JP7036503B2 - ビタミンb12の安定性が優れたビタミンb12含有酸性組成物 - Google Patents
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Description
[1]ビタミンB12を含有する酸性組成物であって、エタノールの含有量が0.1重量%未満であることを特徴とする、組成物。
[2]エタノール、グリセリン、メタノール、酢酸、ギ酸及びブチルアミンの含有量が合計で0.1重量%未満である、[1]に記載の組成物。
[3]プロトン性有機溶媒の含有量が合計で0.1重量%未満である、[2]に記載の組成物。
[4]容器詰め飲料又は容器詰めゼリー飲料である、[1]~[3]のいずれかに記載の組成物。
[5]ビタミンB12を含有する酸性組成物の製造方法であって、エタノールの量が0.1重量%未満となるように原材料を配合することを含む、方法。
[6]エタノール、グリセリン、メタノール、酢酸、ギ酸及びブチルアミンの量が合計で0.1重量%未満となるように原材料を配合することを含む、[5]に記載の方法。
[7]プロトン性有機溶媒の量が合計で0.1重量%未満となるように原材料を配合することを含む、[6]に記載の方法。
[8]前記組成物が容器詰め飲料又は容器詰めゼリー飲料である、[5]~[7]のいずれかに記載の方法。
[9]酸性組成物中におけるビタミンB12の安定性を向上させる方法であって、前記組成物中に含まれるエタノールの量を0.1重量%未満とすることを含む、方法。
[10]前記組成物中に含まれるエタノール、グリセリン、メタノール、酢酸、ギ酸及びブチルアミンの量を合計で0.1重量%未満とすることを含む、[9]に記載の方法。
[11]前記組成物中に含まれるプロトン性有機溶媒の量を合計で0.1重量%未満とすることを含む、[10]に記載の方法。
[12]前記組成物が容器詰め飲料又は容器詰めゼリー飲料である、[9]~[11]のいずれかに記載の方法。
(標品作成方法)
予め400μg/mLに調整したB12標準溶液5mgを褐色メスフラスコに精秤し、水で200mLに希釈定容した。さらに、希釈定容した溶液の4mLを褐色メスフラスコに精秤し、水で100mLに希釈定容し、HPLC測定における検量線作成のための標準溶液とした。
ビタミンB12を含む溶液サンプル25gを褐色メスフラスコに精秤した。下記に記載する調整済み試薬を添加後、沸騰水中で30分間の加熱を行った。
水 :80mL
酢酸ナトリウム緩衝液(pH4.5):20mL
シアン化カリウム(0.05%) : 2mL
加熱終了後に水冷却を行い、水で200mLに定容後、PVDFフィルター(Whatman GD/X Syringe Filter;直径25mm、孔径0.45μm)を用いて溶液を濾過した。次に、コンディショニング済み固相カラム(アジレント・テクノロジー社製 Bond Elute MEGA BE-C18)に濾液を25mL通液した。試料液通液後の固相カラムに洗浄液100mLを通液した。洗浄は、酢酸ナトリウム緩衝液(pH4.5)を水で10倍に希釈した溶液を通液することで行った。25mL容ナシ型フラスコ内に固相カラム吸着物を、メタノールを用いて溶出した。日本ビュッヒ社製ロータリーエバポレーター(Rotavapor(登録商標) R-210)を用いて濃縮乾固した後、水1mLを添加して残留物を再溶解した。溶解物をCAフィルター(MS CA Syringe Filter;直径13mm、孔径0.45μm)を用いて濾過し、試料溶液とした。
装置:日立ハイテクサイエンス製 LaChrom Elite
カラム:CAPCELLPAK C18 UG120 5μm(3.0mmφ×150mm)(資生堂)
温度:50℃
流量:1.0ml/min
注入量:200μL
検出:紫外可視分光検出器 550nm
移動相:
A:0.05mol/L KH2PO4(和光純薬工業株式会社)(pH2.1)
B:アセトニトリル(和光純薬工業株式会社)
A/B=93/7
イオン交換水にグラニュー糖2.5%、果糖1.2%、L-アスコルビン酸0.8%、クエン酸0.2%、クエン酸三ナトリウム0.2%、ビタミンB120.032ppmになるように添加し、1.0N塩酸(和光純薬工業株式会社)、1.0N水酸化ナトリウム(和光純薬工業株式会社)を用いて目標pHに調整しベース液とした。
表1に示す組成の各溶液を、ビタミンB12を含む溶液サンプルとしてHPLC測定前処理方法に記載の方法で前処理して試料溶液とし、得られた試料溶液をHPLC測定条件に従いHPLC測定した。標準溶液を用いて作成した検量線を用い、HPLC測定値からビタミンB12量を求め、0日目の値とし、これを100%とした。表1に示す組成の各溶液を遮光されたレトルトパウチに約100mL室温充填後、LAUDA製恒温水槽(D20KP)を使用して80℃10分間の湯殺菌を行った。殺菌後の各溶液を、ADVANTEC社製恒温庫(AGX-345)を使用して50℃で保存し同様に0日目、3日目のビタミンB12の測定を行った。
