JP6028264B2 - 母体へのシアル酸補給 - Google Patents

Description

発明の詳細な説明

［発明の分野］
［0001］本発明は、シアル酸を含む補給剤と、胎児及び／又は子供に発達上の利益をもたらすことができるような補給剤の女性に対する使用とに関する。

［背景技術］
［0002］胎児又は子供の急速な成長及び発達は、母体の栄養供給にかなりの要求を突き付ける。例えば、Ｃｒａｗｆｏｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｅｄｉａｔｒ．１９９８；１５７：２３−２７を参照されたい。栄養不足は、胎児又は子供の成長及び構造／機能発達、特に、脳の成長及び発達に深刻な影響を及ぼす。細胞数や構造及びシナプス接続性を含む脳の成長は、懐胎２６週でそのピークに達し、生後１年を通して高速で進行する。この脳の成長期間は極めて重要である。なぜなら、一旦この時期を過ぎると、それは再開することができないからである。さらに、この成長期間は、早産児において特に重要である。例えば、Ｃｒａｗｆｏｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｅｄｉａｔｒ．１９９８；１５７：２３−２７を参照されたい。

［0003］多くの研究から、母乳で育った乳児は、ミルクで育った赤ん坊よりも良好な認知発達を達成し、かつ知能テストでより高い得点を獲得することが示されている。例えば、Ｍｏｒｔｅｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＭＡ ２００２；２８７：２３６５−２３７１を参照されたい。例えば、知能指数（ＩＱ）は、より長い期間母乳育児を受けている幼児、特に低出生体重児で高くなることが示されている。例えば、Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｊ Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．１９９９；７０：５２５−５３５を参照されたい。

［0004］ガングリオシド由来の複合脂質、及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）などの長鎖多価不飽和脂肪酸（ＬＣＰＵＦＡ）は、ヒトの母乳中に存在し、子供の視力や認知能力の改善に関係があるとされている。例えば、国際公開第２００９／０５１５０２ Ａ１号パンフレット及びＧｉｂｓｏｎ，Ｌａｎｃｅｔ １９９９；３５４：１９１９−１９２０を参照されたい。しかしながら、ヒトの母乳の他の成分が、胎児又は子供の脳の成長及び発達にとって重要である可能性がある。これらの因子、例えば、酵素、ホルモン、成長因子、及びシアル酸は、ヒトの母乳中に見られ、通常、乳児用調製粉乳ではあまり表示されていない。例えば、ＭｃＶｅａｇｈ ａｎｄ Ｍｉｌｌｅｒ，Ｊ．Ｐａｅｄｉａｔｒ．Ｃｈｉｌｄ Ｈｅａｌｔｈ １９９７；３３：２８１−２８６を参照されたい。

［0005］上記の因子のうち、シアル酸は、ヒトの母乳とヒトの脳の両方においてかなりの量で同時に存在することが示されている。例えば、ＭｃＶｅａｇｈ ａｎｄ Ｍｉｌｌｅｒ，Ｊ Ｐａｅｄｉａｔｒ．Ｃｈｉｌｄ Ｈｅａｌｔｈ １９９７；３３：２８１−２８６を参照されたい。シアル酸は、ガングリオシドの構造及び機能成分である、９炭素骨格を有する単糖、ノイラミン酸のＮ−又はＯ−置換誘導体の総称である。例えば、Ｅｓｓｅｎｔｉａｌｓ ｏｆ Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ．第２版，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ．第１４章のＶａｒｋｉ ａｎｄ Ｓｃｈａｕｅｒ（２００９）；及び図１を参照されたい。哺乳動物に見られる最も主要なシアル酸は、Ｎ−アセチルノイラミン酸（ＮＡＮＡ）である。

［0006］発生及び疾患病理におけるシアル酸の特定の役割が記載されている。例えば、シアル酸生合成の酵素であるウリジンジホスホ−Ｎ−アセチルグルコサミン（ＵＤＰ−ＧｌｃＮＡｃ）２−エピメラーゼ／Ｎ−アセチルマンノサミン（ＭａｃＮＡｃ）キナーゼ（ＧＮＥ／ＭＮＫ）をコードする遺伝子の不活化は、シアル酸レベルの低下、及び成人発症型の進行性神経筋障害である遺伝性封入体ミオパチー（ＨＩＢＭ）の発症と関連付けられている。例えば、Ｇａｌｅａｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２００７；１１７：１５８５−１５９４；Ｍａｌｉｃｄａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．２００９；１５：６９０−６９５；及びＨｕｉｚｉｎｇ ａｎｄ Ｋｒａｓｎｅｗｉｃｈ，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ ２００９；１７９２：８８１−８８７を参照されたい。また、ＵＤＰ−ＧｌｃＮＡｃ／ＭａｃＮＡｃ遺伝子の不活化は、マウスで早期胚性致死をもたらすことが記載されており、発生におけるＵＤＰ−ＧｌｃＮＡｃ／ＭａｃＮＡｃ遺伝子の役割を示唆している。例えば、Ｓｃｈｗａｒｚｋｏｐｆ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ２００２；９９：５２６７−５２７０を参照されたい。高齢者で免疫系を涵養し、かつ中枢及び末梢神経系の健康を回復するためのシアル酸の使用も記載されている。例えば、欧州特許出願公開第２１１６１４０ Ａ１号明細書及び同第２１１６１３９ Ａ１号明細書を参照されたい。

［0007］母親によるいくつかの栄養（例えば、ドコサヘキサエン酸）の摂取の増加は、その子供の脳の発達に利益をもたらすことができる。しかしながら、母親が自然に作るシアル酸の量で不十分であるという証拠はない。実施例に示すように、母体へのシアル酸の補給は、胎児又は子供に対する発達上の利益を明確にもたらし、母体へのシアル酸の補給が必要であることを示唆している。本発明は、本明細書に記載するように、受胎前、妊娠／懐胎期、及び／又は授乳期／出産後に女性に投与することができるシアル酸を提供することにより、この必要に応えるものである。

［0008］母体へのＮＡＮＡの補給はこれまでに記載されていないが、Ｈｅｄｌｕｎｄら（Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２００７；２７：４３４０−４３４６）は、Ｎｅｕ５Ｇｃを産生する遺伝子を欠くマウスに対する別のシアル酸、Ｎ−グリコリルノイラミン酸（Ｎｅｕ５Ｇｃ）の供給を報告した。この研究者らは、この遺伝子を欠く母獣にＮｅｕ５Ｇｃを供給しても、同じくこの遺伝子を欠く子獣にＮｅｕ５Ｇｃが移動しないことを報告した。さらに、成体哺乳動物は、十分なレベルのシアル酸を直ちに合成することが知られており、母親が母胎胎盤単位を通して胎児にシアル酸を供給するかどうかに関する明確な証拠はない。例えば、Ｂｒｉｅｓｅ ｅｔ ａｌ．，Ｚ．Ｇｅｂｕｒｔｓｈ．Ｎｅｏｎａｔｏｌ．１９９９；２０３：６３−６８を参照されたい。

［0009］最も急速な脳の発達（「脳の急成長」）は懐胎期に起こり、少なくとも生後１年の終わりにまで及ぶ。したがって、本発明は、脳の発達のこの極めて重要な時期に補給を提供することにより、シアル酸などの母体用補給剤の胎児又は子供に対する発達上の利益を最適化するものである。

［発明の概要］
［0010］本発明は、女性にシアル酸を提供するための組成物及び方法であって、受胎前、妊娠期、及び授乳期の少なくとも１つの間に、女性にシアル酸を投与することを含む、方法に関する。いくつかの実施態様では、シアル酸は、女性の胎児又は子供に発達上の利益を提供する。いくつかの実施態様では、シアル酸は、遊離シアル酸である。いくつかの実施態様では、シアル酸は、オリゴ糖コンジュゲート、脂質コンジュゲート、タンパク質コンジュゲート、及びそれらの組合せからなる群から選択される。いくつかの実施態様では、シアル酸は、３’シアリルラクトース、ガングリオシド、及びカゼイングリコマクロペプチドからなる群から選択される。いくつかの実施態様では、シアル酸は、ｎ−アセチルノイラミン酸の形態である。

［0011］いくつかの実施態様では、シアル酸は、シアル酸に代謝されるシアル酸前駆体である。いくつかの実施態様では、シアル酸前駆体は、Ｎ−アセチルマンノサミン、Ｎ−プロパノイルマンノサミン、２−ケト−３−デオキシノノン酸、Ｎ−グリコリルノイラミン酸、及びコアシアル酸ノイラミン酸分子からなる群から選択される。

［0012］いくつかの実施態様では、シアル酸は、妊娠期及び授乳期に投与される。いくつかの実施態様では、シアル酸は、受胎前、妊娠期、及び授乳期に投与される。いくつかの実施態様では、シアル酸は、生後最初の約２年間、投与される。

［0013］いくつかの実施態様では、発達上の利益は、胎児又は子供の神経系の成長及び／又は脳の発達もしくは成長の改善である。いくつかの実施態様では、発達上の利益は、脳の神経学的改善である。いくつかの実施態様では、発達上の利益は、成熟ミエリンの発現及び／又は発達の強化、神経突起伸張の促進、ミエリン塩基性タンパク質のレベルの増大、並びに脳の白質の発達の強化からなる群から選択される。いくつかの実施態様では、発達上の利益は、脳の灰白質に見られる。

［0014］いくつかの実施態様では、シアル酸は、剤形で女性に投与される。いくつかの実施態様では、剤形は、栄養補給剤、食品、医薬製剤、飲料、及びそれらの組合せからなる群から選択される。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の０．０１重量％〜１０重量％の量のシアル酸を含む。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の１０重量％〜９０重量％の量のシアル酸を含む。

