JP7151218B2 - 細胞構築物の製造方法、担体、および担体の製造方法 - Google Patents
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Description
本開示の細胞構築物の製造方法は、一部のみに形成された磁性部を有する培養用担体を複数準備する工程(A)と、磁場を印加して複数の培養用担体を容器内で配列する工程(B)と、容器内で、培養用担体が配列した状態を維持して、培養用担体に保持させた細胞20を培養する工程(C)とを含む。このように、一部のみに磁性部を有する培養用担体に磁場を印加すれば、容器内で培養用担体を所望の形状に配列することができる。そして、培養用担体を配列させた状態で培養用担体に保持させた細胞を培養すれば、シート状、管状、球状などの所望の形状に組織化させた細胞構築物を構築することができる。また、担体に細胞を保持させる操作および磁場を用いて担体を配列させる操作は、容易かつ細胞侵襲性の低い操作であるので、この細胞構築物の製造方法では、細胞塊を針に刺して配列したり、細胞自身に磁性を付したりする場合と比較し、ハイスループットかつ低侵襲で細胞構築物を製造することができる。また、本実施形態においては、培養用担体を配列する工程(B)の前に、細胞保持担体を含む培養用担体を複数準備することで、異なる細胞種の細胞を保持させた2種類以上の培養用担体を用いることや、異なる細胞比率で細胞を保持させた2種類以上の培養用担体を用いることが容易となる。
(1)細胞保持担体を含む培養用担体を複数準備する工程(A)と、磁場を印加して複数の培養用担体を容器内で配列する工程(B)と、容器内で、培養用担体が配列した状態を維持して、培養用担体に保持させた細胞を培養する工程(C)とを含む製造方法(実施形態1)と、
(2)細胞未保持担体を含む培養用担体を複数準備する工程(A)と、磁場を印加して複数の培養用担体を容器内で配列する工程(B)と、配列された培養用担体の細胞保持部に細胞を保持させる工程(b3)と、容器内で、培養用担体が配列した状態を維持して、培養用担体に保持させた細胞を培養する工程(C)とを含む製造方法(実施形態2)と、
に分けて説明する。
図1及び図7(A)に、細胞構築物の製造方法の流れの一例を示す。図示例においては、まず、培養容器40(容器)内に、細胞保持担体30を含む培養用担体を複数準備する(工程(A))。次に、培養容器40の底部に、培養容器40の外側下方から磁石50を近づけることによって磁場51を印加して、複数の細胞保持担体30を含む複数の培養用担体を培養容器40内で配列する(工程(B))。その後、培養容器40内で、細胞保持担体30を含む培養用担体が配列した状態を維持して、細胞保持担体30の細胞保持部11に保持させた細胞20を培養する(工程(C))。培養によって、細胞間接着がおこり、複数の細胞20が接着した細胞構築物100が得られる。そして、磁石50を培養容器40の底部から遠ざけることによって、得られた細胞構築物100を、培養容器40の底面42から剥離し、回収する。以下、各工程の詳細について説明する。
工程(A)では、細胞保持担体30を含む培養用担体を複数準備する。具体的には、工程(A)の一例では、図1に示すように、磁性部12および細胞保持部11を有する担体(細胞未保持担体)10を複数準備し、担体10を培養容器40内で液体培地等の細胞適合性のある液体に懸濁させて担体懸濁液を作成する。次に、担体10の懸濁液に対して、液体培地に細胞を懸濁させた細胞懸濁液21を添加し、細胞保持部11に細胞20を保持させ、細胞保持担体30とする。
ここで、担体10としては、特に限定されることなく、一部のみに形成された磁性部12と、細胞20を保持させる細胞保持部11とを有する担体を用いることができる。磁性部12が一部のみに位置することにより、担体10の全体が磁性部12である場合と異なり、工程(B)において、磁場51の印加により、培養用担体を特定の向きで配列することが容易である。よって、複雑な構造の細胞構築物100を効率よく製造することができる。即ち、担体10を用いることにより、方向性が重要な構造を有する細胞構築物100を、好適に製造することができる。また、担体10を用いることにより、細胞20に直接磁性を付与する必要がないから、細胞への侵襲性も低い。
一実施形態の工程(A)では、例えば培養容器40内で、担体10を細胞適合性のある液体に懸濁させて担体懸濁液を得る。ここで、細胞適合性のある液体としては、リン酸緩衝生理食塩水等の緩衝液やイーグル最小必須培地等の液体培地等を用いることができる。また、細胞適合性のある液体中に担体10を懸濁させる方法としては、撹拌、超音波分散、エアレーション等を用いることができる。
