JP6693954B2 - 質量分析によるグリコサミノグリカンのレベルの測定 - Google Patents
質量分析によるグリコサミノグリカンのレベルの測定 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6693954B2 JP6693954B2 JP2017525812A JP2017525812A JP6693954B2 JP 6693954 B2 JP6693954 B2 JP 6693954B2 JP 2017525812 A JP2017525812 A JP 2017525812A JP 2017525812 A JP2017525812 A JP 2017525812A JP 6693954 B2 JP6693954 B2 JP 6693954B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- gag
- sample
- disaccharide
- derivatized
- level
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 title claims description 478
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 title claims description 51
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 236
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims description 208
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 claims description 178
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 154
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 claims description 110
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 64
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 60
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 60
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 52
- 230000029087 digestion Effects 0.000 claims description 43
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 34
- 108010022901 Heparin Lyase Proteins 0.000 claims description 19
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 19
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 15
- OGIQUQKNJJTLSZ-UHFFFAOYSA-N 4-butylaniline Chemical compound CCCCC1=CC=C(N)C=C1 OGIQUQKNJJTLSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 11
- 108010006406 heparinase II Proteins 0.000 claims description 8
- 108010083213 heparitinsulfate lyase Proteins 0.000 claims description 8
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 8
- 108090000819 Chondroitin-sulfate-ABC endolyases Proteins 0.000 claims description 7
- 102000037716 Chondroitin-sulfate-ABC endolyases Human genes 0.000 claims description 7
- 102000011413 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Human genes 0.000 claims description 7
- 108010023736 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Proteins 0.000 claims description 7
- 101710106625 Chondroitinase-AC Proteins 0.000 claims description 6
- 108010048429 chondroitinase B Proteins 0.000 claims description 6
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 claims description 6
- HDVUPIFFKAHPJY-UHFFFAOYSA-N 2-butylaniline Chemical compound CCCCC1=CC=CC=C1N HDVUPIFFKAHPJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- PRDZVHCOEWJPOB-IVMDWMLBSA-N N-sulfo-D-glucosamine Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](NS(O)(=O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O PRDZVHCOEWJPOB-IVMDWMLBSA-N 0.000 claims description 4
- 108010011519 keratan-sulfate endo-1,4-beta-galactosidase Proteins 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 103
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 79
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 79
- 239000000047 product Substances 0.000 description 73
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 72
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 71
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 57
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 51
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 46
- 208000022018 mucopolysaccharidosis type 2 Diseases 0.000 description 45
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 43
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 42
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 40
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 40
- 229920000045 Dermatan sulfate Polymers 0.000 description 38
- 229940051593 dermatan sulfate Drugs 0.000 description 38
- AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L dermatan sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C([O-])=O)O1 AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L 0.000 description 38
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 31
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 31
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 30
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 30
- 201000002273 mucopolysaccharidosis II Diseases 0.000 description 30
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 28
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 28
- 208000015439 Lysosomal storage disease Diseases 0.000 description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 26
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 25
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 24
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 24
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 24
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 23
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 23
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 22
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 22
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 20
- 108010089932 heparan sulfate sulfatase Proteins 0.000 description 18
- PXBFMLJZNCDSMP-UHFFFAOYSA-N 2-Aminobenzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC=C1N PXBFMLJZNCDSMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 16
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 14
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 14
- 230000004044 response Effects 0.000 description 14
- 102000009066 Hyaluronoglucosaminidase Human genes 0.000 description 13
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 13
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 13
- 102100029199 Iduronate 2-sulfatase Human genes 0.000 description 12
- 101710096421 Iduronate 2-sulfatase Proteins 0.000 description 12
- RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N anthranilic acid Chemical compound NC1=CC=CC=C1C(O)=O RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 12
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 12
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 12
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 12
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 12
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 12
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 11
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 11
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 11
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 11
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 11
- 229920000288 Keratan sulfate Polymers 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 238000002641 enzyme replacement therapy Methods 0.000 description 10
- KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N hyaluronan Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H](C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N 0.000 description 10
- 229940099552 hyaluronan Drugs 0.000 description 10
- KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N keratan Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@H]3[C@H]([C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H](O)[C@@H]3O)O)[C@H](NC(C)=O)[C@H]2O)COS(O)(=O)=O)O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H]1O KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N 0.000 description 10
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 10
- 238000009593 lumbar puncture Methods 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 9
