JP6266637B2 - ShenqiFuzheng注射液の指紋的固有スペクトルを確立する方法 - Google Patents
ShenqiFuzheng注射液の指紋的固有スペクトルを確立する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6266637B2 JP6266637B2 JP2015540037A JP2015540037A JP6266637B2 JP 6266637 B2 JP6266637 B2 JP 6266637B2 JP 2015540037 A JP2015540037 A JP 2015540037A JP 2015540037 A JP2015540037 A JP 2015540037A JP 6266637 B2 JP6266637 B2 JP 6266637B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peak
- minutes
- mobile phase
- solution
- shenqi fuzheng
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000002347 injection Methods 0.000 title claims description 96
- 239000007924 injection Substances 0.000 title claims description 96
- 239000008687 shenqi fuzheng Substances 0.000 title claims description 87
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 48
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 75
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 70
- QMNWISYXSJWHRY-YLNUDOOFSA-N astragaloside IV Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O QMNWISYXSJWHRY-YLNUDOOFSA-N 0.000 claims description 28
- QMNWISYXSJWHRY-BCBPIKMJSA-N astragaloside IV Natural products CC(C)(O)[C@@H]1CC[C@@](C)(O1)[C@H]2[C@@H](O)C[C@@]3(C)[C@@H]4C[C@H](O[C@@H]5O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]5O)[C@H]6C(C)(C)[C@H](CC[C@@]67C[C@@]47CC[C@]23C)O[C@@H]8OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]8O QMNWISYXSJWHRY-BCBPIKMJSA-N 0.000 claims description 28
- PFKIBRPYVNVMRU-UHFFFAOYSA-N cyclosieversioside F Natural products CC(C)(O)C1COC(C)(C1)C2C(O)CC3(C)C4CC(OC5OC(CO)C(O)C(O)C5O)C6C(C)(C)C(CCC67CC47CCC23C)OC8OCC(O)C(O)C8O PFKIBRPYVNVMRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 27
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 26
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 17
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 15
- 241000322338 Loeseliastrum Species 0.000 claims description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 13
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 8
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 6
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 6
- XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;formic acid Chemical compound CC#N.OC=O XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 5
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 4
- SMDOOINVMJSDPS-UHFFFAOYSA-N Astragaloside Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)OC2C(C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(O)C(CO)O2)O)=C1 SMDOOINVMJSDPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- QMNWISYXSJWHRY-XWJCTJPOSA-N astragaloside Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O)C4(C)C)C4[C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)CC3[C@]2(C)C[C@@H]1O QMNWISYXSJWHRY-XWJCTJPOSA-N 0.000 claims description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 21
