JP5773873B2

JP5773873B2 - ヘッジホッグ経路関連障害の治療のためのスムースンド拮抗作用

Info

Publication number: JP5773873B2
Application number: JP2011529524A
Authority: JP
Inventors: ドルシュ，マリオン; イー．モナハン，ジョン; パトリックモリシー，ミッチェル; パン，シーフェン; ウィリアム，ジュリエット
Original assignee: ノバルティスアーゲー
Priority date: 2008-10-01
Filing date: 2009-09-28
Publication date: 2015-09-02
Anticipated expiration: 2029-09-28
Also published as: BRPI0920533A2; US20140200217A1; CN102170873B; CN102170873A; WO2010037715A1; JP2012504573A; MX340304B; CN103784457A; IL211678A0; AU2009299927A1; AU2009299927B2; EP2617414A3; KR101624000B1; RU2519200C2; JP2015180654A; EP2346499A1; US20110183962A1; EP3023097A1; TWI478916B; CA2738868C

Description

背景技術
ヘッジホッグ（Ｈｈ）シグナル伝達は、胚パターン形成、すなわち、それによって胚細胞が分化組織の秩序正しい空間配置を形成する過程の重要な調節メカニズムとしてショウジョウバエにおいて最初に同定された（Nusslein-Volhardら（１９８０年）、Nature、２８７巻、７９５〜８０１頁）。哺乳類細胞において、３つのヘッジホッグ遺伝子、すなわちソニックヘッジホッグ（Ｓｈｈ）、インディアヘッジホッグ（Ｉｈｈ）及びデザートヘッジホッグ（Ｄｈｈ）が同定された。ヘッジホッグ遺伝子は、自己触媒切断及びＮ末端における脂質修飾（パルミトイル化）及びＣ末端のコレステロール修飾などの翻訳後修飾を受ける分泌タンパク質をコードする。

脂質修飾Ｎ末端ヘッジホッグタンパク質は、タンパク質経路のシグナル伝達活性を誘発し、細胞間情報伝達は、シグナリング細胞からの可溶性ヘッジホッグタンパク質の送出と応答細胞の受取りによって生ずる。応答細胞において、１２回膜貫通型受容体パッチド（Patched）（Ｐｔｃｈ）がＨｈシグナル伝達の負のレギュレータとしての役割を果たし、７回膜貫通型タンパク質スムースンド（Smoothened）（Ｓｍｏ）がＨｈシグナル伝達の正のレギュレータとしての役割を果たす。休止状態では、遊離Ｐｔｃｈ（すなわち、Ｈｈにより結合されていない）がＳｍｏにより誘発される経路の活性を準化学量論的に抑制する（Taipaleら（２００２年）、Nature、４１８巻、８９２頁）が、リガンドであるＨｈタンパク質の結合により、Ｓｍｏの抑制が解除され、結果として発生するシグナル伝達カスケードがＧｌｉ転写因子（Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２及びＧｌｉ３）の活性化及び核転移をもたらす。

Ｈｈシグナル伝達転写の下流標的遺伝子は、正及び負の調節フィードバックループの要素であるＷｎｔ、ＴＧＦβ及びＧｌｉ１を含む。ｃ−ｍｙｃ、サイクリンＤ及びＥなどのいくつかの細胞周期及び増殖調節遺伝子もＨｈシグナル伝達の標的遺伝子に含められる。

Ｈｈシグナル伝達は、細胞増殖、分化及び器官形成などの様々な生物学的過程を組織特異的かつ用量依存的に調節することが公知である。神経管の発生において、Ｓｈｈがフロアプレートにおいて発現し、運動及びドーパミン作動性ニューロンを含む、ニューロンの特定のサブタイプの分化を誘導する。Ｈｈはまた、小脳顆粒細胞及び神経幹細胞などのニューロン前駆細胞の増殖を調節することが公知である。腸管の発生において、低レベルのＨｈシグナル伝達は膵臓の発生に必要であるが、高レベルのＨｈシグナル伝達は膵臓器官形成を阻害する。Ｈｈはまた、幹細胞増殖並びに皮膚、前立腺、精巣及び骨髄における器官形成に重要な役割を果たしていることが公知である。

通常、Ｈｈシグナル伝達は、細胞増殖、分化及び胚のパターン形成時に厳密に制御される。しかし、例えば、ヘッジホッグシグナル伝達経路を構成的に活性化する突然変異に起因するヘッジホッグシグナル伝達経路の異常な活性は、病的帰結を有する可能性がある。例として、パッチドの機能喪失突然変異は、ゴーリン症候群（基底細胞母斑症候群（ＢＣＮＳ）としても公知である、皮膚及び脳の癌の高いリスクを有する先天的症候群）に認められ、Ｓｍｏ及びＧｌｉの機能獲得突然変異は、基底細胞癌及び神経膠芽腫に関連する。基底細胞癌（ＢＣＣ）は、皮膚癌の最も一般的な形であり、毎年９００００人を超えるアメリカ人を罹患させている。

Ｈｈの構成的活性化は、ＢＣＣ、髄芽腫（最も一般的な小児脳腫瘍）、横紋筋肉腫、膵臓癌、小細胞肺癌、前立腺癌及び乳癌における腫瘍形成を促進することが見いだされた。腫瘍形成における役割のほかに、Ｈｈシグナル伝達は、前立腺癌の転移にも関連付けられている。Ｈｈシグナル伝達は、その他の多くの種類の腫瘍型に関与している可能性があり、そのような関連は、発見され続けると予想される。これは、全世界の多くの癌センターにおける活発な研究の分野である。

これらの癌細胞の増殖は、Ｈｈ経路の活性化を必要とするものであり、Ｈｈシグナル伝達経路の遮断により、癌細胞の増殖がしばしば抑制される。実際、Ｈｈ拮抗薬シクロパミン及び抗Ｇｌｉ１ｓｉＲＮＡは、これらの癌細胞の増殖を効果的に阻害することができ、異種移植片モデルにおける腫瘍の大きさを減少させることができることから、Ｈｈ拮抗薬は、単独又は他剤との併用で、これらの癌の治療のための新たな化学療法計画を提供しうることが示唆される。Ｈｈ拮抗薬シクロパミンは、動物モデルにおける前立腺癌の転移を抑制することが示された。

Ｓｍｏの構成的活性化が癌（例えば、ＢＣＣ）をもたらし、Ｓｍｏが、Ｐｔｃｈによる抑制からのその解放後に発癌性でありうるという証拠は、Ｓｍｏ拮抗薬がそのような障害の治療における治療薬として有用であることを示唆するものである（Stoneら（１９９６年）、Nature、３８４巻、１２９頁）。したがって、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性を調節する、例えば、Ｓｍｏ活性を調節する分子は、治療上有用である。

本発明は、一般的に、腫瘍形成、癌、新生物及び非悪性過剰増殖性障害を含むが、これらに限定されないヘッジホッグ経路に関連する病状（下で定義し、本明細書で「ヘッジホッグ関連障害（単数又は複数）」と呼ぶ）の診断及び治療に関し、より具体的には、ヘッジホッグ及びＳｍｏシグナル伝達経路を阻害することが公知である剤（例えば、スムースンド阻害薬）を（ｉ）コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、（ｉｉ）Ｇｌｉ阻害薬及び／又は（ｉｉｉ）ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬と併用して腫瘍形成、腫瘍成長及び腫瘍生存を抑制する方法に関する。スムースンド阻害薬は、本明細書で定義するクラスであり、シクロパミン、ジェルビン、式Ｉの化合物（例えば、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の化合物）、式ＩＩの化合物、式ＩＩＩの化合物、本明細書で個別に列挙する抗スムースンド化合物のいずれか、抗Ｓｍｏ抗体、抗Ｓｍｏ阻害核酸（例えば、抗ＳｍｏｓｉＲＮＡｓ）並びに当技術分野における及び／又は参照により本明細書に組み込まれている他の公知の抗スムースンド物質を含むが、これらに限定されない。ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬も、本明細書で定義するクラスであり、これらは、式Ａの化合物並びに脂質キナーゼ阻害薬及び抗ＰＩ３Ｋ阻害ヌクレオチド（例えば、ＲＮＡｉ）を含むが、これらに限定されない。

本発明の方法及び化合物は、例えば、Ｐｔｃｈ機能喪失（loss-of-function）、ヘッジホッグ機能獲得（gain-of-function）、スムースンド機能獲得又はＧｌｉ機能獲得などの表現型に起因する異常な成長状態を抑制することにより、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化を抑制することに関し、正常なＰｔｃｈ活性を刺激し（agonize）、正常なヘッジホッグ活性を拮抗し（antagonize）、又はスムースンド活性を拮抗する（例えば、異常な成長状態を逆転又は制御する）のに十分な量のヘッジホッグ及びＳｍｏシグナル伝達経路を阻害することが公知である剤、例えば、スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成阻害薬（例えば、スタチン）；Ｇｌｉ阻害薬；及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを細胞に接触させることを含む。

本発明の一態様は、Ｓｍｏ依存性経路の活性化を抑制するための化合物を用いる方法を含む（例えば、Ｓｍｏがヘッジホッグリガンドの存在により活性化される場合）。本発明の他の態様は、ヘッジホッグ（リガンド）非依存性経路の活性化を抑制するための化合物を用いる方法を含む。特定の実施形態において、この方法は、その活性化がヘッジホッグリガンドの存在下又は不存在下であるかどうかにかかわりなく、ヘッジホッグ機能獲得、Ｐｔｃｈ機能喪失又はスムースンド機能獲得突然変異に起因するようなヘッジホッグ経路の望ましくない活性化の表現型効果を相殺するのに用いることができる。例えば、本発明の方法は、ヘッジホッグリガンドの存在下又は不存在下でスムースンド依存性又は非依存性（すなわち、活性化がスムースンドの下流で起こる場合）ヘッジホッグ経路シグナル伝達を拮抗するのに十分な量のコレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬と組み合わせたスムースンド阻害薬などのＳｍｏ拮抗薬と細胞を（ｉｎｖｉｔｒｏ又はｉｎｖｉｖｏで）接触させることを含みうる。

本発明の特定の実施形態は、ｉｎｖｉｔｒｏ又はｉｎｖｉｖｏで細胞中のＳｍｏタンパク質の細胞内の合成、発現、産生、安定化、リン酸化、再配置及び／又は活性を阻害する方法であって、スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを前記細胞と接触させること又は前記細胞に導入することを含む方法を提供する。スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せは、同時又は逐次的に投与することができる。例えば、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬は、抵抗性腫瘍がＳｍｏ阻害薬の存在下で発生した後の事例で投与することができる。

特定の実施形態において、ヘッジホッグシグナル伝達経路におけるＳｍｏの下流のタンパク質（例えば、Ｇｌｉ）もｉｎｖｉｔｒｏ又はｉｎｖｉｖｏで細胞中で阻害される。例えば、Ｇｌｉタンパク質（単数又は複数）の細胞内の合成、発現、産生、安定化、リン酸化、再配置及び／又は活性は、スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを前記細胞と接触させること又は前記細胞に導入することを含む方法により、上述のスムースンドの阻害に加えて阻害することができる。特定の実施形態において、ヘッジホッグ経路は、該経路がＳｍｏの下流で活性化される（例えば、Ｇｌｉで）ため、スムースンド拮抗薬に以前に曝露されたにもかかわらず、細胞中で依然として活性である可能性がある（例えば、抵抗性腫瘍の場合と同様に）。他の実施形態において、細胞は、スムースンド拮抗薬に以前に曝露されなかった。

本発明の方法は、例えば、幹細胞からの組織の形成においてｉｎｖｉｔｒｏ及び／又はｉｎｖｉｖｏで細胞の増殖及び／又は分化を調節するのに、或いは過剰増殖性細胞の成長を妨げるのに用いることができる。他の特定の実施形態において、スムースンド阻害薬とコレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを細胞と接触させること又は細胞に導入することは、細胞増殖の抑制、腫瘍細胞の成長及び／又は生存の抑制、及び／又は腫瘍形成の抑制をもたらす。したがって、他の特定の実施形態は、腫瘍細胞における本発明の組合せ法を用いることによりＨｈ経路を阻害し、かつ／又はそれを拮抗する方法を提供する。特定の実施形態において、前記細胞増殖、腫瘍細胞の成長及び／若しくは生存、並びに／又は腫瘍形成は、抵抗性腫瘍に関連する。他の実施形態において、前記細胞増殖、腫瘍細胞の成長及び／若しくは生存、並びに／又は腫瘍形成は、感受性腫瘍に関連する。

本発明の組合せは、特定の実施形態において感受性腫瘍に罹患している患者に投与することができる。前記組合せは、特定の他の実施形態において抵抗性腫瘍に罹患している患者に投与することができる。

本発明の組合せを用いて治療することができる、本明細書で述べる腫瘍細胞は、アポトーシス抵抗性であってよく、従来の抗癌療法に抵抗性であってよく、かつ／又は本明細書で定義した抵抗性腫瘍であってよい。抵抗性腫瘍は、例えば、Ｓｍｏ阻害薬の存在にもかかわらずヘッジホッグ経路の再活性化につながる遺伝的変化によって生ずることがある。例は、阻害薬の結合を妨げるＳｍｏ突然変異、及び／又はヘッジホッグ経路の再活性化につながるＳｍｏの下流の遺伝子（例えば、ｓｕｆｕ、Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２）における突然変異である。抵抗性腫瘍及び従来の抗癌療法に屈しない腫瘍のこれらの例において、本発明の組合せは、腫瘍細胞に老化、アポトーシス又はネクローシスを受けさせることができる。前記組合せの投与は、腫瘍細胞死及び転位の予防をもたらしうる。

本発明の方法は、薬学的に許容される賦形剤若しくは担体を含む医薬品として製剤化されたスムースンド阻害薬と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを用いることができる。同様に、前記コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬は、薬学的に許容される賦形剤若しくは担体も含む医薬品として製剤化することができる。前記組合せは、癌及び／又は腫瘍（髄芽腫、基底細胞癌等）並びに非悪性過剰増殖性障害などの望ましくない細胞増殖に関連する状態を治療するために患者に投与することができる。前記組合せは、特定の実施形態において、感受性腫瘍に罹患した患者に投与することができる。前記組合せは、特定の他の実施形態において、抵抗性腫瘍に罹患した患者に投与することができる。

本発明の他の態様は、スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを哺乳動物に投与することを含む、Ｓｍｏ遺伝子若しくは遺伝子産物（例えば、Ｓｍｏタンパク質）の存在及び／又は発現によって特徴付けられる哺乳動物における細胞の衰弱、乱れ及び／又は機能障害；過形成性、過剰増殖性及び／若しくは癌性疾患状態；並びに／又は腫瘍細胞の転移を診断、予防及び／又は治療する方法を提供する。

下でより詳細に述べるように、化合物１及び２の抗腫瘍活性並びに２５日間の処理後のＰｔｃｈ＋／−ｐ５３−／−髄芽腫同種移植片モデルにおける化合物１及び２に対する抵抗性を示す図である。下でより詳細に述べるように、化合物１及び２の抗腫瘍活性並びに連続処理後のＰｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−髄芽腫同種移植片モデルにおける化合物１及び２に対する抵抗性を示す図である。下でより詳細に述べるように、化合物１及び２の抗腫瘍活性並びに連続処理後のＰｔｃｈ＋／−髄芽腫同種移植片モデルにおける化合物１及び２に対する抵抗性を示す図である。下でより詳細に述べるように、３つの抵抗性腫瘍のうちの２つにおいて検出されたＧｌｉ２の増幅を示す図である。ｅｘ−ｖｉｖｏ髄芽腫アッセイの結果を示すウエスタンブロットである。その詳細は下で述べる。ウエスタンブロットに認められるように、ＰＩ３Ｋ阻害化合物である化合物Ａは、感受性及び抵抗性細胞両方におけるＡｋｔ及びＳ６リン酸化を阻害する。Ｐｔｃ＋／−Ｈｉｃ＋／−同種移植片モデルにおける化合物Ａ及び化合物１の組合せの効果を示し、該組合せが前記髄芽腫モデルにおける耐性を予防又は遅延させることを示す図である。Ｐｔｃ＋／−Ｈｉｃ＋／−同種移植片モデルにおける化合物Ａ及び化合物１の組合せの効果を示し、該組合せが前記髄芽腫モデルにおける耐性を予防又は遅延させることを示す図である。Ｐｔｃ＋／−Ｈｉｃ＋／−同種移植片モデルにおける化合物Ｂ及び化合物１の組合せの効果を示し、該組合せが前記髄芽腫モデルにおける耐性を予防又は遅延させることを示す図である。Ｐｔｃ＋／−Ｈｉｃ＋／−同種移植片モデルにおける化合物Ｂ及び化合物１の組合せの効果を示し、該組合せが前記髄芽腫モデルにおける耐性を予防又は遅延させることを示す図である。

発明の詳細な説明
スムースンド阻害薬は、以下の式（Ｉ）の化合物、例えば、ビアリールカルボキサミド化合物

［式中、
Ｒ２−Ｃ、Ｒ３−Ｃ、Ｒ４−Ｃ又はＲ５−Ｃは、Ｎにより置き換えられていてよく、
ｎは、１、２又は３であり、
Ｒ１は、炭素環式アリール又はヘテロアリールであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、独立に水素、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、フルオロ、クロロ、ブロモ、アミノ、置換アミノ、トリフルオロメチル、アシルオキシ、アルキルカルボニル、トリフルオロメトキシ又はシアノであり、
Ｒ６は、水素、場合によって置換されているアルキル、炭素環式又は複素環式アリール−低級アルキルであり、
Ｒ７は、水素、場合によって置換されているアルキル、炭素環式アリール、ヘテロアリール、炭素環式アリール−低級アルキル、ヘテロアリール−低級アルキル、又は

であり、
式中、
Ｒａは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルであり、
Ｒｂは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシクリル（heterocyclyl）であり、
Ｒｃ及びＲｄは、独立に水素、置換アルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルであるか、或いはＲｃ及びＲｄは、低級アルキレン又はＯ、Ｓ、Ｎ−（Ｈ、アルキル、アリールアルキル）により中断された低級アルキレンをともに表し、
Ｒｅは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシクリル、アミノ又は置換アミノである。］
及びその薬学的に許容される塩及びその鏡像異性体を含みうる。

本発明の好ましい実施形態は、以下の式（Ｉａ）

［式中、Ｒ２−Ｃ、Ｒ３−Ｃ、Ｒ４−Ｃ又はＲ５−Ｃは、Ｎにより置き換えられていてよく、
Ｒ１’は、水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、低級アルキル、シアノ、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ジメチルアミノであり、
Ｒ２〜Ｒ７は、式Ｉについて定義した意味を有する］の化合物
及びその薬学的に許容される塩及びその鏡像異性体に関する。

本発明の他の好ましい実施形態は、以下の式（Ｉｂ）の化合物

［式中、
Ｒ１’は、トリフルオロメチル、クロロ、フルオロであり、
Ｒ２及びＲ３は、独立に水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、トリフルオロメチル、クロロ又はフルオロであり、
Ｒ４及びＲ５は、水素であり、
Ｒ６は、水素又はＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ７は、場合によって置換されているアルキル、炭素環式アリール、ヘテロアリール、炭素環式アリール−低級アルキル、ヘテロアリール−低級アルキル、又は

であり、
式中、
Ｒａは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルであり、
Ｒｂは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルであり、
Ｒｃ及びＲｄは、独立に水素、置換アルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルであるか、或いはＲｃ及びＲｄは、低級アルキレン又はＯ、Ｓ、Ｎ−（Ｈ、アルキル、アリールアルキル）により中断された低級アルキレンをともに表し、
Ｒｅは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシクリル、アミノ又は置換アミノである。］
及びその薬学的に許容される塩及びその鏡像異性体に関する。

