JP6517281B2 - 治療薬のポリマーコンジュゲートの皮下送達 - Google Patents

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Description

本開示は、概してポリマーコンジュゲートに関する。本開示は、より詳細には、水溶性ポリマーと薬剤とを含み、該薬剤が放出可能なリンカーにより水溶性ポリマーに連結されており、該放出可能なリンカーが対象において切断可能な切断可能部分を含み、コンジュゲートを対象に投与後に薬剤を放出するポリマーコンジュゲートに関する。このような治療用コンジュゲートを使用する方法およびこのようなコンジュゲートを調製する方法を提供する。
水溶性ポリマーを含む薬剤コンジュゲートの開発により、水への溶解度、薬物動態、代謝、生体内分布および生物活性を含む、薬物の特性を強化可能である。安定な連結を有する多数のポリマー−タンパク質コンジュゲートが、ＦＤＡにより承認されており、現在重要な薬品である（Ｂｅｎｔｌｅｙ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ）Ｇｌｙｃｏｌ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，ｉｎ Ｋｎａｂｌｅｉｎ，Ｊ．（ｅｄ．），Ｍｏｄｅｒｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ Ｖｅｒｌａｇ ＧｂＨ，Ｖｏｌｕｍｅ４，２００５，Ｃｈａｐｔｅｒ ２，ｐｐ．１３９３−１４１８）。ポリ（エチレングリコール）、ポリ（グルタメート）およびポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）を含む水溶性ポリマーと、低分子腫瘍退縮薬とのコンジュゲーションは、臨床試験中である幾つかの製品をもたらしているが、未だ市販されている薬物はない（Ｍｅｒｏ，Ａ．，ＰＥＧ：ａ ｕｓｅｆｕｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ，ｉｎ Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，Ｆ．Ｍ．（ｅｄ．），ＰＥＧｙｌａｔｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇｓ：Ｂａｓｉｃ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｂｉｒｋｈａｕｓｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｂａｓｅｌ，２００９，ｐｐ．２７３−２８１）。タンパク質コンジュゲートの場合とは異なり、放出可能な連結を有する低分子コンジュゲートの製剤化は、高い頻度で有用である。これらのポリマーコンジュゲートは、結合された小分子の半減期を有意に延長することが知られている。腫瘍退縮薬のイリノテカンをマルチアームポリエチレングリコールポリマーに結合させ、マウスに静脈内注射した場合、この活性代謝産物であるＳＮ−３８の血漿半減期は、２時間から１７日に延びた（Ｅｌｄｏｎ，Ｍ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ＮＫＴＲ−１０２，ＰＥＧｙｌａｔｅｄ−ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ，ｉｎ ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｔｕｍｏｒｓ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｉｎ ｍｉｃｅ，Ｐｏｓｔｅｒ ｎｕｍｂｅｒ：Ｐ−０７２２，ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ａｔ ｔｈｅ １４ｔｈ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ（ＥＣＣＯ１４），２３−２７ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２００７，Ｂａｒｃｅｌｏｎａ，Ｓｐａｉｎ）。
小分子薬物のポリマーコンジュゲートの有利性は、薬物のｉｎ ｖｉｖｏ半減期が一般的に短いことに由来する。これらの薬物の短い半減期は、１日に数回の頻繁な投薬を必要とし、このことが、高濃度の薬物の「パルス」をもたらし、血流中の薬物濃度が治療有効性に必要とされる量より低い場合が長期間続く。例えば、パーキンソン病（ＰＤ）などの場合、短時間作用性ドーパミン作動薬またはレボドパによる線条体ドーパミン受容体のパルス状刺激は、中枢神経系（ＣＮＳ）中のドーパミン作動性ニューロンの変性につながる分子および生理的な変化を、実際に加速させ、従って、生活に支障をきたし得る運動症状の変動（ディスキネジア）を促進する恐れがある。相のピークレベルおよびトラフレベルがない、安定した状態で維持される生理学的レベルは、動物およびヒトの両方においてこれらの副作用を除外することが示されている。これらの化合物の幾つかの溶解度の低さが、限定された経口生体利用効率（ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｔｙ）と組み合わされると、これらの臨床使用をさらに複雑にする。これらの問題は、可溶性ポリマーコンジュゲートの調製により解決することができる。
当分野の技術は、皮下経路により投与され、薬の持続性の制御可能な送達を、数日から数週間の期間にわたって提供可能な組成物を欠いている。本開示は、水溶性ポリマーと薬剤とを含み、該薬剤は放出可能なリンカーにより水溶性ポリマーに連結され、該放出可能なリンカーが対象において切断可能な切断可能部分を含み、コンジュゲートを対象に投与後に薬剤を放出するポリマーコンジュゲートを提供する。本開示は、このようなコンジュゲートを提供する。本明細書に示すように、ポリマーコンジュゲートの皮下注射は、薬剤の持続性送達を、薬物の治療有効濃度で、数日から数週間の期間にわたって提供する。
Ｂｅｎｔｌｅｙ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ）Ｇｌｙｃｏｌ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，ｉｎ Ｋｎａｂｌｅｉｎ，Ｊ．（ｅｄ．），Ｍｏｄｅｒｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ Ｖｅｒｌａｇ ＧｂＨ，Ｖｏｌｕｍｅ４，２００５，Ｃｈａｐｔｅｒ ２，ｐｐ．１３９３−１４１８ Ｍｅｒｏ，Ａ．，ＰＥＧ：ａ ｕｓｅｆｕｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ，ｉｎ Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，Ｆ．Ｍ．（ｅｄ．），ＰＥＧｙｌａｔｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇｓ：Ｂａｓｉｃ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｂｉｒｋｈａｕｓｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｂａｓｅｌ，２００９，ｐｐ．２７３−２８１ Ｅｌｄｏｎ，Ｍ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ＮＫＴＲ−１０２，ＰＥＧｙｌａｔｅｄ−ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ，ｉｎ ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｔｕｍｏｒｓ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｉｎ ｍｉｃｅ，Ｐｏｓｔｅｒ ｎｕｍｂｅｒ：Ｐ−０７２２，ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ａｔ ｔｈｅ １４ｔｈ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ（ＥＣＣＯ１４），２３−２７ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２００７，Ｂａｒｃｅｌｏｎａ，Ｓｐａｉｎ
第１の態様において、本開示は、水溶性ポリマーと薬剤とを含み、該薬剤が、放出可能なリンカーによりポリマーに連結されている、ポリマーコンジュゲートを提供する。本態様のある実施形態において、薬剤は、診断薬または治療薬、例えば、限定するものではないが、有機小分子である。
第２の態様において、本開示は、水溶性ポリマーと、パーキンソン病（ＰＤ）または末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療に有用な薬剤とを含む、ポリマーコンジュゲートを提供し、該薬剤は、放出可能なリンカーによりポリマーに連結されている。
第３の態様において、本開示は、水溶性ポリマーと、過剰なＧＡＢＡの再取り込みもしくはＧＡＢＡの再取り込みにより特徴付けられる障害または不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用な薬剤とを含み、前記阻害剤が、放出可能なリンカーによりポリマーに連結された、ポリマーコンジュゲートを提供する。
第４の態様において、本開示は、水溶性ポリマーと、放出可能なリンカーもしくは水溶性ポリマーによりポリマーに連結されたドーパミン作動薬と、放出可能なリンカーによりポリマーに連結されたＧＡＢＡ再取り込み阻害剤とを含む、ポリマーコンジュゲートを提供する。
第５の態様において、本開示は、水溶性ポリマーと、放出可能なリンカーによりポリマーに連結されたロチゴチンとを含むポリマーコンジュゲート、水溶性ポリマーと、放出可能なリンカーによりポリマーに連結されたロピニロールとを含むポリマーコンジュゲート、および水溶性ポリマーと、放出可能なリンカーによりポリマーに連結されたチアガビンとを含むポリマーコンジュゲートを提供する。前述の一実施形態において、水溶性ポリマーは、ポリオキサゾリン、デキストラン、酸化により変性させたデキストランまたはポリエチレングリコールである。
第６の態様において、本開示は、ＰＯＺポリマーと薬剤とを含み、該薬剤が放出可能なリンカーによりＰＯＺポリマーに連結された、ポリ（オキサゾリン）（ＰＯＺ）コンジュゲートを提供する。この態様のある実施形態において、薬剤は診断薬または治療薬、例えば、限定するものではないが、有機小分子である。
第７の態様において、本開示は、ＰＯＺポリマーと、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療に有用な薬剤とを含み、該薬剤が、放出可能なリンカーによりポリマーに連結された、ＰＯＺポリマーコンジュゲートを提供する。
第８の態様において、本開示は、ＰＯＺポリマーと、過剰なＧＡＢＡの再取り込みもしくはＧＡＢＡの再取り込みにより特徴付けられる障害または不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用な薬剤とを含み、前記阻害剤が、放出可能なリンカーによりポリマーに連結された、ＰＯＺポリマーコンジュゲートを提供する。
第９の態様において、本開示は、ＰＯＺポリマーとドーパミン作動薬、放出可能なリンカーによりＰＯＺポリマーに連結されたドーパミン作動薬とを含むか、または／およびＰＯＺポリマーとＧＡＢＡ再取り込み、放出可能なリンカーによりＰＯＺポリマーに連結されたＧＡＢＡ再取り込み阻害剤とを含む、ＰＯＺポリマーコンジュゲートを提供する。
第１０の態様において、本開示は、ＰＯＺポリマーとロチゴチン、放出可能なリンカーによりＰＯＺポリマーに連結されたロチゴチンとを含むＰＯＺポリマーコンジュゲート、ＰＯＺポリマーと、放出可能なリンカーによりＰＯＺポリマーに連結されたロピニロールとを含むＰＯＺポリマーコンジュゲートならびにＰＯＺポリマーとチアガビン、放出可能なリンカーによりＰＯＺポリマーに連結されたチアガビンとを含むＰＯＺポリマーコンジュゲートを提供する。
第１から第５の態様のいずれかにおいて、水溶性ポリマーは、当分野において公知の水溶性ポリマーであってよい。本開示の使用に適切な例示的水溶性ポリマーとしては、限定するものではないが、下記の水溶性ポリマー：ＰＯＺ、ポリ（５，６−ジヒドロ−４ｈ−１，３−オキサジン）、デキストラン、酸化により変性させたデキストラン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）、ポリグルタミン酸、ポリ乳酸−ポリグルタミン酸混合物、ポリシアル酸、ポリカプロラクトン、ポリビニルピロリドン、ポリ（シアル酸）、ポリグリコサミノグリカン、ポリグリセロール、ポリ（アクリロイルオキシエチルホスホリルコリン）、ホスホリルコリンの合成型とのメタクリレートをベースとするコポリマーが挙げられる。前述の組み合わせもまた含まれる。第１から第５の態様の間の特定の実施形態において、水溶性ポリマーは、ＰＯＺ、ＰＥＧ、デキストランまたは酸化により変性させたデキストランである。第１から第５の態様の別の特定の実施形態において、水溶性ポリマーはＰＯＺである。第１から第５の態様の別の実施形態において、水溶性ポリマーは、ＰＥＧおよびＰＯＺのコポリマーである。
第１から第１０の態様のいずれかにおいて、放出可能なリンカーは、より大型の化学的部分（即ち連結基）に場合により含有される切断可能部分を含有し、薬剤とポリマーの間の化学的連結は切断可能である。この態様のある実施形態において、切断可能部分は、エステル、炭酸エステル、カルボン酸エステル、カーバメート、ジスルフィド、アセタール、ヘミアセタール、ホスフェート、ホスホネートまたはアミドである。特定の実施形態において、切断可能部分はエステルである。適切なエステル官能基としては、限定するものではないが、カルボン酸エステルおよび炭酸エステルが挙げられる。
前述の態様のいずれかにおいて、ＰＤまたは末梢神経もしくは中枢神経おけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療に有用な例示的薬剤としては、限定するものではないが、ドーパミン作動薬、アデノシンＡ２Ａ拮抗薬、抗コリン薬、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤およびカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤が挙げられる。例示的ドーパミン作動薬としては、限定するものではないが、ロチゴチン、プラミペキソール、キナゴリド、フェノルドパム、アポモルヒネ、５−ＯＨ−ＤＰＡＴ、ロピニロール、ペルゴリド、カベルゴリンおよびブロモクリプチンが挙げられる。例示的抗コリン薬としては、限定するものではないが、トリヘキシフェニジル、ビペリデンおよびヒヨスチアミンが挙げられる。例示的モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤としては、限定するものではないが、セレギリンおよびラサギリンが挙げられる。例示的ＣＯＭＴ阻害剤としては、限定するものではないが、トルカポンおよびエンタカポンが挙げられる。例示的Ａ２ａ拮抗薬としては、限定するものではないが、カフェイン、テオフィリン、イストラデフィリンおよびプレラデナントが挙げられる。
前述の態様のいずれかにおいて、例示的ＧＡＢＡ再取り込み阻害剤としては、限定するものではないが、チアガビンおよびニペコチン酸が挙げられる。第３、第４、第８または第９の態様のいずれかにおいて、ＧＡＢＡ再取り込み阻害剤はチアガビンである。
前述の態様のいずれかにおいて、例示的ドーパミン作動薬としては、限定するものではないが、ロチゴチン、プラミペキソール、キナゴリド、フェノルドパム、アポモルヒネ、５−ＯＨ−ＤＰＡＴ、ロピニロール、ペルゴリド、カベルゴリンおよびブロモクリプチンが挙げられる。第２、第４、第７または第９の態様のいずれかにおいて、ドーパミン作動薬はロチゴチンである。第２、第４、第７または第９の態様のいずれかにおいて、ドーパミン作動薬は（−）ロチゴチンである。
第１から第１０の態様のいずれかにおいて、薬剤は診断薬または治療薬であってよい。第１から第１０の態様のいずれかにおいて、治療薬は有機小分子であってよい。
第１１の態様において、本開示は、疾患の治療方法を提供し、該方法は、第１から第１０の態様のコンジュゲートを対象に投与するステップを含む。
第１２の態様において、本開示は、疾患の治療方法を提供し、該方法は第１から第１０の態様のコンジュゲートを対象に投与するステップを含み、血流中の薬剤レベルは、薬剤の性質、連結基の性質、ポリマーの性質、ポリマーのサイズ、送達方法または前述の組み合わせにより制御される。
第１３の態様において、本開示は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療方法を提供し、該方法は、第１から第２、第４から第７または第９から第１０の態様のコンジュゲートを対象に投与するステップを含む。
第１４の態様において、本開示は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療方法を提供し、該方法は、第１から第２、第４から第７または第９から第１０の態様のコンジュゲートを対象に投与するステップを含み、血流中の薬剤レベルは、薬剤の性質、連結基の性質、ポリマーの性質、ポリマーのサイズ、送達方法または前述の組み合わせにより制御される。
第１５の態様において、本開示は、過剰なＧＡＢＡの再取り込みもしくはＧＡＢＡの再取り込みにより特徴付けられる障害または不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療方法を提供し、該方法は、第３から第４、第６または第８から第９の態様のコンジュゲートを対象に投与するステップを含む。
第１６の態様において、本開示は、過剰なＧＡＢＡの再取り込みもしくはＧＡＢＡの再取り込みにより特徴付けられる障害または不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療方法を提供し、該方法は、第３から第４、第６または第８から第９の態様のコンジュゲートを対象に投与するステップを含み、血流中の薬剤レベルは、薬剤の性質、連結基の性質、ポリマーの性質、ポリマーのサイズ、送達方法または前述の組み合わせにより制御される。
第１１から第１６の態様のいずれかにおいて、コンジュゲートは、皮下投与により対象に投与される。
第１１から第１６の態様のいずれかにおいて、対象の血漿中の放出される薬剤のレベルは、皮下経路によって送達されるＰＯＺ−コンジュゲートの用量により制御される。
第１１から第１６の態様のいずれかにおいて、治療方法は、薬剤の持続性の制御可能な送達を、数日から数週間の期間にわたって提供する。
第１１から第１６の態様のいずれかにおいて、治療方法は、このような治療を必要とする対象を特定するステップをさらに含んでもよい。
第１１から第１６の態様のいずれかにおいて、コンジュゲートは、治療有効量で投与される。
第１７の態様において、本開示は、第１から第１０の態様のコンジュゲートの製造方法を提供する。
第１８の態様において、本開示は、第１から第１０の態様のコンジュゲートと一緒に該コンジュゲートを投与するための取扱説明書を含有するキットを提供する。
逆相クロマトグラフィー精製前のロチゴチン２−アジドアセテートのＨＰＬＣクロマトグラムを示す図である。 逆相クロマトグラフィー精製後のロチゴチン２−アジドアセテートのＨＰＬＣクロマトグラムを示す図である。 雄Ｓｐｒａｕｇｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける、ＰＯＺロチゴチンの静脈内投薬後のロチゴチンの薬物動態プロファイルを示す図である。 雄Ｓｐｒａｕｇｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける、ＰＯＺロチゴチンの皮下投薬後のロチゴチンの薬物動態プロファイルを示す図である。 雌カニクイザルにおける、ＰＯＺロチゴチンの皮下投薬後のロチゴチンの薬物動態プロファイルを示す図である。
定義
本明細書において使用する場合、「薬剤」という用語は、治療または診断用途を有する任意の分子を指し、該薬剤は、ポリマー上の官能基またはポリマーに結合した連結基と連結を形成でき、該薬剤は、限定するものではないが、治療薬（限定するものではないが、例えば薬物）、診断薬または有機小分子を含む。具体的実施形態において、薬剤は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療に有用である。具体的実施形態において、薬剤は、ドーパミン作動薬、アデノシンＡ２Ａ拮抗薬、抗コリン薬、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤またはカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤である。具体的実施形態において、薬剤は、過剰なＧＡＢＡ再取り込みもしくはＧＡＢＡ再取り込みにより特徴付けられる障害または不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用である。具体的実施形態において、薬剤は、ドーパミン作動薬である。別の具体的実施形態において、薬剤は、ＧＡＢＡ取り込み阻害剤である。
本明細書において使用する場合、「連結する（ｌｉｎｋ）」「連結した（ｌｉｎｋｅｄ）」または「リンカー（ｌｉｎｋｅｒ）」という用語は、本明細書に記載のポリマーまたは薬剤またはこれらの成分に関して使用する場合、化学反応の結果として正常に形成される基または結合を指し、通常共有結合である。
本明細書において使用する場合、「放出可能なリンカー」または「放出可能な官能基」という用語は、本開示のコンジュゲートが対象に投与された後で、対象においてｉｎ ｖｉｖｏの生理的条件下で対象において切断可能である、切断可能部分を含有する化学的連結を指す。一実施形態において、切断可能部分は、化学反応により切断される。この実施形態の態様において、切断は、容易に還元される基、限定するものではないが、例えばジスルフィドの還元による。一実施形態において、切断可能部分は、天然に存在する、または対象において存在するようになる物質により切断される。この実施形態の一態様において、このような物質は、酵素またはポリペプチドである。従って、一実施形態において、切断可能部分は酵素反応により切断される。一実施形態において、切断可能部分は、前述の組み合わせにより切断される。
本明細書において使用する場合、「アルキル」という用語は、単独で使用されても、または置換基の一部として使用されても、１から２０個の炭素原子を含む直鎖炭化水素基を含む。従って、この語句は、直鎖アルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルなどを含む。この語句は、直鎖アルキル基の分枝鎖異性体もさらに含み、限定するものではないが、例としては、以下の、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）３、−Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）などにより提供されるものを含む。この語句は、環状アルキル基、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを含み、上で定義した直鎖および分枝鎖のアルキル基により置換された、このような環もまた含む。この語句は、ポリ環状アルキル基、例えば、限定するものではないが、アダマンチル、ノルボニルおよびビシクロ［２．２．２］オクチルならびに上で定義した直鎖および分枝鎖のアルキル基により置換された、このような環もまた含む。
本明細書において使用する場合、「アルケニル」という用語は、単独で使用されても、または置換基の一部として使用されても、任意の２つの隣接する炭素原子の間に少なくとも１つの二重結合を有するアルキル基を含む。
本明細書において使用する場合、「アルキニル」という用語は、単独で使用されても、または置換基の一部として使用されても、任意の２つの隣接する炭素原子の間に少なくとも１つの三重結合を有するアルキル基を含む。
本明細書において使用する場合、「非置換アルキル」、「非置換アルケニル」および「非置換アルキニル」という用語は、ヘテロ原子を含有しないアルキル、アルケニルおよびアルキニル基を指す。
本明細書において使用する場合、「置換アルキル」「置換アルケニル」および「非置換アルキニル」という用語は、炭素または水素との１以上の結合が、非水素または非炭素原子、例えば、限定するものではないが、アルコキシ基およびアリールオキシ基などの基中の酸素原子；アルキルおよびアリールスルフィド基、スルホン基、スルホニル基およびスルホキシド基などの基中の硫黄原子；トリアルキルシリル基、ジアルキルシリル基、アルキルジアリールシリル基およびトリアリールシリル基などの基中のケイ素原子；ならびにさまざまな他の基中の他のヘテロ原子により置き換えられた、上で定義したアルキル、アルケニルおよびアルキニル基を指す。
本明細書において使用する場合、「非置換アラルキル」という用語は、非置換または置換のアルキルまたはアルケニル基の水素または炭素結合が、上で定義された置換または非置換のアリール基に対する結合と置き換えられた、上で定義された非置換アルキルまたはアルケニル基を指す。例えば、メチル（ＣＨ３）が、非置換アルキル基である。メチル基の水素原子がフェニル基への結合と置き換えられた場合、従って、例えば、メチルの炭素がベンゼンの炭素に結合する場合、この際この化合物は非置換アラルキル基（即ちベンジル基）である。
本明細書において使用する場合、「置換アラルキル」という用語は、置換アリール基が非置換アリール基に対して有した意味と同じ意味を、非置換アラルキル基に対して有する。しかし、置換アラルキル基は、基のアルキル部の炭素または水素結合が、非炭素または非水素原子への結合と置き換えられている基もさらに含む。
本明細書において使用する場合、「非置換アリール」という用語は、環部分に６から１２個の炭素原子を有する、単環式または二環式の芳香族炭化水素基、例えば、限定するものではないが、フェニル、ナフチル、アントラセニル、ビフェニルおよびジフェニル基を指し、これはヘテロ原子を含有しない。「非置換アリール」という語句は、縮合環、例えばナフタレンを含有する基を含むが、トシルなどのアリール基は、以下に記載する置換アリール基であると、本明細書において考えられるので、非置換アリールは、環員の１つに結合した他の基、例えばアルキル基またはハロ基を有するアリール基は含まない。しかし、非置換アリール基は、親化合物中の１以上の炭素原子、酸素原子、窒素原子および／または硫黄原子に結合してもよい。
本明細書において使用する場合、「置換アリール基」という用語は、置換アルキル基が非置換アルキル基に対して有した意味と同じ意味を、非置換アリール基に対して有する。しかし、置換アリール基は、芳香族炭素の１つが、非炭素または非水素原子、例えば、限定するものではないが、置換アルキルに対して上で記載した元素に結合されたアリール基もまた含み、アリール基の１以上の芳香族炭素が、本明細書において定義した置換および／または非置換のアルキル、アルケニルまたはアルキニル基に結合されたアリール基もまた含む。これは、アリール基の２つの炭素原子が、アルキルまたはアルケニル基の２つの原子に結合されて、縮合環系（例えば、ジヒドロナフチルまたはテトラヒドロナフチル）と定義される結合配置を含む。従って、「置換アリール」という語句は、限定するものではないが、トシルおよびヒドロキシフェニルなどを含む。
本明細書において使用する場合、「非置換ヘテロシクリル」という用語は、１以上がヘテロ原子、限定するものではないが、Ｎ、ＯおよびＳである、３以上の環員を含有する、単環式、二環式および多環式の環化合物を含む、芳香族および非芳香族両方の環化合物を指す。「非置換ヘテロシクリル」という語句は、縮合複素環、例えばベンゾイミダゾリルを含み、２−メチルベンゾイミダゾリルなどの化合物は、以下で定義する「置換ヘテロシクリル」基なので、非置換ヘテロシクリルは、環員の１つに結合された他の基、例えばアルキルまたはハロ基を有するヘテロシクリル基は含まない。ヘテロシクリル基の例としては、限定するものではないが、１から４個の窒素原子を含有する不飽和の３から８員環：１から４個の窒素原子を含有する縮合不飽和複素環基、１から２個の酸素原子および１から３個の窒素原子を含有する不飽和の３から８員環、１から２個の酸素原子および１から３個の窒素原子を含有する飽和の３から８員環、１から２個の酸素原子および１から３個の窒素原子を含有する不飽和縮合複素環基、１から３個の硫黄原子および１から３個の窒素原子を含有する不飽和の３から８員環、１から２個の硫黄原子および１から３個の窒素原子を含有する飽和の３から８員環、１から２個の硫黄原子を含有する飽和および不飽和の３から８員環、１から２個の硫黄原子および１から３個の窒素原子を含有する不飽和縮合複素環、酸素原子を含有する不飽和の３から８員環、１から２個の酸素原子を含有する不飽和縮合複素環、１つの酸素原子および１から２個の硫黄原子を含有する不飽和の３から８員環、１から２個の酸素原子および１から２個の硫黄原子を含有する飽和の３から８員環、１から２個の硫黄原子を含有する不飽和縮合環ならびに１つの酸素原子および１から２個の酸素原子を含有する不飽和縮合複素環が挙げられる。ヘテロシクリル基は、環中の１以上のＳ原子が１または２個の酸素原子と二重結合で結合されている、上記の基（スルホキシドおよびスルホン）もまた含む。
本明細書において使用する場合、「置換ヘテロシクリル」という用語は、置換アルキル基が非置換アルキル基に対して有した意味と同じ意味を、非置換ヘテロシクリルに対して有する。しかし、置換ヘテロシクリル基は、炭素の１つが、非炭素または非水素原子、例えば、限定するものではないが、置換アルキルおよび置換アリール基に対して上で記載した原子に結合されたヘテロシクリル基もまた含み、ヘテロシクリル基の１以上の炭素が、本明細書において定義した置換および／または非置換のアルキル、アルケニルまたはアリール基に結合されたヘテロシクリル基もまた含む。これは、ヘテロシクリル基の２つの炭素原子が、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基の２つの原子に結合されて、縮合環系を規定する結合配置を含む。例としては、限定するものではないが、２−メチルベンゾイミダゾリル、５−メチルベンゾイミダゾリル、５−クロロベンゾチアゾリル、１−メチルピペラジニルおよび２−クロロピリジルなどが挙げられる。
本明細書において使用する場合、「非置換ヘテロシクリルアルキル」という用語は、非置換のアルキルまたはアルケニル基の水素または炭素結合が、上で定義した置換または非置換のヘテロシクリル基への結合と置き換えられた、上で定義した非置換のアルキルまたはアルケニル基を指す。例えば、メチル（ＣＨ３）は非置換アルキル基である。メチル基の水素原子がヘテロシクリル基への結合により置き換えられた場合、従って、メチルの炭素がピリジンの２位炭素（ピリジンのＮに結合された炭素の１つ）またはピリジンの３位もしくは４位の炭素に結合された場合、該化合物は非置換ヘテロシクリルアルキル基である。
本明細書において使用する場合、「置換ヘテロシクリルアルキル」という用語は、置換アリール基が、非置換アリール基に対して有した意味と同じ意味を、非置換ヘテロシクリルアルキル基に対して有する。しかし、置換ヘテロシクリルアルキル基は、非水素原子が、ヘテロシクリルアルキル基のヘテロシクリル基中のヘテロ原子、例えば限定するものではないが、ピペリジニルアルキル基のピペリジン環中の窒素原子に結合された基もまた含む。
本明細書において使用する場合、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔ）」および「治療している（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、疾患または病態の症状、状況または特徴の発症後開始される、このような症状、状況または特徴を排除または低減するための、（例えば、コンジュゲートまたは医薬組成物を投与する）一連の行動を指す。このような治療は、絶対的に有用である必要はない。
本明細書において使用する場合、「治療を必要とする」という用語は、患者が治療を必要としている、または治療により利益を得るであろうという、介護者によって為される判断を指す。この判断は、介護者の専門知識の領域にあるさまざまな因子に基づいて為されるが、本開示の方法または化合物により治療可能である疾患または病態の結果として、患者が病気である、または病気になるという認識を含む。
本明細書において使用する場合、「予防を必要とする」という用語は、患者が予防を必要としているまたは予防により利益を得るであろうという、介護者によって為される判断を指す。この判断は、介護者の専門知識の領域にあるさまざまな因子に基づいて為されるが、本開示の方法または化合物により予防可能である疾患または病態の結果として、患者が病気になる、または病気になる可能性があるという認識を含む。
本明細書において使用する場合、「個体」、「対象」または「患者」という用語は、哺乳動物を含む任意の動物、例えばマウス、ラット、他のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマまたは霊長類およびヒトを指す。該用語は、雄もしくは雌または両方を指定することもあれば、または雄もしくは雌を除外することもある。
本明細書において使用する場合、「治療有効量」という用語は、単独または医薬組成物の一部としてのどちらかの、疾患または病態の症状、状況または特徴のいずれかに対して、任意の検出可能なよい効果を有し得る、コンジュゲートの量を指す。このような効果は、絶対的に有用である必要はない。
一般的説明
本開示は、水溶性ポリマーと薬剤とからなる、基本的にこれらからなる、またはこれらを含む、ポリマーコンジュゲートを提供する。一実施形態において、薬剤は、薬剤の反応基とポリマーの反応基との直接連結によって、ポリマー骨格に連結され得る。一実施形態において、直接連結は、ｉｎ ｖｉｖｏの生理的条件下で、対象、例えば、限定するものではないが、ヒトの体内において、ポリマーコンジュゲートを対象に投与した後のある時点で、薬剤がポリマーから放出されるような、少なくとも１つの切断可能部分を含有する。代替の実施形態において、薬剤は、連結基を介してポリマーに連結されてもよい。一実施形態において、連結基は、ｉｎ ｖｉｖｏの生理的条件下で対象、例えば、限定するものではないが、ヒトの体内において、ポリマーコンジュゲートを対象に投与した後のある時点で、薬剤がポリマーから放出されるような、少なくとも１つの切断可能部分を含有する。このような放出可能部位について本明細書において考察する。一実施形態において、連結基は、切断可能部分に加えて、ポリマーの反応基と連結を形成可能な基および薬剤の反応基と連結を形成可能な基を含有する。連結の形態に関係なく、該連結は、ポリマーコンジュゲートを対象に投与した後のある時点で、切断可能部分の切断によって薬剤をポリマーから放出可能にする、放出可能な連結である。コンジュゲートからの薬剤の放出動態は、薬剤の持続性の制御可能な送達を、数日から数週間にわたって提供する。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質、薬剤の性質、ポリマーの性質、ポリマーのサイズ、送達方法または前述の組み合わせにより制御される。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質により制御される。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質および／または薬剤の性質により制御される。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質および／またはポリマーの性質により制御される。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質、薬剤の性質および／またはポリマーの性質により制御される。
一般的な実施形態において、本開示のポリマーコンジュゲートは、一般式Ｉ
ＰＯＬｎ−Ｌ−Ａｂ Ｉ
（式中、
ＰＯＬは水溶性ポリマーであり、
ｎは１から１０００であり、水溶性ポリマーを含むモノマー単位の数を表し、
ｂは１から５０であり、ただしｎは常にｂ以上であり、
Ｌは、切断可能部分を含有する任意の連結基であるか、または薬剤の反応基とポリマーの反応基との間の直接連結を表し、ただし、該直接連結は切断可能部分を形成し、ならびに
Ａは薬剤である。）
により表すことができる。
開示のポリマーコンジュゲートのポリマー部分は、さまざまな形態をとることができる。ある実施形態において、ポリマーは、ポリ（オキサゾリン）（ＰＯＺ）、ポリ（５，６−ジヒドロ−４ｈ−１，３−オキサジン）、デキストラン、酸化により変性させたデキストラン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）、ポリグルタミン酸、ポリ乳酸−ポリグルタミン酸混合物、ポリシアル酸、ポリカプロラクトン、ポリビニルピロリドン、グリコサミノグリカン、ポリグリセロール、ポリ（アクリロイルオキシエチルホスホリルコリン）またはホスホリルコリンの合成型とのメタクリレートをベースとするコポリマーであり、前述の組み合わせもまた含まれる。
