１２質量％であるホップ酸化反応産物（好ましくは、ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物）を用いることができる。ホップ酸化反応産物のＳ－フラクションが図１中に示される矢印Ａ１画分の成分で主に構成される場合は、Biosci.,Biotechnol.,Biochem.,2015 (79):1684-1694記載のmatured hop bitter acidsと同様の測定法により、その含有量を測定することができる。

ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物のＢｒｉｘ値は、特に制限されないが、例えば、３以下であり、好ましくは１．５～３である。ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物は、デカンテーションまたはろ紙等により不溶性成分を除去してもよい。ホップ酸化反応産物の水性媒体抽出物はまた、活性炭処理を施してもよい。

本発明の組成物および用剤は、ホップ酸化反応産物に加えて、疲労に起因する注意機能および判断機能の低下の抑制を意図した１種または２種以上の別の成分を含んでいてもよい。疲労に起因する注意機能の低下の抑制を意図した成分としては、例えば、ヒスチジンが、疲労に起因する判断機能の低下の抑制を意図した成分としては、例えば、クロロゲン酸が、それぞれ挙げられる。

用途
後記実施例２に示されるように、ホップ酸化反応産物（好ましくは、Ｓ－フラクション）は、ＰＯＭＳ２検査により選定された日常的に疲労を感じやすい者に対して、注意機能および判断機能の改善作用を有する。従って、ホップ酸化反応産物は、疲労に起因する注意機能の低下を抑制するための、あるいは、疲労に起因する判断機能の低下を抑制するための組成物の有効成分として使用することができるとともに、疲労に起因する注意機能の低下抑制剤あるいは疲労に起因する判断機能の低下抑制剤の有効成分として使用することができる。

ここで、「注意機能」とは、意識的あるいは意図的にひとつの対象や複雑な体験のひとつのコンポーネントに心的エネルギーを集中し、他の情動的ないし思考的内容を排除する機能を意味し、集中機能を含む意味で用いられるものとする。「注意機能」は主に、集中機能・選択機能（ある刺激に焦点をあてる機能）、維持機能（一定時間注意の強度を維持する機能）、制御機能（目的を達成するために情報を選択したり、二つの刺激に同時に注意を向けたりする機能）があるとされる（日本高次脳機能障害学会編、標準注意検査法・標準意欲検査法、新興医学出版社（2008年））。すなわち、「注意機能」は、目標を達成するために必要な刺激にのみ意識を向けたり、複数の刺激に意識を振り分けたりし、それを一定時間維持する機能ともいえる。

また、「判断機能」とは、振る舞いを変容させ、不慣れな状況に対する対応を最適化する高次の機能を意味し、「実行機能」と同義である。「判断機能」は、将来の計画を立てたり、自発的に行動を変換したり、誘惑に抵抗したりする際に重要であるとされる（Sam J. G et al., Current Biology, 18(3),110-114(2008)）。「判断機能」には、情報の更新、課題ルールのシフト（思考の柔軟性）、反応の抑制が主要な要素として存在する（Miyake A. et al., Cognitive Psychology, 41(1), 49-100(2000)）。「判断機能」にはまた、「working memory」「思考の柔軟性（flexibility）」「planning」が含まれることが知られている（JOHN R HODGES「臨床家のための高次脳機能のみかた」、新興医学出版社、2011年、p24-26、ISBN978-4-88002-4、Wiebe SA. et al, Dev Psychol. 2008 Mar;44(2):575-87）。すなわち、「判断機能」は、ヒトが計画的な活動を行うために、柔軟に物事を判断したり、不要な行動を抑制したりする機能ともいえる。

本発明の組成物および用剤は、疲労した対象（疲労を感じている対象を含む）や疲労しやすい対象（疲労を感じていない対象を含む）に摂取させることができ、例えば、知的作業により疲労した対象や知的作業により疲労しやすい対象に摂取させることができる。ここで、知的作業は、注意力、集中力および／または判断力を要する知的作業であってもよい。本発明の組成物および用剤はまた、日常生活において疲労した対象または日常生活において疲労しやすい対象に摂取させることができる。なお、疲労度は、後記実施例２に記載されたＰＯＭＳ２検査により評価することができ、例えば、「疲労－無気力」スコアが被験者集団で中央値以上（例えば４３点以上）の対象を疲労を感じている対象と判定することができる。

