JP6385334B2 - 糖類の化粧的および医薬的使用 - Google Patents

Description

序論
皮膚色素沈着の障害は、たとえその皮膚色素沈着の障害が他の身体的症状の非存在下で起こった場合でも、それらを発現している人々にとって心理的および社会的の両方でかなりの影響を有する。

白斑は斑点状の皮膚の色の喪失を引き起こす慢性的な予測不能の疾患である。色素脱失したパッチの外観は、特に浅黒い皮膚または日焼けした皮膚において体裁が悪い可能性がある。白斑は心理的および社会的の両方でかなりの影響を有し得る。さらに、皮膚の色素脱失したパッチは、世界の一部の地域でまだ流行し恐れられている疾患であるハンセン病の病変と間違えられる可能性があり、これは冒された人が社会的に孤立し、汚名を着せられる可能性があることを意味する。

炎症は白斑の特徴であり、炎症誘発性サイトカインの上昇したレベルがこの状態と関係している。皮膚の炎症誘発性サイトカインの上昇したレベルは、皮膚上に現れる赤色の痒いパッチが含まれる皮膚炎症をもたらす。白斑において、その皮膚の赤色の痒いパッチが色素産生細胞の喪失の前に起こり得る。

“褐色斑”または“妊娠顔貌”としても知られている黒皮症は、皮膚のより黒ずんだパッチが頬、額、鼻および上唇上に徐々に発現する障害である。この障害は男性よりも女性においてより一般的であり、妊娠およびホルモンを含有する薬物投与と関係している。黒皮症は通常数年間持続する。妊娠関連黒皮症は出産後数ヶ月間持続する可能性があり、ホルモン処置に関連する黒皮症は経口避妊用ホルモンを止めた後長く持続する可能性がある。黒皮症は慢性疾患であり、再発が一般的である。結果として、黒皮症は心理的に苦悩を与え得る。

皮膚色素沈着の他の障害は、ホルモン変化、例えば妊娠および経口避妊薬の結果として生じ得る。
炎症後色素沈着過剰（既に色素沈着した皮膚においてより悪い可能性がある）は、炎症性皮膚疾患、例えばアトピー性湿疹、接触皮膚炎、乾癬またはざ瘡（acne）の結果として生じ得る。

色素沈着過剰は皮膚への外傷の後にも生じ得る。
皮膚色素沈着の障害を患う人にとって、これらの障害を処置および管理するための安全かつ有効な製品および療法は極めて有益であろう。より一様な皮膚の色調をもたらす製品および療法は、そのような障害を有する人々の生活の質を大きく高めるであろう。

加えて、心理的または病理学的動機がなくても、より色素沈着していない皮膚を必要とする人にとって美容的な理由が存在する。皮膚の色調／色の一様化または皮膚色素沈着の局所的な低減が、加齢による染み、母斑、日光による損傷およびそばかすの外観を低減するために、または皮膚色素沈着の障害の管理を助けるために必要とされ得る。社会的圧力は、一般的な皮膚のホワイトニングまたは皮膚色素沈着の低減に対する需要をもたらし得る。加えて、一部の浅黒い皮膚の人はより薄い皮膚の色を好み、これは特にアジア文化においてそれが美または富裕の特別なサインとみなされているためである。皮膚のホワイトニング、皮膚色素沈着の低減または皮膚の色調の一様化のための製品および療法が必要とされている。

今日まで、皮膚色素沈着の障害に関する処置はしばしば不満足なものであった。
皮膚色素沈着の障害に関する従来の処置には、皮膚漂白組成物（化学的薬剤、例えばヒドロキノンが含まれる）、ざ瘡クリーム（化学的薬剤、例えばアゼライン酸が含まれる）、局所用レチノイド類（例えばトレチノイン（tretinion））および酸性溶液を用いて皮膚の外層を除去するフェイシャルピール（facial peels）（例えばグリコール酸ピール）が含まれる。一部の処置は、３重組み合わせクリーム（ヒドロキノン、トレチノインおよびステロイド）のような組み合わせアプローチを組み込んでいる。１つの例は、フルオシノロンアセトニド０．０１％（合成フッ素化コルチコステロイド）、ヒドロキノン４％（療法的には色素脱失剤に分類される）およびトレチノイン０．５％（レチノイド）を含有するＴｒｉ−Ｌｕｍａ（商標）クリームである。

既存の色素脱失処置におけるこれらの苛酷な（ｈａｒｓｈ）化学物質は、負の副作用、例えば皮膚に対する刺激、皮膚の発赤、皮膚剥脱、ひりひりする痛み、灼熱感、皮膚の乾燥、腫脹および掻痒症を引き起こし得る。そのような化学物質は発癌性および催奇性であることも示唆されてきた。

従って、皮膚色素沈着を低減する、および／または皮膚の色調を一様にすることができ、皮膚色素沈着の障害の処置および管理において用いることができる、苛酷な化学物質を必要とせず安全かつ有効である化粧および医薬組成物および療法に関する必要性が存在する。

本発明者らは、安全であり十分に許容される化合物を有効薬剤として含む、皮膚色素沈着を低減することができる化粧用および医薬組成物および療法を開発してきた。
本発明の第１観点は、化粧用組成物の皮膚への局所適用を含む、皮膚色素沈着を低減する、または皮膚の色調を一様にする美容方法を提供し、その化粧用組成物は非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）、および化粧的に許容できるキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤を含む。

本発明の第２観点は、皮膚色素沈着の障害を処置または管理する方法における使用のための非消化性オリゴ糖を提供する。
本発明の第３観点は、皮膚色素沈着の障害の処置または管理のための医薬品の製造における非消化性オリゴ糖の使用に関する。

本発明の第４観点は皮膚色素沈着の障害を処置または管理する方法を提供し、その方法は療法上有効量の非消化性オリゴ糖および医薬的に許容できるキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤を含む組成物の色素沈着の低減を必要とする皮膚への局所適用を含む。