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 10
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 7
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 7
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 7
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 4
- WTPPRJKFRFIQKT-UHFFFAOYSA-N 1,6-dimethyl-8,9-dihydronaphtho[1,2-g][1]benzofuran-10,11-dione;1-methyl-6-methylidene-8,9-dihydro-7h-naphtho[1,2-g][1]benzofuran-10,11-dione Chemical compound O=C1C(=O)C2=C3CCCC(=C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2.O=C1C(=O)C2=C3CCC=C(C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2 WTPPRJKFRFIQKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 244000132619 red sage Species 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000010390 livzon Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000581 reactive spray deposition Methods 0.000 description 2
- 238000001269 time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 2
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000012886 Vertigo Diseases 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000003255 drug test Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 239000000447 pesticide residue Substances 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000035900 sweating Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 1
- 231100000889 vertigo Toxicity 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
- G01N30/8686—Fingerprinting, e.g. without prior knowledge of the sample components
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/72—Mass spectrometers
- G01N30/7233—Mass spectrometers interfaced to liquid or supercritical fluid chromatograph
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/15—Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
- G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
- G01N2030/8813—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample biological materials
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Library & Information Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像を確立する方法、この方法は、超高圧液体クロマトグラフィー・質量分析装置、例えば、超高速液体クロマトグラフィー・四重極飛行時間型質量分析装置によりShenqi Fuzheng注射液を検査する工程を含み、この方法において、クロマトグラフィー条件は以下を含む:
クロマトグラフィーカラム:アジレントZorbax Eclipse Plus C18、2.1mm×100mm、1.8μm;
移動相:移動相Aは0.1%(v/v)ギ酸水溶液、移動相Bは0.1%(v/v)ギ酸アセトニトリル溶液;
以下の溶出プログラムに従う勾配溶出を使用(移動相の割合は、全て体積パーセンテージである):
0−0.5分、移動相Aを95%、移動相Bを5%;
0.5−10分、移動相Aを95%−75%へ、移動相Bを5%−25%へ;
10−15分、移動相Aを75%−45%へ、移動相Bを25%−55%へ;
15−18分、移動相Aを45%−0%へ、移動相Bを55%−100%へ;
18−20分、移動相Aを0%、移動相Bを100%。
流速:0.35ml/分;
カラム温度:40℃;
注入量:5μl。
イオン源は、ESI源であり、検出は、ネガティブイオンモードで操作する;
噴霧されたガス圧:35psig;
乾燥ガス温度:350℃;
乾燥ガス流速:10L/分;
キャピラリー電圧:3,500V;
キャピラリー出口の電圧:135V。
適正量のカリコシングルコシドまたはアストラガロシドIVの重量を正確に測定する工程、および次いでメタノールを加えて、1mlあたりカリコシングルコシドを0.004mgまたは1mlあたりアストラガロシドIVを0.006mg含有する溶液をそれぞれ調製する工程。
