JP5775565B2 - マルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ - Google Patents
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Description
A.サンプル添加:本発明における免疫クロマトグラフィチップのサンプルパッド[2]上に液滴の状態で液体サンプルまたは予備処理された液体サンプルを添加すること、
B.免疫クロマトグラフィ反応:免疫クロマトグラフィ反応が完了するまで数分間静置すること。免疫クロマトグラフィ反応プロセスにおいて、特異的な免疫反応が、テストコンジュゲート[6]と、検知された標的[10]と、固相テストプローブ[15]との間で生じ、マーカー[8]の結合量は、分析膜[4]上の明確に画定され固定された位置において変化する。ある位置におけるマーカー[8]の結合量は、ある種類の検知された標的[10]の存在または濃度を直接反映する、
C.結果判断:カラーマーカー[8]に対する視覚的調査によって直接結果を判断するか、または光信号、電気信号、もしくは磁気信号を発生させるマーカー[8]のための器具を用いて結果を判断すること。ある種類の検知された標的[10]に対する一種類の固相テストプローブ[15]が、分析膜[4]の上の明確に画定された位置に固定して配置されるので、この種類の検知された標的[10]を、カラー信号、光信号、電気信号、または磁気信号を含む、明確に画定された位置に固定されたマーカー[8]からの信号を判断することによって質的に、そして量的に検知することができる、
を包含する。
血液中の、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸器合抱体ウイルス、肺炎マイコプラズマ、肺炎クラミジア、レジオネラニューモフィラ、インフルエンザ菌、および肺炎桿菌に対する抗体を、二重抗原サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップを用いて検知し、起源が不明な発熱に罹患する患者に対するその発熱の原因を迅速に決定した。
A.コンジュゲートパッド[A3]の調製:インフルエンザウイルス表面抗原A、パラインフルエンザウイルス表面抗原A、呼吸器合抱体ウイルス表面抗原A、肺炎マイコプラズマ表面抗原A、肺炎クラミジア表面抗原A、レジオネラニューモフィラ表面抗原A、インフルエンザ菌表面抗原A、および肺炎桿菌表面抗原AをフルオレセインCy5とそれぞれコンジュゲートさせ、8種類のテストコンジュゲート[A6]を調製し、Cy5とジオキシンをコンジュゲートさせ、コントロールコンジュゲート[A7]を調製し、PBバッファ溶液(0.03M、pH=7.2)中でテストコンジュゲート[A6]とコントロールコンジュゲート[A7]を混合し、1mg/mlでコンジュゲートのそれぞれの濃度を有するコンジュゲートの混合物を形成し、コンジュゲートパッド[A3]として使用される一片の1cmx30cmのガラス繊維に液滴の形態でコンジュゲートの混合物を添加し、結果として得られたものを次に使用するために37℃で5時間乾燥させた。
A.サンプル添加:900μlのサンプル希釈剤バッファ(0.5%のPEG20000と、0.05%のSDSと、2%のBSAとを含有するpH=7.2の0.03MのPB)と100μlの血清サンプルを混合し、次に、免疫クロマトグラフィチップのサンプルパッド[A2]上に液滴の形態で1000μlの混合物を添加した。
間接免疫クロマトグラフィチップを用いて、血液中の、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸器合抱体ウイルス、肺炎マイコプラズマ、肺炎クラミジア、レジオネラニューモフィラ、インフルエンザ菌、および肺炎桿菌に対する抗体を検知し、起源が不明な発熱に苦しむ患者に対する発熱の原因を決定した。
A.コンジュゲートパッド[B3]の調製:フルオレセインCy5とヤギ抗ヒトIgGをコンジュゲートさせ、テストコンジュゲート[B6]を調製し、Cy5とヤギ抗ウサギIgGをコンジュゲートさせ、コントロールコンジュゲート[B7]を調製し、PBバッファ溶液(0.03M、pH=7.2)中でコントロールコンジュゲート[B7]とテストコンジュゲート[B6]とを混合してコンジュゲートの混合物を形成し、ここでテストコンジュゲート[B6]の最終的な濃度は8mg/mlであり、コントロールコンジュゲート[B7]の最終的な濃度は1mg/mlであり、コンジュゲートパッド[B3]として使用される一片の1cmx30cmのガラス繊維上に液滴の形態でコンジュゲートの混合物を添加し、結果として得られたものを次に使用するために37℃で5時間乾燥させた。