本発明の第５観点は、唯一の皮膚ホワイトニング有効薬剤としての１種類の（またはより多くの）ＮＤＯ（単数または複数）および１種類以上のキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤を含む皮膚ホワイトニング組成物を提供する。

さらなる観点における本発明の方法および組成物は、サンスクリーン剤も含む。
本発明の別の観点は、皮膚における炎症誘発性サイトカインの発現を低減する方法を提供し、その方法は非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体の局所適用を含む。

本発明のさらなる観点は、非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体および医薬的に許容できるキャリヤー、希釈剤または賦形剤を含む組成物の皮膚への局所適用を含む、皮膚の炎症を処置する方法を提供する。

本発明のさらに別の観点は、皮膚の炎症と関係する自己免疫の病気を処置または予防する方法における使用のための非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体を提供する。

図１は、非消化性オリゴ糖メリビオースの構造を示す。 図２ａは、マッソン・フォンタナ免疫化学染色手順を用いてメラニンに関して染色してあるｅｘ ｖｉｖｏのヒトの皮膚の切片を示す。パネル１は、ＮＤＯで処理しなかった対照の皮膚試料である。パネル２は、１．５％メリビオースと共に培養した試験皮膚試料である。パネル３は、３．０％メリビオースと共に培養した試験皮膚試料である。 図２ｂは、２種類の濃度の非消化性オリゴ糖メリビオースで処理した皮膚および対照としての未処理の皮膚におけるメラニン染色の平均密度を示す。 図３は、２種類の濃度の非消化性オリゴ糖Ｐ９５（オリゴフルクトースの９５％混合物）および２種類の濃度の非消化性オリゴ糖メリビオースで処理した皮膚ならびに対照としての未処理の皮膚におけるメラニン染色の平均密度を示す。 図４ａは、メリビオースがＨａＣａＴケラチノサイトによるインターロイキン−８（Ｉｌ−８）炎症誘発性サイトカインのベースライン発現を低減することができることを示す。 図４ｂは、インターロイキン−１βによるケラチノサイトの刺激に反応したＩＬ−８の産生も低減されたことを示す。

本発明は、皮膚色素沈着を低減する、ならびに皮膚色素沈着の障害を処置および管理するための、安全であり十分に許容される組成物ならびに美容方法および療法的方法ならびに療法を提供する。

本発明において、皮膚色素沈着を低減することは、皮膚色素沈着過剰を低減すること、および／または皮膚の色素脱失として、および／または皮膚の薄色化（ｌｉｇｈｔｅｎｉｎｇ）および／または皮膚のホワイトニングおよび／または加齢の徴候の予防および／もしくは遅延および／または加齢した皮膚の皮膚外観の向上としても言及され得る。本発明の組成物、方法および療法は、皮膚におけるメラニン形成の阻害にも関わっていてよい。

本発明は、皮膚色素沈着の障害を管理および処置する、ならびに皮膚の色調を一様にするための医薬および化粧用組成物および方法を提供する。
皮膚色素沈着の障害および皮膚の色調を一様にする必要性には、以下のものが含まれる：
−白斑、
−褐色斑または妊娠顔貌としても知られている黒皮症、
−妊娠または経口避妊薬のようなホルモン変化に起因する色素沈着過剰、
−炎症性皮膚疾患、例えばアトピー性湿疹、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、乾癬またはざ瘡の結果として生じ得る炎症後色素沈着過剰、
−皮膚への外傷後の色素沈着過剰、
−色素沈着過剰の染み、
−加齢による染み
−母斑
−肝斑
−そばかす
−低減した皮膚の色に関する、または白化した、もしくは薄色化した皮膚に関する願望
−皮膚のブライトニング（ｂｒｉｇｈｔｅｎｉｎｇ）および／またはより若々しい顔貌に関する願望。

一部の任意の態様において、管理または処置される障害は炎症後の状態ではない。そのような態様において、その医薬または化粧用組成物は炎症反応を管理、処置または制御するためには用いられず、場合により管理または処置されている対象（および／またはその対象上の皮膚の領域）は炎症反応を示していなくてよい。

非消化性糖類（ＮＤＳ）とも呼ばれる非消化性オリゴ糖類（ＮＤＯ）は、食事の不活性な食物繊維構成要素である。それらは植物、例えばニンニク、タマネギ、アスパラガス、アーティチョークおよびチコリーの食用部分中にある。ＮＤＯはあらゆる内在性の消化プロセスに抵抗性である炭水化物と呼ぶことができる。より具体的には、非消化性オリゴ糖は、ヒトの小腸中での加水分解に耐え、未変化で通過して結腸に入る炭水化物である。ここで、細菌の酵素による分解は水および単鎖脂肪酸を生成することができ、それはプラスの健康への利益を有すると信じられている。加えて、一部の非消化性オリゴ糖は活発にプレバイオティック（ｐｒｅｂｉｏｔｉｃ）であり、すなわちそれらはいわゆる“善玉菌”、例えば乳酸菌およびビフィズス菌の増殖を刺激する。

非消化性オリゴ糖は、食品産業で、対象の健康に有益であると信じられている消化系中の細菌の増殖または活動を刺激するためのプレバイオティック配合物において広く用いられている。しかし、“善玉菌”の増殖への作用以外では、非消化性オリゴ糖は腸に関して不活性な分子であると考えられている。

２００１年１月１０日に提出されたアメリカ穀物化学者協会の取締役会に対する食物繊維定義委員会の報告（A Report of the Dietary Fiber Definition Committee to the Board of Directors of the American Association Of Cereal Chemists）は、以下の定義を提供した。“食物繊維は、ヒトの小腸中での消化および吸収に抵抗性であり、大腸中で完全または部分的に発酵する植物の食用部分または類似の炭水化物である。”食物繊維には、多糖、オリゴ糖、リグニンおよび関係する植物物質が含まれる。食物繊維は、便通、および／または血中コレステロールの減弱、および／または血糖の減弱が含まれる有益な生理的作用を促進する。