細胞懸濁液21は、上述した細胞を、細胞適合性のある液体に懸濁させて得ることができる。ここで、細胞適合性のある液体としては、市販の液体培地等を用いることができる。また、細胞適合性のある液体中に細胞を懸濁させる方法としては、撹拌、超音波分散、エアレーション等を用いることができる。
一実施形態の工程(A)では、担体懸濁液と細胞懸濁液21とを例えば培養容器40内で接触させて担体10の細胞保持部11に細胞20を保持させ、細胞保持担体30を得る。細胞20を保持させる条件は、細胞20に影響がない条件とすることが好ましく、例えば、ヒト細胞であれば、37℃以下の温度条件とすることが好ましい。細胞懸濁液21中の細胞濃度は、細胞保持部11と細胞20の接着性により決定すればよく、接着性が低い場合は、細胞濃度が高い方が好ましい。また、細胞20の増殖能力が高ければ、細胞懸濁液21中の細胞濃度は低くても良い。
なお、一実施形態で使用する容器の形態は、特に限定されず、一般的な培養容器40であり得る。好ましくは、培養容器40の内面は、細胞20が付着し難い材料からなる。培養容器40の内面が、細胞20が付着し難い材料からなることによって、培養容器40の内面の所望しない部分に細胞20および細胞保持担体30が付着することを防ぐことができる。
工程(B)では、磁場51を印加して複数の培養用担体を培養容器40内で配列する。具体的には、工程(B)では、例えば培養容器40の外側下方から磁石50を近づけることによって磁場51を印加し、担体10の磁性部12を磁場51が印加されている部分に誘引させて、複数の細胞保持担体30を含む複数の培養用担体を培養容器40内で配列する。
工程(C)では、培養容器40内で、培養用担体が配列した状態を維持して、培養用担体の細胞保持部11に保持させた細胞20を培養する。培養によって、近傍の培養用担体の細胞保持部11に保持された細胞20の間で細胞間接着がおこる。結果として、細胞保持部11に保持された細胞20が互いに接着した細胞構築物100が得られる。
そして、工程(C)では、例えば球状、柱状などの立体的な細胞構築物100の他、シート状の平面的な細胞構築物100も製造することができる。また、たとえば皮膚組織のように、平面的で、ところどころ汗腺および毛穴などの立体的な構造を含む細胞構築物100も好適に製造することができる。
細胞構築物の製造方法は、工程(C)の後に、磁性部12を細胞構築物100から除去する工程(D)を、さらに含んでいてもよい。磁性部12を細胞構築物100から除去することにより、より細胞20以外の物質が少ない細胞構築物100を製造することができる。製造した細胞構築物100をNMRで測るなど、磁場が関連する用途に細胞構築物100を用いる場合には、工程(D)によって、磁性部12を除去することが好ましい。
また、細胞構築物の製造方法は、担体10を細胞構築物100から除去する工程(E)を、さらに含んでいてもよい。担体10を細胞構築物100から除去することにより、細胞構築物100中で、担体10が占めていた部分が空洞となる。よって、例えば空隙が多く酸素透過性の高い細胞構築物100など、複雑な構造の細胞構築物100を製造することができる。また、担体10を細胞構築物100から除去することにより、より細胞20以外の物質が少ない細胞構築物100を製造することができる。一例において、酵素で分解できる材料で担体10を形成し、細胞構築物100の製造後に酵素処理により担体10を分解することによって、担体10を除去する。あるいは、担体10の細胞保持部11に温度などの刺激に対して応答する刺激応答性ポリマー層を形成しておき、細胞構築物100の製造後に温度などの刺激を与えて、細胞20と担体10とを分離してもよい。また、酸化還元反応を利用して、担体10を分解させることにより、細胞構築物100から除去してもよい。好ましくは担体10の除去は、細胞20への有害性が低いことから、担体10を酵素により分解すること、または、刺激応答性ポリマーにより表面修飾された担体10へ外部刺激を加えることにより担体10と細胞構築物100とを分離することによって行う。図5(B)は、工程(E)の一例を示す概要図である。図5(B)の例では、担体10は主にコラーゲンから製造されている。培養終了後、培地41に対し、コラーゲン分解酵素を添加し、反応させる。コラーゲン分解酵素が担体10を分解することによって、担体10が細胞構築物100から除去され、空隙が多く酸素透過性の高い細胞構築物100'が得られる。なお、コラーゲン分解酵素の添加および反応は、磁場51を印加したまま行っても、磁場51を印加せずに行ってもよい。
図7(B)に、細胞構築物の製造方法の流れの他の例を示す。なお、担体10、担体懸濁液、細胞20、細胞懸濁液21および培養容器40としては、実施形態1と同様のものが挙げられるので、以下では説明を省略する。
工程(A)では、磁性部12および細胞保持部11を有する担体10(細胞未保持担体)を含む培養用担体を複数準備する。