本発明の他の好ましい実施形態は、式（Ｉｂ）
［式中、
Ｒ１’は、トリフルオロメチル、クロロ、フルオロであり、
Ｒ２及びＲ３は、独立に水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、トリフルオロメチル、クロロ又はフルオロであり、
Ｒ４及びＲ５は、水素であり、
Ｒ６は、水素であり、
Ｒ７は、場合によって置換されているアルキル、炭素環式アリール、ヘテロアリール、炭素環式アリール−低級アルキル又はヘテロアリール−低級アルキルである。］の化合物
及びその薬学的に許容される塩及びその鏡像異性体に関する。

本発明の他の特に好ましい実施形態は、以下の式（Ｉｃ）

［式中、
Ｒ１’は、トリフルオロメチル又はクロロであり、
Ｒ２は、水素又はメチルであり、
ｍは、０又は１であり、
Ｒｆは、炭素環式又は複素環式アリールである。］の化合物
及びその薬学的に許容される塩に関する。

本発明の組合せは、本明細書で述べる置換基の性質によって、１つ又は複数の不斉炭素原子を有し、したがって、ラセミ体並びにそれらのＲ及びＳ鏡像異性体として存在する。好ましいものは、Ｓ立体配置（ＮＲ６Ｒ７置換基を有する炭素において）に一般的に帰属される、より活性の高い鏡像異性体である。

スムースンド阻害薬化合物は、以下の式ＩＩ

［式中、
Ｙ_１及びＹ_２は、Ｎ及びＣＲ_１０から独立に選択され、Ｒ_１０は、水素、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ_１−６アルコキシ及び−ＯＸＮＲ_１０ａＲ_１０ｂから選択され、Ｒ_１０ａ及びＲ_１０ｂは、水素及びＣ_１−６アルキルから独立に選択され、
Ｒ_１は、シアノ、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_６−１０アリール、ジメチル−アミノ、Ｃ_１−６アルキル−スルファニル及び最大２つのＣ_１−６アルキル基（alkyl radicals）で場合によって置換されたＣ_３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、
Ｒ_２及びＲ_５は、水素、シアノ、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ_１−６アルコキシ及びジメチルアミノから独立に選択され、
Ｒ_３及びＲ_４は、水素、ハロ、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ及びハロ置換Ｃ_１−６アルコキシから独立に選択されるか、又はＲ_１及びＲ_２若しくはＲ_１及びＲ_５は、それらの両方が結合しているフェニルと一緒になってＣ_５−１０ヘテロアリールを形成しており、
Ｒ_６及びＲ_７は、水素、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ及びハロ置換Ｃ_１−６アルコキシから独立に選択され、ただし、Ｒ_６及びＲ_７は、両方が水素ではなく、
Ｒ_８は、水素、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ及びハロ置換Ｃ_１−６アルコキシから選択され、
Ｒ_９は、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１１、−ＯＲ_１１、−ＮＲ_１２ａＲ_１２ｂ及び−Ｒ_１１から選択され、Ｒ_１１は、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから選択され、Ｒ_１２ａ及びＲ_１２ｂは、Ｃ_１−６アルキル及びヒドロキシ置換Ｃ_１−６アルキルから独立に選択され、
Ｒ_９の前記アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルは、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_６−１０アリール−Ｃ_０−４アルキル、Ｃ_５−１０ヘテロアリール−Ｃ_０−４アルキル、Ｃ_３−１２シクロアルキル及びＣ_３−８ヘテロシクロアルキルから独立に選択される１〜３つの基で場合によって置換することができ、
Ｒ_９の前記アリール−アルキル置換基は、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ_１−６アルコキシ及びメチルピペラジニルから独立に選択される１〜３つの基で場合によって置換されている。］の化合物；並びにそれらのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護誘導体、個々の異性体及び異性体の混合物；並びにそのような化合物の薬学的に許容される塩及び溶媒和物（例えば、水和物）も含みうる。

式ＩＩの好ましい化合物は、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（モルホリン−４−スルホニル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−メトキシ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−メトキシ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−シクロヘキシル−フェニル）−アミド、４’−メトキシ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２−メチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−ジメチルアミノ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−シクロヘキシル−フェニル）−アミド、４’−ジメチルアミノ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、６−クロロ−４’−ジメチルアミノ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−［１，４］オキサゼパン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−クロロ−４’−ジメチルアミノ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−モルホリン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−クロロ−４’−ジメチルアミノ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−クロロ−４’−メトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２−メチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、６−クロロ−４’−メトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−［１，４］オキサゼパン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−クロロ−４’−メトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−クロロ−４’−メトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−モルホリン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−メトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−モルホリン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−メトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−［１，４］オキサゼパン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−メトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２−メチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−ジメチルアミノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２−メチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−ジメチルアミノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−［１，４］オキサゼパン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−ジメチルアミノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−モルホリン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−メトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−エトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−４’−メチルスルファニル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−ジメチルアミノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−［１，１’；４’，１’’］テルフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、３’−クロロ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、２’，４’−ジクロロ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、２’−クロロ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、３’−クロロ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、３’，４’−ジクロロ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、３’−クロロ−６−メチル−４’−トリフルオロメチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６，４’−ジメチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−エチル−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−ｔｅｒｔ−ブチル−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−４’−プロピル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−イソブチル−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−イソプロピル−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６，２’，６’−トリメチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６，２’，３’−トリメチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−４’−トリフルオロメチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−３’−トリフルオロメチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−３’、５’−ビストリフルオロメチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、３’−イソプロポキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、３’−エトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、２’，６’−ジメトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−４’−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−３’−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−メトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、３’−メトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、３’−ジメチルアミノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−フルオロ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、３’−フルオロ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、２’−フルオロ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４−メチル−Ｎ−（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−３−キノキサリン−６−イル−ベンズアミド、６−メチル−４’−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、２’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、３’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−［１，４］オキサゼパン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２−メチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−［１，２’］ビピリジニル−５’−イル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−モルホリン−４−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（３−フルオロ−４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（３−クロロ−４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（３−ブロモ−４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（３−メチル−４−モルホリン−４−イル−フェニル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−モルホリン−４−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４−シクロヘキシル−フェニル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸ビフェニル−４−イルアミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（４’−メトキシ−ビフェニル−４−イル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（ピペリジン−１−スルホニル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（ピロリジン−１−スルホニル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−メトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−シアノ−２−メトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−シアノ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、３’−フルオロ−４’−メトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−イソプロポキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−ブトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、３’−クロロ−４’−メトキシ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−メトキシ−６，３’−ジメチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−アゼパン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−シアノ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（ピペリジン−１−スルホニル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−フルオロ−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（ピペリジン−１−スルホニル）−フェニル］−アミド、６−ブロモ−４’−シアノ−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（ピペリジン−１−スルホニル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ベンジル−［１，４］ジアゼパン−

１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−チオフェン−３−イルメチル−［１，４］ジアゼパン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−メトキシ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、２−メチル−４’−トリフルオロメチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、２−メチル−４’−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−２−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２−メチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−２−フルオロ−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（ピペリジン−１−スルホニル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−トリフルオロメチル−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（ピペリジン−１−スルホニル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ピリジン−４−イルメチル−［１，４］ジアゼパン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ピリジン−３−イルメチル−［１，４］ジアゼパン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２，６−ジメトキシ−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２−エトキシ−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸（６−｛４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ベンジル］−［１，４］ジアゼパン−１−イル｝−ピリジン−３−イル）−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（４−メトキシ−２，３−ジメチル−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イルメチル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ピリジン−２−イルメチル−［１，４］ジアゼパン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ベンゾ［１，３］ジオキソール−４−イルメチル−［１，４］ジアゼパン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２−トリフルオロメトキシ−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２−ジメチルアミノ−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２，３−ジフルオロ−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２−クロロ−４−フルオロ−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２，６−ジフルオロ−ベンジル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、２−クロロ−４’−シアノ−ビフェニル−３−カルボン酸［４−（ピペリジン−１−スルホニル）−フェニル］−アミド、４’−シアノ−６−トリフルオロメチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、２−クロロ−４’−シアノ−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−エチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（３−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（２−トリフルオロメトキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（３−クロロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（４−イソブチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（７−メトキシ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イルメチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ピリジン−３−イルメチル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（４−ジフルオロメトキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（４−シアノ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−キノリン−５−イルメチル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ピリジン−４−イルメチル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−ピリジン−２−イルメチル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（４−イミダゾール−１−イル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸｛６−［４−（３−シアノ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−３−イル｝−アミド、４’−シアノ−６−メチル−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（４−イソキノリン−５−イルメチル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、（Ｒ）−２−メチル−Ｎ−（６−（２−メチルモルホリノ）ピリジン−３−イル）−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、４’−シアノ−２−メチル−Ｎ−（６−スルホニルモルホリノピリジン−３−イル）ビフェニル−３−カルボキサミド、（Ｓ）−４’−シアノ−２−メチル−Ｎ−（６−（２−メチルモルホリノ）ピリジン−３−イル）ビフェニル−３−カルボキサミド、（Ｒ）−６−クロロ−Ｎ−（６−（２−メチルモルホリノ）ピリジン−３−イル）−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、４’−シアノ−２−メチル−Ｎ−（６−スルフィニルモルホリノピリジン−３−イル）ビフェニル−３−カルボキサミド、４’−シアノ−Ｎ−（６−（ジイソブチルアミノ）ピリジン−３−イル）−２−メチルビフェニル−３−カルボキサミド、４’−シアノ−Ｎ−（２−（（２Ｓ，６Ｒ）−２，６−ジメチルモルホリノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチルビフェニル−３−カルボキサミド、Ｎ−（２−（（２Ｓ，６Ｒ）−２，６−ジメチルモルホリノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチル−４’−（トリフルオロメチル）ビフェニル−３−カルボキサミド、Ｎ−（２−（（２Ｓ，６Ｒ）−２，６−ジメチルモルホリノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチル−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、Ｎ−（２−（ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ）ピリミジン−５−イル）−２−メチル−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、２−メチル−Ｎ−（６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルオキシ）ピリジン−３−イル）−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、Ｎ−（５−クロロ−６−（（２Ｓ，６Ｒ）−２，６−ジメチルモルホリノ）ピリジン−３−イル）−２−メチル−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、Ｎ−（６−（（２Ｒ，６Ｓ）−２，６−ジメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）ピリジン−３−イル）−２−メチル−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、
Ｎ−（６−（４−エチルピペラジン−１−カルボニル）ピリジン−３−イル）−２−メチル−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、２−メチル−Ｎ−（６−（２−オキソピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、２−メチル−Ｎ−（６−（１−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−４−イル）ピリジン−３−イル）−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、２−メチル−Ｎ−（６−（２−オキソ−４−（ピリジン−４−イルメチル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、２−メチル−Ｎ−（６−（１−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−３−イル）ピリジン−３−イル）−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド、Ｎ−（６−（１−エチルピペリジン−３−イル）ピリジン−３−イル）−２−メチル−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド及びＮ−（６−（（２Ｒ，６Ｓ）−２，６−ジメチルモルホリノ）ピリジン−３−イル）−２−メチル−４’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニル−３−カルボキサミド及び２−メチル−４’−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（ｃｉｓ−２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミド、以下の式

を有する（本文書において化合物１としても識別されている）から選択される。

式ＩＩの上の化合物は、国際公開第２００７／１３１２０１号にさらに記載されている。

スムースンド阻害薬化合物は、以下の式ＩＩＩ

［式中、
Ｒ１は、Ｃ_６−１４アリール基であるか、或いは非置換であるか、又は置換されていてよい５〜１４員ヘテロアリール基であり、
Ｒ２及びＲ３は、独立にＣ_１−８アルキル、Ｃ_１−８アルキルＯＨであるか、又はＲ２及びＲ３は、結合してＣ_３−１４シクロアルキル基を形成しており、
Ｌは、結合、Ｃ_１−８アルキレン、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９−、−Ｃ_１−８アルキルＯＨ−、−Ｃ_１−８ハロアルキル−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、
Ｘ及びＷは、独立にＮ又はＣＲ５であり、Ｘ又はＷの少なくとも１つがＮであり、
Ｒ７は、Ｃ_６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基又は３〜１４員シクロヘテロアルキル基であり、
Ｒ４は、置換されているか、又は非置換であってよい、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_２−８アルケニル、Ｃ_３−１４シクロアルキル、Ｃ_６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ_１−８アルコキシ、ハロ、ＮＲ６Ｒ８、Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ８、Ｃ_１−８ハロアルキル、ホルミル、カルバルコキシ、Ｃ_１−８アルキルＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＳＯ_２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ_１−８アルキルＲ６、ＮＲ６Ｒ８、ＳＯ_２ＮＲ６Ｒ８、ＯＣＦ_３、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ_２ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ_２ＮＨＳＯ_２Ｒ６、ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、ＯＣ（Ｏ）Ｒ６又はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６であり、
Ｚは、Ｃ_１−８アルキル、ＣＮ、ＯＨ又はハロゲンであり、
ｍ及びｐは、独立に０〜３であり、
Ｙは、結合、Ｃ_１−８アルキレン、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ（ＯＨ）−又は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０であり、
Ｒ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、低級アルキル、ＯＨ、ＯＣＨ_３又はＯＣＦ_３であり、
Ｒ１は、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_１−８ハロアルキル、Ｃ_１−８アルコキシ、ハロ、ＮＨ_２、ＣＮ、ＯＣＦ_３、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ８、Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＳＯ_２Ｒ６、ＳＯ_２ＮＲ６Ｒ８の１つ又は複数のものにより置換されていてよく、
Ｒ９及びＲ１０は、独立にＣ_１−８アルキル又はＨであり、
Ｒ６及びＲ８は、独立にＨ、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_２−８アルケニル、Ｃ_３−１４シクロアルキル、Ｃ_６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ_１−８ハロアルキル、Ｃ_１−８アルキルＯＨ、Ｃ_１−８アルコキシであるか、或いは１個の原子上の２つのＲ６がヘテロ原子を含む環を形成していてよく、並びに
Ｒ４、Ｒ６及びＲ８は、非置換であるか、或いはＣ_１−８アルキル、Ｃ_３−１４シクロアルキル、Ｃ_６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ_１−８アルキルＯＨ、ＯＨ、オキソ、Ｃ_１−８ハロアルキル、カルボキシＣ_１−８アルキル又はＳＯ_２Ｃ_１−８アルキル、ハロ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＦ_３、−ＯＨ、−ＮＨ_２の１つ又は複数のものにより置換されていてよい。］の化合物も含みうる。

他の実施形態において、本発明は、Ｒ７が

である式ＩＩＩの化合物を含む。

他の実施形態において、本発明は、Ｒ１が

である、請求項１に記載の式ＩＩＩの化合物を含む。

他の実施形態において、本発明は、Ｒ７が

であり、
Ｒ１が

である式ＩＩＩの化合物を含む。

他の実施形態において、本発明は、Ｒ４がＣ（Ｏ）ＯＣ_１−８アルキル、ＣＦ_３、Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ８、Ｃ_１−８ハロアルキル、Ｃ_１−８アルキルＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＳＯ_２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ_１−８アルキルＲ６、Ｃ（ＣＨ_３）（ＣＨ_３）（ＯＨ）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（ＣＨ_２）ＣＨ_３又はＣ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＯＨ）ＯＨであり、並びに
Ｒ６及びＲ８が独立にＨ、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_１−８アルケニル、Ｃ_３−１４シクロアルキル、Ｃ_６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘテロアルキル基である式ＩＩＩの化合物を含む。

他の実施形態において、本発明は、Ｒ４が、非置換であるか、又は置換されていてよい

である式ＩＩＩの化合物を含む。

他の実施形態において、本発明は、Ｒ２及びＲ３がＣ_１−８アルキルである式ＩＩＩの化合物を含む。

さらなる実施形態において、本発明は、Ｒ２及びＲ３がＣＨ_３である式ＩＩＩの化合物を含む。

他の実施形態において、本発明は、Ｌが−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ_２−、−ＣＦ_２−、−ＣＨＦ−、−ＣＯＨ−又は結合である式ＩＩＩの化合物を含む。他の実施形態において、本発明は、Ｌが−ＣＨ_２−である式ＩＩＩの化合物を含む。他の実施形態において、本発明は、両方のＸがＮであり、ＺがＣＨ_３である式ＩＩＩの化合物を含む。

他の実施形態において、本発明は、以下の式（ＩＩＩａ）

の化合物
及びその薬学的に許容される塩を含み、
Ｒ１１は、置換されているか、或いは非置換であってよい、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_２−８アルケニル、Ｃ_３−１４シクロアルキル、Ｃ_６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ_１−８アルコキシ、ハロ、ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１３、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ_１−８ハロアルキル、ホルミル、カルバルコキシ、Ｃ_１−８アルキルＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１３、ＳＯ_２Ｒ１３、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ_１−８アルキルＲ１３、ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯ_２ＮＲ１３Ｒ１４、ＯＣＦ_３、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１３、ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＨ_２ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ１３、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＨ_２ＮＨＳＯ_２Ｒ１３、ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ１３、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１３又はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１３であり、
Ｒ１２は、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_１−８ハロアルキル、Ｃ_１−８アルコキシ、ハロ、ＮＨ_２、ＣＮ、ＯＣＦ_３、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ（Ｏ）Ｒ１３、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１３、ＳＯ_２Ｒ１３、ＳＯ_２ＮＲ１３Ｒ１４であり、
Ｒ１３及びＲ１４は、独立にＨ、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_２−８アルケニル、Ｃ_３−１４シクロアルキル、Ｃ_６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ_１−８ハロアルキル、Ｃ_１−８アルキルＯＨ、Ｃ_１−８アルコキシであるか、或いは１個の原子上のＲ１３及びＲ１４は、ヘテロ原子を含む環を形成していてよく、並びに
Ｒ１１、Ｒ１３及びＲ１４は、非置換であるか、或いはＣ_１−８アルキル、Ｃ_３−１４シクロアルキル、Ｃ_６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ_１−８アルキルＯＨ、ＯＨ、オキソ、Ｃ_１−８ハロアルキル、カルボキシＣ_１−８アルキル又はＳＯ_２Ｃ_１−８アルキル、ハロ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＦ_３、−ＯＨ、−ＮＨ_２の１つ又は複数のものにより置換されていてよい。

スムースンド阻害薬は、内容が参照により本明細書に組み込まれているＰＣＴ公開ＷＯ２００３０１１２１９に記載されている化合物（例えば、化合物Ｎ−［４−クロロ−３−（５−ジメチルアミノ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−３，５−ジメトキシ−ベンズアミド（本明細書において化合物２と呼ぶ）を含みうる。スムースンド阻害薬は、内容が参照により本明細書に組み込まれているＰＣＴ公開ＷＯ２００３０１１２１９に記載されている化合物も含みうる。スムースンド阻害薬は、すべての内容が参照により本明細書に組み込まれているＰＣＴ公開ＷＯ２００６０２８９５８（例えば、化合物２−クロロ−Ｎ−（４−クロロ−３−（ピリジン−２−イル）フェニル）−４−（メチルスルホニル）ベンズアミド）、ＷＯ２００８１４２９１、ＷＯ０７１２０８２７及びＷＯ０６５０３５１に記載されている化合物も含みうる。

本発明の方法は、スムースンド阻害薬、例えば、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書に列挙した若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか、又はＮ−オキシド誘導体、個々の異性体及びそれらの異性体の混合物、又はそれらの薬学的に許容される塩を、１つ又は複数の適切な賦形剤との混合物として含む医薬組成物の使用を含む。

本発明の方法において用いるスムースンド阻害薬は、すべての内容が参照により本明細書に組み込まれているＰＣＴ特許公開ＷＯ０１／０５７６７及びＷＯ００／０５２０１並びにKsanderら（２００１年）、Journal of Medicinal Chemistry、４４巻、４６７７頁に記載されているように調製することができる。