(1)対照溶液の調製:適正量のカリコシングルコシドまたはアストラガロシドIVの重量を正確に測定する工程、および次いでメタノールを加えて、1mlあたりカリコシングルコシドを0.004mgまたは1mlあたりアストラガロシドIVを0.006mg含有する溶液をそれぞれ調製する工程;
(2)検査試料溶液の調製:Shenqi Fuzheng注射液を0.22μm精密濾過膜で濾過する工程;
(3)測定:対照溶液または検査試料溶液を、それぞれ、正確に5μl吸引する工程、および次いで溶液を超高圧液体クロマトグラフィー・質量分析装置、例えば、超高速液体クロマトグラフィー・四重極飛行時間型質量分析装置に注入し、以下の条件に従って測定を行ってShenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像を得る工程:
この方法において、クロマトグラフィー条件は以下を含む:
クロマトグラフィーカラム:アジレントZorbax Eclipse Plus C18、2.1mm×100mm、1.8μm;
移動相:移動相Aは0.1%(v/v)ギ酸水溶液、移動相Bは0.1%(v/v)ギ酸アセトニトリル溶液;
以下の溶出プログラムに従う勾配溶出を用いる(移動相の割合は、全て体積パーセンテージである):
0−0.5分、移動相Aを95%、移動相Bを5%;
0.5−10分、移動相Aを95%−75%へ、移動相Bを5%−25%へ;
10−15分、移動相Aを75%−45%へ、移動相Bを25%−55%へ;
15−18分、移動相Aを45%−0%へ、移動相Bを55%−100%へ;
18−20分、移動相Aを0%、移動相Bを100%。
流速:0.35ml/分;
カラム温度:40℃;
好ましくは、質量分析条件は以下を含む:
イオン源は、ESI源であり、検出は、ネガティブイオンモードで操作する;
噴霧されたガス圧:35psig;
乾燥ガス温度:350℃;
乾燥ガス流速:10L/分;
キャピラリー電圧:3,500V;
キャピラリー出口の電圧:135V。
複数のShenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像を比較して、共通する特徴的なピークを選出し、Shenqi Fuzheng注射液の特徴的な指紋的固有組成像を得る工程。
ピーク1:7.1分、ピーク2:7.5分、ピーク3:8.1分、ピーク4:8.6分、ピーク5:9.2分、ピーク6:9.9分、ピーク7:10.9分、ピーク8:11.3分、ピーク9:11.7分、ピーク10:12.7分、ピーク11:13.4分、ピーク12:13.7分、ピーク13:14.4分、ピーク14:14.8分、ピーク15:15.1分、ピーク16:15.5分、ピーク17:15.9分、ピーク18:16.3分。
ピーク1:0.52、ピーク2:0.54、ピーク3:0.59、ピーク4:0.62、ピーク5:0.66、ピーク6:0.72、ピーク7:0.79、ピーク8:0.82、ピーク9:0.85、ピーク10:0.92、ピーク11:0.97、ピーク12:1.00、ピーク13:1.04、ピーク14:1.07、ピーク15:1.10、ピーク16:1.13、ピーク17:1.16、ピーク18:1.19。
カリコシングルコシドを濃度0.004mg/mlで、およびアストラガロシドIVを濃度0.006mg/mlで含有する、カリコシングルコシドおよびアストラガロシドIVの混合対照溶液を調製する工程;
Shenqi Fuzheng注射液の濾液を試験溶液として用意する工程;
上記の対照溶液および検査試料溶液を、超高速液体クロマトグラフィー・四重極飛行時間型質量分析装置により分析する工程、この工程においてクロマトグラフィー条件は以下を含む:
クロマトグラフィーカラム:アジレントZorbax Eclipse Plus C18、2.1mm×100mm、1.8μm;
移動相:移動相Aは0.1%(v/v)ギ酸水溶液、移動相Bは0.1%(v/v)ギ酸アセトニトリル溶液;
勾配溶出;
流速:0.35ml/分;
カラム温度:40℃;
注入量:5μl;
Shenqi Fuzheng注射液について超高速液体クロマトグラフィー・四重極飛行時間型質量分析による指紋的固有組成像(全イオンクロマトグラム特性)が得られる;
勾配溶出の工程は以下を含む:0−0.5分、移動相のアセトニトリル:水を5:95とする;0.5−10分、移動相のアセトニトリル:水を5:95から25:75へ徐々に変更する;10−15分、移動相のアセトニトリル:水を25:75から55:45へ徐々に変更する;15−18分、移動相のアセトニトリル:水を55:45から100:0へ徐々に変更する;18−20分、移動相のアセトニトリル:水を100:0とする。
Shenqi Fuzheng注射液用の品質基準において、「指紋的固有組成像」の項目には、Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像が高速液体クロマトグラフィー・UV検出により決定されると記述があるが、高速液体クロマトグラフィー・UV検出は品質を観測するという目的をある程度は達成するものの、主成分のサポニン類が実質的に紫外線を吸収しない;「成分決定」の項目には、全サポニン類含量がバニリン氷酢酸を用いたUV分光光度測定により測定され、アストラガロシドIV含量が高速液体クロマトグラフィー・蒸発光散乱検出器により測定されると記述があるが、これでは依然として各サポニン成分の含量を完全には反映できない。企業の内部管理において、高速液体クロマトグラフィー・蒸発光散乱検出器をさらに使用して、サポニン成分を観測することにより、指紋的固有組成像を決定することができるが、試料の前処理が追加で必要になり、分析も長時間を要すると思われる。
1.1装置:アジレントLC/MSD(1290UHPLC複式勾配ポンプ、内蔵型真空脱気装置、100ビットオートサンプラ、インテリジェントカラムオーブン、高精度四重極タンデム時間飛行型質量分析装置システム);クロマトグラフィーカラム:アジレントZorbax Eclipse Plus C18(2.1mm×100mm、1.8μm)。
2.1検査試料溶液の調製:Shenqi Fuzheng注射液を0.22μm精密濾過膜で濾過した。
対照溶液または検査試料溶液を、それぞれ、5μl正確に吸引し、次いで、それぞれ、液体クロマトグラフィー・質量分析装置に注入し、測定を行い、20分間スペクトルを記録した。