本発明の組成物および用剤が低下抑制の目的とするところの注意機能および判断機能は、脳神経疾患により損なわれた脳機能とは区別される。すなわち、本発明の組成物および用剤は、例えば、認知症、統合失調症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋委縮性側索硬化症等の脳神経疾患に罹っていない対象や、前記脳神経疾患患者である、あるいはその恐れがあると診断されていない対象に摂取させることができる。

本発明において「機能の低下抑制」は、ある機能が低下した対象において該機能を改善することのみならず、該機能の低下のリスクがある対象において該リスクを低減することを含む意味で用いられる。すなわち、本発明の組成物および用剤は、注意機能および／または判断機能が低下した対象または注意機能および／または判断機能の低下のリスクがある対象に摂取させるか、あるいは投与することができる。ここで、「注意機能の低下のリスクがある対象」は、注意機能が低下していないが、将来において注意機能の低下の恐れがある対象を意味する。また、「判断機能の低下のリスクがある対象」は、判断機能が低下していないが、将来において判断機能の低下の恐れがある対象を意味する。また、「リスクの低減」は、注意機能や判断機能の低下を緩和することや、注意機能や判断機能の低下を予防することを含む。なお、摂取または投与対象は後述のようにヒトを含む哺乳動物である。

本発明の組成物および用剤は、医薬品（例えば、医薬組成物）、医薬部外品、食品、飼料（ペットフード含む）等の形態で提供することができ、下記の記載に従って実施することができる。

本発明の有効成分であるホップ酸化反応産物は、ヒトおよび非ヒト動物に経口投与することができる。経口剤としては、顆粒剤、散剤、錠剤（糖衣錠を含む）、丸剤、カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤が挙げられる。これらの製剤は、当分野で通常行われている手法により、薬学上許容される担体を用いて製剤化することができる。薬学上許容される担体としては、賦形剤、結合剤、希釈剤、添加剤、香料、緩衝剤、増粘剤、着色剤、安定剤、乳化剤、分散剤、懸濁化剤、防腐剤等が挙げられる。

本発明の有効成分であるホップ酸化反応産物を食品として提供する場合には、これらをそのまま食品として提供することができ、あるいはこれらを食品に含有させて提供することができる。このようにして提供された食品はホップ酸化反応産物を有効量含有した食品である。本明細書において、ホップ酸化反応産物を「有効量含有した」とは、個々の食品において通常喫食される量を摂取した場合に後述するような範囲でホップ酸化反応産物（好ましくは、Ｓ－フラクション）が摂取されるような含有量をいう。また「食品」とは、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、サプリメント、保健機能食品（例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品）、特別用途食品（例えば、幼児用食品、妊産婦用食品、病者用食品）を含む意味で用いられる。なお、本発明の有効成分であるホップ酸化反応産物をヒト以外の動物に摂取させる場合には、本発明でいう食品が飼料として使用されることはいうまでもない。

本発明の組成物および用剤並びにホップ酸化反応産物は疲労に起因する注意機能および判断機能の低下抑制作用を有するため、日常摂取する食品、さらにはサプリメントとして摂取する食品に含有させて提供することができる。この場合、本発明の組成物および用剤並びにホップ酸化反応産物は、１食当たりに摂取する量が予め定められた単位包装形態で提供することができる。１食当たりの単位包装形態としては、例えば、パック、包装、缶、ボトル等で一定量を規定する形態が挙げられる。本発明の組成物および用剤並びにホップ酸化反応産物の各種作用をよりよく発揮させるためには、後述する、ホップ酸化反応産物の１回当たりの摂取量に従って１食当たりの摂取量を決定できる。本発明の食品は、摂取量に関する説明事項が包装に表示されるか、あるいは説明事項が記載された文書等と一緒に提供されてもよい。

