JP6124275B2 - グアイアコール認識性を指標に選抜した微生物と微生物増殖促進活性を有するグアイアコール含有組成物 - Google Patents
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フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも約8.2倍上昇する、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約5.0倍上昇する、
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも約2.8倍上昇する、
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.4倍上昇する、
DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも約5.1倍上昇する、
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する、
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇する、
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも約6.3倍上昇する、
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも約3.9倍上昇する、
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約4.8倍上昇する、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約4.2倍上昇する、
4−メトキシフェノールの非存在下に比べて500μMの4−メトキシフェノールの存在下で、少なくとも約8.5倍上昇する、
ギンゲロールの非存在下に比べて1.5mMのギンゲロールの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
ショウガオールの非存在下に比べて0.25mMのショウガオールの存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリン酸ジエチルアミドの非存在下に比べて500μMのバニリン酸ジエチルアミドの存在下で、少なくとも約3.7倍上昇する、
イソオイゲノールの非存在下に比べて500μMのイソオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.6倍上昇する、
イソバニリン酸の非存在下に比べて500μMのイソバニリン酸の存在下で、少なくとも約5.7倍上昇する、
o−バニリンの非存在下に比べて500μMのo−バニリンの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
トランスフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのトランスフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する、
イソフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのイソフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
イソクレオソールの非存在下に比べて500μMのイソクレオソールの存在下で、少なくとも約12.6倍上昇する、
4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの非存在下に比べて500μMの4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの存在下で、少なくとも約9.8倍上昇する、
ヘスペレチンの非存在下に比べて500μMのヘスペレチンの存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の非存在下に比べて500μMの3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の存在下で、少なくとも約5.9倍上昇する、
イソバニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのイソバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
クレオソールの非存在下に比べて500μMのクレオソールの存在下で、少なくとも約9.7倍上昇する、
o−バニリン酸の非存在下に比べて500μMのo−バニリン酸の存在下で、少なくとも約7.2倍上昇する、
バニリン酸メチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸メチルの存在下で、少なくとも約7.4倍上昇する、
メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の非存在下に比べて500μMのメチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
5−ニトログアイアコールの非存在下に比べて500μMの5−ニトログアイアコールの存在下で、少なくとも約3.6倍上昇する、
スコポレチンの非存在下に比べて500μMのスコポレチンの存在下で、少なくとも約8.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇する、
バニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約6.5倍上昇する、
バニリン酸エチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸エチルの存在下で、少なくとも約1.5倍上昇する、
およびコニフェリルアルコールの非存在下に比べて500μMのコニフェリルアルコールの存在下で、少なくとも約1.8倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの特徴を有する。
フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも約8.2倍上昇する、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約5.0倍上昇する、
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも約2.8倍上昇する、
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.4倍上昇する、
DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも約5.1倍上昇する、
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する、
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇する、
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも約6.3倍上昇する、
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも約3.9倍上昇する、および
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約4.8倍上昇する、
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの特徴を有する。
フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇する、
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも約8.2倍上昇する、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約5.0倍上昇する、
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも約2.8倍上昇する、
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.4倍上昇する、
DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも約5.1倍上昇する、
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する、
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇する、
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも約6.3倍上昇する、
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも約3.9倍上昇する、および
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約4.8倍上昇する、
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの特徴を有する。
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約7.9倍上昇する、
4−メトキシフェノールの非存在下に比べて500μMの4−メトキシフェノールの存在下で、少なくとも約8.5倍上昇する、
ギンゲロールの非存在下に比べて1.5mMのギンゲロールの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
ショウガオールの非存在下に比べて0.25mMのショウガオールの存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリン酸ジエチルアミドの非存在下に比べて500μMのバニリン酸ジエチルアミドの存在下で、少なくとも約3.7倍上昇する、
イソオイゲノールの非存在下に比べて500μMのイソオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.6倍上昇する、
イソバニリン酸の非存在下に比べて500μMのイソバニリン酸の存在下で、少なくとも約5.7倍上昇する、
o−バニリンの非存在下に比べて500μMのo−バニリンの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
トランスフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのトランスフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する、
イソフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのイソフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
イソクレオソールの非存在下に比べて500μMのイソクレオソールの存在下で、少なくとも約12.6倍上昇する、
4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの非存在下に比べて500μMの4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの存在下で、少なくとも約9.8倍上昇する、
ヘスペレチンの非存在下に比べて500μMのヘスペレチンの存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の非存在下に比べて500μMの3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の存在下で、少なくとも約5.9倍上昇する、
イソバニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのイソバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
クレオソールの非存在下に比べて500μMのクレオソールの存在下で、少なくとも約9.7倍上昇する、
o−バニリン酸の非存在下に比べて500μMのo−バニリン酸の存在下で、少なくとも約7.2倍上昇する、
バニリン酸メチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸メチルの存在下で、少なくとも約7.4倍上昇する、
メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の非存在下に比べて500μMのメチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
5−ニトログアイアコールの非存在下に比べて500μMの5−ニトログアイアコールの存在下で、少なくとも約3.6倍上昇する、
スコポレチンの非存在下に比べて500μMのスコポレチンの存在下で、少なくとも約8.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約3.4倍上昇する、
バニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約6.5倍上昇する、
バニリン酸エチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸エチルの存在下で、少なくとも約1.5倍上昇する、
コニフェリルアルコールの非存在下に比べて500μMのコニフェリルアルコールの存在下で、少なくとも約1.8倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約7.8倍上昇する
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの特徴を上記の特徴に追加してあるいは独立して有する。
フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも約2.3倍上昇し、
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇し、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約3.8倍上昇し、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約6.9倍上昇する
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの特徴を上記の特徴に追加してあるいは独立して有する。
フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも約2.3倍上昇し、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約4.2倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの特徴を上記の特徴に追加してあるいは独立して有する。
A)乳酸菌を含む試料を提供する提供工程;
B)硫酸マグネシウム(MgSO4)、硝酸アンモニウム(NH4NO3)、塩化カリウム(KCl)、D−(+)−グルコース、リン酸二水素カリウム(KH2PO4)およびウシ血清を含む培地中で、グアイアコール骨格を有する化合物の存在下または不存在下で該試料を培養する培養工程;および
C)該化合物の不存在下で増殖せず、かつ、存在下において増殖したか、または該化合物の存在下において不存在下よりも増殖が促進された菌株を分離する分離工程
を包含する、方法を提供する。
A)乳酸菌を含む試料を提供する提供工程;
B)硫酸マグネシウム(MgSO4)、硝酸アンモニウム(NH4NO3)、塩化カリウム(KCl)、D−(+)−グルコース、リン酸二水素カリウム(KH2PO4)およびウシ血清を含む培地中で、グアイアコール骨格を有する化合物および/または4−メトキシフェノール骨格を有する化合物の存在下または不存在下で該試料を培養する培養工程;および
C)該化合物の不存在下で増殖せず、かつ、存在下において増殖したか、または該化合物の存在下において不存在下よりも増殖が促進された菌株を分離する分離工程
を包含する、方法を提供する。
本明細書において、必要に応じて、以下の略語を用いる。
L. plantarum:Lactobacillus plantarum
L. paraplantarum:Lactobacillus paraplantarum
L. sakei:Lactobacillus sakei
L. casei:Lactobacillus casei
MHPG:4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩
VMA:DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸 3MT:3−メトキシチラミン塩酸塩
HVA:ホモバニリン酸
VA:バニリン酸
MOPET:ホモバニリルアルコール。
・16S rRNA遺伝子配列の配列解析により、L.plantarum基準株(例えば、JCM1149T株)の16S rRNA配列(DDBJ/EMBL/GenBank accession number、X52653)と例えば99%などの高い相同性を示すこと
・CLUSTALX等によるアライメント解析後のMEGA等による系統樹解析により、L.plantarum基準株と系統学的に近縁な位置関係が認められること
・recA遺伝子を標的にしたmultiplex PCR法により、recAのPCR増幅産物がL.plantarum基準株の同増副産物と同じ電気泳動パターンを示すこと。
・16S rRNA遺伝子配列の配列解析により、L.paraplantarum基準株(例えば、DSM10667T)の16S rRNA配列(DDBJ/EMBL/GenBank accession number、AJ306297)と例えば99%などの高い相同性を示すこと
・CLUSTALX等によるアライメント解析後のMEGA等による系統樹解析により、L.paraplantarum基準株と系統学的に近縁な位置関係が認められること
・recA遺伝子を標的にしたmultiplex PCR法により、recAのPCR増幅産物がL.paraplantarum基準株の同増副産物と同じ電気泳動パターンを示すこと。
・16S rRNA遺伝子配列の配列解析により、L.sakei基準株(例えば、DSM20017T)の16S rRNA配列(DDBJ/EMBL/GenBank accession number、AM113784)と例えば99%などの高い相同性を示すこと
・CLUSTALX等によるアライメント解析後のMEGA等による系統樹解析により、L.sakei基準株と系統学的に近縁な位置関係が認められること
・16S rRNA遺伝子配列の配列解析により、L.casei基準株(例えば、ATCC393T)の16S rRNA配列(DDBJ/EMBL/GenBank accession number、AF469172)と例えば99%などの高い相同性を示すこと
・CLUSTALX等によるアライメント解析後のMEGA等による系統樹解析により、L.casei基準株と系統学的に近縁な位置関係が認められること
・細胞はグラム陽性である。
・細胞形態は桿菌または球菌である。
・カタラーゼ陰性である。
・内性胞子を形成しない。
・運動性を持たない。
・消費したブドウ糖に対して50%以上の乳酸を産生する。
・ビタミンB群のうちナイアシンを必須要求する。
・胞子を形成しない乳酸桿菌である。
・絶対ホモ型発酵、通性ヘテロ型発酵あるいは絶対ヘテロ型発酵形式を示す。
・Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, Second edition,2009,Volume Three(The Firmicutes)のLactobacillus項(P465−P511)に記載されている菌種である。
本発明の好ましい実施形態を、以下に掲げる。以下に提供される実施形態は、本発明のよりよい理解のために提供されるものであり、本発明の範囲は以下の記載に限定されるべきでない。従って、当業者は、本明細書中の記載を参酌して、本発明の範囲内で適宜改変を行うことができることは明らかである。
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも約8.2倍上昇する、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約5.0倍上昇する、
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも約2.8倍上昇する、
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.4倍上昇する、
DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも約5.1倍上昇する、
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する、
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇する、
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも約6.3倍上昇する、