Shenqi Fuzheng注射液の100のバッチの全イオンクロマトグラム(TIC)を比較することで、共通する特徴ピークを選び出した(詳細は図1を参照);これらの共通する特徴ピークのイオン質量数を用いて、選出イオンクロマトグラム(EIC)を得た(詳細は図2を参照)(具体的には、データ分析ソフトウェアMasshunterに含まれる定量分析ソフトウェアを用いイオン抽出機能を利用して一連の標的イオンを図1から抽出し、そうすることにより図2を得た);次いで共通する特徴ピークそれぞれの保持時間(Rt)を付記し、そうすることでShenqi Fuzheng注射液の特徴的な指紋的固有組成像を得た。共通する特徴ピークは18存在し、それらの保持時間(Rt)および質量数は以下のとおりであった:それぞれ、7.1分(471.2083)、7.5分(491.1195)、8.1分(441.1919)、8.6分(309.1555)、9.2分(187.0976)、9.9分(441.1766)、10.9分(593.1876)、11.3分(507.1508)、11.7分(463.1610)、12.7分(991.5119)、13.4分(991.5119)、13.7分(829.4591)、14.4分(871.4697)、14.8分(871.4697)、15.1分(871.4697)、15.5分(913.4650)、15.9分(913.4650)、16.3分(913.4650)、これらのピークのうち、Rtが7.5分および13.7分のクロマトグラフィーピークは、それぞれ、カリコシングルコシドおよびアストラガロシドIVと確認された(詳細は図3を参照);ピークSは、アストラガロシドIV参照ピークに該当するピークであった、特徴ピークそれぞれの相対保持時間は計算されたものであり、計算された保持時間の変動は、指定値の±5%以内でなければならず、指定値とは、順番に、0.52、0.54、0.59、0.62、0.66、0.72、0.79、0.82、0.85、0.92、0.97、1.00、1.04、1.07、1.10、1.13、1.16、1.19であった;カリコシングルコシドおよびアストラガロシドIVのピーク面積対それらに該当する参照ピーク面積の比は、0.5〜1.5以内でなければならない。
近年、臨床でのShenqi Fuzheng注射液の使用が増加するにつれて、欲に目がくらんだ犯罪者が、他の品種を用いたShenqi Fuzheng注射液偽造品を販売して利益を得ている。偽造品は、Shenqi Fuzheng注射液のブランドに大きなマイナスの影響を及ぼすとともに、正規にShenqi Fuzheng注射液を製造販売している企業に対して顕著な経済損失をもたらしている。こうしたShenqi Fuzheng注射液偽造品は、本物とほとんど同じ外観をしているため、本物と偽物を識別することは難しい。
Claims (10)
- 超高圧液体クロマトグラフィー・質量分析装置によりShenqi Fuzheng注射液を検査することを含む、Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像を確立する方法であって、該クロマトグラフィーの条件は、以下:
クロマトグラフィーカラム:アジレントZorbax Eclipse Plus C18、2.1mm×100mm、1.8μm(「ZORBAX」はアジレント社の登録商標である);
移動相:移動相Aは0.1%(v/v)ギ酸水溶液、移動相Bは0.1%(v/v)ギ酸アセトニトリル溶液であり;
以下の溶出プログラムに従う勾配溶出の使用、該移動相の割合は、全て体積パーセンテージである:
0−0.5分、移動相Aを95%、移動相Bを5%;
0.5−10分、移動相Aを95%−75%へ、移動相Bを5%−25%へ;
10−15分、移動相Aを75%−45%へ、移動相Bを25%−55%へ;
15−18分、移動相Aを45%−0%へ、移動相Bを55%−100%へ;
18−20分、移動相Aを0%、移動相Bを100%;
を含み、
該クロマトグラフィーの条件は、以下:
流速:0.35ml/分;
カラム温度:40℃;
注入量:5μl
も含み、さらに、
前記Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像は、18の特徴ピークを含み、特徴ピークそれぞれの保持時間は、
ピーク1:7.1分、ピーク2:7.5分、ピーク3:8.1分、ピーク4:8.6分、ピーク5:9.2分、ピーク6:9.9分、ピーク7:10.9分、ピーク8:11.3分、ピーク9:11.7分、ピーク10:12.7分、ピーク11:13.4分、ピーク12:13.7分、ピーク13:14.4分、ピーク14:14.8分、ピーク15:15.1分、ピーク16:15.5分、ピーク17:15.9分、ピーク18:16.3分であり、さらに、
前記Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像において、ピーク2およびピーク12はそれぞれ、カリコシングルコシドおよびアストラガロシドIVである、方法。 - 前記質量分析の条件は、以下:
イオン源は、ESI源であり、検出は、ネガティブイオンモードで操作する;
噴霧されたガス圧:35psig;
乾燥ガス温度:350℃;
乾燥ガス流速:10L/分;
キャピラリー電圧:3,500V;
キャピラリー出口の電圧:135V;
を含む、請求項1に記載の方法。 - 前記方法は、さらに、以下の工程による対照溶液の調製を含む、請求項1または2に記載の方法:適正量のカリコシングルコシドまたはアストラガロシドIVの重量を正確に測定する工程、およびメタノールを加えて、1mlあたりカリコシングルコシドを0.004mgまたは1mlあたりアストラガロシドIVを0.006mg含有する溶液をそれぞれ調製する工程。
- 前記方法は、さらに、以下の工程による検査試料溶液の調製を含む、請求項1から3のいずれか1項に記載の方法:Shenqi Fuzheng注射液を0.22μm精密濾過膜で濾過する工程。
- 超高圧液体クロマトグラフィー・質量分析装置によりShenqi Fuzheng注射液を検査することを含む、Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像を確立する方法であって、以下の工程:
(1)対照溶液の調製:適正量のカリコシングルコシドまたはアストラガロシドIVの重量を正確に測定する工程、および次いでメタノールを加えて、1mlあたりカリコシングルコシドを0.004mgまたは1mlあたりアストラガロシドIVを0.006mg含有する溶液をそれぞれ調製する工程;