前述の通り、本発明の食品は、日常摂取する食品やサプリメントとして摂取する食品にホップ酸化反応産物を含有させて提供することができるが、ホップ酸化反応産物は、健康食品や機能性食品、好適には、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制を意図した１種または２種以上の他の成分を含有する食品に含有させることができる。あるいは、ホップ酸化反応産物を含有する本発明の食品には、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制を意図した１種または２種以上の他の成分がさらに添加されてもよい。疲労に起因する注意機能および判断機能の低下抑制を意図した他の成分としては前記と同様のものが挙げられる。

「食品」の形態は特に限定されるものではなく、例えば、飲料の形態であっても、半液体やゲル状の形態であってもよい。また、サプリメントとしては、ホップ酸化反応産物の乾燥粉末に賦形剤、結合剤等を加え練り合わせた後に打錠することにより製造された錠剤やタブレット、さらには、カプセル等に封入されたカプセル剤が挙げられる。

本発明で提供される食品としては、本発明の有効成分であるホップ酸化反応産物を含有する限り、特に限定されるものではないが、例えば、清涼飲料水、炭酸飲料、果汁入り飲料、野菜汁入り飲料、果汁および野菜汁入り飲料、牛乳、豆乳、乳飲料、ドリンクタイプのヨーグルト、ドリンクタイプのゼリー、コーヒー、ココア、茶飲料、栄養ドリンク、エナジー飲料、スポーツドリンク、ミネラルウォーター、ニア・ウォーター、ノンアルコールのビールテイスト飲料等の非アルコール飲料；飯類、麺類、パン類およびパスタ類等炭水化物含有飲食品；クッキー、ケーキ、チョコレート等の洋菓子類、饅頭や羊羹等の和菓子類、キャンディー類、ガム類、ヨーグルト、ゼリーやプリン等の冷菓や氷菓、スナック菓子等の各種菓子類；ウイスキー、バーボン、スピリッツ、リキュール、ワイン、果実酒、日本酒、中国酒、焼酎、ビール、アルコール度数１％以下のノンアルコールビール、発泡酒、その他雑酒、酎ハイ等のアルコール飲料；卵を用いた加工品、魚介類や畜肉（レバー等の臓物を含む）の加工品（珍味を含む）、スープ類等の加工食品、濃厚流動食等の流動食等を例示することができるが、これらに限定されるものではない。なお、ミネラルウォーターは、発泡性および非発泡性のミネラルウォーターのいずれもが包含される。

茶飲料としては、発酵茶、半発酵茶および不発酵茶のいずれもが包含され、例えば、紅茶、緑茶、麦茶、玄米茶、煎茶、玉露茶、ほうじ茶、ウーロン茶、ウコン茶、プーアル茶、ルイボスティー、ローズ茶、キク茶、イチョウ葉茶、ハーブ茶（例えば、ミント茶、ジャスミン茶）が挙げられる。

果汁入り飲料や果汁および野菜汁入り飲料に用いられる果物としては、例えば、リンゴ、ミカン、ブドウ、バナナ、ナシ、モモ、マンゴー、アサイー、ブルーベリーおよびウメが挙げられる。また、野菜汁入り飲料や果汁および野菜汁入り飲料に用いられる野菜としては、例えば、トマト、ニンジン、セロリ、カボチャ、キュウリおよびスイカが挙げられる。

本発明の有効成分であるホップ酸化反応産物はヒトが食品として長年摂取してきたホップ由来の成分を利用することから、毒性も低く、それを必要とする哺乳動物（例えば、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、サル等）に対し安全に用いることができる。ホップ酸化反応産物の摂取量または投与量は、受容者の性別、年齢および体重、症状、投与時間、剤形、投与経路並びに組み合わせる薬剤等に依存して決定できる。本発明におけるホップ酸化反応産物の成人１回当たりの摂取量および投与量（乾燥質量換算）を例示すると、０．５～１６０００ｍｇ（好ましくは０．５～８０００ｍｇ、より好ましくは０．５～４０００ｍｇ）であり、Ｓ－フラクションの成人１回当たりの摂取量および投与量（乾燥質量換算）を例示すると、０．１～２０００ｍｇ（好ましくは０．１～１０００ｍｇ、より好ましくは０．１～５００ｍｇ、特に好ましくは０．２～１００ｍｇ）である。なお、上記の本発明の有効成分であるホップ酸化反応産物の摂取量並びに下記摂取タイミングおよび摂取期間は、ホップ酸化反応産物を非治療目的および治療目的のいずれで使用する場合にも適用があり、治療目的の場合には摂取は投与に読み替えることができる。