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも約3.9倍上昇する、
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約4.8倍上昇する、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約4.2倍上昇する、
4−メトキシフェノールの非存在下に比べて500μMの4−メトキシフェノールの存在下で、少なくとも約8.5倍上昇する、
ギンゲロールの非存在下に比べて1.5mMのギンゲロールの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
ショウガオールの非存在下に比べて0.25mMのショウガオールの存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリン酸ジエチルアミドの非存在下に比べて500μMのバニリン酸ジエチルアミドの存在下で、少なくとも約3.7倍上昇する、
イソオイゲノールの非存在下に比べて500μMのイソオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.6倍上昇する、
イソバニリン酸の非存在下に比べて500μMのイソバニリン酸の存在下で、少なくとも約5.7倍上昇する、
o−バニリンの非存在下に比べて500μMのo−バニリンの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
トランスフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのトランスフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する、
イソフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのイソフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
イソクレオソールの非存在下に比べて500μMのイソクレオソールの存在下で、少なくとも約12.6倍上昇する、
4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの非存在下に比べて500μMの4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの存在下で、少なくとも約9.8倍上昇する、
ヘスペレチンの非存在下に比べて500μMのヘスペレチンの存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の非存在下に比べて500μMの3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の存在下で、少なくとも約5.9倍上昇する、
イソバニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのイソバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
クレオソールの非存在下に比べて500μMのクレオソールの存在下で、少なくとも約9.7倍上昇する、
o−バニリン酸の非存在下に比べて500μMのo−バニリン酸の存在下で、少なくとも約7.2倍上昇する、
バニリン酸メチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸メチルの存在下で、少なくとも約7.4倍上昇する、
メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の非存在下に比べて500μMのメチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
5−ニトログアイアコールの非存在下に比べて500μMの5−ニトログアイアコールの存在下で、少なくとも約3.6倍上昇する、
スコポレチンの非存在下に比べて500μMのスコポレチンの存在下で、少なくとも約8.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇する、
バニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約6.5倍上昇する、
バニリン酸エチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸エチルの存在下で、少なくとも約1.5倍上昇する、
コニフェリルアルコールの非存在下に比べて500μMのコニフェリルアルコールの存在下で、少なくとも約1.8倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する。
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する;
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも約8.2倍上昇する;
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約5.0倍上昇する;
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも約2.8倍上昇する;
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.4倍上昇する;
DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも約5.1倍上昇する;
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する;
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇する;
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも約6.3倍上昇する;
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも約3.9倍上昇する;
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約4.8倍上昇する;
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約7.9倍上昇する、
4−メトキシフェノールの非存在下に比べて500μMの4−メトキシフェノールの存在下で、少なくとも約8.5倍上昇する、
ギンゲロールの非存在下に比べて1.5mMのギンゲロールの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
ショウガオールの非存在下に比べて0.25mMのショウガオールの存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリン酸ジエチルアミドの非存在下に比べて500μMのバニリン酸ジエチルアミドの存在下で、少なくとも約3.7倍上昇する、
イソオイゲノールの非存在下に比べて500μMのイソオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.6倍上昇する、
イソバニリン酸の非存在下に比べて500μMのイソバニリン酸の存在下で、少なくとも約5.7倍上昇する、
o−バニリンの非存在下に比べて500μMのo−バニリンの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
トランスフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのトランスフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する、
イソフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのイソフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
イソクレオソールの非存在下に比べて500μMのイソクレオソールの存在下で、少なくとも約12.6倍上昇する、
4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの非存在下に比べて500μMの4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの存在下で、少なくとも約9.8倍上昇する、
ヘスペレチンの非存在下に比べて500μMのヘスペレチンの存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の非存在下に比べて500μMの3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の存在下で、少なくとも約5.9倍上昇する、
イソバニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのイソバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
クレオソールの非存在下に比べて500μMのクレオソールの存在下で、少なくとも約9.7倍上昇する、
o−バニリン酸の非存在下に比べて500μMのo−バニリン酸の存在下で、少なくとも約7.2倍上昇する、
バニリン酸メチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸メチルの存在下で、少なくとも約7.4倍上昇する、
メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の非存在下に比べて500μMのメチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
5−ニトログアイアコールの非存在下に比べて500μMの5−ニトログアイアコールの存在下で、少なくとも約3.6倍上昇する、
スコポレチンの非存在下に比べて500μMのスコポレチンの存在下で、少なくとも約8.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約3.4倍上昇する、
バニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約6.5倍上昇する、
バニリン酸エチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸エチルの存在下で、少なくとも約1.5倍上昇する、
コニフェリルアルコールの非存在下に比べて500μMのコニフェリルアルコールの存在下で、少なくとも約1.8倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する。