A.サンプル添加:900μlのサンプル希釈剤バッファ(0.5%のPEG20000と0.05%のSDSと2%のBSAとを含有する、pH=7.2の0.03MのPB)と100μlの血清サンプルを混合し、次に、免疫クロマトグラフィチップのサンプルパッド[B2]の上に液滴の形態で1000μlの混合物を添加した。
尿中の、アヘン、モルヒネ、ヘロイン、コカイン、コカの葉、アンフェタミン、メタンフェタミン、およびメスカリンを含む違法薬物の痕跡を、競合免疫クロマトグラフィチップを用いて検知した。
A.コンジュゲートパッド[C3]の調製:BSA−アヘン、BSA−モルヒネ、BSA−ヘロイン、BSA−コカイン、BSA−コカの葉、BSA−アンフェタミン、BSA−メタンフェタミン、およびBSA−メスカリンをフルオレセインCy5とそれぞれコンジュゲートさせ、8種類のテストコンジュゲート[C6]を調製し、Cy5とジゴキシンをコンジュゲートさせ、コントロールコンジュゲート[C7]を調製し、PBバッファ溶液(0.03M、pH=7.2)中でテストコンジュゲート[C6]とコントロールコンジュゲート[C7]を混合し、1mg/mlでコンジュゲートのそれぞれの濃度を有するコンジュゲートの混合物を形成し、コンジュゲートパッド[C3]として使用される一片の1cmx30cmのガラス繊維上に液滴の形態でコンジュゲートの混合物を添加し、結果として得られたものを次に使用するために37℃で5時間乾燥させた。
A.サンプル添加:900μlのサンプル希釈剤バッファ(0.5%のPEG8000と0.1%のSDSと1%のBSAとを含有する、pH=7.2の0.03MのPB)と100μlの尿サンプルを混合し、次に、免疫クロマトグラフィチップのサンプルパッド[C2]の上に液滴の形態で1000μlの混合物を添加した。
二重抗原サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップを使用して、血清サンプル中の特異抗体を検知し、ここで検知された抗体に対する特異抗原とマーカーをコンジュゲートさせることによってテストコンジュゲートを形成した。
二重抗原サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップは、積層カード[A1]と、サンプルパッド[A2]と、コンジュゲートパッド[A3]と、分析膜[A4]と、水吸収パッド[A5]とを備え、
積層カード[A1]は、剛性材料で作られ、PVCプレートなどの一つの表面上を粘着剤で被覆されたものであり、その表面上で、サンプルパッド[A2]と、コンジュゲートパッド[A3]と、分析膜[A4]と、水吸収パッド[A5]とが、適切な重複関係で積層および固定され、二重抗原サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップにおける液体の流れの連続性を確保することができ、
サンプルパッド[A2]は、二重抗原サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップが使用されるときに液体サンプルが添加される一片の水吸収パッドであり、
コンジュゲートパッド[A3]は、いくつかの種類のテストコンジュゲート[A6]とコントロールコンジュゲート[A7]とが固定される一片のガラス繊維であり、ここで各種類のテストコンジュゲート[A6]は、一種類の液相テスト抗原[A9]とマーカー[A8]をコンジュゲートさせることによって形成され、ある種類の検知された抗体[A10]に対して特異的に一対一で対応し、コントロールコンジュゲート[A7]は、液相コントロール抗原[A11]をマーカー[A8]とコンジュゲートさせることによって形成され、免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であるか否かを照合することができる。