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 9
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 9
- 208000005340 mucopolysaccharidosis III Diseases 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 9
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 9
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 9
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 9
- 208000008955 Mucolipidoses Diseases 0.000 description 8
- 208000025797 Mucopolysaccharidosis type 4A Diseases 0.000 description 8
- 208000025816 Sanfilippo syndrome type A Diseases 0.000 description 8
- 208000025820 Sanfilippo syndrome type B Diseases 0.000 description 8
- MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N [CH2]CN(CC)CC Chemical compound [CH2]CN(CC)CC MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 8
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 208000036710 mucopolysaccharidosis type 3A Diseases 0.000 description 8
- 208000012226 mucopolysaccharidosis type IIIA Diseases 0.000 description 8
- 208000012227 mucopolysaccharidosis type IIIB Diseases 0.000 description 8
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 8
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 208000010055 Globoid Cell Leukodystrophy Diseases 0.000 description 7
- 208000028226 Krabbe disease Diseases 0.000 description 7
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 7
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 7
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 7
- 208000036709 mucopolysaccharidosis type 3B Diseases 0.000 description 7
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 7
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 7
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 7
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 7
- IAJILQKETJEXLJ-KLVWXMOXSA-N (2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5-tetrahydroxy-6-oxohexanoic acid Chemical group O=C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-KLVWXMOXSA-N 0.000 description 6
- 102100035028 Alpha-L-iduronidase Human genes 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000005503 Hyaluronidase deficiency Diseases 0.000 description 6
- 208000035051 Malignant migrating focal seizures of infancy Diseases 0.000 description 6
- 208000002678 Mucopolysaccharidoses Diseases 0.000 description 6
- 208000028781 Mucopolysaccharidosis type 1 Diseases 0.000 description 6
- 208000025915 Mucopolysaccharidosis type 6 Diseases 0.000 description 6
- 208000025802 Sanfilippo syndrome type C Diseases 0.000 description 6
- 208000025804 Sanfilippo syndrome type D Diseases 0.000 description 6
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 6
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 206010028093 mucopolysaccharidosis Diseases 0.000 description 6
- 208000036707 mucopolysaccharidosis type 3C Diseases 0.000 description 6
- 208000036725 mucopolysaccharidosis type 3D Diseases 0.000 description 6
- 208000025919 mucopolysaccharidosis type 7 Diseases 0.000 description 6
- 208000020004 mucopolysaccharidosis type 9 Diseases 0.000 description 6
- 208000012224 mucopolysaccharidosis type IIIC Diseases 0.000 description 6
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 2-Amino-2-Deoxy-Hexose Chemical compound NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 5
- 101000746373 Homo sapiens Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 208000000149 Multiple Sulfatase Deficiency Disease Diseases 0.000 description 5
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 5
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 5
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 5
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 5
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 5
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- WBMPYOXBHLVYMK-UHFFFAOYSA-N 1-amino-10h-acridin-9-one Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=C1C=CC=C2N WBMPYOXBHLVYMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 4
- 208000006515 AB Variant Tay-Sachs Disease Diseases 0.000 description 4
- 102100022548 Beta-hexosaminidase subunit alpha Human genes 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000024720 Fabry Disease Diseases 0.000 description 4
- 201000008892 GM1 Gangliosidosis Diseases 0.000 description 4
- 208000017462 Galactosialidosis Diseases 0.000 description 4
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000032007 Glycogen storage disease due to acid maltase deficiency Diseases 0.000 description 4
- 206010053185 Glycogen storage disease type II Diseases 0.000 description 4
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 4
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 4
- 102100033448 Lysosomal alpha-glucosidase Human genes 0.000 description 4
- 201000011442 Metachromatic leukodystrophy Diseases 0.000 description 4
- 206010072927 Mucolipidosis type I Diseases 0.000 description 4
- 206010072930 Mucolipidosis type IV Diseases 0.000 description 4
- 102100026502 Mucolipin-1 Human genes 0.000 description 4
- 208000035032 Multiple sulfatase deficiency Diseases 0.000 description 4
- 208000021811 Sandhoff disease Diseases 0.000 description 4
- 208000022292 Tay-Sachs disease Diseases 0.000 description 4
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 4
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 4
- SHZGCJCMOBCMKK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-fucose Chemical compound C[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N alpha-D-mannose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-RWOPYEJCSA-N beta-D-mannose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-RWOPYEJCSA-N 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N chondroitin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@H](O)C=C(C(O)=O)O1 DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 4
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 4
- 229940012882 elaprase Drugs 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 4
- 201000004502 glycogen storage disease II Diseases 0.000 description 4
- 201000008977 glycoproteinosis Diseases 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 108010072166 idursulfase Proteins 0.000 description 4
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 4
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 4
- 208000011985 sialidosis Diseases 0.000 description 4
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 4
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 4
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 4
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 3
- -1 CSF Substances 0.000 description 3
- 229920002567 Chondroitin Polymers 0.000 description 3
- 208000015872 Gaucher disease Diseases 0.000 description 3
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 3
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 3
- 208000025923 Mucopolysaccharidosis type 4B Diseases 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 102000005262 Sulfatase Human genes 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 3
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 3
- 238000012801 analytical assay Methods 0.000 description 3
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 125000000600 disaccharide group Chemical group 0.000 description 3
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 3
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 3
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000007958 sleep Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 description 3