(2)検査試料溶液の調製:Shenqi Fuzheng注射液を0.22μm精密濾過膜で濾過する工程;
(3)測定:該対照溶液または該検査試料溶液を、それぞれ、正確に5μl吸引する工程、および次いで該溶液を超高圧液体クロマトグラフィー・質量分析装置に注入し、以下の条件に従って測定を行って該Shenqi Fuzheng注射液の該指紋的固有組成像を得る工程:
を含み、
該クロマトグラフィーの条件は、以下:
クロマトグラフィーカラム:アジレントZorbax Eclipse Plus C18、2.1mm×100mm、1.8μm(「ZORBAX」はアジレント社の登録商標である);
移動相:移動相Aは0.1%(v/v)ギ酸水溶液、移動相Bは0.1%(v/v)ギ酸アセトニトリル溶液であり;
以下の溶出プログラムに従う勾配溶出の使用、該移動相の割合は、全て体積パーセンテージである:
0−0.5分、移動相Aを95%、移動相Bを5%;
0.5−10分、移動相Aを95%−75%へ、移動相Bを5%−25%へ;
10−15分、移動相Aを75%−45%へ、移動相Bを25%−55%へ;
15−18分、移動相Aを45%−0%へ、移動相Bを55%−100%へ;
18−20分、移動相Aを0%、移動相Bを100%;
を含み、
該クロマトグラフィーの条件は、以下:
流速:0.35ml/分;
カラム温度:40℃;
も含み;
前記Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像は、18の特徴ピークを含み、特徴ピークそれぞれの保持時間は、
ピーク1:7.1分、ピーク2:7.5分、ピーク3:8.1分、ピーク4:8.6分、ピーク5:9.2分、ピーク6:9.9分、ピーク7:10.9分、ピーク8:11.3分、ピーク9:11.7分、ピーク10:12.7分、ピーク11:13.4分、ピーク12:13.7分、ピーク13:14.4分、ピーク14:14.8分、ピーク15:15.1分、ピーク16:15.5分、ピーク17:15.9分、ピーク18:16.3分であり、さらに、
前記Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像において、ピーク2およびピーク12はそれぞれ、カリコシングルコシドおよびアストラガロシドIVである、方法。 - 前記質量分析の条件は、以下:
イオン源は、ESI源であり、検出は、ネガティブイオンモードで操作する;
噴霧されたガス圧:35psig;
乾燥ガス温度:350℃;
乾燥ガス流速:10L/分;
キャピラリー電圧:3,500V;
キャピラリー出口の電圧:135V;
を含む、
請求項5に記載の方法。 - 前記方法は、さらに以下を含む、請求項1から5のいずれか1項に記載の方法:複数のShenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像を比較して、共通する特徴ピークを選出し、該Shenqi Fuzheng注射液の特徴的な指紋的固有組成像を得る工程。
- 前記Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像または前記Shenqi Fuzheng注射液の特徴的な指紋的固有組成像は、対照のアストラガロシドIVを参照ピークとして用いて換算すると、特徴ピークそれぞれの相対保持時間が以下のとおりになる、請求項7に記載の方法:
ピーク1:0.52、ピーク2:0.54、ピーク3:0.59、ピーク4:0.62、ピーク5:0.66、ピーク6:0.72、ピーク7:0.79、ピーク8:0.82、ピーク9:0.85、ピーク10:0.92、ピーク11:0.97、ピーク12:1.00、ピーク13:1.04、ピーク14:1.07、ピーク15:1.10、ピーク16:1.13、ピーク17:1.16、ピーク18:1.19。 - 前記カリコシングルコシドのピークおよび該アストラガロシドIVピークの面積対該当する参照ピークの面積の比は、0.5〜1.5である、請求項1から8のいずれか1項に記載の方法。
- 請求項7に記載の方法に従って確立された前記試験試料の前記Shenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像または前記Shenqi Fuzheng注射液の特徴的な指紋的固有組成像を、前記方法に従って確立された前記標準のShenqi Fuzheng注射液の指紋的固有組成像または前記Shenqi Fuzheng注射液の特徴的な指紋的固有組成像と比較することを含む、Shenqi Fuzheng注射液を同定する方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210436493.4A CN103808840B (zh) | 2012-11-02 | 2012-11-02 | 一种参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法 |
CN201210436493.4 | 2012-11-02 | ||
PCT/CN2013/086405 WO2014067478A1 (zh) | 2012-11-02 | 2013-11-01 | 一种参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015537203A JP2015537203A (ja) | 2015-12-24 |
JP6266637B2 true JP6266637B2 (ja) | 2018-01-24 |
Family
ID=50626516
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015540037A Active JP6266637B2 (ja) | 2012-11-02 | 2013-11-01 | ShenqiFuzheng注射液の指紋的固有スペクトルを確立する方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20160054276A1 (ja) |
EP (1) | EP2916130B1 (ja) |
JP (1) | JP6266637B2 (ja) |
CN (1) | CN103808840B (ja) |
WO (1) | WO2014067478A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109115904A (zh) * | 2018-07-25 | 2019-01-01 | 山西广誉远国药有限公司 | 一种定坤丹uplc指纹图谱的构建方法及其应用 |