式ＩＩ及びＩＩａの化合物は、対応国際出願番号ＰＣＴ／ＥＰ０９／０５９１３８を有する米国特許出願第１２／５０３，５６５号の内容にさらに記載されている。

式（ＩＩ）の好ましい化合物は、下の式の２−［（Ｒ）−４−（６−ベンジル−４，５−ジメチルピリダジン−３−イル）−２−メチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−［１，２’］ビピラジニル−５’−イル］−プロパン−２−オール（本文書で化合物３としても識別する）である。

２−［（Ｒ）−４−（６−ベンジル−４，５−ジメチルピリダジン−３−イル）−２−メチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−［１，２’］ビピラジニル−５’−イル］−プロパン−２−オールは、以下のスキーム１に従って調製することができる。

第１段階：４，５−ジメチル−１，４−ジクロロピリダジン（１０ｇ、５６．５ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３．３ｇ、２．８０ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（２００ｍＬ）の混合物を脱気し、次いで、ベンジル亜鉛ブロミド（１４７ｍＬ、ＴＨＦ中０．５Ｍ）を加える。反応溶液を６５℃に一夜加熱する。溶媒を除去する。水を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲル上クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：０％〜５０％）により精製して、３−ベンジル−６−クロロ−４，５−ジメチル−ピリダジン（９．５ｇ、６７％）を得る。

第２段階：３−クロロ−４，５−ジメチル−６−（（Ｒ）−３−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリダジン（４００ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ、１当量）をマイクロ波バイアル中のベンジル亜鉛ブロミド（１２．３ｍＬ、ＴＨＦ中０．５Ｍ、６．６４ｍｍｏｌ、４当量）の溶液及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１００ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、０．０５当量）に加える。バイアルを密閉し、マイクロ波で１００℃で（高吸収設定）４０分間照射する。反応混合物を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（５〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、３−ベンジル−４，５−ジメチル−６−（（Ｒ）−３−メチルピペラジン−１−イル）−ピリダジン（３２４ｍｇ、６６％）を得る。

第３段階：上の化合物（６．０ｇ、２０．２７ｍｍｏｌ）、５−クロロピラジン−２−カルボン酸メチルエステル（５．３ｇ、３０．３０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ_３Ｎ（６．２ｇ、６０．６０ｍｍｏｌ）及びジオキサン（１００ｍＬ）の混合物を加熱して一夜還流する。溶媒を除去する。飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液を加え、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲル上クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：５０％〜１００％）により精製して、（Ｒ）−４−（６−ベンジル−４，５−ジメチル−ピリダジン−３−イル）−２−メチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−［１，２’］ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル（６．６ｇ、７６％）を黄色固体として得る。

最終段階：ＴＨＦ（１２ｍＬ）中（Ｒ）−４−（６−ベンジル−４，５−ジメチル−ピリダジン−３−イル）−２−メチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−［１，２’］ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル（８４０ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃でメチルマグネシウムブロミド（５ｍＬ、１５ｍｍｏｌ、エーテル中３Ｍ）を加える。反応混合物を０℃で２時間撹拌し、次いで、ＤＣＭで希釈し、ＮＨ_４Ｃｌ及び水で洗浄する。合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、濃縮する。２２０ｎｍの波長での検出による水中アセトニトリル（１０％から９５％まで、３％１−プロパノールを含む）を用いた粗生成物のＨＰＬＣによる精製により、少量の対応するメチルケトンに隣接した所望の化合物３（４００ｍｇ、５０％）を得る。凍結乾燥機を用いて溶媒を除去して、生成物を白色粉末として得る。

本明細書でさらに定義する、ホスホイノシチド３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬化合物は、以下の式Ａ

の化合物
又はそれらの立体異性体、互変異性体（tautomer）若しくは薬学的に許容される塩を含みうる［式中、Ｗは、ＣＲｗ又はＮであり、Ｒｗは、からなる群から選択され、ＷはＣＲ_ｗ又はＮであり、Ｒ_ｗは、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ハロゲン、
（４）メチル、
（５）トリフルオロメチル、
（６）スルホンアミド、
からなる群から選択され、
Ｒ１は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）置換及び非置換アルキル、
（６）置換及び非置換アルケニル、
（７）置換及び非置換アルキニル、
（８）置換及び非置換アリール、
（９）置換及び非置換ヘテロアリール、
（１０）置換及び非置換ヘテロシクリル、
（１１）置換及び非置換シクロアルキル、
（１２）−ＣＯＲ１ａ、
（１３）−ＣＯ２Ｒ１ａ、
（１４）−ＣＯＮＲ１ａＲ１ｂ、
（１５）−ＮＲ１ａＲ１ｂ、
（１６）−ＮＲ１ａＣＯＲ１ｂ、
（１７）−ＮＲ１ａＳＯ２Ｒ１ｂ、
（１８）−ＯＣＯＲ１ａ、
（１９）−ＯＲ１ａ、
（２０）−ＳＲ１ａ、
（２１）−ＳＯＲ１ａ、
（２２）−ＳＯ２Ｒ１ａ及び
（２３）−ＳＯ２ＮＲ１ａＲ１ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ１ａ及びＲ１ｂは、
（ａ）水素、
（ｂ）置換又は非置換アルキル、
（ｃ）置換及び非置換アリール、
（ｄ）置換及び非置換ヘテロアリール、
（ｅ）置換及び非置換ヘテロシクリル及び
（ｆ）置換及び非置換シクロアルキル
からなる群から独立に選択され、
Ｒ２は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）ヒドロキシ、
（６）アミノ、
（７）置換又は非置換アルキル、
（８）−ＣＯＲ２ａ及び
（９）−ＮＲ２ａＣＯＲ２ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ２ａ及びＲ２ｂは、
（ａ）水素及び
（ｂ）置換又は非置換アルキル
からなる群から独立に選択され、
Ｒ３は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）置換又は非置換アルキル、
（６）置換又は非置換アルケニル、
（７）置換又は非置換アルキニル、
（８）置換又は非置換アリール、
（９）置換又は非置換ヘテロアリール、
（１０）置換又は非置換ヘテロシクリル、
（１１）置換又は非置換シクロアルキル、
（１２）−ＣＯＲ３ａ、
（１３）−ＮＲ３ａＲ３ｂ、
（１４）−ＮＲ３ａＣＯＲ３ｂ、
（１５）−ＮＲ３ａＳＯ２Ｒ３ｂ、
（１６）−ＯＲ３ａ、
（１７）−ＳＲ３ａ、
（１８）−ＳＯＲ３ａ、
（１９）−ＳＯ２Ｒ３ａ及び
（２０）−ＳＯ２ＮＲ３ａＲ３ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ３ａ及びＲ３ｂは、
（ａ）水素、
（ｂ）置換又は非置換アルキル、
（ｃ）置換及び非置換アリール、
（ｄ）置換及び非置換ヘテロアリール、
（ｅ）置換及び非置換ヘテロシクリル及び
（ｆ）置換及び非置換シクロアルキル
からなる群から独立に選択され、並びに
Ｒ４は、
（１）水素及び
（２）ハロゲン
からなる群から選択される。］。

式Ｉの化合物の定義に用いる基及び記号は、参照により本明細書に組み込まれているＰＣＴ公開ＷＯ０７／０８４７８６に記載されている意味を有する。ＷＯ０７／０８４７８６は、ＰＩ３キナーゼなどの脂質キナーゼの活性を調節することが見いだされたピリミジン誘導体を記載している。本発明に適する特定のピリミジン誘導体、それらの調製及びそれらを含む適切な医薬品は、ＷＯ０７／０８４７８６に記載されている。

本発明の好ましい化合物は、その合成がＷＯ０７／０８４７８６に実施例１０として記載されている、５−（２，６−ジモルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン（本明細書において化合物Ａと呼ぶ）である。

本明細書でさらに定義する、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬化合物は、以下の式Ｂ

の化合物
［式中、
Ｒ_１は、ナフチル又はフェニルであり、前記フェニルは、
ハロゲン、
非置換又はハロゲン、シアノ、イミダゾリル若しくはトリアゾリルにより置換された低級アルキル、
シクロアルキル、
低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコキシ及び低級アルコキシ低級アルキルアミノからなる群から独立に選択される１つ又は２つの置換基により置換されたアミノ、
非置換又は低級アルキル及び低級アルキルスルホニルからなる群から独立に選択される１つ又は２つの置換基により置換されたピペラジニル、
２−オキソ−ピロリジニル、
低級アルコキシ低級アルキル、
イミダゾリル、
ピラゾリル、
並びにトリアゾリル
からなる群から独立に選択される１つ又は２つの置換基により置換されており、
Ｒ_２は、Ｏ又はＳであり、
Ｒ_３は、低級アルキルであり、
Ｒ_４は、非置換ピリジル又はハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシにより置換されたピリジル或いは非置換ピペラジニル又は低級アルキルにより置換されたピペラジニル、
非置換又は低級アルコキシにより置換されたピリミジニル、
非置換又はハロゲンにより置換されたキノリニル、
キノキサリニル
或いはアルコキシにより置換されたフェニルであり、
Ｒ_５は、水素又はハロゲンであり、
ｎは、０又は１であり、
Ｒ_６は、オキシドであり、
ただし、ｎ＝１である場合、基Ｒ_６を有するＮ原子は、正電荷を有し、
Ｒ_７は、水素又はアミノである。］
又はその互変異性体、又はその薬学的に許容される塩もしくはその水和物若しくは溶媒和物も含みうる。

本明細書で言及する、化合物Ｂ及びＣは、式Ｂの化合物である。

本発明の方法及び組合せは、スムースンド阻害薬、例えば、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書に列挙した若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか、又はＮ−オキシド誘導体、個々の異性体及びそれらの異性体の混合物、又はそれらの薬学的に許容される塩を、１つ又は複数の適切な賦形剤との混合物として含む医薬組成物の使用を含む。

ＰＩ３Ｋ阻害薬は、内容が参照により本明細書に組み込まれているＰＣＴ公開ＷＯ２００６／１２２８０６に記載されている化合物（例えば、化合物２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ｂ）及び例えば、化合物８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（化合物Ｃ））を含みうる。ＰＩ３Ｋ阻害薬は、内容が参照により本明細書に組み込まれているＰＣＴ公開ＷＯ０７０８４７８６に記載されている化合物（例えば、化合物５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン、化合物Ａ）も含みうる。

ＰＩ３Ｋ阻害薬は、内容が参照により本明細書に組み込まれているＰＣＴ公開ＷＯ０７１２７７５、ＷＯ０７１２９００５、ＷＯ０７１２９０４８、ＷＯ０７１２９０５２、ＷＯ０７１２９１６１、ＷＯ０７１３２７１、ＷＯ０７１２２４１０、ＷＯ０７０８０３８２、ＷＯ０７０８７３９５、ＵＳ０７２３８７３０、ＵＳ０７２３８７６４６及びＷＯ０７０８２９５６に記載されている化合物も含みうる。

ＰＩ３Ｋ阻害薬は、ＸＬ−１４７及びＸＬ−７６５（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ（商標））並びにＳＦ−１１２６（ＳｅｍａｐｈｏｒｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（商標））、ＰＸ−８６６（Ｏｎｃｏｔｈｙｒｅｏｎ）及びＧＤＣ０９４１（Ｒｏｃｈｅ）などの阻害薬も含みうる。

定義
特に定義しない限り、本明細書で用いるすべての技術及び科学用語は、本発明が属する分野の技術者によって一般的に理解されているのと同じ意味を有する。次の参考文献は、本発明で用いる用語の多くの一般的定義を当業者に提供する：Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology、Smithら（編）、オックスフォード大学出版（改訂版、２０００年）；Dictionary of Microbiology and Molecular Biology、Singletonら（編）、John Wiley & Sons（3PrdP版、２００２年）；並びにA Dictionary of Biology（Oxford Paperback Reference）、Martin及びHine（編）、オックスフォード大学出版（４版、２０００年）。さらに、本発明の実施に際して読者の助けとなる以下の定義を示す。

例えば、ヘッジホッグ関連障害（例えば、癌）を「抑制し、かつ／又は逆転させる」とは、出願人らは、前記ヘッジホッグ関連障害（例えば、癌）を排除すること、或いは前記状態を治療前又は治療を受けない場合より重度でなくすることを意味する。

「治癒」は、本明細書で用いているように、治療により、患者におけるヘッジホッグ関連障害（例えば、癌）の、又はその持続的エピソードの寛解をもたらすことを意味する。

「予防」又は「防止」という用語は、ヘッジホッグ関連障害（例えば、癌）の発症又は再発を妨げることを意味する。

「診断」は、診断、予後診断、臨床試験における参加者を含む患者を選択すること、モニタリングすること、特徴付けること、及び特定の障害若しくは臨床事象のリスクのある又は特定の障害若しくは臨床事象を有する患者、又は特定の治療処置に反応する可能性が最も高い患者を特定すること、或いは特定の治療処置に対する患者の反応を評価又はモニタリングするためのものを意味する。

「対象」又は「患者」は、状態、障害又は疾患の治療を必要とする哺乳動物、特にヒトを意味する。

「進行の遅延」は、本明細書で用いているように、ヘッジホッグ関連障害（例えば、癌）の前段階又は初期にある患者へのスムースンド阻害薬（例えば、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書で列挙する若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか）の投与が、活性化合物の投与のない疾患の進展と比較して疾患がさらに進展することを予防する、又は疾患の進展を遅らせることを意味する。

「本発明の組合せ」という用語又は同様な語句は、次のものの１つ又は複数と組み合わせたＳｍｏシグナル伝達経路の拮抗薬若しくは阻害薬（例えば、スムースンド阻害薬）を意味する：（ｉ）コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）及び（ｉｉ）Ｇｌｉ阻害薬。

「ヘッジホッグ」という用語は、ソニック、インディアン、デザート及びティギーウインクルを含むヘッジホッグファミリーのメンバーのいずれかを一般的に指すために用いる。この用語は、タンパク質又は遺伝子を示すために用いることができる。この用語は、異なる動物種におけるホモログ／オルソログ配列を記述するためにも用いる。

「ヘッジホッグ（Ｈｈ）シグナル伝達経路」及び「ヘッジホッグ（Ｈｈ）シグナル伝達」という用語は、同義で用い、ヘッジホッグ、パッチド（Ｐｔｃｈ）、スムースンド（Ｓｍｏ）及びＧｌｉなどのシグナル伝達カスケードの種々のメンバーによって通常媒介される事象の連鎖を意味する。ヘッジホッグ経路は、ヘッジホッグタンパク質が存在しない場合でさえ、下流成分を活性化することによって活性化することができる。例えば、Ｓｍｏの過剰発現は、ヘッジホッグが存在しない場合に該経路を活性化する。

Ｈｈシグナル伝達経路のＨｈシグナル伝達構成要素又はメンバーは、Ｈｈシグナル伝達経路に関与する遺伝子産物を意味する。Ｈｈシグナル伝達構成要素は、細胞／組織におけるＨｈシグナルの伝達にしばしば著しく又は実質的に影響を及ぼし、一般的に下流遺伝子発現レベルの程度の変化及び／又は表現型変化をもたらす。Ｈｈシグナル伝達構成要素は、それらの生物学的機能及び下流遺伝子活性化／発現の最終的アウトカムに対する影響によって、正及び負のレギュレータに分けることができる。正のレギュレータは、Ｈｈシグナルの伝達に正の作用を及ぼす、すなわち、Ｈｈが存在する場合に下流の生物学的事象を刺激するＨｈシグナル伝達構成要素である。例としては、ヘッジホッグ、Ｓｍｏ及びＧｌｉなどがある。負のレギュレータは、Ｈｈシグナルの伝達に負の作用を及ぼす、すなわち、Ｈｈが存在する場合に下流の生物学的事象を抑制するＨｈシグナル伝達構成要素である。例は、Ｐｔｃｈ及びＳｕＦｕを含む（が、これらに限定されない）。

「ヘッジホッグ機能獲得」は、Ｐｔｃ、ヘッジホッグ若しくはＳｍｏ遺伝子又はタンパク質の異常な修飾又は突然変異、或いは細胞をヘッジホッグタンパク質と接触させることに類似する表現型をもたらすそのような遺伝子の発現のレベルの低下（又は喪失）、例えば、ヘッジホッグ経路の異常な活性化を意味する。「ヘッジホッグ機能獲得」は、ヘッジホッグ経路天然リガンドの発現の増加及び／又はＳｍｏの発現の増加に起因するヘッジホッグ経路の異常な活性化にも適用することができる。機能獲得は、Ｇｌｉ遺伝子、例えば、Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２及びＧｌｉ３の発現のレベルを調節するＰｔｃｈ遺伝子産物の能力の喪失を含みうる。「ヘッジホッグ機能獲得」という用語は、本明細書において、ヘッジホッグ自体の修飾又は突然変異を含むが、これに限定されない、ヘッジホッグシグナル伝達経路におけるいずれかにおける変化に起因して発生するあらゆる類似の細胞表現型（例えば、過度の増殖を提示する）を指すのにも用いる。例えば、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化に起因する異常に高い増殖速度を有する腫瘍細胞は、ヘッジホッグが当細胞において突然変異していないとしても、「ヘッジホッグ機能獲得」表現型を有するだろう。

「パッチド機能喪失」は、Ｐｔｃｈ遺伝子又はタンパク質の異常な修飾、増幅又は突然変異、或いは細胞をヘッジホッグタンパク質と接触させることに類似する表現型をもたらす該遺伝子の発現のレベルの低下、例えば、ヘッジホッグ経路の異常な活性化を意味する。機能喪失は、Ｇｌｉ遺伝子、例えば、Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２及びＧｌｉ３の発現のレベルを調節するＰｔｃｈ遺伝子産物の能力の喪失を含みうる。

「Ｇｌｉ機能獲得」は、Ｇｌｉ遺伝子又はタンパク質の異常な修飾、増幅又は突然変異、或いは細胞をヘッジホッグタンパク質と接触させることに類似する表現型をもたらす該遺伝子の発現のレベルの増加、例えば、ヘッジホッグ経路の異常な活性化を意味する。

腫瘍の成長又は腫瘍細胞の成長との関連での「抑制すること」又は「抑制」という用語は、原発性又は二次性腫瘍の出現の遅延、原発性又は二次性腫瘍の発育の緩徐化、原発性又は二次性腫瘍の発生の減少、疾患の二次的影響の緩徐化又は重症度の低下、或いは腫瘍成長の停止及び腫瘍の退縮を意味する。「予防する」又は「予防」という用語は、原発性若しくは二次性腫瘍の発育又は疾患の二次的影響の完全な抑制を意味する。酵素活性の調節との関連では、阻害は、競合的、不競合的及び非競合的阻害を含む酵素活性の可逆的な抑制又は低下に関連する。これは、基本的ミカエリス−メンテン速度式により解析することができる、酵素の反応速度論に対する阻害剤の影響によって実験的に区別することができる。競合的阻害は、阻害剤が、活性部位における結合について通常の基質と競合するような形で遊離酵素と結合することができる場合に起こる。競合的阻害剤は、酵素と可逆的に反応して、酵素−基質複合体と類似の酵素−阻害剤複合体［ＥＩ］を形成する。

「スムースンド機能獲得」は、Ｓｍｏ遺伝子の異常な修飾又は突然変異、或いは細胞をヘッジホッグタンパク質と接触させることに類似する表現型をもたらす該遺伝子の発現のレベルの増加、例えば、ヘッジホッグ経路の異常な活性化を意味する。