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 3
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 3
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000012549 training Methods 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 3
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 3
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 3
- PIGCSKVALLVWKU-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoacridone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC(N)=CC=C3NC2=C1 PIGCSKVALLVWKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ICSNLGPSRYBMBD-UHFFFAOYSA-N 2-aminopyridine Chemical compound NC1=CC=CC=N1 ICSNLGPSRYBMBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 4-aminosalicylic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C(O)=C1 WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UWPJYQYRSWYIGZ-UHFFFAOYSA-N 5-aminonaphthalene-2-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=C2C(N)=CC=CC2=C1 UWPJYQYRSWYIGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UBDHSURDYAETAL-UHFFFAOYSA-N 8-aminonaphthalene-1,3,6-trisulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(S(O)(=O)=O)=C2C(N)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=C1 UBDHSURDYAETAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FZWIIGKQNLYDQI-UHFFFAOYSA-N 8-aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid Chemical compound C1=C2C(N)=CC(S(O)(=O)=O)=C(C=C3)C2=C2C3=C(S(O)(=O)=O)C=C(S(O)(=O)=O)C2=C1 FZWIIGKQNLYDQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000029602 Alpha-N-acetylgalactosaminidase deficiency Diseases 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010026719 Chondroitin Lyases Proteins 0.000 description 2
- 102000018963 Chondroitin Lyases Human genes 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 102000004032 Heparin Cofactor II Human genes 0.000 description 2
- 108090000481 Heparin Cofactor II Proteins 0.000 description 2
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 2
- 108700001567 Type I Schindler Disease Proteins 0.000 description 2
- 206010072731 White matter lesion Diseases 0.000 description 2
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 2
- 238000004760 accelerator mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 229960004909 aminosalicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000000065 atmospheric pressure chemical ionisation Methods 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 231100000871 behavioral problem Toxicity 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N benzocaine Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000001023 centrifugal evaporation Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000000451 chemical ionisation Methods 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 229940094517 chondroitin 4-sulfate Drugs 0.000 description 2
- KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N chondroitin sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(O)=O)O1 KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N 0.000 description 2
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 2
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 2
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 2
- 230000008133 cognitive development Effects 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000013872 defecation Effects 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 230000003413 degradative effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- QELUYTUMUWHWMC-UHFFFAOYSA-N edaravone Chemical compound O=C1CC(C)=NN1C1=CC=CC=C1 QELUYTUMUWHWMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003278 egg shell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 108010089296 galsulfase Proteins 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000011134 hematopoietic stem cell transplantation Methods 0.000 description 2
- 208000003906 hydrocephalus Diseases 0.000 description 2
- 238000001095 inductively coupled plasma mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000002307 isotope ratio mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000018984 mastication Effects 0.000 description 2
- 238000010077 mastication Methods 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- REQCZEXYDRLIBE-UHFFFAOYSA-N procainamide Chemical compound CCN(CC)CCNC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 REQCZEXYDRLIBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000244 procainamide Drugs 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000013062 quality control Sample Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 208000019116 sleep disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004677 spark ionization mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 2
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 2
- 238000000176 thermal ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical compound CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002562 urinalysis Methods 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- FGNPLIQZJCYWLE-BTVCFUMJSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-amino-3,4,5,6-tetrahydroxyhexanal;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.O=C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FGNPLIQZJCYWLE-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N (2s)-1-[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]-n-[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]piperidine-2-carboxamide Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C1=CC=CC=C1 YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- KWMUSDDZNYHIBR-UHFFFAOYSA-N 3-amino-1h-quinolin-2-one Chemical compound C1=CC=C2NC(=O)C(N)=CC2=C1 KWMUSDDZNYHIBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCVAGTPWBAZXAL-UHFFFAOYSA-N 4-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC2=NON=C12 ZCVAGTPWBAZXAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 208000006888 Agnosia Diseases 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008143 Bone Morphogenetic Protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010049931 Bone Morphogenetic Protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000024806 Brain atrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 241000206601 Carnobacterium mobile Species 0.000 description 1
- 206010008096 Cerebral atrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 description 1
- 208000032170 Congenital Abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 208000006069 Corneal Opacity Diseases 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-M D-glucopyranuronate Chemical compound OC1O[C@H](C([O-])=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-M 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 101001082432 Homo sapiens Heparin cofactor 2 Proteins 0.000 description 1
- 108050009363 Hyaluronidases Proteins 0.000 description 1
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 1
- 108010003381 Iduronidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004627 Iduronidase Human genes 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-HNFCZKTMSA-N L-idopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-HNFCZKTMSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 108010006140 N-sulfoglucosamine sulfohydrolase Proteins 0.000 description 1
