JP5946046B2 - ヒト角膜内皮細胞シート - Google Patents
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Description
またゼラチンハイドロゲルを支持体として用いた角膜内皮細胞シートの製造方法(特許文献3)や、眼内移植で吸収される生物分解性ポリマー支持マトリックスと内皮細胞層を含む角膜ボタン(特許文献4)が既に知られているところである。
このため、培養角膜内皮細胞シートにおいても同様に考えられており、特に移植面積が数mmから10 mm程度の直径でよいことから、角膜内皮面に合わせた曲率をもつ培養角膜内皮細胞シートを移植する必要は全く考慮されなかった。そればかりか、支持体上に細胞が均等に積層されることの重要性を鑑みれば、常識的に考えて、曲面のシート上に細胞を播種しようなどという発想には到底至らない。
また、臨床で行われている角膜内皮移植は、ドナー角膜を薄切して曲面である角膜内皮面に移植片を接着する治療法であるが、意図的に曲面を作製するような薄切をすることなく実施されている。
[1]ヒト角膜内皮面に適した曲率を有することを特徴とする、ヒト角膜内皮細胞シート。
[2]ヒト角膜内皮面に適した曲率を有する細胞支持体により支持される、上記[1]に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
[3]細胞支持体が、コラーゲンを原料とするシートである、上記[1]または[2]に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
[4]コラーゲンを原料とするシートが、ゼラチンシートである、上記[3]に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
[5]ゼラチンシートの厚みが5〜40 μmである、上記[4]に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
[6]ゼラチンシートが、以下の工程:
(1)ヒト角膜内皮面に適した曲率を有する鋳型に流し込んだゼラチン水溶液をゲル化する工程;
(2)(1)で得られたゲル化ゼラチンを乾燥して、シート状ゼラチンを形成する工程;
(3)(2)で得られたシート状ゼラチンを熱架橋して、ゼラチンシートを得る工程;
により製造されることを特徴とする、上記[4]または[5]に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
[7]ゼラチンシートが、ラミニンまたはアテロコラーゲンでコートされている、上記[4]〜[6]のいずれかに記載のヒト角膜内皮細胞シート。
[8]以下の工程:
(1)ヒト角膜内皮面に適した曲率を有する鋳型に流し込んだゼラチン水溶液をゲル化する工程;
(2)(1)で得られたゲル化ゼラチンを乾燥して、シート状ゼラチンを形成する工程;
(3)(2)で得られたシート状ゼラチンを熱架橋して、ゼラチンシートを得る工程;
(4)(3)で得られたゼラチンシートにヒト角膜内皮細胞を播種し、ヒト角膜内皮細胞層を形成する工程;
を含んでなる、ヒト角膜内皮面に適した曲率を有するヒト角膜内皮細胞シートの製造方法。
[9]ゼラチン水溶液の濃度が1〜5重量%である、上記[8]に記載のヒト角膜内皮細胞シートの製造方法。
[10]ゲル化ゼラチンの厚みが0.5〜2 mmである、上記[8]または[9]に記載のヒト角膜内皮細胞シートの製造方法。
[11]ゼラチンシートが、ラミニンまたはアテロコラーゲンでコートされている、上記[8]〜[10]のいずれかに記載のヒト角膜内皮細胞シートの製造方法。
[12]ゼラチンシートのシート厚みが5〜40 μmである、上記[8]〜[11]のいずれかに記載のヒト角膜内皮細胞シートの製造方法。
[13]鋳型がテフロン(登録商標)製の鋳型である、上記[8]〜[12]のいずれかに記載のヒト角膜内皮細胞シートの製造方法。
ヒト角膜内皮細胞のドナーとしては、角膜は免疫系による認識を免れた隔絶抗原であるとされ、HLAタイプの一致しない場合でも拒絶反応を起こさない場合も多いので、必ずしもレシピエントとHLAタイプが一致している必要はないが、好ましくはHLA-A、HLA-B、HLA-DR及びHLA-Cのうちの1座以上、より好ましくは2座以上、さらに好ましくは3座以上が、レシピエントと一致するヒト個体から採取されたものである。