従って、本発明において有用なＮＤＯは、ヒトの小腸中での消化および吸収に抵抗性である炭水化物と記載することができる。
ＮＤＯは天然源からの直接抽出により得ることができ、または多糖類を加水分解する化学的プロセスにより、もしくは二糖類からの酵素的合成および化学合成により生成することができる。

公認分析化学者協会の公式の総食物繊維の分析法：ＡＯＡＣ公式法９８５．２９（AOAC 1990 Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, Vol II, 第１５版 Sec 985.29. 協会：バージニア州アーリントン）（その方法を本明細書に援用する）は、ある糖類が非消化性であり、従って食物繊維構成要素の一部であるかどうかを試験するための方法を提供する。この方法はＡＡＣＣ法３２−０５としても知られている可能性があり、その方法も本明細書に援用する。１９８５年以来、ＡＯＡＣ法９８５．２９は食物中の総食物繊維の決定のための標準的な方法として世界的に採用されてきた。

従って、本発明において有用なＮＤＯは、ＡＯＡＣ法９８５．２９により食物繊維として分類される炭水化物と記載することができる。
本発明において特に有用なＮＤＯは以下のものである：
ａ）α−結合型ＮＤＯ、例えばメリビオース、ラフィノースおよびスタキオース、
ｂ）β−結合型ＮＤＯ、例えばラクツロースおよびガラクト−オリゴ糖（ＧＯＳ）、ならびに
ｃ）他のタイプのＮＤＯ、例えばフルクト−オリゴ糖（ＦＯＳ）およびイヌリン。

一部の態様において、好ましいＮＤＯは二糖類、三糖類または四糖類である。
メリビオースはガラクトースおよびグルコースのプレバイオティックな二糖（Ｄ−Ｇａｌ−α（１→６）−Ｄ−Ｇｌｃ、図１参照）であり、それは三糖ラフィノースのインベルターゼに媒介される加水分解により生成され得る。

ラフィノースはガラクトース、グルコースおよびフルクトースからなる三糖（Ｇａｌα−（１→６）−Ｇｌｃα−（１→２）−βＦｒｕ）であり、野菜、例えばキャベツ、マメ類、芽キャベツ、および一部の全穀粒中にある。

スタキオースはガラクトース、ガラクトース、グルコースおよびフルクトースからなる四糖（Ｇａｌα−（１→６）−Ｇａｌα（１→６）−Ｇｌｃα（１→２）−βＦｒｕ）である。

ラフィノースおよびスタキオースは共通のα１−６結合型ガラクトシル残基を共有する２〜４の重合度（ＤＰ）を有するオリゴ糖類のセットの一部を形成している。
ラクツロースはガラクトースおよびフルクトースからなる二糖（Ｇａｌβ−（１→４）−Ｆｒｕ）であり、ラクトースの異性化により生成され得る。

オリゴガラクトシルラクトース、オリゴガラクトース、オリゴラクトースまたはトランスガラクトオリゴ糖類（ＴＯＳ）としても知られているガラクト−オリゴ糖類（ＧＯＳ）は、２〜８、またはより通常には２〜５の重合度（ＤＰ）を有するβ−１→３，４および６結合型オリゴ糖類の混合物である。ＧＯＳはラクトースの酵素的変換により生成され得る。

時々オリゴフルクトースまたはオリゴフルクタンとも呼ばれるフルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）はオリゴ糖フルクタンであり、それはフルクトースからなり、代替甘味料として用いることができる。ＦＯＳは果実および野菜、例えばバナナ類、タマネギ類、チコリーの根、ニンニク、アスパラガス、オオムギ、コムギおよびニラ類から抽出することができる。２つの異なるクラスのＦＯＳの混合物を、イヌリンの分解またはトランスフルクトシル化（ｔｒａｎｓｆｒｕｃｔｏｓｙｌａｔｉｏｎ）プロセスに基づいて商業的に製造することができる。この開示において用いられる際、Ｐ９５はオリゴフルクトース、一般にβ−結合型オリゴフルクトースの９５％混合物である。Ｐ９５は本発明の方法において用いることができる。加えて、Ｐ９０、Ｐ９１、Ｐ９２、Ｐ９３、Ｐ９４、Ｐ９６、Ｐ９７、Ｐ９８、Ｐ９９およびＰ１００（それはそれぞれオリゴフルクトース、一般にβ−結合型オリゴフルクトースの９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９６％、９７％、９８％、９９％および１００％混合物である）のいずれも本発明において用いることができる。

イヌリン類は主にフルクトース単位からなるポリマーであり、典型的には末端グルコースを有する。イヌリン類中のフルクトース単位はβ（２→１）グリコシド結合により連結されていてよい。一般に、植物のイヌリン類は５〜数千個のフルクトース単位を含有する。ＦＯＳは大きさが２から６残基までの範囲のイヌリン加水分解産物の混合物であることができる。

本発明の一部の任意の態様において、ＮＤＯはシアリル修飾されたＮＤＯではない。例えば、そのＮＤＯはシアル酸でもシアル酸の配糖体でもない。例えば、一部の態様において、そのＮＤＯはシアリルメリビオースでもシアリルラフィノースでもシアリルスタキオースでもシアリルラクツロースでもない。特定の態様において、そのＮＤＯは３’−シアリルメリビオースでも３’−シアリルラフィノースでも３’−シアリルスタキオースでも３’−シアリルラクツロースでもない。

特定の態様において、用いられるＮＤＯは可溶性である。本発明において有用な好ましいＮＤＯは、メリビオースおよびオリゴフルクトースまたはＰ９５である。
ＮＤＯの塩類、エステル類および誘導体も本発明において有用である。好ましい誘導体の例には、ジフルクトース無水物ＩＩＩおよびジフルクトース無水物ＩＶが含まれる。

ＮＤＯとして、メリビオースは不活性であることが予想された。しかし、本発明者らは、不活性であるどころか、メリビオースは腸細胞の機能を変化させることを実証した。本発明者らはメリビオースがケラチノサイトの生物学にも影響を及ぼし得るかどうか調べる気になり、注目すべきことにメリビオースはケラチノサイトの生物学に影響を及ぼし、皮膚の色素脱失をもたらすことを見出した。さらなる研究は、他のＮＤＯ、例えばオリゴフルクトースは類似の作用を有し、皮膚の色素脱失をもたらすことを確証した。