工程(B)は、細胞未保持担体10を含む培養用担体を配列させる以外は上述した実施形態1の工程(B)と同様にして行うことができる。
工程(C)では、配列された培養用担体の細胞保持部11に細胞20を保持させた後(工程(b3))で、培養容器40内で、培養用担体が配列した状態を維持して、培養用担体に保持させた細胞20を培養する。
上述した本開示の細胞構築物の製造方法に使用し得る担体10は、特に限定されることなく、本開示の担体の製造方法を用いて好適に製造することができる。
一実施形態に係る細胞構築物の製造用キットは、一部のみに形成された磁性部12と、細胞20を保持させる細胞保持部11とを有する担体10、並びに、当該担体10の細胞保持部11に細胞20を保持させてなる細胞保持担体30の少なくとも一方を含む培養用担体を含む。当該製造用キットを用いることにより、本開示の一実施形態に係る細胞構築物の製造方法を、簡便に実施することができる。この他、一実施形態に係る細胞構築物の製造用キットは、キットの取り扱い説明書、培養容器40、磁場印加器、細胞適合性のある液体からなる群から選ばれる少なくとも一つを含む。細胞構築物の製造用キットは、取り扱い説明書の代わりに、取り扱い説明書をサーバからダウンロードする方法を記載した書面を含んでいてもよい。
11 細胞保持部
12、12e、12f 磁性部
20 細胞
21 細胞懸濁液
30 細胞保持担体
40 培養容器
42 底面
43e、43f 嵌合部
50 磁石
51 磁場
60a、60b 係合部
70 領域
100、100' 細胞構築物
Claims (15)
- 磁性部と、細胞を保持させる細胞保持部とを有する担体、並びに、当該担体の細胞保持部に細胞を保持させてなる細胞保持担体の少なくとも一方を含む培養用担体を複数準備する工程(A)と、
磁場を印加して複数の前記培養用担体を容器内で配列する工程(B)と、
前記容器内で、前記培養用担体が配列した状態を維持して、前記培養用担体の前記細胞保持部に保持させた細胞を培養する工程(C)と、
を含む、細胞構築物の製造方法であって、
前記担体は、柱状で、高さ方向中央よりも一端側のみに前記磁性部を有し、前記細胞保持部は、高さ方向に延在している、細胞構築物の製造方法。 - 前記工程(B)は、前記容器に対して振動を加える工程(b1)を含む、請求項1に記載の細胞構築物の製造方法。
- 前記工程(B)において、前記磁場を印加したまま前記振動のオンオフを切り替える、請求項2に記載の細胞構築物の製造方法。
- 前記工程(B)では、振動を加えているときの磁場の磁束密度を振動を加える前の磁場の磁束密度よりも小さくする、請求項2または3に記載の細胞構築物の製造方法。
- 前記工程(B)は、未配列の培養用担体を除去する工程(b2)を含む、請求項1から4のいずれか1項に記載の細胞構築物の製造方法。
- 前記培養用担体を二種類以上用いる、請求項1から5のいずれか1項に記載の細胞構築物の製造方法。
- 前記二種類以上の培養用担体間で、少なくとも一部の特性が互いに異なり、該培養用担体どうしは、該特性により、互いに親和性または反発性を有する、請求項6に記載の細胞構築物の製造方法。
- 複数の前記培養用担体は、互いに係合する係合部を有し、
前記工程(B)において、複数の前記培養用担体を、前記係合部どうしを係合させて配列させる、請求項1から7のいずれか1項に記載の細胞構築物の製造方法。 - 前記容器は、前記培養用担体が嵌合する嵌合部を有し、
前記工程(B)では、前記培養用担体を前記嵌合部に嵌合させて配列させる、請求項1から8のいずれか1項に記載の細胞構築物の製造方法。 - 前記磁性部を前記細胞構築物から除去する工程(D)を含む、請求項1から9のいずれか1項に記載の細胞構築物の製造方法。
- 前記担体を前記細胞構築物から除去する工程(E)を含む、請求項1から10のいずれか1項に記載の細胞構築物の製造方法。
- 前記工程(B)では、前記容器内の互いに離隔した複数の領域に前記磁場を印加し、複数の前記培養用担体を該複数の領域内で配列する、請求項1から11のいずれか1項に記載の細胞構築物の製造方法。
- 細胞を保持する細胞保持部と、磁性部とを有し、
前記磁性部が一端部のみに位置する、担体。 - 前記磁性部は、磁性粒子を含有するゾルを含む層を有する、請求項13に記載の担体。
- 請求項13または14に記載の担体を製造する方法であって、
型中に、磁性粒子を含有するゾルを含む層と、細胞保持性を有するゾルを含む層とを形成する工程と、
前記型中で前記ゾルを固化させる工程と、
を含む、担体の製造方法。
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Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004313007A (ja) | 2003-04-10 | 2004-11-11 | Pentax Corp | 細胞培養担体、細胞培養方法および細胞培養装置 |
