JP7228367B2 - ルミノコッカス属細菌の菌数抑制剤 - Google Patents
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Description
ルミノコッカス・グナバス;配列番号1および10
ルミノコッカス・ラクタリス;配列番号2および11
ルミノコッカス・プロダクタス;配列番号3および12、配列番号4および13
ルミノコッカス・トロクエス;配列番号5および14
ルミノコッカス・ハイドロジェノトロフィクス;配列番号6および15
ルミノコッカス・スチンキ;配列番号7および16
ルミノコッカス・ハンセニー;配列番号8および17
ルミノコッカス・オベウム;配列番号9および18
(1)1-ケストースを主成分とする錠剤の調製
1-ケストース(純度98質量%以上;物産フードサイエンス)1000gおよびステアリン酸カルシウム10gをよく混合した後、連続打錠機に供して打錠することにより、直径10mm、重量505mgの錠剤2000錠(1-ケストース含有量500mg/1錠)を得た。
試験期間を10週間として、4頭のネコ(体重2.4~3.6kg)に、本実施例1(1)の錠剤を1日当たり2錠(1日当たりの1-ケストース摂取量が1000mg)摂取させながら8週間飼育した。その後、経過観察の為に、錠剤を摂取させずに2週間飼育した。試験開始時、試験開始から4週後、8週後、および10週後(試験終了時)に、採便容器スプーン型キットを用いて糞便を採取し、-80℃で凍結保存した。
〈Shunsuke Takahashiら、PLosONE、第9巻、第8号、e105592、2014年8月:参考文献1〉に記載の方法に従って、本実施例1(2)の糞便から総DNAを抽出した。具体的には、まず、4Mのグアニジンチオシアネート、100mMのトリスHCl(pH9.0)および40mMのEDTAを含む水溶液に、氷上で融解した糞便100mgを懸濁し、FastPrep FP100A(MP Biomedicals)を用いてジルコニアビーズで粉砕して懸濁液を得た。Magtration System 12GC(Precision System Science)およびGC series MagDEA DNA 200(Precision System Science)を用いて、この懸濁液からDNAを抽出した。DNAの濃度を分光測光器ND-1000(NanDrop Technologies)を用いて測定し、10ng/μLとなるように調製して、これを糞便由来総DNAとした。
上記参考文献1に記載の方法に従い、本実施例1(2)の糞便に含まれる細菌の種類と存在比率の網羅的解析を行った。すなわち、まず、本実施例1(3)の糞便由来総DNAを鋳型として、下記配列番号19および20のユニバーサルプライマーを用いてDual-index法(Hisada Takayoshiら、Arch Microbiol、197巻、第7号、第919‐34頁、2015年6月)によりポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を行い、細菌由来の16S rDNAを増幅した。
フォワードプライマー(341f):CCTACGGGAGGCAGCAG(配列番号19)
リバースプライマー(R806):GGACTACHVGGGTWTCTAAT(配列番号20)
Claims (4)
- 1-ケストースからなる、腸内のルミノコッカス属細菌の菌数抑制剤。
- ネコにおけるルミノコッカス属細菌の菌数を抑制するために用いられる、請求項1に記載の菌数抑制剤。
- 1-ケストースからなる、腸内のルミノコッカス属細菌の菌数抑制用食品組成物。
- 1-ケストースからなる、腸内のルミノコッカス属細菌の菌数抑制用動物用飼料。
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Title |
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Anaerobe,2018年05月05日,Vol.51,p.110-119 |
Biological Psychiatry,2017年,Vol.82, No.7,p.472-487 |
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