［0015］いくつかの実施態様では、シアル酸は、女性の体重の５ｍｇ／ｋｇ／日〜２００ｍｇ／ｋｇ／日の量で女性に投与される。いくつかの実施態様では、シアル酸は、女性の体重の２５ｍｇ／ｋｇ／日〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の量で女性に投与される。いくつかの実施態様では、シアル酸は、２０ｍｇ／日〜４０００ｍｇ／日の量で女性に投与される。いくつかの実施態様では、シアル酸は、２００ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日の量で女性に投与される。

［0016］いくつかの実施態様では、本方法はさらに、シアル酸及び賦形剤を含む剤形で女性にシアル酸を投与することを含む。賦形剤は、例えば、多価不飽和脂肪酸、カルシウム、葉酸、ビタミンＥ、トコトリエノール、ビタミンＤ、マグネシウム、リン、ビタミンＫ、鉄、ビタミンＢ１２、ナイアシン、チアミン、リボフラビン、ビオチン、ビタミンＢ６、及びイソフラボン、亜鉛、パントテン酸、中鎖トリグリセリド、銅、マンガン、マグネシウム、ビタミンＡ、コリン、ビタミンＣ、ヨウ素、セレン、プレバイオティクス、プロバイオティクス、β−カロテン、ルテイン、リコピン、α−カロテン、ゼアキサンチン、β−クリプトキサンチン、γカロテン、ジンジャー、並びにトリプトファンのうちの１つ又は複数であり得る。

［0017］本発明は、添付の図面と併せた以下の詳細な説明によって、より完全に理解及び認識されるであろう。

シアル酸ファミリーのメンバーを示す図である。 シアル酸補給食を受容するラットの食事療法を示し、その効果は実施例に記載されている。 シアル酸補給食を受容するラットの食事療法を示し、その効果は実施例に記載されている。 シアル酸補給食を受容するラットの食事療法を示し、その効果は実施例に記載されている。 Ａは、発達する子孫（ラット）の脳における、β−アクチン発現に対して正規化した、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の発現に対する母体へのシアル酸補給の効果を示す。Ｂは、発達する子孫（ラット）の脳における、β−アクチン発現に対して正規化した、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の発現に対する母体へのシアル酸補給の効果を示す。 Ａは、子孫に由来する海馬細胞の培養物における神経突起伸張に対する母体へのシアル酸補給の効果を示す。Ｂは、子孫に由来する海馬細胞の培養物における神経突起伸張に対する母体へのシアル酸補給の効果を示す。Ｃは、子孫に由来する海馬細胞の培養物における神経突起伸張に対する母体へのシアル酸補給の効果を示す。 子孫に由来する海馬細胞の培養物における神経突起伸張に対する母体へのシアル酸補給の効果を示す。 子孫に由来する海馬細胞の培養物における神経突起伸張に対する母体へのシアル酸補給の効果を示す。 Ａは、発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。Ｂは、発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。Ｃは、発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現の厚みに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現のレベルに対するシアル酸補給の効果を示す。 発達するラット脳の特定の領域におけるＭＢＰ発現のレベルに対するシアル酸補給の効果を示す。 ＮＡＮＡ投与後の脳脊髄液（ＣＳＦ）中のＮＡＮＡ及びＮｅｕ５Ｇｃ濃度を示す。 ＮＡＮＡ投与後の脳脊髄液（ＣＳＦ）中のＮＡＮＡ及びＮｅｕ５Ｇｃ濃度を示す。

［発明を実施するための形態］
［0024］本発明は、例えば、シアル酸の栄養補給によって、女性、胎児、及び／又は子供の健康及び成長を改善するための方法及び組成物を提供する。いくつかの実施態様では、シアル酸を、妊娠前、妊娠中、及び／又は妊娠後に女性に投与して、本明細書にさらに記載される発達上の利益を含む、胎児及び／又は子供の健康及び発達を改善することができる。シアル酸は、本明細書にさらに記載される剤形を含む、補給剤中で種々の形態であり得る。

［定義］
［0025］本明細書で使用されるとき、本発明の「子供」には、出産の時から出産後約２年まで又は母乳育児を止めてしまう時までの、どちらか長い方の年齢の任意の性別の個体又は対象が含まれるが、これらに限定されない。この用語には、乳児及び幼児が含まれる。

［0026］本明細書で使用されるとき、本発明の「女性」には、胎児又は子供の生物学上の母親、胎児の代理母（ｓｕｒｒｏｇａｔｅ ｃａｒｒｉｅｒ）である個体又は対象、及び子供を母乳育児する個体又は対象が含まれるが、これらに限定されない。この用語には、妊娠しようと試みている個体又は対象も含まれる。

［0027］本明細書で使用されるとき、本発明の「母体用補給剤」は、本明細書に記載の任意の女性に投与され、かつそのような女性にとって有用であり得る。

［0028］本明細書で使用されるとき、「母乳育児」には、女性の乳房から栄養を供給すること（例えば、養育）及びボトルから子供に母乳を供給すること（例えば、人工栄養）が含まれるが、これらに限定されない。これには、その子供に対して母乳育児と乳児用調製粉乳供給の両方（例えば、部分的母乳育児）を行なう女性が含まれる。

［0029］本明細書で使用されるとき、「シアル酸」という用語は、９炭糖ノイラミン酸の誘導体の既知のファミリーの、単独又は１種以上の他のメンバーと組み合わせた、任意のメンバーを指す。この用語には、任意のシアル酸置換体又は変異体、及び当技術分野で公知でありかつ本明細書に記載されているシアル酸の任意の前駆体が含まれる。この用語には、共役型及び非共役型のシアル酸及び遊離シアル酸が含まれる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、Ｎ−アセチルノイラミン酸である。

［0030］本明細書で使用されるとき、「シアル酸補給」は、胎児及び／又は子供に対する発達上の利益をもたらす女性へのシアル酸の投与を指す。

［0031］本明細書で使用されるとき、「シアル酸の前駆体」又は「シアル酸前駆体」は、代謝されてシアル酸を形成する化合物を指す。実施態様では、シアル酸前駆体は、Ｎ−アセチルマンノサミン、Ｎ−プロパノイルマンノサミン、２−ケト−３−デオキシノノン酸（ＫＤＮ）、Ｎ−グリコリルノイラミン酸（Ｎｅｕ５Ｇｃ）、コアシアル酸ノイラミン酸分子（Ｎｅｕ）、及びそれらの組合せを含むことができるが、これらに限定されない。

［0032］本明細書で使用されるとき、「発達上の利益」は、胎児又は子供の発達又は成長に関する因子の改善を指す。胎児又は子供の発達上の利益は、本明細書にさらに記載されるような、神経系の成長及び／又は発達の強化、神経学的改善、成熟ミエリンの発現及び／又は発達の増大、神経突起伸張（例えば、海馬内）の増大、ミエリン塩基性タンパク質のレベルの増加（例えば、全脳、小脳、脳梁、前頭及び／又は吻側脳梁、中央脳梁、正中線脳梁交叉、外側嗅索、運動出力経路、感覚入力経路、運動錐体、及び／又は内側毛帯内）、白質の発達の増大（例えば、脳梁、外側嗅索、又は上記のような、しかし、上記のものに限定されない他の白質路内）、並びに海馬発達の強化のうちの１つ又は複数を含むことができるが、これらに限定されない。

［0033］本明細書で使用されるとき、「受胎前」は、女性が妊娠しようと試みている期間を指す。いくつかの実施態様では、受胎前のシアル酸の投与は、受胎から女性が自身の妊娠を自覚する時か、又は妊娠が確認される時までの期間、有用である。

［0034］本明細書で使用されるとき、「妊娠／懐胎」、「妊娠」、及び「懐胎」という用語は、受胎から胎児の出産までの期間を指す。妊娠／懐胎期には、第Ｉ期（第１期）、第ＩＩ期（第２期）、及び第ＩＩＩ期（第３期）が含まれる。

［0035］本明細書で使用されるとき、「授乳／出産後」、「授乳」、及び「出産後」という用語は、胎児の出産から出産後約２年又は母乳育児を止める時までの期間を指す。

［シアル酸］
［0036］シアル酸には、９炭糖ノイラミン酸（５−アミノ−３，５−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノヌルソン酸）の５０を超える既知の誘導体のファミリーが含まれる。例えば、Ｓｃｈａｕｅｒ，Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ．Ｊ．２０００；１７：４８５−４９９及び図１を参照されたい。個々の化合物又は部分として、シアル酸は、９炭素アミノ糖であり、その構造は、化学文献ですぐに記載される。例えば、Ｋｏｎｔｏｕ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００９；３９０：５７５−５７９を参照されたい。シアル酸ファミリーの１つの分岐は、ヒトで最も多く存在する形態のシアル酸であるＮ−アセチルノイラミン酸を形成するようにＮ−アセチル化されている。例えば、Ｋｏｎｔｏｕ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００９；３９０：５７５−５７９を参照されたい。Ｎ−アセチルノイラミン酸の他の一般に認められている名称には、シアル酸；Ｏ−シアル酸；５−アセトアミド−３，５−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−２−ノヌロソン酸；５−アセトアミド−３，５−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクトヌロソン酸；アセノイラミン酸；Ｎ−アセチル−ノイラミネート；Ｎ−アセチルノイラミン酸；ＮＡＮＡ；及びＮｅｕ５Ａｃが含まれる。

［0037］シアル酸分子が２カ所以上の位置で置換されて、Ｏ−置換がＣ４、Ｃ７、Ｃ８、及びＣ９で生じることがある（Ｏ−アセチル、Ｏ−メチル、Ｏ−スルフェート、及びリン酸基）。Ｃ２とＣ３の間の二重結合の導入は、多種多様な可能な異性体を生じることができる。例えば、Ｋｏｎｔｏｕ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００９；３９０：５７５−５７９及び図１を参照されたい。別の修飾は、糖の５位にアミノ基の代わりにヒドロキシル基が存在することであり、これにより、魚の卵や赤血球で発見されている、２−ケト−３−デオキシ−ノヌロソン酸（ＫＤＮ）が生じる。例えば、Ｋｏｎｔｏｕ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００９；３９０：５７５−５７９及びＩｎｏｕｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８；２７３：２７１９９−２７２０４を参照されたい。

［シアル酸の供給源］
［0038］動物、植物、及び微生物供給源を含むが、これらに限定されない、シアル酸の任意の供給源を本発明の組成物及び方法で用いることができる。例示的な供給源としては、単量体形態又は結合した形態のシアル酸、例えば、単量体Ｎ−アセチル−ノイラミン酸又はポリシアル酸；タンパク質に結合したシアル酸、例えば、カゼイングリコマクロペプチド又はムチン；糖質に結合したシアル酸、例えば、シアリルラクトース又はシアリル化細菌莢膜多糖類；及び脂質に結合したシアル酸、例えば、ガングリオシドが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様では、シアル酸は、タンパク質、糖質、又は脂質に結合していない。いくつかの実施態様では、シアル酸は、タンパク質に結合していない。いくつかの実施態様では、シアル酸は、糖質ではない。いくつかの実施態様では、シアル酸は、脂質に結合していない。いくつかの実施態様では、シアル酸は、ガングリオシド又は他の糖脂質の一部ではない。

［0039］いくつかの実施態様では、シアル酸は、シアル酸に代謝されるシアル酸の前駆体を提供することにより提供することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸前駆体は、Ｎ−アセチルマンノサミン、Ｎ−プロパノイルマンノサミン、２−ケト−３−デオキシノノン酸（ＫＤＮ）、Ｎ−グリコリルノイラミン酸（Ｎｅｕ５Ｇｃ）、コアシアル酸ノイラミン酸分子（Ｎｅｕ）、又はそれらの組合せであり得る。例えば、Ｋｏｎｔｏｕ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００９；３９０：５７５−５７９；及びＧａｇｉａｎｎｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ２００７；１７７０：２９７−３０６を参照されたい。

［0040］いくつかの実施態様では、好適なシアル酸供給源は、天然物又は合成物のいずれかであることができ、かつ天然に存在し、かつ現在同定されているシアル酸誘導体のいずれかを含むことができ、このシアル酸誘導体としては、遊離シアル酸、オリゴ糖コンジュゲート（例えば、シアリルオリゴ糖）、脂質コンジュゲート（例えば、糖脂質）、タンパク質コンジュゲート（例えば、糖タンパク質）、及びそれらの組合せを挙げることができる。

［0041］いくつかの実施態様では、好適なシアル酸供給源は、天然物又は合成物を問わず、ヒト母乳中に一般に見られるシアリルオリゴ糖を含むことができる。いくつかの実施態様では、シアリルオリゴ糖は、３’シアリルラクトース（３’ＳＬ）及び／又は６’シアリルラクトース（６’ＳＬ）であり得る。他の好適なシアリルオリゴ糖としては、オリゴ糖に結合した１個以上のシアル酸分子を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。

［0042］本明細書で用いられる他の好適なシアル酸としては、限定するものではないが、幼児用調製粉乳に用いるのに好適でもある任意の対応する糖脂質が挙げられ、これには、スフィンゴシン、グルコース、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン、及びＮ−アセチルノイラミン酸分子が含まれるが、これらに限定されない。そのようなシアル酸化合物としては、シアリル化されていることが知られている、ヒト母乳中に一般に見られるいくつかの糖タンパク質（例えば、κ−カゼイン、α−ラクトアルブミン、及びラクトフェリン）のいずれか１つ又は複数を挙げることもできるが、これらに限定されない。

［0043］いくつかの実施態様では、シアル酸の好適な供給源としては、哺乳動物ミルクの単離物、濃縮物、及び／もしくは抽出物、又は乳製品を挙げることができ、これらには、ヒト母乳及び牛乳が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様では、牛乳は、本明細書で用いられる供給源であることができ、これには、本明細書に記載の栄養強化乳漿タンパク質濃縮物が含まれるが、これに限定されない。いくつかの実施態様では、本明細書で用いるのに好適なシアル酸の個々の供給源としては、Ａｒｉａ Ｆｏｏｄ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，Ｄｅｎｍａｒｋから入手可能なＬａｃｐｒｏｄａｎ ＣＧＭＰ−１０（４．２％のシアル酸を含むカゼイングリコマクロペプチド）；及びＤａｖｉｓｃｏ Ｆｏｏｄｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｅｄｅｎ Ｐｒａｉｒｉｅ，Ｍｉｎｎ．，ＵＳＡから入手可能なＢｉｏｐｕｒｅグリコマクロペプチド（７〜８％のシアル酸を含む）を挙げることができるが、これらに限定されない。

［剤形］
［0044］いくつかの実施態様では、シアル酸は、組成物もしくは剤形、例えば、栄養補給剤、食品、医薬製剤、飲料、又はそれらの組合せとして、女性に投与することができる。いくつかの実施態様では、剤形は、食品、飲料、及び／又は栄養補給剤である。いくつかの実施態様では、剤形は、食品及び／又は飲料である。いくつかの実施態様では、剤形は、食品である。いくつかの実施態様では、剤形は、処方箋のいる又は処方箋のいらない母親用出生前ビタミン剤を含むが、これに限定されない、栄養補給剤である。そのような剤形の調製物は当業者に周知である。

［0045］いくつかの実施態様では、シアル酸は、医薬製剤に入れて投与することができる。そのような医薬製剤の例としては、チュワブル錠、速溶錠、発泡錠、再構成可能な散剤、エリキシル剤、液剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤、錠剤、多層錠、二層錠、カプセル剤、軟ゼラチンカプセル剤、硬ゼラチンカプセル剤、カプレット剤、ロゼンジ剤、チュワブルロゼンジ剤、ビーズ、散剤、顆粒剤、粒子、微粒子、分散性顆粒剤、カシェー剤、膣洗浄液、坐剤、クリーム剤、局所剤、吸入剤、エアゾール吸入剤、貼付剤、粒子吸入剤、インプラント、デポ型インプラント、摂取可能剤、注射液、注入液、健康バー、糖菓、シリアル、シリアルコーティング、栄養食品、機能性食品、及び／又はそれらの組合せである剤形が挙げられるが、それに限定されない。そのような医薬製剤の調製物は当業者に周知である。

［0046］いくつかの実施態様では、剤形は、焼き菓子及び／もしくはミックス；チューインガム；朝食用シリアル；チーズ製品；ナッツ及び／もしくはナッツ製品；ゼラチン、プリン、及び／もしくは缶詰；冷凍酪農製品；乳製品；酪農製品；ソフトキャンディー；スープ及び／もしくはスープミックス；スナック食品；果物ジュース；野菜ジュース；脂肪及び／もしくは油；魚製品；植物タンパク質製品；家禽食品；並びに／又は肉製品である。いくつかの実施態様では、剤形は、製菓（例えば、チョコレート）及び／又は強化バーである。そのような剤形の調製物は当業者に周知である。

［シアル酸投与及び投薬量］
［0047］剤形中のシアル酸の量は、個体又は女性の疾患状態、年齢、性別、及び重量などの因子によって変わり得る。投薬レジメンを、最適なシアル酸補給及び／又は発達上の利益を提供するように調整することができる。投薬レジメンを、様々なレベルの１種以上のシアル酸を含むように調整することもできる。いくつかの実施態様では、様々なレベルのシアル酸を、受胎前、妊娠、又は出産後の各段階に適合させることができる。本発明の剤形の仕様は、例えば、特定のシアル酸の固有の特徴や達成すべき特定の発達上の利益に左右されるか、又はそれに直接的に依存し得る。

［0048］いくつかの実施態様では、本発明の方法で有用な剤形は、剤形の少なくとも０．０１重量％、少なくとも０．１重量％、少なくとも０．２重量％、少なくとも０．３重量％、少なくとも０．４重量％、少なくとも０．５重量％、少なくとも０．６重量％、少なくとも０．７重量％、少なくとも０．８重量％、少なくとも０．９重量％、少なくとも１．０重量％、少なくとも１．５重量％、少なくとも２重量％、少なくとも２．５重量％、少なくとも３重量％、少なくとも３．５重量％、少なくとも４重量％、少なくとも４．５重量％、少なくとも５重量％、少なくとも５．５重量％、少なくとも６重量％、少なくとも６．５重量％、少なくとも７重量％、少なくとも７．５重量％、少なくとも８重量％、少なくとも８．５重量％、少なくとも９重量％、少なくとも９．５重量％、少なくとも１０重量％、少なくとも１５重量％、少なくとも２０重量％、少なくとも２５重量％、少なくとも３０重量％、少なくとも３５重量％、少なくとも４０重量％、少なくとも４５重量％、少なくとも５０重量％、少なくとも５５重量％、少なくとも６０重量％、少なくとも６５重量％、少なくとも７０重量％、少なくとも７５重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも８５重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９５重量％、少なくとも９９重量％又は少なくとも９９．５重量％の量のシアル酸を含むことができ、かつ有用な範囲は、これらの値のいずれかの間、例えば、剤形の０．０１重量％〜９９重量％、０．０１重量％〜１重量％、０．１重量％〜１０重量％、０．５重量％〜１０重量％、１重量％〜５重量％、５重量％〜２５重量％、５重量％〜９５重量％、５重量％〜８０重量％、１０重量％〜９５重量％、１５重量％〜９５重量％、２０重量％〜９５重量％、２５重量％〜９５重量％、３０重量％〜９５重量％、３５重量％〜９５重量％、４０重量％〜９５重量％、４５重量％〜９５重量％、５０重量％〜９５重量％、１重量％〜９９重量％、５重量％〜９９重量％、１０重量％〜９９重量％、１５重量％〜９９重量％、２０重量％〜９９重量％、２５重量％〜９９重量％、３０重量％〜９９重量％、３５重量％〜９９重量％、４０重量％〜９９重量％、４５重量％〜９９重量％、５０重量％〜９９重量％、５重量％〜７０重量％、１０重量％〜７０重量％、１５重量％〜７０重量％、２０重量％〜７０重量％、２５重量％〜７０重量％、３０重量％〜７０重量％、３５重量％〜７０重量％、４０重量％〜７０重量％、４５重量％〜７０重量％、及び５０重量％〜７０重量％から選択することができる。

［0049］いくつかの実施態様では、本発明の方法で有用な剤形は、剤形の０．０１重量％〜２０重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、食品及び／又は飲料であり得る。いくつかの実施態様では、剤形は、０．１重量％〜１０重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、食品及び／又は飲料であり得る。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の１重量％〜５重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、食品及び／又は飲料に入れて投与することができる。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の０．０１重量％〜１重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、食品及び／又は飲料に入れて投与することができる。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の０．０１重量％〜９９重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、食品及び／又は飲料に入れて投与することができる。

［0050］いくつかの実施態様では、本発明の方法で有用な剤形は、剤形の１０重量％〜９０重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、栄養補給剤であり得る。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の２０重量％〜８０重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、栄養補給剤であり得る。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の３０重量％〜７０重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、栄養補給剤であり得る。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の４０重量％〜６０重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、栄養補給剤であり得る。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の７０重量％〜９０重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、栄養補給剤であり得る。いくつかの実施態様では、剤形は、剤形の０．１重量％〜９９重量％の量のシアル酸を含むことができ、例えば、栄養補給剤であり得る。

［0051］いくつかの実施態様では、本発明の方法で有用なシアル酸の量は、女性の体重の少なくとも２ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも６０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも６５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも７０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも７５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも８０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも８５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも９０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも９５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１００ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１０５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１１０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１１５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１２０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１３０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１３５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１４０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１４５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１６０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１６５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１７０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１７５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１８０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１８５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１９０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１９５ｍｇ／ｋｇ／日、又は少なくとも２００ｍｇ／ｋｇ／日であることができ、かつ有用な範囲は、これらの値のいずれかの間、例えば、２ｍｇ／ｋｇ／日〜２００ｍｇ／ｋｇ／日、３ｍｇ／ｋｇ／日〜２００ｍｇ／ｋｇ／日、５ｍｇ／ｋｇ／日〜２００ｍｇ／ｋｇ／日、１０ｍｇ／ｋｇ／日〜１７５ｍｇ／ｋｇ／日、２５ｍｇ／ｋｇ／日〜１５０ｍｇ／ｋｇ／日、５０ｍｇ／ｋｇ／日〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、５ｍｇ／ｋｇ／日〜７５ｍｇ／ｋｇ／日、１０ｍｇ／ｋｇ／日〜７５ｍｇ／ｋｇ／日、３ｍｇ／ｋｇ／日〜５０ｍｇ／ｋｇ／日、及び２５ｍｇ／ｋｇ／日〜５０ｍｇ／ｋｇ／日から選択することができる。

［0052］いくつかの実施態様では、本発明の方法で有用なシアル酸の量は、少なくとも２０ｍｇ／日、少なくとも２５ｍｇ／日、少なくとも３０ｍｇ／日、少なくとも３５ｍｇ／日、少なくとも４０ｍｇ／日、少なくとも４５ｍｇ／日、少なくとも５０ｍｇ／日、少なくとも５５ｍｇ／日、少なくとも６０ｍｇ／日、少なくとも７０ｍｇ／日、少なくとも７５ｍｇ／日、少なくとも８０ｍｇ／日、少なくとも８５ｍｇ／日、少なくとも９０ｍｇ／日、少なくとも１００ｍｇ／日、少なくとも１１０ｍｇ／日、少なくとも１２０ｍｇ／日、少なくとも１２５ｍｇ／日、少なくとも１３０ｍｇ／日、少なくとも１４０ｍｇ／日、少なくとも１５０ｍｇ／日、少なくとも１６０ｍｇ／日、少なくとも１７０ｍｇ／日、少なくとも１７５ｍｇ／日、少なくとも１８０ｍｇ／日、少なくとも１９０ｍｇ／日、少なくとも２００ｍｇ／日、少なくとも２２５ｍｇ／日、少なくとも２５０ｍｇ／日、少なくとも２７５ｍｇ／日、少なくとも３００ｍｇ／日、少なくとも３２５ｍｇ／日、少なくとも３５０ｍｇ／日、少なくとも３７５ｍｇ／日、少なくとも４００ｍｇ／日、少なくとも４２５ｍｇ／日、少なくとも４５０ｍｇ／日、少なくとも４７５ｍｇ／日、少なくとも５００ｍｇ／日、少なくとも５２５ｍｇ／日、少なくとも５５０ｍｇ／日、少なくとも５７５ｍｇ／日、少なくとも６００ｍｇ／日、少なくとも６２５ｍｇ／日、少なくとも６５０ｍｇ／日、少なくとも６７５ｍｇ／日、少なくとも７００ｍｇ／日、少なくとも７２５ｍｇ／日、少なくとも７５０ｍｇ／日、少なくとも７７５ｍｇ／日、少なくとも８００ｍｇ／日、少なくとも８２５ｍｇ／日、少なくとも８５０ｍｇ／日、少なくとも８７５ｍｇ／日、少なくとも９００ｍｇ／日、少なくとも９２５ｍｇ／日、少なくとも９５０ｍｇ／日、少なくとも９７５ｍｇ／日、少なくとも１０００ｍｇ／日、少なくとも１１００ｍｇ／日、少なくとも１２００ｍｇ／日、少なくとも１３００ｍｇ／日、少なくとも１４００ｍｇ／日、少なくとも１５００ｍｇ／日、少なくとも１６００ｍｇ／日、少なくとも１７００ｍｇ／日、少なくとも１８００ｍｇ／日、少なくとも１９００ｍｇ／日、少なくとも２０００ｍｇ／日、少なくとも２１００ｍｇ／日、少なくとも２２００ｍｇ／日、少なくとも２３００ｍｇ／日、少なくとも２４００ｍｇ／日、少なくとも２５００ｍｇ／日、少なくとも２６００ｍｇ／日、少なくとも２７００ｍｇ／日、少なくとも２８００ｍｇ／日、少なくとも２９００ｍｇ／日、少なくとも３０００ｍｇ／日、少なくとも３１００ｍｇ／日、少なくとも３２００ｍｇ／日、少なくとも３３００ｍｇ／日、少なくとも３４００ｍｇ／日、少なくとも３５００ｍｇ／日、少なくとも３６００ｍｇ／日、少なくとも３７００ｍｇ／日、少なくとも３８００ｍｇ／日、少なくとも３９００ｍｇ／日、又は少なくとも４０００ｍｇ／日であることができ、かつ有用な範囲は、これらの値のいずれかの間、例えば、２０ｍｇ／日〜４０００ｍｇ／日、５０ｍｇ／日〜３０００ｍｇ／日、７５ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日、１００ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日、２００ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日、２５０ｍｇ／日〜１５００ｍｇ／日、１００ｍｇ／日〜５００ｍｇ／日、２５０ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日、２００ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日、又は２００ｍｇ／日以上である量から選択することができる。

［0053］いくつかの実施態様では、シアル酸は、受胎前、妊娠／懐胎期、及び授乳期／出産後のうちの１つ又は複数の間に投与することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、妊娠／懐胎期に投与することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、妊娠／懐胎の第Ｉ期（第１期）、妊娠／懐胎の第ＩＩ期（第２期）、及び／又は妊娠／懐胎の第ＩＩＩ期（第３期）に投与することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、受胎前、妊娠／懐胎の第Ｉ期（第１期）、妊娠／懐胎の第ＩＩ期（第２期）、妊娠／懐胎の第ＩＩＩ期に、及び／又は授乳／出産後に投与することができる。他の実施態様では、シアル酸は、第１期、第２期、及び／もしくは第３期、並びに／又は授乳期／出産後に投与することができる。他の実施態様では、シアル酸は、第１期、第２期、及び／又は第３期に投与することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、妊娠の各期に投与される。いくつかの実施態様では、シアル酸は、妊娠の各期を通じて連続的に投与される。

［0054］いくつかの実施態様では、シアル酸は、受胎前及び／又は第１期に投与することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、第２期に投与することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、第３期に投与することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、授乳期／出産後に投与することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、出産後の最初の２年間、女性に産後投与することができる。

［0055］いくつかの実施態様では、胎児は、胎児を妊娠している女性へのシアル酸の投与によって、シアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、シアル酸補給は、女性が子供に母乳育児していない場合でも、女性に利益があることがある。いくつかの実施態様では、シアル酸は、女性及び胎児又は子供に投与することができる。いくつかの実施態様では、胎児は、胎児の生物学上の母親へのシアル酸の投与によって、シアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、胎児は、胎児の代理母へのシアル酸の投与によって、シアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、胎児は、妊娠の第１期、第２期、及び第３期にシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、胎児は、妊娠の第１期及び第２期にシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、胎児は、妊娠の第２期及び第３期にシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、胎児は、妊娠の第１期及び第３期にシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、胎児は、妊娠の第１期にシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、胎児は、妊娠の第２期にシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、胎児は、妊娠の第３期にシアル酸に曝露される。

［0056］いくつかの実施態様では、子供は、子供にシアル酸を含む幼児用調製粉乳を与えることによって、シアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、子供は、子供にシアル酸を含む母乳を与えることによって、シアル酸に曝露され、ここで、母乳は、本明細書に記載されているようなシアル酸補給を受けた女性由来のものである。いくつかの実施態様では、子供は、子供にシアル酸を含む母乳を与えることによって、シアル酸に曝露され、ここで、母乳は、本明細書に記載されているようなシアル酸補給を受けた子供の生物学上の母親由来のものである。いくつかの実施態様では、子供は、子供にシアル酸を含む母乳を与えることによって、シアル酸に曝露され、ここで、母乳は、本明細書に記載されているようなシアル酸補給を受けた子供の代理母由来のものである。いくつかの実施態様では、子供は、出生から５歳までシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では子供は、出生から４歳までシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、子供は、出生から３歳までシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、子供は、出生から２歳までシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、子供は、出生から１歳までシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、子供は、１歳から３歳までシアル酸に曝露される。いくつかの実施態様では、子供は、１歳から２歳までシアル酸に曝露される。

［0057］いくつかの実施態様では、シアル酸は、出生から生後約２４カ月までの全期間又は大半の期間、毎日のように提供することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、望ましい結果が得られる限り、２年未満の期間、毎日に満たない頻度で提供することができる。いくつかの実施態様では、シアル酸は、第１期に開始し、懐胎期を通じて継続し、かつ出産後の授乳／母乳育児の最初の約２年間、女性に投与することができる。

［0058］いくつかの実施態様では、剤形は、シアル酸及び１種以上の賦形剤を含む。いくつかの実施態様では、賦形剤は、例えば、１種以上のさらなる栄養補給剤及び／又は母体用出生前ビタミン剤であることができ、これには、１種以上の多価不飽和脂肪酸、カルシウム、葉酸、ビタミンＥ、トコトリエノール、ビタミンＤ、マグネシウム、リン、ビタミンＫ、鉄、ビタミンＢ１２、ナイアシン、チアミン、リボフラビン、ビオチン、ビタミンＢ６、及びイソフラボン、亜鉛、パントテン酸、中鎖トリグリセリド、銅、マンガン、マグネシウム、ビタミンＡ、コリン、ビタミンＣ、ヨウ素、セレン、プレバイオティクス、プロバイオティクス、β−カロテン、ルテイン、リコピン、α−カロテン、ゼアキサンチン、β−クリプトキサンチン、γカロテン、ジンジャー、並びにトリプトファンが含まれるが、これらに限定されない。

［0059］いくつかの実施態様では、本発明の組成物又は剤形は、シアル酸を含む。いくつかの実施態様では、本発明の組成物又は剤形は、シアル酸及び幼児用調製粉乳を含む。いくつかの実施態様では、剤形は、少なくとも０．１ｍｇ、少なくとも１ｍｇ、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３０ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４０ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも５５ｍｇ、少なくとも６０ｍｇ、少なくとも６５ｍｇ、少なくとも７０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも８０ｍｇ、少なくとも８５ｍｇ、少なくとも９０ｍｇ、少なくとも９５ｍｇ、少なくとも１００ｍｇ、少なくとも１０５ｍｇ、少なくとも１１０ｍｇ、少なくとも１１５ｍｇ、少なくとも１２０ｍｇ、少なくとも１２５ｍｇ、少なくとも１３０ｍｇ、少なくとも１３５ｍｇ、少なくとも１４０ｍｇ、少なくとも１４５ｍｇ、少なくとも１５０ｍｇ、少なくとも２００ｍｇ、少なくとも２５０ｍｇ、少なくとも３００ｍｇ、少なくとも３５０ｍｇ、少なくとも４００ｍｇ、少なくとも４５０ｍｇ、少なくとも５００ｍｇ、少なくとも５５０ｍｇ、少なくとも６００ｍｇ、少なくとも６５０ｍｇ、少なくとも７００ｍｇ、少なくとも７５０ｍｇ、少なくとも８００ｍｇ、少なくとも８５０ｍｇ、少なくとも９００ｍｇ、少なくとも９５０ｍｇ、少なくとも１，０００ｍｇ、少なくとも１，１００ｍｇ、少なくとも１，２００ｍｇ、少なくとも１，３００ｍｇ、少なくとも１，４００ｍｇ、少なくとも１，５００ｍｇ、少なくとも１，６００ｍｇ、少なくとも１，７００ｍｇ、少なくとも１，８００ｍｇ、少なくとも１，９００ｍｇ、又は少なくとも２，０００ｍｇのシアル酸を含むことができ、かつ有用な範囲は、これらの値のいずれかの間、例えば、０．１ｍｇ〜２,０００ｍｇのシアル酸、１ｍｇ〜１,０００ｍｇ、１ｍｇ〜５００ｍｇ、１ｍｇ〜１００ｍｇのシアル酸、５ｍｇ〜５０ｍｇのシアル酸、１０ｍｇ〜４０ｍｇ、又は２５ｍｇ〜１ ,０００ｍｇのシアル酸から選択することができる。

［0060］いくつかの実施態様では、剤形は、１日に少なくとも１回、１日に少なくとも２回、１日に少なくとも３回、１日に少なくとも４回、１日に少なくとも５回、１日に少なくとも６回、１日に少なくとも７回、１日に少なくとも８回、１日に少なくとも９回、又は１日に少なくとも１０回女性に投与される。いくつかの実施態様では、剤形は、１日に１回〜１０回女性に投与される。いくつかの実施態様では、剤形は、１日に１回〜５回女性に投与される。いくつかの実施態様では、剤形は、１日に１回〜３回女性に投与される。

［シアル酸補給の利益］
［0061］いくつかの実施態様では、シアル酸補給を受けている受胎前、妊娠／懐胎期、又は授乳期／出産後の女性は、胎児及び／又は子供に対する発達上の利益を実現することができる。いくつかの実施態様では、発達上の利益は、神経系の成長及び／又は脳の発達もしくは成長の改善であり得る。いくつかの実施態様では、発達上の利益は、認知能力の改善、正常な認知技能の早期獲得、運動技能の改善、又は正常な運動技能の早期獲得であり得る。いくつかの実施態様では、発達上の利益は、以下の１つ又は複数を含むことができるが、これらに限定されない、脳の構造改善であり得る：成熟ミエリンの発現及び／又は発達の増大、神経突起伸張の促進、より早い発生時点でのミエリン塩基性タンパク質のレベルの増大、並びに脳の白質の発達の強化。いくつかの実施態様では、ミエリン鞘の厚みの増大及び電気伝導速度の増大が起こり得る。いくつかの実施態様では、白質は、脳梁、外側嗅索、運動錐体、延髄錐体、及び／又は錐体であり得るが、任意の又は全ての脳の白質領域が含まれることができる。いくつかの実施態様では、発達上の利益は、脳の海馬の発達の強化であることができ、これは、脳細胞間の接続性の増大、より多くの数のシナプス、より多くの細胞数、又はより長い細胞生存時間を含むことができるが、これらの尺度の増強は、任意の脳の灰白質領域（例えば、大脳皮質、小脳、及び既知の全ての脳の核）に見られる。発達上の利益を決定する方法は当業者に周知であり（例えば、Ｃａｌｄｅｒｏｎ ａｎｄ Ｋｉｍ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００４；９０：９７９−９８８；Ｄｏｎａｒｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｎｈｅｒｉｔ．Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓ．２００６；２９：１４３−１５６；Ｍｏｒｉｇｕｃｈｉ ａｎｄ Ｓａｌｅｍ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００３；８７：２９７−３０９）、例えば、実施例に記載されている。

［0062］いくつかの実施態様では、発達上の利益は、子供又は胎児の脳における神経突起伸張（例えば、海馬内）の増大である。いくつかの実施態様では、シアル酸補給による神経突起伸張は、シアル酸補給なしでの神経突起伸張と比較して、少なくとも０．０１％、少なくとも０．０２％、少なくとも０．０３％、少なくとも０．０４％、少なくとも０．０５％、少なくとも０．０６％、少なくとも０．０７％、少なくとも０．０８％、少なくとも０．０９％、少なくとも０．１％、少なくとも０．２％、少なくとも０．３％、少なくとも０．４％、少なくとも０．５％、少なくとも０．６％、少なくとも０．７％、少なくとも０．８％、少なくとも０．９％、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１１％、少なくとも１２％、少なくとも１３％、少なくとも１４％、少なくとも１５％、少なくとも１６％、少なくとも１７％、少なくとも１８％、少なくとも１９％、少なくとも２０％、少なくとも２１％、少なくとも２２％、少なくとも２３％、少なくとも２４％、少なくとも２５％、少なくとも２６％、少なくとも２７％、少なくとも２８％、少なくとも２９％、少なくとも３０％、少なくとも３１％、少なくとも３２％、少なくとも３３％、少なくとも３４％、少なくとも３５％、少なくとも３６％、少なくとも３７％、少なくとも３８％、少なくとも３９％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％増大する。有用な範囲は、これらの値のいずれかの間で選択することができ、例えば、シアル酸補給による神経突起伸張は、シアル酸補給なしでの神経突起伸張と比較して、０．０１％〜１００％、０．０１％〜７５％、０．０１％〜５０％、１％〜５０％、５％〜５０％、１０％〜５０％、０．０１％〜１０％、０．０１％〜５％、０．０１％〜１％、０．０１％〜０．５％、０．０１％〜０．２％、又は０．１％〜０．２％増大することができる。いくつかの実施態様では、神経突起伸張の増大は、ニューロン特異的マーカーのＭａｐ２ａに対する免疫細胞化学検査によって測定される。いくつかの実施態様では、神経突起伸張の増大は、受胎前及び／又は妊娠期の女性へのシアル酸の投与によって生じる。いくつかの実施態様では、神経突起伸張の増大は、授乳期の女性へのシアル酸の投与によって生じる。いくつかの実施態様では、神経突起伸張の増大は、授乳期ではなく、妊娠期の女性へのシアル酸の投与によって生じる。いくつかの実施態様では、神経突起伸張の増大は、妊娠期ではなく、授乳期の女性へのシアル酸の投与によって生じる。