Families Citing this family (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105699506B (zh) * | 2016-01-18 | 2017-12-01 | 吉林修正药业新药开发有限公司 | 一种中成药“二丁颗粒”hplc指纹图谱的构建方法 |
CN107976494B (zh) * | 2017-11-10 | 2020-01-03 | 安徽安科余良卿药业有限公司 | 康肤酊标准特征图谱的构建及其质量检测方法 |
CN108535380A (zh) * | 2018-04-12 | 2018-09-14 | 公安部物证鉴定中心 | 一种新精神活性物质mdbzp的检测方法 |
US11940429B2 (en) | 2018-05-02 | 2024-03-26 | Waters Technologies Corporation | Methods for authenticating botanicals using a marker compound's related chromatographic profile and mass spectral profile jointly |
CN109444311B (zh) * | 2018-09-12 | 2021-07-20 | 丽珠集团利民制药厂 | 一种参芪扶正注射液有关成分的分离和检测方法 |
CN109187791B (zh) * | 2018-09-15 | 2021-09-21 | 丽珠集团利民制药厂 | 一种测定参芪扶正注射液中核苷类含量的方法 |
CN109061004B (zh) * | 2018-09-20 | 2021-06-25 | 广西壮族自治区药用植物园 | 抗毒升白合剂中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定方法 |
JP2020165847A (ja) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | 株式会社島津製作所 | 食品の品質判定方法、及び、食品品質判定装置 |
CN111855867B (zh) * | 2019-04-25 | 2023-04-28 | 北京同仁堂股份有限公司 | 一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法与应用 |
CN111948299B (zh) * | 2019-05-15 | 2022-11-25 | 上海现代药物制剂工程研究中心有限公司 | 测定泊沙康唑注射液中乙二胺四乙酸二钠含量的方法 |
CN112014480B (zh) * | 2019-05-28 | 2023-03-28 | 黄河科技学院 | 一种uplc-ms/ms检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法 |
CN110568099B (zh) * | 2019-09-12 | 2022-05-31 | 吉林省现代中药工程研究中心有限公司 | 五加参归芪精制剂的指纹图谱构建方法及多指标成分同步含量测定方法 |
CN112147242A (zh) * | 2020-08-14 | 2020-12-29 | 贵州师范大学 | 贞芪扶正胶囊半成品及成品制剂指纹图谱构建方法 |
CN112834650B (zh) * | 2021-01-12 | 2022-10-21 | 湖南天劲制药有限责任公司 | 一种强骨生血口服液的质量检测方法 |
CN113820420B (zh) * | 2021-09-23 | 2023-04-18 | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 | 一种采用uplc-q-tof-ms对益智酒中化学成分的测定方法 |
CN113945674B (zh) * | 2021-12-20 | 2023-01-13 | 江西省药品检验检测研究院 | 一种地黄炮制品的特征图谱及分析方法 |
CN114924014A (zh) * | 2022-05-26 | 2022-08-19 | 河南羚锐制药股份有限公司 | 一种颠茄草药材特征图谱的建立方法及其应用 |
CN114755350A (zh) * | 2022-06-14 | 2022-07-15 | 中国农业科学院蜜蜂研究所 | 一种黄芪蜜的鉴别方法 |
CN115184493A (zh) * | 2022-07-06 | 2022-10-14 | 株洲市食品药品检验所 | 一种南方红豆杉药材及其中药饮片中活性成分的指纹图谱检测方法 |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TWI285262B (en) * | 2005-06-20 | 2007-08-11 | Dev Center Biotechnology | Characteristic mass spectrum fingerprinting setting method and rapid identification method of Chinese herb medicine and prescription |
CN101088520B (zh) * | 2006-06-13 | 2011-10-26 | 天津天士力之骄药业有限公司 | 一种用于癌症辅助治疗药物组合物、其制剂及质量控制方法 |
CN1899362B (zh) * | 2006-07-19 | 2010-05-12 | 丽珠集团利民制药厂 | 参芪扶正注射液的质量控制方法 |
CN101352478A (zh) * | 2007-07-26 | 2009-01-28 | 丽珠集团利民制药厂 | 参芪扶正注射液的质量控制方法 |
GB2455151A (en) * | 2007-11-27 | 2009-06-03 | Phynova Ltd | An Astragalus extract as an antiviral for several genera of the Flaviviridae family |
CN102028840B (zh) * | 2009-09-28 | 2013-07-03 | 中国食品药品检定研究院 | 一种复方中成药的超高压液相检测方法 |
