JP5859307B2 - 眼の血管新生を阻害する方法 - Google Patents
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Description
この出願は、その各内容を出典明示してここに援用する、2008年9月10日に出願された米国仮出願第61/095757号;2008年10月7日に出願された米国仮出願第61/103502号;及び2009年8月17日に出願された米国仮出願第61/234519号に対して米国特許法第119条(e)項の優先権を主張する。
本発明は、一般に血管新生に関連した症状及び疾患の処置に有用な組成物及び方法に関する。特に、本発明は、テトラスパニン12(TSPAN12)及びノリン(Norrin)のアンタゴニストに関する。
他に定められないならば、ここで使用される技術的及び科学的用語は、この発明が属する技術の当業者により、通常に理解されるような同様の意味を有する。例えば、Singletonら, Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 第2版, J. Wiley & Sons(NewYork, NY 1994); Sambrookら, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press(Cold Spring Harbor, NY 1989)。本発明の目的にとって、所定の用語を以下に定める。
MAREDSVKCLRCLLYALNLLFWLMSISVLAVSAWMRDYLNNVLTLTAETRVEEAVILTYFPVVHPVMIAVCCFLIIVGMLGYCGTVKRNLLLLAWYFGSLLVIFCVELACGVWTYEQELMVPVQWSDMVTLKARMTNYGLPRYRWLTHAWNFFQREFKCCGVVYFTDWLEMTEMDWPPDSCCVREFPGCSKQAHQEDLSDLYQEGCGKKMYSFLRGTKQLQVLRFLGISIGVTQILAMILTITLLWALYYDRREPGTDQMMSLKNDNSQHLSCPSVELLKPSLSRIFEHTSMANSFNTHFEMEEL(配列番号:1)
である。
MAREDSVKCLRCLLYALNLLFWLMSISVLAVSAWMRDYLNNVLTLTAETRVEEAVILTYFPVVHPVMIAVCCFLIIVGMLGYCGTVKRNLLLLAWYFGTLLVIFCVELACGVWTYEQEVMVPVQWSDMVTLKARMTNYGLPRYRWLTHAWNYFQREGCGKKMYSFLRGTKQLQVLRFLGISIGVTQILAMILTITLLWALYYDRREPGTDQMLSLKNDTSQHLSCHSVELLKPSLSRIFEHTSMANSFNTHFEMEEL(配列番号:2)
である。
MRKHVLAASFSMLSLLVIMGDTDSKTDSSFIMDSDPRRCMRHHYVDSISHPLYKCSSKMVLLARCEGHCSQASRSEPLVSFSTVLKQPFRSSCHCCRPQTSKLKALRLRCSGGMRLTATYRYILSCHCEECNS(配列番号:3)
である。
MRNHVLAASISMLSLLAIMGDTDSKTDSSFLMDSQRCMRHHYVDSISHPLYKCSSKMVLLARCEGHCSQASRSEPLVSFSTVLKQPFRSSCHCCRPQTSKLKALRLRCSGGMRLTATYRYILSCHCEECSS(配列番号:4)
である。
TSPAN12又はノリン活性のアンタゴニストの調製及び同定
アンタゴニスト候補剤のスクリーニングアッセイは、TSPAN12又はノリンポリペプチドと結合又は複合体形成する化合物、又はそれらの活性及び/又は他の細胞性タンパク質との相互作用に干渉する化合物を同定するために設計される。
Wntシグナル伝達レポーター細胞において、TSPAN12又はノリンに結合する、又はその効果を阻害する抗体の能力をテストする。例示的方法を実施例2に提供するが、当業者にとっては、他の方法も容易に明らかであろう。例示的抗体には、ポリクローナル、モノクローナル、ヒト化、二重特異性、及びヘテロコンジュゲート抗体、ここで記載されたものの調製物が含まれる。
TSPAN12又はノリンのアンタゴニストは、上述にて説明したような種々の疾患及び疾病に対する予防剤及び治療剤として、製薬的に有用である。