JP2013505728A (ja) | 2009-09-25 | 2013-02-21 | エヌ3ディー バイオサイエンスィズ,インコーポレイテッド | 細胞を磁性化するための材料及び磁気操作 |
JP2017510254A (ja) | 2014-02-26 | 2017-04-13 | ブリガム・アンド・ウイミンズ・ホスピタル・インコーポレイテッド | 磁気自己組織化のためのシステム及び方法 |
Family Cites Families (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4517125A (en) | 1983-02-03 | 1985-05-14 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Novel vitamin D3 derivatives and process for producing the same |
JP4666335B2 (ja) * | 2002-09-04 | 2011-04-06 | 晶夫 岸田 | 機械的振動による生物機能の制御方法とその装置 |
EP1605038A4 (en) * | 2003-03-18 | 2006-08-02 | Hiroyuki Honda | CELL CULTURE METHOD AND CELL LAYER |
DE10335130A1 (de) * | 2003-07-31 | 2005-02-24 | Blue Membranes Gmbh | Immobilisierung von Katalysatoren auf porösen Körpern auf Kohlenstoffbasis |
JP2004313008A (ja) | 2003-04-10 | 2004-11-11 | Pentax Corp | 細胞培養方法および細胞培養装置 |
US20040248291A1 (en) | 2003-04-10 | 2004-12-09 | Pentax Corporation | Method for culturing cells, cell culture carriers and cell culture apparatus |
CN1788080A (zh) * | 2003-05-14 | 2006-06-14 | 株式会社日本组织工程 | 细胞培养方法及培养的组织 |
US20090137018A1 (en) * | 2003-06-30 | 2009-05-28 | University Of South Florida | Magnetic three-dimensional cell culture apparatus and method |
WO2005003332A2 (en) | 2003-06-30 | 2005-01-13 | University Of South Florida | Diamagnetically stabilised three-dimensional cell culture |
EP1654529A4 (en) * | 2003-07-08 | 2006-12-20 | Univ Johns Hopkins | METHOD AND MAGNETIC MICROARRAY SYSTEM FOR CATCHING AND MANIPULATING CELLS |
WO2005010139A2 (en) | 2003-07-23 | 2005-02-03 | University Of South Florida | Ferromagnetic cell and tissue culture microcarriers |
DE102004009985A1 (de) * | 2004-03-01 | 2005-09-22 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Magnetische Manipulation von biologischen Proben |
US20090305089A1 (en) * | 2006-07-14 | 2009-12-10 | Akermin, Inc. | Organelles in bioanodes, biocathodes, and biofuel cells |
US7993525B2 (en) * | 2006-12-29 | 2011-08-09 | Intel Corporation | Device and method for particle complex handling |