CN102621244B (zh) * | 2012-03-27 | 2014-04-16 | 中山大学 | 一种参芪扶正注射液hplc指纹图谱的构建方法及其应用 |
-
2012
- 2012-11-02 CN CN201210436493.4A patent/CN103808840B/zh active Active
-
2013
- 2013-11-01 WO PCT/CN2013/086405 patent/WO2014067478A1/zh active Application Filing
- 2013-11-01 US US14/439,635 patent/US20160054276A1/en not_active Abandoned
- 2013-11-01 JP JP2015540037A patent/JP6266637B2/ja active Active
- 2013-11-01 EP EP13851081.3A patent/EP2916130B1/en active Active
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109115904A (zh) * | 2018-07-25 | 2019-01-01 | 山西广誉远国药有限公司 | 一种定坤丹uplc指纹图谱的构建方法及其应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2015537203A (ja) | 2015-12-24 |
WO2014067478A1 (zh) | 2014-05-08 |
EP2916130A4 (en) | 2016-09-28 |
EP2916130B1 (en) | 2022-05-25 |
CN103808840B (zh) | 2015-09-09 |
US20160054276A1 (en) | 2016-02-25 |
CN103808840A (zh) | 2014-05-21 |
EP2916130A1 (en) | 2015-09-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6266637B2 (ja) | ShenqiFuzheng注射液の指紋的固有スペクトルを確立する方法 | |
US20190219550A1 (en) | System and Method for Identifying Shenqi Fuzheng Injection | |
Chan et al. | Ultra‐performance liquid chromatography/time‐of‐flight mass spectrometry based metabolomics of raw and steamed Panax notoginseng | |
Ye et al. | Chemical fingerprinting of Liuwei Dihuang Pill and simultaneous determination of its major bioactive constituents by HPLC coupled with multiple detections of DAD, ELSD and ESI-MS | |
Sun et al. | Profiling and identification of the absorbed constituents and metabolites of schisandra lignans by ultra‐performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry | |
Lu et al. | Quantitative analysis of Cistanches Herba using high‐performance liquid chromatography coupled with diode array detection and high‐resolution mass spectrometry combined with chemometric methods | |
Zhang et al. | Quality evaluation of S emen C assiae (Cassia obtusifolia L.) by using ultra‐high performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry | |
Zhou et al. | Spectrum‐effect relationship between UPLC fingerprints and anti‐lung cancer effect of Panax ginseng | |
Dou et al. | Quality evaluation of rhubarb based on qualitative analysis of the HPLC fingerprint and UFLC–Q‐TOF–MS/MS combined with quantitative analysis of eight anthraquinone glycosides by QAMS | |
KR101817824B1 (ko) | Lc-ms/ms와 전자코 분석기기를 병용한 시판 홍삼 농축액의 원산지 판별방법 | |
Dai et al. | Simultaneous chemical fingerprint and quantitative analysis of Rhizoma Smilacis Glabrae by accelerated solvent extraction and high‐performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry | |
Liang et al. | Histochemical analysis of the root tuber of Polygonum multiflorum Thunb.(Fam. Polygonaceae) | |