一実施形態において、ポリマーはポリ（オキサゾリン）（ＰＯＺ）である。さらに別の実施形態において、ポリマーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。さらに別の実施形態において、ポリマーはデキストランである。さらに別の実施形態において、ポリマーは、酸化により変性させたデキストランである。
薬剤は、疾患もしくは病態の治療または疾患もしくは病態の診断に有用な任意の薬剤であってよい。ある実施形態において、薬剤は診断薬または治療薬である。ある実施形態において、治療薬は有機小分子である。一実施形態において、薬剤は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療に有用な化合物である。別の実施形態において、薬剤は、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより特徴付けられる障害の治療に有用である。別の実施形態において、薬剤は、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用である。薬剤の性質を、本開示においてより詳細に記載する。
連結基は、ポリマー骨格の任意の反応基および薬剤の任意の反応基と連結を形成可能である。連結基とポリマーとの間の連結は、ポリマーの末端において形成可能である。代替的には、連結基とポリマーとの間の連結は、ポリマーの側鎖基（本明細書において「ペンダント」位と称される。）を使用して形成可能である。さらに、連結基は、ポリマーまたは薬剤にもともと存在した反応基の成分を含んでもよい。
適切な連結基を本明細書において記載する。
特定の実施形態において、本開示のポリマーコンジュゲートは、一般式ＩＩ
Ｒ−ＰＯＺｎ−Ｌ−Ａｂ ＩＩ
（式中、
Ｒは開始基であり、
ＰＯＺはポリオキサゾリンポリマーであり、
ｎは１から１１００であり、ポリオキサゾリンポリマーを含むモノマー単位の数を表し、
ｂは１から５０であり、ただしｎは常にｂ以上であり、
Ｌは、切断可能部分を含有する任意の連結基であるか、または薬剤の反応基とポリマーの反応基との間の直接連結を表し、ただし、該直接連結は切断可能部分を形成し、ならびに
Ａは薬剤である。）
により表すことができる。
さまざまなＰＯＺポリマーを、本開示のＰＯＺコンジュゲートに使用することができる。ＰＯＺは、単一のタイプまたは種類の官能基を含有してもよく、または複数のタイプまたは種類の官能基を含有してもよい。ＰＯＺは、線形ＰＯＺポリマー、分枝型ＰＯＺポリマー、ペンダントＰＯＺポリマーまたはマルチアームのＰＯＺポリマーである。さまざまな代表的ＰＯＺポリマーを、本明細書において記載する。ＰＯＺポリマーは、リビングカチオン重合または当分野において公知の他の方法により調製可能である。代表的ＰＯＺポリマーは、米国特許第７，９４３，１４１号、同第８，０８８，８８４号、同第８，１１０，６５１号および同第８，１０１，７０６号、米国特許出願公開第１３／００３，３０６号、同第１３／５４９，３１２号および同第１３／５２４，９９４号に記載されており、これらはそれぞれ、このような教示に関して参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態において、ＰＯＺポリマーは、リビンクカチオン重合により調製される。
薬剤は、疾患もしくは病態の治療または疾患もしくは病態の診断に有用な任意の薬剤であってよい。ある実施形態において、薬剤は診断薬または治療薬である。ある実施形態において、治療薬は有機小分子である。一実施形態において、薬剤は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療に有用な化合物である。別の実施形態において、薬剤は、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより特徴付けられる障害の治療に有用である。別の実施形態において、薬剤は、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用である。薬剤の性質を、本開示においてより詳細に記載する。
一実施形態において、ＰＯＺポリマーは、薬剤または連結基と連結を形成可能な、少なくとも１つの反応基を含有する。
ポリマーと薬剤との間の連結（直接連結であっても、または連結基を利用する連結であっても）は、ポリマー骨格の任意の反応基と、薬剤の任意の反応基との間に形成され得る。連結基とポリマーとの間の連結は、ポリマーの末端において形成可能である。代替的には、連結基とポリマーとの間の連結は、ポリマーの側鎖基（本明細書において「ペンダント」位と称される。）を使用して形成可能である。さらに、連結（直接連結であっても、または連結基を利用する連結であっても）は、ポリマーまたは薬剤にもともと存在した反応基の成分を含んでもよい。適切な連結基を本明細書において記載する。
例示的Ｒ基としては、限定するものではないが、水素、アルキルおよび置換アルキルが挙げられる。一実施形態において、開始基は、アルキル基、例えばＣ１からＣ４のアルキル基である。前述の具体的実施形態において、開始基はメチル基である。別の実施形態において、開始基はＨである。さらに別の実施形態において、開始基は、官能基を欠くように選択される。追加の例示的開始基は、米国特許第７，９４３，１４１号、同第８，０８８，８８４号、同第８，１１０，６５１号および同第８，１０１，７０６号、米国特許出願公開第１３／００３，３０６号、同第１３／５４９，３１２号および同第１３／５２４，９９４号に開示されており、これらはそれぞれ、このような教示に関して参照により本明細書に組み込まれる。
特定の実施形態において、本開示のＰＯＺコンジュゲートは、一般式ＩＩＡ
Figure 0006517281
 （式中、
Ｒ、ＰＯＺ、ｎ、ｂ、ＬおよびＡは、式ＩＩの説明において定義した通りであり、
Ｔは末端基である。）
により表すことができ、薬剤とポリマーとの間の連結は、「ペンダント」位において形成される。
一実施形態において、Ｔは末端求核試薬である。一実施形態において、ＴはＺ−Ｂ−Ｑであり、式中、ＺはＳ、ＯまたはＮであり、Ｂは任意の連結基であり、Ｑは末端求核試薬または求核試薬の末端部分である。ある実施形態において、Ｑは不活性（即ち、官能基を含有しない。）であり、他の実施形態において、Ｑは、第２の官能基を含有する。
例示的Ｂ基としては、限定するものではないが、アルキレン基が挙げられる。特定の実施形態において、Ｂは−（ＣＨ２）ｙ−であり、ｙは、１から１６から選択される整数である。特定の実施形態において、ＺはＳである。本明細書において記載の硫黄基を含有するＰＯＺコンジュゲートは、ＰＯＺカチオンをメルカプチド試薬、例えば、限定するものではないが、メルカプトエステル（例えば、−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２−ＣＯ２ＣＨ３）またはメルカプト保護アミン（例えば、−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２−ＮＨ−ｔＢｏｃ）により末端化することによって調製可能である。このようなＰＯＺコンジュゲートは、イオン交換クロマトグラフィーによる、有効な大規模精製（第２級アミンを除去する。）を提供し、多分散性値の制御（多分散性値１．１０以下）およびより高い分子量のＰＯＺポリマーを用いたコンジュゲートの生成を可能にする。別の実施形態において、ＺはＮである。さらなる実施形態において、ＺはＯである。
上記のように、Ｑは不活性であってもよく、または官能基を含有していてもよい。Ｑが官能基を含有する場合、例示的な基としては、限定するものではないが、アルキン、アルケン、アミン、オキシアミン、アルデヒド、ケトン、アセタール、チオール、ケタール、マレイミド、エステル、カルボン酸、活性カルボン酸（例えば、限定するものではないが、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）および１−ベンゾトリアジン活性エステル）、活性カーボネート、クロロホルメート、アルコール、アジド、ビニルスルホンまたはオルトピリジルジスルフィド（ＯＰＳＳ）が挙げられる。Ｑが不活性基である場合、限定するものではないが、−Ｃ６Ｈ５を含む、任意の不活性基が使用可能である。
一実施形態において、Ｌが存在して、切断可能部分を含有し、ＺはＳであり、Ｂは−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｑは−ＣＯＯＨである。別の具体的実施形態において、Ｌが存在して、切断可能部分を含有し、ＺはＯであり、Ｂは−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｑは−ＣＯＯＨである。さらに別の具体的実施形態において、Ｌが存在して、切断可能部分を含有し、ＺはＮであり、Ｂは−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｑは−ＣＯＯＨである。
別の特定の実施形態において、本開示のＰＯＺコンジュゲートは、一般式ＩＩＢ
Figure 0006517281
 （式中、
Ｒ、Ｌ、Ａは、式ＩＩの説明において定義した通りであり、Ｔ（Ｚ、ＢおよびＱの定義を含む。）は、式ＩＩＡの説明において記載した通りであり、
Ｒ１は非反応基であり、
ａは、ランダムコポリマーを示すラン(ｒａｎ)またはブロックコポリマーを示すブロックであり、
ｏは、１から５０の整数であり、ならびに
ｍは１から１０００の整数である。）
により表すことができ、薬剤とポリマーとの間の連結は、「ペンダント」位において形成される。
一実施形態において、Ｒ１はアルキルまたは置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ１は、メチル、エチル、プロピルまたはブチルである。例示的Ｒ１基は、米国特許第７，９４３，１４１号、同第８，０８８，８８４号、同第８，１１０，６５１号および同第８，１０１，７０６号、米国特許出願公開第１３／００３，３０６号、同第１３／５４９，３１２号および同第１３／５２４，９９４号に記載されており、これらはそれぞれ、このような教示に関して参照により本明細書に組み込まれる。
特定の実施形態において、ＴはＺ−Ｂ−Ｑであり、該化合物は、一般式ＩＩＣ
Figure 0006517281
 （式中、
Ｒ、Ｌ、Ａは、式ＩＩの説明において定義した通りであり、Ｚ、ＢおよびＱは、式ＩＩＡの説明において記載した通りであり、Ｒ１は、式ＩＩＢの説明において記載した通りである。）
により表される。
一実施形態において、Ｌが存在して、切断可能部分を含有し、ＺはＳであり、Ｂは−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｑは−ＣＯＯＨである。別の具体的実施形態において、Ｌが存在して、切断可能部位を含有し、ＺはＯであり、Ｂは−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｑは−ＣＯＯＨである。さらに別の具体的実施形態において、Ｌが存在して、切断可能部分を含有し、ＺはＮであり、Ｂは−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｑは−ＣＯＯＨである。
式ＩＩＢおよびＩＩＣのコンジュゲートの一実施形態において、ＰＯＺコンジュゲートは、一般式Ｒ−｛［Ｎ（ＣＯＸ）ＣＨ２ＣＨ２］ｏ−［Ｎ（ＣＯＲ１）ＣＨ２ＣＨ２］ｍ｝ａ−のＰＯＺポリマーと、薬剤または連結基とを反応させることによって形成される。上記の一般式において、Ｘは、薬剤または連結基と連結を形成できる官能基を含有する、ペンダント部分を表す。連結が形成される結果として、ＰＯＺポリマーのＣＯＸ部分は、ポリマーと薬剤とを連結する連結の一部となる。Ｘに関する例示的官能基としては、限定するものではないが、アルケン、アルキン、アラルキル、ヘテロシクロアルキル、アミン、オキシアミン、アルデヒド、ケトン、アセタール、ケタール、マレイミド、エステル、カルボン酸、活性カルボン酸（例えば、限定するものではないが、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）および１−ベンゾトリアジン活性エステル）、活性カーボネート、クロロホルメート、アルコール、アジド、ビニルスルホンまたはオルトピリジルジスルフィド（ＯＰＳＳ）が挙げられる。Ｘは、官能基をポリオキサゾリンポリマーに連結する連結部分を含むことができる。例示的連結部分としては、アルキレン基が挙げられる。ある場合において、アルキレン基はＣ１−Ｃ１５アルキレン基である。
特定の実施形態において、Ｘはアルキン基を含有し、薬剤または連結基は、アジド基を含有する。別の実施形態において、Ｘはアジド基を含有し、薬剤または連結基はアルキン基を含有する。またさらなる実施形態において、Ｘはカルボン酸を含有し、連結基はフェノール基を含有する。
図ＩＩＢおよびＩＩＣに示す実施形態において、このポリマーブロックは、薬剤または連結基と連結を形成可能な官能基を含有するペンダント部分を含有するので、ポリマーコンジュゲートに結合する薬剤および連結基の数は、可変数ｏにより定義される。一実施形態において、ポリマーコンジュゲートに結合する薬剤および連結基の数は、可変数ｏの値と等しい。別の実施形態において、ポリマーコンジュゲートに結合する薬剤および連結基の数は、可変数ｏの値より少ない。
一般式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢおよびＩＩＣに関して上に記載した実施形態において、具体的連結基を以下に記載する。明確にするために、本明細書に記載の任意の連結基は、上記の一般式で使用することができる。
連結基
上記の実施形態において、薬剤は、放出可能な連結によってポリマーに連結される。一実施形態において、連結基が、ポリマーと薬剤との間に提供され、該連結基は切断可能部分を含有する。連結基は、ポリマーと薬剤との間に放出可能な連結を形成可能である。言い換えると、連結基は、本開示のポリマーコンジュゲートを対象に投与後、対象においてｉｎ ｖｉｖｏで切断可能な連結を含有する。一実施形態において、切断可能部分は、化学反応により切断される。この実施形態の態様において、切断は、容易に還元される基、例えば、限定するものではないが、ジスルフィドの還元による。一実施形態において、切断可能部分は、天然に存在する、または対象において存在するようになる物質により切断される。この実施形態の態様において、このような物質は、酵素またはポリペプチドである。従って、一実施形態において、切断可能部分は酵素反応により切断される。一実施形態において、切断可能部分は、前述の組み合わせにより切断される。連結基は、ポリマーの部分および／または薬剤の部分を含有し、従って、このような部分が反応し、以下に考察する連結基を形成することができる。
例示的放出可能部分としては、限定するものではないが、エステル、カルボン酸エステル、（−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−）、炭酸エステル（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−）、カーバメート（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）およびアミド（−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）が挙げられ、他の放出可能な部分は本明細書において考察される。特定の実施形態において、切断可能部分はエステルである。別の特定の実施形態において、切断可能部分は、炭酸エステルまたはカルボン酸エステルである。加えて、連結基は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸または１以上の天然および／または非天然のアミノ酸を含有するポリマーであってよい。連結基は、ポリマー鎖および／または薬剤由来の特定の基を含んでもよい。
下記の説明において、ポリマーは、例示目的でポリオキサゾリンポリマーと仮定する。しかし、下記の反応は他のポリマータイプにも等しく適用可能である。
一実施形態において、連結基は、Ｒ３またはＲ４基の１つにおいて切断可能部分を含有する二置換トリアゾールである。一実施形態において、切断可能部分はＲ４基に存在する。具体的実施形態において、二置換トリアゾールは、構造
Figure 0006517281
 を有する。
別の実施形態において、二置換トリアゾールは、構造
Figure 0006517281
 を有する。
前述の構造のそれぞれにおいて、
Ｒ３は、トリアゾール部分をポリマー鎖に連結するリンカーである。Ｒ３は、ポリマー鎖の官能基により部分的に定義することができ、言い換えれば、Ｒ３は、ポリマー鎖の官能基の一部を含有することができる。一実施形態において、Ｒ３は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５−であり、Ｒ５は不在であるか、または１から１０個の炭素長の置換もしくは非置換のアルキルである。Ｒ４は、トリアゾール部分を薬剤に連結するリンカーである。Ｒ４は、薬剤の官能基により部分的に定義することができ、言い換えれば、Ｒ４は、薬剤の官能基の一部を含有することができる。一実施形態において、Ｒ４は−Ｒ６−Ｒ７−Ｒ８−であり、Ｒ６は、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアラルキルまたはオリゴ（エチレンオキシド）（例えば、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｄ−、ｄは１から１０または１から４である。）であり、Ｒ７は、切断可能部分もしくは切断可能部分の一部を含有する基であり、Ｒ８は不在であるか、またはＯ、Ｓ、ＣＲｃもしくはＮＲｃであり、Ｒｃは、Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキルである。ある実施形態において、Ｒ７およびＲ８は結び付き、切断可能部分を形成することができる。一実施形態において、Ｒ７は、−Ｒａ−（Ｏ）−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ｃｙｃｌｉｃ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ−（ｃｙｃｌｉｃは、置換もしくは非置換のアリール、ヘテロシクリルアルキル、複素環もしくはシクロアルキルを表す。）、−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（Ｃ６Ｈ４）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ１５−Ｒｂ−（Ｒ１５は、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ５アルキルである。）、−Ｒａ−ＣＨ（ＯＨ）−Ｏ−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｓ−Ｓ−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）−Ｏ−Ｒｂ−（Ｒ１１は、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ５アルキルである。）または−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ１５−Ｒｂ−（Ｒ１５は、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ５アルキルである。）であり、ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、不在であるか、または置換もしくは非置換のアルキルである。別の実施形態において、ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、不在であるか、またはＣ２−Ｃ１６の置換もしくは非置換のアルキルである。前述の一実施形態において、Ｒ６は、直鎖の置換もしくは非置換Ｃ１−Ｃ１６アルキルまたは分枝型の置換もしくは非置換Ｃ１−Ｃ１６アルキルであり、Ｒ７は−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒｂ−であり、Ｒ８は不在である。前述の一実施形態において、Ｒ６は直鎖の置換もしくは非置換Ｃ１−Ｃ４アルキルまたは分枝型の置換もしくは非置換Ｃ１−Ｃ４アルキルであり、Ｒ７は−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒｂ−であり、Ｒ８は不在である。前述の一実施形態において、Ｒ６は、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−または−ＣＨ２（ＣＨ３）−であり、Ｒ７は−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−であり、Ｒ８は不在である。
特定の実施形態において、Ｒ３は−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３であり、Ｒ４は−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−または−ＣＨ２（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である。
特定の実施形態において、Ｒ３は−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３であり、Ｒ４は−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯ−ＮＨ−（Ｃ６Ｈ４）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｄ−Ｃ（Ｏ）−であり、ｄは１から１０である。
別の実施形態において、連結基は構造Ｒ９−Ｙ−Ｒ１０を有し、Ｙは切断可能部分であり、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれ、Ｙをポリマーコンジュゲートおよび薬剤それぞれに連結する基である。Ｒ９およびＲ１０は、同じであっても、または異なっていてもよい。一実施形態において、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれ独立して、不在であるか、または置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアラルキルまたはオリゴ（エチレンオキシド）（例えば、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｄ−、ｄは１から１０または１から４である。）である。別の実施形態において、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれ独立して、不在であるか、またはＣ２−Ｃ１６の置換もしくは非置換アルキルである。
前述の一実施形態において、連結基Ｙは、Ｒ９−（Ｏ）−Ｒ１０−、−Ｒ９−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１０−、−Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ｃｙｃｌｉｃ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１０−（ｃｙｃｌｉｃは、置換もしくは非置換アリール、ヘテロシクリルアルキル、複素環もしくはシクロアルキルを表す。）、−Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（Ｃ６Ｈ４）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１０−、−Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１０−、−Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０−、−Ｒ９−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０−、−Ｒ９−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ１６−Ｒ１０−（Ｒ１６はＨまたは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ５アルキルである。）、−Ｒ９−ＣＨ（ＯＨ）−Ｏ−Ｒ１０−、−Ｒ９−Ｓ−Ｓ−Ｒ１０−、−Ｒ９−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１２）−Ｏ−Ｒ１０−（Ｒ１２はＨまたは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ５アルキルである。）、−Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ１６−Ｒ１０−（Ｒ１６はＨまたは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ５アルキルである。）または−Ｒ９−［ＮＲ１６−ＣＨ（Ｒ１３）（Ｒ１４）−Ｃ（Ｏ）］ｑ−Ｒ１０−（Ｒ１６はＨまたは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ５アルキルであり、Ｒ１３は、ＨまたはＣ１−Ｃ５アルキルであり、Ｒ１４は、天然もしくは非天然のアミノ酸の側鎖基であり、ｑは１から１０である。）であり、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれ独立して、不在であるか、または置換もしくは非置換のアルキルである。別の実施形態において、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれ独立して、不在、Ｃ１−Ｃ１６もしくはＣ１−Ｃ４の置換もしくは非置換アルキルである。
一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質、薬剤の性質、ポリマーの性質、ポリマーのサイズ、送達方法または前述の組み合わせにより制御される。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質により制御される。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質および／または薬剤の性質により制御される。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質および／またはポリマーの性質により制御される。一実施形態において、ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質、薬剤の性質および／またはポリマーの性質により制御される。さらに遊離薬剤の拡散もまた役割を果たすことができる。
前述のそれぞれにおいて、切断可能部分は、生理的条件下で化学的に切断可能であり、天然に存在する、または生理的条件下で対象において存在するようになる物質または前述の組み合わせにより切断される。一実施形態において、このような物質は酵素またはポリペプチドであり、切断は酵素的切断である。
薬剤
薬剤は、疾患もしくは病態の治療または疾患もしくは病態の診断に有用な、任意の薬剤であってよい。ある実施形態において、薬剤は診断薬または治療薬である。ある実施形態において、治療薬は有機小分子である。さらに、薬剤は、治療または診断用途を有する任意の分子であってよく、該薬剤は、本開示のポリマー、例えば、限定するものではないが、ＰＯＺポリマーの官能基または本開示のポリマーに結合した連結基と連結を形成できる。
一実施形態において、薬剤は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療に有用である。このような実施形態において、薬剤は、ドーパミン作動薬、ドーパミン拮抗薬、アデノシンＡ２Ａ受容体拮抗薬、抗コリン薬、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤およびカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤であってよい。例示的ドーパミン作動薬としては、限定するものではないが、ロチゴチン、プラミペキソール、キナゴリド、フェノルドパム、アポモルヒネ、５−ＯＨ−ＤＰＡＴ、ロピニロール、ペルゴリド、カベルゴリンおよびブロモクリプチンが挙げられる。例示的抗コリン薬としては、限定するものではないが、トリヘキシフェニジル、ビペリデンおよびヒヨスチアミンが挙げられる。例示的モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤としては、限定するものではないが、セレギリンおよびラサギリンが挙げられる。例示的ＣＯＭＴ阻害剤としては、限定するものではないが、トルカポンおよびエンタカポンが挙げられる。例示的アデノシンＡ２Ａ受容体拮抗薬としては、限定するものではないが、カフェイン、テオフィリン、イストラデフィリンおよびプレラデナント（Ｂ．Ｃ．Ｃｏｏｋ ａｎｄ Ｐ．Ｆ．Ｊａｃｋｓｏｎ，Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ａ２Ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ａｎｄ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＣＳ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２０１１，２，５５５−５６７）が挙げられる。
ＰＤは、黒質緻密部（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａ ｎｉｇｒａ ｐａｒｓ ｃｏｍｐａｃｔａ）におけるドーパミンニューロンの喪失からもたらされる中枢神経系障害である。脳におけるこれらのニューロンの喪失は、正常な協調および運動に必須である神経伝達物質であるドーパミンの欠損につながる。線条体ドーパミン作動性ニューロンは、ランダムであるが、ドーパミンの安定なレベルにより連続的に興奮し、正確な協調運動を可能にする。ＰＤ患者において、シナプス前細胞は変性している。症状を制御するための試みにおいて、ドーパミン系薬剤（ドーパミン作動薬およびレボドパ）の投与は、シナプス後細胞の不連続刺激につながり、疾患の進行を悪化する可能性のある運動症状の変動（ディスキネジア）を促進する。ＰＤのドーパミン欠損の初期症状としては、振戦、硬直、運動緩慢および歩行障害が挙げられる。認知および行動の障害ならびに認知症が、ＰＤの後期段階において生じる。
現時点においてＰＤの治癒法はないが、この疾患の症状は、ドーパミン作用の維持を目的とするさまざまな薬物により治療されている。ＰＤの治療に現在使用されている薬物としては、レボドパ、ドーパミン作動薬、アデノシンＡ２Ａ拮抗薬、抗コリン薬、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤およびカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ阻害剤などの薬物が挙げられる。レボドパは、通常ＰＤの後期段階のために使わずに残しておき、他の種類が、ＰＤの初期段階に選択される薬物である。これらの薬物に関連する課題が存在する。レボドパは、経口投与が可能であるが、消化管での代謝および不規則な吸収が生体利用効率を限定する。レボドパに関しては、生体利用効率は１０％未満であり、デカルボキシラーゼ酵素による代謝を含む末梢代謝により、脳に無傷で到達するものはさらに少ない。この問題に対処するため、デカルボキシラーゼ阻害剤、例えば、カルボドパを同時投与し末梢代謝を阻害する。さらに、これらの薬物の短い半減期は、毎日数回の頻繁な投薬を要求し、これにより、線条体ドーパミン受容体のパルス状刺激がもたらされ、これは、ＣＮＳにおけるドーパミン作動性ニューロンの消滅を実際に加速し得る。これらの化合物の幾つかの溶解度の低さ、および限定された経口生体利用効率は、これらの臨床使用をさらに複雑にする。
ドーパミン作動薬を使用してＰＤを治療することは、当分野において公知である。２−アミノテトラリン（ドーパミン作動薬活性を有する化合物の１種）の使用は、１９８０代後期の、Ｈｏｒｎ，Ａ．Ｓ．による開示（米国特許第４，７２２，９３３号、１９８８年２月および米国特許第４，８８５，３０８号、１９８９年１２月）に遡る。Ｈｏｒｎは、中枢神経系障害の治療のために、２−アミノテトラリンのアナログおよび小分子プロドラッグについて考察した。このような一例は、強力なドーパミン作動薬であるロチゴチンである。しかし、ロチゴチンの投与は、水性媒体への難溶性および半減期の短さにより困難であることが証明された。Ｓｗａｒｔおよびｄｅ Ｚｅｅｕｗは、ラットにおけるロゴスチンの経口および腹腔内の生体利用効率が１０％未満であることを報告している（Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｄｏｐａｍｉｎｅ Ｄ２ ａｇｏｎｉｓｔ Ｓ（−）−２−（Ｎ−ｐｒｏｐｙｌ−Ｎ−２−ｔｈｉｅｎｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）−５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｅｔｒａｌｉｎ ｉｎ ｆｒｅｅｌｙ ｍｏｖｉｎｇ ｒａｔｓ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１９９３ Ｆｅｂ；８２（２）：２００−３）。ヒトでの研究は、ロチゴチンが２．５時間の半減期を有し、スルフェートおよびフェノール基のグルクロニドアナログに急速に代謝されることを示している。これらのドーパミン作動薬の特徴および経口生体利用効率を改善するための試みにおいて、Ｓｔｅｆａｎｏ、ＳｏｚｉｏおよびＣｅｒａｓａ（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ２００８，１３：４６−６８）は、アセチル、プロピオニル、イソブチリルおよびカーバメートのプロドラッグを調製した。しかし、このタイプのエステルは、水溶性の改善は期待されず、作用期間の改善は、３から４時間から１１から１５時間のわずかな増大であった。経皮パッチは、最適下限薬物動態の対処のために開発された。この取り組みは、２４時間の送達および生体利用効率の改善を可能にするが、難溶性およびパッチにおける結晶化に関する安定性の問題が、製剤問題が処理されるまで、この製品を米国市場から撤退させた。
ロピニロールは、経口送達される別の非エルゴリン系ドーパミン作動薬であり、ヒトにおいて３から６時間の半減期を有する。肝臓および腎臓の代謝のため、臨床的利益を得るためには、高用量が必要である。加えて、１日１回の錠剤投薬は、血中濃度の望ましくないピークおよびトラフを生じる。
別の実施形態において、薬剤は、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより特徴付けられる障害の治療に有用である。一実施形態において、薬剤は、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用である。このような一実施形態において、薬剤は、ＧＡＢＡ再取り込み阻害剤であってよい。ＧＡＢＡ（ガンマアミノ酪酸）は、中枢神経系において産生される神経伝達物質であり、主要な阻害性神経伝達物質であると考えられている。特定の小分子（例えば、チアガビンおよびニペコチン酸）によるＧＡＢＡの再取り込みの阻害は、シナプス後細胞におけるこの活性を増強し、ＧＡＢＡ神経伝達を増強する。
従って、ＰＤおよびドーパミン欠損に関連する他の病態の治療用、ならびに不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療用の、新規な組成物が、当分野において必要である。
本開示は、ポリマー、例えば本明細書に記載のポリマーと、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療、ならびに不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用な薬剤とを含有するコンジュゲートを提供する。前述の障害は、持続性の薬物動態、生体利用効率の増加および投与の容易性に関するポリマーの取り組みから利益を受けるものである。
本開示のポリマーコンジュゲートは、ＰＯＺ−ロチゴチン、ＰＯＺ−チアガビン、ＰＯＺ−ロピニロール、ＰＥＧ−ロチゴチン、ＰＥＧ−チアガビンおよびデキストラン−ロチゴチンにより例示されている。このような薬剤およびポリマーが、水溶性ポリマーへの連結に適切な官能基を含有するように変性させた、または変性可能であることを条件として、本明細書に開示のものを含む、他の薬剤およびポリマーもまた、本開示のコンジュゲートに有用である。
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ＰＤの治療に有用な他の種類の薬物は、例えば、限定するものではないが、抗コリン薬（例えば、限定するものではないが、トリヘキシフェニジル、ビペリデンおよびヒヨスチアミン）、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤（例えば、限定するものではないが、セレギリンおよびラサギリン）、カテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤（例えば、限定するものではないが、トルカポンおよびエンタカポン）およびアデノシンＡ２Ａ受容体拮抗薬（例えば、限定するものではないが、プレラデナント、テオフィリンおよびイストラデフィリン）もまた、本明細書に記載のコンジュゲートおよび治療方法に有用である。