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する;
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも約8.2倍上昇する;
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約5.0倍上昇する;
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも約2.8倍上昇する;
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.4倍上昇する;
DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも約5.1倍上昇する;
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する;
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇する;
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも約6.3倍上昇する;
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも約3.9倍上昇する;
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約4.8倍上昇する、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約7.9倍上昇する、
4−メトキシフェノールの非存在下に比べて500μMの4−メトキシフェノールの存在下で、少なくとも約8.5倍上昇する、
ギンゲロールの非存在下に比べて1.5mMのギンゲロールの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
ショウガオールの非存在下に比べて0.25mMのショウガオールの存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリン酸ジエチルアミドの非存在下に比べて500μMのバニリン酸ジエチルアミドの存在下で、少なくとも約3.7倍上昇する、
イソオイゲノールの非存在下に比べて500μMのイソオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.6倍上昇する、
イソバニリン酸の非存在下に比べて500μMのイソバニリン酸の存在下で、少なくとも約5.7倍上昇する、
o−バニリンの非存在下に比べて500μMのo−バニリンの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
トランスフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのトランスフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する、
イソフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのイソフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
イソクレオソールの非存在下に比べて500μMのイソクレオソールの存在下で、少なくとも約12.6倍上昇する、
4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの非存在下に比べて500μMの4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの存在下で、少なくとも約9.8倍上昇する、
ヘスペレチンの非存在下に比べて500μMのヘスペレチンの存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の非存在下に比べて500μMの3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の存在下で、少なくとも約5.9倍上昇する、
イソバニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのイソバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
クレオソールの非存在下に比べて500μMのクレオソールの存在下で、少なくとも約9.7倍上昇する、
o−バニリン酸の非存在下に比べて500μMのo−バニリン酸の存在下で、少なくとも約7.2倍上昇する、
バニリン酸メチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸メチルの存在下で、少なくとも約7.4倍上昇する、
メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の非存在下に比べて500μMのメチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
5−ニトログアイアコールの非存在下に比べて500μMの5−ニトログアイアコールの存在下で、少なくとも約3.6倍上昇する、
スコポレチンの非存在下に比べて500μMのスコポレチンの存在下で、少なくとも約8.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約3.4倍上昇する、
バニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約6.5倍上昇する、
バニリン酸エチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸エチルの存在下で、少なくとも約1.5倍上昇する、
コニフェリルアルコールの非存在下に比べて500μMのコニフェリルアルコールの存在下で、少なくとも約1.8倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約7.8倍上昇する。
フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも約2.3倍上昇し、
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇し、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約3.8倍上昇し、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約6.9倍上昇する
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの特徴を上記の特徴に追加してあるいは独立して有する。
フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも約2.3倍上昇し、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約4.2倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの特徴を上記の特徴に追加してあるいは独立して有する。
リン酸二水素カリウム(KH2PO4)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、169−04245)
硝酸アンモニウム(NH4NO3)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、017−03235)
塩化カリウム(KCl)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、163−03545)
硫酸マグネシウム七水和物、和光純薬工業株式会社(試薬特級、131−00405)
ウシ血清(Bovine serum),成体(Adult)、Sigma(B5433)。
本明細書において用いられる生化学的手法、微生物学的手法は、当該分野において周知であり慣用されるものであり、例えば、以下を挙げることができる。「プロバイオティクス・プレバイオティクス・バイオジェニックス」(財団法人日本ビフィズス菌センター監修、光岡知足編集);「標準微生物学」(医学書院、山西弘一監修、平松啓一・中込治編集);「乳酸菌実験マニュアル −分離から同定までー」(朝倉書店、小崎道雄監修、内村泰・岡田早苗著);「プロバイオティクスとバイオジェニクス 科学的根拠と今後の開発展望」(株式会社NTS、伊藤喜久治編集代表);「乳酸菌の保健機能と応用」(シーエムシー出版、上野川修一監修);Lactic Acid Bacteria: Microbiological and Functional Aspects, Fourth Edition(Crc Pr I Llc、Seppo Salminen);Handbook of Probiotics and Prebiotics(Wiley−Interscience、Seppo Salminen)およびHandbook of Probiotics(Wiley−Interscience、Yuan−Kun, Koji Nomoto, Seppo Salminen, Sherwood L. Gorbach)。
本実施例では、フェルラ酸等のグアイアコール骨格を有する化合物を認識する微生物の新規選抜法を開発した。
(グアイアコール骨格を有する化合物を認識する微生物の新規選抜法)
(培地)
1.45mM MgSO4、8.92mM NH4NO3、4.79 mM KCl、3.96mM C6H12O6、2.62mM KH2PO4および30% Adult
bovine serumを含む培地(pH6.5, No.189−091201培地)を用いて、微好気(5%CO2、1%O2)条件下で培養した。
・D(+)−グルコース(C6H12O6)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、041−00595)
・リン酸二水素カリウム(KH2PO4)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、169−04245)
・硝酸アンモニウム(NH4NO3)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、017−03235)
・塩化カリウム(KCl)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、163−03545)
・硫酸マグネシウム七水和物、和光純薬工業株式会社(試薬特級、131−00405)・ウシ血清(Bovine serum),成体(Adult)、Sigma(B5433)。
本研究で供試したフェルラ酸の化学構造を以下に示す。