検知プロセスにおいて、サンプルパッド[A2]に液体サンプルを添加した後で、液体サンプルはサンプルパッド[A2]を通ってコンジュゲートパッド[A3]の中に浸透し、液体サンプルの基材の作用の下で、コンジュゲートパッド[A3]に固定されたテストコンジュゲート[A6]とコントロールコンジュゲート[A7]は、再溶解して自由になり、サンプル中の全種類の検知された抗体[A10]と共にコンジュゲートパッド[A3]を離れて分析膜[A4]の中に入り、毛細管の作用の下で、これらの物質は、テストゾーン[A13]とコントロールスポット[A14]とを通って水吸収パッド[A5]に向かって流れ、そのプロセスにおいて、各種類のテストコンジュゲート[A6]が、ある種類の検知された抗体[A10]の一部位と特異的に結合した一方で、同時に、この種類の検知された抗体[A10]の別の部位が、テストゾーン[A13]上の明確に画定された位置に固定された対応する種類の固相テスト抗原[A15]と特異的に結合し、コントロールコンジュゲート[A7]はコントロールスポット[A14]上で固相コントロール抗体[A16]と直接結合したので、分析膜[A4]のテストゾーン[A13]上の明確に画定された位置に固定された固相テスト抗原[A15]と、検知された抗体[A10]と、テストコンジュゲート[A6]の液相テスト抗原[A9]との間の特異的二重抗原サンドイッチ免疫反応を介して、分析膜[A4]のテストゾーン[A13]上の明確に画定され固定された位置におけるマーカー[A8]の量が変化し、結局のところ、明確に画定され固定された位置におけるマーカー[A8]からの信号の存在と強度とは、検知された抗体[A10]の存在と濃度とを指し、ここでマーカー[A8]の信号強度は、検知された抗体[A10]の濃度に比例し、分析膜[A4]のコントロールスポット[A14]上の明確に画定された位置で固定された固相コントロール抗体[A16]とコントロールコンジュゲート[A7]の液相コントロール抗原[A11]との間の直接結合を介して、マーカー[A8]は、分析膜[A4]のコントロールスポット[A14]上の明確に画定され固定された位置で結合し、マーカー[A8]の存在は、免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であったことを示した。
間接免疫クロマトグラフィチップを使用して血清サンプル中の特異抗体を検知し、ここで検知された抗体の二次抗体とマーカーをコンジュゲートさせることによってテストコンジュゲートを形成した。以下、ヒト血清サンプルの検知例を使用して本実施形態を説明する。
間接免疫クロマトグラフィチップは、積層カード[B1]と、サンプルパッド[B2]と、コンジュゲートパッド[B3]と、分析膜[B4]と、水吸収パッド[B5]とを備え、
積層カード[B1]は、剛性材料で作られ、PVCプレートなどの一つの表面上を粘着剤で被覆されたものであり、その表面上で、サンプルパッド[B2]と、コンジュゲートパッド[B3]と、分析膜[B4]と、水吸収パッド[B5]とが、適切な重複関係で積層および固定され、間接免疫クロマトグラフィチップにおける液体の流れの連続性を確保することができ、
サンプルパッド[A2]は、間接免疫クロマトグラフィチップが使用されるときに液体サンプルが添加される一片のセルロース膜であり、
コンジュゲートパッド[B3]は、テストコンジュゲート[B6]とコントロールコンジュゲート[B7]とが固定される一片のポリエステル膜であり、ここでテストコンジュゲート[B6]は、ヤギ抗ヒトIgG[B9]とマーカー[B8]をコンジュゲートさせることによって形成され、検知されたヒト抗体[B10]と特異的に反応してもよく、コントロールコンジュゲート[B7]は、ヤギ抗ウサギIgG[B11]とマーカー[B8]をコンジュゲートさせることによって形成され、免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であるか否かを照合することができ、
分析膜[B4]は、一片のナイロン膜であり、ここで分析膜[B4]は、テスト・アレイ・ユニット[B12]を備え、テスト・アレイ・ユニット[B12]は、テストゾーン[B13]とコントロールスポット[B14]とを備え、テストゾーン[B13]は、様々な種類の固相テスト抗原[B15]を備え、コントロールスポット[B14]は、固相コントロール抗体[B16]、すなわち、ウサギ抗IgGを備え、テストゾーン[B13]上の各種類の固相テスト抗原[B15]は、明確に画定された位置に固定して配置され、ある種類の検知されたヒト抗体[B10]の特異的な検知に対応し、コントロールスポット[B14]上の固相コントロール抗体[B16]は、明確に画定された位置に固定して配置され、全免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であるか否かを照合する。