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明確にするために、薬剤は、前述の種類の化合物または適切な化学的官能基を有し、本開示の水溶性ポリマーまたは連結基と放出可能な連結を形成する別の種類の化合物のいずれであってもよい。前述の例は、例示目的で提示しており、限定する意図のものではない。
さらに、薬剤は、さまざまな疾患および病態の治療に使用可能である。本明細書は、ＰＤおよび末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する他の疾患もしくは病態の治療に有用な特定の薬剤ならびに不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用な薬剤を、本開示の教示を例示するために記載した。しかし、薬剤の選択は、例示した疾患または病態の治療を限定するものではない。持続性の薬物動態、生体利用効率の増加および投与の容易性に関するポリマーの取り組みから利益を得ると思われる任意の薬剤もまた使用可能である。前述の例は、例示目的で提示しており、限定する意図のものではない。
薬剤放出の制御
本開示は、水溶性ポリマーから薬物の放出動態が、ポリマーコンジュゲートのさまざまな１以上のパラメータにより制御され得るポリマーコンジュゲートを提供する。このようなパラメータとしては、限定するものではないが、連結基の性質、ポリマーの性質、薬剤の性質、ポリマーのサイズおよび送達のさまざまな方法（投与様式）が挙げられる。表１から４は、リンカー、薬物およびポリマーのさまざまな性質による、切断速度の制御についての実験データを提供する。
一実施形態において、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質により制御される。別の実施形態において、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態は、ポリマーの性質により制御される。別の実施形態において、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態は、薬剤の性質により制御される。別の実施形態において、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態は、ポリマーのサイズにより制御される。別の実施形態において、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態は、投与様式により制御される。またさらなる実施形態において、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質および／または薬剤の性質により制御される。またさらなる実施形態において、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質および／またはポリマーの性質により制御される。またさらなる実施形態において、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態は、連結基の性質、薬剤の性質および／またはポリマーの性質により制御される。
上記のように、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態（即ち、連結基の切断速度）は、一実施形態において、連結基の性質により制御される。例えば、ポリマー−トリアジン−アルキル−ＣＯ２−ロチゴチンの切断に関して表１に示すように、アルキル基の変化が、薬物であるロチゴチンの放出に影響を与えている。同様に、ポリマーの性質が、水溶性ポリマーからの薬剤の放出動態に対する影響を有している。例えば、ロチゴチンは、ＰＯＺからの方が、ＰＥＧまたは変性デキストランからよりもかなり緩慢に放出される（表１）。薬剤の放出が緩慢である方が、血中の薬物濃度の急速な上昇、続く急速なクリアランスを回避する。このようなプロファイルは、継時的な薬物の持続放出をもたらす。ある場合に、本開示のポリマーコンジュゲートの単回投与は、血中の薬剤の治療有効濃度を、数日から数週間にわたって提供することができる。
表２は、本開示のポリマーコンジュゲートからの薬剤の放出速度が、薬物自体により影響を受けることを例示している。ポリマーおよびリンカーの変動は、薬剤により決定されるある範囲内で、各薬剤の放出速度を調整するために使用可能である。表３は、ポリマーのさまざまな分子量およびペンダントの数が、ポリマーから薬剤（この場合イリノテカン）の放出速度に効果がないことを例示している。
加えて、ポリマーコンジュゲートに含有されるポリマーのサイズは、薬剤の体循環への放出速度に影響を与える。一実施形態において、ポリマーのサイズは、薬剤の体循環への放出速度に影響を与え、連結基の切断速度に影響を与えない。例えば、皮下投与において、ポリマーコンジュゲートの皮下コンパートメントからの放出速度は、少なくとも部分的にポリマーのサイズにより制御される。ポリマーサイズが増大する場合、皮下コンパートメントからの全身クリアランスの速度が低下する。ポリマーサイズが減少する場合、皮下コンパートメントからの全身クリアランスの速度が上昇する。結果として、ポリマーの体循環への進入、続く薬剤放出のための連結基の切断が制御され得る。
さらに、投与経路は、薬剤の体循環への放出速度に影響を与える。皮下経路による投与は、他の投与経路、例えば、静脈内投与と比較して、薬剤の体循環へのより緩慢な持続放出をもたらす。静脈内経路による投与は、薬剤の体循環へのより急速な放出をもたらす。これらの概念は、実施例３１から３２および図２から４に例示される。実施例３２は、サルにおける薬物動態に関する同様の結果を示し、実施例３１は、ラットに関する薬力学に関する同様の結果をもたらす。
ラットにおけるＰＯＺ−ロチゴチンの静脈内および皮下注射後のロチゴチン（ｎｇ／ｍＬ）の血漿濃度を、実施例３１に記載し、図２および３にそれぞれ示す。これらの結果は、ロチゴチンのＰＯＺコンジュゲートの使用が、静脈内（ＩＶ）投薬であっても、または皮下（ＳＣ）投薬であっても、親分子単独と比較した場合、血液からのロゴスチンのクリアランス速度は低下することを示す。ロチゴチン、ＰＯＺアセチルロチゴチンおよびＰＯＺプロピルロチゴチンに関する終末血漿半減期（ｔ１／２）は、それぞれ、２．８、１６および６０時間であった。しかし、投与経路を比較した場合（ＩＶ対ＳＣ）、ＰＯＺ−コンジュゲート、ＰＯＺアセチルロチゴチンおよびＰＯＺプロピルロチゴチンに関するＰＫプロファイルには差がある。ＩＶ送達されたＰＯＺ−コンジュゲートは、概して二相パターンが明確であり、ＰＯＺアセチルロチゴチンおよびＰＯＺプロピルロチゴチンの間にはほとんど差がなかった。しかし、ＳＣ投与後にＰＯＺアセチルロチゴチンとＰＯＺプロピルロチゴチンとを比較した場合、著しい差がある。ＰＯＺアセチルロチゴチンは、ＳＣまたはＩＶのいずれかで送達した場合、基本的に同じＰＫプロファイルを有する。ＰＯＺプロピルロチゴチンは、「ゼロ次」動態に近い、著しく長期にわたるＰＫプロファイルを有する。リンカーの性質は、薬剤、この場合、ロチゴチンの放出において役割を果たし、１日目から７日目までにラットの血漿中で測定されたレベルは、プロピルリンカーの方が、アセチルリンカーよりも高い。最初の１２時間のロチゴチンの初期血漿濃度は、ＰＯＺプロピルロチゴチンの方が、ＰＯＺアセチルロチゴチンコンジュゲートと比較して低い。１２時間において、血漿ロチゴチンのＣｍａｘ値は、１．６ｍｇ／ｋｇの用量でＳＣ投薬した場合、ＰＯＺプロピルロチゴチンに関して６ｎｇ／ｍＬであるのに対してＰＯＺアセチルロチゴチンは４８ｎｇ／ｍＬであった。
正常な、未処置の雌のカニクイザルにおける、ＰＯＺ−ロチゴチンの皮下注射後のロチゴチンの血漿濃度（ｎｇ／ｍＬ）を実施例３２に記載し、図４に示す。動物をランダムに４つの処置群に割り当て、それぞれＮ＝３であった。動物は、ＰＯＺアルファメチルアセチルロチゴチンまたはＰＯＺプロピルロチゴチンのいずれかを、１．５ｍｇまたは４．５ｍｇ／ｋｇ（ロチゴチンの当量に基づき）のいずれかの用量で単回皮下投薬を受けた。皮下注射後のロチゴチンの血漿濃度（ｎｇ／ｍＬ）を、図４に示す。これらの結果は、ロチゴチンのＰＯＺコンジュゲートが、血液からのロチゴチンのクリアランス速度を低下させることを示す。ＰＯＺアルファメチルアセチルロチゴチンおよびＰＯＺプロピオニルロチゴチン由来のロチゴチンの平均終末血漿半減期（ｔ１／２）は、それぞれ、９および６０時間である。またしても、ＰＯＺプロピルロチゴチンは、「ゼロ次」動態に近い、著しく長期にわたるＰＫプロファイルを有する。最初の１２時間のロチゴチンの初期血漿濃度は、ＰＯＺプロピルロチゴチンの方が、ＰＯＺアルファメチルアセチルロチゴチン化合物と比較して低い。４から１９２時間までに、血漿ロチゴチンの平均Ｃｓｓ値は、１．５ｍｇ／ｋｇ用量のＰＯＺプロピルロチゴチンに関して１から６ｎｇ／ｍＬの間であった。
これらの結果は、薬剤の制御された送達が、放出可能なリンカーの性質、ポリマーの性質、薬剤の性質、投与経路（例えば皮下対ＩＶ注射）または前述の組み合わせに基づき、「調整され」、薬剤を、望ましい放出プロファイルで、初期破裂効果なしに放出可能であることを示している。
粘度および薬物負荷
粘度および薬物負荷は、疾患治療に適切なポリマー−薬物コンジュゲートを製剤化する場合、考えなければならない追加の因子である。実施例３０および表５に示すように、ポリマーコンジュゲートの分子量が高くなると、溶液において粘度が増加し、従って有効な注射には粘性が高くなりすぎる可能性がある。ポリマーの性質もまた、この考慮すべき事柄の因子である。例えば、ＰＯＺコンジュゲートは、同じ分子量の４−アームＰＥＧコンジュゲートより粘性が低い。同様に、ＰＥＧ−デンドリマーは、４−アームＰＥＧコンジュゲートより粘性が低い。さらに、ポリマー骨格に結合可能な薬剤の数も考慮に入れなければならない。例えば、１０個のペンダントを有するＰＯＺ−２０Ｋポリマーは、４−アームＰＥＧ２０Ｋポリマーより多くの薬剤分子を担持し、従って、より少ない量のＰＯＺコンジュゲートを注射して、同じ量の薬剤を対象に送達できる。従って、粘度および薬物負荷ならびに血中への放出速度に影響を与える因子（上記）は、疾患治療用の適切なポリマー−薬物組成物を製剤化する場合、考慮しなければならない。一実施形態において、粘度の観点から許容されるポリマー−薬物コンジュゲートは、２８Ｇの針を通して注射可能である。一実施形態において、粘度の観点から許容されるポリマー−薬物コンジュゲートは、（ｍＰａｓで測定して）２１０、１７５、１６０、１５０、１２５または７５以下の粘度を有する。
治療方法
本開示は、水溶性ポリマーと薬剤とを含み、該薬剤が放出可能なリンカーによりポリマーに連結されたポリマーコンジュゲートを提供する。本開示は、ポリマーコンジュゲートからの薬剤の放出が制御可能であることをさらに示す。一態様において、薬剤は、先行技術の治療においてみられるピークおよびトラフがない薬物動態で送達される。一態様において、ポリマーコンジュゲートからの定常状態に近い薬剤の放出が、数日から数週間の期間にわたって達成される。一実施形態において、このような放出プロファイルは、治療有効濃度の薬剤を、このような期間にわたって提供する。結果として、本開示のポリマーコンジュゲートは、薬剤の適切な選択を介して、ヒトの疾患の治療に有用である。さらに、本開示のポリマーコンジュゲートは、当分野と比較して頻度の低い投与を可能にし、治療有効濃度の薬剤を対象において達成する。一実施形態において、本開示のポリマーコンジュゲートは、１日１回、１日おきに１回、１週間に１回または他の所望の間隔で投与される。
一実施形態において、疾患状態または病態の治療方法を開示する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。一実施形態において、このような疾患状態または病態はＰＤである。一実施形態において、このような疾患状態または病態は、末梢神経系または中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する疾患または病態である。一実施形態において、このような疾患状態または病態は、レストレスレッグ症候群である。一実施形態において、このような疾患状態または病態は不安障害である。一実施形態において、このような疾患状態または病態は社会不安障害である。一実施形態において、このような疾患状態または病態はパニック障害である。一実施形態において、このような疾患状態または病態は発作障害である。一実施形態において、このような疾患状態または病態は神経障害性疼痛である。一実施形態において、このような疾患状態または病態は線維筋痛である。一実施形態において、このような疾患状態または病態はひきつけである。一実施形態において、このような疾患状態または病態はてんかんである。一実施形態において、このような疾患状態または病態は筋振戦である。一実施形態において、このような疾患状態または病態は筋痙攣である。
このような実施形態において、本明細書に記載の任意のポリマーコンジュゲートを使用可能であり、薬剤は、治療される疾患または病態に基づき選択可能である。特定の実施形態において、ポリマーはＰＯＺポリマーである。別の実施形態において、ポリマーはＰＥＧポリマーである。さらに別の実施形態において、ポリマーはデキストランポリマーまたは酸化により変性させたデキストランポリマーである。
一実施形態において、本開示は、疾患状態または病態を治療する方法を提供し、該疾患状態または病態は、末梢神経系または中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する疾患または病態である。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、ドーパミン不足に関連する疾患または病態はＰＤである。従って、本開示は、ＰＤを治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、ドーパミン不足に関連する疾患または病態はレストレスレッグ症候群である。従って、本開示は、レストレスレッグ症候群を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
本開示の任意のポリマーコンジュゲートが、上記の方法に使用可能である。特定の実施形態において、下記のポリマーコンジュゲートが、このようの治療方法に使用可能である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経におけるドーパミン不足に関連する別の疾患もしくは病態の治療に有用な化合物である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ドーパミン作動薬、アデノシンＡ２Ａ拮抗薬、抗コリン薬、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤またはカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ロチゴチン、プラミペキソール、キナゴリド、フェノルドパム、アポモルヒネ、５−ＯＨ−ＤＰＡＴ、ロピニロール、ペルゴリド、カベルゴリンまたはブロモクリプチンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ロチゴチンまたは（−）ロチゴチンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ロピニロールである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、トリヘキシフェニジル、ビペリデンまたはヒヨスチアミンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、セレギリンまたはラサギリンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、トルカポンまたはエンタカポンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、カフェイン、テオフィリン、イストラデフィリンまたはプレラデナントである。
前述の実施形態において、ポリマーコンジュゲートがポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートである場合、該ポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートは、化合物ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢまたはＩＩＣのために示した一般式を有し得る。一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、化合物ＩＩＣまたは本明細書において例のために示した一般式を有する、ポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、ポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経におけるドーパミン不足に関連する別の疾患もしくは病態の治療に有用な化合物である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ドーパミン作動薬、アデノシンＡ２Ａ拮抗薬、抗コリン薬、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害またはカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ロチゴチン、プラミペキソール、キナゴリド、フェノルドパム、アポモルヒネ、５−ＯＨ−ＤＰＡＴ、ロピニロール、ペルゴリド、カベルゴリン、またはブロモクリプチンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ロチゴチンまたは（−）ロチゴチンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ロピニロールである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、トリヘキシフェニジル、ビペリデンまたはヒヨスチアミンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、セレギリンまたはラサギリンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、トルカポンまたはエンタカポンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、カフェイン、テオフィリン、イストラデフィリンまたはプレラデナントである。
前述の実施形態において、ポリマーがポリエチレングリコールポリマーである場合、該ポリエチレングリコールポリマーは、４−アームポリマーを含むマルチアームポリマー、二官能性ポリマーまたはデンドリマーであってよい。
前述の実施形態において、ポリマーコンジュゲートがポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートである場合、該ポリエチレングリコールポリマーコンジュゲーは、化合物Ｉまたは本明細書において例のために示した一般式を有し得る。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経におけるドーパミン不足に関連する別の疾患もしくは病態の治療に有用な化合物である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ドーパミン作動薬、アデノシンＡ２Ａ拮抗薬、抗コリン薬、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤またはカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ロチゴチン、プラミペキソール、キナゴリド、フェノルドパム、アポモルヒネ、５−ＯＨ−ＤＰＡＴ、ロピニロール、ペルゴリド、カベルゴリンまたはブロモクリプチンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ロチゴチンまたは（−）ロチゴチンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤はロピニロールである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、トリヘキシフェニジル、ビペリデンまたはヒヨスチアミンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、セレギリンまたはラサギリンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、トルカポンまたはエンタカポンである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、カフェイン、テオフィリン、イストラデフィリンまたはプレラデナントである。
前述の実施形態において、ポリマーコンジュゲートがデキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートである場合、該デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートは、化合物Ｉまたは本明細書において例のために示した一般式を有し得る。
一実施形態において、本開示は、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態を治療する方法を提供する。別の実施形態において、本開示は、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんを治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。このような実施形態において、薬剤は、ＧＡＢＡ再取り込み阻害剤であってよい。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、不安障害である。従って、本開示は、不安障害を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、社会不安障害である。従って、本開示は、社会不安障害を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、パニック障害である。従って、本開示は、パニック障害を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、発作障害である。従って、本開示は、発作障害を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、筋振戦である。従って、本開示は、筋振戦を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、筋痙攣である。従って、本開示は、筋痙攣を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、ひきつけである。従って、本開示は、ひきつけを治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、神経障害性疼痛である。従って、本開示は、神経障害性疼痛を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、線維筋痛である。従って、本開示は、線維筋痛を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、てんかんである。従って、本開示は、てんかんを治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、筋痙攣である。従って、本開示は、筋痙攣を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
一実施形態において、過剰なＧＡＢＡ再取り込みまたはＧＡＢＡ再取り込みにより引き起こされる疾患または病態は、不眠症である。従って、本開示は、不眠症を治療する方法を提供する。このような方法は、ある量の、対象に対する本開示のポリマーコンジュゲートを、対象に投与するステップを含む。
本開示の任意のポリマーコンジュゲートが、上記の方法に使用可能である。特定の実施形態において、下記のポリマーコンジュゲートが、このような治療方法に使用可能である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用な化合物である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤はＧＡＢＡ再取り込み阻害剤である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、チアガビンまたはニペコチン酸である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであり、薬剤はチアガビンである。
前述の実施形態において、ポリマーコンジュゲートがポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートである場合、該ポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートは、化合物ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢまたはＩＩＣについて示した一般式を有し得る。一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、化合物ＩＩＣまたは本明細書において例のために示した一般式を有する、ポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートである。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用な化合物である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤はＧＡＢＡ再取り込み阻害剤である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、チアガビンまたはニペコチン酸である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートはポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートであり、薬剤はチアガビンである。
前述の実施形態において、ポリマーがポリエチレングリコールポリマーである場合、該ポリエチレングリコールポリマーは、４−アームポリマーを含むマルチアームポリマー、二官能性ポリマーまたはデンドリマーであってよい。
前述の実施形態において、ポリマーコンジュゲートがポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートである場合、該ポリエチレングリコールポリマーコンジュゲートは、化合物Ｉまたは本明細書において例のために示した一般式を有し得る。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療に有用な化合物である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、ＧＡＢＡ再取り込み阻害剤である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、チアガビンまたはニペコチン酸である。
一実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートであり、薬剤は、チアガビンである。
前述の実施形態において、ポリマーコンジュゲートがデキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートである場合、該デキストランまたは酸化デキストランのポリマーコンジュゲートは、化合物Ｉまたは本明細書において例のために示した一般式を有し得る。
記載の方法において、ポリマーコンジュゲートは、単独または本明細書に記載の医薬組成物の一部として投与可能である。一実施形態において、対象は、このような治療を必要とするものと決定される。さらなる実施形態において、ポリマーコンジュゲートは、治療有効量で投与される。本明細書に開示の方法において、対象は哺乳動物であってよい。ある実施形態において、対象はヒトである。
一実施形態において、治療方法は、本開示のポリマーコンジュゲートまたはこのようなポリマーコンジュゲートを含有する医薬組成物の皮下投与により達成される。
加えて、一実施形態において、このようなポリマーコンジュゲートは、１日１回投与される。別の実施形態において、このようなポリマーコンジュゲートは、１日おきに１回投与される。またさらなる実施形態において、このようなポリマーコンジュゲートは、３日、４日、５日または６日に１回投与される。その上さらなる実施形態において、このようなポリマーコンジュゲートは、１週間に１回投与される。他の投薬頻度もまた、選択したポリマーコンジュゲートの性質および薬剤の放出動態に基づき使用可能である。
本明細書に記載のポリマーコンジュゲートは、他の治療薬、例えば、ＰＤまたは本明細書に引用された任意の他の病態の治療に有用である他の薬剤と組み合わせて使用することもできる。他の治療薬と一緒に投与される場合、本開示のポリマーコンジュゲートは、追加の治療薬の前、後または同時に投与することができる。さらに、一実施形態において、本開示は、本明細書に記載のポリマーコンジュゲート、少なくとも１種の他の治療薬および医薬として許容される希釈剤または担体を含む組成物を提供する。
キット
本開示は、本開示のポリマーコンジュゲート、包装材およびＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する別の疾患もしくは病態の治療のために、前述のポリマーコンジュゲートを対象に投与するための取扱説明書を含む、基本的にこれらからなる、またはこれらからなるキットを提供する。
本開示は、本開示のポリマーコンジュゲート、包装材ならびに不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療のために、前述のポリマーコンジュゲートを対象に投与するための取扱説明書を含む、基本的にこれらからなる、またはこれらからなるキットもまた提供する。
本開示は、本開示のポリマーコンジュゲート、少なくとも１種の他の治療薬、包装材およびＰＤまたは末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する別の疾患もしくは病態の治療のために、前述のポリマーコンジュゲートを対象に投与するための取扱説明書を含む、基本的にこれらからなる、またはこれらからなるキットもまた提供する。
本開示は、本開示のポリマーコンジュゲート、少なくとも１種の他の治療薬、包装材ならびに不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛（線維筋痛などのほとんど解明されていない障害における有用性を含む。）、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけおよび／またはてんかんの治療のために、前述のポリマーコンジュゲートを対象に投与するための取扱説明書を含む、基本的にこれらからなる、またはこれらからなるキットもまた提供する。
製造方法
一実施形態において、薬剤は、「クリックケミストリー」を使用してポリマーに連結される。この取り組みはさらに、すべてのポリマータイプに容易に適用可能である。一実施形態において、ポリマーはＰＯＺである。別の実施形態において、ポリマーはＰＥＧである。別の実施形態において、ポリマーはデキストランである。クリックケミストリーの取り組みは、アルキン基とアジド基との間の反応を伴う。従って、一実施形態において、薬剤は、アルキン基またはアジド基の一方を含有し、ポリマーは、アルキン基またはアジド基の他方を含有する。それぞれの基は、薬剤および／またはポリマーに結合した連結基に同様に存在してもよい。一態様において、クリックケミストリー反応は、薬剤のアジドエステルとポリマーのアルキンとの反応を伴う。この態様の特定の実施形態において、アジドエステル基は、薬剤の化学基、例えば、限定するものではないが、ヒドロキシル基との適切な化学反応により形成される。例示的反応は、ハロ酸由来のハロゲン化物とアジ化ナトリウムとを置き換え、アジド酸を形成し、続いて、アジド酸を、薬剤（ここでは例としてロチゴチン）のヒドロキシル基でエステル化することによるアジドエステルの調製である。
Figure 0006517281
アジドロチゴチンエステルを、その後、ポリマーに存在するアルキン官能基と連結する。特定の実施形態において、アルキン官能基は、ＰＯＺポリマーのペンダント位に存在するアセチレン官能基である。
Figure 0006517281
上記の方法を使用してもよいが、放出可能な官能基の形成に対する他の取り組みを使用してもよい。例えば、切断可能部分としてエステルを含有する連結は、ポリマーにアジド官能基、例えばＰＯＺポリマーのペンダント基を生成し、薬剤にアルキン基、例えばロチゴチンのアセチレンエステルを生成し、アジド基とアルキン基を反応させ、切断可能部分（この場合エステル結合）を有する連結を形成することによって形成することもできる。
別の取り組みにおいて、カルボン酸基を、ポリマー、例えばＰＯＺポリマーのペンダント基に生成し、薬剤のアルコールまたはフェノール基を直接エステル化することによってカルボン酸基を反応させ、切断可能部分（この場合エステル結合）を有する連結を形成することができる。一実施形態において、ＰＯＺポリマーのカルボン酸基は、重合反応においてカルボキシル化モノマーを含むことによって、ＰＯＺポリマーのペンダント位に生み出される。
本開示のポリマーコンジュゲートの調製において、ポリマー上の薬剤の数は、ポリマーに存在する反応基の数により制御され、一実施形態において、反応基は、ポリマーのペンダント位に存在する。ペンダント位の反応基に関して、ポリマーに存在する反応基の数は、薬剤または連結基と連結を形成可能な官能化側鎖（例えばアセチレン）を有するモノマー単位（例えばモノマーオキサゾリン）と重合に使用される不活性側鎖（例えばアルキル）を有するモノマー単位との比により制御される。加えて、官能化側鎖を有するモノマー単位の所与の比に関して、ポリマー長は、所与のポリマーコンジュゲートに負荷される薬剤の数をさらに制御することで、制御可能である。従って、特定のポリマーコンジュゲートに結合する薬剤の数は、制御可能である。上記のように、連結基の性質、ポリマーのサイズおよび投与経路（静脈内、皮下または経皮）により、ポリマーからの薬剤の放出動態にわたって制御可能である。これらの統合された特性は、送達される薬剤の量の変動および所望の薬理学のための薬剤の放出動態の変動により、結合された薬剤の放出を「調整」可能である。
医薬組成物
ポリマーコンジュゲートは、ヒトおよび獣医学的な使用の両方のために製剤化できる。これらの製剤は、充填剤、結合剤、担体、安定剤、溶媒、共溶媒、増粘剤、滑剤、界面活性剤、香味剤および甘味剤、矯味剤、無機塩、酸化防止剤、抗菌剤、キレート剤、脂質、リン脂質として作用する、医薬として許容された原料を含有する（Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，２０００を参照されたい。）。これらの製剤中の薬剤の量は、これらの物理化学的特性、用量および投与様式に依存するであろう。大部分の剤形は、全製剤の１から９９重量％を、一般的に含有するであろう。
経口投与に適切な製剤は固形であり得、錠剤、丸薬、カプセル、カシェ剤、舐剤、速溶性固体、微粉および顆粒粉を含む。錠剤は、薬物コンジュゲートおよび医薬として許容される賦形剤の圧縮または型抜きである。カプセルは、薬物および賦形剤をカプセル化した、ゼラチンおよび非ゼラチンのカシェ剤である。製剤は液体形態でもあり、溶液、懸濁液、乳剤、シロップおよびエリキシル剤を含む。これらの液体は、水性、砂糖系および非水系、グリコール系であってよい。
非経口使用に適切な製剤は、滅菌液体ならびに適切な水性媒体中で容易に再構成される滅菌粉末および凍結乾燥粉末である。適切な水性媒体の例は、注射用滅菌水、注射用５％デキストロース溶液および注射用０．９％塩化ナトリウム溶液ならびに乳酸加リンゲル液である。これらの製剤は、静脈、皮下、筋肉内および皮内に投与可能である。これらの製剤は、血液および周囲組織に対してｐＨ調整してあり、等張性である。同様の製剤は、鼻腔スプレーおよび点眼薬として送達可能である。
局所、経皮および直腸用製剤は、水、ポリマーおよび油系である。これらは、鉱物油、石油ワックス、液体および固体のポリオール、ポリヒドロキシアルコール、ココアバター、硬化脂肪、界面活性剤およびカルボン酸のエステルに溶解または懸濁することができる。経皮製剤は、設計においてリザーバー型またはモノシリック型であり、薬物コンジュゲートは通常、可溶型である。経皮製剤はまた賦形剤を含有し、薬剤の皮膚への浸透を促進する。