ホップ酸化反応産物は、対象によっては上記摂取量または投与量を１日分の摂取量または投与量として１回で、あるいは数回に分けて摂取させ、あるいは投与してもよい。中長期的な効果を期待する場合には、上記量での摂取または投与を１ヶ月（好ましくは３ヶ月、より好ましくは６ヶ月）間、週に１回以上（好ましくは、３日に１回以上、より好ましくは毎日継続）とすることができる。

ホップ酸化反応産物はまた、注意機能や判断機能の低下の原因となる事象の前に、および／または、注意機能や判断機能の低下の原因となる事象の後に、対象に摂取させるか、あるいは投与することができる。摂取または投与の回数は、事象の前後それぞれにおいて、１回以上とすることができ、好ましくは３回以上、４回以上、５回以上または６回以上である。本発明において注意機能や判断機能の低下の原因となる事象は特に限定されないが、例えば、仕事による疲労、日常生活における疲労、知的作業による疲労、対人関係による疲労、運転による疲労、運動による疲労が挙げられる。

本発明の組成物および用剤並びに食品には、疲労に起因する注意機能および判断機能の低下抑制効果を有する旨の表示が付されてもよい。この場合、消費者に理解しやすい表示とするため本発明の組成物および用剤並びに食品には以下の一部または全部の表示が付されてもよい。なお、本発明において「疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制」が以下の表示を含む意味で用いられることはいうまでもない。
・疲労時でも注意力を高めたい方に
・疲労時でも集中力を高めたい方に
・疲労によりぼんやりしがちな方に
・疲労によりうっかりミスが多い方に
・疲労により集中が続かない方に
・疲労時にゆるみがちな方に
・疲労により頭が回転しない方に
・疲労により複数の作業を同時にこなせない方に
・疲労により混乱しやすい方に
・疲労により柔軟な思考が苦手になる方に
・疲労により計画立てて進めるのが苦手な方に
・疲労によらずクリアな頭を維持したい方に

本発明によれば、有効量のホップ酸化反応産物またはそれを含む組成物を、それを必要としている対象に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制方法が提供される。摂取または投与対象は、ヒトを含む哺乳動物であり、好ましくはヒトである。本発明の注意機能および／または判断機能の低下抑制方法は、本発明の組成物および用剤並びに本発明の有効成分に関する記載に従って実施することができる。

本発明によれば、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制用組成物の製造のための、または、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制剤の製造のための、ホップ酸化反応産物またはそれを含む組成物の使用が提供される。本発明によればまた、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制のための、または、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制剤としての、ホップ酸化反応産物またはそれを含む組成物の使用が提供される。本発明によればまた、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制に用いるための、ホップ酸化反応産物が提供される。本発明の使用および本発明のホップ酸化反応産物は、本発明の組成物および用剤並びに本発明の有効成分に関する記載に従って実施することができる。

本発明の方法および本発明の使用は、ヒトを含む哺乳類における使用であってもよく、治療的使用と非治療的使用のいずれもが意図される。本明細書において、「非治療的」とはヒトを手術、治療または診断する行為（すなわち、ヒトに対する医療行為）を含まないことを意味し、具体的には、医師または医師の指示を受けた者がヒトに対して手術、治療または診断を行う方法を含まないことを意味する。

以下の例に基づき本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。

参考例１：ホップペレット酸化反応産物の調製
ホップとしては、ペレット状のハラタウペルレ種（ＨＰＥ種）を用いた。このホップをミルで粉砕し、８０℃で２４時間まで加熱反応時間を保持した。得られた生成物について以下のように前処理を実施した後、ＨＰＬＣ分析に供した。