上記方法では、コラゲナーゼは、ロッシュ社のコラゲナーゼA、シグマ社のコラゲナーゼタイプIA、ワーシントン社のコラゲナーゼタイプIなどを用いることが可能であり、それぞれ0.2%となるように培地で調製したものを使用する。また培地としては15%牛胎児血清(FCS)および2 ng/mLの塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)を含むDME培地を用いることができる。
ヒト角膜内皮面に適した曲率を有するためには、ヒト角膜内皮細胞シートは、ヒト角膜内皮細胞が、ヒト角膜内皮面に適した曲率を有する細胞支持体により支持される構成をとることが望ましい。ヒト角膜内皮面に適した曲率を有する細胞支持体は、コンタクトレンズ状の薄層シート構造を有する。該支持体シートの外縁により形成される円(略円)の直径は、移植面積に応じて適宜選択されるが、ヒト角膜のサイズを考慮すれば、通常約5〜約12 mm程度である。また支持体シートの曲率半径は通常約6〜約10 mm程度である。支持体シートの厚さは5〜100 μm程度が適当であるが、ヒト角膜のデスメ膜の厚さに近似させることがより好ましく、移植時(膨潤時)の厚さとして約5〜約40 μmであることが好ましく、約5〜約25 μmであることがより好ましい。
鋳型としては、例えば、アクリル製、テフロン(登録商標)製、シリコン製等の鋳型を用いることができるが、これらに限定されない。バイオポリマーをこれらの鋳型に流し込んだ後にゲル化を行い、乾燥工程を経てシートを作製する。乾燥後のシートは極めて薄いため、シートが破れることなく容易に鋳型から外すことができるテフロン(登録商標)製の鋳型が好ましく用いられ得る。ヒト角膜内皮面に適した曲率を有する鋳型は、例えば、図1に示すように、同じ曲率半径の凹凸を有する上下2つの鋳型を作製し、下側の鋳型にバイオポリマー溶液を流し込み、上側の鋳型で蓋をして固化することにより、所望の細胞支持体ゲルに成型することができる。コラーゲンを原料とするバイオポリマーの細胞支持体シートを作製する場合、鋳型により成型された段階での支持体ゲルの厚さを、例えば、約0.5〜約2mmの間で適宜設定することができる。ゲル化されたゼラチンやコラーゲン等を、次いで乾燥することにより、シート状とすることができる。乾燥は、例えば、クリーンベンチ内などの無菌条件下で風乾により行うことができる。
上記のようにしてヒト角膜内皮より採取したヒト角膜内皮細胞は、動物細胞の培養に一般的に使用されるD-MEM、MEM等の基礎培地中で培養(初代培養)することができる。例えば、低グルコース濃度の培地(D-MEM等)にウシ胎児血清 (FBS) 5〜15%、成長因子等を含有することが好ましい。ここで、培地に含有させるグルコース濃度は、通常のグルコース濃度よりも低濃度であり、2.0 g/L 以下、例えば0.1〜2.0 g/L、好ましくは0.1〜1.0 g/Lである。また、成長因子としては肝細胞増殖因子(HGF)、上皮成長因子(EGF)、組換えEGF(rEGF)、線維芽細胞増殖因子(FGF)等が挙げられ、1つ又は複数の因子を適宜組み合わせて培地に含有させることができる。これらの成長因子の含有濃度は、通常1〜100ng/mL、好ましくは2〜5 ng/mLである。さらに、上記培地組成に加えて、必要に応じてドキシサイクリン(doxycycline)等の防腐剤、ファンギゾン(Fungizone)等の防カビ剤を添加することもできる。さらに、1.0〜3.0%程度、好ましくは1.0〜2.0%のヒアルロン酸(ヒアルロン酸ナトリウム)を添加することもできる。
上記したアスコルビン酸誘導体の塩である、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩も、アスコルビン酸誘導体に包含される。中でも、特に角膜内皮細胞の増殖能を高めるものとして、アスコルビン酸2-リン酸が好ましい。
培養温度は35〜38℃、好ましくは37℃である。そして、90〜100%湿潤(好ましくは100%湿潤)、5〜15% CO2(好ましくは10% CO2)のインキュベータ内で培養する。培養は、細胞が集密(コンフルエント)になった段階(定常状態1〜5日程度)まで行うことができる。
上記のようにして調製されたヒト角膜内皮細胞を、前記ヒト角膜内皮面に適した曲率を有する細胞支持体シート上に播種し、培養することにより、本発明のヒト角膜内皮細胞シートが得られる。細胞播種に際しては、細胞支持体シートの凸面を下にしてプレート上に支持体シートを静置する。例えば、コーニング社のトランズウェルプレート(12 mm径のメンブレンを有するSnapwell insertsを有するものが好ましい)のメンブレンを細胞支持体シートで置換したものを用いることができる。このときに細胞支持体の底面が培養ディッシュに接触するようにして固定する。このようにして固定した細胞支持体は、平面からなる培養ディッシュに接触している部分において微細な凹凸が発生している。このように調整した細胞支持体シート上にピペット等を用いて細胞懸濁液を上から滴下することにより細胞を播種する。播種直後は細胞支持体の凹凸により細胞が不均一に接着するが、驚くべきことに培養を続けるうちに均一なヒト角膜内皮細胞層(好ましくは単層)が生じる。
したがって移植の際には、その操作を簡便に行うべく、使用時まで無菌環境下で角膜内皮細胞の生存を維持させることが可能であって、移植時には術者の技量にできるだけ左右されることなく眼球内の移植部位へ該シートを非侵襲的に誘導することが可能な移植用器具に格納することが望ましい。そのような移植用器具としては特に限定されないが、例えば、国際公開第2011/096593号パンフレットに記載される移植用器具を好ましく用いることができる。
操作は清潔なクリーンベンチ(安全キャビネット)内で行うのが望ましく、使用する容器や器具もすべて滅菌されたものもしくは滅菌された使い捨て(ディスポーザブル)タイプのものを使用した。新田ゼラチン社のビーマトリックスゼラチンLS-H粉末を2.0 g秤量し、ボトルに採取した。注射用水を100 mL添加し室温で1時間振盪させた後、50℃の恒温槽で30分間振盪しながら溶解させた。室温で冷ました後、4℃で保存した。
4℃で保存していた2%ゼラチンを37℃の恒温槽で溶解させた。図1のように設計して作製した曲面を有するテフロン(登録商標)鋳型の蓋をはずし、凹面に2%ゼラチン溶液を600 μL流し入れて面全体にいきわたらせ、蓋をして4℃で1日冷やしゲル化した。ピンセットを用いて鋳型の蓋をゆっくりと開け、ゲル化したゼラチンをクリーンベンチ(安全キャビネット)内で2日間乾燥させた。乾燥後シート状になったゼラチンを鋳型よりゆっくり剥がし、真空乾燥装置内で140℃、72時間架橋処理を行った。比較対象物として平面の鋳型を用いて同様の方法にて平面ゼラチンシートを作製した。架橋処理後のゼラチンシートは-30℃で保存した。
35 mmディッシュへ注射用水を5 mLそそぎ、曲率ゼラチンシートをあらかじめ1日膨潤させておいた。コーニングトランズウェル(#3801)よりメンブレンのついたインサートを取り出し、ピンセットを用いてインサートよりメンブレンを取り除いた。35 mmディッシュへ注射用水を5 mLそそぎ、水で膨潤させておいた曲率ゼラチンシートの凸面を上にして浮かべた。メンブレンを除去したリングを曲率ゼラチンシートの下にいれ、リングとシートの円周を合わせたうえで注射用水を抜き取った。ピンセットでシートのシワをのぞき、クリーンベンチ(安全キャビネット)内で風乾させた。リングと曲率シートをOリングで固定した後、トランズウェルにセットし、増殖培地で膨潤させた。
曲率ゼラチンシート貼り付け済みのトランズウェル(注射用水にて膨潤済)より注射用水を除去し、曲率シートの凹部にPBSを160 μL添加した。さらにPBS中にラミニン溶液(rLAMININ-5: オリエンタル酵母工業株式会社)を最終濃度が5 μg/mL となるよう添加して混和し、37℃で2時間インキュベートした。PBS 5 mLで2回洗浄した後、増殖培地を添加した。
35 mmペトリディッシュにヒト強角膜片を移し、内皮面を15%牛胎児血清(FCS)及び2 ng/mL塩基性繊維芽細胞増殖因子(bFGF)を含むDME培地(以下基礎培地と記載)で洗浄した。
微細なセッシを用いて、角膜内皮をデスメ膜ごと角膜の内面の周辺部から中心へ向かってシート状に剥ぎ取り、35mmペトリディッシュに移した。ペトリディッシュ上で角膜内皮細胞が付着したデスメ膜片をさらに2 mm角程の小片に細切後、低吸着遠心チューブ(住友ベークライト(株)製)に回収し、0.2%のコラゲナーゼ(商品名:コラゲナーゼA、コラゲナーゼ活性:>0.15 U/mg、ロシュ(Roche)(株)製)を含む基礎培地中で、37℃、5% CO2で1〜3時間インキュベートした。
コラゲナーゼ処理した細胞を基礎培地で希釈し、20xg、2分間の遠心洗浄を3回繰り返し、上清に浮遊する細胞を除去した。次にリン酸緩衝生理食塩水(PBS)で希釈し、同様に20xg、2分間の遠心洗浄を1回行った後、沈殿した細胞塊に0.5%トリプシン/0.2%エチレンジアミン四酢酸(EDTA)を加え、37℃、5% CO2で5分間インキュベートした。基礎培地を加え、500xg、5分間の遠心をすることにより細胞ペレットを得た。得られた細胞ペレットを、100 μg/mLアスコルビン酸2-リン酸(和光純薬(株)製)を含む基礎培地に再懸濁後、下記の方法で作製したディッシュ上に、それぞれ播種し、37℃、5% CO2のインキュベータ内で2〜4週間、2〜3日毎に培地を交換しながら培養した。
2%アテロコラーゲンインプラント(高研(株)製)を10 mM酢酸で400倍希釈し、50 μg/mLのアテロコラーゲンインプラント溶液を調製した。35 mmディッシュに1 mL加え、37℃で1時間放置後、2 mLのPBSで2回洗浄することによりアテロコラーゲンでコートされたディッシュを作製した。
上記実施例5で得たドナーの初代培養細胞を、それぞれ次の通りに継代培養した。
初代培養細胞をPBSで洗浄後、0.5%トリプシン/0.2% EDTAで分散させた。これに基礎培地を加え、500xgで5分間遠心した後、100 μg/mLアスコルビン酸2-リン酸を含む基礎培地に懸濁し、上記実施例5と同様の方法で作製したアテロコラーゲンでコートされたディッシュ上に、1,000個/cm2の細胞密度でそれぞれ播種し、37℃、5% CO2で培養した。細胞がコンフレントになった時点で同様の継代操作を繰り返した。
曲率ゼラチンシート貼り付け済みのトランズウェル(培地膨潤済)より培地を除去した。上記実施例6と同様に50 μg/mLアテロコラーゲンインプラント溶液を調製し、1ウェルあたり5 mL加え、37℃で1時間放置した。アテロコラーゲンインプラント溶液を除去した後、1ウェルあたり5 mLのPBSで2回洗浄し、培地5 mLを添加した。
継代培養された細胞を、1×106細胞/mLに調製し、曲率シートの凹面より培地を取り除いた後、細胞懸濁液を416μL添加した。37℃、5% CO2の環境下で7日間培養した。
その結果、生体内の内皮細胞と同様の単層構造が認められた。免疫染色により機能マーカータンパク質(図2A: ZO-1、図2B: Na+/K+ATPase)の発現も生体内の内皮細胞と同等であった。密度計算をしたところ3,000細胞/mm2以上であった。
実施例4で得られたラミニンコート済の曲率ゼラチンシートより増殖培地を除去し、新しい増殖培地を4 mL添加した。継代培養された細胞を1×106 cells/mLとなるように基礎培地に懸濁し、曲率シートの凹面より培地を取り除いた後、該細胞懸濁液を416 μL添加した。37℃、5% CO2の環境下で7日間培養した。
その結果、生体内の内皮細胞と同様の単層構造が認められた。免疫染色による機能マーカータンパク質の発現も、生体内の内皮細胞や上記(1)の場合と同等であった。
実施例2で作製した曲面及び平面のゼラチンシートを35 mmペトリディッシュ上に置き注射用蒸留水に浸して一晩膨潤した。膨潤シートをトリパンブルーで染色後、6 mmトレパンで切り出し、シート移植用インジェクター内にシートを充填した。カニクイザルにメスで角膜トンネルを作製し、前房内にインジェクターを挿入、インジェクター挿入孔の反対側に作製したサイドポートよりDSAEK鑷子を挿入し、シートをインジェクターより引き出した。空気を注入することによりシートを角膜裏面に貼り付け、切開創を10-0ナイロン縫合糸で縫合し、眼瞼縫合して終了とした。図3に示すように、従来法である平面のゼラチンシートを移植した時にはシートの外周部分に皺が発生した(皺部分を矢印で示す)。一方、本発明品である曲面シートを移植した時にはシートに皺は発生せず角膜裏面に密着した。
(2)ラミニンコートした曲率シートの観察