- 102100027661 N-sulphoglucosamine sulphohydrolase Human genes 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000008457 Neurologic Manifestations Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 206010053159 Organ failure Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000157908 Paenarthrobacter aurescens Species 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 241000605114 Pedobacter heparinus Species 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M Pentobarbital sodium Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)[N-]C1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 241000588767 Proteus vulgaris Species 0.000 description 1
- 208000037340 Rare genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 108010039286 S 2238 Proteins 0.000 description 1
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- YUWBVKYVJWNVLE-UHFFFAOYSA-N [N].[P] Chemical compound [N].[P] YUWBVKYVJWNVLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940022705 aldurazyme Drugs 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 108010009380 alpha-N-acetyl-D-glucosaminidase Proteins 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 229960001441 aminoacridine Drugs 0.000 description 1
- 238000004082 amperometric method Methods 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 1
- 150000003931 anilides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002490 anilino group Chemical group [H]N(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920006318 anionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229940082988 antihypertensives serotonin antagonists Drugs 0.000 description 1
- 239000003420 antiserotonin agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 201000008098 auditory agnosia Diseases 0.000 description 1
- ALSPKRWQCLSJLV-UHFFFAOYSA-N azanium;acetic acid;acetate Chemical compound [NH4+].CC(O)=O.CC([O-])=O ALSPKRWQCLSJLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940053197 benzodiazepine derivative antiepileptics Drugs 0.000 description 1
- 125000003310 benzodiazepinyl group Chemical class N1N=C(C=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940087430 biaxin Drugs 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L calcium acetate Chemical compound [Ca+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001639 calcium acetate Substances 0.000 description 1
- 229960005147 calcium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000011092 calcium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000003965 capillary gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 229940107200 chondroitin sulfates Drugs 0.000 description 1
- 210000003703 cisterna magna Anatomy 0.000 description 1
- AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N clarithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@](C)([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)OC)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N 0.000 description 1
- 230000003930 cognitive ability Effects 0.000 description 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011035 continuous diafiltration Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 231100000269 corneal opacity Toxicity 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 238000011036 discontinuous diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000005264 electron capture Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000006345 epimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000001061 forehead Anatomy 0.000 description 1
- 238000004508 fractional distillation Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 239000012520 frozen sample Substances 0.000 description 1
- 229960005390 galsulfase Drugs 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000002695 general anesthesia Methods 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 210000004884 grey matter Anatomy 0.000 description 1
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 1
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010019847 hepatosplenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 1
- 239000012145 high-salt buffer Substances 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102000057325 human SERPIND1 Human genes 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940053999 hypnotics and sedatives melatonin receptor agonists Drugs 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000000951 ion mobility spectrometry-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 108010015332 keratanase II Proteins 0.000 description 1
- 230000008140 language development Effects 0.000 description 1
- 229960002486 laronidase Drugs 0.000 description 1
- 210000003140 lateral ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 208000036546 leukodystrophy Diseases 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012006 liquid chromatography with tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000007449 liver function test Methods 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 238000012806 monitoring device Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000002200 mouth mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 208000011045 mucopolysaccharidosis type 3 Diseases 0.000 description 1
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 1
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940068704 naglazyme Drugs 0.000 description 1
- 210000000282 nail Anatomy 0.000 description 1
- 229940051804 natural opium alkaloid analgesics Drugs 0.000 description 1
- 238000013188 needle biopsy Methods 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002610 neuroimaging Methods 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229940052293 other general anesthetics in atc Drugs 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 238000004810 partition chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229940002988 pegasys Drugs 0.000 description 1
- 108010092853 peginterferon alfa-2a Proteins 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000003822 preparative gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 229940007042 proteus vulgaris Drugs 0.000 description 1
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 description 1
- RJSRSRITMWVIQT-UHFFFAOYSA-N quinolin-6-amine Chemical compound N1=CC=CC2=CC(N)=CC=C21 RJSRSRITMWVIQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 231100000279 safety data Toxicity 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 238000001004 secondary ion mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- FKHIFSZMMVMEQY-UHFFFAOYSA-N talc Chemical compound [Mg+2].[O-][Si]([O-])=O FKHIFSZMMVMEQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000017105 transposition Effects 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 229940079023 tysabri Drugs 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 230000002747 voluntary effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6848—Methods of protein analysis involving mass spectrometry
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2400/00—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving carbohydrates
- G01N2400/10—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- G01N2400/38—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence, e.g. gluco- or galactomannans, e.g. Konjac gum, Locust bean gum, Guar gum
- G01N2400/40—Glycosaminoglycans, i.e. GAG or mucopolysaccharides, e.g. chondroitin sulfate, dermatan sulfate, hyaluronic acid, heparin, heparan sulfate, and related sulfated polysaccharides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2560/00—Chemical aspects of mass spectrometric analysis of biological material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/04—Endocrine or metabolic disorders