［反応物分析前処理］
採取した生成物を１０％ｗ／ｖとなるようエタノールに添加し、５０℃で１時間抽出を行った。得られた抽出液をエタノールで１０倍に希釈した。
［ＨＰＬＣ構成装置］
ホンプ：LC-10ADvp×3（SHIMADZU）
デガッサー：DGU-20A5（SHIMADZU）
システムコントローラー：CBM-20A（SHIMADZU）
オートサンプラー：SIL-20ACHT（SHIMADZU）
カラムオーブン：CTO-20AC（SHIMADZU）
フォトダイオードアレー検出器：SPD-M20A（SHIMADZU）
波形解析ソフトウェア：LCSolution（SHIMADZU）

［ＨＰＬＣ条件］
カラム：Alltima C18 2.1mm I.D. x100mm 粒子径3μm
流速：０．６ｍＬ／分
溶出溶媒Ａ：水/リン酸、1000/0.2, (v/v) + EDTA(free) 0.02%(w/v)
溶出溶媒Ｂ：アセトニトリル
溶出溶媒Ｃ：水
注入量：３μＬ
カラム温度：４０℃
検出波長：２７０ｎｍ（酸化反応産物、イソα酸、α酸、β酸）
グラジエントプログラム：

上記分析条件にて、検出波長２７０ｎｍで検出される全ピークの合計面積値（ｍＡＵ・ｍｉｎ）中のα酸、β酸、イソα酸のピークの面積値の比率（％）を算出した。波形解析にあたって、溶媒ピークやインジェクションショックによる負ピークが生じる領域は解析除外領域とした。上記生成物の分析時のＨＰＬＣクロマトグラムは図１に示される通りであった。

実施例１：ホップ酸化反応産物の調製
（１）ホップ酸化処理工程
ハラタウペルレ種（ＨＰＥ種）のホップをペレットミルで粉砕し、得られたホップ粉砕物を大気下で攪拌しながら６０℃で１２０時間程度加熱した。得られた加熱済みホップ（熟成ホップペレット）に、固形分濃度５ｗ／ｖ％となるように水に添加し、５０℃で３０分間抽出処理を行った。得られた抽出液をデカンテーションにより固液分離し、固液分離液（Ｂｒｉｘ 約２）を得た。

（２）活性炭処理工程
上記（１）で得られた固液分離液に、活性炭（Ｙ１８０Ｃ、味の素ファインケミカル社製；対固液分離液０．５ｗ／ｖ％）およびポリビニルポリピロリドン（ポリクラール１０、ＩＳＰジャパン社製；対固液分離液０．４ｗ／ｖ％）を添加して２時間静置した。得られた混合液に濾過助剤（珪藻土）を添加し、濾過処理を行い、濾液（Ｂｒｉｘ値約１．５）を得た。得られた濾液をホップ酸化反応産物水抽出物として以下の実施例で使用した。

（３）ホップ酸化反応産物の成分分析
上記（２）で得られた濾液（ホップ酸化反応産物水抽出液）について、以下の条件にてＨＰＬＣ－ＭＳＭＳ分析を行い、ホップ酸化反応産物に含まれる各種成分の含有量を測定した。なお、ホップ酸化反応産物には、α酸酸化物、イソα酸酸化物またはβ酸酸化物として、スコルピオフムリノールＡ、スコルピオコフムリノールＡ、トリシクロオキシイソフムロンＡ、トリシクロオキシイソコフムロンＡが含まれることが知られている（Biosci.,Biotechnol.,Biochem.,2015 (79):1684-1694、J.,Agric.,Food Chem., 2015:63:10181-10191）。また、分析に際して使用した標準品はJ.,Agric.,Food Chem., 2015:63:10181-10191およびJ. Nat. Prod. 2014, 77, 1252-1261に記載の方法に準じて調製した。

［ＨＰＬＣ条件］
カラム：Ｕｎｉｓｏｎ ＵＫ－Ｃ１８ １００×２ｍｍ ｉ．ｄ． 粒子径３μｍ
流速：０．２５ｍＬ／分
カラム温度：４０℃
移動相Ａ：１％ギ酸含有水
移動相Ｂ：：１％ギ酸含有アセトニトリル
注入量：３μＬ
グラジエント：０→３０分、１５→３１％Ｂ
３０→４０分、３１→８０％Ｂ
４０→４３分、８０％Ｂ
以降は、洗浄および平衡化工程