「スムースンド阻害薬」（又は「スムースンド拮抗薬」又は同様な語句）は、本明細書で用いているように、スムースンドを阻害し、拮抗し、又は抑え、それにより、ヘッジホッグ経路シグナル伝達を阻害し、拮抗し、又は抑えることができる剤を記述する。スムースンド阻害薬は、シクロパミン、ジェルビン、式Ｉの化合物（例えば、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の化合物）、式ＩＩの化合物、式ＩＩＩの化合物、本明細書で個別に列挙した抗スムースンド化合物のいずれか、抗Ｓｍｏ抗体及び抗Ｓｍｏ阻害核酸（例えば、抗ＳｍｏｓｉＲＮＡｓ）を含むが、これらに限定されない。スムースンド阻害薬はまた、当技術分野における、及び／又は参照により本明細書に組み込まれている、他の公知の抗スムースンド剤を含む。

「ＰＩ３Ｋ阻害薬」は、本明細書で用いているように、ＰＩ３Ｋに関連する生物学的活性及び下流エフェクター、例えば、ＰＩ３Ｋ経路の活性化を阻害し、拮抗し、又は抑えることができる剤を記述する。本出願の目的のために、ＰＩ３Ｋ阻害薬は、ＰＤＫ１、Ａｋｔ及びｍＴＯＲ（ラパマイシンの哺乳類標的）などのＰＩ３Ｋの下流標的を阻害する剤も含みうる。

ＰＩ３Ｋ阻害薬は、式Ａ及びＢの一部として本明細書で列挙した化合物を含みうる。ＰＩ３Ｋ阻害薬は、脂質キナーゼ阻害薬及びｓｉＲＮＡｓなどのＰＩ３Ｋに対する阻害ヌクレオチドも含みうる。ＰＩ３Ｋ阻害薬は、内容が参照により本明細書に組み込まれている、ＰＣＴ公開ＷＯ２００６／１２２８０６に記載されている化合物（例えば、化合物２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル、化合物Ｂ；及び例えば、化合物８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン、化合物Ｃ）も含みうる。ＰＩ３Ｋ阻害薬は、内容が参照により本明細書に組み込まれている、ＰＣＴ公開ＷＯ０７０８４７８６に記載されている化合物（例えば、化合物５−（２，６−ジモルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン、化合物Ａ）も含みうる。

ＰＩ３Ｋ阻害薬は、内容が参照により本明細書に組み込まれている、ＰＣＴ公開ＷＯ０７１２７７５、ＷＯ０７１２９００５、ＷＯ０７１２９０４８、ＷＯ０７１２９０５２、ＷＯ０７１２９１６１、ＷＯ０７１３２７１、ＷＯ０７１２２４１０、ＷＯ０７０８０３８２、ＷＯ０７０８７３９５、ＵＳ０７２３８７３０、ＵＳ０７２３８７６４６及びＷＯ０７０８２９５６に記載されている化合物も含みうる。

「Ｇｌｉ阻害薬」は、本明細書で用いているように、Ｇｌｉ関連活性、例えば、遺伝子トランス活性化を阻害し、拮抗し、又は抑えることができる剤を記述する。Ｇｌｉ阻害薬は、スムースンドの下流の活性化に関連するヘッジホッグ関連活性（例えば、ヘッジホッグ関連障害をもたらす異常な活性）を阻害することができる剤を含む。Ｇｌｉ阻害薬の非限定的な例としては、ＧＡＮＴ６１（Ｇｌｉ−ＡＮＴ作動薬６１）、ＧＡＮＴ５８、ゼルムボン、ゼルムボンエポキシド、スタウロスポリノン、６−ヒドロキシスタウロスポリノン、アルシリアフラビンＣ、５，６−ジヒドロキシアルシリアフラビンＡ、及びフィサリンＦ及びＢなどがある。

本明細書において、「治療」という用語は、予防的治療又は防止的治療、並びに本発明の障害（例えば、ヘッジホッグ関連障害（例えば、癌）のリスクがある患者及び疾患患者の治療を含む治癒的又は疾患抑制治療を含みうる。この用語は、疾患の進行の遅延のための治療をさらに含む。

「治療」又は「治療すること」は、疾患（例えば、白血病）の症状、合併症又は生化学的兆候の発症を予防又は遅延させるための化合物又は剤の投与、症状を軽減させること或いは疾患、状態又は障害のさらなる進展を阻止若しくは抑制することを含む。治療は、予防的（疾患の発症を予防若しくは遅延させるため、又はその臨床若しくは無症候性症状の発現を予防するため）又は疾患の発現の後の症状の治療的抑制若しくは軽減でありうる。

「治療する」又は「治療」という用語は、腫瘍成長の停止、及び腫瘍の部分的若しくは完全な退縮も意味し、疾患（例えば、癌）の症状、合併症又は生化学的兆候の発症を予防又は遅延させるための化合物又は剤の投与、症状を軽減させること或いは疾患、状態又は障害のさらなる進展を阻止若しくは抑制することも意味する。

本明細書で用いているように、「小有機分子」は、３キロダルトン未満、好ましくは１．５キロダルトン未満の分子量を有する有機化合物（又は無機化合物（例えば、金属）と錯体を形成した有機化合物）である。

「薬学的に許容される」という語句は、ヒトに投与したときに、生理学的に耐えられ、アレルギー又は胃の不調（gastric upset）、めまいなどの同様な有害反応を一般的に引き起こさない分子実体及び組成物を意味する。好ましくは、本明細書で用いているように、「薬学的に許容される」という用語は、連邦若しくは州政府の規制当局により承認されたもの、又は動物、より明細にはヒト用の米国薬局方若しくは他の一般的に認められた薬局方に収載されているものを意味する。

「担体」という用語は、化合物が一緒に投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤又は媒体を意味する。そのような医薬担体は、水並びに落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油などの石油、動物、植物又は合成由来のものを含む油などの滅菌液体でありうる。水又は水溶液、生理食塩溶液並びに水性デキストロース及びグリセロール溶液を特に注射液用の担体として用いることが好ましい。適切な医薬担体は、E. W. Martinによる「Remington’s Pharmaceutical Sciences」に記載されている。

「治療上有効な量」という語句は、宿主の活動、機能及び反応の臨床的に重要な欠損を少なくとも約１５％、好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも９０％減少させる、またより好ましくは防止するのに十分な量を意味するように本明細書において用いる。或いは、治療上有効な量は、宿主における臨床的に重要な状態／症状の改善をもたらすのに十分なものである。

「剤」又は「試験薬剤」という用語は、あらゆる物質、分子、元素、化合物、実在物（entity）又はそれらの組合せを含む。これは、例えば、タンパク質、ポリペプチド、小有機分子、多糖、ポリヌクレオチドなどを含むが、これらに限定されない。これは、天然産物、合成化合物、又は化学化合物、又は２つ若しくはそれ以上の物質の組合せを含む。他に特に規定がない限り、「剤」、「物質」及び「化合物」は、同義で用いることができる。

「類似物」（analog）は、本明細書で用いているように、本発明の所望の活性及び治療効果（例えば、腫瘍の成長の抑制）を有する化合物、ヌクレオチド、タンパク質若しくはポリペプチド又は化合物と類似又は同じ活性又は機能（単数又は複数）を有するが、好ましい実施形態の配列若しくは構造と類似又は同じである配列若しくは構造を必ずしも含む必要がない小有機化合物、ヌクレオチド、タンパク質若しくはポリペプチドを意味する。

「アポトーシス」は、プログラムされた細胞死を意味し、膜の小胞形成、クロマチン凝集及び断片化、アポトーシス小体の形成及び陽性「タネル」染色パターンなどの特定の細胞特性によって特徴付けられる。アポトーシス時のゲノムＤＮＡの分解は、特有なヌクレオソームサイズのＤＮＡ断片の形成をもたらし、この分解は、ゲル電気泳動により分析するときに、診断用の（約）１８０ｂｐのはしごパターンを生じさせる。アポトーシス過程におけるその後の段階は、アポトーシス細胞を様々な色素（例えば、トリパンブルー及びヨウ化プロピジウム）に対して漏りやすくする、形質膜の分解である。

「誘導体」は、アミノ酸残基の置換、欠失若しくは付加の導入により改変された親タンパク質若しくはポリペプチドのアミノ酸配列を含む化合物、タンパク質若しくはポリペプチド、又はヌクレオチドの置換若しくは欠失、付加若しくは突然変異の導入により修飾された核酸若しくはヌクレオチドを意味する。誘導体核酸、ヌクレオチド、タンパク質又はポリペプチドは、親ポリペプチドと類似又は同一の機能を有する。

「阻害薬」又は「拮抗薬」は、Ｈｈ経路機能のｉｎｖｉｔｒｏ及びｉｎｖｉｖｏアッセイを用いて同定される阻害分子、例えば、Ｓｍｏ拮抗薬を意味する。特に、阻害薬及び拮抗薬は、Ｈｈ経路を介して起こるシグナル伝達を減少させる化合物又は剤を意味する。阻害薬は、この経路を介するシグナル伝達を減少させ、遮断し、又は妨げる化合物であってよい。

「ヘッジホッグ関連障害（単数又は複数）」は、本明細書で用いているように、ヘッジホッグ経路の崩壊又は異常に関連する障害並びにヘッジホッグ経路の活性化に関連する正常であるが、望ましくない成長状態に関連する障害を含む。「ヘッジホッグ関連障害（単数又は複数）」は、腫瘍形成、癌、新生物、悪性過剰増殖性障害及び非悪性過剰増殖性障害を含むが、これらに限定されない。ヘッジホッグ関連障害（単数又は複数）は、良性前立腺過形成、乾癬、滲出型黄斑変性、大理石骨症及び好ましくない毛成長も含む。

本明細書で用いているように、「癌」という用語は、固形哺乳類腫瘍並びに血液悪性腫瘍を含む。「固形哺乳類腫瘍」は、頭頸部、肺、中皮腫、縦隔、食道、胃、膵臓、肝胆道系、小腸、結腸、結腸直腸、直腸、肛門、腎臓、尿道、膀胱、前立腺、尿道、陰茎、精巣、婦人科器官、卵巣、乳房、内分泌系、皮膚、脳を含む中枢神経系の癌；軟組織及び骨の肉腫；並びに皮膚及び眼内起源の黒色腫を含む。「血液悪性腫瘍」という用語は、小児白血病並びにリンパ腫、ホジキン病、リンパ球及び皮膚起源のリンパ腫、急性及び慢性白血病、ＡＩＤＳに関連する形質細胞新生物及び癌を含む。さらに、原発性、転移性及び再発性癌などのあらゆる進行期の癌を治療することができる。多くの種類の癌に関する情報は、例えば、アメリカ癌学会から、又は例えば、Wilsonら（１９９１年）、Harrison’s Principles of Internal Medicine、１２版、McGraw-Hill, Inc.から見いだすことができる。ヒト及び家畜への使用が予期される。

本発明の方法による治療に特に適する癌は、神経膠腫、髄芽腫（例えば、小脳髄芽腫）、周皮腫、原始神経外胚葉性腫瘍（ＰＮＥＴＳ）、基底細胞癌（ＢＣＣ）、小細胞肺癌、大細胞肺癌、胃腸管の腫瘍、横紋筋肉腫、乳癌、軟組織肉腫、膵臓腫瘍、膀胱腫瘍及び前立腺腫瘍を含むが、これらに限定されない。

本明細書で用いているように、「感受性腫瘍」は、スムースンド阻害薬抗癌療法による治療に反応する、ヘッジホッグ経路活性化に起因する腫瘍（例えば、髄芽腫）を意味する。

本明細書で用いているように、「抵抗性腫瘍」は、Ｓｍｏ阻害薬の持続的存在下で、治療による収縮の後に再成長した、又は治療により一時的に除去された後に再出現した以前は感受性だった腫瘍（formerly sensitive tumors）（例えば、髄芽腫）を意味する。抵抗性腫瘍は、スムースンド阻害薬に対する感受性の低下又は無反応を示す。抵抗性腫瘍の功を奏する治療は、例えば、新規若しくは以前に試行された抗癌療法及び／又は化学療法薬に対する腫瘍細胞の感受性の増加を生じさせることができ、また、例えば、その後の腫瘍細胞死及び転移の予防をもたらすことができる。

本明細書で用いているように、「スタチン」は、コレステロールの合成に関与する鍵酵素を阻害し、ＬＤＬコレステロールの受容体結合を促進し、血清コレステロール及びＬＤＬコレステロールのレベルの低下及びＨＤＬコレステロールのレベルの増加をもたらす。これらは、ステロール合成経路阻害薬（ＳＳＰＩｓ）のサブセットとしばしば呼ばれており、コレステロールの生合成に関与する鍵酵素であるＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼを阻害することによって血清コレステロールのレベルを低下させる。スタチンは、プラバスタチン、シムバスタチン、ロバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロスバスタチン及びピタバスタチンなどである。

本明細書で用いているように、「悪性過剰増殖性障害（単数又は複数）」は、癌、ニューロン増殖性障害、骨髄増殖性疾患及び白血病を含むが、これらに限定されない。

本明細書で用いているように、「非悪性過剰増殖障害（単数又は複数）」は、血管平滑筋過形成、皮膚瘢痕化、肺線維症などの非悪性及び非腫瘍性の増殖障害を含むが、これらに限定されない。

本明細書で用いているように、「コレステロール生合成経路阻害薬」は、アセチルＣｏＡの２炭素酢酸基の変換から例えば、細胞質及びミクロソームにおいて始まるコレステロールの生成又は合成を抑制又は阻止することができる剤を意味する。体内のコレステロールの過剰蓄積及び異常沈着（とりわけ心血管疾患につながりうる）を予防するために、コレステロール生合成を厳格に調節する。この経路の阻害薬は、（ｉ）スタチン；（ｉｉ）イソプレノイドのステロールへの変換を阻害し、イソプレノイド合成のみを完全な状態のままにするスクアレン合成阻害薬であるザラゴジン酸Ａ（ＺＧＡ）；初期ステロールであるラノステロールの合成を可能にするが、下流ステロールの合成を妨げるケトコナゾール；（ｉｖ）コレステロール合成の最終段階を遮断し、コレステロール及びその誘導体以外のステロールの産生を可能にするトリパラノール（ＴＰＬ）；及び（ｖ）コレステロールのプレグネネロン及び他のステロイドへの変換を阻害し、ステロール合成を影響を受けないままにするアミノグルテチミドを含むが、これらに限定されないステロール合成経路阻害薬（ＳＳＰＩｓ）のクラスを含む。

「アルキル」という用語は、１〜２０個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖炭化水素基、好ましくは１〜７個の炭素原子の低級アルキルを意味する。具体例としてのアルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチルなどである。好ましいものは、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルである。

有機基又は化合物にそれぞれ関連して本明細書で言及する「低級」という用語は、異なって定義されていなければ、７個を含む個数までの、好ましくは４個を含む個数までの、有利には１個又は２個の炭素原子を有するものを一般的に定義する。それは、直鎖又は分枝鎖であってよい。

「場合によって置換されたアルキル」という用語は、１〜２０個の炭素原子を有する非置換又は置換直鎖又は分枝鎖炭化水素基、好ましくは１〜７個の炭素原子の低級アルキルを意味する。具体例としての非置換アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチルなどである。

「置換アルキル」という用語は、１つ又は複数の次の基により置換されたアルキル基を意味する：ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩなど）、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシアルコキシ、アリールオキシ、シクロアルキル、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アミノ、置換アミノ、アルカノイルアミノ、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、アルキルチオノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アミノスルホニル、ニトロ、シアノ、カルボキシ、カルバミル、アルコキシカルボニル、アリール、アラルコキシ、グアニジノ、ヘテロシクリル（例えば、インドリル、イミダゾリル、フリル、チエニル、チアゾリル、ピロリジル、ピリジル、ピリミジル）など。

「ハロゲン」又は「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味する。

「アルコキシ」又は「アルキルオキシ」という用語は、アルキル−Ｏ−を意味する。

「アリール」又は「アル」という用語は、それぞれがアルキル、ハロ、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アミノ、置換アミノ、アルカノイルアミノ、チオール、アルキルチオ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルバミル、アルコキシカルボニル、アルキルチオノ、アルキルスルホニル、アミノスルホニルなどの１〜４つ、例えば、１つ又は２つの置換基により場合によって置換されていてよい、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル及びビフェニル基などの環部分に６〜１２個の炭素原子を有する炭素環式単環式又は二環式芳香族炭化水素基を意味する。「アリーレン」は、アリール基に由来する二価基である。

「アラルキル」という用語は、ベンジルなどのアルキル基に結合したアリール基を意味する。

「ハロアルキル」という用語は、トリフルオロメトキシなどのハロによる一又は多置換のアルキルを意味する。

「アルキレン」という用語は、１〜３つの低級アルキル基で置換されていてよい単結合により結合された１〜６個の炭素原子の直鎖橋（例えば、ｘが１〜６である−（ＣＨ２）ｘ−）を意味する。

「Ｏ、Ｓ、Ｎ−（Ｈ、アルキル又はアラルキル）により中断されたアルキレン」という用語は、エ（メ）チレンオキシエ（メ）チレン、エ（メ）チレンチオエ（メ）チレン又はエ（メ）チレンイミノエ（メ）チレンなどのＯ、Ｓ、Ｎ−（Ｈ、アルキル又はアラルキル）により中断されている２〜６個の炭素原子の直鎖を意味する。

「シクロアルキル」は、示される数の環原子を含む飽和又は部分的に不飽和の単環式、縮合二環式又は架橋多環式環アセンブリを意味する。例えば、Ｃ_３−１０シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等を含む。

「アルカノイルオキシ」という用語は、アルキル−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−を意味する。

「アルキルアミノ」及び「ジアルキルアミノ」という用語は、それぞれ（アルキル）ＮＨ−及び（アルキル）_２Ｎ−を意味する。

「アルカノイルアミノ」という用語は、アルキル−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−を意味する。

「アルキルチオ」という用語は、アルキル−Ｓ−を意味する。

「アルキルチオノ」という用語は、アルキル−Ｓ（Ｏ）−を意味する。

「アルキルスルホニル」という用語は、アルキル−Ｓ（Ｏ）_２−を意味する。

「カルバミル」という用語は、−Ｃ（Ｏ）−アミノ又は−Ｃ（Ｏ）−置換アミノを意味する。

「アルコキシカルボニル」という用語は、アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−を意味する。

「アシル」という用語は、アルカノイル、アロイル、ヘテロアリオール、アリールアルカノイル、ヘテロアリールアルカノイルなどを意味する。

「ヘテロアリール」又は「ヘテロアル」という用語は、芳香族複素環、例えば、低級アルキル、低級アルコキシ又はハロなどの１〜４つ、例えば、１つ又は２つの置換基により場合によって置換され、前記複素環の結合の箇所が複素環式環の炭素原子にある、例えば、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、フリル、チエニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、インドリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチエニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフリルなどの単環式又は二環式複素環式アリールを意味する。好ましいヘテロアリール残基は、１−メチル−２−ピロリル、２，３−チエニル、２−チアゾリル、２−イミダゾリル、１−メチル−２−イミダゾリル、２，３，４−ピリジル又は２−キノリルである。

「ヘテロシクロアルキル」は、示される１つ又は複数の環炭素が−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−又は−Ｓ（Ｏ）_２−から選択される部分により置換されており、Ｒが水素、Ｃ_１−４アルキル又は窒素保護基であるという条件での本願書で定義したシクロアルキルを意味する。例えば、本発明の組合せを記述するために本願で用いるＣ_３−８ヘテロシクロアルキルは、モルホリノ、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−８−イル、チオモルホリノ、スルファノモルホリノ、スルホノモルホリノ等を含む。