- G01N2800/042—Disorders of carbohydrate metabolism, e.g. diabetes, glucose metabolism
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
Description
本出願は2014年11月14日出願の米国仮特許出願第62/080,154号に対する優先権を主張し、その開示のすべては本明細書に組み込まれる。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される:
(項目1)
生体試料のグリコサミノグリカン(GAG)のレベルを測定する方法であって、前記方法が、
a)グリコサミノグリカンの消化が二糖の混合物の生成を可能にする条件下で、1つ以上の酵素で生体試料をインキュベートする工程と、
b)工程a)で生成する前記二糖の混合物を化学的に誘導体化する工程と、
c)各個別の前記誘導体化された二糖の量を測定する工程と、
d)工程c)で測定した前記各個別の誘導体化された二糖の量に基づいて生体試料のグリコサミノグリカン(GAG)のレベルを測定する工程と、を含む、方法。
(項目2)
前記グリコサミノグリカンがヘパラン硫酸を含む、項目1に記載の方法。
(項目3)
前記1つ以上の酵素が1つ以上のヘパリナーゼを含む、項目1または2に記載の方法。
(項目4)
前記1つ以上のヘパリナーゼがヘパリナーゼI、II及び/またはIIIを含む、項目3に記載の方法。
(項目5)
前記1つ以上の酵素が、コンドロイチナーゼAC、コンドロイチナーゼB、コンドロイチナーゼC、コンドロイチナーゼABC及びケラタナーゼからなる群から選択される、項目1または2に記載の方法。
(項目6)
前記二糖の混合物が、二糖I−S(ΔUA,2S−GlcNS,6S)、II−S(ΔUA−GlcNS,6S)、III−S(ΔUA,2S−GlcNS)、IV−S(ΔUA−GlcNS)、II−A(ΔUA−GlcNAc,6S)及び/またはIV−A(ΔUA−GlcNAc)を含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目7)
前記測定することが、誘導体化されたI−S(ΔUA,2S−GlcNS,6S)、誘導体化されたII−S(ΔUA−GlcNS,6S)、誘導体化されたIII−S(ΔUA,2S−GlcNS)、誘導化されたIV−S(ΔUA−GlcNS)、誘導体化されたII−A(ΔUA−GlcNAc,6S)、及び誘導体化されたIV−A(ΔUA−GlcNAc)のそれぞれの量を測定することを含む、項目6に記載の方法。
(項目8)
前記二糖の混合物が疎水性部分で誘導体化されている、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目9)
前記二糖の混合物が、4−ブチルアニリン、2−アミノベンズアミド(2−AB)、2アミノ安息香酸(アントラニル酸、2−AA)、または2−アミノアクリドン(AMAC)で誘導体化されている、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目10)
前記工程c)が、
(i)前記個々の誘導体化された二糖をクロマトグラフィーにより分離することと、
(ii)前記各個々の誘導体化された二糖を質量分析で測定することと、を含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目11)
前記クロマトグラフィーが逆相液体クロマトグラフィーである、項目10に記載の方法。
(項目12)
前記各個々の誘導体化された二糖が内部標準物質と比較して測定される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目13)
前記各個々の二糖が4−ブチルアニリンで誘導体化されており、各対応する二糖の内部標準物質が 13 C 6 −4−ブチルアニリンで標識されている、項目12に記載の方法。
(項目14)
前記生体試料中の前記グリコサミノグリカン(GAG)のレベルが、前記測定した個々の二糖の量に基づいて合計した二糖のレベル値により決定される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目15)
前記生体試料が脳脊髄液(CSF)試料である、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目16)
前記CSF試料が約10μl〜約100μlの範囲の量を有する、項目15に記載の方法。
(項目17)
前記CSF試料が約45μl〜約55μlの範囲の量を有する、項目15に記載の方法。
(項目18)
前記生体試料が血液試料である、項目1〜14のいずれか一項に記載の方法。
(項目19)
前記生体試料が血しょう試料または尿試料である、項目1〜14のいずれか一項に記載の方法。
(項目20)
前記生体試料が、グリコサミノグリカンを抽出するために最初に処理される、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目21)
前記生体試料が、0.1μM超の濃度でグリコサミノグリカンを含む、先行項目のいずれか一項に記載の方法。
(項目22)
リソソーム蓄積症の治療を監視する方法であって、前記方法が、
投与間隔で対象に置換酵素の治療有効量を投与することを含む治療過程で、リソソーム蓄積症を患う対象を治療することと、
先行項目のいずれか一項に記載の方法による治療過程中、対象から得た生体試料のグリコサミノグリカン(GAG)のレベルを測定することと、を含む前記方法。
(項目23)
前記リソソーム蓄積症が、MPSI、MPSII、MPSIIIA、MPSIIIB、MPSIIIC、MPSIIID、MPSIVA、MPSIVB、MPSVI、MPSVII、MPSIX、アルファマンノース症、アスパルチルグルコサミン尿症、ファブリー病、フコシド蓄積症、ガラクトシアリドーシス、ゴーシェ病、GM1ガングリオシドーシス、GM2活性化因子欠損症、シアリドーシス、クラッベ病、異染性白質ジストロフィー、ムコリピドーシスIV型、多種スルファターゼ欠損症、ポンペ病、サンドホフ病、テイサックス病、AB型シンドラー病、サラ病、ベータマンノース症、及びグロボイド細胞白質ジストロフィーからなる群から選択される、項目22に記載の方法。
(項目24)
前記投与が髄腔内投与または静脈内投与である、項目22または23に記載の方法。
(項目25)
前記投与量が、10mg、45mg、90mg及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目22〜24のいずれか1項に記載の方法。
(項目26)
前記置換酵素が、組み換えヒトヘパランN−スルファターゼまたは組み換えイデュルスルファーゼである、項目22〜25のいずれか一項に記載の方法。
(項目27)
前記投与間隔が、毎日、毎週、隔週、毎月、隔月、毎年またはこれらの組み合わせである、項目22〜26のいずれか一項に記載の方法。
(項目28)
前記生体試料が、脳脊髄液(CSF)、全血、細胞、組織、血しょう、血清、血液、尿、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、項目22〜27のいずれか一項に記載の方法。
(項目29)
前記GAGのレベルが対照GAGのレベルと比べて低下する場合、前記治療的に有効な用量及び/または前記投与間隔を維持することを更に含む、項目22〜28のいずれか一項に記載の方法。
(項目30)
前記GAGのレベルが少なくとも10%、少なくとも20%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%以上減少する、項目29に記載の方法。
(項目31)
前記GAGのレベルが対照GAGのレベルと比べて低下する場合、前記治療的に有効な用量及び/または投与間隔を調節することを更に含む、項目22〜28のいずれか一項に記載の方法。
(項目32)
前記治療に有効な用量及び投与レベルを調節することが、前記投与量及び/もしくは投与間隔を増加させる、または前記投与量及び/もしくは投与間隔を減少させることを含む、項目31に記載の方法。
(項目33)
前記GAGレベルが1%以下、2%以下、3%以下、4%以下、5%以下、6%以下、7%以下、8%以下、9%以下もしくは10%以下減少する、項目31に記載の方法。
(項目34)
前記GAGのレベルが対照GAGのレベルと比べて増加する場合、前記治療的に有効な用量及び/または投与間隔を調節することを更に含む、項目22〜28のいずれか一項に記載の方法。
(項目35)
前記治療に有効な用量及び投与レベルを調節することが、前記投与量及び/もしくは投与間隔を増加させる、または前記投与量及び/もしくは投与間隔を減少させることを含む、項目34に記載の方法。
(項目36)
前記GAGのレベルが少なくとも1%、少なくとも10%、少なくとも20%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%以上増加する、項目34に記載の方法。
(項目37)
前記対照GAGのレベルが、i)リソソーム蓄積症を患っている対象のGAGレベル、ii)治療の初期の時点で測定されたリソソーム蓄積症を患っている対象のGAGレベル、またはiii)未治療の対照対象のGAGレベルである、項目29〜36のいずれか一項に記載の方法。
(項目38)
治療を必要とする対象に、組み換えイズロン酸−2−スルファターゼ(I2S)の治療に有効な用量を定期的に髄腔内投与して、その結果、脳脊髄液(CSF)のグリコサミノグリカン(GAG)のレベルが、先行項目のいずれか一項に記載の方法により測定される、治療前のベースラインのGAGレベルと比較して85%超減少することを含む、ハンター症候群を治療する方法。
本発明をもっと簡単に理解するために、初めに特定の用語を定義する。以下の用語及び他の用語についての追加の定義は本明細書全体にわたって記載する。この定義が当業者によるこれらの用語の理解と矛盾しない限り、この定義はこれらの用語の一般的な意味を除外することを意図しない。
本発明は特に、試料中の1つ以上のグリコサミノグリカンまたは1つ以上のその成分(例えば二糖成分)のレベルを測定するための、方法及び組成物を提供する。本明細書で使用する場合、試料という用語は、最初に収集した試料、ならびにその後に生成した変異型(複数可)またはその試料の一部を含み、その後に生成した変異型またはその一部は、本発明の種々の工程のいずれかによることを含む、例えば任意の種類の実験手順、物質の追加、物質の除去、その成分の改変などによる、その試料に由来する。特定の実施形態では、試料は、複数の試料をプールした複合体である。
グリコサミノグリカン(GAG)は、生物中で、例えば細胞表面、細胞外基質(ECM)及び肥満細胞顆粒上で見つかる、一般に直鎖アニオン性ポリマーの一群を構成する。GAGは、例えばヒアルロナン、ケラタン硫酸(KS)、コンドロイチン硫酸(CS)、デルマタン硫酸(DS)、ヘパラン硫酸(HS)、ヘパリン、コンドロイチン硫酸/デルマタン硫酸(CS/DS)及びヘパラン硫酸(HS)/ヘパリンを含む。GAGは広範な生物学的機能を実現し、その代謝は多数の因子により調節される。1つ以上のGAGもしくは1つ以上のその成分のレベルの、臨床的に重大な調節もしくは不均衡と関連する状態をもたらすもしくはそれに関係している、疾患または状態をGAG状態と呼んでもよい。種々の実施形態では、GAG状態はリソソーム蓄積症である。
本発明の種々の実施形態において、試料は、1つ以上のGAG(例えばHS)、またはその1つ以上の成分(例えば、二糖成分)の抽出(例えば生成もしくは分離)により処理される。GAGは、例えばヒアルロナン、ケラタン硫酸(KS)、コンドロイチン硫酸(CS)、デルマタン硫酸(DS)、ヘパラン硫酸(HS)、ヘパリン、コンドロイチン硫酸/デルマタン硫酸(CS/DS)及びヘパラン硫酸(HS)/ヘパリンを含む。特定の実施形態において、抽出は、試料に存在する1つ以上の他の分子もしくは分子の種類から、1つ以上のGAG分子もしくは1つ以上のその成分を分離するまたは精製する方法である。
本発明の種々の実施形態において、試料は脱塩により処理される。種々の実施形態では、脱塩は抽出後に行うことができる。種々の実施形態では、脱塩は抽出前に行うことができる。種々の実施形態では、脱塩は抽出とインラインで行うことができる。種々の実施形態では、抽出及び脱塩は同時であり、例えば単一工程の結果として一緒に行う。
本発明の種々の実施形態は、1つ以上のGAGが二糖などのGAG成分を産生するために酵素で切断される工程を含む。GAGは、例えばヒアルロナン、ケラタン硫酸(KS)、コンドロイチン硫酸(CS)、デルマタン硫酸(DS)、ヘパラン硫酸(HS)、ヘパリン、コンドロイチン硫酸/デルマタン硫酸(CS/DS)及びヘパラン硫酸(HS)/ヘパリンを含む。GAGリアーゼとして知られている酵素の群は、GAG分子を消化する酵素の例を含む。広く本発明は、種類として、他の酵素において、特異的にGAGを切断すると知られている酵素を含む。GAG分子の切断の特異性は、特定の消化酵素の選択によって、任意に達成することができる。例としては、コンドロイチン硫酸リアーゼ、コンドロイチナーゼABC、コンドロイチナーゼC、Flavobacterium heparinum由来のコンドロイチナーゼC、ヘパラン硫酸リアーゼ、連鎖球菌ヒアルロニダーゼ、Streptomycesヒアルロニダーゼ、ヒアルロニダーゼA、ヒアルロニダーゼC、精巣ヒアルロニダーゼ、ケラタンアーゼ、ヒツジ精巣由来の精巣ヒアルロニダーゼ、及びエンド−β−ガラクトシダーゼを含む。より広範なもしくはより狭義の、または条件付きでより広範なもしくはより狭義の特異的な種々の酵素は、当技術分野において周知である。このような酵素の特異性は、当業者に周知である。種々の実施形態では、消化は、GAG切断生成物を生じる。
種々の実施形態では、本発明の試料は誘導体化されることができる。特定の場合において、消化された試料中に存在するGAG切断生成物は、誘導体化される。誘導体化は、本明細書において開示される種々の方法の分析の感度を、例えば誘導体化された分子のクロマト分離、例えば誘導体化されたGAG切断生成物の分離に関与することによって増加させることができる。
種々の実施形態において、グリカン特異的な抽出工程は、本発明の方法の任意の時点で、例えば分析前の除く、消化後または誘導体化後に実施され得る。特定の実施形態において、グリカン特異的抽出工程は、グリカン特異的な固相抽出工程でもよい。存在する場合、グリカン特異的抽出工程は、第2の抽出工程でもよい。あるいは、存在する場合、後の抽出工程は、唯一の抽出工程でもよい。グリカン特異的抽出工程は、本明細書に記載される方法もしくは技術、または当業者に周知の別の方法のいずれかを使用できて、特にその方法または技術は、条件付き、任意のもしくは別の方法の任意の他の抽出工程に関しても確認する。
本発明の試料、例えば抽出、脱塩及び/または消化された試料、例えば少なくとも抽出及び/または消化された試料は、試料から、試料中に存在する1つ以上のGAG(例えば、HS)、もしくは1つ以上のその成分もしくは切断生成物の種類及び/または量を同定するために、分析することができる。特定の場合において、消化した試料は、消化後の試料中に存在する切断生成物を同定することによって、消化前、最初に試料中に存在する1つ以上のGAGの種類及び量を決定するために、分析される。分析することは、消化及び/または誘導体化した試料中に存在する、1つ以上のGAG、または1つ以上のその成分もしくは切断生成物を分離する工程を含むことができる。特定の場合において、本発明は、誘導体化されたGAG切断生成物を分離することを含む。
本発明の試料、例えばこの順番で、例えば抽出、脱塩、消化及び誘導体化された試料は、1つ以上のGAG、または1つ以上のその成分もしくは切断生成物を分離する方法で処理されることができる。
分離した、または分離されてない試料は、検出工程を受けることができる。特定の実施形態では、検出は、様々な形態のうちの1つ以上の質量分析を含む。いくつかの実施形態では、検出工程は、例えば、電導度検出、ガスクロマトグラフ検出、アンペロメトリー検出(例えば、パルス化アンペロメトリー検出(PAD)または3Dアンペロメトリー)、ゲル電気泳動、及び他の従来のタンパク質分析法、その種々の形態のうちのいずれかの質量分析、ならびに当該技術分野において周知の他の方法を含むことができる。
種々の実施形態では、本明細書に記載される分析の方法は、対照物質及び/または内部標準物質を含む。対照物質及び/または内部標準物質の選択は、一般的に当業者に周知である。対照及び/または内部標準物質との分析結果の比較は、結論を引き出す及び/または重要なデータポイントを特定するための基礎を提供できる。本明細書で使用する場合、対照または標準(または対照物質または標準物質)という用語は、任意の1つの反応もしくはデータ、複数の反応もしくはデータ、反応もしくはデータの一群、または任意のその発現もしくは統合を意味すると理解される。