PRISM (Prism software, CA, USA)により、得られたすべてのデータを統計解析した。
得られた菌株は、L.plantarum TO1000、TO1001、TO1002またはTO1003(受託番号NITE P−958、NITE P−959、NITE P−960またはNITE P−961)として、平成22年7月7日に独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター(千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8)に寄託された。
本実施例から、期待できる本選抜法の有用性は以下のとおりである。本研究で発明した選抜技術により、様々な環境由来の微生物のスクリーニングが可能である。例えば、ヒトや家畜糞便由来のプロバイオティック乳酸菌について、抗生物質または抗酸化物質として知られるフェルラ酸の認識性を指標として選抜することにより、宿主由来である安全性が担保され、将来的に、環境変化認知時に有害微生物を積極的に競合排除しながら消化管環境を維持する機能性食品や飼料の開発が期待できる。食品残さ、サイレージ、発酵TMRには、「食品・植物由来グアイアコール骨格化合物」も含まれることから、これらの素材を有効利用した家畜発酵飼料を調製する場合に、本選抜技術により選抜された乳酸菌が「飼料調製用乳酸菌添加物」としての有効活用されることが期待できる。さらに、糞便由来の大腸菌等の有害微生物の選抜した場合は、環境変化認知時に急激に増殖する有害微生物を特定することに繋がり、当該微生物に対する殺菌・静菌効果を期待した創薬にも資することが期待される。
本実施例で供試した微生物は牧草サイレージ由来乳酸菌であるL. plantarumであり、家畜飼料用の発酵貯蔵飼料より頻繁に分離される菌種として既に多数の報告がある(Rossi F. & Dellaglio F., Journal of Applied Microbiology (2007)Vol.103, 1707−1715; Ennahar S. et al., Applied and Environmental Microbiology (2003)Vol.69, 444−451; Stevenson D−M., et al., Applied microbiology and biotechnology (2006)Vol.71, 329−338など)。いずれの場合も、各飼料の懸濁液から、乳酸菌用培地により容易かつ頻繁に分離されている。容易に分離されている菌種であるが、グアイアコール骨格化合物認識性については公知の事実ではなく、本実施例の選抜法により、広くL.plantarumなどの乳酸菌株の、フェルラ酸等のグアイアコール骨格化合物認識性について評価可能であると考えられる。
次に実施例1で分離したTO1002以外の他の菌株について、グアイアコール骨格化合物の代表例であるフェルラ酸についてその認識能力の実験を行った。
フェルラ酸のL.plantarum TO1000、TO1001、TO1003、JCM1149株に対する増殖促進活性の結果(培養後の培養液の濁度)を図2に、培地のpHを図3に示す。フェルラ酸に対して、標準株を含めTO1002株と同様の増殖活性化傾向を示した。また、pH値は、増殖活性が認められると低下するが、いずれもpH5.0以上であった。
次に実施例1で分離した代表菌株TO1002について、フェルラ酸以外のグアイアコール骨格化合物の代表例としてバニリン、ヒドロキシフェルラ酸およびカプサイシンについてその認識能力の実験を行った。
バニリン、ヒドロキシフェルラ酸およびカプサイシンのL.plantarum TO1002株に対する増殖促進活性について、図4Aに濁度を示し、図4Bに培地のpHを示す。グアイアコール骨格を有するフェルラ酸以外の化合物であるバニリン、ヒドロキシフェルラ酸およびカプサイシンに対しても、本発明の菌株はフェルラ酸に対するのと同様の増殖活性化傾向を示した。また、pH値は、増殖活性が認められると低下するが、いずれもpH5.0以上であった。
次に実施例1で分離した代表菌株TO1002について、実施例1〜3で使用した化合物以外のグアイアコール骨格化合物の代表例として4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)、DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩、DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)、3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩、ホモバニリン酸(HVA)、バニリン酸(VA)、ホモバニリルアルコール(MOPET)、メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩、グアイアコール、3−メトキシフェノール、4−メトキシフェノール、アニソール、フェノール、ギンゲロール、ショーガオール、バニリン酸ジエチルアミド、イソオイゲノール、オイゲノール、イソバニリン酸、o−バニリン、トランスフェルラ酸、イソフェルラ酸、イソクレオソール、4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オン、ヘスペレチン、3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸、イソバニリルアルコール、クレオソール、o−バニリン酸、バニリン酸メチル、メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩、5−ニトログアイアコール、スコポレチン、シリビン、バニリルアルコール、バニリン酸エチル、コニフェリルアルコール、バニリン酸ジエチルアミド、イソオイゲノール、イソバニリン酸、o−バニリン、トランスフェルラ酸、イソフェルラ酸、イソクレオソール、4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オン、ヘスペレチン、3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸、イソバニリルアルコール、クレオソール、o−バニリン酸、バニリン酸メチル、メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩、5−ニトログアイアコール、スコポレチン、シリビン、バニリルアルコール、バニリン酸エチル、コニフェリルアルコールおよびオイゲノール、についてその認識能力の実験を行った。
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)、DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩、DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)、3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩、ホモバニリン酸(HVA)、バニリン酸(VA)、ホモバニリルアルコール(MOPET)、およびメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩のL.plantarum TO1002株に対する増殖促進活性について、図5に濁度を示し、図6に培地のpHを示す。実施例1〜3において実証した化合物以外のグアイアコール骨格を有する数多くの他の化合物に対しても、本発明の菌株はフェルラ酸、バニリン、ヒドロキシフェルラ酸およびカプサイシンに対するのと同様の増殖活性化傾向を示した。また、pH値は、増殖活性が認められると低下するが、いずれもpH5.0以上であった。
本実施例では、4−メトキシフェノール骨格(例えば、4−メトキシフェノール等)を有する化合物を認識する微生物の新規選抜法を開発した。
(4−メトキシフェノール骨格を認識する微生物の新規選抜法)
1.45mM MgSO4、8.92mM NH4NO3、4.79 mM KCl、3.96mM C6H12O6、2.62mM KH2PO4および30% Adult
bovine serumを含む培地(pH6.5, No.189−091201培地)を用いて、微好気(5%CO2、1%O2)条件下で培養した。
・D(+)−グルコース(C6H12O6)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、041−00595)
・リン酸二水素カリウム(KH2PO4)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、169−04245)
・硝酸アンモニウム(NH4NO3)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、017−03235)
・塩化カリウム(KCl)、和光純薬工業株式会社(試薬特級、163−03545)
・硫酸マグネシウム七水和物、和光純薬工業株式会社(試薬特級、131−00405)・ウシ血清(Bovine serum),成体(Adult)、Sigma(B5433)。
(実験方法)
本研究で供試した物質は4−メトキシフェノールである。
得られた菌株は、L.plantarum TO1000、TO1001、TO1002またはTO1003(受託番号NITE P−958、NITE P−959、NITE P−960またはNITE P−961)として、平成22年7月7日に独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター(千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8)に寄託された。
本実施例から、期待できる本選抜法の有用性は以下のとおりである。本研究で発明した選抜技術により、様々な環境由来の微生物のスクリーニングが可能である。例えば、ヒトや家畜糞便由来のプロバイオティック乳酸菌について、4−メトキシフェノール骨格含有化合物の認識性を指標として選抜することにより、宿主由来である安全性が担保され、将来的に、環境変化認知時に有害微生物を積極的に競合排除しながら消化管環境を維持する機能性食品や飼料の開発が期待できる。食品残さ、サイレージ、発酵TMRには、「食品・植物由来4−メトキシフェノール骨格含有化合物」も含まれることから、これらの素材を有効利用した家畜発酵飼料を調製する場合に、本選抜技術により選抜された乳酸菌が「飼料調製用乳酸菌添加物」としての有効活用されることが期待できる。さらに、糞便由来の大腸菌等の有害微生物の選抜した場合は、環境変化認知時に急激に増殖する有害微生物を特定することに繋がり、当該微生物に対する殺菌・静菌効果を期待した創薬にも資することが期待される。
