JP7109827B1 - 抗ウイルス剤 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の一形態は、ロジン、コパールおよびセラックの少なくとも一つを含む、抗ウイルス剤である。
本発明の一形態は、上述の抗ウイルス剤と、溶媒とを含む、抗ウイルス性組成物である。本発明に係る抗ウイルス性組成物は、必要に応じて植物油、その他の成分などをさらに含むことができる。
本発明に係る抗ウイルス剤および抗ウイルス性組成物は、抗ウイルス性を対象に付与する用途で使用することができる。すなわち、本発明の一実施形態は、対象に抗ウイルス性を付与する方法であって、上述の抗ウイルス剤または抗ウイルス性組成物を、対象に含ませることまたはその表面に付着させることを有する方法に関する。
本発明の一実施形態は、上述の抗ウイルス性組成物を用いて形成される抗ウイルス性膜に関する。抗ウイルス性膜は、例えば抗ウイルス性組成物を対象に塗布して硬化させることにより形成することができる。
本発明の一実施形態は、抗ウイルス性膜を表面の少なくとも一部(例えば、ヒトが触れる部分)に有する、抗ウイルス性物品に関する。
下記の手法により、実施例の組成物を調製した。各実施例における各原料の配合量を下記の表1に示す。また、各実施例における各構成成分の配合量を下記の表2に示す。
ガムロジン(LAWTER ARGENTINA S.A.製)13.0質量%、30質量%コパールエタノール溶液43.3質量%、ラックコート50EDS(50質量%セラックエタノール溶液)(日本シェラック工業株式会社製)2.0質量%、および特定アルコール99度1級発酵無変性(無水エタノール)(甘糟化学産業株式会社製)41.7質量%を撹拌機にてよく混合溶解し、均一な溶液の組成物を得た。
ガムロジン(LAWTER ARGENTINA S.A.製)10.0質量%、ラックコート50EDS(50質量%セラックエタノール溶液)(日本シェラック工業株式会社製)20.0質量%、および特定アルコール99度1級発酵無変性(無水エタノール)(甘糟化学産業株式会社製)70.0質量%を撹拌機にてよく混合溶解し、均一な溶液の組成物を得た。
ガムロジン(LAWTER ARGENTINA S.A.製)13.0質量%、30質量%コパールエタノール溶液43.3質量%、ラックコート50EDS(50質量%セラックエタノール溶液)(日本シェラック工業株式会社製)2.0質量%、オリーブ油 リファインド(DSP五協フード&ケミカル株式会社製)2.0質量%、および特定アルコール99度1級発酵無変性(無水エタノール)(甘糟化学産業株式会社製)39.7質量%を撹拌機にてよく混合溶解し、均一な溶液の組成物を得た。
ガムロジン(LAWTER ARGENTINA S.A.製)13.0質量%、および特定アルコール99度1級発酵無変性(無水エタノール)(甘糟化学産業株式会社製)87.0質量%を撹拌機にてよく混合溶解し、均一な溶液の組成物を得た。
30質量%コパールエタノール溶液43.3質量%、および特定アルコール99度1級発酵無変性(無水エタノール)(甘糟化学産業株式会社製)56.7質量%を撹拌機にてよく混合溶解し、均一な溶液の組成物を得た。
ラックコート50EDS(50%セラックエタノール溶液)(日本シェラック工業株式会社製)20.0質量%、および特定アルコール99度1級発酵無変性(無水エタノール)(甘糟化学産業株式会社製)80.0質量%を撹拌機にてよく混合溶解し、均一な溶液の組成物を得た。
以下の試験において、無水エタノールとして特定アルコール99度1級発酵無変性(無水エタノール)(甘糟化学産業株式会社製)を使用した。細胞維持細胞として、Sigma-Aldrich社製 codeM4655 Minimum Essential Medium Eagle(0.2%ゲンタマイシン添加)を使用した。
・試験資材
1:実施例1の組成物
2:実施例2の組成物
各資材は等量の無水エタノールに溶解し、1辺5cmの大きさにカットしたプラスチック(ポリスチレン)片に、各1mL(各資材として0.5mL)を滴下後、コンラージで均一に広がるように塗布した。その後、開放条件で約3時間乾燥させ、エタノール分を蒸発させて、試験片とした。
試験ウイルス:豚流行性下痢(PED)ウイルス P-5V株
宿主細胞:vero細胞(アフリカミドリザルの腎臓上皮由来株化細胞)
(1)試験ウイルスをvero細胞シートに接種した;
(2)37℃で1時間吸着後、接種ウイルス液を除去し、滅菌PBSで2回洗浄した;
(3)細胞維持培地を加え、37℃、5%CO2下で培養した;
(4)70~80%程度の細胞変性が観察された時点で、培養上清を回収した;
(5)回収した培養上清を、3000rpmで30分間遠心分離後、遠心上清を分注し、-70℃以下で保存したものを試験ウイルス液とした。
試験実施前に、後述の試験方法と同様の処理を行った試験資材塗布試験片を、細胞維持培地10mLで洗い出した後、さらに10倍段階希釈し、各希釈液を培養細胞に接種し、37℃、5%CO2下で5日間培養した。培養細胞が正常な形状を示さなかった場合、資材による細胞毒性有りと判定し、本試験では細胞毒性が確認された希釈倍率を試験から除外した。
(2)上記保管経過後の試験片の被覆フィルムを剥がし、試験ウイルス液を0.2mL添加して、再度被覆フィルムを被せて、乾燥しないよう密閉容器に入れて反応開始とした;
(3)試験設定に従い室温下で6時間静置し反応時間とした;