I−S
II−S
III−S
IV−S
II−A
IV−A
場合によっては、本発明の方法及び組成物は、対象から得た1つ以上のGAG、その成分(例えば、二糖成分)または分子を測定するために使用されて、対象は、第2の特性についても測定される、またその後に測定される。種々の例において、第2の特性はバイオマーカー、例えばGAG関連状態のバイオマーカーである。
対象中の1つ以上のGAG(例えば、HS)、またはその成分(例えば、二糖成分)、またはその切断生成物のレベルの測定のために本明細書において開示される種々の方法は、例えば、種々のGAG状態を監視すること、種々のGAG状態を有する患者の重症度を判定すること、種々のGAG状態の治療に対する反応を監視すること、または種々のGAG状態を診断する際に有用であり得る。
本明細書において開示される1つ以上のGAG、1つ以上のその成分(例えば、二糖成分)、または1つ以上のGAG切断生成物のレベルを測定する方法は、GAG状態を監視する、例えばGAG状態の進行を監視する、またはその重症度を測定するために利用できる。例えば試料は、少なくとも第1の時点及び第2の異なる時点(すなわち、2つ以上の異なる時点)で特定の対象または対象の群から得ることができ、1つ以上のGAG、1つ以上のその成分または1つ以上のGAG切断生成物のレベルは、本発明の方法によって各試料から測定されることができる。2つ以上の異なる時点のいずれかの間の変化または傾向は、GAG状態の進行の徴候を提供できる。一実施形態において、1つ以上のGAG、1つ以上のその成分または1つ以上のGAG切断生成物のレベルの長期にわたる増加は、疾患の重症度の増加(すなわち、より重症な方の進行)を示す。あるいは、別の実施形態では、1つ以上のGAG、1つ以上のその成分または1つ以上のGAG切断生成物のレベルの長期にわたる低下は、疾患の重症度の低下を示す。
本明細書において開示される1つ以上のGAG、1つ以上のその成分(例えば、二糖成分)、または1つ以上のGAG切断生成物のレベルを測定する方法は、治療のためにGAG状態の反応を監視する、例えば1つ以上の対象のGAG状態の進行における周知のもしくは実験用の治療の影響を監視するために利用できる。例えば試料は、治療を受けた、もしくは治療群のための対照群(例えば、未治療もしくはプラセボ群)として機能する、特定の対象または対象の群から得てもよい。試料は、少なくとも第1の時点及び第2の異なる時点(すなわち、2つ以上の異なる時点)で容認された実験行為と一致するやり方で、このような群のうちの1つ以上から得ることができ、1つ以上のGAG、1つ以上のその成分または1つ以上のGAG切断生成物のレベルは、本発明の方法によって各試料から測定されることができる。2つ以上の異なる時点のいずれかの間の変化または傾向は、例えば治療の存在下または不存在下にてGAG状態の進行の徴候を提供できる。例えば、治療を受けている1つ以上の対象もしくは対象の群の1つ以上のGAGレベルの増加、同じくらいの減少、統計学的に区別がつかない変化、またはより大きな増加は、対照群の1つ以上の対象もしくは対象の群の1つ以上の同じGAGと長期にわたって比較すると、治療の無効果を示すことができる。あるいは、治療を受けている1つ以上の対象もしくは対象の群の1つ以上のGAGレベルの統計学的に有意な低下、またはより少ない増加は、対照群の1つ以上の対象もしくは対象の群の1つ以上の同じGAGと長期にわたって比較すると、治療の有効性を示すことができる。このような実施形態で、治療は実験用の治療であり得る。
本明細書において開示される1つ以上のGAG、1つ以上のその成分(例えば、二糖成分)、または1つ以上のGAG切断生成物のレベルを測定する方法は、GAG状態を診断する、例えば対象が病理状態を示す可能性が高いGAGレベルを提示しているか診断するために利用できる。GAGは、例えばヒアルロナン、ケラタン硫酸(KS)、コンドロイチン硫酸(CS)、デルマタン硫酸(DS)、ヘパラン硫酸(HS)、ヘパリン、コンドロイチン硫酸/デルマタン硫酸(CS/DS)及びヘパラン硫酸(HS)/ヘパリンを含む。病理学的GAGレベルの測定は、ある期間にわたるGAGレベルを監視すること、及び監視した期間にわたるGAGレベルの傾向を確認することを含むことができる。病理学的GAGレベルの測定は、1つ以上の時点での1つ以上のGAGレベルを測定すること、及び測定したレベルを確立した標準値と比較することを含むことができる。標準値は、例えば本明細書において開示される方法に関して、統計的に有意な数の所与のGAG状態を有する対象及びGAG状態を有さない対象をサンプリングして、そこから得た値を比較し、精査し、または処理することによって確立することができる。
本明細書に記載される方法を用いて、医師は、本明細書に記載される1つ以上のバイオマーカー(例えば、GAGなどのサンフィリポ症候群またはハンター症候群のためのバイオマーカー)の発現及び/または活性レベルの測定による診断及び疾患の段階分けに基づき、患者へ提供される、個々の患者に適している治療を選択し、処方することができる。所与の患者のための適切な治療レジメンの選択は、本明細書に記載されて本発明の方法により提供される診断/段階分けだけに基づいて、なされることができる。代替的にまたは追加的に、サンフィリポ症候群またはハンター症候群を診断して、疾患の進行を評価するために、医師は、既存の方法で使用する他の臨床または病理学的パラメータを考慮に入れることもできる。
試料中のヘパラン硫酸から抽出された二糖を多段階手順を使用して定量化する方法によって、ヘパラン硫酸はヒト脳脊髄液試料において定量化された。特に本実施例の多段階手順は、イオン交換個体相抽出、サイズ排除脱塩、ヘパリナーゼによる消化、化学的誘導体化及びグリカン特異的な固相抽出を含んだ。グリカン特異的な固相抽出の後で、二糖は、API5000(商標)エレクトロスプレー陰イオンモードで作動する三連四重極型質量分析計を使用する、タンデム質量分析と共に、液体クロマトグラフィーにより分析された。
ジエチルアミノエチル(DEAE)樹脂(175μL)は、20μmフリット入りの96ウェルプレートのウェルに加えられた。樹脂は、300μLの添加/洗浄緩衝液(20mMのトリス−HCl、0.1MのNaCl、pH7.4)を添加し、50RCFで1分間遠心分離して平衡させた。CSF(50μL)は、175μLの添加/洗浄緩衝液と混合して、樹脂に添加して、遠心分離された。ウェルを300μlの添加/洗浄緩衝液で2回洗浄して、HSを140μlの溶出緩衝液(20mMのトリス−HCl、1MのNaCl、pH7.4)を用いて樹脂から収集プレート内に溶出した。溶出液を、製造業者プロトコルに従ってG−25ゲル濾過Multitrapプレートを用いて脱塩して、遠心蒸発によって乾燥した。
各抽出ウェル中のHSを、50μLのヘパリンアーゼ消化緩衝液(25mMの酢酸アンモニウム、1mMの酢酸カルシウム、pH7.0)中に溶解させた。二糖成分への消化は、12UヘパリナーゼI、4UヘパリナーゼII及び1.4UヘパリナーゼIIIを使用して実行された。反応は30℃で一晩続けられて、その後の二糖の標識化に備えて、遠心蒸発によって乾燥した。
HSは、ヘキスロン酸(HexA)α/β1−4グルコサミン(GlcN)α4主鎖で構成される、繰り返し二糖サブユニットから作成された直鎖ポリマーを含む。二糖主鎖は、異なる化学基によって生合成的に改変されることができる。例えばHexA単位は、2−O位置で硫酸化されることができて、カルボキシル基はリングの平面に対して2つの逆方向にエピマー化されることができる。GlcNは、その6及びもっと稀には3ヒドロキシル酸素で硫酸化を生じることができる。アミン窒素はごく稀に遊離であり、硫酸化またはアセチル化によって、より頻繁に置換される。少なくともある程度はこのような不均一性により、HS鎖を分析するのは非常に困難である。二糖成分の分析及び定量化は、この問題点の解決に関与する。二糖の標識は、更に後述するように、本方法の少なくともいくつかで、このような方法の有用性に更に貢献できる工程である。
HS二糖を、オンライン質量分析検出を備えた逆相(RP)クロマトグラフィーで分離した。使用するカラムは、流量0.3ml/分及びカラム温度25℃でWaters Acquityで作動するHSS T3RP18(1.7μM、2.1×100mm)(Waters(Milford、MA))であった。移動相Bがアセトニトリルであったのに対して、移動相Aは60mMの酢酸アンモニウム酢酸pH5.4であった。勾配は98%のAで最初の1分の平衡化を含み、8分間にわたる60%のAに減少して、二糖を溶出した。カラムを1分間20%のAで洗浄して、1分間98%のAで再平衡化した。合計分析時間は、12分であった。
較正を生成するために、ヒトCSF中で最も豊富な6つの商業的に入手した二糖、すなわちIS、IIS、IIIS、IVS、IIA及びIVAを、以下のそれぞれのモル比のパーセント10%、5%、15%、10%、10%及び50%で混合した。8つのゼロ以外の較正は、全二糖の濃度レベル(0.1μM、0.25μM、0.8μM、2.5μM、6.0μM、17.5μM、40μM及び50μM)の増加と共に使用された。定量化の下限及び定量化の上限は、それぞれ0.1μM及び50μMであった。DEAE抽出及び脱塩をすでに受けた50μLのCSFに、各レベルを添加した。基質へのヘパリナーゼの添加は、内因性HSの消化を回避するために省略した。キャリブレーター混合物を12C−4−NBAで標識して、上記のとおりIstdの存在下で、SPEにより精製した。それぞれの13C Istdに対する6つの12C二糖の標準化した強度の合計は、キャリブレーターの全二糖濃度に対してプロットされた。1/x2重み付きの最適な線形回帰モデルを、較正曲線を生成するために用いた。
二糖品質管理(DS QC)の準備のために、キャリブレーターを模した二糖混合物を、較正曲線の範囲にわたる定量化(LLOQ)の下限及びより高い濃度レベルで調製した(0.3μM、2μM、15μM及び37.5μM)。QCを、較正曲線に基づいて定量化した。真度(%bias)及び精度(%CV;n=6)を測定した。
監視する二糖のIstdを生成する可能性を提供するので、この標識の同位体標識型は望ましい。このように定量化の精度及び真度を強化する実験的可変性を相殺したので、試料調製及びLC/MS分析中のIstdの導入は重要であった。4−NBAの市販型は、逆相樹脂と相互作用するブチルヒドロカーボン尾部で重水素化する。水素添加で標識したラベルに関して、LC分離中、重水素化二糖の保持時間でわずか30秒の変動が生じる。この課題を回避するために、アニリン環で標示する13C−4−NBAが合成された(図2A)。質量分析の検出中、一価のとき、そのm/zで6ダルトンの変動を示す一方で、この型で標識した二糖はその12C対照物で共溶出される(図2B)。したがって13C−4−NBA標示した二糖は、本実施例においてIstdとして機能する最良の分析物であった。
4−NBAのHS二糖への共有結合はその親水性特性を減弱させて、RP C18液体クロマトグラフィーによる分離の影響を受けやすくなる。図3は、ヒトCSF HSから生成した大量の二糖を表す6つの市販のHS二糖標準物質の分離を示す。12分のLC/MS法は、大きな試料セットの分析中、試料の回転率を上昇させる。6つの二糖は、疎水性の順序を増加させる際に分解されて、溶出された。3重に硫酸化した二糖(IS)が6.46分で最初に溶出して、非硫酸化/アセチル化した1つ(IVA)は、樹脂と最も強力に相互作用して、8.33分の最も長い保持時間を有した。同一のm/zを有する異性体二糖IIS及びIIISは、それぞれ6.65分と6.94分でベースライン分離して溶出して、個々の検出及び計量を容易にした。同様に一対の異性体IIA/IIIAはこのクロマトグラフィーによって分離したが、IIIAがCSF中のヒトHSの軽微な成分であるので、それは分析から無視された。要約すると、本明細書で記載されたLC/MSプラットフォームは、試料分析の処理能力を増加させる短い勾配を使用して、異性体を含むHS二糖を分離する力を有する。溶出特性が方法の変化と共に変わることを、当業者は理解するであろう。
CSF試料処理プロトコルは、処理能力の高い試料分析中の有用性を提供する特性の96ウェルプレートフォーマットで起こった(図4)。弱アニオン交換によって負に帯電したGAGの抽出により開始した。樹脂に保持された分析物は、高塩濃度緩衝液により溶出されて、それから溶出液はゲル濾過カートリッジを使用して脱塩された。抽出物のHSフラクションを、ヘパリナーゼI、II及びIIIを含む、HS特異的な酵素カクテルを使用して、その二糖構成単位内で解重合した。得られた二糖は、12C−4−NBAによって還元的にアミン化されて、親水性相互作用液体クロマトグラフィー(HILIC)固相抽出(SPE)プレートを使用して、下流のクロマトグラフィーと干渉する過剰標識試薬から精製された。HS二糖は水で溶出されて、RP LC/MSによって直ちに分析された。あらかじめ13C−4−NBAで標識した二糖の混合物を、標識化工程後のIstdとして試料に添加して、下流工程で行われる試料から試料の実験的変動を相殺するのに役立つ(図4)。多工程アッセイプロトコルを広範囲に確認した。特定のバリデーション結果を表1に要約する。
患者CSF中の二糖定量化のための較正曲線を生成するために、異なる濃度の二糖キャリブレーターは、患者の試料を模擬化するマトリックス中に添加された。このようなマトリックスを調製するために、市販のブランクCSFに抽出及び脱塩を行った。患者試料の処理とは対照的に、キャリブレーターの調製で使用したマトリックスは、酵素消化を受けなかった。この改変は、急上昇したキャリブレーターの名目上の濃度に対する、低い内因性HSレベルの関与を排除する。二糖キャリブレーターは、脱塩後及び標識化の前に調製したマトリックスに加えられて、12C−4−NBAで標識されて、同位体標識Istdの存在下で、HILICにより精製される。キャリブレーターは、ヒトCSF HS、すなわちIS、IIS、IIIS、IVS、IIA及びIVAの構造で最も豊富なものを表す6つの市販の二糖を含有する、混合物であった。直交法に基づいて、モル比は、サンフィリポ症候群A型患者のCSF中の蓄積されたHSの近似の二糖組成物を模倣するように調整された。使用する濃度は、患者CSF中の全二糖濃度が低下すると思われる範囲にわたった。試験した範囲は、定量化の下限(LLOQ)である0.1μM及び定量化の上限(ULOQ)である50μMを有する、全二糖0μM〜50μMである。キャリブレーター混合物中の各二糖の絶対の質量分析反応は、そのそれぞれの13C Istdに標準化された。6つの二糖の標準化した強度の合計は、混合物の全二糖濃度に対してプロットされた(図5)。生成された較正曲線は、最適式y=0.9613x+0.2005及び0.99の判定(R2)値の係数を有する線形であった。
品質管理(QC)は、較正曲線ベースの定量化の真度及び精度を評価するために用いる試料である。二糖QC(DS QC)は、新たに調整した二糖混合物を使用したキャリブレーターと同様に調整した。DS QCのものは較正曲線に基づいて定量化されて、定量化の真度及び精度を評価した。6つの複製中の各較正曲線の範囲にわたる5つの異なるQCレベルを、使用した。定量下限DS QC(0.1μM)、低DS QC(0.3μM)、低〜中DS QC(2μM)、中DS QC(15μM)及び高DS QC(37μM)。表3は、DS QCsの定量化のための1日内の真度及び精度データを示す。定量下限及び低DS QCについて、それぞれの%CVが11.7%と6.7%であったのに対して、%biasはそれぞれ16%及び9%であった。より高いQCレベルにおいて、真度及び精度パラメータ≦20%のままであった。この実験を3つの異なる日に繰り返して、5つのDS QCレベルにわたるアッセイ間の真度及び精度は、それぞれ−15.7〜16%及び2.2〜16%の範囲であった。
回収率(R)は、分析アッセイで使用する粗製材料の最初の量に対する回収される生成物の量の比であり得る。本分析アッセイにおいて、抽出/脱塩の後及び消化の直前にHSが同じマトリックスに添加される別の試料の標準化した検出反応を、最初の抽出工程前にHSがブランク未MPS CSFに添加される試料の標準化した検出反応で割ることによって、Rは測定される。比は、抽出及び脱塩の間、失われる材料の量を示す。この実施例のために、ウシ腎臓からのHSは市場での入手性に依存した。消化に応じて、較正曲線の定量化可能な範囲の全二糖濃度を得るHS濃度の低、低〜中、中及び高レベルについて、Rは算出された。興味深いことに、アッセイの回復率の値は、異なる濃度レベル(%CV=13.6)で急激な差異を示さず、44〜58%の範囲であった(表4)。実施例の残りのために及び必要に応じて、4つのHSレベル間の平均R値を使用した。
