JP5911006B2 - 再生医療用基材シート - Google Patents
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本発明者らは上記問題点を解決すべく鋭意検討した結果、選択された寸法特性をもつ生体内分解吸収性基材を用いることによって、複合化されるコラーゲンの層の厚みなどのバラツキを抑え、播種される細胞の増殖性等にも優れた再生医療用基材シートが得られることを知見し、本発明に到達した。
本発明は、第6に、前記コラーゲンは抗原性が低減されたアルカリ可溶化コラーゲン又は酵素可溶化コラーゲンである上記第1乃至上記第5のいずれか1つに記載の再生医療用基材シートである。
その開口率は18〜50%であることが必要である。この場合、開口率は、(タテ糸間の間隔×ヨコ糸間の間隔)/((タテ糸間の間隔+糸径)*(ヨコ糸間の間隔+糸径))で算出される。開口率が18%未満であると、メッシュ織物とコラーゲンの層と十分な複合化がなされないおそれがあり、50%より大きいと、支持体として十分な強度を保持できなくなるおそれがある。
以下実施例に基づいて詳細に説明する。ただし、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。また、評価方法は以下の通りである。
〔開口幅、開口率〕
メッシュ織物をマイクロスコープにて100倍に拡大し、タテ糸間の間隔(タテ方向開口幅)、ヨコ糸間の間隔(ヨコ方向開口幅)及び糸径を測定し、
(タテ糸間の間隔×ヨコ糸間の間隔)/((タテ糸間の間隔+糸径)*(ヨコ糸間の間隔+糸径))×100 にて算出した。
〔メッシュ織物の開孔幅の(タテ方向・ヨコ方向)の比〕
上記で測定したタテ糸間の間隔とヨコ糸間の間隔から、
(タテ糸間の間隔)/(ヨコ糸間の間隔)で算出した。
〔メッシュ織物の保水性〕
動的接触性測定システム(共和界面化学(株)製 DCA−WZ)にメッシュ織物をセットし、3μlの水を滴下し、水滴とメッシュ織物の接触角θを測定し、下記のように判断した。
保水性良 θ≧100°
保水性不良 θ<100°
〔コラーゲンの層の状態〕
作成した再生医療基材シートの表面及び側面を走査型電子顕微鏡で1000倍で撮影し、コラーゲンの層表面の細孔のバラツキと厚みを確認した。
○ 無孔部分も認められず、細孔部分は均一に分布しおり、厚みもそろっていた。
× 無孔部分が認められる、或いは、細孔分布に多少のバラツキが見られる、或いは、厚みにバラツキが見られる。
次に、メッシュ織物とコラーゲンの層(コラーゲンスポンジ)との複合化の方法を示す。まず、銅板をパラフルオロアルコキシ(PFA)フィルムで包み、その表面に純水を20回噴霧し、これを−30℃で凍結することにより、平均粒径400μmの氷微粒子を作製した。次に、作製した氷微粒子の鋳型を−3℃の低温チャンバー内に1時間静置し、氷微粒子の温度を−3℃に保持した。一方、1.0(w/v)%ブタタイプIコラーゲン水溶液を−1℃で24時間静置した。コラーゲンスポンジの厚みを制御するために、厚さが1.0mmのシリコーンフレームを用いた。−3℃の低温チャンバー内で、氷微粒子の鋳型の上にシリコーンフレームを載せ、フレームの中に上記のコラーゲン水溶液を流し込み、メッシュ織物とポリ塩化ビニリデンラップで覆ったガラスプレートを順にコラーゲン水溶液の上に載せて−3℃で1時間凍結した。さらに−80℃で5時間凍結した後、ポリ塩化ビニリデンラップで覆ったガラスプレートを除いて凍結物を銅板から外し、これを24時間凍結乾燥し、メッシュ織物とコラーゲンの層との複合体を得た。該複合体を25%グルタルアルデヒド水溶液で飽和した蒸気中で4時間処理しコラーゲンを架橋させた。その後、該複合体を純水で3回洗浄し、0.1Mグリシン水溶液に12時間浸漬することにより、未反応のアルデヒド基をブロッキングした。その後、純水で6回洗浄した。洗浄した複合体を凍結乾燥し、再生医療用基材シートを作成した。評価結果を表1に示す。
ポリ乳酸繊維150dtex30f(追撚無し)(Concordia Medical社製)を用いて経密度60本/インチ、緯密度64本/インチの平組織からなるメッシュ織物を製織した。この織物の開口率は1.5%で、タテ方向のメッシュ開口幅が65μm、ヨコ方向のメッシュ開口幅が120μm、線径627μm、メッシュ開口幅のタテ方向とヨコ方向の比は0.54であった。次に、実施例1と同様にしてメッシュ織物とコラーゲンスポンジを積層し再生医療用基材シートを作成した。評価結果を表1に示す。
ポリ乳酸繊維150dtex30f(追撚無し)(Concordia Medical社製)を用いて経密度60本/インチ、緯密度31本/インチの平組織からなるメッシュ織物を製織した。この織物の開口率は14%で、タテ方向のメッシュ開口幅が430μm、ヨコ方向のメッシュ開口幅が120μm、線径329μm、メッシュ開口幅のタテ方向とヨコ方向の比は3.58であった。次に、実施例1と同様にして、メッシュ織物とコラーゲンスポンジを積層し再生医療用基材シートを作成した。評価結果を表1に示す。
ポリ乳酸繊維150dtex30f(追撚無し)(Concordia Medical社製)を用いて経密度45本/インチ、緯密度64本/インチの平組織からなるメッシュ織物を製織した。この織物の開口率は7%で、タテ方向のメッシュ開口幅が65μm、ヨコ方向のメッシュ開口幅が300μm、線径341μm、メッシュ開口幅のタテ方向とヨコ方向の比は0.21であった。次に、実施例1と同様にして、メッシュ織物とコラーゲンスポンジを積層し再生医療用基材シートを作成した。評価結果を表1に示す。
ポリ乳酸繊維150dtex30f(追撚無し)(Concordia Medical社製)を用いて経密度120本/インチ、緯密度80本/インチの平組織からなる織物を製織した。この織物の開口率は0%で、タテ方向のメッシュ開口幅が0μm、ヨコ方向のメッシュ開口幅が0μm、線径237μm、メッシュ開口幅のタテ方向とヨコ方向の比は0であった。次に、実施例1と同様にして、平組織織物とコラーゲンスポンジを積層し再生医療用基材シートを作成した。評価結果を表1に示す。
2.コラーゲンの層
3.メッシュ織物
Claims (6)
- 開口率が18〜50%である生体内分解吸収性材料からなるメッシュ織物と、前記メッシュ織物の表面及び/又は内部に形成されたコラーゲンの層とからなり、前記メッシュ織物と水との接触角が100°以上である再生医療用基材シート。
- 前記メッシュ織物のメッシュ開口幅がタテ方向、ヨコ方向とも200〜500μmである請求項1に記載の再生医療用基材シート。
- 前記メッシュ織物のメッシュ開口幅の(タテ方向/ヨコ方向)の比が0.60〜1.40である請求項2に記載の再生医療用基材シート。
- 前記生体内分解吸収性材料が、ポリ−L−乳酸、ポリ−D−乳酸、ポリグリコール酸、グリコール酸と乳酸との共重合体、又は、ポリグリコール酸とポリ乳酸の混合物から選ばれる一種以上である請求項1乃至3のいずれか1項に記載の再生医療用基材シート。
- 前記コラーゲンの層が、多孔質状である請求項1乃至4のいずれか1項に記載の再生医療用基材シート。
- 前記コラーゲンは抗原性が低減されたアルカリ可溶化コラーゲン又は酵素可溶化コラーゲンである請求項1乃至5のいずれか1項に記載の再生医療用基材シート。
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