上記実施例4および9に記載の方法で、曲率ゼラチンシートをラミニンでコーティングし、該シートに細胞を播種することでヒト角膜内皮細胞シートを作製した。比較のために、何もコーティングしていない曲率ゼラチンシートにも細胞を播種した。それぞれのヒト角膜内皮細胞シートを倒立顕微鏡下で観察したところ、何もコーティングしていない単なるゼラチンシートに播種した場合は、ロットによって部分的に細胞の剥離が認められたが(図4左)、ラミニン-5コートでは、細胞が剥離することは全くなかった(図4右)。こうして得られた曲率シートは、均一なヒト角膜内皮細胞層であり、正常なヒト眼の角膜内皮と同等(3,000細胞/mm2)以上の細胞密度を有していた。また生体内の細胞と同等またはそれ以上の角膜内皮細胞としての機能(バリア機能、ポンプ機能、細胞接着能)を保持していると考えられた。
この結果は、単なるゼラチンシートよりも、ラミニンでコーティングしたゼラチンシートを用いた方が、移植により適したヒト角膜内皮細胞シートが得られることを示している。
カニクイザルにメスで角膜トンネルを作製し、20Gソフトテーパードニードルで中央部分の内皮(直径8 mm程度)を掻破した。前房内に粘弾性物質を注入し、I/A洗浄した。眼内灌流液で5倍希釈したトリパンブルー溶液を前房内に注入後、I/A洗浄し、内皮細胞が十分に除去されていることを確認した。実施例7のトランズウェルに固定された細胞シートをトランズウェルごと取り出し、35 mmペトリディッシュ上に置いた。トリパンブルーで染色後、6 mmトレパンで切り出した。シートを無血清培地で洗浄し、その後培地成分は除去した。シート上に粘弾性物質を塗布した。再び35 mmペトリディシュに無血清培地を満たし、シート移植用インジェクター内にシートを充填した。前房内にインジェクターを挿入、インジェクター挿入孔の反対側に作製したサイドポートよりDSAEK鑷子を挿入し、シートをインジェクターより引き出した。空気を注入することによりシートを角膜裏面に貼り付け、切開創を10-0ナイロン縫合糸で縫合し、眼瞼縫合して終了とした。その後1週間毎に角膜厚を測定し、浮腫の状態を観察した。比較対照としてシート無移植群とシートのみ移植群を用いた。
図5に術後4週までの角膜厚の推移を示す。コントロール(シート無移植、シートのみ)と比べ、ヒト細胞シート移植群では角膜厚が薄くなっておりその有効性が明らかとなった。
Claims (8)
- ヒト角膜内皮面に適した曲率を有することを特徴とする、単層のヒト角膜内皮細胞シートであって、
当該ヒト角膜内皮細胞シートは、ヒト角膜内皮面に適した曲率を有する細胞支持体により支持されており、
細胞支持体が、コラーゲン、ラミニン、エラスチン、フィブロネクチン、ビトロネクチン、フィブリノゲン、トロンボスポンジン、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、RGDS、ポリカルボフィルと結合したbFGF、およびポリカルボフィルと結合したEGFからなる群から選択される1種または2種以上の分子からなる高分子複合体を原料とするバイオポリマーから構成されている、
ヒト角膜内皮細胞シート。 - 細胞支持体が、コラーゲンを原料とするバイオポリマーから構成されている、請求項1に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
- コラーゲンを原料とするバイオポリマーから構成されている細胞支持体が、ゼラチンシートである、請求項2に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
- コラーゲンを原料とするバイオポリマーから構成されている細胞支持体が、ラミニン、エラスチン、フィブロネクチン、ビトロネクチンおよびフィブリノゲンからなる群から選択されるいずれかの細胞外マトリックス分子でコーティングされている、請求項2または3に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
- ゼラチンシートが、ラミニンまたはアテロコラーゲンでコートされている、請求項3に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
- 細胞支持体の厚みが5〜40 μmである、請求項1〜5のいずれか一項に記載のヒト角膜内皮細胞シート。
- 請求項1〜6のいずれか一項に記載のヒト角膜内皮細胞シートを含んでなる、角膜内皮細胞障害の治療剤。
- 角膜内皮細胞障害が、水疱性角膜症である、請求項7の治療剤。
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Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016093359A1 (ja) * | 2014-12-11 | 2016-06-16 | 学校法人慶應義塾 | 治療用角膜内皮代替細胞スフェアの製造方法 |