アンタゴニストの治療用組成物は、凍結乾燥製剤、水溶液の形態で、場合によっては製薬的に許容可能な担体、賦形剤又は安定剤(Remington's Pharmaceutical Sciences, 16版, A. Osol, A.編(1980))と、適切な純度を有する所望の分子を混合することにより、保管用に調製される。許容可能な担体、賦形剤、又は安定剤は、用いられる投与量及び濃度で受容者に非毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸等の緩衝剤、アスコルビン酸及びメチオニンを含む酸化防止剤;防腐剤(例えば、オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム;塩化ヘキサメトニウム;塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム;フェノール、ブチル又はベンジルアルコール;メチル又はプロピルパラベンのようなアルキルパラベン;カテコール;レゾルシノール;シクロヘキサノール;3-ペンタノール;及びm-クレゾール);低分子量(約10残基未満)のポリペプチド;血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質;ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー;グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリジン等のアミノ酸;グルコース、マンノース、又はデキストリンを含む単糖類、二糖類、及び他の炭水化物;EDTA等のキレート剤;スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール等の糖;ナトリウム等の塩形成対イオン;金属錯体(例えば、亜鉛-タンパク質複合体);及び/又はトゥイーン(TWEEN)TM、プルロニクス(PLURONICS)TM、又はポリエチレングリコール(PEG)等の非イオン性界面活性剤を含む。
TSPAN12又はノリンのアンタゴニスト;
溶液におけるポリペプチド又は他の分子の最大安定の範囲内のpH、好ましくは約4-8を維持可能なバッファー;
攪拌誘発性凝集に対して、ポリペプチド又は分子を主として安定化させる洗浄剤/界面活性剤;
等張剤;
フェノール、ベンジルアルコール及びベンゼトニウムハロゲン化物、例えば塩化物の群から選択される防腐剤;及び
水;
を含有可能である。
当該問題の疾患の予防又は処置における、TSPAN12又はノリンのアンタゴニストの有効性は、活性化合物を、同じ組成物において、又は別個の組成物として、それらの目的にとって有効な他の薬剤と連続的に又は組合せて投与することにより改善することができる。
本発明の最も有望な薬剤候補のいくつかは、TSPAN12又はノリンの生成を阻害し、及び/又はTSPAN12又はノリンの活性を低減可能な抗体及び抗体断片である。
ポリクローナル抗体の調製方法は当業者に知られている。哺乳動物においてポリクローナル抗体は、例えば免疫化剤、及び所望するのであればアジュバントを、一又は複数回注射することで発生させることができる。典型的には、免疫化剤及び/又はアジュバントを複数回皮下又は腹腔内注射により、哺乳動物に注射する。免疫化剤は、TSPAN12又はノリンポリペプチド又はその融合タンパク質を含みうる。免疫化剤を免疫化された哺乳動物において免疫原性が知られているタンパク質に結合させるのが有用である。このような免疫原タンパク質の例には、これらに限られないが、キーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシサイログロブリン及び大豆トリプシンインヒビターが含まれる。使用され得るアジュバントの例には、フロイント完全アジュバント及びMPL-TDMアジュバント(モノホスホリル脂質A、又は合成トレハロースジコリノミコラート)が含まれる。免疫化プロトコールは、過度の実験なく当業者により選択されるであろう。
あるいは、抗TSPAN12又は抗ノリン抗体はモノクローナル抗体であってもよい。モノクローナル抗体は、Kohler及びMilstein, Nature, 256:495 (1975)に記載されているようなハイブリドーマ法を使用することで調製することができる。ハイブリドーマ法では、マウス、ハムスター又は他の適切な宿主動物を典型的には免疫化剤により免疫化することで、免疫化剤に特異的に結合する抗体を生成するかあるいは生成可能なリンパ球を誘発する。また、リンパ球をインビトロで免疫化することもできる。
一価抗体の調製にはインビトロ法もまた適している。抗体の消化による、その断片、特にFab断片の生成は、当該分野において知られている慣用的技術を使用して達成できる。
抗TSPAN12又は抗ノリン抗体は、さらにヒト化抗体又はヒト抗体を含み得る。非ヒト(例えばマウス)抗体のヒト化形とは、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖あるいはその断片(例えばFv、Fab、Fab'、F(ab')2あるいは抗体の他の抗原結合サブ配列)であって、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むものである。ヒト化抗体はレシピエントのCDRの残基が、マウス、ラット又はウサギのような所望の特異性、親和性及び能力を有する非ヒト種(ドナー抗体)のCDRの残基によって置換されたヒト免疫グロブリン(レシピエント抗体)を含む。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのFvフレームワーク残基は、対応する非ヒト残基によって置換されている。また、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも、移入されたCDRもしくはフレームワーク配列にも見出されない残基を含んでいてもよい。一般に、ヒト化抗体は、全てあるいはほとんど全てのCDR領域が非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、全てあるいはほとんど全てのFR領域がヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである、少なくとも1つ、典型的には2つの可変ドメインの実質的に全てを含む。ヒト化抗体は、好ましくは免疫グロブリン定常領域(Fc)、典型的にはヒトの免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部を含んでなる。Jonesら, Nature, 321:522-525(1986); Riechmannら, Nature, 332:323-329(1988); 及びPresta, Curr. Op. Struct. Biol., 2:593-596(1992)。
二重特異性抗体は、少なくとも2つの異なる抗原に対して結合特異性を有するモノクローナル抗体、好ましくはヒトもしくはヒト化抗体である。本ケースにおいて、結合特異性の一方はTSPAN12又はノリンポリペプチドに対してであり、他方は任意の他の抗原又はポリペプチドに対してである。
ヘテロ結合抗体は、2つの共有結合した抗体からなる。このような抗体は、例えば、免疫系細胞を不要な細胞に対してターゲティングさせるため(米国特許第4,676,980号)、及びHIV感染の処置のために提案されている。国際公開第91/00360号; 国際公開第92/200373号; 欧州特許第03089号。この抗体は、架橋剤に関連したものを含む合成タンパク化学における既知の方法を使用して、インビトロで調製することができると考えられる。例えば、ジスルフィド交換反応を使用するか又はチオエーテル結合を形成することにより、免疫毒素を作成することができる。この目的に対して好適な試薬の例には、イミノチオラート及びメチル-4-メルカプトブチリミダート、及び例えば米国特許第4,676,980号に開示されているものが含まれる。
また、ここに開示する抗体は、免疫リポソームとして処方することができる。抗体を含むリポソームは、Epsteinら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688 (1985); Hwangら,Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77: 4030(1980); 及び米国特許第4,485,045号及び第4,544,545号に記載されたような、当該技術で知られた方法で調製される。向上した循環時間を持つリポソームは、米国特許第5,013,556号に開示されている。
ここで同定されるTSPAN12又はノリンポリペプチドに特異的に結合する抗体、並びにここに開示したスクリーニングアッセイで同定された他の分子は、種々の疾患の治療のために、製薬用組成物の形態で投与することができる。
TSPAN12又はノリンに対する抗体は、上述にて記した種々の血管新生に関連した病状を処置するのに使用することができると考えられる。
抗体は、公知の方法に一致して、例えばボーラスとしての静脈内投与、又は長時間にわたる連続注入、硝子体内、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、くも膜下腔内、口腔、局所、又は吸入経路により、哺乳動物、好ましくはヒトに投与される。抗体の硝子体内投与が好ましい。