［実施例１］−ランダムＨ−［（Ｐｔｙｎ） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−Ｔ−ＣＯ ２ Ｈの合成
Figure 0006517281
さまざまなペンダント基を有するＰＯＺポリマーの合成が、米国特許第８，１１０，６５１号および同第８，１０１，７０６号に記載されており、これらはそれぞれ、このような教示に関して参照により本明細書に組み込まれる。具体的な実施形態において、Ｈ−［（Ｐｔｙｎ）１０（ＥＯＺ）１９０］−Ｔ−ＣＯ２Ｈの合成を提供するが、異なる分子量、異なる開始基および異なる末端基ならびに「Ｒ２」位に異なる基を有する他のＰＯＺポリマー（上記のＰＯＺの定義に関連して）も、同じ方法により生成可能である。加えて、ブロックコポリマーも、下記のランダムコポリマーに加えて生成可能である。ランダムおよびブロックコポリマーの生成方法は、米国特許出願公開第１２／７４４，４７２号および同第１２／７８７，２４１号に記載されており、これらはそれぞれ、このような教示に関して参照により本明細書に組み込まれる。
Ｈ−［（Ｐｔｙｎ）１０（ＥＯＺ）１９０］−Ｔ−ＣＯ２Ｈの合成のために、トリフリン酸（ＨＯＴｆ、１７３．３μＬ、１．９６ｍｍｏｌ）を、クロロベンゼン（１２４ｍＬ）中２−ペンチニル−２−オキサゾリン（ＰｔｙｎＯＺ、３．７６ｇ、２７．４ｍｍｏｌ、１４当量）および２−エチル−２−オキサゾリン（ＥＯＺ、４６．６１ｇ、４７０．２ｍｍｏｌ、２４０当量）の溶液に加えた。５分間室温において撹拌後、混合物を８０℃に１０時間加熱し、次いで室温に冷却した。別のフラスコ中に、メチル３−メルカプトプロピオネート（１．２３ｍＬ、０．０１１４ｍｏｌ）を、クロロベンゼン（３４ｍＬ）中水酸化ナトリウム（鉱物油中６０％、０．２７２ｇ、０．００６８ｍｏｌ）の懸濁液に滴下することによって、停止試薬を調製した。この混合物を７時間撹拌し、その後、Ｈ−（Ｐｔｙｎ）１０（ＥＯＺ）２００ ＋のリビングポリマーの溶液を加えた。得られた混合物を、その後、１８時間撹拌した。溶媒を、ロータリーエバポレーションにより除去し、白色残留物を得た。この残留物を水に溶解し、ｐＨを１２．０に調整した。得られた水溶液を、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦを使用するイオン交換クロマトグラフィーにより、精製した。水溶液を、ＮａＣｌ（１５％ｗ／ｗ）により飽和させ、ジクロロメタンで抽出した。統合した有機相を無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮した。残留物を、ジクロロメタン濃縮液をジエチルエーテルに加えることによって沈殿させた。沈殿させた物質を回収し、減圧下で乾燥させ、２２．８ｇの所望の生成物を、白色の粉末として得た（収率５０％）。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、通常の骨格ピークを、１．１３ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，ＣＨ３ＣＨ２ＣＯ−）；２．３２ｐｐｍ（ｍ）および２．４１（ｓ）（合計面積２Ｈ，ＣＨ３ＣＨ２ＣＯ−）；ならびに３．４７ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−）に示した。末端基のピークは、２．６３ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，−ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ）、２．７４ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２ＳＣＨ２ＣＨ２ ＣＯ２Ｈ）および２．８５ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，−ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ）に現れた。ペンダントペンチニル基のピークは、１．８５ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）および２．０３ｐｐｍ（ｂｒ ｓ，１Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）に現れた。ペンダントであるＰｔｙｎの基の数は、末端アセチレンプロトンおよびポリマー骨格プロトンの積分値と比較することによって、８．５と決定した。ＧＰＣにより、Ｍｎ＝１９，５００ＤａおよびＭｐ＝２０，８００ＤａならびにＰＤＩは１．０７であった。
［実施例２］非水溶媒中のアジド酢酸の合成
Figure 0006517281
この実施例は、さまざまなアジドアルキル酸リンカーの合成に関する一般的合成スキームを提供する。この方法を例示するために、２−アジド酢酸の合成を提供する。２−アジド酢酸の合成に使用した２−ブロモ酢酸を、他の試薬に置き換えることによって、アジドアルキル酸リンカー、例えば、限定するものではないが、３−アジドプロピオン酸および２−アジドプロピオン酸を生成することができる。
２−アジド酢酸の合成のために、ＤＭＦ（１４．３９ｍｌ）中２−ブロモ酢酸（１ｇ、７．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、アジ化ナトリウム（０．４９１ｇ、７．５６ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間室温において撹拌後、反応混合物を、ＲＰ ＨＰＬＣによりモニターし、９８％の転化（保持時間、ｔｒ＝２．４０分）および残り２％のブロモ酢酸（ｔｒ＝２．７７分）が示された。
Ｈ１ ＮＭＲ分析（ＣＤＣｌ３中１０ｍｇ／ｍＬ）は、関連ピークを３．８４ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２ＣＯ２Ｈ）に示した。
［実施例３］２−アジド酢酸リンカーを有するロチゴチンの合成
Figure 0006517281
２５ｍＬの丸底フラスコに、ロチゴチン（１ｇ、３．１７ｍｍｏｌ、１当量）、２−アジド酢酸−ＤＭＡＰ塩（０．８４９ｇ、３．８０ｍｍｏｌ、１．２当量）および３２ｍＬの無水ＤＣＭを入れ、混合物をアルゴン下で撹拌した。ＤＭＡＰ（０．０７７ｇ、０．６３４ｍｍｏｌ、０．２当量）およびＤＣＣ（０．７８５ｇ、３．８０ｍｍｏｌ、１．２当量）を固体として加えた。混合物を１６時間室温において撹拌した。混合物をその後ろ過し、沈殿した尿素を除去し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮した。粗混合物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、酢酸エチルおよびヘキサン（１：２）の混合物を溶出液として使用して初回の精製を行い、透明な黄色の油を得た（１．２７ｇ、収率９２％）。
２回目の精製を、逆相クロマトグラフィーにより実施し、遊離のロチゴチンおよび他の小分子不純物を除去した。負荷用試料溶液を、粗アジドアセチル−ロチゴチン（３５０ｍｇ）をアセトニトリル（４．０５ｍＬ）中０．１％ ＴＦＡに溶解し、次いで、１Ｎ ＨＣｌ（０．９１ｍＬ）および水（４．０４ｍＬ）中０．１％ ＴＦＡを加えることによって調製した。試料溶液を、０．２μｍ ＰＴＦＥシリンジフィルターを介してろ過し、その後２１４ｎｍのＵＶ検出器を装備したＡＫＴＡ Ｐｕｒｉｆｉｅｒ ｓｙｓｔｅｍにおいてＷａｔｅｒｓ ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤ ３０／２５０Ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒｓ製）に負荷した。水中０．１％ ＴＦＡ（Ａ）およびアセトニトリル中０．１％ ＴＦＡ（Ｂ）を、移動相として使用した。その後、カラムを、４０％の移動相Ｂを用いて流速２０ｍＬ／分で、均一速度で溶出した。アジドアセチル−ロチゴチンを含有する分画を回収し、プールした。プールした分画中のアセトニトリルを、ロータリーエバポレーションにより蒸発させた。残った水溶液を、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、次いで、ＤＣＭを蒸発させた。残留物を、真空中で乾燥させた（２９３ｍｇ、８３％）。
Figure 0006517281
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ピークを、０．９０ｐｐｍ（ｔ，Ｊ＝６．８４Ｈｚ，３Ｈ）、１．２５（ｍ，１Ｈ）、１．２９（ｍ，１Ｈ）、１．４９（ｍ，１Ｈ）、１．５９（ｍ，１Ｈ）、２．０５（ｍ，２Ｈ）、２．５４（ｍ，３Ｈ）、２．８２（ｍ，３Ｈ）、２．９７（ｍ，３Ｈ）、４．１５６ Ｎ３ＣＨ２ Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ｓ，２Ｈ）、６．８１（ｓ，１Ｈ）、６．８８（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２（ｔ，Ｊ＝３．４２Ｈｚ，１Ｈ）、７．０２（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｍ，２Ｈ）に示した。
ＲＰ−ＨＰＬＣ分析により、生成物が遊離ロチゴチンを含有しないことが示された。逆相クロマトグラフィー精製の前（図１Ａ）および後（図１Ｂ）のアジドアセチル−ロチゴチンのＨＰＬＣクロマトグラムを示す。
［実施例４］３−アジドプロピオン酸リンカーを有するロチゴチンの合成
Figure 0006517281
５０ｍＬの丸底フラスコにおいて、ロチゴチン（５００ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ、１当量）、５ｍＬのＤＣＭに溶解した３−アジドプロピオン酸（４４７ｍｇ、３．７３ｍｍｏｌ、２．４当量）、ピリジン（３０２μＬ、３．７３ｍｍｏｌ、２．４当量）を、５０ｍＬの無水ＤＣＭに溶解し、アルゴン下で撹拌させた。溶液を氷水バスにおいて５分間冷却し、バスを取り除いた。溶液にＤＣＣ（７７８ｍｇ、３．７３ｍｍｏｌ、２．４当量）を加えた。溶液を、室温においてアルゴン下で撹拌させた。一晩反応後、反応混合物の逆相ＨＰＬＣ分析により、遊離ロチゴチンのエステル型への完全な転化が示された。反応混合物をろ過し、ろ液を、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固させた。粗生成物をその後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。粗生成物をヘキサン−酢酸エチルの混合溶媒（６ｍＬ、４：１ ｖ／ｖ）に溶解し、その後、３００ｍＬのシリカゲルカラム（３０ｍｍ ｉｄ）に負荷した。カラムを、ヘキサン−酢酸エチル混合溶媒（４：１ ｖ／ｖ）で溶出した。分画（各１０ｍＬ）を、ＴＬＣおよび逆相ＨＰＬＣにより分析した。生成物分画をプールし、ロータリーエバポレーションにより蒸発させ、その後真空中で一晩乾燥させた。収率：２９２ｍｇ。
Figure 0006517281
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ピークを、３．７０６ｐｐｍ Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ｔ，２Ｈ）、２．８３８ Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ｔ，２Ｈ）に示した。
［実施例５］２−アジドプロピオン酸リンカーを有するロチゴチンの合成
Figure 0006517281
１００ｍＬ丸底フラスコに、３ｍＬのＤＣＭに溶解した２−アジドプロピオン酸（２５１ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ、１．３当量）、ロチゴチン（５００ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ、１当量）および６ｍＬのＤＣＭ（６ｍＬ）に溶解した４−ＤＭＡＰ（２４９ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ、１．３当量）を入れ、混合物をアルゴン下で撹拌させた。溶液を、フラスコを氷水バスに５分間置くことによって冷却した。この溶液に、ＤＣＣを加えた（４２１ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ、１．３当量）。反応を進行させ、次いで、逆相ＨＰＬＣを行った。一晩室温において撹拌後、追加の２ｍＬのＤＣＭ中２−アジドプロピオン酸（１２６ｍｇ、０．６５当量）および４−ＤＭＡＰ（１２４ｍｇ、０．６５当量）を、反応混合物に加え、次いで、ＤＣＣ（２１１ｍｇ、０．６５当量）を加えた。溶液を室温においてさらに３．５時間撹拌させた。ＨＰＬＣの結果は、エステルへの９４％の転化を示している反応混合物をろ過し、ろ液を、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固させた。粗生成物をその後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。粗生成物を、ヘキサン−酢酸エチル（６ｍＬ、４：１ ｖ／ｖ）の混合溶媒に溶解し、その後、３００ｍＬのシリカゲルカラム（３０ｍｍ ｉｄ）に負荷した。カラムを、ヘキサン−酢酸エチル混合溶媒（４：１ ｖ／ｖ）で溶出させた。分画（各１０ｍＬ）をプールし、ＴＬＣおよび逆相ＨＰＬＣにより分析した。生成物の分画を、ロータリーエバポレーションにより蒸発させ、真空中で一晩乾燥させた。収率：３０７ｍｇ。
Figure 0006517281
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ピークを、４．２０３ｐｐｍ ＣＨ３ＣＨ（Ｎ３）−（ｑ，１Ｈ）および１．６４２ＣＨ３ＣＨ（Ｎ３）−（ｄ，３Ｈ）に示した。
［実施例６］アジドアセチル−ロチゴチンをポリオキサゾリン１０ペンダント酸２０Ｋに結合させることによる、Ｈ−［（アセチル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの調製
Figure 0006517281
Ｈ−［（ＰｔｙｎＯＺ）１０（ＥＯＺ）１９０］−ＣＯＯＨ２０Ｋポリマー（１．３０６ｇｍ、０．０６５３ｍｍｏｌ、１．０当量；実施例１に記載のように調製）を、１００ｍＬの丸底フラスコにおいて１５ｍＬのＴＨＦに溶解した。別の５０ｍＬの丸底フラスコにおいて、アジドアセチル−ロチゴチン（ＦＷ３８４．５０Ｄａ．２５１ｍｇ、０．６５３ｍｍｏｌ、１０．０当量；実施例３のように調製）を、１５ｍＬのＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解した。アジドアセチル−ロチゴチン溶液を、前記１００ｍＬの丸底フラスコに移した。溶液にアルゴンを流した。ＣｕＩ（ヨウ化銅（Ｉ）≧９９．５％、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、５０ｍｇ、０．２６１ｍｍｏｌ、４．０当量）を、その後フラスコに加え、次いでＴＥＡ（１２７μＬ、０．９１４ｍｍｏｌ、１４．０当量）を加えた。溶液を、一晩、４５℃においてアルゴン下で撹拌させた。緑色の粗反応混合物を、０．２μｍのシリンジフィルターを用いてろ過し、その後、０．１Ｎ ＨＣｌ酸（２０ｍＬ）をろ液に加えた。混合物は、褐色に変色した。混合物中のＴＨＦを、ロータリーエバポレーターを用いて２８℃において蒸発させた。
２つのカラム精製ステップを用いて、粗生成物を精製した。第１ステップにおいて、ガラスカラム（２ｃｍ ＩＤ）に、６０ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ酸中シリカゲル６０（ＥＭＤ、７０−２３０Ｍｅｓｈ、３０ｍＬ）のスラリーを充填した。カラムの充填および溶出は、重力により行った。前洗浄（水および２ｍＭ ＨＣｌ酸）したＤｏｗｅｘ（登録商標）Ｍ４１９５媒体（２０ｍＬ）を、シリカ層の上に充填した。カラムを、２ｍＭ ＨＣｌ（５０ｍＬ）で平衡化した。
第２のガラスカラムにおいて、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０Ｈ（４０ｍＬ）を充填し、脱イオン水で溶出液の伝導率が１μＳ／ｃｍ未満になるまで洗浄した。カラムをその後、２ｍＭ ＨＣｌ（４０ｍＬ）で平衡化した。
＞３００ｍｇ／ＬのＣｕ＋／２＋（Ｑｕａｎｔｏｆｉ Ｃｏｐｐｅｒ ｔｅｓｔ ｓｔｉｃｋにより測定）を含有する、ろ過した粗反応混合物（２０ｍＬ）を、第１のＤｏｗｅｘ／シリカゲルカラムに負荷した。カラムを、２ｍＭ ＨＣｌ酸で溶出した。Ｈ−［（アセチル−ロチゴチン）１０（ＥＯＺ）１９０］−ＣＯＯＨ２０Ｋポリマー生成物（１００ｍＬ）を含有する溶出液を回収した。Ｃｕ＋／２＋レベルは、１０ｍｇ／Ｌ（Ｑｕａｎｔｏｆｉ Ｃｏｐｐｅｒ ｔｅｓｔ ｓｔｉｃｋ）未満であった。溶出液中の遊離ロチゴチンを、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０Ｈにより、次に記載するように除去した。Ｄｏｗｅｘ／シリカゲルカラムの溶出液（１００ｍＬ）を、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０Ｈ（４０ｍＬ）カラムに負荷した。カラムを、１ｍＭ ＨＣｌで溶出した。Ａｍｂｅｒｌｉｔｅカラムからの溶出液（１５０ｍＬ）に、ＮａＣｌを加え、１０％濃度にした。濁った溶液を、ＤＣＭ（３×２００ｍＬ、穏やかに振とう）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。この塩をろ別し、ろ液を、約２０ｍＬにロータリーエバポレーションにより濃縮した。濃縮溶液を、４００ｍＬのエチルエーテルに加え、沈殿を得た。ろ過後、沈殿を真空下で乾燥させた。収率は１．１３ｇｍであった。ＲＰ−ＨＰＬＣ分析により、ロチゴチンおよびアジドアセチル−ロチゴチンの不在が示された。精製されたロチゴチンのポリオキサゾリンコンジュゲートは、優れた水溶性を示した。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ピークを、５．４７９ｐｐｍ−ＮＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ｓ，２Ｈ）、６．９４５−７．１９７ ロチゴチンのフェニル基およびチオフェン基由来、に示した。
［実施例７］３−アジドプロピオニル−ロチゴチンをポリオキサゾリン１０ペンダント酸２０Ｋに結合させることによる、Ｈ−［（プロピオニル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの調製
Ｈ−［（ＰｔｙｎＯＺ）１０（ＥＯＺ）１９０］−ＣＯＯＨ２０Ｋ（６８１ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ、１当量；実施例１のように調製）を、１５ｍＬのＴＨＦに、５０ｍＬの丸底フラスコ中で溶解した。２０ｍＬのガラスバイアルにおいて、３−アジドプロピオニル−ロチゴチン（１４０ｍｇ、０．３４０ｍｍｏｌ、１０．０当量；実施例４のように調製）を、５ｍＬのＴＨＦに溶解した。３−アジドプロピオニル−ロチゴチン溶液を、前記５０ｍＬの丸底フラスコに移した。溶液にアルゴンを流した。ＣｕＩ（ヨウ化銅（Ｉ）、≧９９．５％、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、２６ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ、４．２当量）をその後フラスコに加え、次いで、ＴＥＡ（２０μＬ、０．１４４ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を、一晩、４５℃において、アルゴン雰囲気下で撹拌させた。緑色の粗反応混合物を室温に冷却し、０．１Ｎ ＨＣｌ酸（１０ｍＬ）を加えた。反応混合物は、透明な黄褐色になった。混合物中のＴＨＦを、ロータリーエバポレーターを用いて、２８℃において蒸発させた。
反応混合物を、実施例６に説明したように精製し、抽出し、沈殿させた。収率は６１１ｍｇであった。ＲＰ−ＨＰＬＣ分析により、ロチゴチンおよび３−アジドプロピオニル−ロチゴチンの不在が示された。生成されたロチゴチンのポリオキサゾリンコンジュゲートは、優れた水溶性を示した。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ピークを、４．８２９ｐｐｍ−ＮＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ｔ，２Ｈ）、６．８７６−７．１９４ ロチゴチンのフェニル基およびチオフェン基由来、に示した。
［実施例８］２−アジドプロピオニル−ロチゴチンを、ポリオキサゾリン１０ペンダント酸２０Ｋに結合することによる、Ｈ−［（−［（α−メチル−アセチル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの調製
Ｈ−［（ＰｔｙｎＯＺ）１０（ＥＯＺ）１９０］−ＣＯＯＨ２０Ｋ（１．４０９ｇｍ、０．０７０ｍｍｏｌ、１当量；実施例１のように調製）を、１５ｍＬのＴＨＦに、１００ｍＬの丸底フラスコ中で溶解した。２０ｍＬのガラスバイアルにおいて、２−アジドプロピオニル−ロチゴチン（２９１ｍｇ、０．７０５ｍｍｏｌ、１０．０当量；実施例５のように調製）を、１５ｍＬのＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解した。２−アジドプロピオニル−ロチゴチン溶液を、前記１００ｍＬの丸底フラスコに移した。溶液にアルゴンを流した。ＣｕＩ（ヨウ化銅（Ｉ）、≧９９．５％、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、５４ｍｇ、０．２８２ｍｍｏｌ、４．０当量）をその後フラスコに加え、次いで、ＴＥＡ（４１μＬ、０．２９６ｍｍｏｌ、４．２当量）を加えた。溶液を、一晩、４５℃においてアルゴン雰囲気下で撹拌させた。反応混合物を室温に冷却し、０．２μｍのＰＴＦＥシリンジフィルターを介してろ過した。０．１Ｎ ＨＣｌ（２０ｍＬ）酸をろ液に加えた。粗混合物は、外観が透明な褐色に変わった。混合物中のＴＨＦを、ロータリーエバポレーターを用いて、２８℃において蒸発させた。
反応混合物を、実施例６に説明したように精製し、抽出し、沈殿させた。収率は５４１ｍｇであった。ＲＰ−ＨＰＬＣ分析により、ロチゴチンおよび２−アジドプロピオニル−ロチゴチンの不在が示された。生成されたロチゴチンのポリオキサゾリンコンジュゲートは、優れた水溶性を示した。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ピークを、５．６９２ｐｐｍ−Ｎ（ＣＨ２）ＣＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−（ｓ，Ｈ）、６．９４３−７．１９６ ロチゴチンのフェニル基およびチオフェン基由来、に示した。
［実施例９］４−アームポリエチレングリコール−アセチレン（１０Ｋ）の調製
４−アームポリエチレングリコール−ＳＣＭ（４−アームＰＥＧ−ＳＣＭ、２２０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ、１当量、ＭＷ：１１，０００Ｄａ）を、０．５５ｍＬのジクロロメタンに、３ｍＬのバイアルにおいてアルゴン下で溶解した。プロパルギルアミン（８．８ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ、８当量）およびトリエチルアミン（１６．２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ、８当量）を、その後バイアルに加えた。バイアルをゴムのセプタムで密閉し、溶液を、室温においてアルゴン下で１８時間撹拌した。ＤＣＭ溶液を、その後、２０ｍＬバイアル中でジエチルエーテル（１０ｍＬ）内に沈殿させた。３ｍＬのバイアルを、０．２５ｍＬのＤＣＭですすぎ、この部分を、ジエチルエーテル内にさらに沈殿させた。溶液を、１５０ｍｍのＷｈａｔｍａｎろ紙を使用してろ過した。ポリマーを、２ｍＬのイソプロパノールに５０℃において溶解し、溶液を室温に冷却した。沈殿を、３０ｍＬのガラス焼結フリットを使用してろ過し、高真空下で一晩（１８時間）乾燥させ、２０３ｍｇの最終ポリマー（収率：９５％）を得た。最終ポリマーの１Ｈ ＮＭＲは、４−アームＰＥＧ−ＳＣＭの２．８２ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，ＮＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯ）および４．４８ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＯＯ）における化学シフトが完全に消失し、新しいポリマーの新しいピークが、２．２４、４．０２および４．０９ｐｐｍに現れたことを示した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ：２．２４（ｓ，１Ｈ，Ｃ≡ＣＨ）、３．５９（ｍ，ＣＨ２（ＰＥＧ））、４．０２（ｓ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＯＮＨ）、４．０９（ｄｄ，２Ｈ，ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）。
［実施例１０］４−アームＰＥＧ−アセチル−ロチゴチンの調製
実施例３のアジドアセチルロチゴチン（１５．９ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ、１．６当量）を、３ｍＬのＴＨＦにバイアル中で溶解した。４−アームＰＥＧ−アセチレン（１１０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌｅ、１当量、ＭＷ：１１，０００Ｄａ）を加え、混合物を撹拌して、ポリマーを完全に溶解した。ヨウ化銅（Ｉ）（３．１ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ、１．６当量）およびトリエチルアミン（１．６ｍｇ、２．２１μＬ、０．０１６ｍｍｏｌｅ、１．６当量）を加え、透明な緑色溶液を得た。得られた溶液を、４５℃においてアルゴンブランケット下で１７時間撹拌した。濁った混合物（黄褐色）室温に冷却し、０．２μｍのＰＴＦＥシリンジフィルターを使用してろ過した。ろ液を、２ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌと一緒に撹拌し、わずかに濁った黄色の混合物（ｐＨ：２．５）を得た。ＴＨＦを、ロータリーエバポレーターを使用して２８℃において除去した。得られた水溶液（濁った）を、Ｄｏｗｅｘカラム（１０ｇ、１５ｍＬ）に通した。６０ｍＬの水溶液を回収した。溶液をその後、１０ｇのＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０Ｈ（１５ｍＬ）を充填したカラムに通し、１５０ｍＬの水溶液を得た。溶液を、ＮａＣｌ（１５ｇ）で飽和させ、ＤＣＭで３回抽出した（３×５０ｍＬ）。有機相を分離し、統合し、Ｎａ２ＳＯ４（１０ｇ）で脱水し、ろ過し、０．５ｍＬに濃縮し、その後、ジエチルエーテル（２０ｍＬ）内に５０ｍＬにビーカー中で沈殿させた。沈殿を１５ｍＬのガラスフリットでろ過し、高真空下で一晩乾燥させ、９５ｍｇの最終生成物を得た（収率：７８％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ：０．９７（３Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）；１．８６（合計３Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３および−ＮＣＨＣＨ２ＣＨ２Ｃ−）；２．５１（１Ｈ，−ＮＣＨＣＨ２ＣＨ２Ｃ−）；２．７９−３．４９（合計１１Ｈ、残りの脂肪族ＣＨ２およびＣＨのピーク）；３．５８（ｍ，ＣＨ２（ＰＥＧ））、３．９７（ｓ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＯＮＨ）、４．５６（ｔ，２Ｈ，トリアゾール−ＣＨ２ＮＨＣＯ）、５．３９（ｓ，トリアゾール−ＣＨ２ＣＯＯ）；６．７０−７．０３（３Ｈ，１，２，３，４−テトラヒドロナフタレンのＣＨピーク）；６．９３−７．４２（３Ｈ，２−チオフェンのＣＨピーク）；７．６８−７．８３（ｄ，トリアゾールのＣＨピーク）。
［実施例１１］４−アームＰＥＧ−アセチレン（１０Ｋ）とアジドプロピルロチゴチンとのカップリング
Figure 0006517281
９５．０ｍｇのアジドプロピルロチゴチン．ＴＦＡ（０．１８ｍｍｏｌｅ）を、２０ｍＬのＴＨＦに５０ｍＬの一ッ口丸底フラスコ中で溶解し、３３０ｍｇの４−アームＰＥＧ−アセチレン（Ｃｒｅａｔｉｖｅ ＰＥＧＷｏｒｋｓ、ＺＱ９２１４）（０．０３ｍｍｏｌｅ、ＭＷ：１１，０００ｇ／ｍｏｌｅ）をフラスコに加え、混合物を撹拌して、ポリマーを溶解した（褐色混合物）。９．３ｍｇのヨウ化銅（Ｉ）（０．０４８ｍｍｏｌｅ）および６．６３μＬのトリエチルアミン（４．８ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌｅ）を加え、透明な褐色溶液を得た。得られた溶液を、４５℃においてアルゴンブランケット下で１７時間撹拌した。褐色混合物を室温に冷却し、０．２μＭのＰＴＦＥフィルターを介してろ過した。ろ液を、６ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌと一緒に撹拌し、褐色混合物（ｐＨ試験紙によりｐＨ２．５）を得た。ＴＨＦを、ロータリーエバポレーターを使用して２８℃において除去した。得られた濁った水溶液を、Ｄｏｗｅｘ（１０ｍＬ、Ｍ４１９５、Ｓｕｐｅｌｃｏ、１８４４２６Ｉ）を上部に、２０ｇのＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０（３０ｍＬ、Ｆｌｕｋａ、ＢＣＢＦ３０７４Ｖ）を下部に充填したカラムに通して、２００ｍＬの水溶液を得た。溶液を、２０ｇのＮａＣｌで飽和させ、５０ｍＬのＤＣＭで３回抽出した（３×５０ｍＬ）。有機層を分離し、統合し、２０ｇのＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、２ｍＬに濃縮し、４０ｍＬのジエチルエーテル内に５０ｍＬのビーカー中で沈殿させた。ポリマーをろ過し、高真空下で乾燥させ、３１０ｍｇの最終生成物を得、収率は８１％であった。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ，ｐｐｍ，ＴＭＳ）：１．０３（３Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）；１．８−３．６（合計１７Ｈ，ロチゴチンの脂肪族ＣＨおよびＣＨ２のピーク；２．５６（２Ｈ，−ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２−トリアゾール）；３．４１（−Ｃ（ＣＨ２Ｏ）４）；３．６４（１０００Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；４．７１（２Ｈ，−ＯＣＨ２−トリアゾール）；４．７６（２Ｈ，−ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２−トリアゾール）；６．８８−７．２１（６Ｈ，１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン）の−ＣＨピークおよび２−チオフェンの−ＣＨピーク）；７．７６（１Ｈ，トリアゾールのピーク−ＣＨ）。
［実施例１２］４−アームＰＥＧ−アセチレン（２０Ｋ）とアジドプロピルロチゴチンとのカップリング
Figure 0006517281
１２６．２ｍｇのアジドプロピルロチゴチン．ＴＦＡ（ＺＨ−２７−９Ｐ）（０．２４ｍｍｏｌｅを、４０ｍｌのＴＨＦに５０の一ッ口丸底フラスコ中で溶解し、６２４ｍｇの４−アームＰＥＧ−アセチレン（Ｃｒｅａｔｉｖｅ ＰＥＧＷｏｒｋｓ、ＺＱ９２１６）（０．０３ｍｍｏｌｅ、ＭＷ：２０，８００ｇ／ｍｏｌｅ）を、フラスコに加え、混合物を撹拌して、ポリマーを完全に溶解した（黄色溶液）。９．６３ｍｇのヨウ化銅（Ｉ）（０．０４８ｍｍｏｌｅ）および６．６０μＬのトリエチルアミン（４．８ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌｅ）を加え、透明な黄色溶液を得た。得られた溶液を、４５℃において、アルゴンブランケット下で４０時間撹拌した。反応を、撹拌４０時間後に停止させた。溶液を、０４５μＭのＰＴＦＥフィルターを介してろ過した。ろ液を、１２ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌと一緒に撹拌し、褐色混合物を得た（ｐＨ試験紙によりｐＨ２．５）。ＴＨＦを、ロータリーエバポレーターを使用して２８℃において除去した。得られた濁った水溶液を、Ｄｏｗｅｘ（２０ｍＬ、Ｍ４１９５、Ｓｕｐｅｌｃｏ、１８４４２６Ｉ）を上部に、４０ｇのＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０（６０ｍＬ、Ｆｌｕｋａ、ＢＣＢＦ３０７４Ｖ）を下部に充填したカラムに通し、４００ｍＬの水溶液を得た。溶液を、４０ｇのＮａＣｌで飽和させ、５０ｍＬのＤＣＭで３回抽出した（３×５０ｍＬ）。有機層を分離し、統合し、２０ｇのＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、４ｍＬに濃縮した。ＤＣＭ溶液をその後、８０ｍＬのジエチルエーテル内に１００ｍＬビーカー中で沈殿させた。溶媒をデカントし、ポリマーを高真空下で乾燥させ、５８２ｍｇの最終生成物を得、収率は８６％であった。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ，ｐｐｍ，ＴＭＳ）：１．０３（３Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）；１．８−３．６（合計１７Ｈ，ロチゴチンの脂肪族ＣＨおよびＣＨ２のピーク；２．５６（２Ｈ，−ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２−トリアゾール）；３．４１（２Ｈ，−Ｃ（ＣＨ２Ｏ）４）；３．６４（１０００Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；４．６９（２Ｈ，−ＯＣＨ２−トリアゾール）；４．７４（２Ｈ，−ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２−トリアゾール）；６．８８−７．２１（６Ｈ，１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン）の−ＣＨピークおよび２−チオフェンの−ＣＨピーク）；７．７１（１Ｈ，トリアゾールの−ＣＨピーク）。
［実施例１３］２−アームＰＥＧアセチレン（１０Ｋ）の調製
Figure 0006517281
１．０５ｇのＳＣＭ−ＰＥＧ−ＳＣＭ（０．１ｍｍｏｌｅ、ＭＷ：１０，５００ｇ／ｍｏｌｅ）を、２．５ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）に１０ｍＬのバイアルにおいてアルゴン下で溶解し、２５．６μＬのプロパルギルアミン（２２ｍｇ、０．４ｍｍｏｌｅ）および５６．５μＬのトリエチルアミン（４１ｍｇ、０．４ｍｍｏｌｅ）を、その後バイアルに加えた。バイアルをゴムのセプタムで密閉し、溶液を、室温においてアルゴン下で１８時間撹拌した。ＤＣＭ溶液を、その後、５０ｍＬのジエチルエーテル内に１００ｍＬのビーカー中で沈殿させた。１０ｍＬのバイアルを、１ｍＬのＤＣＭですすぎ、この部分をさらに沈殿させた。溶液を、１５０ｍｍのＷｈａｔｍａｎろ紙を使用してろ過した。ろ過したポリマーを、５０ｍＬのイソプロパノールに５０℃において再溶解し、室温に冷却した。ポリマーを、冷却により再結晶化させた。このポリマーを、３０ｍＬガラスの焼結フリットを使用してろ過し、高真空下で一晩乾燥させ、１．０ｇの最終ポリマーを得、収率は９６％であった（ＢＤ−２３−８６−１）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ，ｐｐｍ，ＴＭＳ）：２．２４（１Ｈ，−ＣＯＮＨＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）、３．６４（９２０Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）、４．０２（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＯＮＨＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）、４．１０−４．１５（２Ｈ，−ＣＯＮＨＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）。
［実施例１４］２−アームＰＥＧ−アセチレン（１０Ｋ）とロチゴチン３−アジプロピオネートプロピオネートとのカップリング
Figure 0006517281