JP4517125B2 (ja) | 2007-03-30 | 2010-08-04 | 国立大学法人九州大学 | 細胞の立体構造体の製造方法 |
ES2707852T3 (es) | 2008-09-25 | 2019-04-05 | Univ Texas | Sistemas y métodos para el guiado magnético y diseño (patterning) de células y materiales |
JP5407345B2 (ja) * | 2009-01-13 | 2014-02-05 | 大日本印刷株式会社 | 生体組織の作製方法 |
US9518249B2 (en) * | 2010-12-16 | 2016-12-13 | General Electric Company | Cell carrier, associated methods for making cell carrier and culturing cells using the same |
US11332704B2 (en) * | 2013-07-09 | 2022-05-17 | Universal Bio Research Co., Ltd. | Culture device, culture system, and culture method |
EP2995381A1 (en) * | 2014-09-09 | 2016-03-16 | Roche Diagniostics GmbH | Set of sample container carriers for a laboratory sample distribution system, laboratory sample distribution system and laboratory automation system |
EP3212761A1 (en) | 2014-10-29 | 2017-09-06 | Corning Incorporated | Microwell design and fabrication for generation of cell culture aggregates |
JP6510663B2 (ja) * | 2015-09-30 | 2019-05-08 | 富士フイルム株式会社 | シート状細胞構造体の製造方法及びシート状細胞構造体 |
JP6872920B2 (ja) | 2017-02-06 | 2021-05-19 | 日立造船株式会社 | サクション基礎 |
-
2018
- 2018-07-04 JP JP2018127773A patent/JP7151218B2/ja active Active
-
2019
- 2019-05-09 WO PCT/JP2019/018605 patent/WO2020008723A1/ja active Application Filing
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- 2019-05-09 EP EP19829840.8A patent/EP3819374A4/en active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004313007A (ja) | 2003-04-10 | 2004-11-11 | Pentax Corp | 細胞培養担体、細胞培養方法および細胞培養装置 |
JP2013505728A (ja) | 2009-09-25 | 2013-02-21 | エヌ3ディー バイオサイエンスィズ,インコーポレイテッド | 細胞を磁性化するための材料及び磁気操作 |
JP2017510254A (ja) | 2014-02-26 | 2017-04-13 | ブリガム・アンド・ウイミンズ・ホスピタル・インコーポレイテッド | 磁気自己組織化のためのシステム及び方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
TASOGLU, S., et al.,Guided and magnetic self-assembly of tunable magnetoceptive gels,Nature Communications,2014年09月01日,Vol. 5, No. 4702,DOI: 10.1038/ncomms5702 |
井藤彰,他,機能性磁性ナノ粒子を用いた三次元組織構築技術,Yakugaku Zasshi,2008年01月,Vol. 128(1),p. 21-28 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
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