［0063］いくつかの実施態様では、発達上の利益は、子供又は胎児の脳におけるミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）のレベルの増加である。いくつかの実施態様では、シアル酸補給による脳（例えば、全脳、小脳、脳梁、前頭及び／又は吻側脳梁、中央脳梁、正中線脳梁交叉、外側嗅索、運動出力経路、感覚入力経路、運動錐体、及び／又は内側毛帯）におけるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、少なくとも０．０１％、少なくとも０．０２％、少なくとも０．０３％、少なくとも０．０４％、少なくとも０．０５％、少なくとも０．０６％、少なくとも０．０７％、少なくとも０．０８％、少なくとも０．０９％、少なくとも０．１％、少なくとも０．２％、少なくとも０．３％、少なくとも０．４％、少なくとも０．５％、少なくとも０．６％、少なくとも０．７％、少なくとも０．８％、少なくとも０．９％、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１１％、少なくとも１２％、少なくとも１３％、少なくとも１４％、少なくとも１５％、少なくとも１６％、少なくとも１７％、少なくとも１８％、少なくとも１９％、少なくとも２０％、少なくとも２１％、少なくとも２２％、少なくとも２３％、少なくとも２４％、少なくとも２５％、少なくとも２６％、少なくとも２７％、少なくとも２８％、少なくとも２９％、少なくとも３０％、少なくとも３１％、少なくとも３２％、少なくとも３３％、少なくとも３４％、少なくとも３５％、少なくとも３６％、少なくとも３７％、少なくとも３８％、少なくとも３９％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも１００％増大する。有用な範囲は、これらの値のいずれかの間で選択することができ、例えば、シアル酸補給によるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、０．０１％〜１００％、０．０１％〜２５％、０．１％〜２５％、１％〜２５％、１％〜２０％、１％〜１０％、１％〜５％、又は５％〜２０％増大することができる。いくつかの実施態様では、ＭＢＰ発現は、免疫細胞化学検査によって測定される。

［0064］いくつかの実施態様では、ＭＢＰ発現の増大は、受胎前及び／又は妊娠期の女性へのシアル酸の投与によって生じる。いくつかの実施態様では、ＭＢＰ発現の増大は、授乳期の女性へのシアル酸の投与によって生じる。いくつかの実施態様では、ＭＢＰ発現の増大は、授乳期ではなく、妊娠期の女性へのシアル酸の投与によって生じる。いくつかの実施態様では、ＭＢＰ発現の増大は、妊娠期ではなく、授乳期の女性へのシアル酸の投与によって生じる。

［0065］いくつかの実施態様では、シアル酸補給によるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、脳梁、吻側脳梁、正中線脳梁、外側嗅索、及び／又は正中線脳梁交叉で増大する。いくつかの実施態様では、シアル酸補給によるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、脳梁、吻側脳梁、正中線脳梁、外側嗅索、及び／又は正中線脳梁交叉で増大し、運動出力経路、感覚入力経路、運動錐体、及び／又は内側毛帯では増大しない。いくつかの実施態様では、シアル酸補給によるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、脳梁、吻側脳梁、正中線脳梁、外側嗅索、及び／又は正中線脳梁交叉で増大し、運動出力経路、感覚入力経路、運動錐体、及び／又は内側毛帯で増大せず、シアル酸は、妊娠期の女性に投与される。いくつかの実施態様では、シアル酸補給によるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、脳梁、吻側脳梁、正中線脳梁、外側嗅索、及び／又は正中線脳梁交叉で増大し、運動出力経路、感覚入力経路、運動錐体、及び／又は内側毛帯で増大せず、シアル酸は、授乳期ではなく、妊娠期の女性に投与される。

［0066］いくつかの実施態様では、シアル酸補給によるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、小脳で増大する。いくつかの実施態様では、シアル酸補給によるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、小脳で増大し、シアル酸は、授乳期に投与される。いくつかの実施態様では、シアル酸補給によるＭＢＰ発現は、シアル酸補給なしでのＭＢＰ発現と比較して、小脳で増大し、シアル酸は、妊娠期ではなく、授乳期に投与される。

［0067］いくつかの実施態様では、女性に投与されるシアル酸は、少なくとも一部は血液脳関門を横断する。いくつかの実施態様では、女性に投与されるシアル酸は、Ｎ−アセチルノイラミン酸（ＮＡＮＡ）であり、これは、少なくとも一部は血液脳関門を横断する。いくつかの実施態様では、女性に投与されるシアル酸は、ＮＡＮＡであり、これは、少なくとも一部は非ヒト動物においてＮｅｕ５Ｇｃに変換される。いくつかの実施態様では、女性に投与されるシアル酸は、ＮＡＮＡであり、これは、少なくとも一部は血液脳関門を横断し、かつ少なくとも一部は非ヒト動物においてＮｅｕ５Ｇｃに変換される。

［0068］いくつかの実施態様では、女性に投与されるシアル酸は、脳脊髄液（ＣＳＦ）中に存在する。いくつかの実施態様では、女性に投与されるシアル酸はＮＡＮＡであり、ＮＡＮＡは、少なくとも一部は、ＣＳＦ中に存在する。いくつかの実施態様では、女性に投与されるシアル酸はＮＡＮＡであり、ＮＡＮＡは、少なくとも一部は、非ヒト動物においてＮｅｕ５Ｇｃに変換される。いくつかの実施態様では、女性に投与されるシアル酸はＮＡＮＡであり、ＮＡＮＡは、少なくとも一部は、ＣＳＦ中に存在し、かつ少なくとも一部は、非ヒト動物においてＮｅｕ５Ｇｃに変換される。

［0069］いくつかの実施態様では、本発明は、本明細書に記載の使用のいずれかのための剤形の調製における本明細書に記載のシアル酸組成物のいずれかの使用に関する。

［0070］本発明のさらなる目的、利点、及び新規の特徴は、限定であることが意図されない、以下のその実施例を検討することによって、当業者に明らかになるであろう。

［実施例］
［実施例１］
［母体へのＮＡＮＡ補給プロトコル：］
［0071］子孫の脳の発達に対するシアル酸（ｎ−アセチルノイラミン酸；ＮＡＮＡ）を含む母体食の補給の効果を明らかにするために、４０匹（４０）の妊娠したＬｏｎｇ−Ｅｖａｎｓラットを、そのシアル酸（Ｎａｃａｌａｉ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）の投与が異なる４種（４）の食餌（食餌１種当たり１０匹の母獣）で飼育した。動物は全て、交尾後４日目（懐胎４日目）に、これらの食餌を始めた。

［0072］図２に示すように、対照動物を、懐胎期及び授乳期を通じて検出可能な量のＮＡＮＡを含まない基本食（「基本」又は「不含」）で飼育した。懐胎食（「懐胎」）で飼育された母獣は、懐胎期だけＮＡＮＡ（１日（ｄ）にキログラム（ｋｇ）体重当たり２００ミリグラム（ｍｇ））を受容した。次に、子孫が生まれた後、これらの動物を基本食で飼育した。反対に、授乳食（「授乳」）の母獣は、懐胎期は基本食で飼育したが、授乳期は食餌を通してＮＡＮＡ（２００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を受容した。懐胎期及び授乳期を通じて食餌からＮＡＮＡ（２００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を受容した母獣は、「Ｇ＋Ｌ」群として知られた。

［0073］図２はまた、これらの子孫を用いて、子孫の発達に対する母体食の効果を明らかにする方法及び時期を示している。生後、各食餌群に生まれた子獣を、母体管理上の相違を調整するために、そのそれぞれの群内で交差養育した。次に、母獣へのアクセス不足が原因で生じる栄養面の相違を防ぐために、同腹子を、母獣１匹当たり１０匹の子獣になるよう間引きした。この研究はまた、全ての群で同腹子サイズが同じになるように維持しながら、各エンドポイント（Ｎ＝５）で５匹の子獣の使用が可能となるように設計された。母体食の懐胎期補給と授乳期補給の潜在的な相違を明らかにするために、子獣を生後１日（ｐ１）で取り出した。子獣を生後１６（ｐ１６）日で取り出した。なぜなら、子獣は、約ｐ１８で母親の食餌を直接利用し始め、これは、母体から子獣へのＮＡＮＡの移動の評価を妨げることになるからである。子獣をｐ８でも取り出した。なぜなら、それは、途中時点の役目を果たし、また、使用される主なバイオマーカーは、ラット発生のこの日まで検出することができないからである。

［0074］図３Ａ及び３Ｂは、懐胎期（図３Ａ）及び授乳期（図３Ｂ）に投与される追加用量のＮＡＮＡを試験する実験についての母体へのＮＡＮＡ補給プロトコルを示す。

［0075］以下の実施例に記載するように、３つの主要エンドポイントをこの研究で用いた：発達中の全脳におけるミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）発現、海馬から培養されたニューロンのエクスビボでの神経突起伸張、及び発達中の脳におけるＭＢＰ発現の厚みの評価。

［実施例２］
［懐胎期及び授乳期の母体へのＮＡＮＡの供給は、子孫におけるＭＢＰの発現を増強する：］
［0076］ＭＢＰ発現は脳の発達の尺度である。なぜなら、それは、脳回路の成熟ミエリン化の程度の具体的な尺度であるからである。ミエリンは、脳の「ワイヤー」間の絶縁体であり、絶縁体が銅配線における電気抵抗を低下させるのとほぼ同じように、脳回路における電気抵抗を低下させる。抵抗の低下は、より良好なシグナル伝達、及びその後の発生分化を可能にする。したがって、成熟ミエリンの発現レベルは、さらに先へと発達する脳と関連している。

［0077］子孫の脳の発達に対する母体へのＮＡＮＡ補給の効果を明らかにするために、図２に記載の生後０、８、及び１６日目の子獣から採取した全脳ライセートのウェスタンブロット解析により、ＭＢＰ発現を測定した。図４Ａに示すように、ブロットを、２つの異なるアイソフォーム（分子量１８及び２１キロダルトン［ｋＤａ］）を認識するＭＢＰに対する抗体（下のパネル；Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ又はＣｏｖａｎｃｅ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）でプロービングした。このブロットを、タンパク質ローディング対照の役割を果たすβ−アクチンに対する抗体（上のパネル；Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｂｅｖｅｒｌｙ，ＭＡ又はＭｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）でもプロービングした。