本実施例で供試した微生物は牧草サイレージ由来乳酸菌であるL. plantarumであり、家畜飼料用の発酵貯蔵飼料より頻繁に分離される菌種として既に多数の報告がある(Rossi F. & Dellaglio F., Journal of Applied Microbiology (2007)Vol.103, 1707−1715; Ennahar S. et al., Applied and Environmental Microbiology (2003)Vol.69, 444−451; Stevenson D−M., et al., Applied microbiology and biotechnology (2006)Vol.71, 329−338など)。いずれの場合も、各飼料の懸濁液から、乳酸菌用培地により容易かつ頻繁に分離されている。容易に分離されている菌種であるが、グアイアコール骨格化合物認識性については公知の事実ではなく、本実施例の選抜法により、広くL.plantarumなどの乳酸菌株の、4−メトキシフェノール骨格含有化合物認識性について評価可能であると考えられる。
本実施例では、L.plantarum以外の他の乳酸菌を用いて、実施例1〜4と同様の実験を行った。本実施例では、Lactobacillus paraplantarum、Lactobacillus sakeiおよびLactobacillus caseiを用いた。
本実施例では、各菌株をより特徴付けるため、増殖活性は、1.45mM MgSO4、8.92mM NH4NO3、4.79 mM KCl、3.96mM C6H12O6、2.62mM KH2PO4および30% ウシ血清を含む培地(pH6.5)における増殖活性の変化を計算した。実施例1〜5と同様の実験を行なってその結果を、以下のような計算を行なった。以下には、まず、Lactobacillus plantarumの菌株でまとめた結果を示す。
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇し、
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも約8.2倍上昇し、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約5.0倍上昇し、
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも約2.8倍上昇し、
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.4倍上昇し、
DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも約5.1倍上昇し、
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.8倍上昇し、
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇し、
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも約6.3倍上昇し、
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも約3.9倍上昇し、
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約4.8倍上昇する。
試験したLactobacillus plantarumについては以下の活性も有する。
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約7.9倍上昇する、
4−メトキシフェノールの非存在下に比べて500μMの4−メトキシフェノールの存在下で、少なくとも約8.5倍上昇する、
ギンゲロールの非存在下に比べて1.5mMのギンゲロールの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
ショウガオールの非存在下に比べて0.25mMのショウガオールの存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリン酸ジエチルアミドの非存在下に比べて500μMのバニリン酸ジエチルアミドの存在下で、少なくとも約3.7倍上昇する、
イソオイゲノールの非存在下に比べて500μMのイソオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.6倍上昇する、
イソバニリン酸の非存在下に比べて500μMのイソバニリン酸の存在下で、少なくとも約5.7倍上昇する、
o−バニリンの非存在下に比べて500μMのo−バニリンの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
トランスフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのトランスフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する、
イソフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのイソフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
イソクレオソールの非存在下に比べて500μMのイソクレオソールの存在下で、少なくとも約12.6倍上昇する、
4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの非存在下に比べて500μMの4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの存在下で、少なくとも約9.8倍上昇する、
ヘスペレチンの非存在下に比べて500μMのヘスペレチンの存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の非存在下に比べて500μMの3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の存在下で、少なくとも約5.9倍上昇する、
イソバニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのイソバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
クレオソールの非存在下に比べて500μMのクレオソールの存在下で、少なくとも約9.7倍上昇する、
o−バニリン酸の非存在下に比べて500μMのo−バニリン酸の存在下で、少なくとも約7.2倍上昇する、
バニリン酸メチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸メチルの存在下で、少なくとも約7.4倍上昇する、
メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の非存在下に比べて500μMのメチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
5−ニトログアイアコールの非存在下に比べて500μMの5−ニトログアイアコールの存在下で、少なくとも約3.6倍上昇する、
スコポレチンの非存在下に比べて500μMのスコポレチンの存在下で、少なくとも約8.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約3.4倍上昇する、
バニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約6.5倍上昇する、
バニリン酸エチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸エチルの存在下で、少なくとも約1.5倍上昇する、
コニフェリルアルコールの非存在下に比べて500μMのコニフェリルアルコールの存在下で、少なくとも約1.8倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約7.8倍上昇する。
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇し、
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも約8.2倍上昇し、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約5.0倍上昇し、
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも約2.8倍上昇し、
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.4倍上昇し、
DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも約5.1倍上昇し、
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも約5.8倍上昇し、
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも約5.5倍上昇し、
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも約6.3倍上昇し、
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも約3.9倍上昇し、
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも約4.8倍上昇し、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約7.9倍上昇する、
4−メトキシフェノールの非存在下に比べて500μMの4−メトキシフェノールの存在下で、少なくとも約8.5倍上昇する、
ギンゲロールの非存在下に比べて1.5mMのギンゲロールの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
ショウガオールの非存在下に比べて0.25mMのショウガオールの存在下で、少なくとも約2.3倍上昇する、
バニリン酸ジエチルアミドの非存在下に比べて500μMのバニリン酸ジエチルアミドの存在下で、少なくとも約3.7倍上昇する、
イソオイゲノールの非存在下に比べて500μMのイソオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.6倍上昇する、
イソバニリン酸の非存在下に比べて500μMのイソバニリン酸の存在下で、少なくとも約5.7倍上昇する、
o−バニリンの非存在下に比べて500μMのo−バニリンの存在下で、少なくとも約6.1倍上昇する、
トランスフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのトランスフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する、
イソフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのイソフェルラ酸の存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
イソクレオソールの非存在下に比べて500μMのイソクレオソールの存在下で、少なくとも約12.6倍上昇する、
4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの非存在下に比べて500μMの4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの存在下で、少なくとも約9.8倍上昇する、
ヘスペレチンの非存在下に比べて500μMのヘスペレチンの存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の非存在下に比べて500μMの3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の存在下で、少なくとも約5.9倍上昇する、
イソバニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのイソバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約4.4倍上昇する、
クレオソールの非存在下に比べて500μMのクレオソールの存在下で、少なくとも約9.7倍上昇する、
o−バニリン酸の非存在下に比べて500μMのo−バニリン酸の存在下で、少なくとも約7.2倍上昇する、
バニリン酸メチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸メチルの存在下で、少なくとも約7.4倍上昇する、
メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の非存在下に比べて500μMのメチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の存在下で、少なくとも約6.6倍上昇する、
5−ニトログアイアコールの非存在下に比べて500μMの5−ニトログアイアコールの存在下で、少なくとも約3.6倍上昇する、
スコポレチンの非存在下に比べて500μMのスコポレチンの存在下で、少なくとも約8.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約3.4倍上昇する、
バニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのバニリルアルコールの存在下で、少なくとも約6.5倍上昇する、
バニリン酸エチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸エチルの存在下で、少なくとも約1.5倍上昇する、
コニフェリルアルコールの非存在下に比べて500μMのコニフェリルアルコールの存在下で、少なくとも約1.8倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約7.8倍上昇する(ただし、グアイアコール以下はTO0002株のみを測定)。
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇し、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも約3.8倍上昇し、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約5.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約6.9倍上昇する。
フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも約2.3倍上昇し、
グアイアコールの非存在下に比べて500mMのグアイアコールの存在下で、少なくとも約4.2倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも約2.7倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも約4.3倍上昇する。
本発明により同定した、化合物について、常法により次の組成からなる錠剤を製造する。本発明の成分は、グアイアコール骨格を有する化合物および/または4−メトキシフェノール骨格を有する化合物の場合は、一般の低分子化合物と同様に調製する。菌株を併用する場合は、乾燥させて菌株末とする。これらの錠剤は、例えば、本発明菌株を用いた発酵食品等と別途、併用処方することができる。
本発明の成分 100mg
乳 糖 60mg
馬鈴薯でんぷん 30mg
ポリビニルアルコール 2mg
ステアリン酸マグネシウム 1mg
タール色素 微量。
本発明により同定した化合物について、常法により次の組成からなる散剤を製造する。本発明の成分は、グアイアコール骨格を有する化合物および/または4−メトキシフェノール骨格を有する化合物の場合は、一般の低分子化合物と同様に調製する。菌株を併用する場合は、乾燥させて菌株末とする。これらの散剤は、例えば、本発明菌株を用いた発酵食品等と別途、併用処方することができる。
本発明の成分 150mg
乳 糖 280mg。
本発明により同定した化合物、菌株について、常法により次の組成からなるシロップ剤を製造する。本発明の成分は、グアイアコール骨格を有する化合物および/または4−メトキシフェノール骨格を有する化合物の場合は、一般の低分子化合物と同様に調製する。菌株を併用する場合は、乾燥させて菌株末とする。これらのシロップ剤は、例えば、本発明菌株を用いた発酵食品等と別途、併用処方することができる。
本発明の成分 100mg
精製白糖 40 g
p−ヒドロキシ安息香酸エチル 40mg
p−ヒドロキシ安息香酸プロピル 10mg
チョコフレーバー 0.1cc
これに水を加えて全量100ccとする。
本発明により同定したプロバイオティック乳酸菌について、常法により次の組成からなるはっ酵乳を製造する。本発明の菌株は、ヨーグルト発酵スターターと同時に添加することで、共発酵とする。乳酸菌スターターとしては、特に限定されなく、通常ヨーグルトの発酵に使用するものを用いることができる。
本発明の菌株 10kg
乳酸菌スターター 20kg
還元乳 800kg
糖類 10kg
安定剤 1kg。
本発明により同定したプロバイオティック乳酸菌について、常法により次の組成からなる家畜貯蔵発酵飼料を製造する。本発明の菌株を、例えば、飼料作物・牧草・食品副産物に添加し、常法のロールベール法等の保存処理を実施する。飼料作物・牧草・食品副産物としては、特に限定されなく、通常家畜飼料に使用するものを用いることができる。本発明の菌株の場合は、乾燥させて菌株末とし、使用する際に50gを10Lの水に溶解させ、飼料作物・牧草・食品副産物にスプレーする。
本発明の菌株 50 g
調合水 10kg
飼料作物・牧草・食品副産物 10 t。
本発明により同定した、プロバイオティック乳酸菌について、常法により次の組成からなるはっ酵乳を製造する。本発明の菌株は、ヨーグルト発酵スターターと同時に添加することで、共発酵とする。乳酸菌スターターとしては、特に限定されなく、通常ヨーグルトの発酵に使用するものを用いることができる。グアイアコール骨格を有する化合物および/または4−メトキシフェノール骨格を有する化合物の場合は、一般の低分子化合物と同様に調製する。
本発明の菌株 10kg
本発明の化合物 10kg
乳酸菌スターター 20kg
還元乳 800kg
糖類 10kg
安定剤 1kg。
本発明により同定したプロバイオティック乳酸菌について、常法により次の組成からなる家畜貯蔵発酵飼料を製造する。本発明の菌株を、例えば、飼料作物・牧草・食品副産物に添加し、常法のロールベール法等の保存処理を実施する。飼料作物・牧草・食品副産物としては、特に限定されなく、通常家畜飼料に使用するものを用いることができる。本発明の菌株の場合は、乾燥させて菌株末とし、使用する際に50gを本発明の化合物50gと同時に10Lの水に溶解させ、飼料作物・牧草・食品副産物にスプレーする。グアイアコール骨格を有する化合物および/または4−メトキシフェノール骨格を有する化合物の場合は、一般の低分子化合物と同様に調製する。
本発明の菌株 50 g
本発明の化合物 50 g
調合水 10kg
飼料作物・牧草・食品副産物 10 t。
NITE P−959
NITE P−960
NITE P−961
NITE P−1308
NITE P−1309
NITE P−1310
NITE P−1311
NITE P−1312
Claims (18)
- Lactobacillus属乳酸菌株であって、
該菌株の増殖活性が、1.45mM MgSO4、8.92mM NH4NO3、4.79 mM KCl、3.96mM C6H12O6、2.62mM KH2PO4および30% ウシ血清を含む培地(pH6.5)において、
フェルラ酸の非存在下に比べて500μMのフェルラ酸の存在下で、少なくとも5.5倍上昇する、との特徴を有する、菌株であって、該菌株は、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus paraplantarum、およびLactobacillus sakeiからなる群より選択される種に属する、菌株。 - 請求項1に記載のLactobacillus属乳酸菌株であって、該菌株が、 1.45mM MgSO 4 、8.92mM NH 4 NO 3 、4.79 mM KCl、3.96mM C 6 H 12 O 6 、2.62mM KH 2 PO 4 および30% ウシ血清を含む培地(pH6.5)において、
バニリンの非存在下に比べて500μMのバニリンの存在下で、少なくとも4.4倍上昇する、
ヒドロキシフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのヒドロキシフェルラ酸の存在下で、少なくとも8.2倍上昇する、
カプサイシンの非存在下に比べて500μMのカプサイシンの存在下で、少なくとも5.0倍上昇する、
4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の非存在下に比べて500μMの4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)の存在下で、少なくとも2.8倍上昇する、
DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのDL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも5.4倍上昇する、
DL−4−ヒドロキシ−3メトキシマンデル酸(VMA)の非存在下に比べて500μMのDL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)の存在下で、少なくとも5.1倍上昇する、