DE102015205534B4 (de) * | 2015-03-26 | 2017-01-26 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Artifizielles Descemet-Konstrukt |
JP6228176B2 (ja) * | 2015-10-21 | 2017-11-08 | 地方独立行政法人東京都立産業技術研究センター | ゼラチンまたはその化学修飾体、それを含有する水性組成物および医療用積層体、ならびに医療用積層体の製造方法および細胞シートの単離方法 |
CN109089422B (zh) * | 2016-03-29 | 2022-04-01 | 富士胶片株式会社 | 含有细胞片的层叠体、心脏疾病治疗剂及细胞片层叠用薄膜 |
JP6758631B2 (ja) | 2017-06-19 | 2020-09-23 | 国立大学法人大阪大学 | 角膜内皮細胞マーカー及びその利用 |
ES2695629B2 (es) * | 2017-07-03 | 2022-05-10 | Viscofan Sa | Parche para la regeneración de tejidos biológicos |
CA3140395A1 (en) * | 2019-06-03 | 2020-12-10 | Advanced Solutions Life Sciences, Llc | System and method for fabricating a cornea |
CN112494722A (zh) * | 2020-12-15 | 2021-03-16 | 中新国际联合研究院 | 一种快速上皮化的胶原基角膜再生修复材料及其制备方法 |
US20240100227A1 (en) * | 2021-02-09 | 2024-03-28 | Shin-Etsu Chemical Co., Ltd. | Implantation device |
EP4056206A1 (en) * | 2021-03-11 | 2022-09-14 | Precise Bio Inc. | Artificial endothelial keratoplasty graft and methods of preparation thereof |
CN113101411A (zh) * | 2021-04-14 | 2021-07-13 | 广州宏达医疗设备有限公司 | 一种角膜基质内人工角膜内皮及其制备方法 |
CN116322812B (zh) * | 2022-08-25 | 2024-03-22 | 山东第一医科大学附属眼科研究所(山东省眼科研究所、山东第一医科大学附属青岛眼科医院) | 一种大直径人工角膜内皮片及其应用 |
JP2024077544A (ja) * | 2022-11-28 | 2024-06-07 | ニッタ株式会社 | 細胞シート作製装置及び細胞シート作製装置用無菌閉鎖系回路 |
CN116492505B (zh) * | 2023-05-11 | 2023-12-08 | 山东第一医科大学附属眼科医院(山东省眼科医院) | 一种人工角膜内皮移植片及其应用 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004073761A1 (ja) * | 2003-02-20 | 2004-09-02 | Cellseed Inc. | 再生角膜内皮細胞シート、製造方法及びその利用方法 |
JP2005229869A (ja) * | 2004-02-18 | 2005-09-02 | Satoshi Yamagami | ヒト角膜内皮細胞の培養物層積層体及びその作製方法 |
WO2011021706A1 (ja) * | 2009-08-19 | 2011-02-24 | 国立大学法人東北大学 | 角膜移植用シート |
WO2011074208A1 (ja) * | 2009-12-18 | 2011-06-23 | 国立大学法人東北大学 | 皮膚真皮又は羊膜透明化による角膜移植材料調製法 |