(4)感作時間経過後、被覆フィルムごと滅菌バックに移し、細胞維持培地10mLを添加しよく混合してウイルスを洗い出した;
(5)洗い出し液について、さらに細胞維持培地で10倍段階希釈を行い、希釈液を96wellマイクロプレートの培養細胞に接種し、5%CO2ガス存在下で37℃、5日間培養した;
(6)培養後のCPE(細胞変成効果)の有無又は培養上清の1%鶏赤血球凝集反応の有無から、ウイルス力価(ウイルス感染価)(TCID50)を測定した。
試験結果において、検査時点ごとに、対照区に対する試験区の減少率(%)を算出し、効果を確認した。
・試験資材
1:実施例2の組成物
2:実施例3の組成物
各資材は等量の無水エタノールに溶解し、25cm2平底フラスコ底面(ポリスチレン製)に、各1mL(各資材として0.5mL)を滴下後、均一に広がるように塗布した。その後、キャップを閉じずに約12時間乾燥させ、エタノール分を蒸発させて試験片とした。試験例2では、エタノールの影響を除去するため、乾燥時間を試験例1より長く設定した。
試験ウイルス:Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2)
宿主細胞:vero細胞(アフリカミドリザルの腎臓上皮由来株化細胞)
なお、試験ウイルスは、ヒト由来分離株である。ヒト唾液よりvero細胞を用いて分離培養後、リアルタイムPCRを用いてSARS-CoV-2遺伝子の増幅の確認(厚生労働省通知法)を行ったウイルス株を使用した。
(2)37℃で1時間吸着後、接種ウイルス液を除去し、滅菌PBSで2回洗浄した;
(3)細胞維持培地を加え、37℃、5%CO2下で培養した;
(4)70~80%程度の細胞変性が観察された時点で、培養上清を回収した;
(5)回収した培養上清を、3000rpmで30分間遠心分離後、遠心上清を分注し、-70℃以下で保存したものを試験ウイルス液とした。
試験実施前に、後述の試験方法と同様の処理を行った試験資材塗布試験片を、細胞維持培地10mLで洗い出した後、さらに10倍段階希釈し、各希釈液を培養細胞に接種し、37℃、5%CO2下で5日間培養した。培養細胞が正常な形状を示さなかった場合、資材による細胞毒性有りと判定し、本試験では細胞毒性が確認された希釈倍率を試験から除外した。
試験結果において、検査時点ごとに、対照区に対する試験区の抗ウイルス活性値及び減少率を算出し、効果を確認した。
・試験資材
1:実施例3の組成物
資材は等量の無水エタノールに溶解し、25cm2平底フラスコ底面(ポリスチレン製)に、1mL(資材として0.5mL)を滴下後、均一に広がるように塗布した。その後、キャップを閉じずに約12時間乾燥させ、エタノール分を蒸発させて試験片とした。試験例3では、エタノールの影響を除去するため、乾燥時間を長く設定した。
試験例2と同様の方法により、試験ウイルス液を調製した。
試験実施前に、後述の試験方法と同様の処理を行った試験資材塗布試験片を、細胞維持培地10mLで洗い出した後、さらに10倍段階希釈し、各希釈液を培養細胞に接種し、37℃、5%CO2下で5日間培養した。培養細胞が正常な形状を示さなかった場合、資材による細胞毒性有りと判定し、本試験では細胞毒性が確認された希釈倍率を試験から除外した。
試験例2と同様にして、抗ウイルス活性値及び減少率(%)を算出した。結果を表8に示す。
・試験資材
1:実施例4の組成物
2:実施例5の組成物
3:実施例6の組成物
各資材は等量の無水エタノールに溶解し、25cm2平底フラスコ底面(ポリスチレン製)に、各1mL(各資材として0.5mL)を滴下後、均一に広がるように塗布した。その後、キャップを閉じずに約12時間乾燥させ、エタノール分を蒸発させて試験片とした。試験例4では、エタノールの影響を除去するため、乾燥時間を長く設定した。
試験例2と同様の方法により、試験ウイルス液を調製した。
試験例3と同様の方法により、試験ウイルス液の接種およびウイルス感染価の測定を行った。
試験例2と同様にして、抗ウイルス活性値及び減少率(%)を算出した。結果を表10に示す。
Claims (11)
- コパールまたはセラックの少なくとも一つからなる、抗ウイルス剤。
- コパールまたはセラックの少なくとも一つと、ロジンと、からなる、抗ウイルス剤。
- 前記ロジンおよび前記セラックからなる、請求項2に記載の抗ウイルス剤。
- 前記ロジン1.0質量部に対して、前記セラックを0.02~2.0質量部含む、請求項3に記載の抗ウイルス剤。
- 前記ロジン、前記コパールおよび前記セラックからなる、請求項2~4のいずれか1項に記載の抗ウイルス剤。
- 前記ロジン1.0質量部に対して、前記コパールを0.02~2.0質量部含み、前記セラックを0.02~2.0質量部含む、請求項5に記載の抗ウイルス剤。
- 請求項1~6のいずれか1項に記載の抗ウイルス剤と、溶媒とを含み、対象に抗ウイルス性を付与するために用いられる、抗ウイルス性組成物。
- 植物油をさらに含む、請求項7に記載の抗ウイルス性組成物。
- 膜形成用である、請求項7または8に記載の抗ウイルス性組成物。
- 請求項9に記載の抗ウイルス性組成物を用いて形成される、抗ウイルス性膜。
- 請求項10に記載の抗ウイルス性膜を表面の少なくとも一部に有する、抗ウイルス性物品。
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