3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の非存在下に比べて500μMの3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩の存在下で、少なくとも5.8倍上昇する、
ホモバニリン酸(HVA)の非存在下に比べて500μMのホモバニリン酸(HVA)の存在下で、少なくとも5.5倍上昇する、
バニリン酸(VA)の非存在下に比べて500μMのバニリン酸(VA)の存在下で、少なくとも6.3倍上昇する、
ホモバニリルアルコール(MOPET)の非存在下に比べて500μMのホモバニリルアルコール(MOPET)の存在下で、少なくとも3.9倍上昇する、
メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の非存在下に比べて500μMのメタネフリン(Metanephrine)塩酸塩の存在下で、少なくとも4.8倍上昇する、
グアイアコールの非存在下に比べて500μMのグアイアコールの存在下で、少なくとも7.9倍上昇する、
4−メトキシフェノールの非存在下に比べて500μMの4−メトキシフェノールの存在下で、少なくとも8.5倍上昇する、
ギンゲロールの非存在下に比べて1.5mMのギンゲロールの存在下で、少なくとも6.1倍上昇する、
ショウガオールの非存在下に比べて0.25mMのショウガオールの存在下で、少なくとも2.3倍上昇する、
バニリン酸ジエチルアミドの非存在下に比べて500μMのバニリン酸ジエチルアミドの存在下で、少なくとも3.7倍上昇する、
イソオイゲノールの非存在下に比べて500μMのイソオイゲノールの存在下で、少なくとも4.6倍上昇する、
イソバニリン酸の非存在下に比べて500μMのイソバニリン酸の存在下で、少なくとも5.7倍上昇する、
o−バニリンの非存在下に比べて500μMのo−バニリンの存在下で、少なくとも6.1倍上昇する、
トランスフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのトランスフェルラ酸の存在下で、少なくとも4.3倍上昇する、
イソフェルラ酸の非存在下に比べて500μMのイソフェルラ酸の存在下で、少なくとも4.4倍上昇する、
イソクレオソールの非存在下に比べて500μMのイソクレオソールの存在下で、少なくとも12.6倍上昇する、
4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの非存在下に比べて500μMの4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オンの存在下で、少なくとも9.8倍上昇する、
ヘスペレチンの非存在下に比べて500μMのヘスペレチンの存在下で、少なくとも6.6倍上昇する、
3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の非存在下に比べて500μMの3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸の存在下で、少なくとも5.9倍上昇する、
イソバニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのイソバニリルアルコールの存在下で、少なくとも4.4倍上昇する、
クレオソールの非存在下に比べて500μMのクレオソールの存在下で、少なくとも9.7倍上昇する、
o−バニリン酸の非存在下に比べて500μMのo−バニリン酸の存在下で、少なくとも7.2倍上昇する、
バニリン酸メチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸メチルの存在下で、少なくとも7.4倍上昇する、
メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の非存在下に比べて500μMのメチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩の存在下で、少なくとも6.6倍上昇する、
5−ニトログアイアコールの非存在下に比べて500μMの5−ニトログアイアコールの存在下で、少なくとも3.6倍上昇する、
スコポレチンの非存在下に比べて500μMのスコポレチンの存在下で、少なくとも8.8倍上昇する、
シリビンの非存在下に比べて500μMのシリビンの存在下で、少なくとも3.4倍上昇する、
バニリルアルコールの非存在下に比べて500μMのバニリルアルコールの存在下で、少なくとも6.5倍上昇する、
バニリン酸エチルの非存在下に比べて500μMのバニリン酸エチルの存在下で、少なくとも1.5倍上昇する、
コニフェリルアルコールの非存在下に比べて500μMのコニフェリルアルコールの存在下で、少なくとも1.8倍上昇する、および
オイゲノールの非存在下に比べて500μMのオイゲノールの存在下で、少なくとも7.8倍上昇する
からなる群より選択される特徴の少なくとも1つの増殖活性の特徴をさらに有する、菌株。 - Lactobacillus plantarum TO1000(受託番号NITE P−958)、Lactobacillus plantarum TO1001(受託番号NITE P−959)、Lactobacillus plantarum TO1002(受託番号NITE P−960)、Lactobacillus plantarum TO1003(受託番号NITE P−961)、Lactobacillus paraplantarum LOOC 2020(受領番号:NITE AP−1308)、Lactobacillus sakei SG171(受領番号:NITE AP−1309)、またはLactobacillus casei LOOC82(受領番号:NITE AP−1310)であるLactobacillus属乳酸菌株。
- フェルラ酸、バニリン、ヒドロキシフェルラ酸、カプサイシン、4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニルグリコールヘミピペラジニウム塩(MHPG)、DL−ノルメタネフリン(Normetanephrine)塩酸塩、DL−4−ヒドロキシ−3−メトキシマンデル酸(VMA)、3−メトキシチラミン(3MT)塩酸塩、ホモバニリン酸(HVA)、バニリン酸(VA)、ホモバニリルアルコール(MOPET)、メタネフリン(Metanephrine)塩酸塩、グアイアコール、4−メトキシフェノール、ギンゲロール、ショウガオール、バニリン酸ジエチルアミド、イソオイゲノール、イソバニリン酸、o−バニリン、トランスフェルラ酸、イソフェルラ酸、イソクレオソール、4−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)−3−ブテン−2−オン、ヘスペレチン、3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸、イソバニリルアルコール、クレオソール、o−バニリン酸、バニリン酸メチル、メチル−3−(4−ヒドロキシ−3−メトキシフェニル)プロピオン酸塩、5−ニトログアイアコール、スコポレチン、シリビン、バニリルアルコール、バニリン酸エチル、コニフェリルアルコール、およびオイゲノールからなる群より選択される少なくとも1つの化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物を含む、請求項1〜3のいずれか1項に記載のLactobacillus属乳酸菌株の増殖のための組成物。
- 前記菌株は請求項3に記載の菌株である請求項4に記載の組成物。
- 前記化合物がフェルラ酸である、請求項4に記載の組成物。
- 前記菌株はLactobacillus plantarum TO1002(受託番号NITE P−960)である、請求項4に記載の組成物。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の菌株を含むプロバイオティクス組成物。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の菌株と請求項4に示される化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物とを組み合わせたシンバイオティクス組成物。
- 前記化合物は、体内で存在する場合に前記菌株の1×106コロニー形成単位(cfu)あたり少なくとも10μMで含まれる請求項9に記載の組成物。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の菌株と組み合わせて使用するための、請求項4に示される化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物を含むプレバイオティクス組成物。
- グアイアコール骨格を有する化合物および/または4−メトキシフェノールによって増殖活性が上昇する乳酸菌を選択する方法であって、該方法は、
A)乳酸菌を含む試料を提供する提供工程;
B)硫酸マグネシウム(MgSO4)、硝酸アンモニウム(NH4NO3)、塩化カリウム(KCl)、D−(+)−グルコース、リン酸二水素カリウム(KH2PO4)およびウシ血清を含む培地中で、グアイアコール骨格を有する化合物および/または4−メトキシフェノールの存在下または不存在下で該試料を培養する培養工程;および
C)該化合物の不存在下で増殖せず、かつ、存在下において増殖したか、または該化合物の存在下において不存在下よりも増殖が促進された菌株を分離する分離工程
を包含する、方法。 - 前記硫酸マグネシウムは、1.16〜1.74mM、前記硝酸アンモニウムは、8.02〜9.81mM、前記塩化カリウムは、3.83〜5.74mM、前記D−(+)−グルコースは3.96〜39.64mM、前記リン酸二水素カリウムは、2.09〜3.14mM、および前記ウシ血清は15〜30%で前記培地中に存在し、前記培地はpHが6.0〜7.0である、請求項12に記載の方法。
- 前記培養工程は、32〜48時間実施される、請求項12に記載の方法。
- 前記培養工程は、25〜40℃で実施される、請求項12に記載の方法。
- 前記培養工程は、0〜5%CO2、および1〜20%O2の条件下で実施される、請求項12に記載の方法。
- 前記乳酸菌は、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus paraplantarum、Lactobacillus sakeiおよびLactobacillus caseiからなる群より選択される種に属する、請求項12に記載の方法。
- 前記試料は、5×105〜5×106コロニー形成単位/wellの間で前記乳酸菌を含む、請求項17に記載の方法。
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