I.材料・測定方法
1.標準原液
葉酸100mgを200mL褐色ビーカーに精秤し、0.1N水酸化ナトリウム溶液(和光純薬)を5mL添加して溶解した。次いで、特級エタノール(和光純薬)10mLを添加・混和後、イオン交換水100mLと0.1N塩酸(和光純薬)にて溶液のpHを7.0~8.0に調整した。200mL褐色メスフラスコとイオン交換水を用いて所定量に定容し、HPLC測定における検量線作成のための標準原液とした。
葉酸を含む溶液サンプルは、重量を測定後、1.0N水酸化ナトリウム溶液(和光純薬)を用いてpH12.0(HORIBA製pHメーター(F-72))に調整した。次いで、10分間撹拌後(AS ONE製マグネティックスターラー(RSH-1AN))、1.0N塩酸(和光純薬)を用いてpH7.0に調整し、ろ過し(AS ONE製0.45μmフィルター(SY25TF))、得られたろ液をHPLC測定に付した。
装置:Waters ACQUITY H-Classシステム
カラム:Waters XBridge C18 5μm 6×250mm
温度:50℃
流量:1.2ml/min
移動相:12%メタノール(和光純薬)、0.3%酢酸(和光純薬)、1.08%オクタスルホン酸Na溶液(和光純薬)
イオン交換水にグラニュー糖2.5重量%、果糖1.2重量%、L-アスコルビン酸0.8重量%、クエン酸0.2重量%、クエン酸三ナトリウム0.2重量%、及び葉酸0.0003重量%を添加し、1.0N塩酸(和光純薬)、及び1.0N水酸化ナトリウム(和光純薬)を用いて、所定のpHに調整し、ベース液とした。
下記表3に示す組成に従って、ベース液、ならびに、エタノール、又は、アセトニトリルを含み、所定のpHを有する溶液(参考例1~7、参考比較例1E~7E(エタノール添加)、参考比較例1A~7A(アセトニトリル添加))をそれぞれ調製した(0日目)。
下記表5に示す組成にしたがって、ベース液、及びエタノールを含み、pHを3.5とする溶液(参考例8、9、参考比較例8E)をそれぞれ調製した(0日目)。
下記表7に示す組成にしたがって、葉酸を含む溶液(参考例10、参考比較例9E)をそれぞれ調製した(0日目)。なお、香料1はエタノールを含まず中鎖脂肪酸とグリセリン脂肪酸エステルを溶媒として用いて、溶液化した香料であり、香料2は溶媒としてエタノールを50重量%(最終製品濃度0.1重量%)含む香料である。
Claims (12)
- ビタミンB12 及び香料製剤を含有する酸性組成物であって、前記香料製剤が中鎖脂肪酸及び/又は乳化剤から選択される一又は複数を溶媒として含む香料製剤であり、エタノールの含有量が0.1重量%未満であることを特徴とする、組成物。
- エタノール、グリセリン、メタノール、酢酸、ギ酸及びブチルアミンの含有量が合計で0.1重量%未満である、請求項1に記載の組成物。
- プロトン性有機溶媒の含有量が合計で0.1重量%未満である、請求項2に記載の組成物。
- 容器詰め飲料又は容器詰めゼリー飲料である、請求項1~3のいずれか一項に記載の組成物。
- ビタミンB12 及び香料製剤を含有する酸性組成物の製造方法であって、前記香料製剤として、中鎖脂肪酸及び/又は乳化剤から選択される一又は複数を溶媒として含む香料製剤を用い、エタノールの量が0.1重量%未満となるように原材料を配合することを含む、方法。
- エタノール、グリセリン、メタノール、酢酸、ギ酸及びブチルアミンの量が合計で0.1重量%未満となるように原材料を配合することを含む、請求項5に記載の方法。
- プロトン性有機溶媒の量が合計で0.1重量%未満となるように原材料を配合することを含む、請求項6に記載の方法。
- 前記組成物が容器詰め飲料又は容器詰めゼリー飲料である、請求項5~7のいずれか一項に記載の方法。
- ビタミンB 12 及び香料製剤を含有する酸性組成物中におけるビタミンB12の安定性を向上させる方法であって、前記香料製剤として、中鎖脂肪酸及び/又は乳化剤から選択される一又は複数を溶媒として含む香料製剤を用い、前記組成物中に含まれるエタノールの量を0.1重量%未満とすることを含む、方法。
- 前記組成物中に含まれるエタノール、グリセリン、メタノール、酢酸、ギ酸及びブチルアミンの量を合計で0.1重量%未満とすることを含む、請求項9に記載の方法。
- 前記組成物中に含まれるプロトン性有機溶媒の量を合計で0.1重量%未満とすることを含む、請求項10に記載の方法。
- 前記組成物が容器詰め飲料又は容器詰めゼリー飲料である、請求項9~11のいずれか一項に記載の方法。
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1本にぎゅっとビタミン全13種類!「C1000 1日分のビタミン」「C1000 1日分のビタミンゼリー」3月9日から全国で発売,2015年03月02日,pp.1-2 |
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