検知プロセスにおいて、サンプルパッド[B2]に液体サンプルを添加した後で、液体サンプルは、サンプルパッド[B2]を通ってコンジュゲートパッド[B3]の中に浸透し、液体サンプルの基材の作用の下で、コンジュゲートパッド[B3]に固定されたテストコンジュゲート[B6]とコントロールコンジュゲート[B7]は再溶解して自由になり、サンプル中の全種類の検知されたヒト抗体[B10]と共にコンジュゲートパッド[B3]を離れて分析膜[B4]の中に入り、毛細管の作用の下で、これらの物質は、テストゾーン[B13]とコントロールスポット[B14]とを通って水吸収パッド[B5]に向かって流れ、そのプロセスにおいて、テストコンジュゲート[B6]が、特定の種類の検知されたヒト抗体[B10]の一部位と特異的に結合した一方で、同時に、この種類の検知されたヒト抗体[B10]の別の部位が、テストゾーン[B13]上の明確に画定された位置に固定された対応する種類の固相テスト抗原[B15]と特異的に結合し、コントロールコンジュゲート[B7]はコントロールスポット[B14]上の固相コントロール抗体[B16]、すなわち、ウサギ抗IgGと直接結合したので、分析膜[B4]のテストゾーン[B13]上の明確に画定された位置に固定された固相テスト抗原[B15]と、検知されたヒト抗体[B10]と、テストコンジュゲート[B6]のヤギ抗ヒトIgG[B9]との間の特異的な免疫反応を介して、分析膜[B4]のテストゾーン[B13]上の明確に画定され固定された位置におけるマーカー[B8]の量が変化し、結局のところ、明確に画定され固定された位置におけるマーカー[B8]からの信号の存在と強度とは、検知されたヒト抗体[B10]の存在と濃度とを指し、ここでマーカー[B8]の信号強度は、検知されたヒト抗体[B10]の濃度に比例し、分析膜[B4]のコントロールスポット[B14]上の明確に画定された位置に固定された固相コントロール抗体[B16](すなわち、ウサギ抗IgG)とコントロールコンジュゲート[B7]のヤギ抗ウサギIgG[B11]との間の直接結合を介して、マーカー[A8]は、分析膜[B4]のコントロールスポット[B14]上の明確に画定され固定された位置で結合し、マーカー[B8]の存在は、免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であったことを示した。
競合免疫クロマトグラフィチップを使用して、1つの抗原決定基だけを有するハプテンなどの小分子を検知した。
競合免疫クロマトグラフィチップは、積層カード[C1]と、サンプルパッド[C2]と、コンジュゲートパッド[C3]と、分析膜[C4]と、水吸収パッド[C5]とを備え、
積層カード[C1]は、剛性材料で作られ、PVCプレートなどの一つの表面上に粘着剤で被覆されたものであり、その表面上で、サンプルパッド[C2]と、コンジュゲートパッド[C3]と、分析膜[C4]と、水吸収パッド[C5]とが、適切な重複関係で積層および固定され、競合免疫クロマトグラフィチップにおける液体の流れの連続性を確保することができ、
サンプルパッド[C2]は、競合免疫クロマトグラフィチップが使用されるときに液体サンプルが添加される一片のガラス繊維であり、
コンジュゲートパッド[C3]は、いくつかの種類のテストコンジュゲート[C6]とコントロールコンジュゲート[C7]とが固定される一片の不織布であり、ここで各種類のテストコンジュゲート[C6]は、一種類の液相テスト抗原[C9]とマーカー[C8]をコンジュゲートさせることによって形成され、ある種類の検知された抗原[C10]と特異的に一対一で対応し、この種類の検知された抗原[C10]と同じ抗原決定基を有し、コントロールコンジュゲート[C7]は、ジゴキシン[C11]とマーカー[C8]をコンジュゲートさせることによって形成され、免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であるか否かを照合することができ、
分析膜[C4]は、一片のニトロセルロース膜であり、ここで分析膜[C4]は、テスト・アレイ・ユニット[C12]を備え、テスト・アレイ・ユニット[C12]は、テストゾーン[C13]とコントロールスポット[C14]とを備え、テストゾーン[C13]は、様々な種類の固相テスト抗体[C15]を備え、コントロールスポット[C14]は、固相コントロール抗体[C16]を備え、テストゾーン[C13]上の各種類の固相テスト抗体[C15]は、明確に画定された位置に固定して配置され、ある種類の検知された標的[C10]の特異的な検知に対応し、コントロールスポット[C14]上の固相コントロール抗体[A16](すなわち、ウサギ抗ジゴキシン)は、明確に画定された位置に固定して配置され、全免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であるか否かを照合する。