４７．３ｍｇのアジドプロピルロチゴチン．ＴＦＡ（０．０９ｍｍｏｌｅ）を、２０ｍｌのＴＨＦに５０ｍＬの一ッ口丸底フラスコ中で溶解し、３１５ｍｇのアセチレン−ＰＥＧ−アセチレン（０．０３ｍｍｏｌｅ）をフラスコに加え、混合物を撹拌して、ポリマーを完全に溶解した（透明な無色の溶液）。９．３ｍｇのヨウ化銅（Ｉ）（０．０４８ｍｍｏｌｅ）および６．６３μＬのトリエチルアミン（４．８ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌｅ）を、その後フラスコに加え、透明な緑色溶液を得た。得られた溶液を、４５℃においてアルゴンブランケット下で２０時間撹拌した。緑色混合物を室温に冷却し、０．２μｍのＰＴＦＥシリンジフィルターを使用してろ過した。ろ液を、６ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌと一緒に撹拌し、黄色混合物を得た（ｐＨ試験紙によりｐＨ２．５）。ＴＨＦを、ロータリーエバポレーターを使用して２８℃において除去した。得られた濁った水溶液を、１０ｍＬのＤｏｗｅｘ（Ｍ４１９５、Ｓｕｐｅｌｃｏ、１８４４２６Ｉ）を上部に、２０ｇのＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０（３０ｍＬ、Ｆｌｕｋａ、ＢＣＢＦ３０７４Ｖ）を下部に充填したカラムに通し、２００ｍＬの水溶液を得た。水溶液を、２０ｇのＮａＣｌで飽和させ、５０ｍＬのＤＣＭで３回抽出した（３×５０ｍＬ）。有機層を分離し、統合し、２０ｇのＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、２ｍＬに濃縮し、４０ｍＬのジエチルエーテル内に５０ｍＬのビーカー中で沈殿させた。沈殿させたポリマーをろ過し、高真空下で乾燥させ、２５０ｍｇの最終生成物を得、収率は７３％であった。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ，ｐｐｍ，ＴＭＳ）：１．０３（３Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）；１．８−３．６（合計１７Ｈ，ロチゴチンの脂肪族ＣＨおよびＣＨ２のピーク；２．６３（２Ｈ，−ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２−トリアゾール）；３．６４（９２０Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；４．０２（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＯＮＨＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）；４．６１（２Ｈ，−ＣＯＮＨＣＨ２−トリアゾール）；４．７６（２Ｈ，−ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２−トリアゾール）；６．８７−７．２１（６Ｈ，１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン）の−ＣＨピークおよび２−チオフェンの−ＣＨピーク）；７．７５（トリアゾールの−ＣＨピーク）；７．８１（１Ｈ，−ＣＯＮＨ−）。
［実施例１５］４−アームＰＥＧロチゴチングリシンエステル（１０Ｋ）の調製
Figure 0006517281
グリシン−ロチゴチンの合成：ロチゴチンＨＣｌ（１．２ｇ、３．４１ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ−グリシンＯＨ（１．１９５ｇ、６．８２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１５０ｍｌ）に溶解し、懸濁液を得た。ＤＭＡＰ（０．６２５ｇ、５．１１ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１．４０７ｇ、６．８２ｍｍｏｌ）の添加後、混合物を、室温において１６時間撹拌した。混合物を、ろ紙を使用してろ過し、ろ液を、５１ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ（５．１１ｍｍｏｌ）で反応停止させた。２層を分離し、水相を、７ｍＬのジクロロメタンで抽出した。統合した有機相を、水で洗浄し、その後ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮し、減圧下で乾燥させ、粗生成物を淡い黄色の固体として得た。粗物質を、ジエチルエーテル（５０ｍＬ）と一緒に３０分間撹拌し、ガラスフリットでろ過し、ジエチルエーテルですすぎ、減圧下で乾燥させ、淡い黄色の粉末を、所望の生成物であるＢｏｃ−Ｇｌｙ−ロチゴチン．ＨＣｌ（１．２５８ｇ、収率７５％）として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ピークを、１．０４ｐｐｍ（ｔ，３Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、１．４７ｐｐｍ（ｓ，９Ｈ，−ＮＨＢｏｃ）、１．９６ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、２．０６ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、２．６０ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、２．９３ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、３．０４ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、３．１３ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、３．２６ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、３．４０ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、３．５２ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、３．６６ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、４．１７ｐｐｍ（ｄ，２Ｈ，−ＮＨＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−）、５．０８ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ２−）、６．９５ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，芳香族）、７．０６ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，チオフェニル）および７．２０ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，チオフェニル）に示した。
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｒｏｔｉｇ ＨＣｌの１．２５８ｇ（２．５５ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（６４ｍｌ）にまず溶解することによって脱保護した。トリフルオロ酢酸（９．８３ｍｌ、１２８ｍｍｏｌ）の添加後、反応混合物を、１時間室温において撹拌し、その後、すべての揮発性物質を、ロータリーエバポレーターを使用して除去した。残留物（暗い黄色）を、メタノールに再溶解し、ジエチルエーテル（４０ｍＬ）を加えることによって沈殿させた。淡い黄色の沈殿を、ガラスフリットを使用してろ過し、乾燥させ、Ｇｌｙ−ロチゴチン．２ＴＦＡ（１．１４０ｇ、収率７９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ピークを、０．９８ｐｐｍ（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、１．７２ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、１．８３ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、２．３３ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、２．５１ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、２．８０ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、３．００ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、３．１２ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）、３．３０ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ）、３．７３ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、４．０３ｐｐｍ（ｑ，２Ｈ，ＮＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−）、６．８０ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，芳香族）、６．９２ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，芳香族）、６．９９ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，チオフェニル）、７．０８ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，チオフェニル）および７．１７ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，チオフェニル）に示した。
Figure 0006517281
４−アームＰＥＧ−ＳＣＭ１０Ｋ（２．０２ｇ、０．１６５ｍｍｏｌ）およびＧｌｙ−ロチゴチン．２ＴＦＡ（０．３７３ｇ、０．６５８ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１６．５ｍｌ）に溶解した。ＴＥＡ（０．２２９ｍｌ、１．６４５ｍｍｏｌ）を加え、黄色の透明溶液を得た。１６時間室温において撹拌後、混合物を、１６ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ溶液で反応停止させ、１．６ｇのＮａＣｌ（水に対して１０ｗ／ｖ％）を入れた。２層を分離し、水相を、１６ｍＬのジクロロメタンで抽出した。統合した有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗抽出液を、４０ｍＬの水に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（ＩＲ１２０Ｈ）カラムに通し、すべての小分子を除去した。回収した水溶液を、５０ｍＬのジクロロメタンと一緒に撹拌し、１０．５ｇのＮａＣｌ（水に対して１５ｗ／ｖ％）を入れた。２層を分離し、水相を、追加の５０ｍＬのジクロロメタンで抽出した。統合した有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮し、減圧下で乾燥させ、所望の生成物である４−アームＰＥＧ−Ｇｌｙ−ロチゴチン．ＨＣｌ１０Ｋ（１．８９ｇ、収率８５％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ポリマー骨格ピークを３．６４ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）に示し、他の主要ピークを、１．０４ｐｐｍ（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、６．９６ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，芳香族）、７．０５ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，チオフェニル）、７．２０ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，チオフェニル）および７．８０ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ，トリアゾール）に示した。各ポリマーのロチゴチン分子の平均数は、１Ｈ ＮＭＲ分析により３．１であると決定された。
［実施例１６］４−アームＰＥＧロチゴチングリシンエステル（２０Ｋ）の調製
グリシン−ロチゴチン．２ＴＦＡ塩を、実施例１６に記載のように調製した。４−アームＰＥＧ−ＳＣＭ２０Ｋ（２．００７ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）およびＧｌｙ−ロチゴチン．２ＴＦＡ（０．２２２ｇ、０．３９３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（９．８ｍｌ）に溶解した。ＴＥＡ（０．１３７ｍｌ、０．９８１ｍｍｏｌ）を加え、黄色の透明溶液を得た。１６時間室温において撹拌後、混合物を、９．８ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ溶液で反応停止させ、１．０ｇのＮａＣｌ（水に対して１０ｗ／ｖ％）を入れた。２層を分離し、水相を、１０ｍＬのジクロロメタンで抽出した。統合した有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗抽出液を、４０ｍＬの水に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（ＩＲ１２０Ｈ）カラムに通し、すべての小分子を除去した。回収した水溶液を、５０ｍＬのジクロロメタンと一緒に撹拌し、１０．５ｇのＮａＣｌ（水に対して１５ｗ／ｖ％）を入れた。２層を分離し、水相を、４０ｍＬのジクロロメタンで抽出した。統合した有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮し、減圧下で乾燥させ、所望の生成物である４−アームＰＥＧ−Ｇｌｙ−ロチゴチン．ＨＣｌ２０Ｋ（１．５８ｇ、収率７４％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、ポリマー骨格ピークを３．６４ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）に示し、他の主要ピークを１．０３ｐｐｍ（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、６．９５ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，芳香族）、７．０６ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，チオフェニル）、７．２０ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，チオフェニル）および７．８１ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ，トリアゾール）に示した。各ポリマーのロチゴチン分子の平均数は、１Ｈ ＮＭＲ分析により２．５３であると決定された。
［実施例１７］チアガビン３−アジドアセテートをポリオキサゾリン１０ペンダント酸２０Ｋに結合させることによる、Ｈ−［（エチル−チアガビン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの調製
Figure 0006517281
２５０ｍＬの丸底フラスコにおいて、チアガビン（２．００ｇｍ、５．３３ｍｍｏｌ）、４−ＤＭＡＰ（６５８ｍｇ、５．３３ｍｍｏｌ）を無水ＡＣＮ（１００ｍＬ）に溶解した。ＡＣＮを、ロータリーエバポレーションにより完全に蒸発させた。ＤＣＭ（１００ｍＬ）を加え、残留物を溶解し、これをアルゴン下で撹拌させた。溶液に、２−ブロモエタノール（１．１７ｍＬ、１５．９８ｍｍｏｌ）およびＤＣＣを加えた（１．１６ｇｍ、５．５９ｍｍｏｌ）。溶液を室温において一晩撹拌させた。ピンク色の溶液が濁った。一晩反応後、反応混合物を逆相ＨＰＬＣにより分析し、これにより、２−ブロモエチルチアガビンへの９８％の転化が示された。反応混合物をろ過し、ピンク色のろ液を、０．１Ｎ ＨＣｌで２回、各回１００ｍＬを分液漏斗において洗浄した。相の分離後、ＤＣＭ相を、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で脱水した。混合物を、ガラスフリットを介してろ過した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより濃縮乾固させた。残留物をＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解した。白色沈殿を、ろ別した。ろ液を１０ｍＬに濃縮し、これを、その後ヘキサン（３００ｍＬ）に加えて沈殿させた。ろ過後、固体をガラスフリットに回収し、真空中で乾燥させ、化合物２ａを固体粉末として得た（２．１ｇｍ、収率：７２％）。重水素化クロロホルム中の２ａのＮＭＲ分析は、関連ピークを、４．４０５ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；３．４９６ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；７．２５１ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０９５ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８８９ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７７４ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９６５ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，＝ＣＨＣＨ２−）；２．０３０ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）；１．９８３ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）に示した。１．４５５ｐｐｍ−３．６５３ｐｐｍ（ｍ，１６Ｈ，ＣＨ３−およびＢｒＣＨ２−非含有）。
２−ブロモエチルチアガビン・ＨＣｌ塩（２ａ）（２．００ｇｍ、３．７０ｍｍｏｌ）に、１００ｍＬの丸底フラスコにおいて、２０ｍＬの無水ＤＭＦ、ＴＥＡ（１．１１ｍＬ、７．９８ｍｍｏｌ）を加え、ＮａＮ３（２６２ｍｇ、３．９９ｍｍｏｌ）を溶液に加えた。溶液を、オイルバスにより４０℃において、アルゴン雰囲気下で撹拌させた。一晩撹拌後、ＤＭＦを、４０℃において真空下でロータリーエバポレーションにより蒸発させた。酢酸エチル（１００ｍＬ）および０．１Ｎ ＨＣｌ（６０ｍＬ）を混合物に加え、撹拌し、その後、分液漏斗に移した。相分離後、水相を、酢酸エチル（１００ｍＬ）により再度抽出した。酢酸エチル相を統合し、０．１Ｎ ＨＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチル層を、その後硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で脱水した。ろ過後、透明なろ液を、２５０ｍＬの丸底フラスコ中でロータリーエバポレーションにより２０ｍＬに濃縮した。混合物に、ヘキサン（２００ｍＬ）を加え、生成物を沈殿させた。ろ過後、固体をガラスフリットに回収し、真空中で一晩乾燥させ、１．３８ｇｍの粗生成物を固形で得た。粗生成物（１．０ｇｍ）を、ＡＣＮ（２４ｍＬ）中０．１％ＴＦＡの溶液に再溶解し、その後、水（９６ｍＬ）中０．１％ＴＦＡに再溶解した。混合物中の白色沈殿をろ別した。ろ液を、その後、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ８ ＯＢＤ ３０／２５０Ｃｏｌｕｍｎ、Ｗａｔｅｒｓ製を用い、ＵＶ検出器を波長２１４ｎｍを使用する逆相クロマトグラフィーにより、流速２０ｍＬ／分で精製した。水中０．１％ＴＦＡ（移動相Ａ）およびＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ（移動相Ｂ）を、精製用移動相として使用した。カラムを２０％のＢで平衡化した。粗生成物の負荷後、カラムを、初めに２０％の移動相Ｂを用いて均一濃度で溶出した。勾配は、３５％の移動相Ｂに１５分で傾斜を付け、その後、３５％の移動相Ｂを用いて均一濃度で溶出した。カラムを３５％の移動相Ｂを用いて溶出して、生成物の分画を回収した。溶液を、ロータリーエバポレーションにより蒸発させ、ＡＣＮを除去した。残った水溶液を、ＤＣＭ（３×１２０ｍＬ）により抽出した。相分離後、ＤＣＭ相を、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で脱水した。固体をろ別し、ろ液を、ロータリーエバポレーターにより濃縮し、ほとんど乾固させ、その後、真空中で乾燥させ、化合物２ｂを粘性油として得た（０．８９ｇｍ）。重水素化クロロホルム中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、４．２７２ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；３．４８３ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；７．２５１ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０９１ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８８３ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７６９ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９３４ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，＝ＣＨＣＨ２−）；２．０２１ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）；１．９７２ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）に示した。１．４５５ｐｐｍ−３．７３３ｐｐｍ（ｍ，１６Ｈ，ＣＨ３−およびＢｒＣＨ２−非含有）。ＨＰＬＣ純度は９９％であった。
Figure 0006517281
Ｈ−［（ＰｔｙｎＯＺ）１０（ＥＯＺ）１９０］−Ｔ−ＰＡ（１．１３ｇｍ、０．０５７７ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬのＲＢフラスコにおいて、ＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解し、２−アジドエチルチアガビン・ＨＣｌ塩（２ｂ）（３４４．５ｍｇ、０．６３５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を、アルゴン下で保護した。ＣｕＩ（４４．２ｍｇ、０．２３１ｍｍｏｌ）を、その後フラスコに加え、次いで、ＴＥＡ（０．１２ｍＬ、０．８６６ｍｍｏｌ）をすぐに加えた。緑変した溶液を、４５℃において一晩、アルゴン雰囲気下で撹拌した。溶液をろ過し、固体を除去した。０．１Ｎ ＨＣｌ（２０ｍＬ）を、ろ液に加えた。混合物中のＴＨＦを、その後ロータリーエバポレーターにより蒸発させた。残った水溶液（２０ｍＬ）を、その後、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）Ｍ４１９５媒体（２０ｇｍ）をシリカゲル６０（１４ｇｍ）の上に充填し、２ｍＭ ＨＣｌで平衡化させたカラム（２ｃｍ ｉ．ｄ．）に負荷し、銅イオンを除去した。カラムを、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートがカラムに全く保有されなくなるまで、２ｍＭ ＨＣｌで溶出した。低分子量のチアガビン関連種（チアガビンおよび２−アジドエチルチアガビン）を除去するために、回収した溶離液（１７５ｍＬ）を、その後、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲ−１２０（４１ｇｍ）樹脂を充填したカラムに適用し、次いで、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートが完全に溶出されるまで、２ｍＭ ＨＣｌで溶出した。ＮａＣｌ（１５ｇｍ）を、回収された溶離液（３００ｍＬ）に加え、５％のブラインを生成した。溶液を、ＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。相分離後、ＤＣＭ相をプールし、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で１時間脱水した。混合物を、ガラスフリットを介してろ過し、硫酸ナトリウムを除去した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより２５ｍＬに濃縮し、その後、５００ｍＬのジエチルエーテル中で沈殿させた。混合物を、ガラスフリットを介してろ過して、沈殿を回収し、真空中で乾燥させ、１．１ｇｍのポリオキサゾリンペンダント２−エチルチアガビン（４）を白色粉末として得た。ＨＰＬＣ分析により、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートが、遊離のチアガビンまたは２−アジドエチルチアガビンを含有しなかったことが示された。重水素化クロロホルム中のポリオキサゾリンペンダント２−エチルチアガビンのＮＭＲ分析は、関連ピークを、７．５４８ｐｐｍ（ｍ，分解不十分，ｎＨ，＝ＣＨ−Ｎ）；７．２５６ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０８７ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８８８ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７７２ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９５８ｐｐｍ（ｔ，ｎＨ，＝ＣＨＣＨ２−）；４．７６１ｐｐｍ（ｔ，分解不十分，２ｎＨ，−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）；４．４９４ｐｐｍ（ｍ，２ｎＨ，Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；３．４４９ｐｐｍ、２．４０６ｐｐｍおよび１．１２０ｐｐｍ（ポリマー骨格）に示した。各ＰＯＺのペンダントチアガビン分子の平均数（ｎ）は９．４であった。
［実施例１８］チアガビン３−アジドプロピオネートをポリオキサゾリンペンダント酸２０Ｋに結合させることによる、Ｈ−［（プロピル−チアガビン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの調製
Figure 0006517281
２５０ｍＬの丸底フラスコにおいて、チアガビン（２．００ｇｍ、５．３３ｍｍｏｌ）、４−ＤＭＡＰ（６５８ｍｇ、５．３３ｍｍｏｌ）を、無水ＡＣＮ（１００ｍＬ）に溶解した。ＡＣＮを、ロータリーエバポレーションにより完全に蒸発させた。ＤＣＭ（１００ｍＬ）を加え、残存物を溶解し、これをアルゴン下で撹拌させた。溶液に、３−ブロモ−１−プロパノール（１．４９ｍＬ、１５．９８ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１．１６ｇｍ、５．５９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を、室温において一晩撹拌させた。ピンク色の溶液が濁った。一晩反応後、反応混合物を、逆相ＨＰＬＣにより分析し、３−ブロモプロピルチアガビンエステルへ９６％が転化されたことが示された。反応混合物をろ過し、ピンク色のろ液を、０．１Ｎ ＨＣｌで２回、各回１００ｍＬを使用して分液漏斗において洗浄した。相分離後、ＤＣＭ相を無水硫酸ナトリウムで脱水した。混合物を、ガラスフリットを介してろ過した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより濃縮乾固させた。残留物を、真空中でさらに乾燥させた。残留粗生成物を、ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ（４２ｍＬ）の溶液に再溶解し、その後水（７８ｍＬ）中０．１％ＴＦＡに再溶解した。混合物中の白色沈殿をろ別した。ろ液を、その後、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ８ ＯＢＤ ３０／２５０Ｃｏｌｕｍｎ、Ｗａｔｅｒｓ製を用いて、ＵＶ検出器を波長２１４ｎｍで使用する逆相クロマトグラフィーにより精製した。水中０．１％ＴＦＡ（移動相Ａ）およびＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ（移動相Ｂ）を、精製用移動相として使用した。カラムを、３５％のＢで平衡化した。粗生成物を負荷後、カラムを、３５％の移動相Ｂで、均一濃度で溶出した。生成物の分画を回収し、逆相ＨＰＬＣにより分析した。溶液を、ロータリーエバポレーションにより蒸発させ、ＡＣＮを除去した。残った水溶液を、ＤＣＭ（３×２５０ｍＬ）により抽出した。相分離後、ＤＣＭ相を、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で脱水した。固体をろ別し、ろ液を、ロータリーエバポレーターによりほとんど濃縮乾固させ、その後、真空中で乾燥させ、化合物１ａを粘性油として得た（１．８３ｇｍ、収率：５６％）。重水素化クロロホルム中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、４．２４７ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；３．４４１ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；７．２５３ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０９４ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８８４ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７７１ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９３２ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，＝ＣＨＣＨ２−）；２．０２９ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）；１．９７３ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）に示した。１．４５５ｐｐｍ−３．６６８ｐｐｍ（ｍ，１６Ｈ，ＣＨ３−ａｎｄＢｒＣＨ２−非含有）。ＨＰＬＣ純度は９８％であった。
３−ブロモプロピルチアガビンエステル・ＴＦＡ塩（１．８０ｇｍ、２．８９ｍｍｏｌ）に、１００ｍＬの丸底フラスコにおいて、２０ｍＬの無水ＤＭＦを加え、ＴＥＡ（８０６μＬ、５．７８ｍｍｏｌ）およびＮａＮ３（１８８ｍｇ、２．８９ｍｍｏｌ）を溶液に加えた。溶液を、オイルバスを用いて４０℃において、アルゴン雰囲気下で撹拌させた。一晩撹拌後、ＤＭＦを、４０℃において、真空下でロータリーエバポレーションにより蒸発させた。酢酸エチル（１００ｍＬ）および０．１Ｎ ＨＣｌ（６０ｍＬ）を混合物に加え、撹拌し、その後分液漏斗に移した。相分離後、水相を、酢酸エチル（１００ｍＬ）により再度抽出した。酢酸エチル層を統合し、脱イオン水（５０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチル層を、その後硫酸ナトリウムで脱水した。ろ過後、透明なろ液を、ロータリーエバポレーションにより濃縮乾固させた。残留物を真空中でさらに乾燥させ、化合物１ｂを粘性油として得た（１．５３ｇｍ、収率：９７％）。重水素化クロロホルム中ＮＭＲ分析は、関連ピークを、４．１９０ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；３．３８８ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；７．２５３ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０９３ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８８４ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７７１ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９３７ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，＝ＣＨＣＨ２−）；２．０２１ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）；１．９７３ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）；１．４５７ｐｐｍ−３．６８３ｐｐｍ（ｍ，１６Ｈ，ＣＨ３−ａｎｄＮ３ＣＨ２−非含有）に示した。ＨＰＬＣ純度は９２％であった。
Figure 0006517281
Ｈ−［（ＰｔｙｎＯＺ）１０（ＥＯＺ）１９０］−Ｔ−ＰＡ（１．１３ｇｍ、０．０５７７ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬのＲＢフラスコにおいてＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解し、３−アジドプロピルチアガビンエステル・ＨＣｌ塩（３３８．７ｍｇ、０．６３５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を、アルゴン下で保護した。ＣｕＩ（４４．２ｍｇ、０．２３１ｍｍｏｌ）を、その後フラスコに加え、次いで、ＴＥＡ（０．１２ｍＬ、０．８６６ｍｍｏｌ）をすぐに加えた。緑変した溶液を、４５℃において、一晩アルゴン雰囲気下で撹拌した。緑色溶液をろ過し、固体を除去した。０．１Ｎ ＨＣｌ（２０ｍＬ）を、ろ液に加えた。混合物中のＴＨＦを、その後、ロータリーエバポレーターにより蒸発させた。残った水溶液（２０ｍＬ）を、その後、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）Ｍ４１９５媒体（２０ｇｍ）をシリカゲル６０（１４ｇｍ）の上に充填し、２ｍＭ ＨＣｌで平衡化したカラム（２ｃｍ ｉ．ｄ．）に負荷し、銅イオンを除去した。カラムを、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートが全くカラムに保有されなくなるまで、２ｍＭ ＨＣｌで溶出した。低分子量のチアガビン関連種（チアガビンおよび３−アジドプロピルチアガビンエステル）を除去するために、回収した溶離液（１７５ｍＬ）を、その後、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０（４１ｇｍ）樹脂を充填したカラムに適用し、次いで、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートが完全に溶出されるまで、２ｍＭ ＨＣｌで溶出した。ＮａＣｌ（１５ｇｍ）を、回収した溶離液（３００ｍＬ）に加え、５％のブラインを生成した。溶液を、ＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で溶出した。相分離後、ＤＣＭ相をプールし、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で１時間脱水した。混合物を、ガラスフリットを介してろ過し、硫酸ナトリウムを除去した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより２５ｍＬに濃縮し、その後、５００ｍＬのジエチルエーテル中で沈殿させた。混合物を、ガラスフリットを介してろ過して、沈殿を回収し、真空中で乾燥させ、１．１ｇｍの白色粉末を得た。ＨＰＬＣ分析により、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートが、遊離のチアガビンまたは３−アジドプロピルチアガビンエステルを含有しなかったことが示された。重水素化クロロホルム中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、７．５５ｐｐｍ（ｍ，分解不十分，ｎＨ，＝ＣＨ−Ｎ），−）；７．２５８ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０９３ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８８１ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７６９ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９６４ｐｐｍ（ｔ，ｎＨ，＝ＣＨＣＨ２−）；４．４２５ｐｐｍ（ｔ，分解不十分，２ｎＨ，−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）；３．４６３ｐｐｍ、２．４０６ｐｐｍおよび１．１２０ｐｐｍ（ポリマー骨格）に示した。