ＮＤＯは天然の食物の一部であるため、それらは皮膚への局所適用に関して安全であり、それらは他の色素脱失剤と関係する負の副作用を有しない。
一部の観点において、本発明は、本発明に従うＮＤＯの投与または適用を含む美容的処置に関する。本明細書で用いられる際の“美容的”は、非療法的である。そのような方法は療法によるヒトまたは動物の体の処置を含まない。美容的処置は、皮膚色素沈着を低減するため、および／または皮膚の外観および／または手触りを向上させるために用いることができる。

本発明は、美容的処置の方法におけるＮＤＯの使用、およびＮＤＯを用いた美容的処置の方法も意図している。例えば、皮膚の外観を向上させる、および／または色素沈着した皮膚の領域の外観を向上させる方法において。本明細書において用いられる際、用語“美容方法”は、ＥＰＣ第５３条（ｃ）に従う外科手術もしくは療法によるヒトもしくは動物の体の処置のための方法またはヒトもしくは動物の体に対して実行される診断法を指していない。

本発明は、ＮＤＯを含む化粧用組成物も提供する。その組成物は、皮膚色素沈着を低減するためおよび／または皮膚の外観を向上させるために用いることができる。化粧用組成物は、本明細書で記載されるように、医薬組成物と同様に配合することができる。

処置すべき対象はあらゆる動物またはヒトであってよい。その対象は非ヒト哺乳類であってよいが、より好ましくはヒトである。その対象は雄または雌であってよい。一部の態様において、その対象はその美容的処置を適用すべき部位における処置を必要としない。

本発明に従う美容方法は、好ましくは“化粧的に有効な量”の投与を含む。これは、化合物、成分、物質、組成物、剤形等の美容上の利益を誘導するために有効な量での投与に関係する。これは関連する専門家の適切な判断の範囲内である。当業者には、その有効化合物、およびその有効化合物を含む組成物の適切な投与量は対象ごとに異なり得ることは理解されるであろう。

この開示において、ＮＤＯの、および本発明の組成物のあらゆる他の構成要素の濃度は％ｗ／ｖ（百分率重量／体積）で表されてよく、ここで１００ｍｌの溶液中に１ｇのＮＤＯまたは他の構成要素を含む溶液は１％または１％ｗ／ｖと呼ぶことができる。

本発明の組成物はその組成物の重量により少なくとも０．００１５％の量の、またはその組成物の重量により少なくとも０．００５０％、もしくは少なくとも０．０１０％、もしくは少なくとも０．０５０％、もしくは少なくとも０．１０％、もしくは少なくとも０．５０％の量の、そして場合により少なくとも１．０％の濃度でＮＤＯを含んでいてよく、そして本発明の方法はその組成物の重量により少なくとも０．００１５％の量の、またはその組成物の重量により少なくとも０．００５０％、もしくは少なくとも０．０１０％、もしくは少なくとも０．０５０％、もしくは少なくとも０．１０％、もしくは少なくとも０．５０％の量の、そして場合により少なくとも１．０％の濃度でＮＤＯを用いてよい。

本発明の組成物はその組成物の重量により１０％までの量の、または９％まで、８％まで、７％まで、６％まで、そして場合により５％まで、または４％まで、または３％までの量のＮＤＯを含んでいてよく、そして本発明の方法はその組成物の重量により１０％までの量の、または９％まで、８％まで、７％まで、６％まで、そして場合により５％まで、または４％まで、または３％までの量のＮＤＯを用いてよい。

本発明の組成物中のＮＤＯに関する量の予想される範囲は、その組成物の重量により０．００１５％〜５％である。
この開示において、可溶性のＮＤＯ、例えばメリビオースの、および本発明の組成物のあらゆる他の構成要素の濃度は、ミリモル濃度の量で表されてよい。本発明の組成物はＮＤＯを少なくとも０．０５ｍＭの濃度で、または少なくとも０．１ｍＭ、もしくは少なくとも０．５ｍＭ、もしくは少なくとも１ｍＭ、もしくは少なくとも５ｍＭ、もしくは少なくとも１０ｍＭ、もしくは少なくとも２０ｍＭの濃度で、そして場合により少なくとも３０ｍＭの濃度で含むことができ、そして本発明の方法はＮＤＯを少なくとも０．０５ｍＭの濃度で、または少なくとも０．１ｍＭ、もしくは少なくとも０．５ｍＭ、もしくは少なくとも１ｍＭ、もしくは少なくとも５ｍＭ、もしくは少なくとも１０ｍＭ、もしくは少なくとも２０ｍＭの濃度で、そして場合により少なくとも３０ｍＭの濃度で用いることができる。

本発明の組成物はＮＤＯを３２０ｍＭまでの濃度で、または３００ｍＭまで、２５０ｍＭまで、２２５ｍＭまで、もしくは２００ｍＭまでの濃度で、そして場合により１６０ｍＭの濃度まで含み、そして本発明の方法はＮＤＯを３２０ｍＭまでの濃度で、または３００ｍＭまで、２５０ｍＭまで、２２５ｍＭまで、もしくは２００ｍＭまでの濃度で、そして場合により１６０ｍＭの濃度まで用いることができる。

本発明の組成物中のＮＤＯに関する濃度の予想される範囲は、０．０５ｍＭ〜１６０ｍＭである。
本発明において用いられるＮＤＯの好ましい濃度の例は、１．５％または５０ｍＭおよび０．７５％または２５ｍＭである。

本発明の組成物は１タイプのＮＤＯ、または１より多くのタイプのＮＤＯ、例えば少なくとも２種類のＮＤＯ、もしくは少なくとも３種類のＮＤＯ、またはＮＤＯの混合物もしくは組み合わせを含むことができ、本発明の方法は１タイプのＮＤＯ、または１より多くのタイプのＮＤＯ、例えば少なくとも２種類のＮＤＯ、もしくは少なくとも３種類のＮＤＯ、またはＮＤＯの混合物もしくは組み合わせを用いることができる。