「アルカノイル」という用語は、例えば、アセチル、プロピオニル又はピバロイルなどのＣ_２〜Ｃ_７アルカノイル、特にＣ_２〜Ｃ_５アルカノイルを意味する。

「アラルコキシ」という用語は、アルコキシ基に結合したアリール基を意味する。

「アリールスルホニル」という用語は、アリール−ＳＯ_２−を意味する。

「アロイル」という用語は、アリール−ＣＯ−を意味する。

「ヘテロシクリル」という用語は、例えば、少なくとも１つの炭素原子含有環に少なくとも１個のヘテロ原子を有する、４〜７員単環式、７〜１１員二環式又は１０〜１５員三環式環系である、場合によって置換された完全に飽和又は不飽和の芳香族又は非芳香族環式基を意味する。ヘテロ原子を含む複素環式基の各環は、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選択される１、２又は３個のヘテロ原子を有してよく、窒素及び硫黄ヘテロ原子は、場合によって酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は、場合によって四級化されていてもよい。複素環式基は、ヘテロ原子又は炭素原子において結合させることができる。

具体例としての単環式複素環式基は、ピロリジニル、ピロリル、ピラゾリル、オキセタニル、ピラゾリニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリクリニル（isothiazoliclinyl）、フリル、テトラヒドロフリル、チエニル、オキサジアゾリル、ピペリジニル、ピペラジニル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロロジニル、２−オキソアゼピニル、アゼピニル、４−ピペリドニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアモルホリニルスルホン、１，３−ジオキソラン及びテトラヒドロ−１，１−ジオキソチエニルなどである。

具体例としての二環式複素環式基は、インドリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチエニル、キヌクリジニル、キノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラニル、インドリジニル、ベンゾフリル、クロモニル、クマリニル、エンゾピラニル（enzopyranyl）、シンノリニル、キノキサリニル、インダゾリル、ピロロピリジル、フロピリジニル（フロ［２，３−ｃ］ピリジニル、フロ［３，２−ｂ］ピリジニル又はフロ［２，３−ｂ］ピリジニルなど）、ジヒドロイソインドリル、ジヒドロキナゾリニル（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−キナゾリニル）などである。

具体例としての三環式複素環式基は、カルバゾリル、ベンゾイドリル（benzidolyl）、フェナントロリニル、アクリジニル、フェナントリジニル、キサンテニルなどである。

「ヘテロシクリル」という用語は、置換複素環式基も含む。置換複素環式基は、以下のものの１、２又は３つで置換された複素環式基を意味する：
（ａ）アルキル
（ｂ）ヒドロキシ（若しくは保護ヒドロキシ）、
（ｃ）ハロ、
（ｄ）オキソ（すなわち、＝Ｏ）、
（ｅ）アミノ若しくは置換アミノ、
（ｆ）アルコキシ、
（ｇ）シクロアルキル、
（ｈ）カルボキシ、
（ｉ）ヘテロシクロオキシ、
（ｊ）非置換低級アルコキシカルボニルなどのアルコキシカルボニル、
（ｋ）カルバミル、アルキルカルバミル、アリールカルバミル、ジアルキルカルバミル、
（ｌ）メルカプト、
（ｍ）ニトロ、
（ｎ）シアノ、
（ｏ）スルホンアミド、スルホンアミドアルキル又はスルホンアミドジアルキル、
（ｐ）アリール、
（ｑ）アルキルカルボニルオキシ、
（ｒ）アリールカルボニルオキシ、
（ｓ）アリールチオ、
（ｔ）アリールオキシ、
（ｕ）アルキルチオ、
（ｖ）ホルミル、
（ｗ）アリールアルキル、或いは
（ｘ）アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ又はハロにより置換されたアリール。

「ヘテロシクロオキシ」という用語は、酸素架橋を介して結合した複素環式基を意味する。

「ヘテロアリールスルホニル」という用語は、ヘテロアリール−ＳＯ_２−を意味する。

「ヘテロアロイル」という用語は、ヘテロアリール−ＣＯ−を意味する。

「アシルアミノ」という用語は、アシル−ＮＨ−を意味する。

「置換アミノ」という用語は、アルキル、アラルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアラルキルにより一置換又は独立に二置換されたアミノ、或いは低級アルキレン又はＯ、Ｓ、Ｎ−（Ｈ、アルキル、アラルキル）などにより中断された低級アルキレンにより二置換されたアミノを意味する。

本明細書で用いているように、「接触させること」（contacting）は、通常の意味を有し、２つ又はそれ以上の分子（例えば、小分子有機化合物とポリペプチド）を混合すること、或いは分子と細胞（例えば、化合物と細胞）を混合することを意味する。接触は、ｉｎｖｉｔｒｏで起こりうる。例えば、２つ又はそれ以上の剤を混合する、或いは化合物と細胞又は細胞溶解物を試験管又は他の容器中で混合する。接触は、細胞内又はｉｎｓｉｔｕでも起こりうる。例えば、２つのポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドの細胞内での共発現により細胞内で、或いは細胞溶解物中で２つのポリペプチドを接触させる。

本発明の方法により用いられるいずれの酸性スムースンド阻害薬化合物の薬学的に許容される塩も、塩基により生成する塩、すなわち、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ及びアルカリ土類金属塩並びにアンモニウム、トリメチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム及びトリス−（ヒドロキシメチル）−メチルアンモニウム塩などのアンモニウム塩などのカチオン塩である。

同様に、鉱酸、有機カルボン及び有機スルホン酸、例えば、塩酸、メタンスルホン酸、マレイン酸などの酸付加塩は、アミノ又はピリジルなどの塩基基が構造の一部を構成しているならば、可能である。

本発明の方法により用いられるスムースンド阻害薬化合物の薬学的に許容される塩は、ピリジルなどの塩基基が構造の一部を構成しているならば、鉱酸、有機カルボン及び有機スルホン酸、例えば、塩酸、メタンスルホン酸、マレイン酸などの特に酸付加塩である。

本発明の方法により用いられるスムースンド阻害薬化合物は、置換基の性質によって、１つ又は複数の不斉炭素原子を有し、したがって、それらのラセミ体並びに（Ｒ）及び（Ｓ）鏡像異性体として存在する。好ましいものは、Ｓ立体配置（ＮＲ_６Ｒ_７置換基がある炭素において）に一般的に帰属される、より高い活性の鏡像異性体である。

本発明は、Ｈｈ及び／又はＳｍｏにより調節されるシグナル伝達経路が、スムースンド阻害薬（例えば、シクロパミン、ジェルビン、式Ｉの化合物（式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の化合物）、式ＩＩの化合物、式ＩＩＩの化合物、本明細書で個別に列挙した抗スムースンド化合物のいずれか、抗Ｓｍｏ抗体及び抗Ｓｍｏ阻害核酸（例えば、抗ＳｍｏｓｉＲＮＡｓ））とコレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）Ｇｌｉ阻害薬及び／又はホスファチジルイニシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬の組合せにより調節することができるという発見に関する。前記調節は、Ｈｈ／Ｓｍｏ経路がスムースンド拮抗薬に以前に曝露されたにもかかわらず活性である場合（例えば、抵抗性腫瘍の場合と同様に）に起こる。前記調節は、Ｈｈ／Ｓｍｏ経路がスムースンド拮抗薬に以前に曝露されなかったにもかかわらず活性である場合（例えば、感受性腫瘍の場合と同様に）にも起こる。

本発明は、一般的に、腫瘍形成、癌、新生物及び非悪性過剰増殖性障害を含むが、これらに限定されないヘッジホッグ経路に関連する病変（下で定義し、本明細書では「ヘッジホッグ関連障害（単数又は複数）」と呼ぶ）の診断及び治療に関し、より具体的には、次のものの１つ又は複数と組み合わせた、ヘッジホッグ及びＳｍｏシグナル伝達経路を阻害することが公知の剤、例えば、スムースンド阻害薬を用いて腫瘍形成、腫瘍成長及び腫瘍生存を抑制する方法に関する：（ｉ）コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、（ｉｉ）Ｇｌｉ阻害薬及び／又は（ｉｉｉ）ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬。スムースンド阻害薬は、本明細書で定義するクラスであり、抗スムースンド抗体若しくは阻害ヌクレオチド（例えば、ＲＮＡｉ）、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書で列挙若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか、並びに当技術分野における及び／又は参照により本明細書に組み込まれている他の公知の抗スムースンド剤を含むが、これらに限定されない。ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬も本明細書で定義するクラスであり、これは、式Ａの化合物並びに脂質キナーゼ阻害薬及び抗ＰＩ３Ｋ阻害ヌクレオチド（例えば、ＲＮＡｉ）を含むが、これらに限定されない。

本発明の方法及び化合物は、例えば、Ｐｔｃｈ機能喪失、ヘッジホッグ機能獲得、スムースンド機能獲得又はＧｌｉ機能獲得などの表現型に起因する異常な成長状態を抑制することにより、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化を抑制することに関し、正常なＰｔｃｈ活動を活性化し、正常なヘッジホッグ活性を拮抗し、又はスムースンド活性を拮抗する（例えば、異常な成長状態を逆転又は制御する）のに十分な量のヘッジホッグ及びＳｍｏシグナル伝達経路を阻害することが公知である剤、例えば、スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成阻害薬（例えば、スタチン）；Ｇｌｉ阻害薬；及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せと細胞とを接触させることを含む。

本発明の一態様は、Ｓｍｏ依存性経路の活性化を抑制するための化合物を用いる方法を含む（例えば、Ｓｍｏがヘッジホッグリガンドの存在により活性化される場合）。本発明の他の態様は、ヘッジホッグ（リガンド）非依存性経路の活性化を抑制するための化合物を用いる方法を含む。特定の実施形態において、本方法は、活性化がヘッジホッグリガンドの存在下又は不存在下であるかどうかにかかわりなく、ヘッジホッグ機能獲得、Ｐｔｃｈ機能喪失又はスムースンド機能獲得突然変異に起因するようなヘッジホッグ経路の望ましくない活性化の表現型効果を無効にするのに用いることができる。例えば、本発明の方法は、ヘッジホッグリガンドの存在下又は不存在下でスムースンド依存性又は非依存性（すなわち、活性化がスムースンドの下流で起こる場合）ヘッジホッグ経路シグナル伝達を拮抗するのに十分な量のコレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬と組み合わせたスムースンド阻害薬などのＳｍｏ拮抗薬と細胞とを（ｉｎｖｉｔｒｏ又はｉｎｖｉｖｏで）接触させることを含みうる。

本発明の特定の実施形態は、ｉｎｖｉｔｒｏ又はｉｎｖｉｖｏで細胞中のＳｍｏタンパク質の細胞内の合成、発現、産生、安定化、リン酸化、再配置及び／又は活性を阻害する方法であって、スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを前記細胞と接触させること又は前記細胞に導入することを含む方法を提供する。特定の実施形態において、ヘッジホッグシグナル伝達経路におけるＳｍｏの下流のタンパク質（例えば、Ｇｌｉ）もｉｎｖｉｔｒｏ又はｉｎｖｉｖｏで細胞中で阻害される。例えば、Ｇｌｉタンパク質（単数又は複数）の細胞内の合成、発現、産生、安定化、リン酸化、再配置及び／又は活性は、スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを前記細胞と接触させること又は前記細胞に導入することを含む方法により、上述のスムースンドの阻害に加えて阻害することができる。特定の実施形態において、前記Ｓｍｏタンパク質は、スムースンド拮抗薬に以前に曝露されたにもかかわらず、活性である（例えば、抵抗性腫瘍の場合と同様に）。他の実施形態において、前記Ｓｍｏタンパク質は、スムースンド拮抗薬に以前に曝露されなかった。

本発明の方法は、例えば、幹細胞からの組織の形成におけるｉｎｖｉｔｒｏ及び／又はｉｎｖｉｖｏでの細胞の増殖及び／又は分化を調節するために、或いは過剰増殖性細胞の成長を妨げるために用いることができる。他の特定の実施形態において、スムースンド阻害薬と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを細胞と接触させること又は細胞に導入することは、細胞増殖の抑制、腫瘍細胞の成長及び／又は生存の抑制、及び／又は腫瘍形成の抑制をもたらす。したがって、他の特定の実施形態は、腫瘍細胞における本発明の組合せ法を用いることによりＨｈ経路を阻害し、かつ／又は拮抗する方法を提供する。特定の実施形態において、前記細胞増殖、腫瘍細胞の成長及び／又は生存、及び／又は腫瘍形成は、抵抗性腫瘍に関連する。他の実施形態において、前記細胞増殖、腫瘍細胞の成長及び／又は生存、及び／又は腫瘍形成は、感受性腫瘍に関連する。

本発明の組合せを用いて治療することができる、本明細書で述べる腫瘍細胞は、アポトーシス抵抗性であってよく、従来の抗癌療法に抵抗性であってよく、かつ／又は本明細書で定義した抵抗性腫瘍であってよい。抵抗性腫瘍は、例えば、Ｓｍｏ阻害薬の存在にもかかわらずヘッジホッグ経路の再活性化につながる遺伝子変化によって生ずることがある。例は、阻害薬の結合を妨げるＳｍｏ突然変異、及び／又はヘッジホッグ経路の再活性化につながるＳｍｏの下流の遺伝子（例えば、ｓｕｆｕ、Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２）における突然変異である。抵抗性腫瘍及び従来の抗癌療法に屈しない腫瘍のこれらの例において、本発明の組合せは、腫瘍細胞に老化、アポトーシス又はネクローシスを受けさせることができる。前記組合せの投与は、腫瘍細胞死及び転移の予防をもたらしうる。

本発明の方法は、薬学的に許容される賦形剤若しくは担体を含む医薬品として製剤化されたスムースンド阻害薬とコレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを用いることができる。同様に、前記コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬は、薬学的に許容される賦形剤若しくは担体も含む医薬品として製剤化することができる。前記組合せは、癌及び／又は腫瘍（髄芽腫、基底細胞癌等）並びに非悪性過剰増殖性障害などの望ましくない細胞増殖に関連する状態を治療するために患者に投与することができる。前記組合せは、特定の実施形態において、感受性腫瘍に罹患した患者に投与することができる。前記組合せは、特定の他の実施形態において、抵抗性腫瘍に罹患した患者に、又は抵抗性腫瘍を防止するために患者に投与することができる。

本発明の他の態様は、スムースンド阻害薬とコレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬、及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを哺乳動物に投与することを含む、Ｓｍｏ遺伝子若しくは遺伝子産物（例えば、Ｓｍｏタンパク質）の存在及び／又は発現によって特徴付けられる哺乳動物における細胞の衰弱、乱れ及び／又は機能障害；過形成性、過剰増殖性及び／又は癌性疾患状態；及び／又は腫瘍細胞の転移を診断、予防及び／又は治療する方法を提供する。

ヘッジホッグシグナル伝達経路
シグナル伝達分子のヘッジホッグファミリーのメンバーは、脊椎動物の発生時の多くの重要な短期及び長期パターニング過程を媒介する。パターン形成は、胚細胞が分化組織の秩序正しい空間配置を形成する活動である。高等生物体の物理的複雑さは、細胞内因性系統（lineage）と細胞外因性シグナル伝達との相互作用により胚発生時に生ずる。誘導相互作用は、身体計画の最早期の確立から、器官系のパターニングまで、組織分化時の多様な細胞型の発生までの脊椎動物の発生における胚パターニングに必須である。発生細胞相互作用の効果は変化し、応答細胞の非誘導及び誘導状態と異なる細胞を誘導することによって、応答細胞は、細胞分化の１つの経路から他の経路に変化させられる（誘導）。時として、細胞は、それらの隣接細胞をそれら自体のように分化するように誘導し（ホメオジェネティック（homeogenetic）誘導）、他の場合に、細胞は、その隣接細胞がそれ自体のように分化することを妨げる。初期の発生における細胞相互作用は、２つの細胞型の間の初期の誘導が多様性の漸進的増幅につながるように順次的である可能性がある。さらに、誘導相互作用は、胚においてだけでなく、成人細胞においても起こり、分化を誘導することに加えて、形態形成パターンを確立し、維持するように作用しうる。

ヘッジホッグ遺伝子の脊椎動物ファミリーは、すべてが分泌タンパク質をコードするデザート（Ｄｈｈ）、ソニック（Ｓｈｈ）及びインディアン（Ｉｈｈ）ヘッジホッグとして公知の哺乳動物に存在する３つのメンバーを含む。これらの各種ヘッジホッグタンパク質は、単一シグナルペプチド、高度に保存されたＮ末端領域及びより多岐にわたるＣ末端ドメインからなっている。生化学的試験により、Ｈｈ前駆体タンパク質の自己タンパク質分解開裂が、後に求核置換で開裂する内部チオエステル中間体を経て進行することが示された。求核体は、Ｎ−ペプチドのＣ末端に共有結合した状態になり、それを細胞表面につなぎ留める小親油性分子であることはありうる。その生物学的意味は深い。つなぎ留めの結果として、Ｎ末端ヘッジホッグペプチドの高い局所濃度がヘッジホッグ産生細胞の表面上に生ずる。それが短期及び長期ヘッジホッグシグナル伝達活動に必要かつ十分であるこのＮ末端ペプチドである。

スムースンド（Ｓｍｏ）は、ヘッジホッグ（Ｈｈ）シグナルのトランスデューサとして作用する１０２４アミノ酸膜貫通タンパク質をコードする。Ｓｍｏタンパク質は、７つの疎水性膜貫通ドメイン、細胞外アミノ末端領域及び細胞内カルボキシ末端領域を有する。Ｓｍｏは、Ｇタンパク質共役受容体とのいくつかの類似性を有し、セルペンチンタンパク質のＦｒｉｚｚｌｅｄ（Ｆｚ）ファミリーと最も相同的である（Alcedoら（１９９６年）、Cell、８６巻、２２１頁）。

不活性ヘッジホッグシグナル伝達経路は、膜貫通タンパク質受容体パッチド（Ｐｔｃ）がスムースンド（Ｓｍｏ）の安定化、リン酸化及び活性を阻害する場である。Ｈｈシグナル伝達の下流構成要素である転写因子Ｇｌｉは、Ｆｕｓｅｄ（Ｆｕ）及びＦｕｓｅｄのサプレッサー（Ｓｕｆｕ）を含む細胞質タンパク質との相互作用により核に入るのを妨げられる。結果として、ヘッジホッグ標的遺伝子の転写活性化が抑制される。該経路の活性化は、３つの哺乳類リガンド（Ｄｈｈ、Ｓｈｈ又はＩｈｈ）のいずれかのＰｔｃへの結合により開始される。

Ｈｈによるリガンド結合がＳｍｏとＰｔｃの相互作用を変化させ、Ｓｍｏが細胞内の内部構造から形質膜に移動すると直ちにＳｍｏの抑制が逆転する。形質膜へのＳｍｏの局在化がＨｈ経路標的遺伝子の活性化をＨｈ非依存的に誘発する（Zhuら（２００３年）、Genes Dev.、１７巻（１０号）、１２４０頁）。Ｓｍｏにより活性化されたカスケードは、転写因子Ｇｌｉの活性形の核への転移をもたらす。転移した核ＧｌｉによるＳｍｏの活性化は、Ｗｎｔ、ＴＧＦβ及びＰｔｃｈ並びにＧｌｉ自体を含むＨｈ経路標的遺伝子の発現を活性化する。

ヘッジホッグ関連障害
前述のことによれば、本発明は、そのような治療を必要とする対象における本明細書で述べた疾患又は障害（本明細書で個別又は集合的に「ヘッジホッグ関連障害」とも呼ぶ）のいずれかを予防又は治療する方法を提供し、該方法は、スムースンド阻害薬（シクロパミン、ジェルビン、式Ｉの化合物（例えば、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の化合物）、式ＩＩの化合物、式ＩＩＩの化合物、本明細書で個別に列挙する抗スムースンド化合物のいずれか、抗Ｓｍｏ抗体及び抗Ｓｍｏ阻害核酸（例えば、抗ＳｍｏｓｉＲＮＡｓ）又はその薬学的に許容される塩と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを前記対象に投与することを含む。上の使用のいずれかについて、必要とする用量は、投与の方法、治療する個々の状態及び所望の効果によって異なる。