［実施例１９］２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エチルチアガビンエステルをポリオキサゾリン１０ペンダント酸２０Ｋに結合させることによる、Ｈ−［（ＰＥＧ３−チアガビン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの調製
Figure 0006517281
１００ｍＬの丸底フラスコに、チアガビン（７８６ｍｇ、２．０９２ｍｍｏｌ、１．０当量）、４−ＤＭＡＰ（２５８ｍｇ、２．０９２ｍｍｏｌ、１．０当量）および２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エタノール（７３３ｍｇ、４．１８５ｍｍｏｌ、２．０当量）を、無水アセトニトリル（ＡＣＮ、４０ｍＬ）に溶解した。ＡＣＮを、ロータリーエバポレーションにより２５℃において完全に蒸発させた。無水ジクロロメタン（ＤＣＭ、３５ｍＬ）を加え、残留物を溶解し、アルゴン雰囲気において撹拌した。この溶液にＤＣＣ（４５８ｍｇ、２．１９７ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加えた。溶液を室温において一晩撹拌させた。次に反応混合物をろ過し、固体沈殿を除去し、ピンク色に色づいたＤＣＭろ液を、０．１Ｎ ＨＣｌ（２×５０ｍＬ）で分液漏斗において洗浄した。相分離後、ＤＣＭ相を、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で脱水し、ろ過し、その後、ロータリーエバポレーショにより濃縮乾固した。残留物を、真空下でさらに乾燥させ、得られた生成物は、１．３５ｇｍの粗２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エチルチアガビンエステルであった。この粗粉末を、次にＡＣＮ中０．１％ ＴＦＡ（３５ｍＬ）に溶解し、その後、水（６５ｍＬ）中０．１％ＴＦＡを加えた。混合物を、ガラスフリットを介してろ過し、白色沈殿を除去した。ろ液を、０．４５μｍの膜を介してさらにろ過し、その後、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ８ ＯＢＤ ３０／２５０ Ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐ）およびＵＶ検出器を波長２１４ｎｍに設定して使用する分取逆相クロマトグラフィーにより精製した。精製に使用した溶出媒体は、水中０．１％ＴＦＡ（移動相Ａ）およびＡＣＮ中０．１％ ＴＦＡ（移動相Ｂ）であった。カラムを３５％のＢで平衡化した。粗生成物の負荷後、カラムを、３５％の移動相Ｂで、均一濃度で溶出した。溶出した生成物分画を、ロータリーエバポレーションにより蒸発させ、ＡＣＮを除去した。残った水溶液を、その後、ＤＣＭ（３回×２５０ｍＬ）で抽出した。相分離後、各回、ＤＣＭ相を回収し、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で脱水した。固体をろ別し、ろ液を、ロータリーエバポレーションによりほとんど濃縮乾固し、その後、真空下で乾燥させ、２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エチルチアガビンエステルを、粘性油として得た（５６７ｍｇ、収率：４２％）。
生成物を逆相ＨＰＬＣにより分析し、純度９８％を確認した。重水素化クロロホルム中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、４．２５５ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）；３．６５２−３．７０３ｐｐｍ（ｍ，４×２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ３）；３．３８７ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，−ＣＨ２Ｎ３）；７．２４９ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０８９ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８７９ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７６７ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９３２ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，＝ＣＨＣＨ２−）；２．０２９ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）；１．９７３ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）に示した。１．４５５ｐｐｍ−３．５５０ｐｐｍ（ｍ，１３Ｈ）。
Figure 0006517281
Ｈ−［（ＰｔｙｎＯＺ）１０（ＥＯＺ）１９０］−Ｔ−ＰＡ（１．６５ｇｍ、０．０８４７ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬのＲＢフラスコにおいて、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ、３５ｍＬ）に溶解し、２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エチルチアガビンエステル（５６１ｍｇ、０．８４７ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を、アルゴン雰囲気下で混合した。ヨウ化銅（ＣｕＩ、６５ｍｇ、０．３３９ｍｍｏｌ）を、その後フラスコに加え、次いで、トリエチルアミン（ＴＥＡ、０．１８ｍＬ、１．２７０ｍｍｏｌ）をすぐに加えた。緑変した溶液を、４５℃において一晩、アルゴン雰囲気下で撹拌した。緑色溶液を、その後ろ過し、いずれの固体残留物も除去し、０．１Ｎ ＨＣｌ酸（３０ｍＬ）を、その後ろ液に加えた。混合物中のＴＨＦを、その後、ロータリーエバポレーターにより蒸発させた。残った水溶液（３０ｍＬ）を、その後、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）Ｍ４１９５媒体（３０ｇｍ）をシリカゲル６０（２０ｇｍ）の上に充填し、２ｍＭ ＨＣｌで平衡化したカラム（２ｃｍ ｉ．ｄ．）に負荷し、いずれの可溶性銅イオン種も除去した。カラムを、２ｍＭ ＨＣｌで、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートがカラムに全く保有されなくなるまで溶出した。低分子量の遊離チアガビンおよび未反応の２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エチルチアガビンエステル種を除去するために回収し、溶出液（２５６ｍＬ）を、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０（６０ｇｍ）樹脂を充填したカラムに負荷し、その後２ｍＭ ＨＣｌ酸で溶出した。所望のＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートを含有する水溶液（４００ｍＬ）に、ＮａＣｌ（２０ｇｍ）を加え、およそ５％の塩を含むブライン溶液を生成した。この溶液をＤＣＭ（３回×１４５ｍＬ）で抽出した。相分離後、ＤＣＭ相をプールし、無水硫酸ナトリウム（１４５ｇｍ）で１時間脱水した。混合物を、ガラスフリットを介してろ過し、硫酸ナトリウムを除去した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより３０ｍＬに濃縮し、その後、６５０ｍＬのジエチルエーテル中に沈殿させた。混合物をガラスフリットを介してろ過して、沈殿を回収し、その後真空中で乾燥させ、１．５ｇｍの白色粉末を得た。
ＨＰＬＣ分析により、所望のＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートが、遊離チアガビンまたは未反応２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エチルチアガビンエステルを含有しなかったことが示された。重水素化クロロホルム中のＮＭＲは、関連ピークを、７．７２ｐｐｍ（ｍ，分解不十分，ｎＨ，＝ＣＨ−Ｎ）；７．２５８ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０９３ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８８４ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７６９ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９６２ｐｐｍ（ｔ，ｎＨ，＝ＣＨＣＨ２−）；４．５７５ｐｐｍ（ｔ，分解不十分，２ｎＨ，−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）；３．４７２ｐｐｍ、２．４０６ｐｐｍおよび１．１２０ｐｐｍ（ポリマー骨格）に示した。
［実施例２０］チアガビン３−アジド−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）プロパンアミドエステルをポリオキサゾリン１０ペンダント酸２０Ｋへと結合することによる、Ｈ−［（フェニル−チアガビン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの調製
Figure 0006517281
スクシンイミジルアジドプロピオネート：３−アジドプロピオン酸（５．００ｇｍ、純度９５．４％、４１．４４６ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ、４．８７ｇｍ、４１．４４６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）に溶解し、次いで、ＤＣＣ（８．６４ｇｍ、４１．４４６ｍｍｏｌ、１．０当量）を加えた。溶液を、アルゴン下で室温において撹拌させた。一晩反応後、濁った混合物をろ過し、白色沈殿を除去した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより蒸発乾固させた。残留物を、ＡＣＮ（１００ｍＬ）に溶解し、ＡＣＮ中に存在するどのような白色沈殿もろ別した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより蒸発乾固させ、次いで、真空下でさらに乾燥させた。得られた生成物であるスクシンイミジルアジドプロピオネートは、９．７ｇｍであった。ＤＭＳＯ−ｄ６中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、３．６５９ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２−）；３．０１２ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，−Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２−）；２．８２２ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，−ＯＳｕ）に示した。逆相ＨＰＬＣ純度は９５％であった。
Figure 0006517281
３−アジド−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド：次のステップにおいて、４−アミノフェノール（１．４７ｇｍ、１３．４３３ｍｍｏｌ、０．７５当量）を、ＡＣＮ−水混合溶媒（１：１ｖ／ｖ、６０ｍＬ）に６０℃において溶解した。溶液を、スクシンイミジルアジドプロピオネート（４．００ｇｍ、１７．９１１ｍｍｏｌ、１．０当量）を含有する丸底フラスコに移した。溶液を、６０℃においてアルゴン雰囲気下で撹拌させた。一晩反応後、混合物を、０．４５μｍの膜を介してろ過した。ろ液を蒸発させ、ＡＣＮを完全に除去し、この過程の間に、沈殿が、残った水溶液中に形成された。上清をデカントし、残った沈殿を、次にＤＩ水（３０ｍＬ）で洗浄し、デカントし、その後ＡＣＮ（３０ｍＬ）に再溶解した。溶液を、ロータリーエバポレーターに配置し、溶媒を蒸発させ、後に残った残留物は、真空下でさらに乾燥させる必要があった。乾燥させた生成物は、０．７９ｇｍの３−アジド−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）プロパンアミドであった。ＤＭＳＯ−ｄ６中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、７．３５２ｐｐｍ（ｄ，２×１Ｈ，フェニル）；６．６８４ｐｐｍ（ｄ，２×１Ｈ，フェニル）；３．５９０ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２−）；２．５５２ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２−）に示した。
４−（３−アジドプロパンアミド）フェニルチアガビンエステル：２５０ｍＬの丸底フラスコにおいて、３−アジド−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド（７８７ｍｇ、３．６４１ｍｍｏｌ、２．０当量）、チアガビン（６８４ｍｇ、１．８２１ｍｍｏｌ、１．０当量）、４−ＤＭＡＰ（２２５ｍｇ、１．８２１ｍｍｏｌ、１．０当量）を、１０ｍＬの無水ＡＣＮ（１０ｍＬ）に溶解した。ＡＣＮを、ロータリーエバポレーションにより２８℃において完全に蒸発させた。ＤＭＦ（１５ｍＬ）を加え、残留物を溶解し、これをアルゴン下で撹拌させた。溶液にＤＣＣを加えた（３９８ｍｇ、１．９１２ｍｍｏｌ、１．０５当量 ）。溶液を、室温において一晩撹拌させた。反応混合物を、３５℃において真空下で蒸発させ、ＤＭＦを除去した。残留物を、ＡＣＮ（３５ｍＬ）中０．１％ＴＦＡに溶解し、次いで、水（６５ｍＬ）中０．１％ＴＦＡを加えた。混合物を、ガラスフリットを介してろ過し、白色沈殿を除去した。ろ液を、０．４５μｍの膜を介してさらにろ過した。ろ液を、その後、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ８ ＯＢＤ ３０／２５０ Ｃｏｌｕｍｎ、Ｗａｔｅｒｓ製を用いて、ＵＶ検出器を波長２１４ｎｍで使用する逆相クロマトグラフィーにより、精製した。水中０．１％ＴＦＡ（移動相Ａ）およびＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ（移動相Ｂ）を精製用移動相として使用した。生成物分画を回収し、逆相ＨＰにより分析した。溶液を、ロータリーエバポレーションにより蒸発させ、ＡＣＮを除去した。残った水溶液を、ＤＣＭ（３×２５０ｍＬ）により抽出した。相分離後、ＤＣＭ相を、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で脱水した。固体をろ別し、ろ液を、ロータリーエバポレーターによりほとんど濃縮乾固し、その後、真空中で乾燥させ、４−（３−アジドプロパンアミド）フェニルチアガビンエステルを粘性油として得た（４８４ｍｇ）。重水素化クロロホルム中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、７．５６３ｐｐｍ（ｄ，２Ｈ，フェニル）；６．９９６ｐｐｍ（ｄ，２Ｈ，フェニル）；７．２３５ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０８９ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８７４ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７６８ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９４６ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，＝ＣＨＣＨ２−）；３．７２５ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２−）；２．６２０ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｎ３ＣＨ２ＣＨ２−）；２．０２９ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）；１．９７３ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−）に示した。ＨＰＬＣ純度９２％。
Figure 0006517281
Ｈ−［（ＰｔｙｎＯＺ）１０（ＥＯＺ）１９０］−Ｔ−ＰＡ（１．２９ｇｍ、０．０６５９ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬのＲＢフラスコにおいて、ＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解し、４−（３−アジドプロパンアミド）フェニルチアガビンエステル（４８４ｍｇ、０．６５９ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で加えた。ヨウ化銅（ＣｕＩ、５０ｍｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）を、その後フラスコ加え、次いで、トリエチルアミン（ＴＥＡ、０．１４ｍＬ、０．９８９ｍｍｏｌ）をすぐに加えた。緑変した溶液を、４５℃において一晩、アルゴン雰囲気下で撹拌した。緑色溶液をろ過し、固体を除去し、０．１Ｎ ＨＣｌ酸（２４ｍＬ）をろ液に加えた。混合物中のＴＨＦを、その後、ロータリーエバポレーションにより蒸発させ、残った水溶液（２４ｍＬ）は濁った。２ｍＭ ＨＣｌ酸（２６ｍＬ）を、水性混合物に加え、不溶性物質を溶解し、溶液を清澄化した。溶液をその後、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）Ｍ４１９５媒体（２４ｇｍ）をシリカゲル６０（１６ｇｍ）の上に充填し、２ｍＭ ＨＣｌで平衡化したカラム（２ｃｍ ｉ．ｄ．）に負荷し、銅イオンを除去した。カラムを、２ｍＭ ＨＣｌで、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートがカラムに全く保有されなくなるまで溶出した。低分子量の遊離チアガビンおよび未反応４−（３−アジドプロパンアミド）フェニルチアガビンエステルを除去するために、回収した溶出液（２０５ｍＬ）を、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０（４８ｇｍ）樹脂を充填したカラムに負荷し、その後、２ｍＭ ＨＣｌ酸で溶出した。溶出液（３２０ｍＬ）を回収し、ＮａＣｌ（１６ｇｍ）を加えて、５％の塩を含むブライン溶液を生成した。溶液を、ＤＣＭ（３回×１００ｍＬ）で抽出した。相分離後、各回、ＤＣＭ相を回収し、プールし、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で１時間脱水した。混合物を、ガラスフリットを介してろ過し、硫酸ナトリウムを除去した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより３０ｍＬに濃縮し、４００ｍＬのジエチルエーテル中に沈殿させた。混合物をガラスフリットを介してろ過し、沈殿を回収して、その後、真空中で乾燥させ、１．２ｇｍの白色粉末を得た。
ＨＰＬＣ分析により、ＰＯＺ−チアガビンコンジュゲートが、遊離チアガビンまたは４−（３−アジドプロパンアミド）フェニルチアガビンエステルを含有しなかったことが示された。重水素化クロロホルム中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、７．６０７ｐｐｍ（ｄ，分解不十分，２ｎＨ，フェニル）；７．５４８ｐｐｍ（ｍ，分解不十分，ｎＨ，＝ＣＨ−Ｎ）；７．２４５ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０９１ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．９４２ｐｐｍ（ｄ，分解不十分，２Ｈ，フェニル）；６．８７４ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７６７ｐｐｍ（ｄ，ｎＨ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９７０ｐｐｍ（ｔ，ｎＨ，＝ＣＨＣＨ２−）；４．７０５ｐｐｍ（ｔ，分解不十分，２ｎＨ，−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）；３．４５７ｐｐｍ、２．４０１ｐｐｍおよび１．１１８ｐｐｍ（ポリマー骨格）に示した。
［実施例２１］４−アームＰＥＧ−アセチレン（１０Ｋ）とアジドプロピルチアガビンとのカップリング
Figure 0006517281
４アームＰＥＧ−アルキン１０Ｋ（１．５９ｇｍ、０．１４４ｍｍｏｌ、Ｃｒｅａｔｉｖｅ ＰＥＧＷｏｒｋｓ製）を、１００ｍＬのＲＢフラスコにおいて、２５ｍＬのＴＨＦに溶解し、３−アジドプロピル−チアガビンエステル・ＨＣｌ塩（３３８．７ｍｇ、０．６３５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液をＡｒ下で保護し、４５℃に加熱し、溶解した。ＣｕＩ（４４．２ｍｇ、０．２３１ｍｍｏｌ）を、その後フラスコに加え、次いでＴＥＡ（１２０．６μＬ、０．８６６ｍｍｏｌ）をすぐに加えた。溶液を、４５℃において一晩、アルゴン雰囲気下で撹拌した。溶液をろ過し、固体を除去した。０．１Ｎ ＨＣｌ（２０ｍＬ）をろ液に加えた。混合物中のＴＨＦを、その後、ロータリーエバポレーターにより蒸発させた。残った水溶液（２０ｍＬ）をその後、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）Ｍ４１９５媒体（２０ｇｍ）を充填し、２ｍＭ ＨＣｌで平衡化したカラム（２ｃｍ ｉ．ｄ．）に負荷し、銅イオンを除去した。カラムを、ＰＥＧ−チアガビンコンジュゲートがカラムに全く保有されなくなるまで、２ｍＭ ＨＣｌで溶出した。低分子量のチアガビン関連種（チアガビンおよび３−アジドプロピルチアガビンエステル）を除去するために、回収した溶離液をその後、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０（４１ｇｍ）樹脂を充填したカラムに適用し、次いで、２ｍＭ ＨＣｌで、ＰＥＧ−チアガビンコンジュゲートが完全に溶出されるまで溶出した。ＮａＣｌ（１１ｇｍ）を、回収した溶離液（２２０ｍＬ）に加え、５％のブライン溶液を生成した。溶液をＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。相分離後、ＤＣＭ相をプールし、無水硫酸ナトリウム（１００ｇｍ）で１時間脱水した。混合物を、ガラスフリットを介してろ過し、硫酸ナトリウムを除去した。ろ液を、ロータリーエバポレーションにより３ｍＬに濃縮し、その後、ジエチルエーテル（２００ｍＬ）中に沈殿させた。混合物を、ガラスフリットを介してろ過し、沈殿を回収し、その後、真空中で乾燥させ、１．４ｇｍの白色粉末を得た。重水素化クロロホルム中のＮＭＲ分析は、関連ピークを、７．６２ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，＝ＣＨ−Ｎ），−）；７．２５９ｐｐｍ（ｄ，４Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；７．０９６ｐｐｍ（ｄ，４Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．８８３ｐｐｍ（ｄ，４Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；６．７７２ｐｐｍ（ｄ，４Ｈ，−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−）；５．９６７ｐｐｍ（ｔ，４Ｈ，＝ＣＨＣＨ２−）；４．４４０ｐｐｍ（ｔ，分解不十分，８Ｈ，−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）；３．６４ｐｐｍ（ＰＥＧ骨格）に示した。各４アームＰＥＧのチアガビン分子の平均数は、３．２であった。
［実施例２２］ロピニロール３−アジドカーバメートをポリオキサゾリン１０ペンダント酸２０Ｋに結合することによる、Ｈ−［（カーバメート−ロピニロール） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの調製
Figure 0006517281
ブロモエチルＮ−ロピニロリル（ｒｏｐｉｎｉｒｏｌｙｌ）カーバメート：ジオキサン（３８ｍｌ）中ロピニロール塩酸塩（０．５５８ｇ、１．８８ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（２．１０ｍｌ、１５．１ｍｍｏｌ）を加えた。５分間撹拌後、２−ブロモエチルクロロホルメート（１．６１ｍｌ、１５．１ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、混合物を、一晩、室温において撹拌させた。水（４０ｍＬ）を加え、ｐＨ９．５の混合物を得た。一晩撹拌後、混合物を、ジクロロメタン（４０ｍＬ）およびブライン溶液（１０ｍＬ）と一緒に、１０分間撹拌した。２層を分離し、上層を、ジクロロメタン（４０ｍＬ）で抽出した。統合した有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮し、暗赤色の濃厚油を得た。さらなる精製を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、ジクロロメタン／ＥｔＯＡｃ（９：１から出発し、４：１その後１００％ＥｔＯＡｃ）で溶出して実施し、所望のＮ−アシル化生成物であるブロモエチル−Ｎ−ロピニロリル（ｒｏｐｉｎｉｒｏｌｙｌ）カーバメートを、暗赤色の油として得た。（０．１７０ｇ、収率２２．０１％）。）。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＤＭＳＯ−ｄ６，δ）：０．８３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，６Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、１．３９（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２．３９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２．６２（ｍ，４Ｈ，Ｐｒ２ＮＣＨ２ＣＨ２−Ａｒ）、３．８０（ｓ，２Ｈ，−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−）、３．８０（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ）、４．６５（ｔ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．２５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ，Ａｒ Ｈ）。
アジドエチル−Ｎ−ロピニロリル（ｒｏｐｉｎｉｒｏｌｙｌ）カーバメート：ＤＭＦ（２ｍｌ）中ブロモエチル−Ｎ−ロピニロリル（ｒｏｐｉｎｉｒｏｌｙｌ）カーバメート（０．１７０ｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）の溶液に、アジ化ナトリウム（０．０２７ｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）を加え、透明な黄色の溶液を得た。一晩、室温において撹拌後、混合物を、１ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌで反応停止させ、その後、２ｍＬの水で希釈した。すべての揮発性物質を、ロータリーエバポレーターを使用して除去し、水溶液を、ジクロロメタンで２回（各３ｍＬ）抽出した。統合した有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮して、アジドエチル−Ｎ−ロピニロリル（ｒｏｐｉｎｉｒｏｌｙｌ）カーバメート（０．１２ｇ、収率７８％）を、濃厚な黄色の油として得た。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＤＭＳＯ−ｄ６，δ）：０．９３（ｔ，Ｊ＝Ｈｚ，６Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、１．７０（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２．９９（ｍ，Ｊ＝Ｈｚ，４Ｈ，Ｐｒ２ＮＣＨ２ＣＨ２−Ａｒ）、３．０７（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３．２２（ｍ，４Ｈ，Ｐｒ２ＮＣＨ２ＣＨ２−Ａｒ）、３．９２（ｓ，２Ｈ，−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−）、３．９８（ｔ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ３）、４．４８（ｔ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ）、７．１４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．３３（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．６９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ，Ａｒ Ｈ）。
Ｈ−［（カーバメート−ロピニロール）１０（ＥＯＺ）１９０］−ＣＯＯＨ２０Ｋ：アジドエチル−Ｎ−ロピニロリル（ｒｏｐｉｎｉｒｏｌｙｌ）カーバメート塩酸塩（０．１２ｇ、０．２９３ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１５ｍｌ）に溶解した。Ｈ−［（Ｐｔｙｎ）１０（エチル）２００］−Ｔ−ＰＡ（０．４８８ｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を撹拌して、完全に溶解した。ＣｕＩ（０．０１９ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．０１４ｍｌ、０．０９８ｍｍｏｌ）を加え、透明な赤色溶液を得た。
１６時間、４５℃において撹拌後、混合物を、２ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌで反応停止させ、ｐＨ３の溶液を得た。すべての揮発性物質を除去し、残留物を、メタノールに再溶解した。得られた混合物を、Ｄｏｗｅｘおよびａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０カラムに、メタノールを溶出液として使用して、通した。メタノールの除去後、得られた水溶液を、ジクロロメタンで２回（各５ｍＬ）抽出した。有機溶液を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、１０ｍＬに濃縮し、７０ｍＬのジエチルエーテルに加えることによって沈殿させた。沈殿をろ過し、減圧下で乾燥させ、Ｈ−［（カーバメート−ロピニロール）１０（エチル）２００］−Ｔ−ＰＡ（０．５０ｇ、収率８６％）を、淡い黄色の粉末として得た。普通のポリマー骨格ピークに加え、１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＤＭＳＯ−ｄ６，δ）は、平均６．４単位のロチゴチンを含有したポリマー鎖および主要なロピニロールのピークを、０．９７（ｍ，６Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、４．６２（ｍ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｂｒおよびｍ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ２−トリアゾール環）、７．１９−７．３９（ｂｒ ｍ，３Ｈ，Ａｒ Ｈ）および７．９１（ｍ，１Ｈ，トリアゾール Ｈ）に示している。
［実施例２３］ポリエチレングリコールデンドリマー（２６Ｋ）の合成
ＰＥＧデンドリマーの合成は２ステップを有し、第１はＰＥＧデンドロンブロックの構築であり、第２は、デンドリマー構造を生成するためのブロックの収束（ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｃｅ）である。
ｉ デンドロン構築ブロックの調製：
Figure 0006517281
Ｅｔ−Ｇ１−ＮＨＢｏｃ。Ｌ−リジンエチルエステルジヒドロクロリド（０．２５３ｇ、１．０２５ｍｍｏｌ）およびＳＣＭ−ＰＥＧ−ＮＨＢｏｃ ２Ｋ（４．７１ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１７０ｍｌ）に溶解した。ＴＥＡ（０．７１４ｍｌ、５．１２ｍｍｏｌ）の添加後、混合物を、一晩、室温において撹拌した。反応混合物を、５１ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ溶液で反応停止させ、ＮａＣｌ（５．１ｇ）と一緒に撹拌した。
２層を分離し、水相を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で抽出した。統合した有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮し、減圧下で乾燥させ、粗生成物を、ワックス状の固体として得た。粗生成物を水に再溶解し、Ａｍｂｅｒｌｉｔカラムに通し、その後、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦおよびＳＰ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦの両方を使用するイオン交換カラムに通した。得られた水溶液に、ＮａＣｌ（１５％ｗ／ｖ）を入れ、ジクロロメタンで抽出した。統合した有機相を、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮し、減圧下で乾燥させ、Ｅｔ−Ｇ１−ＮＨＢｏｃを得た（３．４ｇ、収率８４％）。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、普通の骨格ピークを、３．６４ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）に示し、他の主要ピークを、１．２８ｐｐｍ（ｔ，３Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、１．４４ｐｐｍ（ｓ，１８Ｈ，−ＮＨＢｏｃ）、４．０１ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ各ＰＥＧに関する２つのプロトン，−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）、４．３２ｐｐｍ（ｑ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、４．５９ｐｐｍ（ｑ，１Ｈ，−ＣＨ（ＣＯ２Ｅｔ）ＮＨ−）に示した。