本発明において有用な医薬または化粧用組成物は皮膚への局所投与のためのものであってよく、１種類以上の医薬的または化粧的に許容できるキャリヤーと共に、クリーム、エマルジョン、ローション、ゲル、ヒドロゲル、散剤、軟膏、泡状物質、ペースト、ソーク（soak）、スティック、スプレー、エアロゾル、バスオイル、液剤等として配合することができ、または皮膚用パッチ中に含浸させることができ、または包帯もしくは衣服中に含浸させることができる。本発明の局所用組成物において、ＮＤＯは適切な薬剤、例えば湿潤剤、皮膚軟化薬、ゲル化および増粘剤、保存剤、浸透増進剤および場合により芳香ならびに他のキャリヤー、ビヒクルおよび賦形剤と共に配合されてよい。局所用皮膚組成物の配合に関する情報は、例えばMark Gibsonにより編集されたPharmaceutical Preformulation and Formulation: A Practical Guide from Candidate Drug Selection to Commercial Dosage Formにおいて当業者に既知であり、それを本明細書に援用する。

本発明において有用な組成物には、さらに皮膚科学的に有効な薬剤、例えばさらなるメラニン発現の可能性の低減および既存の皮膚色素沈着の低減の両方を行うサンスクリーン（sun screen）またはサンブロック（sun block）を製造するためのサンスクリーンまたはサンブロッキング剤が含まれてよい。

本発明の組成物中で用いることができるサンスクリーン剤には、紫外（ＵＶ）線を吸収する有機化学化合物、紫外線を反射、散乱および吸収する無機性微粒子（例えば二酸化チタンおよび酸化亜鉛）、ならびに有機化学化合物のように主に光を吸収するが多数の発色団を含有しており、それが無機性微粒子のように光の一部を反射および散乱して、配合物中で有機化学化合物とは異なる方式で振る舞うことができる有機性微粒子（例えば、Bisoctrizoleとしても知られているTinosorb M（商標）、広いスペクトルのＵＶ吸収剤であり、ＵＶＢもＵＶＡも吸収し、ＵＶの反射および散乱もする）が含まれる。当業者はさらなるサンスクリーン剤を知っているであろう。加えて、当業者は、異なる管轄権において使用に関して認可されたサンスクリーン剤の最大濃度を知っているであろう。

本発明において有用な組成物には、さらに皮膚科学的に有効な薬剤、例えば皮膚の加湿および皮膚色素沈着の低減の両方を行うスキンケア製品を製造するための加湿構成要素が含まれていてよい。

実施例１−メリビオースは培養したヒトの ｅｘ ｖｉｖｏの皮膚を色素脱失させる
完全な厚さのｅｘ ｖｉｖｏのヒトの皮膚の試料を、選択的形成手術手順から得た。（このプロジェクトに関する倫理的承認をノースウエスト研究倫理委員会から得た（番号０９／Ｈ１０１０／１０を有する）。患者はそのプロジェクトの全ての詳細を説明する情報パックを与えられ、彼らが彼らの皮膚試料を提供することを希望するかどうか決定するために最低２４時間を有していた。全ての皮膚試料は選択的な化粧的手順から得られた。）その皮膚試料を器官培養において６日間維持した。ＮＤＯメリビオースの２種類の濃度、１．５および３．０％（ｗ／ｖ）を、その培養された皮膚試料の周囲の培地に１日目において、およびその後その培地を交換するたびごとに添加することにより、皮膚色素沈着を低減するそれらの能力に関して試験した。対照として、一部の皮膚試料をメリビオースの存在を除いて同一の条件下で培養した。

６日目に、その皮膚試料を凍結包埋媒体中に浸し、５μｍの切片に切り、マッソン・フォンタナアッセイを用いて染色した。マッソン・フォンタナアッセイの原理は、メラニン顆粒はアンモニア性硝酸銀溶液から銀を還元して見ることができる金属状態にすることである。マッソン・フォンタナアッセイに関するプロトコルについての情報は、関連する実験室用の手引書、例えばLille RD, 1965, Histopathologic Technique and Practical Histochemistry, 第３版 1965, the Blakiston Division, McGraw Hill Book Company, p240において見付けることができ、それを本明細書に援用する。

皮膚の凍結切片をエタノール／酢酸で固定した後、スライドを０．５％アンモニア性硝酸銀溶液中でマイクロ波を用いて加熱した。次いで切片を１％塩化金中で調色し（ｔｏｎｅｄ）、５％チオ硫酸ナトリウム中で固定し、ヘマトキシリンで対比染色した後、ＤＰＥＸを用いてマウントした。次いでメラニン染色を光学顕微鏡を用いて可視化することができる。

切片の分析は、図２ａにおいて示されるように、メリビオース処理した試料における未処理の対照試料と比較したメラニンにおける有意な低減を示した。図２ｂは、ＮＤＯの非存在下で培養した、および２５ｍＭまたは５０ｍＭメリビオースと共に培養した皮膚試料に関するメラニン染色の平均密度を示す。この画像分析は、処理した皮膚対対照におけるおおよそ１０％のメラニン染色における低減を実証している。

実施例２−メリビオースおよびＰ９５は培養したヒトのｅｘ ｖｉｖｏの皮膚を色素脱失させる
完全な厚さのｅｘ ｖｉｖｏのヒトの皮膚の試料を実施例１において記載したように得て、器官培養において６日間維持した。ＮＤＯメリビオースの２種類の濃度（２５ｍＭおよび５０ｍＭ）、およびＮＤＯ Ｐ９５（フルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）としても知られているオリゴフルクトースの９５％混合物）の２種類の濃度（２５ｍＭおよび５０ｍＭ）を、その培養された皮膚試料の周囲の培地に１日目において、およびその後その培地を交換するたびごとに添加することにより、皮膚色素沈着を低減するそれらの能力に関して試験した。対照として、一部の皮膚試料をＮＤＯの非存在を除いて同一の条件下で培養した。