検知プロセスにおいて、サンプルパッド[C2]に液体サンプルを添加した後で、液体サンプルは、サンプルパッド[C2]を通ってコンジュゲートパッド[C3]の中に浸透し、液体サンプルの基材の作用の下で、コンジュゲートパッド[C3]に固定されたテストコンジュゲート[C6]とコントロールコンジュゲート[C7]は再溶解して自由になり、サンプル中の全種類の検知された抗原[C10]と共にコンジュゲートパッド[C3]を離れて分析膜[C4]の中に入り、毛細管の作用の下で、これらの物質は、テストゾーン[C13]とコントロールスポット[C14]とを通って水吸収パッド[C5]に向かって流れ、そのプロセスにおいて、各種類のテストコンジュゲート[C6]と、ある種類の検知された抗原[C10]とが、テストゾーン[C13]上の明確に画定された位置に固定された対応する種類の固相テスト抗体[C15]と特異的に結合するように競合し、コントロールコンジュゲート[C7]はコントロールスポット[C14]上の固相コントロール抗体[C16](すなわち、ウサギ抗ジゴキシン)と直接結合したので、検知された抗原[C10]と、テストコンジュゲート[C6]の液相テスト抗原[C9]と、分析膜[C4]のテストゾーン[C13]上の明確に画定された位置に固定された固相テスト抗体[C15]との間の特異的免疫反応を介して、分析膜[B4]のテストゾーン[B13]上の明確に画定され固定された位置におけるマーカー[B8]の量が変化し、すなわち、各種類のテストコンジュゲート[C6]は、対応する種類の固相検知抗体[C15]の全結合部位を占有し、それによりある種類の検知された抗原[C10]が存在しなかった場合には、マーカー[C8]の最も強い信号をもたらしたが、ある種類の検知された抗原[C10]が、対応する種類の固相テスト抗体[C15]の結合部位に関して、対応する種類のテストコンジュゲート[C6]と競合し、それによりこの種類の検知された抗原[C10]が存在した場合には、マーカー[C8]のより弱い信号をもたらし、結局のところ、明確に画定され固定された位置におけるマーカー[C8]からの信号の存在と強度とは、ある種類の検知された抗原[C10]の存在と濃度とを指し、ここでマーカー[C8]の信号強度は、この種類の検知された抗原[C10]の濃度に反比例し、分析膜[C4]のコントロールスポット[C14]上の明確に画定された位置で固定された固相コントロール抗体[C16](すなわち、ウサギ抗ジゴキシン)とコントロールコンジュゲート[C7]のジゴキシン[C11]との間の直接結合を介して、マーカー[C8]は、分析膜[C4]のコントロールスポット[C14]上の明確に画定され固定された位置で結合し、マーカー[C8]の存在は、免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であったことを示した。
Claims (12)
- 積層カード[1]と、サンプルパッド[2]と、コンジュゲートパッド[3]と、分析膜[4]と、水吸収パッド[5]とを備える、マルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップであって、
前記サンプルパッド[2]と、前記コンジュゲートパッド[3]と、前記分析膜[4]と、前記水吸収パッド[5]とは、前記積層カード[1]の上で前後方向に順次並んでおり、前記サンプルパッド[2]の後端部と前記コンジュゲートパッド[3]の前端部とが重複し、前記コンジュゲートパッド[3]の後端部と前記分析膜[4]の前端部とが重複し、前記分析膜[4]の後端部と前記水吸収パッド[5]の前端部とが重複し、
いくつかの種類のテストコンジュゲート[6]とコントロールコンジュゲート[7]は、前記コンジュゲートパッド[3]に固定され、各種類の前記テストコンジュゲート[6]は、対応する種類の液相テストプローブ[9]とマーカー[8]をコンジュゲートさせることによって形成され、各種類の検知された標的[10]に対して特異的に一対一で対応し、