上記のとおりのDS QCの準備中に、二糖混合物は、標識化工程でマトリックスに添加される。したがってこのようなQCを使用すると、抽出、脱塩及び消化工程で起きる変化が考慮されないので、定量化の真度及び精度はアッセイの一部に対してのみ評価される。アッセイの真度及び精度に影響できるプロトコルの初期工程と関連する2つの要因は、抽出及び脱塩工程中の試料回復率間の可変性、及びHSの酵素消化中のリアーゼの矛盾する酵素活性である。これらの要因の複合した影響を評価するために、ヘパラン硫酸品質対照試料(HS QC)を使用した。異なる4レベルのHS QCは、最初のアニオン交換抽出工程前に、異なる濃度レベルで非MPSドナーCSFにウシ腎臓HSを添加することによって調製された。HS QCは、抽出から質量分析検出まで全試料調製プロトコルを受けた。処理中生成された二糖は、平均回復率Rにより修正される較正曲線及び値に基づいて、定量化された。算出平均QC濃度の1日内の真度は、−12.8%〜7.9%の範囲だった(表5)。1日内の%CVの範囲は、5.0%〜11.4%であった。3つの異なる実験にわたって、精度は4.6%〜18.3%の間にあると共に、1日内の真度は−12.8%〜7.9%の範囲であった。
再注入再現性は、あらかじめ許容した較正標準及び品質管理値の量を決定して、その後再注入が続く。値は理論上の値と比較した(表6)。
処理した試料中のヘパラン硫酸の抽出安定性は、新たに抽出した標準曲線に従った特定の試験条件下で保存した、あらかじめ受け入れた較正標準物質及び分析的な品質対照試料を192時間後に再注入することによって判定された(表7)。品質管理濃度を新たに抽出した較正曲線から算出されて、理論値と比較した。
凍解安定性を評価するために、少なくとも24時間の最初の凍結期間の後、各凍解サイクルは、少なくとも12時間の凍結貯蔵を含んだ(表8)。実験試料のために使用した方法条件当たり、マトリックス安定性品質対照試料は、解凍されて、維持された。各解凍サイクルの時間間隔は、少なくとも30分であった。
試験条件下(例えば、温度、露光量など)で保存した溶液から得た反応を、試験条件に供されなかった同じ溶液(対照)のアリコートから得た反応と比較することによって、溶液安定性は明らかにされた。新たに調製した溶液(対照)から得た反応を、試験条件(例えば、低下した温度、光からの保護)で維持した溶液から得た反応と比較することによって、長期の溶液安定性を判定した。13C6−4−ブチルアニリンで標識した二糖の25時間にわたる卓上溶液安定性は、対照と試験溶液の間の1.6%の差で許容された。ヘパラン硫酸原液の25時間にわたる卓上安定性は、試験と対照溶液の間の1.9%の差で許容された。二糖溶液の21時間にわたる卓上使用用溶液安定性は、試験と対照溶液の間の0.3%の差で許容された。ヘパラン硫酸の長期原液安定性(27日)は、試験と対照溶液の間の2.0%の差で許容された。ヘパラン硫酸二糖の長期原液安定性(56〜81日)は、I−Sにおいては試験と対照溶液の間の3.0%の差で、II−Sにおいては試験と対照溶液の間の11.5%の差で、IV−Sにおいては試験と対照溶液の間の−2.9%の差で、IV−Aにおいては試験と対照溶液の間の8.8%の差で許容された。ヘパラン硫酸二糖III−Sの長期原液安定性(81日)は、試験と対照溶液の間の−2.4%の差で許容された。高濃度(50.0μM)のヘパラン硫酸二糖の長期使用用溶液安定性(56日)は試験と対照溶液の間の−1.5%の差で許容された。
これらのデータは、HSの酵素消化によって生成された二糖の分離及び計量に、新規の96ウェルプレート、LC/MSプラットフォームを提供する。効果的なクロマトグラフ法は、例えば強アニオン交換(SAX)などのHS二糖類分析のために依然に利用された。効果的であるにもかかわらず、多くの従来のクロマトグラフ法は技術的な困難に直面する可能性がある。SAX分離の間、使用する高含有量の不揮発性塩は、特別なオンライン脱塩装置のない質量分析計によって、その直接カップリングを妨げる可能性がある。IPRPクロマトグラフィーは長時間を要する勾配を必要とする可能性があり、質量分析計を汚染する危険性がある移動相のアルキルアンモニウム塩のミリモル濃度の使用に依存している可能性がある。これにより多くの場合、1つの用途の運転中の器具がそれだけに専念することを必要とする可能性がある。PGCは、その損失を引き起こす溶出が困難な、特異的に高硫酸化した異なるHS二糖を保持できる(Gill,V.L.et al.,Anal.Chem.(2013)85(2):1138−1145)。HILICは、最適な分離を達成するために処理能力を犠牲にして長い分離時間(>30分)を必要とする可能性がある。分解能を保持すると共に、特定の場合には酢酸アンモニウムなどの通常の質量分析にも好都合な緩衝液を使用することにより、現行手法は、多くまたはすべてのこれらの問題をある程度は回避する。方法は、比較的急速な12分のLC/MS方法及び処理能力を提供できる。
25人の未治療のサンフィリポ症候群A型患者からのCSF試料は、上記のLC/MSベースHS分析法を使用して分析された。HS濃度は、CSFがバイオレポジトリーから得られて、同じ方法を用いて分析された156人の対照健康な個人と比較された。患者群において、HS濃度は1.94μM〜9.71μMの範囲であり、平均HS濃度は4.9μMであった(図6)。対照的に、対照試料の33%は、アッセイの定量化の下限(LLOQ)未満のHSレベルを特徴とする。定量化可能な範囲のそれらは、平均濃度は0.37μMであり、最低及び最高の濃度はそれぞれ0.229μM及び0.648μMであった。したがって対照と比べて、サンフィリポ症候群A型患者のCSF中のHSレベルは、著しい13倍の増加(t検定、P<0.001)であった。
本実施例は部分的には、患者の状況及び治療の有効性の監視のための本発明の方法の適用に関する。サンフィリポ症候群A型患者は、22週間脊髄内投与によって、毎月10mg、45mgまたは90mgの組み換えヘパランN−スルファターゼを投与された。CSF試料は組み換えヘパランN−スルファターゼの各投与の前に収集されて、CSF中のHSは上記のLC/MSベースHSアッセイを使用して測定された。22週間の治療理間にわたるCSF HSの変化を、図7に示す。すべての投与量で、CSF試料中のHS濃度は、ベースライン(すなわち、第1の治療投与量前に収集された試料)に対して50%減少した。これらのデータは、とりわけ、CSF HSレベルが治療過程の間、安定なままであり、CSF HSの最低レベルが90mg投与量で達成されたことを証明する。
9人の未治療のハンター症候群患者からのCSF試料は、実施例1に記載されているLC/MSベースHSアッセイを使用して分析された。HS濃度は、CSFがバイオレポジトリーから得られて、同じ方法を用いて分析された156人の対照健康な個人と比較された。患者群において、HS濃度は0.8μM〜9.5μMの範囲であり、平均HS濃度は2.9μMであった(図8)。対照的に、対照試料の33%は、アッセイの定量化の下限(LLOQ)未満のHSレベルを特徴とした。定量化可能な範囲のそれらは、平均濃度は0.37μMであり、最低及び最高の濃度はそれぞれ0.229μM及び0.648μMであった。したがって対照と比べて、ハンター症候群患者のCSF中のHSレベルは、著しい7.8倍の増加(t検定、P<0.001)であった。
患者
MPSIIの書面の診断を有する成人患者≧18歳及び小児患者<18歳を組み入れた。すべての患者を、静脈内イデュルスルファーゼERTで治療した。非研究関連の腰椎穿刺(LP)を受けるスクリーニング前、または全身麻酔の投与を必要とする他の医学的もしくは診断手続きの前に予定される場合だけ、小児患者は参加する資格があった。成人患者は、LPを受けることを任意に選択できた。成人患者は、スクリーニング/ベースライン前3か月でまたはそれ以内に、認知評価による知能指数≧78を有すること必要とした。正式な認知試験は、小児患者には必要とされなかった。
患者参加の予定期間は約3週間であり、2週間のスクリーニング/ベースライン期間、研究室及び認知評価のために約1日、及びCSF収集に1日(LP、または頭蓋内圧監視装置挿入(圧力ボルト術)などCSFへのアクセスを可能にする他の事前の予定手順を介して、または頸髄減圧術中)からなる。安全評価のための追跡調査は、CSF収集後約1週間で電話により行われた(8日目)。
主要な評価項目は、CSF中の全GAG濃度であった。安全対策は、有害事象(AE)の文書からなる。
CSF中の全HSレベルは、液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析法(LC−MS/MS)により測定された。簡潔には、CSF中のHSは、最初にアニオン交換樹脂を用いて抽出されて、次にヘパリナーゼI、II及びIIIを含む酵素の組み合わせで消化した。得られたHS二糖は、還元的アミノ化によって12C−4−N−ブチルアニリンで標識されて、それからLC−MS/MSにより分析された。全CSF HSレベルは、陽性対照として精製ウシHSを使用する、6つの最大量の(その信号強度に関連する)二糖の合成信号強度から得られた。
10人の患者が実験対象基準を満たして、米国5か所、英国2か所の7か所の施設で登録された(図9)。全10人の登録患者は実験を完了した。これらの患者のうち、8人は評価可能なCSFサンプルを有し、安全性及び薬力学的母集団に含まれた。残りの2人の患者のうち、1人目の患者は不成功のLPを有し、2人目は遡及的CSF試料をGAG分析に提供することに同意した。1人目の不成功のLP患者は薬力学母集団でないが安全性母集団の一部として評価されて、2人目は安全性評価ではなく、薬力学母集団の一部であった。このように安全性及び薬力学母集団はそれぞれ9人の患者を有し、そのうちの8人は重複していた。
患者ベースラインの人口統計学的及び臨床的特徴を、表11に示す。実験母集団は、5人の成人患者≧18歳及び5人の小児患者<18歳を含んだ。ベースライン(CSF及び尿試料採集)時の総合平均年齢は、17.9歳だった(4.1〜36.8歳の範囲)。5人の成人中、平均年齢は27.9歳で、5人の小児中、平均年齢は7.8歳だった。成人患者のみ行われたWAIS−IVのスコアは88〜111の範囲で、平均スコアは99.6であった。正常または異常として記録した小児患者の認知状態は、3人の患者は異常、2人の患者は正常だった。
全5人の成人患者はLPを受けたが、CSF収集はこれらの患者のうちの1人で失敗し、そのヒトは安全性母集団のみに含まれており、別の患者は2LPを必要として、それの2回目は成功した(表11)。CSF試料があった5人の児童を含む9人の患者のうち(薬力学的集団)、患者1人当たり収集したCSFの量は1.5〜16.0mLの範囲だった。全GAG濃度は、356.8〜2,360.9ng/mLの範囲だった。児童だけで、CSF全GAG濃度は356.8〜2,360.9ng/mLの範囲だった。成人だけで、GAG濃度は、381.5〜1,181.1ng/mLだった。
正常な認知発達/減弱したMPS IIの患者は一般に、重症な表現型の患者より低いCSF GAGレベルを有することができることを、これらのデータは証明する。認知状態が正常として評価された6人の患者(成人及び小児)のうち、5人は360ng/mL〜460ng/mLの範囲のCSF GAG値を有し、その一方で残りの患者のGAG値は1181.1ng/mLであった。対照的に、異常な認知の全3人の小児患者は値>840ng/mLを有した。質量分光で測定されるように、HSのレベルは一般に、健康な対象と比較して異常に高い値を有する全MPS II患者と、最も高い値を有する重症な表現型患者との類似のパターンに従った。しかし、最も高いHS値は認識的に無傷の成人で観察された(しかし、最も高い全CSF GAG値をもつ認知的に無傷の成人と同じ対象でなかった)。
本実施例は広くは、とりわけ、治療的処置の評価及び/またはモニタリングにおけるHSの質量分析アッセイの使用に関する。本実施例は、MPS IIIA患者(すなわちサンフィリポ症候群A型)に髄腔内投与した組み換えヒトヘパランN−スルファターゼ(rhHNS)の最高3回の投与量レベルの、安全性、耐容性及び臨床的活性を評価するように設計された、多施設、複数回投与、投与量逐次漸増試験について記載する。サンフィリポ症候群A型患者は、4週間毎に1度、10mg、45mgまたは90mgのrhHNSで治療した。患者はこれまでサンフィリポ症候群A型のための薬剤または装置による治療を受けていなかったが、延長試験に入った患者は先行試験でrhHNSの5回または6回の予定した投与量を受けた。治療の継続は6か月であり、延長試験に入った患者は治療の継続は48か月であった。
ヘパラン硫酸は、MPS IIIA中の主な蓄積代謝物質であり、中枢神経系のrhHNSの生体内活性を示す重要な薬力学エンドポイントである。実験期間にわたって、CSF中のグリコサミノグリカン(GAG)ヘパラン硫酸の濃度を測定した。全尿GAGも評価した。
本発明の多くの実施形態が本明細書に記載される一方で、本開示及び実施例は本発明の他の方法及び組成物を提供するために変更することができる。したがって、本発明の範囲は、例示として示される特定の実施形態に加えて、添付の請求の範囲により定義されることはいうまでもない。本明細書で引用したすべての参考文献は、参照により本明細書に組み込まれる。
Claims (17)
- 生体試料のグリコサミノグリカン(GAG)のレベルを測定する方法であって、前記方法が、
a)グリコサミノグリカンの消化が二糖の混合物の生成を可能にする条件下で、1つ以上の酵素で生体試料をインキュベートする工程と、
b)工程a)で生成する前記二糖の混合物を化学的に誘導体化する工程と、
c)各個別の前記誘導体化された二糖の量を測定する工程であって、
(i)個別の誘導体化された二糖をクロマトグラフィーにより分離することと、
(ii)各個別の誘導体化された二糖を質量分析で測定することと、
を含み、各個別の二糖が4−ブチルアニリンで誘導体化されており、 13 C 6 −4−ブチルアニリンで標識された各対応する二糖の内部標準物質と比較される、工程と、
d)工程c)で測定した前記各個別の誘導体化された二糖の量に基づいて生体試料のグリコサミノグリカン(GAG)のレベルを測定する工程と、を含む、方法。 - 前記グリコサミノグリカンがヘパラン硫酸を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記1つ以上の酵素が1つ以上のヘパリナーゼを含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記1つ以上のヘパリナーゼがヘパリナーゼI、II及び/またはIIIを含む、請求項3に記載の方法。
- 前記1つ以上の酵素が、コンドロイチナーゼAC、コンドロイチナーゼB、コンドロイチナーゼC、コンドロイチナーゼABC及びケラタナーゼからなる群から選択される、請求項1または2に記載の方法。
- 前記二糖の混合物が、二糖I−S(ΔUA,2S−GlcNS,6S)、II−S(ΔUA−GlcNS,6S)、III−S(ΔUA,2S−GlcNS)、IV−S(ΔUA−GlcNS)、II−A(ΔUA−GlcNAc,6S)及び/またはIV−A(ΔUA−GlcNAc)を含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記測定することが、誘導体化されたI−S(ΔUA,2S−GlcNS,6S)、誘導体化されたII−S(ΔUA−GlcNS,6S)、誘導体化されたIII−S(ΔUA,2S−GlcNS)、誘導化されたIV−S(ΔUA−GlcNS)、誘導体化されたII−A(ΔUA−GlcNAc,6S)、及び誘導体化されたIV−A(ΔUA−GlcNAc)のそれぞれの量を測定することを含む、請求項6に記載の方法。
- 前記二糖の混合物が疎水性部分で誘導体化されている、請求項1または2に記載の方法。
- 前記クロマトグラフィーが逆相液体クロマトグラフィーである、請求項1に記載の方法。
- 前記生体試料中の前記グリコサミノグリカン(GAG)のレベルが、前記測定した個々の二糖の量に基づいて合計した二糖のレベル値により決定される、請求項1または2に記載の方法。
- 前記生体試料が脳脊髄液(CSF)試料である、請求項1または2に記載の方法。
- 前記CSF試料が約10μl〜約100μlの範囲の量を有する、請求項11に記載の方法。
- 前記CSF試料が約45μl〜約55μlの範囲の量を有する、請求項11に記載の方法。
- 前記生体試料が血液試料である、請求項1または2に記載の方法。
- 前記生体試料が血しょう試料または尿試料である、請求項1または2に記載の方法。
- 前記生体試料が、グリコサミノグリカンを抽出するために最初に処理される、請求項1または2に記載の方法。
- 前記生体試料が、0.1μM超の濃度でグリコサミノグリカンを含む、請求項1または2に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201462080154P | 2014-11-14 | 2014-11-14 | |
US62/080,154 | 2014-11-14 | ||
PCT/US2015/060714 WO2016077775A1 (en) | 2014-11-14 | 2015-11-13 | Determination of glycosaminoglycan levels by mass spectrometry |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017535774A JP2017535774A (ja) | 2017-11-30 |