６日目に、その皮膚試料を凍結包埋媒体中に浸し、５μｍの切片に切り、実施例１において述べたようにマッソン・フォンタナアッセイを用いて染色した。
図３は、ＮＤＯの非存在下で培養した、２５ｍＭまたは５０ｍＭのＰ９５と共に培養した、および２５ｍＭまたは５０ｍＭのメリビオースと共に培養した皮膚試料に関するメラニン染色の平均密度を示す。この画像分析は、図３において示されるように、対照に対するｐ９５またはメリビオースのどちらかで処理した処理した皮膚におけるメラニン染色の低減を実証している。

実施例１および２の結果は、ＮＤＯ、例えばメリビオースおよびオリゴフルクトースの皮膚への適用は、皮膚色素沈着を低減する能力を有することを示している。従って、ＮＤＯは皮膚色素沈着の障害、例えば白斑、黒皮症および色素沈着過剰において役に立つ療法薬を提供し、化粧的な皮膚のホワイトニングが必要とされる場合に有用である。

実施例３−皮膚色素沈着の低減または皮膚の色調の一様化における使用のための化粧用組成物
以下の表は、皮膚色素沈着を低減する、または皮膚の色調を一様にする方法における皮膚への局所適用のための化粧用組成物の例を提供する。

以下の表は、皮膚色素沈着を低減する、または皮膚の色調を一様にする方法における皮膚への局所適用のためのサンスクリーン剤を提供する。

実施例４−皮膚色素沈着の障害を処置または管理するための医薬組成物
以下の表は、皮膚色素沈着の障害を処置または管理する方法における使用のための皮膚への局所適用のための医薬組成物の例を提供する。

実施例５−メリビオースはケラチノサイトによる炎症性サイトカイン類の産生を抑制する
この実験は、炎症誘発性サイトカインであるインターロイキン−８（ＩＬ−８）に対して産生された抗体を用いてケラチノサイトに由来する培養上清中のＩＬ−８のレベルを検出して、ＮＤＯメリビオースはＨａＣａＴケラチノサイトによるＩＬ−８のベースライン発現を低減することができることおよびインターロイキン−１βによるケラチノサイトの刺激に反応したＩＬ−８の産生も低減されることを実証した。

平底９６ウェルプレートを抗ＩＬ−８抗体により一晩コーティングの後、２０００ｐｇ／ｍｌのＩＬ−８ストック溶液からの系列希釈を用いて９点ＩＬ−８標準曲線を生成した。これらを糖類に曝露したケラチノサイトに由来する培養上清と共に９６ウェルプレート上で２時間培養した。次いでそのプレートを洗浄し、抗ＩＬ−８ビオチン抗体と共に２時間インキュベートした後、そのプレートを再度洗浄し、ストレプトアビジン−ＨＲＰの溶液と共に２０分間そのままにしておいた。最後の洗浄後、そのプレートをテトラメチルベンジジンの溶液で覆い、青色の反応生成物が形成され、その強度は元の培養上清中に存在するＩＬ−８の量に関連する。この反応を硫酸を用いて停止すると溶液が黄色に変わり、次いでそれをマルチプレートリーダー上で４５０ｎＭにおいて読み取った。ＩＬ−８の未知の試料濃度を標準曲線を用いて決定した。

図４ａにおいて示されるように、メリビオースはＨａＣａＴケラチノサイトにおけるＩＬ−８の産生を抑制する。メリビオースは構成的なＩＬ−８の分泌の穏やかな（mildly）用量応答性の抑制を示した。さらに、図４ｂにおいて示されるように、ケラチノサイトのＩＬ−１β刺激に反応したＩｌ−８の分泌（Ｉｌ−１β）が５％メリビオースで処理した細胞においてほとんど対照レベルまで低減した（Ｉｌ−１ｂ＋Ｍ）。２番目のＮＤＳであるＰ９５の作用を比較のために示す（Ｉｌ−１ｂ＋Ｐ）。

従って、ＮＤＯ、例えばメリビオースおよびＰ９５を用いて炎症誘発性サイトカイン類の発現を抑制または低減することができる。ＮＤＯを含む組成物を用いて、炎症を起こした皮膚および／または赤色の痒いパッチを有する皮膚の状態を予防、処置または改善することができる。ＮＤＯを含む組成物は、皮膚色素沈着の障害と関係する皮膚炎症の処置または予防または管理において用いることができる。特定の態様において、ＮＤＯは白斑と関係する炎症を処置、管理または予防するために用いられる。他の態様において、ＮＤＯを含む組成物は炎症と関係する皮膚障害、例えば皮膚炎、湿疹、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、乾癬、ざ瘡、酒さおよびじんま疹の処置、予防または管理において用いることができる。