ヘッジホッグシグナル伝達のレベルの増加（例えば、異常なヘッジホッグシグナル伝達）は、癌の形成を開始するのに十分なものであり、腫瘍の生存に必要である。癌の形成及び腫瘍の生存に必要であることは、同様にＰｔｃｈ機能喪失、ヘッジホッグ機能獲得、スムースンド機能獲得及び／又はＧｌｉ機能獲得に起因しうる。これらの癌は、前立腺癌（ＫａｒｈａｄｋａｒＳＳら（２００４年）、Nature、１０月７日、４３１巻（７００９号）、７０７〜１２頁）（Sanchez Pら（２００４年）、PNAS、８月２４日、１０１巻（３４号）、１２５６１〜６頁）（Mimeault Mら（２００６年）、International Journal of Cancer、１１８巻（４号）、１０２２〜３１頁）；乳癌（Kubo Mら（２００４年）、Cancer Res.、２００４年９月１日、６４巻（１７号）、６０７１〜４頁）（Liu Sら（２００６年）、Cancer Res、６６巻（１２号）、６０６３〜７１頁）（Moraes RCら（２００７年）、Development、１３４巻（６号）、１２３１〜４２頁）；髄芽腫（Berman DMら（２００２年）、Science、８月３０日、２９７巻（５５８６号）、１５５９〜６１頁）；非黒色腫皮膚癌、すなわち、扁平上皮癌（ＳＣＣ）及び基底細胞癌（ＢＣＣ）（Williams JAら（２００３年）、PNAS、４月１５日、１００巻（８号）、４６１６〜２１頁）（Xie Jら（１９９８年）、Nature、１月１日、３９１巻（６６６２号）、９０〜２頁）；膵臓、食道、胃及び胆管癌（Thayer SPら（２００３年）、Nature、１０月２３日、４２５巻（６９６０号）、８５１〜６頁）（Maら（２００６年）、Int J Cancer、１１８巻（１号）、１３９頁）（Berman DMら（２００３年）、Nature、１０月２３日、４２５巻（６９６０号）、８４６〜５１頁）（Nakashima Hら（２００６年）、Cancer Research、６６巻（１４号）、７０４１〜９頁）（Feldmann Gら（２００７年）、Cancer Research、６７巻（５号）、２１８７〜９６頁）（Ji Zら（２００７年）、J Biol Chem、２８２巻（１９号）、１４０４８〜５５頁）並びに小細胞肺癌（Watkins DNら（２００３年）、Nature、３月２０日、４２２巻（６９２９号）、３１３〜７頁）（Vestergaard Jら（２００６年）、Lung Cancer、５２巻（３号）、２８１〜９０頁）を含むが、これらに限定されない。

ヘッジホッグシグナル伝達のレベルの増加が癌の形成を開始するのに十分なものであり、腫瘍の生存に必要であるその他の癌は、大腸癌（Douard Rら（２００６年）、Surgery、１３９巻（５号）、６６５〜７０頁）（Qualtrough Dら（２００４年）、International Journal of Cancer、１１０巻（６号）、８３１〜７頁）；神経膠腫（Bar EEら（２００７年）、Neuro-Oncology、９巻（４号）、５９４頁）（Clement Vら（２００７年）、Current Biology、１７巻（２号）、１６５〜７２頁）（Ehteshan Mら（２００７年）、Oncogene、３月１２日、印刷前の電子版）：黒色腫（Stecca Bら（２００７年）、PNAS、１０４巻（１４号）、５８９５〜９００頁）；非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）（Yuan Zら（２００７年）、Oncogene、２６巻（７号）、１０４６〜５５頁）；卵巣（Chen XJら（２００７年）、Cancer Science、９８巻（１号）、６８〜７６頁）；肝臓（Huang SHら（２００６年）、Carcinogenesis、２７巻（７号）、１３３４〜４０頁）（Sicklick JKら（２００６年）、Carcinogenesis、２７巻（４号）、７４８〜５７頁）；腎臓（Cutcliffe Cら（２００５年）、Clinical Cancer Research、１１巻（２２号）、７９８６〜９４頁）；横紋筋肉腫（Hahn Hら（１９９８年）、Nature Medicine、４巻（５号）、６１９〜２２頁）（Tostar Uら（２００６年）、Journal of Pathology、２０８巻（１号）、１７〜２５頁）及び軟骨肉腫（Tiet TDら（２００６年）、American Journal of Pathology、１６８巻（１号）、３２１〜３０頁）を含むが、これらに限定されない。

悪性リンパ腫（ＭＬ）は、リンパ系の細胞に関わり、米国における第５位の最も一般的な癌である。ＭＬは、リンパ増殖性疾患の異種群である非ホジキン病及びホジキン病を含む。ホジキン病は、全悪性リンパ腫の約１４％を占めている。非ホジキンリンパ腫は、主としてＢ細胞起源の悪性腫瘍の多様な群である。ワーキングフォーミュレーション（Working Formulation）分類スキームでは、これらのリンパ腫は、それらの自然歴により低、中及び高グレードカテゴリーに分類された（「The Non-Hodgkin’s Lymphoma Pathologic Classification Project」、Cancer、４９巻、２１１２〜２１３５頁、１９８２年参照）。低グレードリンパ腫は、無痛性であり、生存期間の中央値は５〜１０年である（Horning及びRosenberg、N. Engl. J. Med.、３１１巻、１４７１〜１４７５頁、１９８４年）。化学療法は大多数の無痛性リンパ腫における寛解を誘発するが、治癒はまれであり、ほとんどの患者が最終的に再発し、さらなる治療を必要とする。中及び高グレードリンパ腫は、より攻撃的な腫瘍であるが、化学療法による治癒のより大きい可能性を有する。しかし、これらの患者のかなりの割合が再発し、さらなる治療を必要とする。

多発性骨髄腫（ＭＭ）は、骨髄に通常認められる種類の形質細胞からなる悪性腫瘍である。これらの悪性形質細胞は、骨髄に蓄積し、一般的にモノクローナルＩｇＧ又はＩｇＡ分子を産生する。悪性形質細胞は、骨髄中に存在し、拡大し、正常な造血の喪失により、貧血及び免疫抑制を引き起こす。多発性骨髄腫罹患者は、しばしば貧血、溶骨性病変、腎不全、高カルシウム血症及び再発性細菌感染を経験する。ＭＭは、第２の最も一般的な造血器悪性腫瘍である。

「ヘッジホッグ関連障害」は、リンパ腫、白血病及び骨髄腫などの血液及びリンパ系の癌をさらに含む。本発明の方法及び組合せは、ヘッジホッグシグナル伝達経路の１つ又は複数の構成要素を拮抗して、リンパ腫細胞、白血病細胞又は骨髄腫細胞の成長及び増殖を抑制する。リンパ腫は、Ｂリンパ球由来のリンパ芽球の悪性腫瘍である。骨髄腫は、骨髄に通常認められる種類の形質細胞からなる悪性腫瘍である。白血病は、血液形成器官に関わる急性又は慢性疾患である。ＮＨＬは、循環血液中の白血球数の対応する増加を伴う又は伴わない身体の組織中の白血球数の異常な増加によって特徴付けられ、最も顕著に関係する白血球の種類に従って分類される。

例として、リンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、形質芽球腫、形質細胞腫又はＣＬＬ）に罹患している対象又はその発現のリスクのある対象は、本発明の方法及び組合せにより治療することができる。好ましくは、対象はヒトである。本発明の方法及び組合せは、次のものの１つ又は複数のものと組み合わせた有効量のスムースンド阻害薬を含む医薬組成物を対象に投与することを伴う：（ｉ）コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）及び（ｉｉ）Ｇｌｉ阻害薬。対象は、いずれかの病期（例えば、Ｉ〜ＩＶ期、ＡｎｎＡｒｂｏｒＳｔａｇｉｎｇＳｙｓｔｅｍ）の転移を伴う又は伴わないリンパ腫と診断されている対象でありうる。本発明の方法による治療に適するリンパ腫は、ホジキン病及び非ホジキン病を含むが、これらに限定されない。ホジキン病は、特定のリンパ節から発生すると思われ、後に脾臓、肝臓及び骨髄に広がるリンパ組織のヒト悪性障害（リンパ腫）である。ホジキン病は、主として１５〜３５歳の個人に発生する。ホジキン病は、リンパ節、脾臓及び全身リンパ組織の進行性の無痛性腫脹によって特徴付けられる。古典的ホジキン病は、次の４つのサブタイプに分類される：（１）小結節硬化型ホジキン病（ＮＳＨＤ）、（２）混合細胞性ホジキン病（ＭＣＨＤ）、（３）リンパ球枯渇型ホジキン病（ＬＤＨＤ）及び（４）リンパ球優勢古典的ホジキン病（ｃＬＲＨＤ）。

いくつかの好ましい実施形態において、本発明の方法及び組合せは、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）を治療するのに用いることができる。非ホジキン病は、リンパ肉腫とも呼ばれており、ホジキン病と重要な点が異なるリンパ腫の群を指し、癌細胞の顕微鏡的外観に従って分類される。非ホジキンリンパ腫は、（１）遅成長リンパ腫及びリンパ性白血病（例えば、慢性リンパ球性白血病、小リンパ球性白血病、リンパ形質細胞様リンパ腫、濾胞中心リンパ腫、濾胞性小分割細胞、濾胞性混合細胞、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、毛様細胞性白血病、形質細胞腫、骨髄腫、大顆粒リンパ球性白血病、菌状息肉腫、スザリー（szary）症候群）、（２）中等度に攻撃性なリンパ腫及びリンパ性白血病（例えば、前リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、濾胞中心リンパ腫、濾胞性小分割細胞、濾胞中心リンパ腫、慢性リンパ球性白血病／前リンパ球性白血病、血管中心性リンパ腫、血管免疫芽球性リンパ腫）、（３）攻撃性リンパ腫（例えば、大Ｂ細胞型リンパ腫、末梢Ｔ細胞型リンパ腫、腸Ｔ細胞型リンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫）及び（４）高度に攻撃性なリンパ腫及びリンパ性白血病（例えば、Ｂ細胞前駆Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫、バーキットリンパ腫、高悪性度Ｂ細胞型リンパ腫、バーキット様Ｔ細胞前駆Ｔリンパ芽球性白血病／リンパ腫）を含むが、これらに限定されない。本発明の方法は、成人又は小児型のリンパ腫、並びにいずれかの病期、例えば、Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ又はＩＶ期のリンパ腫に用いることができる。本明細書で述べる方法は、他の形の白血病、例えば、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）を治療するのにも用いることができる。

本発明の治療方法及び組合せの一部は、Ｇｌｉ３を発現しないリンパ腫又は骨髄腫の治療を特に対象とする。Ｇｌｉ１及びＧｌｉ２はすべてのリンパ腫で発現すると思われるが、検出可能なＧｌｉ３発現は、シクロパミンによるＨｈ経路の阻害に抵抗性であったリンパ腫に主として存在する。正常脾Ｂ細胞及び大多数のシクロパミン反応性リンパ腫におけるＧｌｉ３の発現は存在しない。

したがって、本発明の方法及び組合せによる治療の前に、リンパ腫を有する対象を対象から得たリンパ腫細胞試料中のＧｌｉ３の発現について最初に検査することができる。試料中のＧｌｉ３発現レベルを該対象から得た正常脾Ｂ細胞中のＧｌｉ３発現レベルと比較することができる。リンパ腫又は骨髄腫試料及び対照細胞中のＧｌｉ３発現レベルは、当技術分野で周知の方法を用いて測定することができる。本明細書で述べる方法及び組合せによる治療に対する起こりうる反応性は、リンパ腫又は骨髄腫試料中の検出可能なＧｌｉ３発現の欠如、或いは正常Ｂ細胞中のＧｌｉ３発現レベルより有意に高くない（例えば、２５％、５０％又は１００％以上以下）発現レベルによって示される。本発明の治療方法の追加の段階以外に、Ｇｌｉ３発現の欠如についての事前のスクリーニングを患者層別化の方法として独立に用いることができる。

リンパ腫に加えて、上述の方法及び組合せは、骨髄腫の治療にも適している。多発性骨髄腫は、Ｉｇ鎖の分泌をしばしば伴う、形質細胞のクローンの蓄積によって特徴付けられる致死的新生物である。腫瘍による骨髄浸潤は、貧血、低ガンマグロブリン血症及び随伴性細菌感染を伴う顆粒球減少症と関連する。異常なサイトカイン環境、主として高いＩＬ−６及びＩＬ−１βレベルは、骨痛につながる骨吸収の増加、骨折及び高カルシウム血症をしばしばもたらす。攻撃的化学療法及び移植にもかかわらず、多発性骨髄腫は、普遍的に致命的な血漿増殖性障害である。

本発明の組合せ及び方法は、基底細胞癌（ＢＣＣ又は蚕食性潰瘍）、副腎髄質の皮質又は髄質部分から生ずる副腎の腫瘍及び卵巣腫瘍の治療に有用である。

まれな常染色体優性癌遺伝症候群である、ゴーリン症候群（基底細胞母斑症候群（ＢＣＮＳ）及び母斑様基底細胞癌としても公知である）を有するヒト患者は、Ｐｔｃｈにおける生殖細胞系機能喪失突然変異に起因した、基底細胞癌（ＢＣＣ）を高頻度で、またより低頻度で他の固形腫瘍（例えば、髄芽腫）を発現する。これらの患者並びにＰｔｃｈにおける体性機能喪失突然変異を有するＢＣＣを有する他の非ゴーリン患者は、ヘッジホッグリガンドに関連する治療に反応するとは予想されないであろう。しかし、それらの患者は、本発明の方法及び組合せに認められるようなＨｈリガンドから下流のＨｈシグナル伝達の阻害薬に反応すると思われる。

同様に、Ｐｔｃｈ又はＳｍｏ突然変異に起因する他の固形腫瘍は、Ｈｈリガンド関連阻害に反応しないが、Ｓｍｏ遮断（例えば、本発明の方法及び組合せの適用による）に反応する。

本発明のスムースンド阻害薬（例えば、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書で列挙する若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか）又はその薬学的に許容される塩と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せは、骨過成長障害を含むヘッジホッグ関連障害の治療にも有用である。骨過成長障害は、先端巨大症、大頭症、ソトス症候群、進行性骨幹形成異常（ＰＤＤ又はカムラチ−エンゲルマン（Camurati-Engelmann）病）、頭蓋骨幹形成異常（craniodiaphyseal dysplasia）並びにファンブッヘム（Van Buchem）病（Ｉ及びＩＩ型）及び硬結性骨化症を含む骨内膜骨化過剰症を含むが、これらに限定されない。

本発明の組合せは、望ましくない毛成長、例えば、ヘアリーモール（hairy moles）の治療及び脱毛後の毛再成長の美容上の予防に有用である。

本発明の組合せは、他の公知のヘッジホッグ経路阻害薬（例えば、シクロパミン）が治療における有用性を示した（Cutis、２００６年、７８巻（３号）１８５〜８頁；Br. J. Dermatology、４月、１５４巻（４号）、６１９〜２３頁）乾癬のようなヘッジホッグ関連障害の治療にも有用である。

本発明の組合せは、「線維性障害」、特に肝線維症のようなヘッジホッグ関連障害の治療にも有用である。線維性障害は、過度の線維芽細胞又は筋線維芽細胞増殖並びにコラーゲン、フィブロネクチン及びグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）を含む結合組織マトリックスの産生によって特徴付けられる。肝線維性障害は、アルコール性、Ｃ型肝炎関連及び原発性胆管線維症、並びに非アルコール性脂肪肝及び硬化性胆管炎、住血吸虫症に起因する線維症を含むが、これらに限定されない。

ヘッジホッグシグナル伝達は、小さい胸腺サイズを有し、ダブルマイナスからダブルプラスＴ細胞への分化の低下を示すＳｈｈ−／−マウスにより少なくとも証明されるようにＴ細胞分化に重要である。Ｔ細胞前駆細胞の増殖及び分化に加えて、Ｈｈシグナル伝達は、レパートリー選択時のＴ細胞受容体シグナル伝達を調節することが示されている。したがって、本発明の方法及び組合せは、自己免疫及び炎症性疾患などのＴ細胞関連障害の治療及び診断、並びに腫瘍による免疫系回避に有用でありうる。

Ｇｌｉ転写因子
亜鉛フィンガー転写因子Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２及びＧｌｉ３は、スムースンドが、パッチド阻害による放出（例えば、ヘッジホッグリガンド結合による）時にそのシグナルを伝達する、ヘッジホッグシグナル伝達経路の最終的エフェクターである。Ｇｌｉは、腫瘍形成に関連し、その構成的活性化は、癌発生に決定的に重要である（Lauth M.ら（２００７年）、PNAS、１０４巻（２０号）、８４５５頁）。

本明細書に記載するデータから、下流転写因子Ｇｌｉ２が、Ｓｍｏ阻害薬の存在にもかかわらずヘッジホッグ経路の再活性化（例えば、抵抗性腫瘍の形成をもたらしうる）に関与する可能性があることが示唆される。Ｇｌｉ１又はＧｌｉ２に作用する阻害薬は、本発明の方法によってもたらされるように、特にスムースンド阻害薬との併用で、抵抗性腫瘍の成長を阻害すると考えられる。

本発明の組合せ法に用いることができる公知のＧｌｉ阻害薬は、小分子Ｇｌｉ拮抗薬ＧＡＮＴ６１（Ｇｌｉ−ＡＮＴ作動薬６１）及びＧＡＮＴ５８（Laugh M.ら）を含むが、これらに限定されない。本発明の組合せ法に用いることができる他の公知のＧｌｉ阻害薬は、セスキテルペンゼルンボン及びゼルンボンエポキシド；ビスインドールアルカロイドスタウロスポリノン、６−ヒドロキシスタウロスポリノン、アルシリアフラビンＣ及び５，６−ジヒドロキシアルシリアフラビンＡ；並びにフィサリンＦ及びＢ（Hosoya T.ら（２００８年）、ChemBioChem、９巻、１０８２頁）を含むが、これらに限定されない。

ＰＩ３Ｋ
ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）は、イノシトール環のＤ−３位においてホスホイノシチドをリン酸化する広く発現する脂質キナーゼである。これらのタンパク質は、細胞表面受容体の下流のシグナルトランスデューサとして機能する。ＰＩ３Ｋ触媒反応の生成物であるホスファチジルイノシトール３，４，５−三リン酸（ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）Ｐ３）、ホスファチジルイノシトール３，４−ビスリン酸（ＰｔｄＩｎｓ（３，４）Ｐ２）及びホスファチジルイノシトール３−リン酸（ＰｔｄＩｎｓ（３）Ｐ）は、細胞の成長、分化、可動性、増幅及び生存を含む多くの細胞過程に中心的な役割を有するセカンドメッセンジャーである。

ＰＩ３Ｋファミリーの８つのメンバーは、それらの一次配列、ｉｎｖｉｔｒｏ基質選択、ドメイン構造及び調節の様式に基づいて３つの群に分類された。クラスＩＩのＰＩ３Ｋは、大部分が細胞の膜画分に結合し、それらのＣ末端におけるＣ２ドメインによって特徴付けられ、３つのイソ型（ＰＩ３Ｋ−Ｃ２α、ＰＩ３Ｋ−Ｃ２β及びＰＩ３Ｋ−Ｃ２γ）からなる（Sheikhら（２００３年）、BMC Clin. Pathol.、３巻、１頁）。クラスＩＩＩのＰＩ３Ｋは、ホスファチジルイノシトールのみを基質として利用し、リソソームを介するタンパク質トラフィッキングに必須の役割を果たす（Voliniaら（１９９５年）、EMBO J.、１４巻、３３３９頁）。