JP2017535774A5 JP2017535774A5 (ja) | 2018-12-20 |
JP6693954B2 true JP6693954B2 (ja) | 2020-05-13 |
Family
ID=54754780
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017525812A Active JP6693954B2 (ja) | 2014-11-14 | 2015-11-13 | 質量分析によるグリコサミノグリカンのレベルの測定 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10578624B2 (ja) |
EP (1) | EP3218722A1 (ja) |
JP (1) | JP6693954B2 (ja) |
CN (1) | CN107003324B (ja) |
AU (1) | AU2015346064B2 (ja) |
CA (1) | CA2967382A1 (ja) |
EA (1) | EA035784B1 (ja) |
MA (1) | MA40954A (ja) |
MX (1) | MX2017006242A (ja) |
WO (1) | WO2016077775A1 (ja) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6973714B2 (ja) * | 2017-06-09 | 2021-12-01 | 国立大学法人北海道大学 | ニーマン・ピック病c型の診断を補助する方法、ニーマン・ピック病c型に対する治療効果の判定を補助する方法並びにニーマン・ピック病c型治療薬のスクリーニング方法 |
MA50746A (fr) * | 2017-10-02 | 2020-08-12 | Denali Therapeutics Inc | Protéines de fusion comprenant des enzymes d'enzymothérapie substitutive |
CN114965822A (zh) * | 2017-10-27 | 2022-08-30 | 齐鲁制药有限公司 | 高效测定神经节苷脂gm1及其杂质的药物分析方法 |
CN107991414A (zh) * | 2017-12-28 | 2018-05-04 | 山东大学 | 一种舒洛地特的电泳亲水相互作用色谱质谱联用检测方法 |
WO2020040071A1 (ja) * | 2018-08-21 | 2020-02-27 | Jcrファーマ株式会社 | コンドロイチン硫酸の分析法 |
CN109541115B (zh) * | 2018-11-28 | 2021-04-20 | 西北大学 | 唾液酸化糖链同分异构体的高分辨顺序分离和准确定量分析方法 |
WO2021039644A1 (ja) * | 2019-08-23 | 2021-03-04 | Jcrファーマ株式会社 | 脳脊髄液に含まれるHex4,lyso-GM1,Fuc-GlcNAc-Asn,及びlyso-sulfatideの定量法 |
CN111721872B (zh) * | 2020-06-24 | 2021-06-25 | 山东大学 | 一种肝素与硫酸乙酰肝素的鉴别方法及应用 |
WO2022125560A1 (en) * | 2020-12-07 | 2022-06-16 | The Nemours Foundation | Elevation of glycosaminoglycans in subjects without mucopolysaccharidosis |
CN113092604B (zh) * | 2021-03-18 | 2022-04-12 | 福建省水产研究所(福建水产病害防治中心) | 水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法 |
CN115032377B (zh) * | 2022-08-11 | 2022-11-01 | 裕菁科技(上海)有限公司 | 一种粘多糖贮积症生物标记物及应用 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3698563B2 (ja) * | 1998-09-22 | 2005-09-21 | 生化学工業株式会社 | グリコサミノグリカンの測定方法及び測定キット |
JP2003265196A (ja) * | 2002-03-15 | 2003-09-24 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | ムコ多糖症のスクリーニング方法 |
AUPS293002A0 (en) * | 2002-06-14 | 2002-07-04 | Women's And Children's Hospital | Identification of oligosaccharides and their use in the diagnosis and evaluation of mucopolysaccharidoses and other related disorders |
US20050238536A1 (en) * | 2004-04-21 | 2005-10-27 | Striepeke Steven K | Device and method for measuring glycosaminoglycans in body fluids |
US20070161074A1 (en) * | 2005-12-27 | 2007-07-12 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Diagnostic method of mucopolysaccharidoses |
US9029530B2 (en) * | 2009-01-02 | 2015-05-12 | Biomarin Pharmaceutical Inc. | Detection of oligosaccharides |
RU2660348C2 (ru) | 2010-06-25 | 2018-07-05 | Шир Хьюман Дженетик Терапис, Инк. | Способы и композиции для доставки в цнс идуронат-2-сульфатазы |
EP2776553B1 (en) * | 2011-11-07 | 2018-07-11 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Biomarkers for sanfilippo syndrome and uses thereof |
CN103713057B (zh) * | 2013-12-12 | 2015-07-08 | 中国海洋大学 | 一种降解硫酸乙酰肝素及检测其二糖组成的方法 |
-
2015
- 2015-11-12 MA MA040954A patent/MA40954A/fr unknown
- 2015-11-13 JP JP2017525812A patent/JP6693954B2/ja active Active
- 2015-11-13 CN CN201580065001.7A patent/CN107003324B/zh active Active
- 2015-11-13 US US15/526,217 patent/US10578624B2/en active Active
- 2015-11-13 EA EA201790769A patent/EA035784B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2015-11-13 WO PCT/US2015/060714 patent/WO2016077775A1/en active Application Filing
- 2015-11-13 CA CA2967382A patent/CA2967382A1/en not_active Abandoned
- 2015-11-13 EP EP15802276.4A patent/EP3218722A1/en not_active Withdrawn
- 2015-11-13 AU AU2015346064A patent/AU2015346064B2/en active Active
- 2015-11-13 MX MX2017006242A patent/MX2017006242A/es unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2016077775A1 (en) | 2016-05-19 |
MA40954A (fr) | 2017-09-19 |
EA201790769A1 (ru) | 2017-11-30 |
CA2967382A1 (en) | 2016-05-19 |
EA035784B1 (ru) | 2020-08-10 |
CN107003324A (zh) | 2017-08-01 |
US20170350900A1 (en) | 2017-12-07 |
JP2017535774A (ja) | 2017-11-30 |
AU2015346064B2 (en) | 2021-09-23 |
EP3218722A1 (en) | 2017-09-20 |
MX2017006242A (es) | 2018-01-23 |
US10578624B2 (en) | 2020-03-03 |
CN107003324B (zh) | 2019-09-24 |
AU2015346064A1 (en) | 2017-05-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6693954B2 (ja) | 質量分析によるグリコサミノグリカンのレベルの測定 | |
JP4965999B2 (ja) | ムコ多糖症の診断方法 | |
Auray-Blais et al. | Efficient analysis of urinary glycosaminoglycans by LC-MS/MS in mucopolysaccharidoses type I, II and VI | |
Tomatsu et al. | Assay for glycosaminoglycans by tandem mass spectrometry and its applications | |
US9796999B2 (en) | Detection of oligosaccharides | |
TW200400351A (en) | Oligosaccharide biomarkers for mucopolysaccharidoses and other related disorders | |
US10888607B2 (en) | Marker for acid sphingomyelinase disorders and uses thereof | |
US8592140B2 (en) | Detection of oligosaccharides | |
He et al. | Synthetic disaccharide standards enable quantitative analysis of stored heparan sulfate in MPS IIIA murine brain regions | |
Wang et al. | Improving the sensitivity for quantifying heparan sulfate from biological samples | |
JP2010139511A (ja) | サポシンおよび他のマーカーを用いるリソソーム貯蔵障害の診断 | |
JP2016506501A (ja) | 異染性白質ジストロフィーの診断方法 | |
US9982288B2 (en) | Mucopolysaccharidosis IVA/VII screening and treatment method | |
Zhang et al. | Comparison of dermatan sulfate and heparan sulfate concentrations in serum, cerebrospinal fluid and urine in patients with mucopolysaccharidosis type I receiving intravenous and intrathecal enzyme replacement therapy | |
Maccari et al. | Composition and structure of glycosaminoglycans in DBS from 2-3-day-old newborns for the diagnosis of mucopolysaccharidosis | |
Makino et al. | Fast, sensitive method for trisaccharide biomarker detection in mucopolysaccharidosis type 1 | |
JP4703008B2 (ja) | 被験体におけるリソソーム貯蔵障害の診断またはモニターのために少なくとも1つのサポシンのレベルを使用する方法 | |
Saville et al. | Endogenous non-reducing end glycosaminoglycan biomarkers for the mucopolysaccharidoses: Accurate diagnosis and elimination of false positive newborn screening results | |
Nilsson et al. | A glycomic workflow for LC–MS/MS analysis of urine glycosaminoglycan biomarkers in mucopolysaccharidoses | |
US20240003908A1 (en) | Polyol biomarkers for congenital disorders of glycosylation | |
Lau et al. | Filipin complex‐reactive brain lesions: A cautionary tale | |
Krabbi | Biochemical Diagnosis of Classical Galactosemia and Mucopolysaccharidoses in Estonia | |
Yuan et al. | Urine proteome uncover common mechanism between mucopolysaccharidosis type I and II | |
Coppa et al. | Plasmatic and urinary glycosaminoglycans characterization in mucopolysaccharidosis II patient treated with enzyme-replacement therapy with idursulfase | |
Alharbi | The use of globotriaosylsphingosine to detect and monitor Fabry Disease |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181112 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20181112 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20190731 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190827 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20191126 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200327 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200416 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6693954 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |