JP6023086B2 - ヒアルロン酸組成物 - Google Patents

Description

本発明は、注射可能なヒアルロン酸組成物の分野、並びに化粧的及び／又は医学的応用におけるこのような組成物の使用に関する。

医学的使用のために最も広範に用いられている生体適合性ポリマーの１つはヒアルロン酸である。それはグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）群に属する天然に存在する多糖である。ヒアルロン酸及び他のＧＡＧは、多量の水を吸収する能力を有する負に帯電したヘテロ多糖鎖である。ヒアルロン酸及びヒアルロン酸から誘導される製造物は、例えば、粘性外科的処置中に、真皮充填剤として、生物医学分野及び化粧分野において幅広く用いられている。

水吸収ゲル、即ちハイドロゲルは、生物医学分野において幅広く用いられている。それらは、一般に、無限ネットワークへのポリマーの化学的架橋によって調製される。天然のヒアルロン酸及びある種の架橋ヒアルロン酸製造物は、それらが完全に溶解されるまで水を吸収するが、一方、架橋ヒアルロン酸ゲルは、典型的には、それらが飽和するまで、即ち、それらが有限の液体保持能力又は膨張度を有するまで、ある量の水を吸収する。

ヒアルロン酸は、大部分の生物において、その分子量を除いて、同一の化学的構造を有して存在するため、最小限の反応を提供し、先進的な医学的使用を与える。ヒアルロン酸分子の架橋及び／又は他の修飾は、インビボにおいてその存続期間を改善するために必要である。さらに、このような修飾は、ヒアルロン酸分子の液体保持能力に影響を及ぼす。その結論として、ヒアルロン酸は、多数の修飾の試みの対象となっていた。

注射用のヒアルロン酸製造物は、多くの場合、注射手法により、患者によって経験される疼痛又は不快を減少させるために、適切な麻酔薬、例えばリドカインと併用される。

医学的及び／又は非医学的応用のための改善された注射可能なヒアルロン酸組成物を提供することが本発明の目的である。

注射に用いるためのヒアルロン酸組成物は、使用前に滅菌される必要がある。滅菌は、一般に、オートクレーブなどの熱処理によって行われる。熱処理は、概して、ヒアルロン酸組成物の剛性又は粘性の減少をもたらす。上記されるように、注射用のヒアルロン酸製造物は、注射手法に起因して、患者によって経験される疼痛又は不快を減少させるために、適切な麻酔薬、例えばリドカインとしばしば併用される。通常使用されるいくつかの麻酔薬、例えばリドカインの添加は、得られた組成物が、リドカインを含まないゲルよりも剛性又は粘性となるように、ヒアルロン酸組成物のレオロジーに対して熱処理の影響に弱めることが観察されている。レオロジーにおけるこの変化は、いくつかの応用、例えば、ゲルの浅い注射が必要とされ又は望まれ、及び／又は非常に細いゲージ針が必要とされ又は望まれる応用において欠点となる場合がある。このような応用の例には、皮膚再生（ｒｅｖｉｔａｌｉｚａｔｉｏｎ）及び軟組織の増加（ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ）、例えば、ヒアルロン酸ゲルの注射による顔又は体の皺のばし又は輪郭調整が含まれる。

現在、アミド型及びエステル型の局所麻酔薬からなる群から選択される局所麻酔薬を含むヒアルロン酸組成物への相対的に少量のアスコルビン酸誘導体の添加は、オートクレーブによる組成物の滅菌時に局所麻酔薬によって生じるヒアルロン酸組成物の「粘性増加」を効果的に低減し得ることが見出されている。このようにして、局所麻酔薬を含むヒアルロン酸組成物への相対的に少量のアスコルビン酸誘導体の添加は、組成物を送り出すために必要とされる力を増加させず、ヒアルロン酸成分に変更を与えることなしに、注射用の細い針の使用を促進する場合がある。また、溶液の粘性及び／又は弾性係数Ｇ’の減少は、組成物が皮膚表面の近くで注射される応用、例えば、皮膚再生又は軟組織の増加、例えばヒアルロン酸ゲルの注射による顔又は体の皺のばし又は輪郭調整における利点である。

組成物における粘性及び／又は弾性係数Ｇ’に対するアスコルビン酸誘導体の効果は、未修飾のヒアルロン酸と修飾された、例えば架橋されたヒアルロン酸の両方について示され、これは、ヒアルロン酸を含む全ての組成物に共通することを指示する。

組成物における粘性及び／又は弾性係数Ｇ’に対する有利な効果に加えて、組成物へのアスコルビン酸誘導体の添加はまた、更なる利点を提供する場合がある。アスコルビン酸（ビタミンＣとしても知られる）及びその誘導体は、還元剤及びスカベンジャー攻撃性酸化剤及びラジカルとして作用し得る。アスコルビン酸及びその誘導体はコラーゲン形成を改善することができるため、それらは皮膚の形態学を増大させ得る。また、それらは、表皮バリア形成を改善し、経表皮性の水分喪失を減少させ、創傷治癒を改善し、したがって、皮膚の老化及び関連した乾燥皮膚状態の予防において重要な役割を果たす可能性がある。アスコルビン酸及びその誘導体は、それらの抗炎症性及び光防護性、並びにＵＶ誘導性の皮膚損傷の改善におけるそれらの作用について知られている。また、乾癬及び皮脂欠乏性湿疹などの疾患経過の要素として炎症を有する皮膚科学的状態を臨床的に改善し得ることも示されている。アスコルビン酸及びその誘導体は、メラニン形成を抑制することができるため、それらは皮膚の白化作用を有する場合があり、肝斑及び老人性染みを臨床的に改善することが示されている。また、それらは毛髪成長を促進する場合がある。アスコルビン酸及びその誘導体は、抗癌特性を有することが示唆されている。

ヒアルロン酸組成物へのアスコルビン酸誘導体の添加は、一般に、組成物の安定性に効果がないか又は僅かな効果しかない。顕著には、アスコルビン酸誘導体の添加は、ヒアルロン酸組成物の安定性を増加させないことが観察されている。本発明者らによる研究は、アスコルビン酸誘導体の添加が、時として、ヒアルロン酸組成物の安定性に僅かな減少をもたらし得ることを示した。しかしながら、本発明者らは、アスコルビン酸誘導体の添加と関連した利点は、ある場合においては、この添加によって引き起こされる安定性の僅かな減少を上回ることを見出した。ヒアルロン酸組成物の安定性における不要な減少を避けるために、アスコルビン酸誘導体の濃度は、下記に示されるように、最大濃度以下に維持されるべきである。

本明細書において例証される局面によれば、下記：
ヒアルロン酸、
アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される局所麻酔薬、並びに
熱による滅菌時に局所麻酔薬によって生じる組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’に対する影響を阻止又は低減させる量のアスコルビン酸誘導体
を含む注射可能なヒアルロン酸組成物が提供される。

用語「注射可能な」とは、ヒアルロン酸組成物が、非経口注射に適した形態で、例えば、対象又は患者の皮膚などの軟組織に提供されることを意味する。注射可能な組成物は、滅菌されるべきであるが、対象又は患者の皮膚などの軟組織に導入される場合、有害反応を引き起し得る成分を含むべきではない。これは、処置された個体において、免疫反応が全く生じないか、又はごく非常に穏やかな免疫反応が生じることを暗に意味する。即ち、処置された個体において、望ましくない局所的又は全身的影響が全く生じないか、あるいはごく非常に穏やかな望ましくない局所的又は全身的影響が生じる。

ヒアルロン酸組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’は、当業者に周知である種々の方法に従って測定されてもよい。粘度は、例えば、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＣ１４又はＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いた回転式粘度測定によって、「ゼロ剪断粘度、η_０」として測定されてもよい。また、粘度を測定する他の方法は利用可能である。弾性係数Ｇ’は、例えば、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性をＬＶＲ内で測定してもよい。弾性係数Ｇ’を測定する他の方法も利用可能である。

注射可能なヒアルロン酸組成物は、好ましくは水性であり、ヒアルロン酸、局所麻酔薬及びアスコルビン酸誘導体は、好ましくは水相で膨張され、溶解され、又は分散される。

注射可能なヒアルロン酸組成物はヒアルロン酸を含む。ヒアルロン酸は修飾されてもよく、例えば、分岐した又は架橋されたヒアルロン酸であってもよい。ある種の実施形態によれば、ヒアルロン酸は架橋ヒアルロン酸である。特定の実施形態によれば、ヒアルロン酸はヒアルロン酸ゲルである。

他に提供されなければ、用語「ヒアルロン酸」は、種々の鎖長及び荷電状態の、並びに架橋を含む種々の化学的修飾を含む、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸塩（ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅ）又はヒアルロナン（ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ）の全ての改変体、及びそれらの改変体の組み合わせを包含する。即ち、この用語はまた、種々の対イオンを有するヒアルロン酸の種々のヒアルロン酸塩、例えば、ヒアルロン酸ナトリウムを包含する。また、ヒアルロン酸の種々の修飾は、用語、例えば、酸化（例えば、−ＣＨ_２ＯＨの−ＣＨＯ及び／又は−ＣＯＯＨへの酸化）；近接のヒドロキシル基の過ヨウ素酸塩酸化、場合により続く還元（例えば、−ＣＨＯの−ＣＨ_２ＯＨへの還元）、又はアミンによってカップリングさせ、イミンを形成し、第２級アミンへの還元；硫酸化；脱アミド酸、場合により続く新しい酸を用いた脱アミノ化又はアミド形成；エステル化；架橋；種々の化合物による置換、例えば架橋剤又はカルボジイミド支援カップリングを用いる；ヒアルロン酸への、タンパク質、ペプチド及び活性薬剤成分などの異なる分子のカップリングを伴うもの、によって包含される。修飾の他の例は、イソウレア、ヒドラジド、ブロモヤン、モノエポキシド及びモノスルホンカップリングである。

ヒアルロン酸は、動物及び非動物源の種々の供給源から得ることができる。非動物源の供給源は酵母を含み、好ましくは細菌を含む。単一のヒアルロン酸分子の分子量は、典型的には、０．１〜１０ＭＤａの範囲であるが、他の分子量も可能である。

ある種の実施形態において、該ヒアルロン酸の濃度は、１〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲にある。いくつかの実施形態において、該ヒアルロン酸の濃度は、２〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲にある。特定の実施形態において、該ヒアルロン酸の濃度は、５〜３０ｍｇ／ｍｌの範囲、又は１０〜３０ｍｇ／ｍｌの範囲にある。ある種の実施形態において、ヒアルロン酸は架橋される。架橋されたヒアルロン酸は、共有架橋、ヒアルロン酸鎖の物理的巻き込み、及び静電相互作用、水素結合及びファン・デル・ワールス力などの種々の相互作用によって、一緒に保持されるヒアルロン酸分子の連続的なネットワークを作製するヒアルロン酸鎖間の架橋を含む。

ヒアルロン酸の架橋は、化学的架橋剤を用いた修飾によって達成されてもよい。化学的架橋剤は、例えば、ジビニルスルホン、マルチエポキシド及びジエポキシドからなる群から選択されてもよい。実施形態によれば、化学的架橋剤は、１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）、１，２−エタンジオールジグリシジルエーテル（ＥＤＤＥ）及びジエポキシオクタンからなる群から選択される。好ましい実施形態によれば、化学的架橋剤は１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）である。

架橋されたヒアルロン酸製造物は、好ましくは生体適合性である。これは全くないか、またはごく軽度の免疫応答が処置された個体に生じることを暗に意味する。即ち、全くないか、ごく軽度の望ましくない局所又は全身の効果が処置された個体で発生する。

本発明に係る架橋されたヒアルロン酸製造物は、ゲル又はヒドロゲルであってもよい。すなわち、それは、水不溶性とみなされ得るが、液体、典型的には水性液体に供された場合、ヒアルロン酸分子の架橋系を実質的に希釈することができる。

ゲルは、重量でほとんど液体が含まれており、例えば９０〜９９．９％の水を含むことができ、液体中の３次元の架橋ヒアルロン酸ネットワークに起因して、固体のように挙動する。その重要な液体含量により、ゲルは、構造的にフレキシブルであり、組織工学における足場として、組織増強のために非常に有用にする自然な組織と類似している。

前述のように、架橋ヒアルロン酸ゲルを形成するヒアルロン酸の架橋は、化学架橋剤、例えばＢＤＤＥ（１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテルなど）による修飾によって達成することができる。ヒアルロン酸濃度及び架橋の程度は、機械的特性、例えば、ゲルの弾性係数Ｇ’及び安定性に影響を与える。架橋ヒアルロン酸ゲルは、しばしば、「修飾度」という点で特徴付けられる。ヒアルロン酸ゲルの修飾度は、一般的に０．１〜１５モル％の間の範囲である。本発明による組成物における粘度及び／又は弾性係数Ｇ’に対するアスコルビン酸誘導体の影響は、低い修飾度を有する架橋ヒアルロン酸ゲルにおいて特に顕著であることが見出された。最も顕著な影響は、より架橋されたヒアルロン酸ゲルと比較し、て２モル％以下の修飾度、例えば１．５モル％以下、例えば１．２５モル％以下、例えば０．１〜２モル％以下の範囲、例えば０．２〜１．５モル％の範囲、例えば０．３モル〜１．２５モル％の範囲であるヒアルロン酸ゲルにおいて得られる。修飾度（モル％）は、ＨＡの二糖単位を繰り返す総モル量に対して、ＨＡに結合する架橋剤（単数又は複数）の量、即ち、結合した架橋剤（単数又は複数）のモル量を示す。修飾度は、ＨＡがどの程度、化学架橋剤によって化学的に修飾されたかを反映している。修飾度を決定するための架橋技術及び適切な分析技術に関する反応条件はすべて、これら及び他の関連する因子を容易に調整することができる当業者に周知であり、それにより、適切な条件を与え、０．１〜２％の範囲の修飾度を得て、修飾度に関する得られた製造物特徴を変更することができる。ＢＤＤＥ（１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル）架橋されたヒアルロン酸ゲルは、例えば、公開された国際特許出願ＷＯ９７０４０１２の実施例１及び２に記載された方法に従って調製されてもよい。

好ましい実施形態では、組成物のヒアルロン酸は、化学的架橋剤によって架橋された架橋ヒアルロン酸ゲルの形態で存在し、ここで、該ヒアルロン酸の濃度は１０〜３０ ｍｇ／ｍｌの範囲にあり、該化学的架橋剤による修飾度は０．１〜２モル％の範囲にある。

ヒアルロン酸ゲルはまた、架橋していない、すなわち、三次元の架橋ヒアルロン酸ネットワークに結合していないヒアルロン酸の部分を含むことができる。しかしながら、好ましくは、少なくとも５０重量％、好ましくは少なくとも６０重量％、より好ましくは７０重量％、最も好ましくは少なくとも８０重量％の、ゲル組成物中のヒアルロン酸は、架橋されたヒアルロン酸ネットワークの一部を形成する。

注射可能なヒアルロン酸組成物は、さらに、アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される局所麻酔薬を含む。局所麻酔薬は、可逆的な局所麻酔及び痛覚の喪失を引き起こす薬剤である。それが特定の神経経路（神経ブロック）に使用される場合、このような鎮痛（痛みの感覚の喪失）と麻痺（筋電力の損失）などの効果が達成され得る。局所麻酔薬は、注入処置のために患者が経験する疼痛又は不快感を減らすために、ヒアルロン酸組成物に添加することができる。アミド（一般にはアミノアミドともいう）型の局所麻酔薬及びエステル（一般にはアミノエステルとも呼ばれる）型の局所麻酔薬は、明確に定義され、当該技術分野において認識されている。

アミド型及びエステル型の局所麻酔薬分子は、塩基性の側鎖に結合したアミド結合又はエステル結合によって連結された芳香族部分からなる単純な化学プラン上に構築される。唯一の例外は、塩基性基を持たないベンゾカインである。。他のすべての麻酔薬は、それらが生理学的ｐＨで、主に、完全ではないが、イオン化されるように、主に８〜９の範囲のｐＫａ値を有する弱塩基である。それらの類似性の結果として、それらは、ヒアルロン酸組成物に類似した化学的及び物理的効果を有することが期待され得る。

特定の実施形態によれば、局所麻酔薬は、アミド型及びエステル型の局所麻酔薬、例えば、ブピバカイン、ブタニリカイン、カルチカイン、シンコカイン（ジブカイン）、クリブカイン、エチルパラピペリジノアセチルアミノベンゾエート、エチドカイン、リグノカイン（リドカイン）、メピバカイン、オキセサゼインから選択されるプリロカイン、ロピバカイン、トリカイン、トリメカイン、バボカイン、アルチカイン、レボブピバカイン、アミロカイン、コカイン、プロパノカイン、クロルメカイン、シクロメチカイン、プロキシメタカイン、アメソカイン（テトラカイン）、ベンゾカイン、ブタカイン、ブトキシカイン、アミノ安息香酸ブチル、クロロプロパカイン、ジメソカイン（ラロカイン）、オキシブプロカイン、ピペロカイン、パレソキシカイン、プロカイン（ノボカイン）、プロポキシカイン、トリカイン又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。

特定の実施形態によれば、局所麻酔薬は、アミド型の局所麻酔薬、例えば、ブピバカイン、ブタニリカイン、カルチカイン、シンコカイン（ジブカイン）、クリブカイン、エチルパラピペリジノアセチルアミノベンゾエート、エチドカイン、リグノカイン（リドカイン）、メピバカイン、オキセサゼイン、プリロカイン、ロピバカインから選択される、トリカイン、トリメカイン、バボカイン、アルチカイン、レボブピバカイン又は組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態によれば、局所麻酔薬は、ブピバカイン、リドカイン、ロピバカイン又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。特定の実施形態によれば、局所麻酔薬はリドカインである。リドカインは、ヒアルロン酸組成物などの注射可能な製剤における局所麻酔薬として広く用いられている周知の物質である。

アミド型又はエステル型の局所麻酔薬の濃度は、それぞれの特定の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせの治療的に関連した濃度範囲内で当業者によって選択することができる。

特定の実施形態では、該局所麻酔薬の濃度は、０．１〜３０ｍｇ／ｍｌの範囲にある。いくつかの実施形態では、局所麻酔薬の濃度は、０．５〜１０ｍｇ／ｍｌの範囲にである。

リドカインを局所麻酔薬として使用する場合、リドカインは、好ましくは１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲、より好ましくは２〜４ｍｇ／ｍｌの範囲、例えば約３ｍｇ／ｍｌの濃度で存在することができる。

注射ヒアルロン酸組成物は、さらに、アスコルビン酸誘導体を含む。用語「アスコルビン酸誘導体」は、本明細書で使用する、アスコルビン酸又はアスコルビン酸の一般的な化学構造を含むアスコルビン酸の誘導体を意味する。したがって、アスコルビン酸誘導体は、以下の化学構造を含む化合物であってもよい。

組成物のアスコルビン酸誘導体は、アスコルビン酸、あるいはアスコルビン酸に構造的に関連する化合物及び／又はアスコルビン酸から誘導される化合物であってもよい。アスコルビン酸自体は、いくつかの応用において有用であってもよいが、安定性が低いため、いくつかの実用的な応用において使用が限定される場合がある。

アスコルビン酸誘導体は水溶性であってもよい。大気条件下で水へのアスコルビン酸誘導体の溶解性は、好ましくは、組成物中の所望の濃度のアスコルビン酸誘導体の溶解を可能にするのに十分であってもよい。大気条件下で、水への水溶性アスコルビン酸誘導体の溶解性は、好ましくは、ヒアルロン酸組成物において、０．００１ｍｇ／ｍｌ以上、より好ましくは０．０１ｍｇ／ｍｌ以上の可能にするのに十分であり得る。

アスコルビン酸誘導体は、例えば、ホスファターゼ、グルコシダーゼなどによって媒介される酵素分解を介して、ｉｎ ｖｉｖｏでアスコルビン酸又はアスコルビン酸塩を形成することが可能である。ある実施形態によれば、アスコルビン酸誘導体は、インビボ条件で置かれたとき、アスコルビン酸又はアスコルビン酸塩を形成することができる。

いくつかの実施形態では、アスコルビン酸誘導体、リン酸、アスコルビン酸、アスコルビン酸のカルボン酸エステル、アスコルビン酸塩、アスコルビン酸のスルホン酸エステル、アスコルビン酸塩とのエステルからなる群から選択されるアセタール又はケタールとしては、アスコルビン酸、又はそれらの組み合わせから選択される。

アスコルビン酸誘導体は、例えば、以下の一般式：

（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ又は有機置換基である）
を有する化合物であってもよい。化合物Ｉは、例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも１つが、

（式中、Ｘは、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アミン、アルコール、グリコシド、又は

であり、ここで
ｎは０〜５００とすることができる）
である、アスコルビン酸のリン酸エステルであってもよい。

対イオンは、限定されないが、Ｎａ^＋、Ｋ^＋、Ｃａ^２＋、Ａｌ^３＋、Ｌｉ^＋、Ｚｎ^２＋、又はＭｇ^２＋であり得る。

化合物Ｉは、例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも１つが

（式中、Ｙは、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アミン、アルコール、グリコシド、アミノ酸エステルである）
である、又は

（式中、ｎは０〜５００とすることができる）
である、アスコルビン酸のカルボン酸エステルであってもよい。

化合物Ｉは、例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも１つが、

である、アスコルビン酸硫酸塩であってもよい。

対イオンは、限定されないが、Ｎａ^＋、Ｋ^＋、Ｃａ^２＋、Ａｌ^３＋、Ｌｉ^＋、Ｚｎ^２＋、又はＭｇ^２＋であり得る。

化合物Ｉは、例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも１つが、

（式中、Ｚは、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アミン、アルコール、グリコシドである）
であり、又は

（式中、ｎは０〜５００とすることができる）
である、アスコルビン酸のスルホン酸エステルであってもよい。

化合物Ｉは、例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも１つが、

（式中、Ｕは、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アミン、アルコール、グリコシドである）
であり、又は

（式中、ｎは０〜５００とすることができる）
である、アスコルビン酸の炭酸塩であってもよい。

化合物Ｉは、例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも一つが、

（式中、Ｗ、Ｗ’、及びＷ’’は、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アミン、アルコール、又は炭水化物残基、例えば、

である）
である、アセタール又はケタール置換されたアスコルビン酸であってもよい。

化合物Ｉは、例えば、一般式：

（式中、Ｈは水素であり、Ａｌｋはアルキルであり、Ａｒはアリールである）
有するアセタール又はケタール置換されたアスコルビン酸であってもよい。

いくつかの実施形態では、アスコルビン酸誘導体は、リン酸アスコルビル、硫酸スコルビル、及びアスコルビルグリコシド、又はそれらの組合せからなる群から選択される。

特定の実施形態では、アスコルビン酸誘導体は、リン酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシド、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。

いくつかの実施形態では、リン酸アスコルビルは、リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）及びリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。リン酸アスコルビルは、ホスファターゼによる酵素加水分解により、インビボでビタミンＣに変換する。

いくつかの実施形態では、アスコルビン酸誘導体は、アミノアルキルリン酸アスコルビルである。特定の実施形態では、アスコルビン酸誘導体は、アミノプロピルリン酸Ｌ−アスコルビルある。

いくつかの実施形態では、アスコルビン酸誘導体は、アスコルビルグルコシドである。アスコルビルグルコシドは、グルコシダーゼによる酵素加水分解により、インビボでビタミンＣに変換する。

いくつかの実施形態では、アスコルビン酸誘導体は、アスコルビン酸メチルシラノールである。

いくつかの実施形態では、アスコルビン酸誘導体は、Ｌ−アスコルビン酸アセトニドである。

本明細書に記載のアスコルビン酸誘導体は、非プロトン化形態又は完全に若しくは部分的にプロトン化された形態、あるいは医薬として許容される塩の形態であってもよい。具体的には、用語リン酸アスコルビル、硫酸アスコルビル、リン酸アミノアルキルアスコルビル、リン酸アミノプロピルアスコルビル、アスコルビルグリコシド、及びアスコルビルグルコシドは、非プロトン化形態又は完全に若しくは部分的にプロトン化された形、あるいは医薬として許容される塩の形態である化合物を包含することが意図される。適した対イオンの例としては、限定されないが、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、及び亜鉛が挙げられる。

アスコルビン酸誘導体の濃度は、使用する特定のアスコルビン酸誘導体に応じて当業者によって選択することができる。

特定の実施形態では、上記アスコルビン酸誘導体の濃度は、０．００１〜１５ｍｇの／ｍｌの範囲にある。特定の実施形態では、上記アスコルビン酸誘導体の濃度は、０．００１〜１０ｍｇ／ｍｌの範囲にある。いくつかの実施形態では、上記アスコルビン酸誘導体の濃度は、０．０１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲にある。ヒアルロン酸組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’のより顕著な減少を与えるため、０．０１ｍｇ／ｍｌを超える上記アスコルビン酸誘導体の濃度が好ましい。より高濃度が、付加的な利点がないヒアルロン酸組成物の安定性の望ましくない減少をもたらし得るため、５ｍｇ／ｍｌを下回る上記アスコルビン酸誘導体の濃度が好ましい。

アスコルビン酸誘導体の必要な濃度は、使用される特定のアスコルビン酸誘導体に応じて、上記で特定された範囲内で変化し得る。一例として、リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）又はリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）の適した濃度は０．０１〜１ｍｇ／ｍｌの範囲にあってもよく、一方、アスコルビルグルコシドの適した濃度は、０．１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲にあってもよい。

このように、本実施形態によれば、アスコルビン酸誘導体は、好ましくは０．０１〜１ｍｇ／ｍｌのと０．０１〜０．５ｍｇ／ｍｌの範囲内の範囲内の濃度のリン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）又はアスコルビン酸リン酸マグネシウム（ＭＡＰ）である。

別の実施形態によれば、アスコルビン酸誘導体は、０．０１〜１ｍｇ／ｍｌの範囲、好ましくは０．０１〜０．８ｍｇ／ｍｌの範囲、より好ましくは０．０５〜０．４ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度であるアスコルビルグルコシドである。

前述のように、アスコルビン酸誘導体の添加はヒアルロン酸組成物の安定性を増加させないことが観察された。換言すれば、本発明に係る注射可能なヒアルロン酸組成物は、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物に比べて、増大した安定性を示さない。

本明細書で使用するとき、安定性なる用語は、使用前の貯蔵及び操作中に分解に耐性となるヒアルロン酸組成物の能力を示すために使用される。ヒアルロン酸又はヒアルロン酸ゲルへの構成物の添加が、上記ヒアルロン酸又はヒアルロン酸ゲルの安定性に影響を及ぼし得ることが知られている。ヒアルロン酸又はヒアルロン酸ゲルの組成物の安定性は、広範囲の異なる方法によっての範囲によって決定することができる。安定性を決定するための方法としては、限定されないが、組成物の均質性、色、透明度、ｐＨ、ゲル含量、及びレオロジー特性を評価することが挙げられる。ヒアルロン酸組成物の安定性は、多くの場合、経時的に上記パラメータの１つ以上を観測又は測定することによって決定される。安定性は、例えば、経時的にヒアルロン酸組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’を測定することによって決定されてもよい。粘度は、例えば、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＣ１４又はＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いる回転粘度測定によって、「ゼロ剪断粘度η_０」として測定され得る。また、粘度を測定する他の方法も利用可能である。弾性係数Ｇ’は、例えば、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために歪掃引を行い、次に、ＬＶＲ内で粘弾性を測定することによって、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて測定され得る。弾性係数Ｇ’を測定する他の方法も利用可能である。

より具体的な実施形態では、２〜５０ｍｇ／ｍｌのヒアルロン酸を含む水性ヒアルロン酸ゲル；０．５〜１０ｍｇ／ｍｌのリドカイン；並びにリン酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシド又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、０．０１〜５ｍｇ/ｍｌのアスコルビン酸誘導体、を含む注射可能なヒアルロン酸組成物が提供される。

より具体的な実施形態では、２〜５０ｍｇ／ｍｌのヒアルロン酸を含む水性ヒアルロン酸ゲル；０．５〜１０ｍｇ／ｍｌのリドカイン；並びに０．０１〜５ｍｇ/ｍｌのリン酸アスコルビル、例えば、リン酸アスコルビルナトリウム又はマグネシウム、を含む注射可能なヒアルロン酸組成物が提供される。

別のより具体的な実施形態では、２〜５０ｍｇ／ｍｌのヒアルロン酸を含む水性ヒアルロン酸ゲル；０．５〜１０ｍｇ／ｍｌのリドカイン；並びに０．０１〜５ｍｇ/ｍｌのアスコルビルグリコシド、例えば、アスコルビルグルコシド、を含む注射可能なヒアルロン酸組成物が提供される。

いくつかの実施形態では、組成物は、滅菌に供されている。特定の実施形態では、組成物は滅菌され、即ち、組成物は、組成物を殺菌するために、熱及び／又は水蒸気処理に供されている。いくつかの実施形態では、組成物は、オートクレーブ、又は熱若しくは水蒸気による類似の滅菌に供されている。滅菌、例えばオートクレーブは、Ｆ_０値≧４で行うことができる。飽和水蒸気滅菌プロセスのＦ_０値は、Ｚ値が１０である微生物と比較して、最終容器中の製造物への、該プロセスによって到達される１２１℃の温度にて数分の同等な時間で示される致死性である。

ヒアルロン酸組成物は、熱又は水蒸気による処理によって殺菌に供される場合、粘度及び／又は弾性係数Ｇ’は、一般的に低減する。アミド型又はエステル型の局所麻酔薬がヒアルロン酸組成物に添加された場合、粘度及び／又は弾性係数Ｇ’の減少は低減し、硬く又はより粘性の最終製造物が得られる。アスコルビン酸誘導体の添加は、局所麻酔薬のこの影響を中和し、それにより、ヒアルロン酸成分を変更せずに、局所麻酔薬を含まないヒアルロン酸組成物と非常によく似た粘度及び／又は弾性係数Ｇ’を有する最終製造物が生成される。

本発明に係る架橋されたヒアルロン酸製造物、又はその水性組成物は、予め充填されたシリンジ、即ち、架橋されたヒアルロン酸組成物を予め充填され、オートクレーブされたシリンジの形態で提供されてもよい。

本明細書に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物は、患者又は対象の軟組織への組成物の注射によって、医学的手法、並びに非医学的な、例えば純粋に化粧的な手法において採用されてもよい。組成物は、ヒアルロン酸ゲルの注入によって、例えば、軟組織の増加、例えば皺のばしにおいて有用であることが見出された。組成物は、本明細書では皮膚再生とも称される化粧的処置において特に有用であることが見出され、そこでは、少量のヒアルロン酸が、処置されるべき皮膚の領域全体に分布した多数の注射部位で真皮に注射され、皮膚の色調と皮膚の弾力性の改善をもたらす。皮膚再生は簡単な手法であり、その手法に関連付けられる健康へのリスクは非常に低い。本明細書に例証される他の態様では、薬剤として使用するための上記のような注射可能なヒアルロン酸組成物が提供される。組成物は、例えば、様々な皮膚科学的状態の治療において有用である。具体的には、創傷治癒、乾燥皮膚状態又は日焼けで痛んだ皮膚の治療、沈着過度障害の治療、脱毛の治療及び予防、並びに疾患の経過の要因の１つとしての炎症を有する状態、例えば乾癬及び皮脂欠乏性湿疹の治療からなる群から選択される皮膚科学的治療における使用のために上記のような注射可能なヒアルロン酸組成物が提供される。換言すると、創傷治癒、乾燥皮膚状態又は日焼けで痛んだ皮膚の治療、沈着過度障害の治療、脱毛の治療及び予防、並びに疾患の経過の要因の１つとしての炎症を有する状態、例えば乾癬及び皮脂欠乏性湿疹の治療からなる群から選択される皮膚科学的治療において使用するための薬剤の製造において使用するための上記のような注射可能なヒアルロン酸組成物が提供される。

別の実施形態によれば、関節内注射による関節障害の治療に使用するための上記のような注射可能なヒアルロン酸組成物が提供される。

本明細書に例証される他の態様によれば、対象の皮膚に組成物を注入することによって、対象の化粧的、非医学的な処置のための上記のような注射可能なヒアルロン酸組成物の使用が提供される。化粧的、非医学的な処置の目的は、皮膚の外観を改善し、脱毛を予防及び／又は治療し、対象の顔又は体の皺をのばし又は輪郭を整えるためのものであってもよい。化粧的、非医学的な使用は、任意の形態の疾患又は病状の処置を伴わない。皮膚の外観を改善する例としては、限定されないが、日焼けで痛んだ皮膚又は皮膚の老化、皮膚の処置、皮膚再生、皮膚の白化作用、例えば老人性そばかす、肝斑及び雀卵班などの沈着過度障害の治療が挙げられる。

特定の実施形態では、皮膚の外観を改善し、脱毛を予防及び／又は治療し、対象の顔又は体の皺をのばし又は輪郭を整えるための上述したような注射ヒアルロン酸組成物の使用が提供される。用途は好ましくはヒト対象の真皮及び/又は皮下組織に組成物を注入することを含む。皮膚の外観を改善予防及び/又は脱毛の治療、しわを充填又は被写体の顔又は体の輪郭のための注射可能なヒアルロン酸組成物の使用は、例えば、本質的に又は完全に非医療あってもよい純粋に化粧品。

特定の実施形態によれば、皮膚の外観を改善するための上記のような注射可能なヒアルロン酸組成物の使用が提供される。好ましい実施形態によれば、皮膚再生のために上記のような注射可能なヒアルロン酸組成物の使用が提供される。

特定の実施形態によれば、脱毛の予防及び／又は治療のための上記のような注射可能なヒアルロン酸組成物の使用が提供される。

特定の実施形態によれば、対象の顔又は体の皺をのばし、又は輪郭を調整するための上述したように注射可能なヒアルロン酸組成物の使用が提供される。

本明細書に例証される他の態様によれば、以下：
ａ）上述のように注射可能なヒアルロン酸組成物を用意し、及び
ｂ）対象の皮膚に注射可能なヒアルロン酸組成を注射する
ことを含む、皮膚の外観を改善し、脱毛を予防及び／又は治療し、対象の顔又は体の皺をのばし又は輪郭を整える方法が提供される。

特定の実施形態では、注射可能なヒアルロン酸組成物は、真皮及び／又は皮下組織に注射される。

特定の実施形態によれば、この方法は、皮膚の外観を改善することを含む。好ましい実施形態によれば、この方法は、皮膚再生を含む。

特定の実施形態によれば、この方法は、脱毛の予防及び／又は治療ことを含む。

特定の実施形態によれば、この方法は、対象の顔又は体の皺のばし又は輪郭を備えることを含む。

本明細書に例証される他の態様によれば、以下：
ａ）ヒアルロン酸、アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される局所麻酔薬、並びに、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって生じる組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’における影響を阻止又は減少させる量のアスコルビン酸誘導体を混合し、並びに
ｂ）熱による滅菌に該混合物を供する
ことを含む、ヒアルロン酸組成物を製造する方法が提供される。

組成物の製造方法では、上記アスコルビン酸誘導体は、熱による滅菌に起因した、組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’に対する局所麻酔薬の効果を阻止又は減少させるために操作的である。

組成物の成分、即ち、ヒアルロン酸、局所麻酔薬及びアスコルビン酸誘導体は、注射可能なヒアルロン酸組成物について上述されるようにさらに定義されてもよい。

製造されたヒアルロン酸組成物は、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物に比べて、増加した安定性を示さない。

いくつかの実施形態では、工程ｂ）の滅菌は、熱処理に混合物を供することを含む。特定の実施形態では、工程ｂ）の滅菌は、Ｆ_０値≧４で混合物をオートクレーブすることを含む。滅菌は、組成物について上述したようにさらに特徴付けることができる。

本明細書に例証される他の態様によれば、ヒアルロン酸、アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される局所麻酔薬をさらに含む注射可能なヒアルロン酸組成物において、熱による滅菌に起因した、組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’における局所麻酔薬の影響を阻止又は低減するために、アスコルビン酸誘導体の使用が提供される。

組成物の成分は、注射可能なヒアルロン酸組成物について上述したようにさらに定義することができる。滅菌は、上述したようにさらに特徴付けられてもよい。

アスコルビン酸誘導体を用いて形成された注射可能なヒアルロン酸組成物は、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物に比べて、増大した安定性を示さない。

図１は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＭＡＰ（リン酸アスコルビルマグネシウム）の効果を示すグラフである。 図２は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＭＡＰの効果を示すグラフである。 図３は、リドカインを含む非架橋ヒアルロン酸に対するＭＡＰの効果を示すグラフである。 図４は、リドカインを含む非架橋ヒアルロン酸に対するＭＡＰの効果を示すグラフである。 図５は、様々なＦ_０値でオートクレーブされたリドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＭＡＰの効果を示すグラフである。 図６は、ブピバカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＭＡＰの効果を示すグラフである。 図７は、テトラカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＭＡＰの効果を示すグラフである。 図８は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＳＡＰ（リン酸アスコルビルナトリウム）の効果を示すグラフである。 図９は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するアスコルビン酸メチルシラノールの効果を示すグラフである。 図１０は、ブピバカインを含む非架橋ヒアルロン酸に対するアスコルビルグルコシドの効果を示すグラフである。 図１１は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対する種々の濃度のＳＡＰの効果を示すグラフである。 図１２は、テトラカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＬ−アスコルビン酸アセトニドの効果を示すグラフである。 図１３は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＳＡＰの効果を示すグラフである。 図１４は、リドカインを含む非架橋ヒアルロン酸に対するリン酸アミノプロピルアスコルビルの効果を示すグラフである。 図１５は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するアスコルビルグルコシドの効果を示すグラフである。 図１６は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するアスコルビルグルコシドの効果を示すグラフである。 図１７は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するアスコルビルグルコシドの効果を示すグラフである。 図１８は、リドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＭＡＰの効果を示すグラフである。 図１９は、安定性試験におけるリドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＳＡＰの効果を示すグラフである。 図２０は、安定性試験におけるリドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するアスコルビルグルコシドの効果を示すグラフである。 図２１は、安定性試験におけるリドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するＭＡＰ又はアスコルビルグルコシドの効果を示すグラフである。 図２２は、安定性試験におけるリドカインを含むヒアルロン酸ゲルに対するアスコルビルグルコシドの効果を示すグラフである。

実施態様の項目別リスト
１．ヒアルロン酸、アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される局所麻酔薬、並びに熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’への影響を阻止又は減少させる量のアスコルビン酸誘導体を含む注射可能なヒアルロン酸組成物。
２．前記組成物が、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物と比較して、安定性の増加を示さない、上記１に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３．前記ヒアルロン酸が修飾されたヒアルロン酸である、上記１又は２に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
４．前記ヒアルロン酸がヒアルロン酸ゲルである、上記３に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
５．前記ヒアルロン酸ゲルが、化学的架橋剤を用いた修飾によって架橋される、上記４に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

６．前記化学的架橋剤が、ジビニルスルホン、マルチエポキシド及びジエポキシドからなる群から選択される、上記５に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
７．前記化学的架橋剤が、１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）、１，２−エタンジオールジグリシジルエーテル（ＥＤＤＥ）及びジエポキシオクタンからなる群から選択される、上記６に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
８．前記化学的架橋剤が１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）である、上記７に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
９．前記ヒアルロン酸ゲルが、２モル％以下、例えば１．５モル％以下、例えば１．２５モル％以下の修度を有する、上記５〜８のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
１０．前記ヒアルロン酸ゲルが、０．１〜２モル％の範囲、例えば０．２〜１．５モル％の範囲、例えば０．３〜１．２５モル％の範囲の修飾度を有する、上記５〜８のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

１１．前記ヒアルロン酸の濃度が、１〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記１〜１０のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
１２．前記ヒアルロン酸の濃度が２〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記１１に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
１３．前記ヒアルロン酸の濃度が、１０〜３０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記１２に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
１４．前記局所麻酔薬が、リグノカイン（リドカイン）、ブピバカイン、ブタニリカイン、カルチカイン、シンコカイン（ジブカイン）、ジブカイン、エチルパラピペリジノアセチルアミノベンゾエート、エチドカイン、メピバカイン、オキセサゼイン、プリロカイン、ロピバカイン、トリカイン、トリメカイン、バボカイン、アルチカイン、レボブピバカイン、アミロカイン、コカイン、プロパノカイン、クロルメカイン、シクロメチカイン、プロキシメタカイン、アメソカイン（テトラカイン）、ベンゾカイン、ブタカイン、ブトキシカイン、アミノ安息香酸ブチル、クロロプロパカイン、ジメソカイン（ラロカイン）、オキシブプロカイン、ピペロカイン、パレソキシカイン、プロカイン（ノボカイン）、プロポキシカイン、トリカイン又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、上記１〜１３のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
１５．前記局所麻酔薬が、アミド型局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、上記１〜１４のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

１６．前記局所麻酔薬が、リグノカイン（リドカイン）、ブピバカイン、ブタニリカイン、カルチカイン、シンコカイン（ジブカイン）、ジブカイン、エチルパラピペリジノアセチルアミノベンゾエート、エチドカイン、メピバカイン、オキセサゼイン、プリロカイン、ロピバカイン、トリカイン、トリメカイン、バボカイン、アルチカイン、レボブピバカイン又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、上記１５に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
１７．前記局所麻酔薬が、リドカイン、ブピバカイン及びロピバカイン又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、上記１６に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
１８．前記局所麻酔薬がリドカインである、上記１７に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
１９．前記局所麻酔薬の濃度が、０．１〜３０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記１〜１８のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
２０．前記局所麻酔薬の濃度が、０．５〜１０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記１９に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

２１．前記リドカインの濃度が、１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記２０に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
２２．前記リドカインの濃度が、２〜４ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記２１に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
２３．前記リドカインの濃度が、約３ｍｇ／ｍｌである、上記２２に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
２４．前記アスコルビン酸誘導体が、化学構造：

を含む化合物である、上記１〜２３のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
２５．前記アスコルビン酸誘導体が、大気条件下で水溶性である、上記１〜２４のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

２６．前記アスコルビン酸誘導体が、インビボ条件に置かれた場合、アスコルビン酸又はアスコルビン酸塩を形成することができる、上記１〜２５のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
２７．前記アスコルビン酸誘導体が、リン酸アスコルビル、硫酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシド、又はその組み合わせからなる群から選択される、上記１〜２６のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
２８．前記アスコルビン酸誘導体が、リン酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシド、又はその組み合わせからなる群から選択される、上記１〜２７のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
２９．前記アスコルビン酸誘導体がリン酸アスコルビルである、上記１〜２８のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３０．前記リン酸アスコルビルが、リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）及びリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）からなる群から選択される、上記２９に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

３１．前記アスコルビン酸誘導体がアスコルビルグリコシドである、上記１〜２８のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３２．前記アスコルビン酸誘導体がアスコルビルグルコシドである、上記３１に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３３．前記アスコルビン酸誘導体の濃度が，０．００１〜１５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記１〜３２のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３４．前記アスコルビン酸誘導体の濃度が、０．００１〜１０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記３３に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３５．前記アスコルビン酸誘導体の濃度が、０．０１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記３４に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

３６．前記アスコルビン酸誘導体の濃度が、０．０１〜０．５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記３５に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３７．前記リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）又はリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）の濃度が、０．０１〜１ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記３０に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３８．前記リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）又はリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）の濃度が、０．０１〜０．５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記３７に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
３９．前記アスコルビルグルコシドの濃度が、０．０１〜０．８ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記３１に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
４０．前記アスコルビルグルコシドの濃度が、０．０５〜０．４ｍｇ／ｍｌの範囲にある、上記３９に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

４１．− ２〜５０ｍｇ／ｍｌのヒアルロン酸を含む水性ヒアルロン酸ゲル；
− ０．５〜１０ｍｇ／ｍｌのリドカイン；及び
− リン酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシド又はそれらの組み合わせからなる群から選択される０．０１〜５ｍｇ／ｍｌのアスコルビン酸誘導体
を含む、上記１に記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
４２．上記１〜４１のいずれか１つに記載の滅菌した注射可能なヒアルロン酸組成物。
４３．前記組成物が、オートクレーブ又は熱による同様の滅菌処理によって滅菌に供される、上記４２に記載の滅菌したヒアルロン酸組成物。
４４．薬剤として使用するための、上記１〜４３のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
４５．創傷治癒、乾燥皮膚状態及び日焼けで痛んだ皮膚の治療、沈着過度障害の治療、脱毛の治療及び予防、並びに疾患経過の成分として炎症を有する状態、例えば乾癬及び皮脂欠乏性湿疹の治療からなる群から選択される皮膚科的治療において使用するための、上記１〜４３のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。

４６．関節内投与による関節障害の治療において使用するための、上記１〜４３のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物。
４７．皮膚の外見の改善、脱毛の治療及び／又は予防、対象の皺のばし又は顔若しくは体の輪郭調整のための、上記１〜４３のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物の化粧的な非医学的使用。
４８．対象の皮膚の外見を改善するための、上記４７に記載の化粧的な非医学的使用。
４９．対象の皺のばしのための、上記４７に記載の化粧的な非医学的使用。
５０．ａ）上記１〜４３のいずれか１つに記載の注射可能なヒアルロン酸組成物を用意し；及び
ｂ）該注射可能なヒアルロン酸組成物を対象の皮膚に注射する
ことを含む、皮膚の外見の改善、脱毛の予防及び／又は治療、対象の顔又は体の皺のばし又は輪郭調整の化粧的な非医学的使用。

５１．前記注射可能なヒアルロン酸組成物が、真皮及び／又は皮下組織に注射される、上記５０に記載の方法。
５２．ａ）ヒアルロン酸、アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせ、並びに熱による滅菌時に局所麻酔薬によって生じる組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’に対する影響を阻止又は低減させる量のアスコルビン酸誘導体を混合し、及び
ｂ）該混合物を熱に供する
ことを含む、ヒアルロン酸組成物を製造する方法。
５３．形成されたヒアルロン酸組成物が、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物と比較して安定性の増加を示さない、上記５２に記載の方法。
５４．工程ｂ）が該混合物をＦ_０値≧４に供することを含む、上記５２又は５３に記載の方法。
５５．熱による滅菌に起因した、組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’を阻止又は低減させるために、ヒアルロン酸、及びアミド及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される局所麻酔薬をさらに含む注射可能なヒアルロン酸組成物におけるアスコルビン酸誘導体の使用。
５６．前記ヒアルロン酸組成物が、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物と比較して、安定性の増加を示さない、上記５５に記載の使用。

これらに限定することを望むことなしに、本発明は、以下のように実施例により説明される。ヒアルロン酸ポリマー及びヒアルロン酸ゲルは、通常、いくらかのバッチからバッチへの変動を供する可能性があるため、各実施例は、同等の結果を得るために、ヒアルロン酸ポリマー又はヒアルロン酸ゲルの単一のバッチで行われた。別の実施例において同様の組成物間での、例えば、レオロジー特性又は粘度のわずかな変動は、このようなバッチからバッチへの変動に起因している可能性がある。

実施例１．リドカインとＭＡＰを含むヒアルロン酸ゲル
この実験では、添加物を含まないヒアルロン酸ゲルのオートクレーブ後のレオロジー特性が、それぞれ、添加されたリドカインを含むヒアルロン酸ゲル、及び添加されたリドカインとＭＡＰを含むヒアルロン酸ゲルと比較された。

表１に概要される様々な濃度のリドカインとＭＡＰを有する製剤を下記のように調製した。

すべての製剤において、１モル％の修飾度を有し、ヒアルロン酸含有量が２０ｍｇ／ｍｌであるＢＤＤＥ（１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル）架橋されたヒアルロン酸ゲルを用いた。修飾度（モル％）は、、ＨＡの二糖単位を繰り返す総モル量と比較した、ＨＡに結合している架橋剤（単数又は複数）の量、即ち、結合した架橋剤（単数又は複数）のモル量を示す。修飾度は、ＨＡがどの程度、架橋剤によって化学的に修飾されたかを反映している。

ＢＤＤＥ（１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル）架橋されたヒアルロン酸ゲルは、例えば、公開された国際特許出願ＷＯ９７０４０１２の実施例１及び２に記載の方法に従って調製することができる。

リドカイン塩酸塩一水和物（ＣＡＳ番号６１０８−０５−０，Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＵＳＡ）のストック溶液は、ＷＦＩ（注射用水）に塩酸リドカイン一水和物を溶解することによって調製され、リン酸アスコルビルマグネシウムのストック溶液（ＭＡＰ、ＣＡＳ番号１１４０４０−３１−２，Ｎｉｋｋｏ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ｃｏ，Ｊａｐａｎ）は、リン酸緩衝生理食塩水（８ｍＭ、０．９％のＮａＣｌ）にＭＡＰを溶解することによって調製された。

製剤１ａ：
ヒアルロン酸ゲルは、リン酸緩衝生理食塩水（８ｍＭ、０．９％のＮａＣｌ）を添加することによって、図１ｂ〜１ｇと同程度に希釈された。

製剤１Ｂ：
リドカインのストック溶液をヒアルロン酸ゲルに添加し、最終濃度を３ｍｇ／ｍｌゲルとした。

製剤１ｃ：
リドカインのストック溶液及びＭＡＰのストック溶液をヒアルロン酸ゲルに添加し、最終濃度を３ｍｇリドカイン／ｍｌゲル及び０．０７ｍｇ ＭＡＰ／ｍｌゲルとした。

製剤１ｄ〜１ｇは、リドカインストック溶液及びＭＡＰストック溶液の量を変化させることによって同様に調製された。すべての製剤について、リン酸緩衝生理食塩水（８ｍＭ、０．９％ＮａＣｌ）が、同程度に希釈物を調整するために添加された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜３０）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引（ｓｔｒａｉｎ ｓｗｅｅｐ）は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図１に示す。ＭＡＰは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を中和する（ｃｏｕｎｔｅｒａｃｔ）。ＭＡＰ濃度が高くなるにつれて、弾性Ｇ’係数の減少が増大する。より高濃度のリドカインは、弾性係数Ｇ’の増加に影響を与えない。

実施例２．リドカインとＭＡＰを含むより高い修飾度を有するヒアルロン酸ゲル
表２に概要される製剤は、より高い修飾度（約７％）を有するヒアルロン酸ゲルを用いたことを除いて、本質的には、実施例１に記載の方法に従って調製された。ヒアルロン酸ゲルは、例えば、米国特許第６，９２１，８１９Ｂ２号の実施例に記載されている方法に従って調製されてもよい。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２９）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図２に示す。ＭＡＰは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’への影響を中和する。

実施例３．リドカインとＭＡＰを含む非架橋ヒアルロン酸
表３に概要される製剤は、平均分子量が１×１０^６Ｄａである非架橋ヒアルロン酸を用いたことを除いて、本質的に、実施例１に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

製剤の粘度は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて、回転粘度計により試験された。結果を図３に示す。ＭＡＰは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の粘度に影響を中和する。

実施例４．より低濃度のリドカインとＭＡＰを含む非架橋ヒアルロン酸
表４に概説される製剤は、より低濃度のＭＡＰを使用したことを除いて、本質的に、実施例３に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。製剤の粘度は、Ｂｏｈｌｉｎｇ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を使用して、回転粘度計により試験された。