ＣＯ ２ Ｈ−Ｇ１−ＮＨＢｏｃ。Ｅｔ−Ｇ１−ＮＨＢｏｃ（０．９７５ｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）を水（６．２ｍｌ）に溶解し、一晩、０．１Ｎ ＮａＯＨ（５ｍｌ、０．５ｍｍｏｌ）と一緒に撹拌した。混合物を、０．５ｍＬの１Ｎ ＨＣｌを加えることによって酸性化し、１．８ｇのＮａＣｌ（１５％ｗ／ｖ）を入れ、その後、１０ｍＬのＤＣＭと一緒に撹拌した。２層を分離し、水相を、８ｍＬのＤＣＭで抽出した。統合した有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮し、減圧下で乾燥させ、ＣＯ２Ｈ−Ｇ１−ＮＨＢｏｃ（０．９２８ｇ、収率９６％）を、淡い黄色のワックス状粉末として得た。加水分解の完了を、１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）により確認し、１．２８および４．３２ｐｐｍに示されたエステルのプロトンピーク（−ＯＣＨ２ＣＨ３）の消失が明らかにされた。
Ｅｔ−Ｇ１−ＮＨ ２ ．２ＴＦＡ。Ｅｔ−Ｇ１−ＮＨＢｏｃ（２．４２ｇ、０．６１３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１５．３３ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（２．３６ｍｌ、３０．７ｍｍｏｌ）と一緒に、１時間、室温において撹拌した。揮発性物質の大部分を、ロータリーエバポレーターを使用して除去し、約４．５ｇの濃厚な赤色の抽出物を得た。粗生成物を、３０ｍＬジエチルエーテルと一緒に撹拌し、粘着性粉末状物質およびわずかに濁った溶液を得た。溶液をデカント後、残留物を、３０ｍＬのジエチルエーテルと一緒に撹拌した。溶液をデカント後、淡い白色粉末（ワックス状）を、減圧下で一晩乾燥させた。粗生成物を、２５ｍＬのジクロロメタンに再溶解し、その後、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮し、減圧下で乾燥させ、Ｅｔ−Ｇ１−ＮＨ２・２ＴＦＡ（２．１０ｇ、収率８６％）を得た。脱保護の完了を、１．４４ｐｐｍ（ｓ，１８Ｈ，−ＮＨＢｏｃ）に示された−Ｂｏｃ基のプロトンピークの消失により確認した。
ＣＯ ２ Ｈ−Ｇ１−エチニル。ＨＯＢＴ（０．２０９ｇ、１．３６２ｍｍｏｌ）を、アセトニトリルを使用して共沸乾燥させた。残留物に、ジクロロメタン（２０ｍｌ）中４−ペンチン酸（０．１２５ｇ、１．２７７ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。ＤＣＣ（０．２６４ｇ、１．２７７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１０分間撹拌し、濁った溶液を得た。ジクロロメタン（２０ｍｌ）中Ｅｔ−Ｇ１−ＮＨ２・２ＴＦＡ（１．６９ｇ、０．４２６ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．３５６ｍｌ、２．５５ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。１８時間撹拌後、反応混合物を、シリンジフィルターを使用してろ過し、０．１Ｎ ＨＣｌで反応停止させた。すべての有機揮発性物質を、ロータリーエバポレーターを使用して除去し、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅカラムに通し、その後、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦを使用するイオン交換カラムに通した。得られた水溶液に、ＮａＣｌ（１５％ｗ／ｖ）を入れ、ジクロロメタンで抽出した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮し、減圧下で乾燥させ、Ｅｔ−Ｇ１−エチニルを得た。
Ｅｔ−Ｇ１−エチニルの加水分解。エチルエステル生成物を水に溶解し、溶液のｐＨを、０．５Ｎ ＮａＯＨを使用して１３に調整した。一晩撹拌後、混合物を、ｐＨ３に酸性化し、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅカラムおよびＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦを使用するイオン交換カラムにより精製し、１．１４ｇ（収率６９％）のＣＯ２Ｈ−Ｇ１−エチニルを所望の生成物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、普通の骨格ピークを、３．６４ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）に示し、他の主要ピークを、２．０３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＣＨ）、２．４２（ｔ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＣＨ）、２．５３（ｔ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＣＨ）、３．９８−４．１６ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ 各ＰＥＧに関する２つのプロトン，−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）、４．６２ｐｐｍ（ｑ，１Ｈ，−ＣＨ（ＣＯ２Ｅｔ）ＮＨ−）に示した。
ｉｉ 収束（Ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ）経路によるデンドリマーの構築
Figure 0006517281
Ｅｔ−Ｇ２−ＮＨＢｏｃ。ＨＯＢＴ（０．０３５ｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（２０ｍＬ）を使用して共沸乾燥させた。残留物に、ジクロロメタン（１５ｍｌ）中ＣＯ２Ｈ−Ｇ１−ＮＨＢｏｃ（０．８９０ｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。ＤＣＣ（０．０４７ｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を３時間撹拌した。Ｅｔ−Ｇ１−ＮＨ２・２ＴＦＡ（０．４１０ｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．０８６ｍｌ、０．６２０ｍｍｏｌ）の添加後、反応混合物を、一晩、室温において撹拌した。混合物を、シリンジフィルターを使用してろ過し、０．１Ｎ ＨＣｌで反応停止させた。すべての有機揮発物質を、ロータリーエバポレーターを使用して除去した。得られた水溶液を、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅカラムに通し、その後、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦおよびＳＰ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦの両方を使用するイオン交換カラムに通した。得られた水溶液に、ＮａＣｌ（１５％ｗ／ｖ）を加え、ジクロロメタンで抽出した。統合した有機相を、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮し、減圧下で乾燥させ、Ｅｔ−Ｇ２−ＮＨＢｏｃを得た（０．８７９ｇ、収率７４％）。ＤＥＡＥおよびＳＰカラムの両方におけるイオン交換分析により、すべてが中性種であることが明らかにされた。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、普通の骨格ピークを、３．６４ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）に示し、他の主要ピークを、１．２８ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、１．４４ｐｐｍ（ｓ，３６Ｈ，−ＮＨＢｏｃ）、３．９８−４．０４ｐｐｍ（ｍ，１２Ｈ 各ＰＥＧに関する２つのプロトン，−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）、４．１９ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、４．５９ｐｐｍ（ｑ，１Ｈ，−ＣＨ（ＣＯ２Ｅｔ）ＮＨ−）に示した。
Ｅｔ−Ｇ２−ＮＨ ２ ．４ＨＣｌ。Ｅｔ−Ｇ２−ＮＨＢｏｃ（０．８７７ｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）を、２０ｍＬのメタノール性ＨＣｌ（５ｍｌ、１５．２０ｍｍｏｌ）と一緒に１時間、室温において撹拌した。すべての揮発性物質を、ロータリーエバポレーターにより除去した。残留物を、３０ｍＬのジクロロメタンに再溶解し、２５ｍＬのブライン溶液で洗浄した。有機溶液を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮し、減圧下で乾燥させ、Ｅｔ−Ｇ２−ＮＨ２・ＨＣｌ（０．８８３ｇ、定量的収率）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ、５００ＭＨｚ、１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、普通の骨格ピークを、３．６４ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）に示し、他の主要ピークを、１．２８ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、３．９４−４．０４ｐｐｍ（ｍ，１２Ｈ 各ＰＥＧに関する２つのプロトン，−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）、４．１７ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）に示した。脱保護の完了を、１．４４ｐｐｍ（ｓ，３６Ｈ，−ＮＨＢｏｃ）に示された−Ｂｏｃ基のプロトンピークの消失により確認した。
Ｅｔ−Ｇ３−エチニル。ＨＯＢＴ（０．０５１ｇ、０．３３２ｍｍｏｌ）を、３０ｍＬのアセトニトリルを使用して共沸乾燥させた。残留物に、ジクロロメタン（３３ｍｌ）中ＣＯ２Ｈ−Ｇ１−エチニル（１．１３３ｇ、０．２９２ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。ＤＣＣ（０．０６０ｇ、０．２９２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、２時間、室温において撹拌し、濁った溶液を得た。Ｅｔ−Ｇ２−ＮＨ２ ＨＣｌ（０．７５ｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．０７４ｍｌ、０．５３２ｍｍｏｌ）の添加後、混合物を、１６時間、室温において撹拌した。混合物を、６ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌで反応停止させた。すべての有機揮発性物質を、ロータリーエバポレーターを使用して除去し、残った水溶液を、１５ｍＬの水で希釈した。得られた水溶液を、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅカラムに通し、その後ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦおよびＳＰ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦの両方を使用するイオン交換カラムに通し、過剰な酸デンドロン種および反応の未完成によるアミノ種を除去した。得られた水溶液にＮａＣｌ（１５％ｗ／ｖ）を入れ、ジクロロメタンで抽出した。統合した有機相を、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮し、減圧下で乾燥させ、淡い黄色い固体を得た。さらなる精製を、３０ｍＬのジエチルエーテルと一緒に３０分間撹拌し、ガラスフリットでろ過し、乾燥させることによって実施し、Ｅｔ−Ｇ３−エチニル（１．２２１ｇ、収率６９％）を淡い黄色の結晶として得た。ＤＥＡＥおよびＳＰの両方のカラムにおけるイオン交換分析により、すべての中性種が明らかにされた。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、普通の骨格ピークを、３．６４ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎに示し、他の主要ピークを、１．２８ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、２．０３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＣＨ）、２．４３（ｔ，１６Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＣＨ）、２．５３（ｔ，１６Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＣＨ）、３．９８−４．０３ｐｐｍ（ｍ，２８Ｈ 各ＰＥＧに関する２つのプロトン，−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）、４．１７ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、４．４０ｐｐｍ（ｑ，６Ｈ，−ＣＨ（ＣＯ−）ＮＨ−）．４．６２ｐｐｍ（ｑ，１Ｈ，−ＣＨ（ＣＯ２Ｅｔ）−ＮＨ−）に示した。
［実施例２４］ＰＥＧ Ｅｔ−Ｇ３−エチニルデンドリマー２６Ｋとロチゴチン３−アジドプロピオネートとの結合
Figure 0006517281
ロチゴチン３−アジドプロピオネート（０．１９２ｇ、０．３６５ｍｍｏｌ）およびＥｔ−Ｇ３−エチニル（１．０７７ｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２７．０ｍｌ）に溶解した。トリエチルアミン（０．０９０ｍｌ、０．６４８ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（０．１２３ｇ、０．６４８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、４０時間、５０℃において撹拌した。室温に冷却後、混合物を、１２ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ溶液と一緒に撹拌した。ＴＨＦを、ロータリーエバポレーターを使用して除去後、得られた水溶液を、１０ｍＬの水で希釈し、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（ＩＲ−１２０Ｈ）カラム（５０ｍＬ）およびＤｏｗｅｘ（登録商標）Ｍ４１９５カラム（５０ｍＬ）に、０．０１％ＨＣｌ溶液を溶出液として使用して通した。回収した水溶液を、７０ｍＬのジクロロメタンと一緒に、２２ｇのＮａＣｌ（水の量の１５ｗ／ｖ％）を使用して撹拌した。２層を分離し、水相を、７０ｍＬのジクロロメタンと一緒に撹拌した。統合した有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮し、ジエチルエーテルを加えることによって沈殿させ、ろ過し、減圧下で乾燥させた。得られたワックス状固体を、ジエチルエーテル（２０ｍＬ）と一緒に１時間撹拌し、ろ過し、乾燥させ、０．９９７ｇ（収率８２％）の所望の生成物である、Ｅｔ−Ｇ３−Ｒｏｔｉｇ ＨＣｌを、淡い黄色の粉末として得た。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３）は、普通のＰＥＧピークを、３．６４ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ，−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）に示し、他の主要ピークを、１．２８ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、３．９７−４．０３ｐｐｍ（ｍ，２８Ｈ各ＰＥＧに関する２つのプロトン，−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−）、４．１７ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ３）、４．４１ｐｐｍ（ｑ，６Ｈ，−ＣＨ（ＣＯ）ＮＨ−）および４．６２ｐｐｍ（ｑ，１Ｈ，−ＣＨ（ＣＯ２Ｅｔ）ＮＨ−）に示した。ロチゴチンの（Ｒｏｔｉｇｏｔｉｎｙｌ）ピークは、１．０４ｐｐｍ（ｔ，３Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、４．７３ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，トリアゾール−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｏｔｉｇ）、６．８９−７．２０ｐｐｍ（ｍ，６Ｈ，芳香族およびチオフェニル Ｈ）、７．７０（ｂｒ ｓ，１Ｈ，トリアゾール Ｈ）に明らかにされた。デンドリマーのロチゴチンの数は、１Ｈ ＮＭＲおよび逆相ＨＰＬＣ分析の両方により、５．６であることが決定された。「クリック」反応を、２．０３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＣＨ）および２．４３（ｔ，１６Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＣＨ）に示された末端ピークの消失および７．７０ｐｐｍのトリアゾールプロトンピークの出現によりモニターした。
［実施例２５］ｍＰＥＧ−ｃｏ−ポリアミドＧ２エチニルデンドリマー（２０Ｋ）の合成
Figure 0006517281
Ｆｍｏｃ−Ｇ２−エステル：２５ｍＬの丸底フラスコに、１−ＨＯＢＴ水和物（０．３４２ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を入れ、１５ｍＬのアセトニトリルを使用して共沸乾燥させた。ＤＭＦ（８ｍｌ）の添加後、Ｆｍｏｃ−Ｇ１−酸（０．３ｇ、０．６３９ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（０．４６１ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を加えた。１時間３０分間撹拌後、混合物は濁り、アミノ−Ｇ１−エステル（０．９２９ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた淡い黄色の沈殿溶液を、１６時間、室温において撹拌させた。混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を、ジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液で２回（各１０ｍＬ）洗浄し、その後ブラインで洗浄した。有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して濃縮した。粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２：３、その後１：１）の溶媒混合物で溶出することによって精製し、０．８９ｇの、所望の生成物であるＦｍｏｃ−Ｇ２−エステルを、収率８４％で得た。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤＣｌ３，δ）：１．４１（ｓ，８１Ｈ，−ＣＯＯＣ（ＣＨ３）３）、１．９６（ｍ，２４Ｈ，−ＮＨＣ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．２０（ｍ，２４Ｈ，−ＮＨＣ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、４．２０（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−）、４．３０（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−）、６．０３（ｂｒ ｓ，３Ｈ，−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−）、６．４８（ｂｒ ｓ，１Ｈ，−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−）、７．３２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．３９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．６６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ，Ａｒ Ｈ）。
Ｆｍｏｃ−Ｇ２−ａｃｉｄ：Ｆｍｏｃ−Ｇ２−エステル（０．８９ｇ、０．５３５ｍｍｏｌ）を、ＨＣＯＯＨ（５．４ｍｌ）に溶解した。１６時間撹拌後、すべての揮発性物質を、ロータリーエバポレーターを使用して除去し、濃厚な油性物質を得た。残留物を、ジエチルエーテルと一緒に撹拌し、ろ過し、乾燥させ、白色粉末を得た（０．５８７ｇ、収率９５％）。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤ３ＯＤ，δ）：１．９１（ｍ，２４Ｈ，−ＮＨＣ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．２８（ｍ，２４Ｈ，−ＮＨＣ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、４．２３（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−）、４．３６（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−）、６．８４（ｂｒ ｓ，１Ｈ，−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−）、７．３３（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．４０（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．７０（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ，Ａｒ Ｈ）、７．８０（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ，Ａｒ Ｈ）．加水分解の完了を、１．４１ｐｐｍに示されたｔｅｒｔ−ブチル基のピークの消失により確認した。
アミノ−Ｇ２−エチニル：透明な黄色の油であるプロパルギルアミン（０．４１５ｇ、７．５４ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬの丸底フラスコに秤量し、その後、ＤＭＦ（３８ｍｌ）で希釈した。Ｆｍｏｃ−Ｇ２−エステル（０．４３６ｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）を加え、濃密溶液を得た。ＴＢＴＵ（１．４５ｇ、４．５２ｍｍｏｌ）を加え、透明な黄色の溶液を得た。ＴＥＡ（１．２６ｍｌ、９．０５ｍｍｏｌ）の添加後、反応混合物を、４日間、室温において撹拌させた。すべての揮発性物質を、減圧下で除去し、残留物を、４０ｍＬのジクロロメタンと一緒に撹拌し、濁った溶液を得た。得られた混合物を、ブライン溶液（２５ｍＬ）と一緒に撹拌し、２層分離液および黄色の粘性沈殿をもたらした。有機相および水溶液の両方をデカントし、残留した黄色の粘性物質を、メタノールに溶解した。回収したメタノール中溶液を濃縮し、減圧下で乾燥させ、０．３５８ｇの所望のアミノ−Ｇ２−エチニルを、淡い黄色の粉末として、収率７５％で得た。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤ３ＯＤ，δ）：１．７０（ｂｒ ｔ，６Ｈ，ＮＨ２Ｃ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．００（ｍ，１８Ｈ，−ＮＨＣ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．２１（ｍ，２４Ｈ，−Ｃ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．６０（ｓ，９Ｈ，−ＮＨＣＨ２ＣＣＨ）、３．９６（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ，−ＮＨＣＨ２ＣＣＨ）．Ｆｍｏｃ基の脱保護の完了を、Ｆｍｏｃ基のピークの消失により確認した。
ｍＰＥＧ−ｃｏ−ポリアミド−Ｇ２−エチニル。ｍＰＥＧ−ＳＶＡ２０Ｋ（０．４２９ｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）およびアミノ−Ｇ２−エチニル（０．０４０４ｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）を、６ｍＬの１：１ＤＭＦ／ジクロロメタンに溶解した。ＴＥＡ（０．０１２ｍｌ、０．０８５ｍｍｏｌ）の添加後、混合物を、１８時間、室温において撹拌した。すべての揮発性物質を、減圧下で４０℃において除去し、残留物を、４ｍＬのＤＣＭに再溶解し、乳状溶液を得た。ＩＰＡ（１２ｍＬ）の添加により溶液は透明になった。ジクロロメタンを、ロータリーエバポレーターを使用して除去し、白色沈殿を含む溶液を得た。１０分間、室温において撹拌後、白色沈殿をろ過し、ＩＰＡで洗浄し、減圧下で乾燥させ、０．４３２ｇ（収率９５％）の、ＰＥＧとポリアミドデンドリマーとのブロックコポリマーであるｍＰＥＧ−ポリアミド−Ｇ２−エチニルを得た。１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤ３ＯＤ，δ）：１．７０（ｍ，２Ｈ，ｍＰＥＧ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−）、１．８２（ｍ，２Ｈ，ｍＰＥＧ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−）、１．９４（ｂｒ ｔ，６Ｈ，−ＮＨＣ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．０１（ｍ，１８Ｈ，−ＮＨＣ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．２１（ｍ，１８Ｈ，−Ｃ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．３８（ｍ，６Ｈ，−Ｃ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−）３）、２．６２（ｓ，９Ｈ，−ＮＨＣＨ２ＣＣＨ）、３．３７（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３Ｏ−）、３．６４（ｍ，ＰＥＧ ｂａｃｋｂｏｎｅ，ＣＨ３Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２−）、３．９７（ｂｒ ｓ，２Ｈ，−ＮＨＣＨ２ＣＣＨ）。
［実施例２６］ＰＥＧ−ポリアミドデンドリマーとロチゴチン３−アジドプロピオネートとの結合
Figure 0006517281
ロチゴチン３−アジドプロピオネート・ＨＣｌ（０．０８５ｇ、０．１８９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１２ｍｌ）に溶解した。ｍＰＥＧ−ポリアミドＧ２−エチニルデンドリマー（０．４２６ｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を撹拌し、完全に溶解した。ＣｕＩ（０．０１４ｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．０３９ｍｌ、０．２７８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１６時間、４５℃において撹拌した。室温に冷却後、混合物を、１０ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ溶液で反応停止させた。すべての有機揮発性物質を、ロータリーエバポレーターを使用して除去した。得られた水溶液を、１０ｍＬのメタノールで希釈し、その後、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）Ｍ４１９５カラム（１５ｍＬ）に通し、次いでメタノール洗浄を実施した。ロータリーエバポレーターを使用してメタノールを除去後、得られた水溶液を、ジクロロメタン（各２０ｍＬ）と一緒に２回、１ｇのＮａＣｌを使用して撹拌した。統合した有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮し、ジエチルエーテル内に加えることによって沈殿させた。沈殿させた溶液をろ過し、乾燥させ、０．４７ｇ（定量的収率）の所望の生成物、ｍＰＥＧ−ポリアミドＧ２−Ｐｒ−Ｒｏｔｉｇを、淡い黄色の結晶物質として得た。コポリマー骨格ピークの他に、１Ｈ ＮＭＲ（Ｖａｒｉａｎ，５００ＭＨｚ，１０ｍｇ／ｍＬ ＣＤ３ＯＤ，δ）は、「クリック」反応の完了による主要なロチゴチンのピークを、１．０５ｐｐｍ（ｄ，２７Ｈ，ロチゴチンの−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、４．４０ｐｐｍ（ｍ，１８Ｈ，−ＮトリアゾールＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−Ｒｏｔｉｇ）、４．７０ｐｐｍ（ｍ，１８Ｈ，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ２−Ｃトリアゾール−）および７．９４ｐｐｍ（ｓ，９Ｈ，トリアゾール Ｈ）に示した。
［実施例２７］酸化ポリデキストラン（２０Ｋ）の合成
Figure 0006517281
ポリアール（ｐｏｌｙａｌ）（酸化デキストラン）の合成：５．５８ｇの過ヨウ素酸ナトリウム（２６ｍｍｏｌｅ）を、３０ｍＬのＤＩ−Ｈ２Ｏに、１００ｍＬの一ッ口丸底フラスコにおいて溶解した。フラスコを、アルミ箔で覆った。２０ｍＬのバイアルにおいて、２．０ｇのデキストラン（０．１３ｍｍｏｌｅ、Ｍｎ：１５，３４０ｇ／ｍｏｌｅ、Ｍｐ：２２，６３０ｇ／ｍｏｌｅ、ＰＤ：２．１１）を、１５ｍＬのＤＩ−Ｈ２Ｏに溶解し、この溶液を、前記丸底フラスコにゆっくりと加えた。バイアルを、１５ｍＬのＤＩ−Ｈ２Ｏですすぎ、すすいだ溶液もまた、丸底フラスコに加えた。透明な無色の溶液を、室温において、２４時間撹拌した。この時間の終わりに、水溶液を、２つのＳｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ ２Ｋ透析カセットに写し、水中で一晩、透析を実施した。この水溶液（約６０ｍＬ）を、次のステップに使用した。
ポリアールからポリアルコールの合成：１．１３４ｇの水酸化ホウ素ナトリウム（３０ｍｍｏｌｅ）を、１０ｍＬのＤＩ−Ｈ２Ｏに、１００ｍＬの一ッ口丸底フラスコにおいて溶解した。前ステップからの水溶液（ＢＤ−２９−８）を、その後、丸底フラスコにゆっくりと加えた。溶液を１８時間撹拌した。溶液のｐＨを、３Ｍ ＨＣｌを使用して６に調整し、溶液を、３つの１０Ｋ ＭＷＣＯ透析カセットを使用して、２日間透析した。水溶液を、５ｍＬに濃縮し、その後、２日間凍結乾燥し、１．５６ｇのポリアルコールを、収率９４％で得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ，ｐｐｍ，ＴＭＳ）：３．３５（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．４８（２Ｈ，−ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．５８−３．７０（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．６４（１Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、４．６２（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、４．７０（１Ｈ，−ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ，ｐｐｍ，ＴＭＳ）：６４．５６（−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、６５．１０（−ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、６８．９６（−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、７９．８８（−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、１０５．８６（−ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）。
ＧＦＣ：Ｍｎ：１１，１００ｇ／ｍｏｌｅ、Ｍｐ：１９，２７０ｇ／ｍｏｌｅ、ＰＤ：２．４１
Figure 0006517281
ポリアルコールプロパルギルブロミドの反応：８４０．０ｍｇのポリアルコール（５×１０−５ｍｏｌｅ、Ｍｎ：１１，１００ｇ／ｍｏｌｅ、Ｍｐ：１９，２７０、ＰＤ：２．４）を、１０ｍＬのジメチルホルムアミドに、２５ｍＬの丸底フラスコにおいて溶解した。５ｍＬのトルエンを、その後丸底フラスコに加えた。トルエンを、５０℃において４０ｍｂａｒでロータリーエバポレーターを使用してロータリーエバポレーションにより濃縮した。４０７．５ｍｇの炭酸セシウム（１．２５×１０−３ｍｏｌｅ）を、その後丸底フラスコに加えた。混合物を、３時間、アルゴン下で６０℃において撹拌した。２３４．０ｍｇの臭化プロパルギル溶液（トルエン中８０％溶液、１８７．５ｍｇの臭化プロパルギル、１．２５×１０−３ｍｏｌｅ）を、丸底フラスコに加えた。濁った溶液を、６０℃において３４時間アルゴン下で撹拌した。この時間の終わりに、黄色い濁った溶液を室温に冷却し、３０ｍＬのフリットを介してろ過し、ろ液を濃縮乾固させた。ポリマーを、１５ｍＬのＤＩ−Ｈ２Ｏに再溶解し、ジクロロメタンで２回（２×４５ｍＬ）洗浄した。ジクロロメタン相を、１５ｍＬのＤＩ−Ｈ２Ｏで洗浄した。水相を分離し、統合し、ロータリーエバポレーターで濃縮し、いずれの残留ジクロロメタンも除去した。水溶液を、その後、２Ｋ ＭＷＣＯ透析カセットを使用して一晩透析した。水を除去し、ポリマーを高真空下で乾燥させ、７３０．０ｍｇの最終生成物を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ，ｐｐｍ，ＴＭＳ）：３．３５（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．４８（２Ｈ，−ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．５８−３．７０（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．６４（１Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、４．１８（４Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）Ｏ−）、４．６２（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、４．７０（１Ｈ，−ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）。ＮＭＲデータから、「ｎ」の平均値は７８であり、「ｍ」の平均値は５である。
［実施例２８］酸化ポリデキストラン（２０Ｋ）と３−アジドプロピルロチゴチンとの結合
Figure 0006517281