Singh et al. | Quantitative determination of isoquinoline alkaloids and chlorogenic acid in Berberis species using ultra high performance liquid chromatography with hybrid triple quadrupole linear ion trap mass spectrometry | |
Guo et al. | Comparison of Artemisiae argyi Folium and Artemisiae lavandulaefoliae Folium by simultaneous determination of multi‐components with single reference standard method and chemometric analysis | |
Jeong et al. | Simultaneous determination of sildenafil, tadalafil, and vardenafil in pharmaceutical preparations by high-temperature gas chromatography/mass spectrometry | |
Zhang et al. | Rapid quantitative analysis of adulterant Lonicera species in preparations of Lonicerae Japonicae Flos | |
Du et al. | Simultaneous qualitative and quantitative analysis of 28 components in Isodon rubescens by HPLC‐ESI‐MS/MS | |
Yuan et al. | Characterization and determination of six aristolochic acids and three aristololactams in medicinal plants and their preparations by high‐performance liquid chromatography‐photodiode array detection/electrospray ionization mass spectrometry | |
Wang et al. | Rapid screening of illegal additives in functional food using atmospheric pressure solids analysis probe coupled to a portable mass spectrometer | |
Wang et al. | Dynamic changes of metabolite accumulation in Scrophulariae Radix based on liquid chromatography–tandem mass spectrometry combined with multivariate statistical analysis | |
Liu et al. | Metabolomic study of a rat fever model induced with 2, 4-dinitrophenol and the therapeutic effects of a crude drug derived from Coptis chinensis | |
Zhang et al. | Quantitative and chemical fingerprint analysis for quality evaluation of the dried bark of wild Phellodendron amurense Rupr. based on HPLC-DAD-MS combined with chemometrics methods | |
Li et al. | Chemical Differentiation and Quantitative Analysis of Different Types of Panax Genus Stem‐Leaf Based on a UPLC‐Q‐Exactive Orbitrap/MS Combined with Multivariate Statistical Analysis Approach | |
Zhou et al. | Improved liquid chromatography fingerprint of fat‐soluble Radix isatidis extract using multi‐wavelength combination technique | |
Wang et al. | Discrimination of crude and processed rhubarb products using a chemometric approach based on ultra fast liquid chromatography with ion trap/time‐of‐flight mass spectrometry |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160629 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20170222 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170307 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170607 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20171212 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6266637 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R154 | Certificate of patent or utility model (reissue) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R154 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |