JP6387220B2 - フィラグリン発現促進剤およびそれを用いた化粧品、皮膚外用剤 - Google Patents
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Description
〔1〕フィラグリン蛋白の発現
ヒト三次元培養表皮LabCyte EPI−MODEL(株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング製)にアッセイ培地(株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング製)を添加して培養後、1%、2%または3%の濃度のdl−α−トコフェロールを添加し、培養した。dl−α−トコフェロール添加後の表皮モデルを3、6時間後に回収し、ホルマリン固定、パラフィン包埋後、4μmの組織切片を作製した。その組織切片を、抗ヒトfilaggrin mAb−IgGマウス抗体(一次抗体)(Abcam製)、ペルオキシダーゼ標識抗マウスIgG/HRP抗体(二次抗体)(Dako製)で処理し、フィラグリン蛋白の免疫染色を実施した。組織像は、高感度CCDカメラにて撮影し、フィラグリン蛋白発現は解析ソフトを用いて計測した。
ヒト三次元培養表皮LabCyte EPI−MODEL(株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング製)にアッセイ培地(株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング製)を添加して培養後、2%の濃度の酢酸dl−α−トコフェロールを添加し、培養した。酢酸dl−α−トコフェロール添加後の表皮モデルを3、6時間後に回収し、ホルマリン固定、パラフィン包埋後、4μmの組織切片を作製した。その組織切片を、抗ヒトfilaggrin mAb−IgGマウス抗体(一次抗体)(Abcam製)、ペルオキシダーゼ標識抗マウスIgG/HRP抗体(二次抗体)(Dako製)で処理し、フィラグリン蛋白の免疫染色を実施した。組織像は、高感度CCDカメラにて撮影し、フィラグリン蛋白発現は解析ソフトを用いて計測した。
Claims (1)
- 2〜3重量%のdl−α−トコフェロールおよび酢酸dl−α−トコフェロールから選ばれる少なくとも1種を有効成分として含有するフィラグリン発現促進剤。
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