［ＭＳＭＳ条件］
質量分析装置：ＡＢ ＳＣＩＥＸ ４０００Ｑ Ｔｒａｐ
イオンソース：ＥＳＩ－ネガティブイオンモード
イオンスプレー電圧：－４５００Ｖ
分析パラメータ：

上記（１）および（２）を３回実施して濾液を得て、スコルピオフムリノールＡ、スコルピオコフムリノールＡ、トリシクロオキシイソフムロンＡおよびトリシクロオキシイソコフムロンＡの含有量を測定した結果、トリシクロオキシイソフムロンＡおよびトリシクロオキシイソコフムロンＡの合計量の、スコルピオフムリノールＡおよびスコルピオコフムリノールＡの合計量に対する比率（（トリシクロオキシイソフムロンＡ＋トリシクロオキシイソコフムロンＡ）／（スコルピオフムリノールＡ＋スコルピオコフムリノールＡ））は以下の通りであった。
ロット１：３．２
ロット２：６．８
ロット３：１２．１

以上の結果から、ホップ酸化反応産物においては、トリシクロオキシイソフムロンおよびトリシクロオキシイソコフムロンの合計量の、スコルピオフムリノールおよびスコルピオコフムリノールの合計量に対する比率は２～２０程度であることが分かった。

実施例２：ホップ酸化反応産物（特にＳ‐Ｆｒ）が注意機能および判断機能に及ぼす効果
（１）試験の概要
本試験は、プラセボを対照とした無作為化二重盲検並行群間比較試験とした。試験期間は１２週間とし、試験期間中は試験食品または対照食品を摂取させた。具体的には、脳の衰えもしくは物忘れを自覚する４５歳以上６４歳以下の認知症を有さない健康な男女に、試験食品として「ホップ酸化反応産物含有カプセル」を、対照食品として「ホップ酸化反応産物非含有カプセル」をそれぞれ摂取させて、ホップ酸化反応産物（特にＳ‐Ｆｒ）の注意機能（集中機能を含む）および判断機能に対する効果を確認した。

（２）被験者
事前検査において医師から健常と判断された者のうち、被験食品摂取開始前にＰＯＭＳ２検査によって選ばれた者を対象とした。被験者には、試験期間中は試験期間前と同様の生活を継続させた。

ＰＯＭＳ２検査はＰｒｏｆｉｌｅ ｏｆ Ｍｏｏｄ Ｓｔａｔｅｓ ２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（短縮版）（本明細書において、「ＰＯＭＳ２検査」ということがある。）に基づいて次のように行った。すなわち、被験者が感じた過去１週間の気分状態ついて合計３５問の質問に答えさせた。回答を項目ごとに「怒り－敵意」、「混乱－当惑」、「抑うつ－落込み」、「疲労－無気力」、「緊張－不安」、「活気－活力」および「友好」の７尺度について算出し、過去１週間の気分状態を評価した。各尺度の点数をＴ得点（世代平均が５０、標準偏差が１０の正規分布に近似するように変換された値）で評価したところ、「疲労－無気力」の中央値は４３点であったため、４３点以上の者を日常的に疲れを感じやすい者とみなして解析対象者とした。解析対象者の内訳は表３の通りであった。

（３）被験食品
試験期間中（１２週間）、試験食品群には３粒の試験食品を、対照食品群には３粒の対照食品を１日１回水またはぬるま湯と共に毎日摂取させた。試験食品としては、「ホップ酸化反応産物含有カプセル」（カプセル３粒中にＳ－Ｆｒを乾燥質量換算で３５ｍｇ含む）を用いた。また、対照食品としてはホップ酸化反応産物に代えて、デキストリン（パインデックス＃１００：松谷化学工業社製）を配合する以外は同様の方法によって製造した「ホップ酸化反応産物非含有カプセル」を用いた。１粒あたりの試験食品の処方は表４に示す通りである。

（４）測定
ストループ試験を、被験食品摂取開始前、摂取開始後６週時、摂取開始後１２週時の被験者の来院時に１回ずつ実施した。なお、６週時および１２週時において、被験食品の摂取は測定の開始３０分前を目安に行った。

ストループ試験では「文字が表す意味と異なる色で印刷された文字列の文字の意味」または「文字が表す意味と異なる色で印刷された文字列の文字の色」を可能な限り早く被験者に読み上げさせた。読み上げる際の時間を評価した。ストループ課題の遂行には典型的な誤った反応を抑制する能力が求められ、注意機能（集中機能を含む）や判断機能（実行機能）の指標として使用され（山内俊雄、鹿島晴雄、青木省三「精神・心理機能評価ハンドブック」、中山書店、１３３－１３５頁、２０１５年）、特にステレオタイプな反応を抑制する能力の指標として使用される。本試験においては、実測値の減少が評価項目の改善を意味する。

（５）評価と解析
各アンケート指標において、各測定時点におけるスコアを得、摂取開始後６週後または摂取開始後１２週後のスコアから、対応する摂取開始前のスコアを減じた値を変化量とした。両群の実測値および被験食品摂取前からの変化量について、ストループ試験においては２標本ｔ検定によって検定を行った。

（６）結果
結果は表５に示される通りであった。実測値と変化量はいずれもスコアの被験者の平均値±標準偏差で示している。

Ｓｔｅｐ１（黒色で書かれた赤色などの色名をそのまま答えさせる課題）、Ｓｔｅｐ２（赤色、青色または黒色で印刷されランダムに配列された丸印の色の名前を順に読み上げる課題）、Ｓｔｅｐ３（赤、青、黒の文字が各々の文字の意味と異なる色で印刷され、ランダムに配置されている文字を順に読み上げる課題）およびＳｔｅｐ４（赤、青、黒の文字が各々の文字の意味と異なる色で印刷され、ランダムに配置されている文字の色を順に読み上げる課題）のいずれにおいても、対照食品群に比して試験食品群の方の変化量が大きく減少しており、摂取開始６週目時点において、Ｓｔｅｐ１およびＳｔｅｐ２で両群の有意差が認められた（Ｐ＜０．０５）。また、摂取開始１２週目時点において、Ｓｔｅｐ３およびＳｔｅｐ４で両群の差が有意傾向であった（Ｐ＜０．１）。Ｓｔｅｐ３にかかった時間からＳｔｅｐ１にかかった時間を減じた時間の実測値についても、摂取開始１２週目時点において、試験食品摂取群が対照食品摂取群と比較して有意な改善が認められた（Ｐ＜０．０５）。

（７）結論
ＰＯＭＳ２検査の「疲労－無気力」を指標として選択された疲労を感じやすい者がホップ酸化反応産物（特にＳ－Ｆｒ）を摂取することによって、注意機能および判断機能が改善されることが示された。

Claims (5)

1. ホップ酸化反応産物を含んでなる、疲労に起因する注意機能および／または判断機能の低下抑制用組成物であって、前記疲労に起因する注意機能および／または判断機能が、ストループ試験により評価される能力であり、前記ホップ酸化反応産物がトリシクロオキシイソコフムロンＡ、トリシクロオキシイソフムロンＡ、スコルピオフムリノールＡおよびスコルピオコフムリノールＡを含むものであり、かつ、疲労した対象および／または疲労しやすい対象に摂取させるための、前記組成物。
2. トリシクロオキシイソフムロンＡおよびトリシクロオキシイソコフムロンＡの合計量の、スコルピオフムリノールＡおよびスコルピオコフムリノールＡの合計量に対する比率（乾燥質量換算）が、２～２０の範囲である、請求項１に記載の組成物。
3. 前記ストループ試験により評価される能力が、典型的な誤った反応を抑制する能力またはステレオタイプな反応を抑制する能力である、請求項１または２に記載の組成物。
4. 食品組成物である、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
5. １回摂取に適した単位包装形態である、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。

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