本出願の方法及び組合せの対象である、クラスＩのＰＩ３Ｋは、２つのサブグループＩＡ及びＩＢからなる。クラスＩＡのＰＩ３Ｋサブグループは、５つの調節ドメイン：ｐ８５α、ｐ８５β、ｐ８５γ、ｐ５０α及びｐ５５αの１つとヘテロ二量体を形成する、３つの触媒サブユニットｐ１１０α、ｐ１１０β及びｐ１１０δからなる。これらのＰＩ３Ｋは、細胞表面受容体チロシンキナーゼによって活性化される。

クラスＩＢのＰＩ３Ｋは、１つのメンバー、ｐ１１０ｇのヘテロ二量体、及びＧタンパク質共役受容体の刺激後にＧタンパク質βγサブユニットによって活性化される調節ｐ１０１ドメインからなる。ＰＩ３ＫＩＡ及びＩＢは、脂質ホスファターゼＰＴＥＮの作用により逆転される過程である、ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）Ｐ３の形成を触媒する。

コレステロール合成経路
ヘッジホッグ経路とコレステロール生合成経路が関連するという理由の中には、ステロール合成がＳｈｈシグナル伝達に必要とされることがある（Corocoran R.及びScott M.（２００６年）、PNAS、１０３巻（２２号）、８４０９頁）。ステロール合成が障害される場合、Ｓｈｈリガンドがコレステロールにより共有結合により修飾されるだけでなく、Ｓｈｈシグナルもヘッジホッグ経路における受信細胞において遮断されうる（Cooper Mら（１９９８年）、Science、２８０巻、１６０３頁）。スタチンの抗腫瘍効果は、当技術分野で周知であり、いくつかのスタチンが癌適応について臨床試験にかけられている。コレステロールと癌との関連は、スタチンクラスのコレステロール合成阻害薬を用いた試験により示唆された（Bar E. & Stearns D.（２００８年）、Expert Opin. Investig. Drugs、１７巻（２号）、１８５頁）。スタチンは、ＨＭＧ−ＣｏＡ（酵素３−ヒドロキシ−３−グルタリル補酵素Ａ）レダクターゼに天然基質より約１０００倍効果的に結合する。

スムースンド阻害薬とコレステロール生合成経路阻害薬、ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬及び／又はＧｌｉ阻害薬との組合せ
本発明は、スムースンド阻害薬（例えば、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書で列挙する若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか）と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せを提供する。この組合せは、ａ）遊離形又は薬学的に許容される塩の形の本明細書で開示するスムースンド阻害薬（例えば、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書で列挙する若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか）である第１の剤、並びにｂ）コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）及び／又はＧｌｉ阻害薬を含む少なくとも１つの併用剤、を含む医薬品の組合せ、例えば、キットとして提供することができる。キットは、その投与に関する指示を含みうる。

本発明の組合せについて相乗的効果が可能である。すなわち、スムースンド阻害薬（例えば、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書で列挙する若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか）と、コレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬及び／又はホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害薬との組合せの治療効果は、個別に投与する各阻害薬の治療効果より、又はそれらを併用することの予想される単なる相加効果より有意に大きいことがありうる。いくつかの実施形態において、併用剤を同時に投与する。他の実施形態において、併用剤を逐次的に投与する。

併用投与剤の用量は、用いる剤の固有のタイプ、治療する状態などによって異なる。

「併用（co-administration）」又は「併用投与（combined administration）」という用語又は同様な用語は、本明細書で用いているように、単一患者への選択される治療剤の投与を含むことを意味し、剤が必ずしも同じ投与経路により、又は同時に投与されない治療計画を含むものとする。

「医薬品の組合せ」（pharmaceutical combination）という用語は、本明細書で用いているように、複数の有効成分の混合又は配合により得られる製品を意味し、有効成分の固定及び非固定配合を含む。「固定配合」という用語は、有効成分、例えば、スムースンド阻害薬化合物及び併用剤の両方を単一の実体又は剤形の形で同時に患者に投与することを意味する。「非固定配合」という用語は、有効成分、例えば、スムースンド阻害薬化合物及び併用剤の両方を別個の実体として同時に、並行して、又は特定の時間制限なしに逐次的に患者に投与することを意味し、そのような投与は、患者の体内の２つの化合物の治療上有効なレベルをもたらす。後者は、カクテル療法、例えば、３つ以上の有効成分の投与にも適用される。

医薬組成物の投与
本発明は、癌などのヘッジホッグ関連障害（単数又は複数）の治療的（及び、本発明のより広い態様において、予防的）処置のためのスムースンド阻害薬（例えば、式Ｉ、式ＩＩ若しくは式ＩＩＩの化合物、又は本明細書で列挙する若しくは参照により組み込まれている化合物のいずれか）並びにコレステロール生合成経路阻害薬（例えば、スタチン）、Ｇｌｉ阻害薬及び／又はＰＩ３Ｋ阻害薬を含む医薬組成物の組合せの使用に関する。

一般的に、本発明の方法及び組合せの化合物は、単独又は１つ若しくは複数の治療剤Ｓと組み合わせて、当技術分野で公知の通常及び許容できる方法のいずれかにより治療上有効な量で投与する。治療上有効な量は、疾患の重症度、対象の年齢及び相対的健康、用いる化合物の効力及び他の因子によって広く異なる可能性がある。一般的に、十分な結果は、約０．０３〜２．５ｍｇ／ｋｇ／体重の１日投与量で全身的に得られることが示されている。大型哺乳動物、例えば、ヒトにおける指示された１日投与量は、例えば、１日４回までの分割量で又は遅延剤形で適宜投与される約１０００ｍｇ、好ましくは５００ｍｇ、より好ましくは１００ｍｇの範囲にある。経口投与用の適切な単位剤形は、約１〜５０ｍｇの有効成分を含む。

本発明の方法及び組合せの化合物は、医薬組成物として、任意の通常の経路により、特に経腸的に、例えば、経口的に、例えば、錠剤若しくはカプセル剤の形で、又は、非経口的に、例えば、注射用液剤若しくは懸濁剤の形、局所的に、例えば、ローション剤、ゲル剤、軟膏剤若しくはクリーム剤の形で、又は、鼻若しくは坐剤の形で投与することができる。少なくとも１つの薬学的に許容される担体又は希釈剤とともに遊離形又は薬学的に許容される塩の形の本発明の化合物を含む医薬組成物は、混合、造粒又はコーティング法により従来の方法で製造することができる。例えば、経口組成物は、有効成分並びにａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース及び／又はグリシン；ｂ）滑沢剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウム若しくはカルシウム塩及び／又はポリエチレングリコール；また錠剤用にｃ）結合剤、例えば、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム及び／又はポリビニルピロリドン；所望の場合ｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸若しくはそのナトリウム塩、又は発泡混合物；並びに／或いはｅ）吸収剤、着色剤、着香剤及び甘味料を含む錠剤又はゼラチンカプセル剤でありうる。注射用組成物は、水性等張性液剤又は懸濁剤であってよく、坐剤は、脂肪性乳剤又は懸濁剤から調製することができる。

化合物は、滅菌され、かつ／又は保存、安定化、湿潤若しくは乳化剤、溶解促進剤、浸透圧の調節用の塩及び／又は緩衝剤などの補助剤を含んでいてよい。さらに、それらは、他の治療上有用な物質も含んでいてよい。経皮適用用の適切な製剤は、有効量の本発明の化合物と担体を含む。担体は、宿主の皮膚の通過を促進するための薬理学的に許容される吸収性溶剤を含みうる。例えば、経皮用具は、基材（backing member)、化合物と場合によって担体を含む貯留層、場合によって長時間にわたり制御され、あらかじめ定められた速度で宿主の皮膚に化合物を送達するための速度制御バリア、及び皮膚に該用具を固定するための手段を含む絆創膏の形である。マトリックス経皮製剤も用いることができる。例えば、皮膚及び眼への局所適用用の適切な製剤は、好ましくは当技術分野で周知の水性液剤、軟膏剤、クリーム剤又はゲル剤である。そのようなものは、可溶化剤、安定化剤、等張性促進剤、緩衝剤及び保存剤を含んでいてよい。

本発明は、本発明を例示することを意図し、それに対する制限であると解釈すべきではない以下の代表的な実施例によって、さらに例示するが、限定されない。特に示さない限り、前記実施例では、以下の材料及び方法を用いる。

皮下髄芽腫同種移植片モデルの説明
Ｐｔｃｈ＋／−ｐ５３−／−、Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−又はＰｔｃｈ＋／−マウスにおける自然発生髄芽腫に最初に由来する腫瘍断片から直接解離させたマウス髄芽腫細胞（１．０〜５．０ｘ１０^６）をＨａｒｌａｎｎｕ／ｎｕマウスの右側腹部の皮下に接種した。処置は、移植後約７〜１０日目に開始した。動物を約２５０〜３００ｍｍ^３の範囲の同様な平均腫瘍容積を有する処置群に無作為化した。解析のためにすべての群の腫瘍容積（ｍｍ^３）及び体重（ｇ）を１週当たり２又は３回記録した。用量は、投与時に体重で調整した。処置群間の比較は、ノンパラメトリッククラスカル−ウォリス／ウィルコクスン順位和検定を用いて行った。

同種移植片モデルデータ解析
腫瘍を２次元で径を測定し、容積を式：（長さｘ幅２）／２を用いて計算した。ここで、長さは、２つの測定値の長いほうであり、幅は、短いほうである。処置／対照パーセント（％Ｔ／Ｃ）値は、次の式を用いて計算した：ΔＴｆ−ｉが＞０ならば、％Ｔ／Ｃ＝１００ｘΔＴｆ−ｉ／ΔＣｆ−ｉであり、ΔＴｆ−ｉが＜０ならば（退縮（regression））、％Ｔ／Ｔ０＝１００ｘΔＴｆ−ｉ／Ｔ０である。部分奏効動物（ＰＲ）は、腫瘍が試験の終了時までに初期腫瘍容積の５０％未満であった動物と定義した。試験の終了時までに触知できる腫瘍を有さない動物は、完全奏効動物（ＣＲ）と定義する。

[実施例１: Ｐｔｃｈ＋／−モデルにおいて認められた薬剤耐性]
Ｐｔｃｈ＋／−マウスは、髄芽腫を自然に発現する（Romerら、２００４年）。Ｓｍｏ依存性であることが以前に示された腫瘍を、Ｈｈ経路を阻害する化合物を試験するためのモデルとして用いる。ｐ５３の喪失が髄芽腫の早期発症をもたらし、その発生率を増加させ、Ｐｔｃｈ＋／−ｐ５３−／−マウスの９５％が髄芽腫を発現し、ほとんどが出生から１２週以内に脳腫瘍により死亡する（Wetmore、Eberhart及びCurran、２００１年、Romerら、２００４年）。Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−マウスも高い浸透率及び低い潜伏期を有する髄芽腫を形成する（Briggsら、２００８年）。Ｓｍｏ阻害薬は、Ｐｔｃｈ＋／−ｐ５３−／−マウスにおいて、トランスジェニックモデル（Romerら、２００４年）及びＰｔｃｈ＋／−ｐ５３−／−髄芽腫腫瘍由来の同種移植片モデル（Bermanら、２００２年）の両方において直接的に髄芽腫の発生率を効果的に低下させることが示された。

したがって、対応するトランスジェニックマウス由来であり、ｉｎｖｉｖｏで継代し、長期連続投与後のＰｔｃｈ＋／−ｐ５３−／−、Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−及びＰｔｃｈ＋／−マウス髄芽腫同種移植片モデルにおいて化合物１のｉｎｖｉｖｏでの有効性を評価した。

[実施例１ａ: Ｐｔｃｈ＋／−ｐ５３＋／−髄芽腫同種移植片モデルにおける処置]
Ｐｔｃｈ＋／−ｐ５３＋／−モデルにおける処置は、次のように行った。処置は、移植（５００万個の細胞／動物）後８日目に開始した。化合物１を５ｍｇ／ｋｇｂｉｄ（すなわち、１日２回）、１０ｍｇ／ｋｇｂｉｄ、２０ｍｇ／ｋｇｑｄ（すなわち、１日１回）、２０ｍｇ／ｋｇｂｉｄ、４０ｍｇ／ｋｇｂｉｄ及び８０ｍｇ／ｋｇｂｉｄで合計２５日間ｐｏ（すなわち、経口）投与した。化合物２を１００ｍｇ／ｋｇｂｉｄで２５日間投与した。化合物１の媒体対照は、水中０．５％メチルセルロース、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０であった。最初の群の大きさは、８匹の動物からなっていた。媒体群を処置１０日後に中止させた（腫瘍がマウス体重の１０％超）。動物に合計２６日間の処置のために連続投与した。

２６日間の前記連続投与後（図１）に、腫瘍退縮が投与期間の前半で認められた。しかし、その後、投与を継続したにもかかわらず、腫瘍は再成長した。同様に、１００ｍｇ／ｋｇｂｉｄで投与した化合物２も最初に退縮を、その後、腫瘍成長をもたらした。投与の終了時に再成長腫瘍においてＧｌｉ１ｍＲＮＡの発現を分析したところ、部分的にのみ抑制されたことが示された（媒体対照と比較して６０〜８０％）。内部の以前の試験で、ほぼ１００％のＧｌｉ１ｍＲＮＡ阻害が腫瘍退縮に必要であることが示された。これは、薬力学的マーカーＧｌｉ１ｍＲＮＡによって分析されたように、腫瘍の再成長がヘッジホッグ経路の不十分な阻害に起因することを示唆するものである。

[実施例１ｂ: Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−髄芽腫同種移植片モデルにおける処置]
結果を図２に示す、Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−モデルにおけるフォローアップ試験において、処置を次のように行った。

処置は、移植（５００万個の細胞／動物）後７日目に開始した。化合物１を５ｍｇ／ｋｇｂｉｄ、１０ｍｇ／ｋｇｂｉｄ、２０ｍｇ／ｋｇｑｄ、２０ｍｇ／ｋｇｂｉｄ、４０ｍｇ／ｋｇｂｉｄ及び８０ｍｇ／ｋｇｂｉｄで試験期間中ｐｏ投与した。化合物２を１００ｍｇ／ｋｇｂｉｄで試験期間中投与した。化合物１の媒体対照は、水中０．５％メチルセルロース、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０であった。最初の群の大きさは、８匹の動物からなっていた。媒体群を処置１０日後に中止させた（腫瘍がマウス体重の１０％超）。

Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−モデルにおいて、腫瘍のすべてではないが、一部が、最初の退縮後の再成長の証拠を示した。しかし、持続性完全退縮が動物のサブセットにおいて認められた（表１参照）。持続性の完全寛解（complete response）は、高用量で頻度がより高いと思われた。これは、Ｐｔｃｈ＋／−突然変異を共有しているが、異なる腫瘍サプレッサー突然変異（ｐ５３−／−又はＨｉｃ＋／−）を有する異なる皮下同種移植片マウス腫瘍モデルにおいて、耐性が様々な程度に発生することを示唆するものである。

図２及び表１の両方でわかるように、Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−腫瘍すべてに化合物１を５、１０、２０、４０及び８０ｍｇ／ｋｇｂｉｄ並びに２０ｍｇ／ｋｇｑｄで、化合物２を１００ｍｇ／ｋｇｂｉｄで移植後７日目に開始してｐｏ投与した。表１に示す持続性退縮は、４７日目の試験終了時に依然として存在する完全寛解の例数を表す。

図２において、黒四角は、媒体のみ、ｐｏｂｉｄ（すなわち、経口、１日２回）を表す。点線付きの黒三角は、１００ｍｇ／ｋｇｐｏｂｉｄ投与の化合物２を表す。点線付きの逆黒三角は、５ｍｇ／ｋｇｐｏｂｉｄ投与の化合物１を表す。点線付きの黒ダイヤモンドは、１０ｍｇ／ｋｇｐｏｂｉｄ投与の化合物１を表す。点線付きの黒丸は、２０ｍｇ／ｋｇｐｏｑｄ投与の化合物１を表す。点線付きの白四角は、２０ｍｇ／ｋｇｐｏｂｉｄ投与の化合物１を表す。点線付きの白三角は、４０ｍｇ／ｋｇｐｏｂｉｄ投与の化合物１を表す。点線付きの白逆三角は、８０ｍｇ／ｋｇｐｏｂｉｄ投与の化合物１を表す。

その他の２つのＳｍｏ阻害薬である化合物３及び化合物４を、連続投与時のＰｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−モデルにおけるフォローアップ試験において評価した。両方が最初に腫瘍退縮を誘発し、続いて化合物の存在下で腫瘍の再成長が起こった。次の数の持続性完全退縮が化合物３について次のように認められた：４０ｍｇ／ｋｇｑｄで０／８、４０ｍｇ／ｋｇｂｉｄで３／８、６０ｍｇ／ｋｇｑｄで０／８、８０ｍｇ／ｋｇｑｄで０／８、１００ｍｇ／ｋｇｑｄで３／８（持続性完全退縮は５６日目について示す。マウスに腫瘍移植後１０日目から５６日目まで投与した。）。化合物４（マウスに腫瘍移植後８日目から４３日目まで投与した）については持続性退縮は認められなかった。

[実施例１ｃ: Ｐｔｃｈ＋／−髄芽腫同種移植片モデルにおける処置]
これらの試験において、処置を次のように行い、その結果を図３に示す。

処置は、移植（５００万個の細胞／動物）後７日目に開始した。化合物１を１０ｍｇ／ｋｇｑｄ、２０ｍｇ／ｋｇｑｄ、４０ｍｇ／ｋｇｑｄ、８０ｍｇ／ｋｇｑｄ及び１６０ｍｇ／ｋｇｑｄで試験期間中ｐｏ投与した。化合物２を１００ｍｇ／ｋｇｂｉｄで試験期間中投与した。化合物１の媒体対照は、水中０．５％メチルセルロース、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０であった。最初の群の大きさは、８匹の動物からなっていた。媒体群を処置７日後に中止させた（腫瘍がマウス体重の１０％超）。Ｐｔｃ＋／−Ｈｉｃ＋／−モデルで認められたのと同様な耐性が認められ、完全寛解動物のサブセットが再成長し、他は完全退縮を示した（表２）。表２に示す持続性退縮は、４８日目の試験終了時に依然として存在する完全退縮の例数を表す。

図３において、黒四角は、媒体のみ、ｑｄｂｉｄ（すなわち、経口、１日１回）を表す。点線付きの黒三角は、１０ｍｇ／ｋｇｐｏｑｄ投与の化合物１を表す。点線付きの逆黒三角は、２０ｍｇ／ｋｇｐｏｑｄ投与の化合物１を表す。点線付きの黒ダイヤモンドは、４０ｍｇ／ｋｇｐｏｑｄ投与の化合物１を表す。実線付きの黒丸は、４０ｍｇ／ｋｇｐｏｂｉｄ投与の化合物１を表す。点線付きの白四角は、８０ｍｇ／ｋｇｐｏｑｄ投与の化合物１を表す。点線付きの白三角は、１６０ｍｇ／ｋｇｐｏｑｄ投与の化合物１を表す。点線付きの白逆三角は、２００ｍｇ／ｋｇｐｏｂｉｄ投与の化合物２を表す。

[実施例２: 薬剤耐性のメカニズムの特徴付け]
抵抗性腫瘍と比較して感受性腫瘍（それらの両方の用語は本明細書で定義されている）における遺伝子発現の変化を特徴付けるために、ＲＮＡを、４時間（１回投与）、１６時間（１回投与）及び４８時間（３回投与）、媒体又は化合物１で処理した感受性腫瘍から単離し、並びに抵抗性腫瘍（化合物１の存在下で最初は退縮した（１３日目）が、その後、上述のように薬物の存在下で再成長した）から単離した。処置群につき３つの腫瘍を分析した。感受性腫瘍群は、２０ｍｇ／ｋｇの化合物１で４時間、１６時間及び４８時間処理した腫瘍を含む。抵抗性腫瘍群は、１０ｍｇ／ｋｇｂｉｄ及び８０ｍｇ／ｋｇｂｉｄの化合物１で２６日間処理した腫瘍を含む。