結果を図４に示す。ＭＡＰは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こさる組成物の粘度における影響を中和する。

実施例５．異なるＦ _０ 値でオートクレーブされたリドカインとＭＡＰを含むヒアルロン酸ゲル
表５に概要される製剤は、異なる濃度のＭＡＰを用いたことを除いて、本質的に、実施例１に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、表５に記載の異なるＦ_０値のＧｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブでオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性は、ＬＶＲ内で測定された。

結果を図５に示す。熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’に与える影響は、より高いＦ_０値について僅かに大きくなっている。ＭＡＰは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こさる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を中和する。

実施例６．ブピバカインとＭＡＰを含むヒアルロン酸ゲル
表６に概要される製剤は、リドカインがブピバカイン（ＣＡＳ番号２１８０−９２−９、Ｃａｍｂｒｅｘ社、Ｋａｒｉｓｋｏｇａ、スウェーデン）に置き換えられ、１％未満の修飾度を有し、ヒアルロン酸含有量が１２ｍｇ／ｍｌであるヒアルロン酸ゲルを用いていることを除いて、本質的に、実施例１に記載される方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図６に示す。ブピバカインは、リドカインと同様の、組成物の弾性係数Ｇ’に対する影響を有する。ＭＡＰは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こさる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を中和する。

実施例７．テトラカインとＭＡＰを含むヒアルロン酸ゲル
表７に概説される製剤は、リドカインがテトラカイン（ＣＡＳ番号１３６−４７−０，Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＵＳＡ）で置換され、ＭＡＰ濃度が０．３ｍｇ／ｍｌであることを除いて、本質的に、実施例１に記載した方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図７に示す。テトラカインは、リドカインと同様の、組成物の弾性係数Ｇ’に対する影響を有する。ＭＡＰは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こさる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を中和する。

実施例８．リドカインとＳＡＰを含むヒアルロン酸ゲル
表１０に概要される製剤は、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）が、リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）に置換されたことを除いて、本質的に、実施例１に記載の方法に従って調製された。

ＳＡＰ（ＣＡＳ番号６６１７０−１０−３，Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＵＳＡ）のストック溶液は、リン酸緩衝生理食塩水（８ｍＭ、０．９％のＮａＣｌ）中にＳＡＰを溶解することによって調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２９）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図８に示す。ＳＡＰは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を中和する。

実施例９．リドカインとアスコルビン酸メチルシラノールを含むヒアルロン酸ゲル
表１１で概要される製剤は、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）が、アスコルビン酸メチルシラノール（ＣＡＳ番号１８７９９１−３９−５）を含有するアスコルボシランＣ（製品番号０７８，Ｅｘｓｙｍｏｌ，Ｍｏｎａｃｏ）で置換されたことを除いて、実施例１に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図９に示す。アスコルビン酸メチルシラノールは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係Ｇ’の影響を効果的にを中和する。

実施例１０．ブピバカインとアスコルビルグルコシドを含む非架橋ヒアルロン酸
表１０に概要される製剤は、リドカインがブピバカインで置換され、ＭＡＰがアスコルビルグルコシド（ＣＡＳ番号１２９４９９−７８−１，ＣａｒｂｏＭｅｒ，Ｉｎｃ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＵＳＡ）で置換されたことを除いて、本質的に、実施例３に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

製剤の粘度はＢｏｈｌｉｎｇ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＣ１４）を使用して、回転粘度計により試験された。

結果を図１０に示す。アスコルビルグルコシドは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の粘度における影響を中和する。

実施例１１．リドカインと種々の濃度のＳＡＰを含むヒアルロン酸ゲル
表１１で概要される製剤は、本質的に、種々の濃度のリン酸アスコルビルナトリウム、ＳＡＰを使用したことを除いて、本質的に、実施例８に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。結果を図１１に示す。ＳＡＰは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を中和する。ＳＡＰの濃度が高くなるにつれ、その影響を大きくなる。

実施例１２．テトラカインとＬ−アスコルビン酸アセトニドを含むヒアルロン酸ゲル
表１２に概要される製剤は、ＭＡＰが、Ｌ−アスコルビンアセトニド（ＣＡＳ番号１５０４２−０１−０，Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ，Ｂｅｒｋｓｈｉｒｅ，ＵＫ）で置換され、高濃度の誘導体を使用したことを除いて、本質的に、実施例７に記載した方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜５）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図１２に示す。Ｌ−アスコルビンアセトニドは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を効果的に中和する。

実施例１３．リドカインとＳＡＰを含むより高い修復度を有するヒアルロン酸ゲル
表１３に概要される製剤は、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）がリン酸アスコルビルナトリウム、ＳＡＰ（ＣＡＳ番号６６１７０−１０−３，Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＵＳＡ）で置換され、別の濃度の誘導体を用いたことを除いて、本質的に、実施例１に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜３２）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図１３に示す。ＳＡＰは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を中和する。

実施例１４．リドカインとリン酸アミノプロピルアスコルビルを含む非架橋ヒアルロン酸
表１４に概要される製剤は、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）が、リン酸アミノプロピルアスコルビル（Ｍａｃｒｏ Ｃａｒｅ、大韓民国）で置換され、より高濃度の誘導体を用いたことを除いて、本質的に、実施例３に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

製剤の粘度は、Ｂｏｈｌｉｎｇ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を使用して、回転粘度計により試験された。

結果を図１４に示す。リン酸アミノプロピルアスコルビルは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の粘度に対する影響を効果的に中和する。

実施例１５．リドカインとアスコルビルグルコシドを含むヒアルロン酸ゲル
表１５に概要される製剤は、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）が、アスコルビルグルコシド（ＣａｒｂｏＭｅｒ，Ｉｎｃ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＵＳＡ）で置換され、別の濃度の誘導体を用いたことを除いて、本質的に、実施例１に記載した方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２３）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図１５に示す。アスコルビルグルコシドは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’に対する影響を中和する。

実施例１６．リドカインとアスコルビルグルコシドを含むヒアルロン酸ゲル
表１６に概要される製剤は、１％未満の修復度を有し、ヒアルロン酸含有量が１２ｍｇ／ｍｌであるヒアルロン酸ゲルを用い、より高濃度の誘導体を用いたことを除いて本質的に、実施例１５に記載した方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２３）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図１６に示す。アスコルビルグルコシドは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’に対する影響を中和する。

実施例１７．リドカインとアスコルビルグルコシドを含むヒアルロン酸ゲル
表１７に概要される製剤は、別の製造業者（Ｈａｙａｓｈｉｂａｒａ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ，Ｏｋａｙａｍａ，Ｊａｐａｎ）からのアスコルビルグルコシドを用い、高濃度の誘導体を使用したことを除いて、本質的に、実施例１５に記載の方法に従って調製された。この実施例では、ヒアルロン酸含有量が１６ｍｇ／ｍｌであるヒアルロン酸ゲルを使用した。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２３）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図１７に示す。アスコルビルグルコシドは、熱による殺菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’に対する影響を中和する。

実施例１８．リドカインとＭＡＰを含む異なる修復度のヒアルロン酸ゲル
表１８に概要される製剤は、別の濃度のＭＡＰを用いたことを除いて、本質的に、実施例１に記載した方法に従って調製された。この実施例では、異なる修復度のヒアルロン酸ゲルを使用した。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図１８に示す。ＭＡＰは、熱による滅菌時に局所麻酔薬によって引き起こされる組成物の弾性係数Ｇ’の影響を中和する。その影響は、より低い修復度を有する製剤において顕著である。

実施例１９．６０℃における１４日間の安定性試験
リドカインとＳＡＰを含むより高い修飾度のヒアルロン酸ゲル
表１９に概要される製剤は、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）が、リン酸アスコルビルナトリウム、ＳＡＰで置換され、及びより低濃度の誘導体を用いたことを除いて、本質的に、実施例２に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜３２）でオートクレーブされた。

６０℃における１４日間の安定性試験は、０、３、７、１１、及び１４日目にサンプリングを行った。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図１９に示す。組成物の安定性はＳＡＰによって増加しない。ＳＡＰを含む組成物の分解速度はＳＡＰを含まない組成物に対応する。

実施例２０．６０℃における１４日間の安定性試験
リドカインとアスコルビルグルコシドを含むヒアルロン酸ゲル
表２０で概要される製剤は、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）が、アスコルビルグルコシド（ＣａｒｂｏＭｅｒ，Ｉｎｃ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＵＳＡ）によって置換され、別の濃度の誘導体を用いたことを除いて、本質的に、実施例１に記載の方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２２）でオートクレーブされた。