例えば、疾患の種類及び重症度に応じて、約1μg/kg〜50mg/kg(例えば、0.1−20mg/kg)の抗体が、一又は複数の別個投与、又は連続注入にかかわらず、患者に投与する際の初期候補用量である。上述した要因に応じて、典型的な毎日又は週当たりの用量は、約1μg/kg〜100mg/kgの範囲、又はそれ以上であってよい。条件に応じた、数日又はより長期にわたる繰り返し投与において、疾患の兆候の発生が所望程度に抑制されるまで、処置は繰り返されるか、又は持続される。しかしながら、他の投薬計画も有用である。この治療の進捗具合は、例えば腫瘍のX線画像を含む、従来からの技術及びアッセイにより、容易にモニターされる。
本明細書に引用された全ての特許及び参考文献の開示は、それらの全体が参照によりここに導入される。
実施例1.TSPAN12は正常又は病的な血管新生に関与している
TSPAN12のコード化領域は、ヒト及びマウスを含むいくつかの生物体において公知であるが(例えば、GenBank(登録商標)受入番号、hTSPAN12についてはNM_012338、及びmTSPAN12についてはNM_173007)、それについての機能は同定されていない。その機能を明らかにし始めるために、従来からの方法を使用し、TSPAN12ノックアウト(KO)マウスを作製した。特に、標的コンストラクトを129/SvEvBrd(Lex-2)ES細胞にエレクトロポレーションし、サウザンブロットアッセイを使用し、標的クローンを同定した。標的クローンからの細胞をC57BL/6(アルビノ)胚盤胞に注射した。得られたキメラをC57BL/6(アルビノ)メスと交配させ、変異に対してヘテロ接合性であるマウスを生じさせ、続いてC57/BL6バックグラウンド(>N3)において戻し交配させ、表現型分析及び他の実験に使用した。TSPAN12−/−マウスは生存能力があり、繁殖能力もあった。
TSPAN12、Fzd4及びノリンKOマウスにおいて観察される表現型間の類似性に基づき、TSPAN12が、Fzd4を介したノリン-誘発性β-カテニンWntシグナル伝達に関与しているかどうかを決定するために、Topflashレポーターアッセイを実施した。Topflashコンストラクトは、カノニカルβ-カテニンシグナル伝達に対して反応するLEF/TCFコンセンサス部位を含むプロモーター下、ホタルのルシフェラーゼからなる。構成的プロモーター下でウミシイタケルシフェラーゼを発現するコンストラクトが、内部対照体として使用される。レポーターコンストラクト及びレセプターで形質移入された細胞は、外来性TSPAN12又はベクター対照体の存在下、10nMの組換えノリンで活性化された。16-18時間後、レポーター活性(ホタル活性をウミシイタケ活性で割る)を決定した。ノリン-媒介性シグナル伝達は、対照細胞よりも、TSPAN12が過剰発現している細胞において、約4倍高かった(図3、左欄−右欄は、対照となるウミシイタケルシフェラーゼ発現が、全ての条件下で同じであることを示している)。野生型TSPAN12 mRNAがsiRNAを使用して低減している(発現は対照レベルの5分の1のわずかに下だった)細胞において、同様の実験を実施し、ノリン-誘発性、Fzd4/LRP5-媒介性発現は、TSPAN12ノックダウン後に、かなり低減したことが見出された。
TSPAN12が、ノリン/β-カテニンシグナル伝達の開始の間に、実際に機能するならば、レセプター複合体の成分と共に共局在化し、相互作用することが予期される。この可能性をテストするために、flag-Fzd4(細胞外に位置するflag)とHA-TSPAN12を用いてHela細胞を形質移入した。細胞膜Fzd4を、氷上にて、非透過性の生存細胞において、flag抗体を用いて検出し、固定化及び透過化の後に続いて、TSPAN12を検出した。この染色パラダイムにより、Hela細胞の表面における多量のFzd4発現が明らかとなった。Fzd4は細胞膜に均一に分散していないが、その代わり、多くの点状領域に凝縮していることが見出された。TSPAN12はFzd4ポジティブ点状体と共に広範囲に共局在化しており、さらに、抗flag染色が細胞を透過することなく細胞表面で実施されるために、抗flag抗体で染色されない細胞内構造体に生じる。対照的に、CD9とFzd4は共局在化しなかった。Fzd4がFzd5で置き換えられ、TSPAN12と同時発現する場合、TSPAN12とFzd5が最も離間して局在化することが見出された(双方のタンパク質を強く発現したまれな細胞でのみ、分離が部分的に克服された)。
ノリンは、分子間ジスルフィド結合を介してダイマーを形成するシステインノットタンパク質のサブグループに属し(Vittら Mol. Endocrinol. 15(5): 681-94(2001))、ノリンダイマーがさらに高分子量の構造体に組み立て可能であると示唆される。(Perez-Vilarら J. Biol. Chem. 272(52): 33410-15(1997))。ノリンは、ノリンがAPに縮合していないならば、細胞外マトリックス(ECM)に強く会合している(Xuら 上掲)。分子間ジスルフィド結合の還元を通して、ノリンはモノマーに完全に転換可能であり、又は95位におけるシステインの変異により、分子間ジスルフィド結合が無効になると予測される。293細胞において、V5-タグされたノリンC95R変異体及びV5-タグされた野生型ノリンを発現させ、ECMからノリン抽出した。還元条件下、SDS PAGEにより、実際に区別できない、野生型及び変異ノリンのモノマーが明らかになった。以前の報告と一致して、非還元条件下での分析では、野生型ノリンがダイマー、及びより高分子量のアセンブリを形成することが明らかとなった。対照的に、ノリン-C95R変異体は、ほとんどがモノマーであり、大きなアセンブリは形成されなかった(図11)。全ノリンC95Rの小さなフラクションは、C95以外の位置での分子間ジスルフィドにより、又は可能であれば非共有結合により、ダイマーを形成した。
ノリン/β-カテニンシグナル伝達を強く損なわせるが、ノリンに結合する能力は維持している、上述した変異FZD4-M157Vを使用するレセプタークラスター化の生化学的分析を実施した(Xuら, 上掲)。構造的情報(Dannら Nature 412:86-90(2001))により補助すると、M157V変異は、ノリン誘発性FZD4ダイマー化、及びその結果としてのマルチマー化(Dannら, 上掲;Toomesら, 上掲;Xuら, 上掲)に影響を与えることが提案されている。以前の報告(Xuら, 上掲)と一致して、FZD4-M157Vにより媒介されるシグナル伝達が、かなり損なわれていたことが見出された。興味あることに、TSPAN12同時発現は、FZD4-M157Vのシグナル伝達欠失を完全にレスキューした(図13A)。
多くの方法を使用し、抗TSPAN12及び抗ノリン抗体を生成した。例えば、予防接種及びハイブリドーマ技術により抗体を生成した。また、重鎖及び軽鎖の相補性決定領域(CDR)に多様性を導入することより、単一のフレームワーク(ヒト化抗ErbB2抗体、4D5)に作製される合成ファージ抗体ライブラリも使用する(Leeら J. Mol. Biol.340: 1073-93(2004); Liangら J. Biol. Chem. 281: 951-61(2006))。ナイーブなライブラリを用いたプレートパニングを、MaxiSorpTM免疫プレートに固定化されたHis-タグヒトTSPAN12に対して実施する。増菌の4ラウンド後、クローンをランダムに選定し、ファージELISAを使用して、特定のバインダーを同定する。得られたhTSPAN12結合クローンを、His-タグマウスTSPAN12タンパク質を用いてさらにスクリーニングし、異種間クローンを同定する。それぞれのポジティブファージクローンについて、重鎖及び軽鎖の可変領域を、全長IgG鎖を発現するように設計されたpRK発現ベクターにサブクローンする。重鎖及び軽鎖のコンストラクトを、293又はCHO細胞に同時形質移入し、発現抗体を、プロテインAアフィニティーカラムを使用し、無血清培地から精製する。精製された抗体を、組換えTSPAN12又はノリンへの結合についてはELISAにより、FZD4と共に、全長ヒトTSPAN12又はマウスTSPAN12を発現する、もしくはヒト又はマウスノリンを発現する安定した株化細胞への結合についてはFACSによりテストする。ついで、抗体を、TSPAN12(抗TSPAN12抗体)により、ノリン-媒介性、FZD4/LRP5-媒介性のWntレポーター活性の増強のブロック、又はノリン-誘発性シグナル伝達(抗ノリン抗体)のブロックについてテストする。親和成熟について、関心ある最初のクローンから誘導された3つの異なるCDRループ(CDR-L3、-H1、及び-H2)の組合せを有するファージライブラリを、各選択位置が、約50:50の頻度で、非野生型残基に変異するか、又は野生型として維持されるように、柔軟なランダム化法により実施する(Liangら, 2006, 上述)。ついで、高親和性のクローンを、漸次増加する緊縮性を有する、ヒト及びマウスの双方のHis-タグTSPAN12タンパク質に対して、4ラウンドの液相パニングを介して同定する。
マウスモデルにおいて、抗体又はTSPAN12ポリペプチドをテストする。マウスROPモデルについて、P7で開始して5日間、子供を75%の酸素(過酸素症)に置く。P12にて、動物をエアコンの効いた部屋(酸素正常状態)に戻し、さらに5日間(P17)保持した。抗TSPAN12、抗ノリン抗体、又はTSPAN12の大きな細胞外ループ(例えば、Hoら 上掲)を、P12の動物の硝子体内に注射する。アンタゴニストの親和性及び安定性により決定される予測に基づき、複数の用量レベルと頻度で実施する。P17に、右目を4%のPFAに配し、左目をダビットソンの固定液に配した。パラフィン工程及び切片化のために、角膜とレンズを左目から取り除いた。眼杯を、虹彩側が下になり、切開面が面するようにブロックに配した。16ミクロン間隔の切片を得、特注の核アルゴリズムを具備するAperio ScanScope(登録商標)を使用し、血管新生について分析した。NFLに密接に関連した新生血管房を、アルゴリズム定量化の関心ある領域として同定した。ケース毎に、新生血管核を含む最小30切片を、網膜の血管新生の評価のために定量した。
マウスレーザー誘起脈絡膜血管新生モデルにおいても、抗体及びポリペプチドをテストする。
Claims (21)
- 血管新生に関連した眼の疾患又は病状を患っている被験者の血管新生を低減又は阻害するための医薬の製造におけるTSPAN12アンタゴニストの使用であって、
眼の疾患又は病状が糖尿病性網膜症、脈絡膜血管新生(CNV)、加齢黄斑変性症(AMD)、糖尿病黄斑浮腫(DME)、病的近視、フォンヒッペルリンダウ病、眼のヒストプラスマ症、網膜中心静脈閉塞症(CRVO)、網膜静脈分枝閉塞症(BRVO)、角膜血管新生、網膜血管新生、未熟児網膜症(ROP)、結膜下出血、及び高血圧性網膜症からなる群から選択され、
TSPAN12アンタゴニストがTSPAN12に対するsiRNAである、使用。 - 眼の疾患又は病状が、糖尿病性網膜症、AMD、DME、CRVO、及びBRVOからなる群から選択される、請求項1に記載の使用。
- 医薬が第2の抗血管新生剤と投与される、請求項1に記載の使用。
- 第2の抗血管新生剤が、TSPAN12アンタゴニスト投与の前又は後に投与される、請求項3に記載の使用。
- 第2の抗血管新生剤が、TSPAN12アンタゴニストと同時に投与される、請求項3に記載の使用。
- 第2の抗血管新生剤が、抗体、ノリン又はVEGFのポリペプチド断片、アンチセンス又はRNA又はDNAコンストラクト、siRNA、小分子、リボザイム及び三重らせん体形成核酸分子からなる群から選択されるノリン又は血管内皮細胞増殖因子(VEGF)のアンタゴニストである、請求項3に記載の使用。
- ノリンアンタゴニストが抗ノリン抗体である、請求項6に記載の使用。
- VEGFアンタゴニストが抗VEGF抗体である、請求項6に記載の使用。
- 抗VEGF抗体がラニビズマブである、請求項8に記載の使用。
- 所望しない血管新生に関連した眼の疾患又は病状を処置するための医薬の製造におけるTSPAN12アンタゴニストの使用であって、
眼の疾患又は病状が糖尿病性網膜症、脈絡膜血管新生(CNV)、加齢黄斑変性症(AMD)、糖尿病黄斑浮腫(DME)、病的近視、フォンヒッペルリンダウ病、眼のヒストプラスマ症、網膜中心静脈閉塞症(CRVO)、網膜静脈分枝閉塞症(BRVO)、角膜血管新生、網膜血管新生、未熟児網膜症(ROP)、結膜下出血、及び高血圧性網膜症からなる群から選択され、
TSPAN12アンタゴニストがTSPAN12に対するsiRNAである、使用。 - 眼の疾患又は病状が、糖尿病性網膜症、AMD、DME、CRVO、及びBRVOからなる群から選択される、請求項10に記載の使用。
- 医薬が第2の抗血管新生剤と投与される、請求項10に記載の使用。
- 第2の抗血管新生剤が、TSPAN12アンタゴニスト投与の前又は後に投与される、請求項12に記載の使用。
- 第2の抗血管新生剤が、TSPAN12アンタゴニストと同時に投与される、請求項12に記載の使用。
- 第2の抗血管新生剤が、抗体、ノリン又はVEGFのポリペプチド断片、アンチセンス又はRNA又はDNAコンストラクト、siRNA、小分子、リボザイム及び三重らせん体形成核酸分子からなる群から選択されるノリン又はVEGFのアンタゴニストである、請求項12に記載の使用。
- ノリンアンタゴニストが抗ノリン抗体である、請求項15に記載の使用。
- VEGFアンタゴニストが抗VEGF抗体である、請求項15に記載の使用。
- 抗VEGF抗体がラニビズマブである、請求項17に記載の使用。
- TSPAN12アンタゴニストであるTSPAN12に対するsiRNAを含む、抗血管新生剤。
- 抗ノリン抗体又は抗VEGF抗体をさらに含む、請求項19に記載の抗血管新生剤。
- 抗VEGF抗体がラニビズマブである、請求項20に記載の抗血管新生剤。
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