３４２ミリグラム（３４２．０ｍｇ）の３−アジドプロピオニルロチゴチン．ＴＦＡ（６．５×１０−４ｍｏｌｅ）を、１００ｍＬの丸底フラスコに秤量し、８３５．０ｍｇの、アセチレンペンダントを有する酸化デキストラン（６．５×１０−５ｍｏｌｅ；平均「ｎ」値が８９、「ｍ」値が６）を、フラスコに加えた。８０ミリリットル（８０ｍＬ）のジメチルホルムアミドを、その後フラスコに加え、ポリマーを完全に溶解した。６４．５ｍｇの硫酸銅（２．６×１０−４ｍｏｌｅ）および１０３．０ｍｇのアスコルビン酸ナトリウム（５．２×１０−４ｍｏｌｅ）を、その後丸底フラスコに加えた。丸底フラスコを、ゴムのセプタムで密閉し、この溶液を、４０℃においてアルゴン下で一晩撹拌した。追加の硫酸銅（２５８．０ｍｇ、１．０４×１０−３ｍｏｌｅ）およびアスコルビン酸ナトリウム（４１２．０ｍｇ、２．０８×１０−３ｍｏｌｅ）をＲＢＦに加え、溶液を、一晩、４０℃において撹拌した。追加の硫酸銅（３２２．５ｍｇ、１．３×１０−３ｍｏｌｅ）およびアスコルビン酸ナトリウム（５１５．０、２．６×１０−３ｍｏｌｅ）をＲＢＦに加え、溶液を、一晩４０℃において撹拌した。この時間の終わりに、溶液を室温に冷却し、粗いフリットを介してろ過し、ロータリーエバポレーターを介して濃縮乾固させた。残留物を、６０ｍＬのＤＭＦに溶解し、ろ過し、１０ｍＬに濃縮し、ジエチルエーテル（２００ｍＬ）内に沈殿させた。溶媒をデカントし、ポリマーを、高真空下で乾燥させ、３６２．０ｍｇの最終生成物を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ，ｐｐｍ，ＴＭＳ）：０．８６（３Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）；１．４−３．６（合計１７Ｈ，ロチゴチンの脂肪族ＣＨおよびＣＨ２のピーク）；３．３６（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．４７（２Ｈ，−ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．５７−３．７０（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、３．６４（１Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ、４．６２（２Ｈ，−ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）、４．７０（１Ｈ，−ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）Ｏ−）；６．８０−７．２９（６Ｈ，１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン）の−ＣＨピークおよび２−チオフェンの−ＣＨピーク）；８．１４（１Ｈ，トリアゾールの−ＣＨピーク）。
［実施例２９］活性薬物分子（ロチゴチン、エトポシド、イリノテカン、チアガビン）のポリマーコンジュゲート型からのこれらの加水分解
ポリオキサゾリン、ポリエチレングリコール、変性デキストランおよびＰＥＧデンドリマーポリマーの骨格に結合した、さまざまなリンカーからの、ロチゴチン、エトポシド、イリノテカンおよびチアガビンの切断を、ラットの血漿において検査した。４ミリリットルのラット血漿を、試験管に配置し、その後、４００μＬの５％デキストロース溶液に溶解した、およそ１６ｍｇの各ポリマー薬物コンジュゲートを混ぜた。試験管を３７℃のウォーターバスに配置し、およそ４８から７２時インキュベートした。一定時間ごとに、１００μＬの血漿アリコートを取り、１．５ｍＬの遠心管に配置し、５μＬの希薄酸溶液（３Ｍ ＨＣｌ）で中和し、およそ５００μＬのアセトニトリルで処理し、血漿タンパク質を沈殿させ、放出された薬物を溶解した。この遠心管を、１４，０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。上清を除去し、水中０．１％ＴＦＡで希釈し、ろ過し、ＨＰＬＣバイアルに配置し、波長を各薬物のλｍａｘに合うように設定した可変ＵＶ検出器に取り付けたＡｇｉｌｅｎｔ １１００／１２００クロマトグラフィーシステムに固定したＺｏｒｂａｘ Ｃ８ ３００ＳＢ、５μ、４．６×１５０ｍｍカラムを使用する逆相クロマトグラフィーにより、アッセイした。移動相は、水中０．１％ＴＦＡ（Ａ）およびアセトニトリル中０．１％ＴＦＡ（Ｂ）であり、１ｍＬ／分の速度で溶出した。標準曲線を、公知の濃度の薬物を血漿中に混ぜ、抽出し、上記の遊離薬物をアッセイすることによって作成した。各アリコート中の薬物量を、上記の標準曲線から計算し、放出された薬物の濃度対時間のプロットを作製した。各ポリマー薬物コンジュゲートの半減期を計算し、表１から３に報告した。
Figure 0006517281
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表１に示した結果は、リンカーの長さが、薬剤、この場合はロチゴチンの、ポリオキサゾリンコンジュゲーからの放出速度に影響を与えることを実証している。結果は、アジドアルキル酸リンカーの長さまたはサイズが増大した場合、ロチゴチンのポリオキサゾリンコンジュゲートからの放出速度が低下することを示している。表２は、薬剤の性質もまた、ポリマーからの薬剤の放出速度に影響を与えることを示している。表３は、分子量およびペンダント基の数が、イリノテカンの場合、ポリオキサゾリンからの放出速度に有意に影響を与えないことを示している。総合すると、結果は、ポリオキサゾリンコンジュゲートから薬剤の放出は、継時的に所望の量の薬剤を放出するように調整可能である。
Figure 0006517281
３種の異なるタイプのリンカーを使用した２０Ｋポリオキサゾリンおよび１０Ｋポリエチレングリコールからのチアガビンの放出を、さらに測定した。試験したリンカーのタイプは、ポリオキサゾリンコンジュゲートに対して、アルキルリンカー、ポリエチレングリコールリンカーおよび芳香族アミドリンカーであり、ポリエチレングリコールコンジュゲートに対してアルキルリンカーである。表４は、薬物負荷％およびおよそこの放出半減期（日）を要約している。結果は、より大きい親水性ＰＥＧポリマーが、より速い薬物放出プロファイルを示し、表１に示した結果と一致していることを示している。
いずれの特定の理論にも縛られるものではないが、表１、２および４に例示される化合物の驚くべき緩慢な加水分解速度は、結合された薬物およびこの付随する放出可能なリンカーに水の少ない環境を提供する、ポリマーのフォールディングからもたらされる可能性が仮定される。対照的に、エチレンオキシド単位をリンカーとして含有するＰＯＺコンジュゲートの比較的早い加水分解は、エチレンオキシド単位のオリゴ（エチレンオキシド）リンカーが、水を、切断可能部分の近隣に持ち込むという仮定により説明可能である。各エチレンオキシド単位のポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＧとしても知られる。）が２から４個の水分子を伴うことは、独立した研究から公知である。言い換えれば、結合された薬物およびこの付随する放出可能なリンカーは、研究した他のコンジュゲートの場合のような水の少ない環境ではなく、水に富んだ環境にある。
別の説明は、エチレンオキシド単位の酸素原子の１つが、「隣接基関与」効果をもたらすように作用できることである。隣接基関与は、内部求核試薬として作用し、エステルなどの基の切断を加速する、隣接原子の能力を説明する周知の理論である。
［実施例３０］さまざまなポリマーコンジュゲートの粘度比較
各ポリマー薬物コンジュゲート試料の粘度を、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ ＬＶＤＶ−ＩＩ Ｃｏｎｅ ａｎｄ Ｐｌａｔｅ粘度計において、温度調節ジャケットプレートを取り付けて測定した。ポリマー試料（０．５ｍＬの水中１０、２０、３０および４０％ｗ／ｗ溶液）を、プレートの中心に配置し、これを機器の主駆動源に取り付けた。コーン（ＣＰＥ−４０）を、さまざまな速度（ｒｐｍ）で回転させ、粘度（ｍＰａｓ）を、各回、２５℃において記録した。下の表は、各被験試料に関して読み取った粘度の比較を示す。結果は、本開示のＰＯＺコンジュゲートが、狭孔径針を通した投与が容易に可能な、低粘度を有することを示す。
Figure 0006517281
［実施例３１］Ｈ−［（アセチル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０ＫおよびＨ−［（プロピオニル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの静脈内および皮下投与後の、ラットにおけるロチゴチンの薬物動態
本明細書に記載のＰＯＺコンジュゲートの薬物動態を研究するために、ｉｎ ｖｉｖｏ研究を、雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットで実施した。２７匹の雄のカニューレ挿入したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（３００から３５０ｇ）を、３匹の動物／群の９群に分けた。ＩからＩＩ群には、単回皮下（ＳＣ）用量（右脇腹）のＰＯＺアセチルロチゴチン（実施例６に記載）を、１．６および６．４ｍｇ／ｋｇの等価用量で与えた。ＩＩＩからＩＶ群には、単回皮下（ＳＣ）用量（右脇腹）のＰＯＺプロピルロチゴチン（実施例７に記載）を、１．６および６．４ｍｇ／ｋｇの等価用量で与えた。Ｖ群には、単回皮下（ＳＣ）用量（右脇腹）のロチゴチン塩酸塩を、０．５ｍｇ／ｋｇの等価用量で与えた。ＶＩからＶＩＩ群には、単回静脈内（ＩＶ）用量（側面尾静脈）のＰＯＺアセチルロチゴチン（実施例６に記載）を、０．５および２．０ｍｇ／ｋｇの等価用量で与えた。ＶＩＩＩからＩＸ群には、単回静脈内（ＩＶ）用量（側面尾静脈）のＰＯＺプロピルロチゴチン（実施例７に記載）を、０．５および２．０ｍｇ／ｋｇの等価用量で与えた。試験物質を、５％デキストロース注射液に溶解し、ろ過し、その後それぞれ注射した。段階的血液試料を、静脈内投薬された各動物からカニューレ挿入されたカテーテルを介して、注射後１２、２４、４８、９６および１６８時間の時間間隔で得た。皮下投薬された動物に対する時間間隔は、６、１２、２４、４８、９６および１６８時間であった。血液を、血漿を回収するために処理し、これを−７０℃において分析前に保存した。血漿試料を、アセトニトリルで抽出し、ｄ３−ロチゴチンを内部標準として使用して、抽出液中の分析物を、Ｃ−１８逆相カラムおよび０．９ｕｍシリカコアシェル（Ａｃｃｕｃｏｒｅ（商標）、ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、３０×２．１ｍｍＩＤおよび２．６ミクロン粒径）を使用するＬＣ／ＭＳ−ＭＳシステムにおけるクロマトグラフィー分析により分析した。移動相は、ギ酸アンモニウム１０ｍＭ ｐＨ３．０（溶媒Ａ）；および９０％アセトニトリル、１０％メタノール、および０．１％ギ酸（溶媒Ｂ）であり、０．６ｍＬ／分で溶離した。
静脈内および皮下注射後のロチゴチンの血漿濃度（ｎｇ／ｍＬ）を、図２および３に、それぞれ示す。これらの結果は、ロチゴチンのＰＯＺコンジュゲートが、静脈内または皮下のいずれに投薬されても、血液からのロチゴチンのクリアランス速度を、親分子単独と比較して低下させるであろうことを示唆している。ロチゴチン、ＰＯＺアセチルロチゴチンおよびＰＯＺプロピルロチゴチンに関する終末血漿半減期（ｔ１／２）は、それぞれ、２．８、１６および６０時間であった。しかし、ＰＯＺ−コンジュゲートのＰＯＺアセチルロチゴチンとＰＯＺプロピルロチゴチンとを、ＩＶとＳＣで比較した場合、ＰＫプロファイルに著しい差が存在する。ＩＶ送達されたＰＯＺ−コンジュゲートは、ＰＯＺアセチルロチゴチンおよびＰＯＺプロピルロチゴチンの間にほとんど差のない、２相パターンで全体に明確である。しかし、この２つをＳＣ投与後に比較した場合、著しい差がある。ＰＯＺアセチルロチゴチンは、ＳＣまたはＩＶのいずれで送達しても、基本的に同じＰＫプロファイルを有する。ＰＯＺプロピルロチゴチンは、ほぼ「ゼロ次」動態の、著しく長期にわたるＰＫプロファイルを有する。リンカーのサイズおよび長さは、薬剤、この場合ロチゴチンの放出において役割を果たし、ラット血漿中で１日目から７日目に測定したレベルは、プロピルリンカーの方が、アセチルリンカーより高かった。初めの１２時間のロチゴチンの初期血漿濃度は、ＰＯＺプロピルロチゴチンが、ＰＯＺアセチルロチゴチン化合物と比較して低い。１．６ｍｇ／ｋｇの用量でＳＣ投薬した場合、１２時間において、血漿ロチゴチンのＣｍａｘは、ＰＯＺプロピルロチゴチンの６ｎｇ／ｍＬ対ＰＯＺアセチルロチゴチンの４８ｎｇ／ｍＬであった。このことは、薬剤の制御された送達が、放出可能なリンカーの性質、ＰＯＺポリマーのサイズ、投与経路（例えば皮下）または前述の組み合わせに基づいて、所望の放出プロファイルで、初期破裂効果なしに薬剤を放出するように、「調整」可能であることを示唆している。
［実施例３２］Ｈ−［（α−メチル−アセチル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０ＫおよびＨ−［（プロピオニル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの皮下投与後の、サルにおけるロチゴチンの薬物動態
ロチゴチンのＰＯＺコンジュゲートの薬物動態を、正常な、未処置の雌マカクにおいて測定した。動物を、４つの処置群、各Ｎ＝３にランダムに割り当てた。動物に、単回皮下用量のＰＯＺアルファメチルアセチルロチゴチン（実施例８に記載）またはＰＯＺプロピルロチゴチン（実施例７に記載）のいずれかを、１．５ｍｇ／ｋｇまたは４．５ｍｇ／ｋｇ（ロチゴチン当量に基づき）のいずれかの用量で与えた。試験物質を、試験物質を、５％デキストロース注射液に溶解し、ろ過し、その後それぞれ注射した。段階的静脈血液試料を、１日目の実験薬剤投与前、その後１５分、３０分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、２４時間、４８時間、９６時間、１９２時間、２４０時間および３３６時間に各動物から得た。血液を、血漿を回収するために処理し、これを−７０℃において分析前に保存した。これらの血漿試料を処理し、実施例３１に記載のように、ＬＣ／ＭＳ−ＭＳシステムにおいてクロマトグラフィー分析によりアッセイした。
皮下注射後のロチゴチンの血漿濃度（ｎｇ／ｍＬ）を、図４に示す。これらの結果は、ロチゴチンのＰＯＺコンジュゲートが、血液からのロチゴチンのクリアランス速度を低下させるであろうことを示唆している。ＰＯＺアルファメチルアセチルロチゴチンおよびＰＯＺプロピオニルロチゴチンからのロチゴチンの平均終末血漿半減期（ｔ１／２）は、それぞれ９および６０時間であった。またしても、ＰＯＺプロピルロチゴチンは、ほぼ「ゼロ次」動態の、著しく長期にわたるＰＫプロファイルを有する。初めの１２時間のロチゴチンの初期血漿濃度は、ＰＯＺプロピルロチゴチンについて、ＰＯＺアルファメチルアセチルロチゴチン化合物と比較して低い。４から１９２時間まで、血漿ロチゴチンの平均Ｃｓｓ値は、１．５ｍｇ／ｋｇ用量のＰＯＺプロピルロチゴチンに関して１から６ｎｇ／ｍＬ用量の間であった。
［実施例３３］皮下投与後の６−ＯＨＤＡラットモデにおける、Ｈ−［（アセチル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０ＫおよびＨ−［（プロピオニル−ロチゴチン） １０ （ＥＯＺ） １９０ ］−ＣＯＯＨ２０Ｋの効果
本明細書に記載のＰＯＺコンジュゲートの効果を研究するために、ｉｎ ｖｉｖｏ研究を、雌のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットで実施した。雌のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（２７５から３５０ｇ）を研究に使用した。各動物に定位手術を施し、右黒質線条体経路の片側病変を、１２．５μｇの６−ヒドロキシドーパミン（６−ＯＨＤＡ）を、内側前脳束中の単一部位に注射することによって与えた。ラットを２週間にわたってモニターし、円筒試験によって、行動評価を行った（７日目）。明白な行動非対称性（＞８５％が同側前脚使用）を欠く動物は、研究から除外した。ラットを、６つの処置群（各Ｎ＝８）の１つにランダムに割り当てた。この群は以下のようであった：ビヒクル対照（Ａ群）；ロチゴチン塩酸塩０．５ｍｇ／ｋｇ（Ｂ群）；ロチゴチン塩酸塩３ｍｇ／ｋｇ（Ｃ群）；Ｈ−［（アセチル−ロチゴチン）１０（ＥＯＺ）１９０］−ＣＯＯＨ２０Ｋ（実施例６に記載）１．６ｍｇ／ｋｇ（Ｄ群）；Ｈ−［（プロピオニル−ロチゴチン）１０（ＥＯＺ）１９０］−ＣＯＯＨ２０Ｋ（実施例７に記載）１．６ｍｇ／ｋｇ（Ｅ群）；およびＨ−［（プロピオニル−ロチゴチン）１０（ＥＯＺ）１９０］−ＣＯＯＨ２０Ｋ（実施例７に記載）６．４ｍｇ／ｋｇ（Ｆ群）。ラットに、単回皮下用量（２ｍＬ／ｋｇ）のビヒクル（５％デキストロース）または５％デキストロースに溶解した試験化合物を与えた。
結果を、表６に提示した。すべての処置は、投薬１日目において陽性の回転行動（向反側転換）を示している。ＰＯＺプロピルロチゴチンだけが５日目に活性を示し、高用量である６．４ｍｇ／ｋｇでは、著しい連続性の向反側回転があった。この好ましい応答は、薬物動態研究（実施例３２）において観察された、５日目の高い、持続性の血中ロチゴチン薬物レベルによるものである。
各動物群（上記のＡからＦ）を、回転行動および前脚対称性に関して、１日目、２日目、５日目および９日目にラットを独立して評価した。回転試験において、動物を、自動ロトメーター装置（ＭｅｄＡｓｓｏｃｉａｔｅｓ、ＵＳＡ）に配置し、病変に対して向反側の回転の正味数を、各日６時間にわたって記録した。前脚対称性試験において、ラットを、上面のない透明なガラスの円筒（直径１５ｃｍ×高さ４５ｃｍ）中に配置した。個別の後脚立ちの間に個々の脚が円筒の側面に触れた回数を、各日１０分間の観察にわたって記録した。どの後脚立ちにおいても、壁に触れた最初の脚を１ポイントと採点する。両方の脚が、互いに０．４秒以内に接触した場合、この際はこれを「両脚」として採点する。この脚を使用する、壁に対するすべての続く探索行動は、体重を支えながら他の脚が壁に接触するまで、独立して採点する。両脚を互い違いに伴う交互足踏み運動は、両脚に１ポイント与える。対側接触の正味数を計算し、好ましい応答を考察する。
結果を表７に提示する。すべての処置は、投薬１日目において陽性の向同側前脚使用を示している。ＰＯＺプロピルロチゴチンだけが５日目に活性を示し、１．６および６．４ｍｇ／ｋｇの両方の用量において、著しい連続性の向同側前脚使用があった。この好ましい応答は、薬物動態研究（実施例３２）において観察された、５日目の高い、持続性の血中ロチゴチン薬物レベルによるものである。
下記の表６に回転試験の結果を要約する：
Figure 0006517281
下記の表７に、前脚の非対称試験の結果を要約する：
Figure 0006517281

Claims (60)

  1. ポリ（オキサゾリン）ポリマーと該ポリ（オキサゾリン）ポリマーに連結した薬剤とを含む、ポリマーコンジュゲートであって、
    該ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     を有し、式中、
    Ｒが、開始基であり、
    Ｌが、対象において切断可能な、エステル基を含み、持続性の制御可能な薬剤の送達を数日から数週間にわたって提供する切断可能部分を含有する放出可能なリンカーであり、
    Ａが薬剤であり、該薬剤は、ロチゴチン、ロピニロールまたはチアガビンであり、
    ＰＯＺが、ポリ（オキサゾリン）ポリマーであり、
    ｎが、１から１０００であり、
    ｂが、１から５０であり、ただしｂはｎ以下であり、ならびに
    Ｔが、末端基である、
    ポリマーコンジュゲート。
  2. ポリ（オキサゾリン）ポリマーが、３００Ｄａから２００，０００Ｄａの範囲の分子量を有する、請求項１に記載のポリマーコンジュゲート。
  3. ＰＯＺが、式
    Figure 0006517281
     を有し、式中、
    Ｒ１が、非反応基であり
    ａが、ランダムコポリマーを示すラン（ｒａｎ）またはブロックコポリマーを示すブロックであり、
    ｏが、１から５０であり、および
    ｍが、１から１０００である、
    請求項１または２に記載のポリマーコンジュゲート。
  4. Ｔが、−Ｚ−Ｂ−Ｑであり、
    式中、
    Ｚが、Ｓ、ＯまたはＮであり、
    Ｂが、任意の連結基であり、ならびに
    Ｑが、末端求核試薬の末端部分である、
    請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  5. Ｒが、水素、アルキルまたは置換アルキルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  6. 放出可能なリンカーが、少なくとも１つのカルボン酸エステル、炭酸エステル、カーバメート、ジスルフィド、アセタール、ヘミアセタール、ホスフェート、ホスホネートまたはアミド基を含有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  7. Ｌが、式
    Figure 0006517281
     を有し、式中、
    Ｒ３が、トリアゾール部分とポリマー鎖とを連結するリンカーであり、
    Ｒ４が、−Ｒ６−Ｒ７−Ｒ８−であり、
    Ｒ６が、置換もしくは非置換のアルキルまたは置換もしくは非置換のアラルキルであり、
    Ｒ７が、切断可能部分の少なくとも一部を含有する基であり、
    Ｒ８が、不在であるか、またはＯ、Ｓ、ＣＲｃもしくはＮＲｃであり、ならびに
    Ｒｃが、Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキルである、
    請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  8. Ｒ７が、−Ｒａ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ−、−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（Ｃ６Ｈ４）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ−、または−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒｂ−であり、
    ＲａおよびＲｂが、それぞれ独立して、不在であるか、または置換もしくは非置換のアルキルである、
    請求項１〜７のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  9. Ｒ７が−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒｂ−であり、Ｒａ、ＲｂおよびＲ８がそれぞれ不在であるか、
    Ｒ７が−Ｒａ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ−であり、ＲａおよびＲｂがそれぞれ不在であり、Ｒ８がＯであるか、または
    Ｒ７が−Ｒａ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ−であり、ＲａおよびＲｂがそれぞれ不在であり、Ｒ８がＮＨである、
    請求項１〜８のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  10. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項１〜９のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  11. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯ−ＮＨ−（Ｃ６Ｈ４）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｄ−Ｃ（Ｏ）−であり、
    ｄが１から１０である、
    請求項１〜９のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  12. Ａがロチゴチンである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  13. Ａがロピニロールである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  14. Ａがチアガビンである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  15. ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     を有する、請求項４に記載のポリマーコンジュゲート。
  16. ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     を有し、式中、
    ｐが１から１８である、
    請求項７に記載のポリマーコンジュゲート。
  17. ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     を有する、請求項４に記載のポリマーコンジュゲート。
  18. ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     を有し、式中、
    ｐが１から１８である、
    請求項７に記載のポリマーコンジュゲート。
  19. 患者における末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する疾患または病態を治療するための組成物であって、
    前記組成物が、ポリマーコンジュゲートを含み、
    前記ポリマーコンジュゲートが、ポリオキサゾリンポリマーとドーパミン不足の治療に有用な薬剤とを含み、
    該ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     を有し、式中、
    Ｒが、開始基であり、
    Ｌが、対象において切断可能な、エステル基を含み、持続性の制御可能な薬剤の送達を数日から数週間にわたって提供する切断可能部分を含有する放出可能なリンカーであり、
    Ａが薬剤であり、該薬剤はロチゴチンまたはロピニロールであり、
    ＰＯＺが、ポリ（オキサゾリン）ポリマーであり、
    ｎが、１から１０００であり、
    ｂが、１から５０であり、ただしｂはｎ以下であり、ならびに
    Ｔが、末端基である、
    組成物。
  20. 疾患または病態が、パーキンソン病である、請求項１９に記載の組成物。
  21. 疾患または病態が、レストレスレッグ症候群である、請求項１９に記載の組成物。
  22. ポリマーコンジュゲートが、請求項１２、１５および１６のいずれか一項に記載のコンジュゲートである、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の組成物。
  23. ポリマーコンジュゲートが、請求項１３に記載のコンジュゲートである、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の組成物。
  24. 患者において過剰なＧＡＢＡ再取り込みもしくはＧＡＢＡ再取り込みにより特徴付けられる疾患または病態を治療するための組成物であって、
    前記組成物が、ポリマーコンジュゲートを含み、
    前記ポリマーコンジュゲートが、ポリオキサゾリンポリマーとチアガビンとを含み、
    該ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     を有し、式中、
    Ｒが、開始基であり、
    Ｌが、対象において切断可能な、エステル基を含み、持続性の制御可能なチアガビンの送達を数日から数週間にわたって提供する切断可能部分を含有する放出可能なリンカーであり、
    Ａが、チアガビンであり、
    ＰＯＺが、ポリ（オキサゾリン）ポリマーであり、
    ｎが、１から１０００であり、
    ｂが、１から５０であり、ただしｂはｎ以下であり、ならびに
    Ｔが、末端基である、
    組成物。
  25. 疾患または病態が、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけまたはてんかんである、請求項２４に記載の組成物。
  26. ポリマーコンジュゲートが、請求項１４、１７および１８のいずれか一項に記載のコンジュゲートである、請求項２４または２５に記載の組成物。
  27. ポリマーコンジュゲートが、皮下投与により投与される、請求項１９〜２６のいずれか一項に記載の組成物。
  28. 式
    Figure 0006517281
     ［式中、
    Ｒが、開始基であり、
    Ｌが、式
    Figure 0006517281
     （式中、
    Ｒ３が、ポリ（オキサゾリン）ポリマー鎖と連結を形成し、および
    Ｒ４が、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−である。）
    を有し、
    Ａが薬剤であり、該薬剤は、ロチゴチン、ロピニロールまたはチアガビンであり、
    Ｒ１が、非反応基であり、
    ａが、ランダムコポリマーを示すラン（ｒａｎ）またはブロックコポリマーを示すブロックであり、
    ｏが、１から５０であり、
    ｍが、１から１０００であり、および
    Ｔが、末端基である。］
    を有する、ポリ（オキサゾリン）ポリマーコンジュゲートであって、
    Ｒ４の選択に依存した、ロチゴチン、ロピニロールまたはチアガビンの放出プロファイルを提供する、ポリマーコンジュゲート。
  29. ポリ（オキサゾリン）ポリマーが、３００Ｄａから２００，０００Ｄａの範囲の分子量を有する、請求項２８に記載のポリマーコンジュゲート。
  30. Ｔが、−Ｚ−Ｂ−Ｑであり、
    式中、
    Ｚが、Ｓ、ＯまたはＮであり、
    Ｂが、任意の連結基であり、ならびに
    Ｑが、末端求核試薬の末端部分である、
    請求項２８または２９に記載のポリマーコンジュゲート。
  31. Ｒが、水素、アルキルまたは置換アルキルである、請求項２８〜３０のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  32. Ｌが、式
    Figure 0006517281
     を有する、請求項２８〜３１のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  33. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項２８〜３２のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  34. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項２８〜３３のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  35. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項２８〜３３のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  36. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項２８〜３３のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  37. Ｒ１が、アルキルまたは置換アルキルである、請求項２８〜３６のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  38. Ｒ１が、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ３である、請求項２８〜３７のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  39. Ｔが、−ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈである、請求項２８〜３８のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  40. Ａがロチゴチンである、請求項２８〜３９のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  41. Ａがロピニロールである、請求項２８〜３９のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  42. Ａがチアガビンである、請求項２８〜３９のいずれか一項に記載のポリマーコンジュゲート。
  43. 患者における末梢神経系もしくは中枢神経系におけるドーパミン不足に関連する疾患または病態を治療するための組成物であって、
    前記組成物が、ポリマーコンジュゲートを含み、
    前記ポリマーコンジュゲートが、ポリオキサゾリンポリマーとドーパミン不足の治療に有用な薬剤とを含み、
    該ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     ［式中、
    Ｒが、開始基であり、
    Ｌが、式
    Figure 0006517281
     （式中、
    Ｒ３が、ポリ（オキサゾリン）ポリマー鎖と連結を形成し、および
    Ｒ４が、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−である。）
    を有し、
    Ａが薬剤であり、該薬剤は、ロチゴチンまたはロピニロールであり、
    Ｒ１が、非反応基であり、
    ａが、ランダムコポリマーを示すラン（ｒａｎ）またはブロックコポリマーを示すブロックであり、
    ｏが、１から５０であり、
    ｍが、１から１０００であり、および
    Ｔが、末端基である。］
    を有し、Ｒ４の選択に依存した、ロチゴチンまたはロピニロールの放出プロファイルを提供する、ポリマーコンジュゲートである、
    組成物。
  44. 疾患または病態が、パーキンソン病である、請求項４３に記載の組成物。
  45. 疾患または病態が、レストレスレッグ症候群である、請求項４３に記載の組成物。
  46. Ａがロチゴチンである、請求項４３〜４５のいずれか一項に記載の組成物。
  47. Ａがロピニロールである、請求項４３〜４５のいずれか一項に記載の組成物。
  48. 患者において過剰なＧＡＢＡ再取り込みもしくはＧＡＢＡ再取り込みにより特徴付けられる疾患または病態を治療するための組成物であって、
    前記組成物が、ポリマーコンジュゲートを含み、
    前記ポリマーコンジュゲートが、ポリオキサゾリンポリマーとチアガビンとを含み、
    該ポリマーコンジュゲートが、式
    Figure 0006517281
     ［式中、
    Ｒが、開始基であり、
    Ｌが、式
    Figure 0006517281
     （式中、
    Ｒ３が、ポリ（オキサゾリン）ポリマー鎖と連結を形成し、および
    Ｒ４が、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−である。）
    を有し、
    Ａが、チアガビンであり、
    Ｒ１が、非反応基であり、
    ａが、ランダムコポリマーを示すラン（ｒａｎ）またはブロックコポリマーを示すブロックであり、
    ｏが、１から５０であり、
    ｍが、１から１０００であり、および
    Ｔが、末端基である。］
    を有し、Ｒ４の選択に依存した、チアガビンの放出プロファイルを提供する、ポリマーコンジュゲートである、
    組成物。
  49. 疾患または病態が、不安障害、社会不安障害、パニック障害、神経障害性疼痛、慢性疼痛、筋振戦、筋痙攣、発作、ひきつけまたはてんかんである、請求項４８に記載の組成物。
  50. ポリ（オキサゾリン）ポリマーが、３００Ｄａから２００，０００Ｄａの範囲の分子量を有する、請求項４３〜４９のいずれか一項に記載の組成物。
  51. Ｔが、−Ｚ−Ｂ−Ｑであり、
    式中、
    Ｚが、Ｓ、ＯまたはＮであり、
    Ｂが、任意の連結基であり、ならびに
    Ｑが、末端求核試薬の末端部分である、
    請求項４３〜５０のいずれか一項に記載の組成物。
  52. Ｒが、水素、アルキルまたは置換アルキルである、請求項４３〜５１のいずれか一項に記載の組成物。
  53. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項４３〜５２のいずれか一項に記載の組成物。
  54. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項４３〜５３のいずれか一項に記載の組成物。
  55. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項４３〜５３のいずれか一項に記載の組成物。
  56. Ｒ３が、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−であり、
    Ｒ４が、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−である、
    請求項４３〜５３のいずれか一項に記載の組成物。
  57. Ｒ１が、アルキルまたは置換アルキルである、請求項４３〜５６のいずれか一項に記載の組成物。
  58. Ｒ１が、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ３である、請求項４３〜５７のいずれか一項に記載の組成物。
  59. Ｔが、−ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈである、請求項４３〜５８のいずれか一項に記載の組成物。
  60. ポリマーコンジュゲートが、皮下投与により投与される、請求項４３〜５９のいずれか一項に記載の組成物。
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