［0078］各レーンのバンドのデンシトメトリーによって、図４Ｂに示すようなＭＢＰ発現の定量を行なった。各レーンは個々の動物に相当した。グラフは、相対蛍光単位（正規化したＲ．Ｆ．Ｕ．）の対応するアクチンシグナルで正規化したＭＢＰ発現の平均強度を表す。一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）は、ＮＡＮＡ補給による、１８ｋＤａ ＭＢＰ（Ｆ［３，３２］＝３．１８７；ｐ＝０．０３７；検出力＝０．６８１）と２１ｋＤａ ＭＢＰ（Ｆ［３，３２］＝４．２７０；ｐ＝０．０１２；検出力＝０．８１６）の両方の発現の有意な増加を検出した。さらに、チューキーのポストホック検定は、授乳食が、ＮＡＮＡ欠損食と比較して、解析全体において、及び生後８日目で、両方のＭＢＰアイソフォームの発現を有意に増加させることを検出した（^＊、ｐ＜０．０５）。

［実施例３］
［懐胎期及び授乳期の母体へのＮＡＮＡの供給は、子孫の海馬培養物における神経突起伸張を増大させる：］
［0079］海馬は、空間学習や短期記憶から長期記憶への移行に不可欠な脳の特定の領域である。海馬の培養物における神経突起伸長は、脳細胞の成長、分化、及びネットワーク形成の尺度としての役割を果たす。これらのエクスビボの尺度の増加は有益であると考えられる。なぜなら、同様の有益なプロセスがインビボで起こると考えられているからである。

［0080］子孫の脳の発達に対する母体へのＮＡＮＡ補給の効果を明らかにするために、神経突起伸張を、図２に記載のｐ０子獣から作製された海馬培養物で測定した。図５Ａは、懐胎期にＮＡＮＡ欠損食に曝露された母獣の子孫の測定を示す。図５Ｂは、懐胎期にＮＡＮＡ補給食（２００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を供給された母獣の子孫の測定を示す。６日間のインキュベーションの後、これらの培養物は、ニューロン特異的マーカーＭａｐ２ａ（Ｓｉｇｍａ，Ｒｏｎｋｏｎｋｏｍａ，ＮＹ；又はＭｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）についての免疫細胞化学検査を受けた。各培養物中の細胞数は、４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）での染色によって評価した。

［0081］図５Ｃに示すように、ニューロン当たりのＭａｐ２ａ染色のパーセント面積の定量は、その母親がその食餌中のＮＡＮＡを受容していた子獣に由来する培養物で有意により大きかった。Ｍａｐ２ａ染色のパーセント面積は、各画像（群１つ当たり９〜１０培養物；動物１匹当たり１つの培養物の各々について５つのランダムな領域）中の全Ｍａｐ２ａ陽性ピクセルのコンピュータによる計数によって測定した。次に、画像中のＭａｐ２ａ陽性ピクセルの数をその同じ画像中のピクセルの総数で割り算した。次に、得られた商に１００を掛けて、パーセント（％）面積を出した。次に、細胞数について正規化するために、パーセント面積を画像中の細胞の総数で割り算した。両側独立スチューデントｔ−検定を用いて、２つの群を比較し、この検定により、補給群と対照群の間に有意差が検出された（^＊＊、ｐ＜０．０１）。したがって、母体のＮＡＮＡへの曝露は、子孫の海馬培養物における神経突起伸張を有意に増大させた。

［実施例４］
［懐胎期の母体への様々なＮＡＮＡ用量の供給は、子孫における神経突起伸張を促進する：］
［0082］子孫の脳の発達に対する懐胎期の母体へのＮＡＮＡ補給の用量−応答効果をさらに評価するために、神経突起伸張を、図３Ａに記載の子獣から作製された海馬培養物で測定した。図６Ａは、懐胎期にＮＡＮＡ欠損食（「ＮＡＮＡなし」）、又は懐胎期にＮＡＮＡ補給食（２５ｍｇ／ｋｇ／ｄ ＮＡＮＡ、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄ ＮＡＮＡ、１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ ＮＡＮＡ、及び２００ｍｇ／ｋｇ／ｄ ＮＡＮＡ）を摂取した母獣の子孫に由来する代表的な海馬培養物を示す。６日間のインキュベーションの後、これらの培養物は、ニューロン特異的マーカーＭａｐ２ａ（Ｓｉｇｍａ，Ｒｏｎｋｏｎｋｏｍａ，ＮＹ；又はＭｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）についての免疫細胞化学検査を受けた。各培養物中の細胞数は、４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）での染色によって評価した。

［0083］ニューロン当たりのＭａｐ２ａ染色のパーセント面積を実施例３に記載した通りに定量した。図６Ｂに示すように、ニューロン当たりのＭａｐ２ａ染色のパーセント面積は、その母親がその食餌中のＮＡＮＡを受容していた子獣に由来する培養物で有意により大きかった（^＊＊、ｐ＜０．０１；^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。したがって、母体のＮＡＮＡへの曝露は、子孫の海馬培養物における神経突起伸張を有意に増大させた。

［実施例５］
［懐胎期及び授乳期の母体へのＮＡＮＡの供給は、白質におけるＭＢＰ発現の厚みを増大させる：］
［0084］ミエリン鞘の厚み及び成熟度の増大は、白質（ミエリン化した脳領域）のより速い伝導速度やより進んだ発生及び分化と関連している。特に、脳梁（ＣＣ）は、実行機能や学習を制御する２つの大脳半球間のコミュニケーションの主要経路である。また、齧歯類は、その通常環境における位置確認や食物誘導型行動をその嗅覚系にほとんど依存しているので、外側嗅索（ＬＯＴ）は、齧歯類において特に重要である。ＬＯＴは、嗅球の一次嗅覚中枢から大脳及び海馬の高次処理中枢へと情報を運ぶ。その大きさゆえに、また、脳機能及び動物がその環境を感知する能力におけるその重要性ゆえに、ＣＣ及びＬＯＴを以下の実験で測定した。

［0085］子孫の脳の発達に対する母体へのＮＡＮＡ補給の効果を明らかにするために、図２に記載のｐ１６の子獣の脳の薄いスライスを採取し、このスライスをＭＢＰの免疫組織化学検査により染色し、共焦点レーザー顕微鏡法で対象となる領域を測定することによって、ＣＣ及びＬＯＴの評価を行なった。図７Ａに示すように、ＣＣにおけるＭＢＰ発現の厚みを、脳の吻側部（あまり発達していない）及び正中線部（よく発達している）の帯状束（破線）で測定した（スケールバー＝１ミリメーター）。ＬＯＴ及び前交連（ＡＣ）と関連した領域の位置も図７Ａに示す。

［0086］図７Ｂは、（図２に記載の）懐胎期（懐胎）、授乳期（授乳）、又は懐胎期＋授乳期（Ｇ＋Ｌ）の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫のＣＣにおけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加［多変量ＡＮＯＶＡ；Ｆ［３，８６］＝８．４５５；ｐ＜０．００１］をもたらしたことを示す（ｐ＜０．０５；^＊＊、ｐ＜０．０１；及び^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。図７Ｃは、母体へのＮＡＮＡ補給が、ＣＣで検出されたのと同様のＬＯＴにおけるＭＢＰ発現の最大の厚みへの有意な増加ももたらしたことを示す。さらに、これらの調査結果は、実施例２に記載のウェスタンブロットによる調査結果と一致している。

［実施例６］
［懐胎期の母体への様々なＮＡＮＡ用量の供給は、白質におけるＭＢＰ発現の厚みを増大させる：］
［0087］子孫の脳の発達に対する懐胎期の母体へのＮＡＮＡ補給の効果をさらに評価するために、図３Ａに記載のｐ１６の子獣の脳（懐胎ＤＲ ｐ１６）の薄いスライスを採取し、図２に記載の通りに、このスライスをＭＢＰの免疫組織化学検査により染色し、共焦点レーザー顕微鏡法で対象となる領域を測定することによって、脳梁（ＣＣ）及び外側嗅索（ＬＯＴ）の評価を行なった。２５ｍｇ／ｋｇ／ｄ、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄ、１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ、及び２００ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量での母体へのＮＡＮＡ補給を試験した。

［0088］図８Ａは、懐胎期の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫の前頭ＣＣにおけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらしたことを示す（^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。図８Ｂは、母体へのＮＡＮＡ補給が、中央ＣＣにおけるＭＢＰ発現の厚みを変化させないように見えたことを示す。図８Ｃは、母体へのＮＡＮＡ補給が、ＬＯＴにおけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらしたことを示す（^＊、ｐ＜０．０５；^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。図８Ｄは、母体へのＮＡＮＡ補給が、正中線ＣＣ交叉におけるＭＢＰ発現の厚みを変化させないように見えたことを示す。

［実施例７］
［懐胎期の母体への様々なＮＡＮＡ用量の供給は、運動出力経路及び感覚入力経路におけるＭＢＰ発現を増大させる：］
［0089］脊髄の白質は、上行性（感覚）又は下行性（運動）である線維の経路を含む。上行性経路は、皮膚受容体、自己受容体（筋肉及び関節感覚）、並びに内臓受容体からの感覚情報を伝える。内側毛帯は、そのような感覚情報を薄束核及び楔状束核から視床に運ぶ経路である。２つの主要な下行性経路がある：皮質脊髄経路、又は錐体路、及び錐体外路。一般に、これらの経路は、体の筋肉組織の制御に関与する。

［0090］子孫の脳の発達に対する懐胎期の母体へのＮＡＮＡ補給の効果をさらに評価するために、図３Ａに記載のｐ１６の子獣の脳の薄いスライスを採取し、図２に記載の通りに、このスライスをＭＢＰの免疫組織化学検査により染色し、共焦点レーザー顕微鏡法で対象となる領域を測定することによって、運動錐体及び内側毛帯の評価を行なった。２５ｍｇ／ｋｇ／ｄ、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄ、１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ、及び２００ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量での母体へのＮＡＮＡ補給を試験した。

［0091］図９Ａは、懐胎期の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫の運動錐体におけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらしたことを示す（^＊、ｐ＜０．０５；^＊＊、ｐ＜０．０１；^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。図９Ｂは、母体へのＮＡＮＡ補給が、内側毛帯におけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらしたことを示す（^＊、ｐ＜０．０５；^＊＊、ｐ＜０．０１）。