実施例６−配合
次の表は、本発明に従う組成物の配合を示す。

その組成物は室温より下で約１５〜２０℃において調製される。メリビオースを水に添加し、５分間ゆっくりと攪拌して溶解させる。グリセリンおよび変性アルコール（ＩＭＳ）を添加し、５分間ゆっくりと攪拌して溶解させる。キサンタンガムを３０分間かけてゆっくりと攪拌しながらゆっくりと添加する。次いでその組成物を均質になるまで約１時間攪拌する。次いで保存剤を添加し、５分間ゆっくりと攪拌する。クエン酸溶液を適量添加してｐＨを４．５〜５．５にして、その組成物を３０分間ゆっくりと攪拌する。
ある態様において、本発明は以下であってもよい。
［態様１］
化粧用組成物の皮膚への局所適用を含む、皮膚色素沈着を低減する、または皮膚の色調を一様にする美容方法であって、該化粧用組成物が以下：
非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体、および
化粧的に許容できるキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤
を含む、前記美容方法。
［態様２］
ＮＤＯがメリビオース、ラフィノース、スタキオース、ラクツロース、ガラクト−オリゴ糖、フルクト−オリゴ糖（オリゴフルクトース）もしくはイヌリンまたはそれらの混合物から選択される炭水化物である、態様１に記載の美容方法。
［態様３］
ＮＤＯがヒトの小腸中での加水分解に耐え、未変化で通過して結腸に入る炭水化物である、態様１に記載の美容方法。
［態様４］
ＮＤＯがＡＯＡＣ法９８５．２９により食物繊維として分類される炭水化物である、請求項１に記載の美容方法。
［態様５］
ＮＤＯが少なくとも０．００１５％重量／体積（ｗ／ｖ）の量で、または場合により少なくとも１．０％ｗ／ｖの濃度で組成物中に存在する、態様１〜４のいずれか１項に記載の美容方法。
［態様６］
ＮＤＯが５％重量／体積（ｗ／ｖ）まで、または場合により５％ｗ／ｖまでの量で組成物中に存在する、前記の態様のいずれか１項に記載の美容方法。
［態様７］
ＮＤＯが約０．００１５％から約５％重量／体積までの量で組成物中に存在する、前記の態様のいずれか１項に記載の美容方法。
［態様８］
組成物が１種類より多くのＮＤＯまたはＮＤＯの組み合わせを含む、前記の態様のいずれか１項に記載の美容方法。
［態様９］
組成物が局所適用のために、場合によりクリーム、エマルジョン、ローション、ゲル、ヒドロゲル、ペースト、散剤、軟膏、泡状物質、ソーク、スティック、スプレー、エアロゾル、バスオイル、液剤等として配合されている、前記の態様のいずれか１項に記載の美容方法。
［態様１０］
組成物がさらにサンスクリーン剤を含む、前記の態様のいずれか１項に記載の美容方法。
［態様１１］
前記の態様のいずれか１項に記載の美容方法であって、該方法が白斑、黒皮症、色素沈着過剰、場合により炎症性皮膚疾患から生じる炎症後色素沈着過剰、色素沈着過剰の染み、加齢による染み、母斑、肝斑、そばかすにおいて皮膚色素沈着を低減する、または皮膚の色調を一様にする、皮膚を白化する、皮膚を薄色化する、およびより若々しい顔貌を得るためのものである、前記美容方法。
［態様１２］
組成物が他の皮膚ホワイトニングまたは皮膚色素沈着低減剤を含まない、前記の態様のいずれか１項に記載の美容方法。
［態様１３］
加齢による染み、母斑、日光による損傷、肝斑およびそばかすから選択される色素沈着過剰の領域の外観を低減するための皮膚のホワイトニングまたは皮膚の色調の一様化の美容方法であって、化粧用組成物の皮膚への局所適用を含み、該化粧用組成物がメリビオースおよび化粧的に許容できるキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤を含む、前記美容方法。
［態様１４］
皮膚色素沈着の障害を予防、処置または管理する方法における使用のための、非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体。
［態様１５］
ＮＤＯがメリビオース、ラフィノース、スタキオース、ラクツロース、ガラクト−オリゴ糖、フルクト−オリゴ糖（オリゴフルクトース）もしくはイヌリンまたはそれらの混合物から選択される炭水化物である、態様１４に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様１６］
ＮＤＯがヒトの小腸中での加水分解に耐え、未変化で通過して結腸に入る炭水化物である、態様１４に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様１７］
ＮＤＯがＡＯＡＣ法９８５．２９により食物繊維として分類される炭水化物である、請求項１４に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様１８］
ＮＤＯが少なくとも０．００１５％重量／体積（ｗ／ｖ）の量で、または場合により少なくとも１．０％ｗ／ｖの濃度で組成物中に配合される、態様１４〜１７のいずれか１項に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様１９］
ＮＤＯが５％重量／体積（ｗ／ｖ）まで、または場合により５％ｗ／ｖまでの量で組成物中に配合される、態様１４〜１８のいずれか１項に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様２０］
ＮＤＯが約０．００１５％から約５％重量／体積までの量で組成物中に配合される、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様２１］
１種類より多くのＮＤＯまたはＮＤＯの組み合わせが方法において用いられる、態様１４〜２０のいずれか１項に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様２２］
ＮＤＯが局所適用のために、場合によりクリーム、エマルジョン、ローション、ゲル、ヒドロゲル、ペースト、散剤、軟膏、泡状物質、ソーク、スティック、スプレー、エアロゾル、バスオイル、液剤等として組成物中に配合される、態様１４〜２１のいずれか１項に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様２３］
組成物がさらにサンスクリーン剤を含む、態様２２に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様２４］
皮膚色素沈着の障害が白斑、黒皮症、色素沈着過剰、場合により炎症性皮膚疾患から生じる炎症後色素沈着過剰、色素沈着過剰の染み、加齢による染み、母斑、肝斑、そばかす、皮膚を白化すること、皮膚を薄色化すること、およびより若々しい顔貌を得ることから選択される、態様１４〜２３のいずれか１項に記載の使用のためのＮＤＯ。
［態様２５］
皮膚色素沈着の障害の処置または管理のための医薬品の製造におけるＮＤＯの使用。
［態様２６］
皮膚色素沈着の障害を処置または管理する方法であって、該方法が以下：
（ｉ）療法上有効量の非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体
および
（ｉｉ）医薬的に許容できるキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤
を含む組成物の色素沈着の低減を必要とする皮膚への局所適用を含む、前記方法。
［態様２７］
ＮＤＯがメリビオース、ラフィノース、スタキオース、ラクツロース、ガラクト−オリゴ糖、フルクト−オリゴ糖（オリゴフルクトース）、イヌリンおよびそれらの混合物からなる群から選択される炭水化物である、態様２６に記載の方法。
［態様２８］
ＮＤＯがヒトの小腸中での加水分解に耐え、未変化で通過して結腸に入る炭水化物である、態様２６に記載の方法。
［態様２９］
ＮＤＯがＡＯＡＣ法９８５．２９により食物繊維として分類される炭水化物である、請求項２６に記載の方法。
［態様３０］
ＮＤＯが少なくとも０．００１５％重量／体積（ｗ／ｖ）の量で、または場合により少なくとも１．０％ｗ／ｖの濃度で組成物中に存在する、態様２６に記載の方法。
［態様３１］
ＮＤＯが５％重量／体積（ｗ／ｖ）まで、または場合により５％ｗ／ｖまでの量で組成物中に存在する、態様２６に記載の方法。
［態様３２］
ＮＤＯが約０．００１５％から約５％重量／体積までの量で組成物中に存在する、請求項２６に記載の方法。
［態様３３］
組成物が１種類より多くのＮＤＯまたはＮＤＯの組み合わせを含む、態様２６に記載の方法。
［態様３４］
組成物がクリーム、エマルジョン、ローション、ゲル、ヒドロゲル、ペースト、散剤、軟膏、泡状物質、ソーク、スティック、スプレー、エアロゾル、バスオイルおよび液剤等からなる群から選択される配合物として提供される、態様２６に記載の方法。
［態様３５］
組成物がさらにサンスクリーン剤を含む、態様２６に記載の方法。
［態様３６］
皮膚色素沈着の障害が白斑、黒皮症、色素沈着過剰、場合により炎症性皮膚疾患から生じる炎症後色素沈着過剰、色素沈着過剰の染み、加齢による染み、母斑、肝斑、そばかす、皮膚を白化すること、皮膚を薄色化すること、およびより若々しい顔貌を得ることから選択される、態様２６に記載の方法。
［態様３７］
白斑、黒皮症、妊娠または経口避妊薬におけるホルモン変化の結果としてもたらされる皮膚色素沈着の障害、アトピー性湿疹、接触皮膚炎、乾癬またはざ瘡（acne）から選択される炎症性皮膚疾患における炎症後色素沈着過剰、皮膚への外傷の後にも生じ得る色素沈着過剰から選択される皮膚色素沈着の障害を処置または管理する方法における使用のためのメリビオース。
［態様３８］
唯一の皮膚のホワイトニング有効薬剤としての１種類の（またはそれより多くの）ＮＤＯ（単数または複数）および１種類以上のキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤を含む皮膚のホワイトニング組成物。
［態様３９］
実質的に本明細書において前に図を参照して記載されたような組成物または方法。
［態様４０］
皮膚における炎症誘発性サイトカインの発現を低減する方法であって、療法上有効量の非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体のそれを必要とする対象の皮膚への局所適用を含む、前記方法。
［態様４１］
ＮＤＯまたはその塩もしくは誘導体の局所適用が炎症誘発性サイトカインであるインターロイキン−８（ＩＬ−８）を抑制する、態様４０に記載の方法。
［態様４２］
療法上有効量の非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体および医薬的に許容できるキャリヤー、希釈剤または賦形剤を含む組成物の皮膚への局所適用によりそれを必要とする対象において皮膚炎症を低減することを含む、皮膚炎症を処置または管理する方法。
［態様４３］
ＮＤＯがメリビオースである、態様４２に記載の方法。
［態様４４］
皮膚炎症が白斑である、態様４２に記載の方法。
［態様４５］
皮膚炎症を処置、予防または管理する方法における使用のための非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）またはその塩もしくは誘導体であって、該皮膚炎症が白斑におけるものである、前記ＮＤＯ。
［態様４６］
ＮＤＯがメリビオースである、態様４５に記載の使用のためのＮＤＯ。

