JP6851141B2 - 角層採取方法および採取した角層の観察方法 - Google Patents
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Description
[1]角層採取用液体を含浸させた担体で、対象の皮膚部位を塗擦し、皮膚から角層を採取する工程;および
塗擦後の担体から角層を取り出す工程
を含む、角層採取方法。
[2]塗擦後の担体から角層を取り出す工程が、塗布後の担体を乾燥し、乾燥した担体に粘着面を有する媒体を接触させて、角層を媒体に転写することによる、1に記載の角層採取方法。
[3]角層採取用液体が、非イオン性界面活性剤を0.01〜10質量%含有する、1または2に記載の角層採取方法
[4]角層採取用液体が、揮発性シリコーンを0.1〜50質量%含有する、1〜3のいずれか1項に記載の角層採取方法。
[5]塗擦が、顔の皮膚に対して行われる、1〜4のいずれか1項に記載の角層採取方法。
[6]塗擦が、目または口の周囲を含む皮膚に対して行われる、1〜5のいずれか1項に記載の角層採取方法。
[7]担体が綿を含む、1〜6のいずれか1項に記載の角層採取方法。
[8]1〜7のいずれか1項の角層採取方法を実施し、採取した角層を染色する工程;および染色した角層を観察する、または観察のために提示する工程
を含む、角層観察方法。
[9]染色が、非蛍光色素または蛍光染色を用いて行われる、8に記載の角層観察方法。
[10]染色が、免疫染色により行われる、8または9に記載の角層観察方法。
[11]8〜10のいずれか1項の角層観察方法を実施し、観察結果に基づき対象の美容方法を選択する、美容方法の決定方法。
[12]非イオン性界面活性剤と揮発性シリコーンとの少なくとも一方を含む、角層採取用液体組成物。
本発明の角層の採取方法は、皮膚への負担が比較的少なく、また綿棒等を用いて実施することができる。そのため、目の周囲、口の周囲等、従来法では角層の採取が困難だった部位からも、容易に角層を採取することができる。
また、本発明の角層の採取方法は、熟練した手技や特別な機器等が不要であり、簡単に行えるため、店頭での販売員や客自身による実施等、場所や採取者の限定なく実施できる。
本発明の方法により採取した角層は、従来法で採取した角層と同様に染色等を行うことができ、観察できる。
本発明の角層採取方法は、以下の工程を含む。
(1)角層採取用液体を浸潤させた担体で、対象の皮膚部位を塗擦し、皮膚から角層を採取する工程;および
(2)塗擦後の担体から角層を取り出す工程。
(非イオン性界面活性剤)
本発明に用いられる角層採取用液体は、角層を十分に採取することができるとの観点からは、非イオン性界面活性剤を含むことが好ましい。本発明に用いられる非イオン性界面活性剤は、化粧品の成分として許容されるものである限り特に限定されないが、例えば、プロピレングリコール、グリセリン、ソルビタン、ソルビット、ペンタエリスリトール、ショ糖等の多価アルコールの脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン多価アルコール脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、トリエタノールアミン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油誘導体等の脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤;ポリオキシエチレンアルキルまたはアルケニルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンステロールエーテル等のエーテル型非イオン性界面活性剤;ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロック共重合体、エチレンジアミンのポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロック共重合体付加物等のプルロニック型非イオン性界面活性剤;脂肪酸モノアルカノールアミド、脂肪酸ジアルカノールアミド等の脂肪酸アルカノールアミド;ポリオキシエチレンアルキルアミン;トリアルキルアミンオキシド等のアミンオキシド型非イオン性界面活性剤;アルキルグルコシド等を挙げることができる。
HLB値= E/5
本発明に用いられる角層採取用液体は、角層を十分に採取することができるとの観点からは、非イオン性界面活性剤に代えて、または非イオン性界面活性剤とともに、揮発性シリコーンを含むことが好ましい。
本発明に用いられる角層採取液体に用いられる成分のうち液状であるものは、上で説明したように、テープストリッピングにより担体から角層を取り出すために担体を乾燥させる必要がある場合は、揮発させることができる成分からなることが好ましい。本発明に用いられる角層採取液体は、揮発させることができる液状成分として、例えば、精製水、エタノール、イソプロピルアルコール、揮発性炭化水素油等を含みうる。その他、本発明に用いられる角層採取液体は、非イオン性界面活性剤以外の界面活性剤、キレート剤、水溶性高分子、pH調節剤、多価アルコール、保湿剤、美容成分等を含んでいてもよい。
本発明により採取した角層は、含まれる細胞または成分を観察するために用いることができる。観察は、細胞を顕微鏡等を用いて観察することのみならず、成分を分析(検出または定量)することを含み、また実際の観察のために、角層を提示する行為を含む。角層を提示する行為には、例えば、採取した角層自体または角層に含まれる細胞自体を示すこと、または採取した角層または角層に含まれる細胞を撮影した画像または動画を示すことが含まれる。
(1)No.1〜No.8を均一に混合する。
(2)(1)を攪拌しながらNo.9を徐々に加え粘性が出るまで撹拌する。
(3)(2)を取り出して容器に充填し、角質採取用液体を得た。
製造例1で得た角層採取液体を用い、被験者の顔の皮膚から、下記の手順で角層を採取した。
(採取)
(1)コットンに角層採取液体AまたはBを含ませる。
(2)被験者の皮膚表面を、力を入れずに円を描くように動かしながらコットンで塗擦し、コットンを回収する。
(3)コットンを室温にて十分な時間をかけて乾燥させる
(4)乾燥したコットンの表面を、セロテープ(登録商標)(ニチバン社製)によりテープストリップする。
実施例1で得た角層を、下記の手順で染色した。
(染色)
テープストリップしたテープは4%パラフォルムアルデヒド固定液(武藤化学株式会社製)等の固定液を用いて固定した後、PBS溶液で洗浄を行う。その後1%エオシンY溶液(和光純薬工業社製)にて染色し、一定の時間染色した後流水にて洗浄を行う。洗浄を行ったテープをスライドガラス等に張り付けたのち、適宜カバーガラス等で覆い観察用に供した。
前記スライドガラス試料をオリンパス社製の倒立型蛍光顕微鏡を用いて観察した。染色した角層の顕微鏡写真を図1に示した。
Claims (7)
- 角層採取用液体を含浸させた担体で、対象の皮膚部位を塗擦し、皮膚から角層を採取する工程;および
塗擦後の担体から角層を取り出す工程であって、塗擦後の担体を乾燥し、乾燥した担体に粘着面を有する媒体を接触させて、角層を媒体に転写することによる、工程
を含む、角層採取方法であって、
角層採取用液体が、非イオン性界面活性剤0.1〜5質量%と揮発性シリコーン5〜30質量%との少なくとも一方を含有し、
塗擦が、顔の皮膚に対して行われる、方法。 - 塗擦が、目または口の周囲を含む皮膚に対して行われる、請求項1に記載の角層採取方法。
- 担体が綿を含む、請求項1または2に記載の角層採取方法。
- 請求項1〜3のいずれか1項の角層採取方法を実施し、採取した角層を染色する工程;および染色した角層を観察する、または観察のために提示する工程
を含む、角層観察方法。 - 染色が、非蛍光色素または蛍光染色を用いて行われる、請求項4に記載の角層観察方法。
- 染色が、免疫染色により行われる、請求項4または5に記載の角層観察方法。
- 請求項4〜6のいずれか1項の角層観察方法を実施し、観察結果に基づき対象の美容方法を選択する、美容方法の決定方法。
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