［実施例８］
［授乳期の母体への様々なＮＡＮＡ用量の供給は、白質におけるＭＢＰ発現の厚みを増大させる：］
［0092］子孫の脳の発達に対する授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給の効果をさらに評価するために、図３Ｂに記載のｐ１６の子獣の脳（授乳ＤＲ ｐ１６）の薄いスライスを採取し、図２に記載の通りに、このスライスをＭＢＰの免疫組織化学検査により染色し、共焦点レーザー顕微鏡法で対象となる領域を測定することによって、脳梁（ＣＣ）及び外側嗅索（ＬＯＴ）の評価を行なった。２５ｍｇ／ｋｇ／ｄ、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄ、１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ、及び２００ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量での母体へのＮＡＮＡ補給を試験した。

［0093］図１０Ａは、授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫の吻側ＣＣにおけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらしたことを示す（^＊＊、ｐ＜０．０１；^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。図１０Ｂは、授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫の正中線ＣＣにおけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらしたことを示す（^＊＊、ｐ＜０．０１；^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。図１０Ｃは、授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫のＬＯＴにおけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらしたことを示す（^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。図１０Ｄは、授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫の正中線ＣＣ交叉におけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらしたことを示す（^＊、ｐ＜０．０５；^＊＊＊、ｐ＜０．００１）。

［実施例９］
［授乳期の母体への様々なＮＡＮＡ用量の供給、並びに運動出力経路及び感覚入力経路におけるＭＢＰ発現：］
［0094］子孫の脳の発達に対する授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給の効果をさらに評価するために、図３Ｂに記載のｐ１６の子獣の脳（授乳ＤＲ ｐ１６）の薄いスライスを採取し、図２に記載の通りに、このスライスをＭＢＰの免疫組織化学検査により染色し、共焦点レーザー顕微鏡法で対象となる領域を測定することによって、運動錐体及び内側毛帯の評価を行なった。２５ｍｇ／ｋｇ／ｄ、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄ、１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ、及び２００ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量での母体へのＮＡＮＡ補給を試験した。

［0095］図１１Ａは、授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫における５０ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量での母体へのＮＡＮＡの補給後に、運動錐体におけるＭＢＰ発現の厚みの有意な増加をもたらし（^＊、ｐ＝０．０２２）、試験した他の用量での母体へのＮＡＮＡの補給後に、運動錐体におけるＭＢＰ発現の厚みに有意な変化をもたらさなかったことを示す。図１１Ｂは、授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給が、子孫の内側毛帯におけるＭＢＰ発現の厚みに有意な変化をもたらさなかったことを示す。

［実施例１０］
［授乳期の母体への様々なＮＡＮＡ用量の供給は、小脳におけるＭＢＰ発現を増大させる：］
［0096］子孫の脳の発達に対する授乳期の母体へのＮＡＮＡ補給の効果をさらに評価するために、図３Ｂに記載の生後０、８、及び１６日目の子獣から採取した小脳のウェスタンブロット解析により、ＭＢＰ発現を測定した。実施例２に記載したように、ブロットを、１８キロダルトン型（１８ｋＤ ＭＢＰ）及び２１キロダルトン型（２１ｋＤ ＭＢＰ）を認識する実施例２に記載のＭＢＰに対する抗体、並びにタンパク質ローディング対照としてのβ−アクチンに対する抗体でプロービングした。各レーンのバンドのデンシトメトリーによって、ＭＢＰ発現の定量を行なった。各レーンは、実施例２に記載の個々の動物に相当した。

［0097］図１２Ａ及び１２Ｂのグラフは、相対蛍光単位（正規化したＲ．Ｆ．Ｕ．）の対応するアクチンシグナルで正規化したＭＢＰ発現の平均強度を表す。一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）は、試験した特定の用量での授乳期のＮＡＮＡ補給による、１８ｋＤａ ＭＢＰと２１ｋＤａ ＭＢＰの両方の発現の有意な増加を検出した（ｐ＜０．００１）。

［0098］１８ｋＤａ ＭＢＰと２１ｋＤａ ＭＢＰの組み合わせた発現強度の解析は、２５ｍｇ／ｋｇ／ｄ（ｐ＜０．０１）、１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ（ｐ＜０．０５）、及び２００ｍｇ／ｋｇ／ｄ（ｐ＜０．０１）のＮＡＮＡ用量での授乳期のＮＡＮＡ補給後の総ＭＢＰの有意な増加を示した。

［実施例１１］
［ＮＡＮＡは血液脳関門を横断し、非ヒト哺乳動物においてＮｅｕ５Ｇｃに一部変換される：］
［0099］ＮＡＮＡがその天然形態で脳に生体利用されるかどうか、又はＮＡＮＡが血液脳関門を横断する途中でプロセシングされるかどうかを評価するために、ＮＡＮＡ及びその潜在的な代謝体のうちの１つのレベルをラット脳脊髄液（ＣＳＦ）中で測定した。まず、動物をＮＡＮＡを含まない食餌で１週間飼育することによって、動物の食餌からＮＡＮＡを除去した。次に、動物にＮＡＮＡ（２００ｍｇ／ｋｇ）の単回経口用量を投与し、投与の０、０．２５、１、２、４、及び６時間後に各動物のＣＳＦをサンプリングした。次に、蛍光検出法及び定量標準と連関させた高速液体クロマトグラフィーによって、ＣＳＦ中のＮＡＮＡ及びＮｅｕ５Ｇｃの濃度を評価した。

［0100］図１３は、経口ＮＡＮＡ投与後のＣＳＦ中のＮＡＮＡ及びＮｅｕ５Ｇｃの濃度の変化を示す。図１３Ａが示すように、天然のＮＡＮＡのピークは、投与１５分後に、ベースラインを超えて検出可能であった。その後、このＮＡＮＡピークは、比較的速やかに低下し、経口ＮＡＮＡ投与後１時間までにベースライン値に戻った。これらのデータは、外部投与の結果として、天然のＮＡＮＡが血液脳関門を横断したことを示唆している。その後、ＮＡＮＡは、それ自体脳組織吸収されたか、代謝体、例えば、Ｎｅｕ５ＧｃもしくはＭａｎＮＡｃへとプロセシングされたか、又はその両方であった。実際、図１３Ｂが示すように、ＮＡＮＡの少なくとも一部は、Ｎｅｕ５Ｇｃに変換されていた可能性が高い。Ｎｅｕ５Ｇｃ濃度は、経口投与後１時間まではベースラインを超えて増加せず、この増加は、ＮＡＮＡピークが投与１５分後に観察された後で顕著になった。その後、Ｎｅｕ５Ｇｃ濃度は、残りのサンプリング期間中ずっと、ピークＮＡＮＡ濃度の４％のレベルで持続した。したがって、外因性ＮＡＮＡは、脳に生体利用されるが、それはある程度プロセシングもされる。他の全ての哺乳動物とは異なり、ヒトは、ＮＡＮＡをＮｅｕ５Ｇｃに変換する機能的酵素を持たないので、このデータは、ヒトＣＳＦでは異なる可能性が高いことに留意すべきである。

［0101］本発明の前述の記載は、例示及び説明目的のために提示されている。さらに、本記載は、本発明を本明細書に開示されている形態に限定することを意図するものではない。

［0102］本明細書に記載の様々な態様、実施態様、及び選択肢は全て、ありとあらゆるバリエーションで組み合わせることができる。

［0103］本明細書で言及された全ての刊行物、特許、及び特許出願は、各々の個々の刊行物、特許、又は特許出願が参照により組み込まれていることが具体的にかつ個別に示されている場合と同じ程度に参照により本明細書に組み込まれる。

Claims (13)

1. 女性の胎児又は子供に発達上の利益を提供するために、受胎前、妊娠期、及び授乳期の少なくとも１つの間に、前記女性に投与するための医薬組成物の製造におけるシアル酸の使用であって、前記シアル酸はＮ−アセチルノイラミン酸又はその前駆体である、使用。
2. 前記シアル酸が遊離シアル酸である、請求項１に記載の使用。
3. 前記シアル酸が、Ｎ−アセチルノイラミン酸である、請求項１又は２に記載の使用。
4. 前記医薬組成物が、妊娠期及び授乳期に投与されるためのものである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
5. 前記医薬組成物が、受胎前、妊娠期、及び授乳期に投与されるためのものである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
6. 前記医薬組成物が、前記女性による子供の出産後の最初の２年間、前記女性に投与されるためのものである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
7. 前記発達上の利益が、神経系及び／又は脳の発達の改善である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
8. 前記発達上の利益が、脳の神経学的改善である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
9. 前記発達上の利益が、成熟ミエリンの発現及び／又は発達の増大、神経突起伸張の促進、ミエリン塩基性タンパク質のレベルの増大、脳の白質の発達の強化、及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
10. 前記発達上の利益が脳の灰白質に見られる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
11. 前記医薬組成物が、前記医薬組成物の０．０１重量％〜１０重量％の量のシアル酸を含有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用。
12. 前記医薬組成物が、前記医薬組成物の１０重量％〜９０重量％の量のシアル酸を含有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用。
13. 前記医薬組成物が、多価不飽和脂肪酸、カルシウム、葉酸、ビタミンＥ、トコトリエノール、ビタミンＤ、マグネシウム、リン、ビタミンＫ、鉄、ビタミンＢ１２、ナイアシン、チアミン、リボフラビン、ビオチン、ビタミンＢ６、イソフラボン、亜鉛、パントテン酸、中鎖トリグリセリド、銅、マンガン、マグネシウム、ビタミンＡ、コリン、ビタミンＣ、ヨウ素、セレン、プレバイオティクス、プロバイオティクス、β−カロテン、ルテイン、リコピン、α−カロテン、ゼアキサンチン、β−クリプトキサンチン、γカロテン、ジンジャー、及びトリプトファンからなる群から選択される１種以上をさらに含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の使用。

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