Claims (12)

1. 化粧用組成物の皮膚への局所適用を含む、皮膚の色調をホワイトニングまたは薄色化（lightening）する美容方法であって、該化粧用組成物が以下：
   メリビオースまたはその塩、および
   化粧的に許容できるキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤
   を含み、ここで当該メリビオースまたはその塩は、少なくとも０．５％重量／体積（ｗ／ｖ）の量で該組成物中に存在する、前記美容方法。
2. メリビオースが少なくとも１．０％重量／体積（ｗ／ｖ）の量で組成物中に存在する、請求項１に記載の美容方法。
3. メリビオースが１０％重量／体積（ｗ／ｖ）までの量で組成物中に存在する、請求項１に記載の美容方法。
4. メリビオースが０．５％から５％重量／体積までの量で組成物中に存在する、請求項１または３に記載の美容方法。
5. 組成物が１種類より多くの非消化性オリゴ糖（ＮＤＯ）を含む、請求項１に記載の美容方法。
6. 組成物が局所適用のために配合されている、請求項１記載の美容方法。
7. 組成物が、クリーム、エマルジョン、ローション、ゲル、ヒドロゲル、ペースト、散剤、軟膏、泡状物質、ソーク、スティック、スプレー、エアロゾル、バスオイル、液剤等として配合されている、請求項６記載の美容方法。
8. 組成物がさらにサンスクリーン剤を含む、請求項１に記載の美容方法。
9. 該方法が白斑、黒皮症、色素沈着過剰、炎症後色素沈着過剰、色素沈着過剰の染み、加齢による染み、母斑、肝斑、そばかすにおいて皮膚の色調をホワイトニングまたは薄色化する、皮膚をホワイトニングする、皮膚を薄色化する、およびより若々しい顔貌を得るためのものである、請求項１に記載の美容方法。
10. 組成物が他の皮膚ホワイトニングまたは皮膚色素沈着低減剤を含まない、請求項１に記載の美容方法。
11. 該方法が、加齢による染み、母斑、日光による損傷、肝斑およびそばかすから選択される色素沈着過剰の領域の外観を低減するための皮膚のホワイトニングまたは皮膚の色調の薄色化の方法であり、化粧用組成物の皮膚への局所適用を含む、請求項１に記載の美容方法。
12. 唯一の皮膚のホワイトニング有効薬剤としてのメリビオースまたはその塩および１種類以上のキャリヤー、ビヒクルまたは賦形剤を含む皮膚のホワイトニング組成物であって、当該メリビオースまたはその塩は、少なくとも０．５％重量／体積（ｗ／ｖ）の量で該組成物中に存在する、前記組成物。