６０℃における１４日間の安定性試験は、０、７、及び１４日目にサンプリングを行った。

ゲル含有量は、製剤の既知量に過剰な生理食塩水を添加し、希釈懸濁液を形成するように十分にゲルを分散させることによって決定された。ゲルの希釈懸濁液は、０．２２ｍｍのフィルターを通じて濾過され、濾過物（「抽出部分」）中のＨＡ濃度は、カルバゾール法を用いて決定された。ゲル含有量は、製品の希釈懸濁液を濾過するときに、０．２２ｍｍのフィルターを通過することができない充填剤におけるＨＡの画分として算出された。

結果を図２０に示す。アスコルビルグルコシドを含まない製剤に比べて、アスコルビルグルコシドを含む組成物については安定性の変化はない。

実施例２１．６０℃における１４日間の安定性試験
リドカイン、ＭＰＡ又はアスコルビルグルコシドを含むヒアルロン酸ゲル
表２１に概要される製剤は、ＭＡＰ又はアスコルビルグルコシド（ＣａｒｂｏＭｅｒ， Ｉｎｃ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＵＳＡ）を用い、１％未満の修飾度を有し、ヒアルロン酸含有量が１２ｍｇ／ｍｌであるヒアルロン酸ゲルを用いたことを除いて、本質的に、実施例１に記載した方法に従って調製された。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２６）でオートクレーブされた。

６０℃における１４日間の安定性試験は、０、３、７、１１、及び１４日目にサンプリングを行った。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図２１に示す。組成物の安定性は、アスコルビルグルコシドの影響を受けない。ＭＡＰを含む組成物においては、安定性のわずかな減少が見られた。しかしながら、本発明者らは、組成物の安定性が依然として許容され、アスコルビン酸誘導体の添加と関連した利点は、添加によって引き起こされる安定性のわずかな減少を上回ることを見出した。

実施例２２．９０℃における１６時間の安定性試験
リドカインとアスコルビルグルコシドを含むヒアルロン酸ゲル
表２２に概要される製剤は、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）が、アスコルビルグルコシド（Ｈａｙａｓｈｉｂａｒａ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ，Ｏｋａｙａｍａ，Ｊａｐａｎ）に置換され、他の濃度の誘導体を用いたことを除いて、本質的に、実施例１に記載の方法に従って調製された。この実施例では、ヒアルロン酸含有量が１６ｍｇ／ｍｌであるヒアルロン酸ゲルを使用した。

製剤のｐＨ値を７．５±０．２に調整し、製剤は、１ｍｌのガラスシリンジ（ＢＤ Ｈｙｐａｋ ＳＣＦ）に充填され、Ｇｅｔｉｎｇｅ ＧＥＶ６６１０ ＥＲＣ−１オートクレーブ（Ｆ_０〜２６）でオートクレーブされた。

９０℃における１６時間の安定性試験は、０、８、及び１６時間目にサンプリングを行った。

製剤のレオロジー特性は、Ｂｏｈｌｉｎ ＶＯＲ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（測定システムＰＰ３０、ギャップ１．００ｍｍ）を用いて分析された。最初、歪み掃引は、線形粘弾性領域（ＬＶＲ）を見出すために行われ、次に、粘弾性特性はＬＶＲ内で測定された。

結果を図２２に示す。より低濃度におけるアスコルビルグルコシドは、組成物の安定性には影響を与えない。より高濃度のアスコルビルグルコシドは、組成物の安定性を低下させる。これらの結果から、より高濃度は、ヒアルロン酸組成物の安定性の不要な減少をもたらす場合があるため、５ｍｇ／ｍｌを下回るアスコルビルグルコシドの濃度が好ましいと結論付けられた。

Claims (24)

1. −ヒアルロン酸、及び
   −アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、治療的に関連した濃度の局所麻酔薬
   をさらに含む注射可能なヒアルロン酸組成物の製造における、熱による滅菌に起因した該組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’への該局所麻酔薬の影響を阻止又は減少させるための、リン酸アスコルビル、硫酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシドからなる群から選択されるアスコルビン酸誘導体の使用であって、該組成物中のアスコルビン酸誘導体の濃度は０．０１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲にある使用。
2. 前記ヒアルロン酸組成物が、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物と比較して、安定性の増加を示さない、請求項１に記載の使用。
3. 前記局所麻酔薬がリドカインであり、その濃度は、好ましくは１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項１又は２に記載の使用。
4. 前記アスコルビン酸誘導体が、リン酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシド又はそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはアスコルビルグリコシド、より好ましくはアスコルビルグルコシドである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
5. 前記アスコルビン酸誘導体の濃度が、０．０１〜０．５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項１〜４のいずれか１項に記載の使用。
6. 前記アスコルビン酸誘導体が、リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）及びリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）からなる群から選択され、該リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）又はリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）の濃度が、０．０１〜１ｍｇ／ｍｌの範囲、好ましくは０．０１〜０．５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項４に記載の使用。
7. 前記アスコルビン酸誘導体が、アスコルビルグルコシドであり、該アスコルビルグルコシドの濃度が、０．０１〜１ｍｇ／ｍｌの範囲、好ましくは０．０１〜０．８ｍｇ／ｍｌの範囲、より好ましくは０．０５〜０．４ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項４に記載の使用。
8. −ヒアルロン酸ゲル、
   −アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、治療的に関連した濃度の局所麻酔薬、及び
   −熱による滅菌時に局所麻酔薬によって生じる組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’における影響を阻止又は減少させる量の、リン酸アスコルビル、硫酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシドからなる群から選択されるアスコルビン酸誘導体、ここで、該アスコルビン酸誘導体の濃度は０．０１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲にある
   を含む、滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
9. 前記組成物が、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物と比較して、安定性の増加を示さない、請求項８に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
10. 前記局所麻酔薬がリドカインであり、その濃度は、好ましくは１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項８又は９に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
11. 前記アスコルビン酸誘導体が、リン酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシド又はそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはアスコルビルグリコシド、より好ましくはアスコルビルグルコシドである、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
12. 前記アスコルビン酸誘導体の濃度が、０．０１〜０．５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
13. 前記アスコルビン酸誘導体が、リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）及びリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）からなる群から選択され、該リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）又はリン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）の濃度が、０．０１〜１ｍｇ／ｍｌの範囲、好ましくは０．０１〜０．５ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項１１に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
14. 前記アスコルビン酸誘導体が、アスコルビルグルコシドであり、該アスコルビルグルコシドの濃度が、０．０１〜１ｍｇ／ｍｌの範囲、好ましくは０．０１〜０．８ｍｇ／ｍｌの範囲、より好ましくは０．０５〜０．４ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項１１に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
15. 薬剤として使用するための、請求項８〜１４のいずれか１項に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
16. 創傷治癒、乾燥皮膚状態及び日焼けで痛んだ皮膚の治療、沈着過度障害の治療、脱毛の治療及び予防、並びに疾患経過の要因として炎症を有する状態、例えば乾癬及び皮脂欠乏性湿疹の治療からなる群から選択される皮膚科的治療において使用するための、請求項８〜１４のいずれか１項に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
17. 関節内投与による関節障害の治療において使用するための、請求項８〜１４のいずれか１項に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物。
18. 皮膚の外見の改善、脱毛の治療及び／又は予防、対象の皺のばし又は顔若しくは体の輪郭調整のための、請求項８〜１４のいずれか１項に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物を含む医薬組成物。
19. 対象の皮膚の外見を改善するための、請求項１８に記載の医薬組成物。
20. 対象の皺のばしのための、請求項１８に記載の医薬組成物。
21. ａ）請求項８〜１４のいずれか１項に記載の滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物を用意し；及び
    ｂ）該滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物を対象の皮膚に注射する
    ことを含む、皮膚の外見の改善、脱毛の予防及び／又は治療、対象の顔又は体の皺のばし又は輪郭調整のための医薬組成物。
22. 前記滅菌された注射可能なヒアルロン酸組成物が、真皮及び／又は皮下組織に注射される、請求項２１に記載の医薬組成物。
23. ａ）ヒアルロン酸ゲル、アミド型及びエステル型の局所麻酔薬又はそれらの組み合わせからなる群から選択される局所麻酔薬、並びに熱による滅菌時に局所麻酔薬によって生じる組成物の粘度及び／又は弾性係数Ｇ’に対する影響を阻止又は低減させる量の、リン酸アスコルビル、硫酸アスコルビル及びアスコルビルグリコシドからなる群から選択されるアスコルビン酸誘導体を混合し、及び
    ｂ）該混合物をＦ₀値≧４でのオートクレーブによって滅菌に供する
    ことを含む、滅菌されたヒアルロン酸組成物を製造する方法。
24. 形成されたヒアルロン酸組成物が、アスコルビン酸誘導体を含まない同組成物と比較して安定性の増加を示さない、請求項２３に記載の方法。

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