前記分析膜[4]は、テスト・アレイ・ユニット[12]を備え、前記テスト・アレイ・ユニット[12]は、テストゾーン[13]と1つのコントロールスポット[14]とを備え、
前記テストゾーン[13]は、様々な種類の固相テストプローブ[15]を備え、前記テストゾーン[13]上の前記固相テストプローブ[15]は、丸いスポットの形態で、左右方向及び前後方向の双方に配列され、各種類の前記固相テストプローブ[15]は、ある種類の検知された標的[10]の特異的な検知に対応し、
前記コントロールスポット[14]は、固相コントロールプローブ[16]を備え、前記コントロールスポット[14]上の前記固相コントロールプローブ[16]は、丸いスポットの形態で、前記固相テストプローブ[15]の最後列が存在する線上であって、前記分析膜[4]の幅中央に位置し、全免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であるか否かを照合する、マルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。 - 前記積層カード[1]は、剛性材料で作られ、一つの表面上を粘着剤で被覆されたものであり、前記カードはPVCプレートである、請求項1に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- 前記サンプルパッド[2]は、大きな総容積と均一な微細構造とを有するものであり、前記パッドは、水吸収紙、セルロース膜、ガラス繊維、不織布、または血液濾過膜から選択される、請求項1に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- 前記コンジュゲートパッド[3]は、大きな総容積と均一な微細構造とを有するものであり、前記パッドは、ガラス繊維、ポリエステル膜、または不織布から選択され、前記コントロールコンジュゲート[7]は、液相コントロールプローブ[11]と前記マーカー[8]をコンジュゲートさせることによって形成され、前記免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であるか否かを照合することができる、請求項1に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- 前記分析膜[4]は、均一な微細構造を有するものであり、前記膜は、ニトロセルロース膜またはナイロン膜から選択される、請求項1に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- 前記水吸収パッド[5]は、大きな総容積を有するものであり、前記パッドは、水吸収紙またはセルロース膜から選択される、請求項1に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- 各検知された標的[10]は2つのテストプローブに対応し、前記テストプローブのうちの一方は、前記分析膜[4]上に前記固相テストプローブ[15]として固定され、前記液相テストプローブ[9]としての他方のテストプローブは、マーカー[8]とコンジュゲートされ、前記コンジュゲートパッド[3]上に固定された前記テストコンジュゲート[6]を形成する、請求項1に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- 各種類の前記固相テストプローブ[15]は、前記分析膜[4]の前記テストゾーン[13]上で、明確に画定された位置に固定して配置され、ある種類の検知された標的[10]の特異的な検知に個々に対応し、各種類の前記固相テストプローブ[15]を、ある種類の検知された標的[10]および前記テストコンジュゲート[6]の前記対応する種類の液相テストプローブ[9]と特異的に免疫学的に反応させることにより、この種類の固相テストプローブ[15]が位置決めされる前記明確に画定された位置において結合された前記マーカー[8]の量が、前記免疫反応によって変化し、それにより、この種類の検知された標的[10]の存在と濃度を、前記マーカー[8]の量によって明らかにする、請求項1に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- 