JP7054186B2 - Vegf産生促進剤 - Google Patents
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Description
(1)クレマティスの抽出物を含有することを特徴とするVEGF産生促進剤。
(2)VEGFがVEGF-B及び/又はVEGF-Dであることを特徴とする(1)記載のVEGF産生促進剤。
(3)(1)又は(2)記載のVEGF産生促進剤を含む唇用外用組成物。
クレマティスの全草20gに1,3-ブチレングリコール200mLを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、クレマティス1,3-ブチレングリコール抽出物を141g得た。クレマティス抽出物の乾燥固形物重量としては、約0.7gであった。
クレマティスの全草50gに精製水500mLを加え、90~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してクレマティス熱水抽出物を3.3g得た。
クレマティスの葉50gに50(v/v)%エタノール水溶液500mLを加え、常温で3日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、クレマティス50%エタノール抽出物を2.8g得た。
クレマティスの葉50gにエタノール500mLを加え、常温で3日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、クレマティスエタノール抽出物を3.1g得た。
コンフルエントになったヒトケラチノサイト由来細胞であるHaCaTに老化誘導試薬である5-bromo-2-deoxyuridine(BrdU、シグマ)を最終濃度が3、10及び30μMとなるように添加し、4日間培養した後、RNAiso plus(TAKARA)を用いて総RNAの抽出を行った。総RNA量は分光光度計(NanoDrop)を用いて、260nmにおける吸光度により求めた。総RNAを基に、リアルタイムRT-PCR法により、VEGF-B及びVEGF-D mRNA発現量の測定を行った。リアルタイムRT-PCR法にはSYBR Select Master Mix(ライフテクノロジーズ)を用い、VEGF-B及びVEGF-D用のプライマーは以下に示すものを用いた。内部標準として、β-アクチンを用いた。リアルタイムRT-PCRの操作は定められた方法に従い、VEGF-B及びVEGF-D mRNAの発現量を内部標準であるβ-アクチン mRNAの発現量に対する割合として求めた。尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。
CCCTGTCTCCCAGCCTGAT(配列番号1)
GCGCGAGTATACACATCTATCCAT(配列番号2)
VEGF-D用のプライマーセット
GTTCCGATGTGGTGGCTGTT(配列番号3)
TACGAGGTGCTGGTGTTCATAC(配列番号4)
β-アクチン用のプライマーセット
CACTCTTCCAGCCTTCCTTCC(配列番号5)
GTGTTGGCGTACAGGTCTTTG(配列番号6)
コンフルエントになったヒトケラチノサイト由来細胞であるHaCaTにクレマティス1,3-ブチレングリコール抽出物(製造例1)を最終濃度が0.1、1及び10mg/mLとなるように添加し、FBSを含まないDMEM培地にて24時間培養した後、RNAiso plus(TAKARA)を用いて総RNAの抽出を行った。以下のリアルタイムRT-PCRの操作は、実験例1と同様に行った。
以下に示す処方例に従い、製造例1~4で製造したクレマティスの抽出物を含有したリップエッセンス、リップクリーム、リクイドリップクリームを常法により調製した。
成分 含有量(重量%)
1.グリセリン 5.0
2.1,3-ブチレングリコール 5.0
3.精製水 残量
4.カルボキシメチルセルロース 0.5
5.ヒドロキシプロピルメチルセルロース 0.5
6.水酸化カリウム 0.5
7.セスキオレイン酸ソルビタン 0.5
8.モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.) 1.5
9.流動パラフィン 5.0
10.パラオキシ安息香酸メチル 0.3
11.フェノキシエタノール 0.01
12.製造例1~4のクレマティス抽出物 0.3
成分 含有量(重量%)
1.ポリエチレンワックス 1.5
2.パラフィンワックス 9.0
3.マイクロクリスタリンワックス 3.0
4.カルナウバロウ 3.0
5.パルミチン酸デキストリン 0.25
6.流動パラフィン 10.0
7.トリイソステアリン酸ポリグリセリル-2 残量
8.製造例1~4のクレマティス抽出物 0.05
成分 含有量(重量%)
1.ポリエチレンワックス 2.0
2.マイクロクリスタリンワックス 5.0
3.カルナウバロウ 0.5
4.ステアリン酸イヌリン 0.1
5.ミリスチン酸デキストリン 0.05
6.重質流動イソパラフィン 35.0
7.リンゴ酸ジイソステアリル 10.0
8.トリイソステアリン酸ポリグリセリル-2 残量
9.製造例1~4のクレマティス抽出物 0.1
Claims (2)
- クレマティスの1,3-ブチレングリコール抽出物を含有することを特徴とするVEGF産生促進剤。
- VEGFがVEGF-B及び/又はVEGF-Dであることを特徴とする請求項1記載のVEGF産生促進剤。
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