WO2011111562A1 (ja) * | 2010-03-08 | 2011-09-15 | 国立大学法人大阪大学 | 三次元細胞集合体の作製方法およびそれに用いる細胞培養用三次元ゲル担体並びに三次元細胞集合体 |
WO2012006390A1 (en) * | 2010-07-08 | 2012-01-12 | Lifecell Corporation | Method for shaping tissue matrices |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004024852A (ja) * | 2002-04-30 | 2004-01-29 | Amniotec:Kk | 角膜内皮様シート、及びその作製方法 |
CA2542041C (en) * | 2003-10-10 | 2014-12-09 | Cellular Bioengineering, Inc. | Methods and compositions for growing corneal endothelial and related cells on biopolymers and creation of artifical corneal transplants |
WO2007043255A1 (ja) * | 2005-09-13 | 2007-04-19 | Arblast Co., Ltd. | 培養角膜内皮シート及びその作製方法 |
KR20080070820A (ko) | 2005-10-12 | 2008-07-31 | 셀룰라 바이오엔지니어링 인코포레이티드 | 재흡수성 각막편 |
US20080050423A1 (en) * | 2006-08-23 | 2008-02-28 | National Tsing Hua University | Biopolymer-bioengineered cell sheet construct |
JP5257355B2 (ja) * | 2007-05-11 | 2013-08-07 | 大日本印刷株式会社 | 寸法が保持された細胞シート、その製造方法、及びそのための細胞培養担体 |
EP2532738B1 (en) | 2010-02-05 | 2016-12-21 | Cornea Regeneration Institute Co., Ltd. | Method for culture of corneal endothelial cells, process for production of corneal endothelial cell sheet for transplantation purposes, and culture kit for corneal endothelial cells |
-
2013
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Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004073761A1 (ja) * | 2003-02-20 | 2004-09-02 | Cellseed Inc. | 再生角膜内皮細胞シート、製造方法及びその利用方法 |
JP2005229869A (ja) * | 2004-02-18 | 2005-09-02 | Satoshi Yamagami | ヒト角膜内皮細胞の培養物層積層体及びその作製方法 |
WO2011021706A1 (ja) * | 2009-08-19 | 2011-02-24 | 国立大学法人東北大学 | 角膜移植用シート |
WO2011074208A1 (ja) * | 2009-12-18 | 2011-06-23 | 国立大学法人東北大学 | 皮膚真皮又は羊膜透明化による角膜移植材料調製法 |
WO2011111562A1 (ja) * | 2010-03-08 | 2011-09-15 | 国立大学法人大阪大学 | 三次元細胞集合体の作製方法およびそれに用いる細胞培養用三次元ゲル担体並びに三次元細胞集合体 |
WO2012006390A1 (en) * | 2010-07-08 | 2012-01-12 | Lifecell Corporation | Method for shaping tissue matrices |
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