前記固相コントロールプローブ[16]は、前記コントロールコンジュゲート[7]の液相コントロールプローブ[11]と直接結合して、前記免疫クロマトグラフィ分析が正常な状態であるか否かを照合する、請求項5に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップと、間接免疫クロマトグラフィチップと、競合免疫クロマトグラフィチップとを備え、前記サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップは、抗原検知のための二重抗体サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップと、抗体検知のための二重抗原サンドイッチ免疫クロマトグラフィチップとを備え、前記間接免疫クロマトグラフィチップは、血清サンプルにおける特異抗体の検知のために、検知された抗体の二次抗体とマーカーをコンジュゲートさせることによって形成された前記テストコンジュゲートと共に使用され、前記競合免疫クロマトグラフィチップは、1つの抗原決定基だけを有するハプテンなどの小分子物質の検知のために使用される、請求項1に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップ。
- 請求項1〜10いずれか1項に記載のマルチアッセイ免疫クロマトグラフィチップの調製方法であって、以下の工程:
A.コンジュゲートパッド[3]の調製:様々な種類のテストコンジュゲート[6]とコントロールコンジュゲート[7]を混合してコンジュゲートの混合物を得、コンジュゲートパッド[3]として使用される、一片の、ガラス繊維、ポリエステル膜、または不織布上に前記混合物を塗布し、結果として得られたものを次に使用するために乾燥させる工程、
B.分析膜[4]の調製:明確に画定され固定されたアドレサブルな位置で、ニトロセルロース膜またはナイロン膜上で丸いスポットの形態の、固相テストプローブ[15]として働く様々な種類の抗原と、固相コントロールプローブ[16]として働く抗体とをそれぞれ添加することで、テストゾーン[13]とコントロールスポット[14]とをそれぞれ形成し、それによりテスト・アレイ・ユニット[12]を形成し、前記テスト・アレイ・ユニット[12]において、前記検知された標的[10]と一対一で対応する各種類の前記固相テストプローブ[15]は、明確に画定された位置で固定され、明確に画定され固定された位置をも有する1つの固相コントロールプローブ[16]だけを必要とし、前記分析膜[4]上に複数の前記テスト・アレイ・ユニット[12]を調製して、それを次に使用するために乾燥させる工程、
C.積層および切断:積層カード[1]として働くPVCプレートに対して順番に、前記サンプルパッド[2]と、前記コンジュゲートパッド[3]と、前記分析膜[4]と、水吸収パッド[5]とを、各部品間の重複関係を確保しながら積層させ、前記PVCプレートを、前記テスト・アレイ・ユニット[12]間のブレイクポイント[17]において、別個の使用可能な完成品に切断する工程であって、前記免疫クロマトグラフィチップの完成品は、直接使用されるか、または使用するためにプラスチックカートリッジの中に装填されることができ、本発明の免疫クロマトグラフィチップを取得する、
を包含する、方法。 - 請求項1〜10のいずれか1項に記載のマルチ免疫クロマトグラフィチップを用いた生物学的標的検知方法であって、
A.サンプル添加:請求項1〜10のいずれか1項に記載の免疫学的クロマトグラフィチップの前記サンプルパッド[2]上に液滴の状態で液体サンプルまたは予備処理された液体サンプルを添加すること、
B.免疫クロマトグラフィ反応:前記免疫クロマトグラフィ反応が完了するまで数分間静置すること、ここで前記免疫クロマトグラフィ反応プロセスにおいて、特異的な免疫反応が、前記テストコンジュゲート[6]と、前記検知された標的[10]と、前記固相テストプローブ[15]との間で生じ、前記マーカー[8]の結合量は、前記分析膜[4]上の前記明確に画定され固定された位置において変化し、ある位置における前記マーカー[8]の結合量は、ある種類の検知された標的[10]の存在または濃度を直接反映する、
C.結果判断:カラーマーカー[8]に対する視覚的調査によって直接結果を判断するか、または光信号、電気信号、もしくは磁気信号を発生させるマーカー[8]のための器具を用いて結果を判断することにより、前記明確に画定され固定された位置に対応するある種類の検知された標的[10]に対する質的検知結果と量的検知結果とを取得すること、
を包含する、生物学的標的検知方法。
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