腫瘍試料中のｍＲＮＡ発現をアフィメトリクス（Affymetrix）プロファイリングにより分析した。シグナル伝達経路に従ってデータを分類するＧｅｎｅＧｏ経路プログラムを用いて、発現データを解析した。ヘッジホッグシグナル伝達経路活性を示す遺伝子が、化合物１で４時間、１６時間及び４８時間（h）処理することにより、感受性腫瘍において時間依存的に抑制されたことが示唆された。抵抗性腫瘍（化合物１の存在下で最初は退縮した（１３日目）が、その後、薬物の存在下で再成長した）においては、ヘッジホッグ経路遺伝子の発現が媒体処理腫瘍における発現に近かったことから、化合物１がヘッジホッグ経路遺伝子の発現をもはや十分に阻害しなかったことがわかった。同様な発現パターンがコレステロール生合成経路の遺伝子について認められた。ＰＩ３Ｋ経路活性を示す遺伝子については異なる発現パターンが認められた。化合物１による４、１６及び４８時間の処理時に感受性腫瘍では遺伝子発現の変化は検出されなかった。しかし、感受性腫瘍と比較して、抵抗性腫瘍においてＰＩ３Ｋ経路活性のアップレギュレーションが認められた。

[実施例２ａ: ヘッジホッグ経路再活性化のメカニズムの特徴付け]
１つの提案された作用機序は、抵抗性腫瘍における遺伝子変化が、Ｓｍｏ阻害薬の存在にもかかわらずヘッジホッグ経路の再活性化につながるということである。例は、阻害薬の結合を妨げるＳｍｏ突然変異及び／又はヘッジホッグ経路の再活性化につながるＳｍｏの下流の遺伝子（例えば、Ｓｕｆｕ、Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２）における突然変異である。

ＤＮＡを抵抗性腫瘍及び感受性腫瘍から単離し、配列決定解析を実施した。抵抗性対感受性腫瘍について特異的なＳｕｆｕ、Ｓｍｏ、Ｇｌｉ１及びＧｌｉ２における突然変異は検出されなかった。

３つの感受性及び３つの抵抗性Ｐｔｃｈ＋／−ｐ５３―／−腫瘍からのＤＮＡも単離し、ＡｇｉｌｅｎｔＣＧＨＡｎａｌｙｔｉｃｓ３．２オリゴアッセイを用いてゲノム全体の増幅又は欠失について解析した。Ｐｔｃｈ＋／−ｐ５３―／−マウスの肝臓ＤＮＡを比較として用いた。図４でわかるように、Ｇｌｉ２の増幅が３つの抵抗性腫瘍のうちの２つに検出され、感受性腫瘍のいずれにも検出されなかった。

すべての抵抗性腫瘍におけるＧｌｉ２のコピー数を解析するために、Ｇｌｉ２についての定量的ＰＣＲを開発した（Ｇｌｉ１及びＧｌｉ３についても）。Ｇｌｉ２の増幅がＰｔｃｈ＋／−ｐ５３―／−モデルにおける抵抗性腫瘍の多く（抵抗性腫瘍４４個のうちの２４個）に検出されたが、Ｐｔｃｈ＋／−モデルではより低い程度で検出された（１０％）。Ｇｌｉ２増幅は、Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−モデルには検出されなかった。

データから、下流転写因子Ｇｌｉ２の増幅が抵抗性腫瘍の一部におけるＳｍｏ阻害薬の存在下のヘッジホッグ経路の再活性化の原因である可能性が示唆される。Ｇｌｉ１又はＧｌｉ２に作用する阻害薬は、抵抗性腫瘍の成長を抑制することが可能かもしれない。

[実施例２ｂ: コレステロール生合成経路阻害のメカニズムの特徴付け]
コレステロール生合成経路のアップレギュレーションが抵抗性腫瘍におけるヘッジホッグ経路の再活性化に寄与している可能性がある。オキシステロールは、以前にヘッジホッグ経路におけるシグナル伝達メディエーターとして関係しているとみなされた（Corcoranら（２００６年）、PNAS、１０３巻（２２号）、８４０８頁）。細胞中のオキシステロールレベルの増加は、Ｓｍｏ上の結合部位に対して直接的に競合することにより、又は阻害薬の結合を間接的に妨害することにより、Ｓｍｏ阻害薬によるＳｍｏ活性の阻害を妨害する可能性がある。スタチンによるコレステロール生合成経路の阻害は、抵抗性腫瘍の成長を抑制するか、或いは単独又はスムースンド阻害薬と共同して、耐性の発生を妨げる可能性がある。

感受性及び抵抗性Ｐｔｃｈ＋／−細胞由来の髄芽腫細胞の増殖に対するスタチン（例えば、シンバスタチン、フルスタチン）の効果を「ｅｘ−ｖｉｖｏ髄芽腫増殖アッセイ」を用いて評価した。同種移植ヌードマウスから新しく採取したＰｔｃｈ＋／−ｐ５３−／−、Ｐｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−又はＰｔｃｈ＋／−髄芽腫腫瘍を用いて、Ｓｍｏ阻害薬のｉｎｖｉｔｒｏ効力を評価することを可能にする短期４８時間増殖アッセイが開発された。増殖の読み出しは、３Ｈチミジンの取込みを用いる。該アッセイは、化合物１に対する腫瘍細胞のｉｎｖｉｖｏでの感受性を反映する。感受性腫瘍細胞は、化合物１により抑制され、ＩＣ５０は４ｎＭであったが、抵抗性腫瘍におけるＩＣ５０は、２０μＭより大きかった。

表３においてわかるように、感受性並びに抵抗性腫瘍細胞の両方がコレステロール生合成経路阻害薬シンバスタチンによって抑制され、ＩＣ５０は低ナノモル範囲にある。これにより、スタチンが抵抗性髄芽腫腫瘍のｉｎｖｉｖｏでの成長を抑制することができるだろうこと、又はＳｍｏ阻害薬とスタチンの組合せが耐性の発生を予防することができるだろうことが示唆される。

[実施例２ｃ: ＰＩ３Ｋ経路阻害薬の投与]
ＰＩ３キナーゼの阻害薬である化合物Ａを用いて、髄芽腫におけるＰＩ３キナーゼ経路の役割を評価した。表４に化合物１（式ＩＩのスムースンド阻害薬化合物）、化合物Ａ（式ＡのＰＩ３Ｋ阻害薬化合物）又はその組合せによる髄芽腫の処理の結果を要約する。化合物Ａは、ＰＩ３Ｋの脂質キナーゼ活性を阻害することができる。他の作用のうち、化合物Ａは、感受性及び抵抗性細胞両方における下流エフェクターＡｋｔ及びＳ６のリン酸化及び活性化を阻害することが公知である（図５に示すように）。

感受性及び抵抗性髄芽腫細胞由来の髄芽腫細胞の増殖に対するＰＩ３Ｋ阻害薬（例えば、化合物Ａなどの化合物）の効果を上述の「ｅｘ−ｖｉｖｏ髄芽腫増殖アッセイ」を用いて評価した。表４に示すように、感受性細胞は、化合物１により抑制され、ＩＣ５０が２〜４ｎＭであったが、抵抗性腫瘍ではＩＣ５０は２０μＭより大きかった。しかし、ＰＩ３キナーゼ阻害薬化合物Ａは、同様なＩＣ５０で感受性及び抵抗性腫瘍の両方を抑制した。

図５に示すように、化合物Ａは、感受性及び抵抗性腫瘍の両方におけるＡｋｔ及びＳ６リン酸化を同様な濃度で阻害した。これは、ＰＩ３キナーゼ経路の阻害と増殖の抑制との相関を示すものである。

次に、化合物１と化合物Ａとの組合せをＰｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−髄芽腫同種移植片モデルにおいて検討した。図６Ａに示すように、動物に４０ｍｇ／ｋｇｑｄの化合物１、６０ｍｇ／ｋｇｑｄの化合物Ａ並びに化合物１及び化合物Ａの組合せを投与した。化合物Ａは、媒体対照と比較して腫瘍成長に対する中等度の効果のみを示したが、化合物１は、最初は退縮を誘発したが、腫瘍は再成長し始めた。化合物１と化合物Ａとの組合せで処理した動物では腫瘍再成長は認められなかった。

併用処理は、図６Ｂに示すようにエンドポイント（腫瘍容積＞１５００ｍｍ^３）までの時間の延長をもたらした。媒体対照及び化合物Ａで処理した動物は、それらの腫瘍容積が１５００ｍｍ^３に達したため、それぞれほぼ２０及び２５日目に屠殺しなければならなかった。エンドポイントまでの時間は、化合物１で処理した動物において有意に延長した。併用処理群では、大多数のマウスが試験に留まっていた。同様な結果が化合物１のみで最初の１０日間処理し、続いて化合物Ａによる単剤処理を受けた動物について得られた（データは示さず）。データから、Ｓｍｏ阻害薬とＰＩ３Ｋ阻害薬との併用によって髄芽腫モデルにおける耐性の発生を有意に遅延又は予防することができることがわかる。

次に、化合物１と化合物Ｂとの組合せをＰｔｃｈ＋／−Ｈｉｃ＋／−髄芽腫同種移植片モデルにおいて検討した。図７Ａに示すように、動物に８０ｍｇ／ｋｇｑｄの化合物１、４０ｍｇ／ｋｇｑｄの化合物Ｂ並びに化合物１及び化合物Ｂの組合せを投与した。化合物Ｂは、媒体対照と比較して腫瘍成長に対する効果を示さなかったが、化合物１は、最初は退縮を誘発したが、腫瘍は再成長し始めた。化合物１と化合物Ｂとの組合せで処理した動物における腫瘍再成長は、かなり遅延した。

併用処理は、図７Ｂに示すようにエンドポイント（腫瘍容積＞７００ｍｍ^３）までの時
間の延長をもたらした。媒体対照及び化合物Ｂで処理した動物は、それらの腫瘍容積が７
００ｍｍ^３に達したため、それぞれほぼ１２及び１５日目にエンドポイントに達した。エ
ンドポイントまでの時間は、化合物１で処理した動物において有意に延長した。併用処理
群では、大多数のマウスが試験に留まっていた。データから、Ｓｍｏ阻害薬とＰＩ３Ｋ阻
害薬との併用によって髄芽腫モデルにおける耐性の発生を有意に遅延又は予防することが
できることがわかる。

本発明は以下の態様を含み得る。
［１］
スムースンド阻害薬及びコレステロール生合成経路阻害薬の組合せをそのような治療を
必要とする対象に投与することを含むヘッジホッグ関連障害を治療する方法であって、前
記スムースンド阻害薬が以下の式Ｉ

［式中、
Ｒ２−Ｃ、Ｒ３−Ｃ、Ｒ４−Ｃ又はＲ５−Ｃは、Ｎにより置き換えられていてよく、
ｎは、１、２又は３であり、
Ｒ１は、炭素環式アリール又はヘテロアリールであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、独立に水素、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アル
キルチオ、フルオロ、クロロ、ブロモ、アミノ、置換アミノ、トリフルオロメチル、アシ
ルオキシ、アルキルカルボニル、トリフルオロメトキシ又はシアノであり、
Ｒ６は、水素、場合によって置換されているアルキル、炭素環式又は複素環式アリール
−低級アルキルであり、
Ｒ７は、水素、場合によって置換されているアルキル、炭素環式アリール、ヘテロアリ
ール、炭素環式アリール−低級アルキル、ヘテロアリール−低級アルキル、又は

であり、
式中、
Ｒａは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロ
シクリルであり、
Ｒｂは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロ
シクリルであり、
Ｒｃ及びＲｄは、独立に水素、置換アルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシ
クリルであるか、或いはＲｃ及びＲｄは、低級アルキレン又はＯ、Ｓ、Ｎ−（Ｈ、アルキ
ル、アリールアルキル）により中断された低級アルキレンをともに表し、
Ｒｅは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロ
シクリル、アミノ又は置換アミノである。］の化合物、
並びにその薬学的に許容される塩である、前記方法。
［２］
前記ヘッジホッグ関連障害が癌である、請求項１に記載の方法。
［３］
前記癌が髄芽腫である、請求項２に記載の方法。
［４］
前記コレステロール生合成経路阻害薬がスタチンである、請求項１に記載の方法。
［５］
スムースンド阻害薬及びコレステロール生合成経路阻害薬の組合せをそのような治療を
必要とする対象に投与することを含むヘッジホッグ関連障害を治療する方法であって、前
記スムースンド阻害薬が以下の式ＩＩ

［式中、
Ｙ _１及びＹ _２は、Ｎ及びＣＲ _１０から独立に選択され、Ｒ _１０は、水素、ハロ、Ｃ _１−
_６アルキル、ハロ置換Ｃ _１−６アルキル、Ｃ _１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ _１−６アルコ
キシ及び−ＯＸＮＲ _１０ａＲ _１０ｂから選択され、Ｒ _１０ａ及びＲ _１０ｂは、水素及びＣ
_１−６アルキルから独立に選択され、
Ｒ _１は、シアノ、ハロ、Ｃ _１−６アルキル、ハロ置換Ｃ _１−６アルキル、Ｃ _１−６アル
コキシ、ハロ置換Ｃ _１−６アルコキシ、Ｃ _６−１０アリール、ジメチル−アミノ、Ｃ _１−
_６アルキル−スルファニル及び最大２つのＣ _１−６アルキル基で場合によって置換された
Ｃ _３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、
Ｒ _２及びＲ _５は、水素、シアノ、ハロ、Ｃ _１−６アルキル、ハロ置換Ｃ _１−６アルキル
、Ｃ _１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ _１−６アルコキシ及びジメチルアミノから独立に選択
され、
Ｒ _３及びＲ _４は、水素、ハロ、シアノ、Ｃ _１−６アルキル、ハロ置換Ｃ _１−６アルキル
、Ｃ _１−６アルコキシ及びハロ置換Ｃ _１−６アルコキシから独立に選択されるか、又はＲ
_１及びＲ _２若しくはＲ _１及びＲ _５は、それらの両方が結合しているフェニルと一緒になっ
てＣ _５−１０ヘテロアリールを形成しており、
Ｒ _６及びＲ _７は、水素、Ｃ _１−６アルキル、ハロ置換Ｃ _１−６アルキル、Ｃ _１−６アル
コキシ及びハロ置換Ｃ _１−６アルコキシから独立に選択され、ただし、Ｒ _６及びＲ _７は、
両方が水素ではなく、
Ｒ _８は、水素、ハロ、Ｃ _１−６アルキル、ハロ置換Ｃ _１−６アルキル、Ｃ _１−６アルコ
キシ及びハロ置換Ｃ _１−６アルコキシから選択され、
Ｒ _９は、−Ｓ（Ｏ） _２Ｒ _１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ _１１、−ＮＲ _１２ａＲ _１２ｂ及び−Ｒ _１１
から選択され、Ｒ _１１は、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル及びヘテロシクロ
アルキルから選択され、Ｒ _１２ａ及びＲ _１２ｂは、Ｃ _１−６アルキル及びヒドロキシ置換
Ｃ _１−６アルキルから独立に選択され、
Ｒ _９の前記アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルは、
Ｃ _１−６アルキル、ハロ置換Ｃ _１−６アルキル、Ｃ _１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ _１−６
アルコキシ、Ｃ _６−１０アリール−Ｃ _０−４アルキル、Ｃ _５−１０ヘテロアリール−Ｃ _０
_−４アルキル、Ｃ _３−１２シクロアルキル及びＣ _３−８ヘテロシクロアルキルから独立に
選択される１〜３つの基で場合によって置換することができ、
Ｒ _９の前記アリール−アルキル置換基は、ハロ、Ｃ _１−６アルキル、ハロ置換Ｃ _１−６
アルキル、Ｃ _１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ _１−６アルコキシ及びメチルピペラジニルか
ら独立に選択される１〜３つの基で場合によって置換されている。］の化合物、
並びにそれらの薬学的に許容される塩、水和物及び溶媒和物である、前記方法。
［６］
前記ヘッジホッグ関連障害が癌である、請求項５に記載の方法。
［７］
前記癌が髄芽腫である、請求項６に記載の方法。
［８］
前記コレステロール生合成経路阻害薬がスタチンである、請求項５に記載の方法。
［９］
スムースンド阻害薬及びコレステロール生合成経路阻害薬の組合せをそのような治療を
必要とする対象に投与することを含むヘッジホッグ関連障害を治療する方法であって、前
記スムースンド阻害薬が以下の式ＩＩＩ

［式中、
Ｒ１は、Ｃ _６−１４アリール基であるか、或いは非置換であるか、又は置換されていて
よい５〜１４員ヘテロアリール基であり、
Ｒ２及びＲ３は、独立にＣ _１−８アルキル、Ｃ _１−８アルキルＯＨであるか、又はＲ２
及びＲ３は、結合してＣ _３−１４シクロアルキル基を形成しており、
Ｌは、結合、Ｃ _１−８アルキレン、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９−、−Ｃ _１−８
アルキルＯＨ−、−Ｃ _１−８ハロアルキル−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり
、
Ｘ及びＷは、独立にＮ又はＣＲ５であり、Ｘ又はＷの少なくとも１つがＮであり、
Ｒ７は、Ｃ _６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基又は３〜１４員シクロヘ
テロアルキル基であり、
Ｒ４は、置換されているか、又は非置換であってよい、Ｃ _１−８アルキル、Ｃ _２−８ア
ルケニル、Ｃ _３−１４シクロアルキル、Ｃ _６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリー
ル基、３〜１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ _１−８アルコキシ、ハロ、ＮＲ６Ｒ８、Ｃ
（Ｏ）ＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ８、Ｃ _１−８ハロアルキル、ホルミル、カルバルコキシ
、Ｃ _１−８アルキルＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＳＯ _２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ _１−８アルキルＲ
６、ＮＲ６Ｒ８、ＳＯ _２ＮＲ６Ｒ８、ＯＣＦ _３、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＣＨ _２ＯＣ（Ｏ）Ｎ
Ｒ６Ｒ８、ＣＨ _２ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ _２Ｎ
ＨＳＯ _２Ｒ６、ＣＨ _２ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、ＯＣ（Ｏ）Ｒ６又はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６であり
、
Ｚは、Ｃ _１−８アルキル、ＣＮ、ＯＨ又はハロゲンであり、
ｍ及びｐは、独立に０〜３であり、
Ｙは、結合、Ｃ _１−８アルキレン、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ（ＯＨ）−
又は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０であり、
Ｒ５は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、低級アルキル、ＯＨ、ＯＣＨ _３又はＯＣＦ _３であり、
Ｒ１は、Ｃ _１−８アルキル、Ｃ _６−１４アリール基、Ｃ _１−８ハロアルキル、Ｃ _１−８
アルコキシ、ハロ、ＮＨ _２、ＣＮ、ＯＣＦ _３、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ８、Ｃ（Ｏ）Ｒ６
、ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ６、ＳＯ _２Ｒ６、ＳＯ _２ＮＲ６Ｒ８の１つ又は複数のもの
により置換されていてよく、
Ｒ９及びＲ１０は、独立にＣ _１−８アルキル又はＨであり、
Ｒ６及びＲ８は、独立にＨ、Ｃ _１−８アルキル、Ｃ _２−８アルケニル、Ｃ _３−１４シク
ロアルキル、Ｃ _６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘ
テロアルキル基、Ｃ _１−８ハロアルキル、Ｃ _１−８アルキルＯＨ、Ｃ _１−８アルコキシで
あるか、或いは１個の原子上の２つのＲ６がヘテロ原子を含む環を形成していてよく、及
び
Ｒ４、Ｒ６及びＲ８は、非置換であるか、或いはＣ _１−８アルキル、Ｃ _３−１４シクロ
アルキル、Ｃ _６−１４アリール基、５〜１４員ヘテロアリール基、３〜１４員シクロヘテ
ロアルキル基、Ｃ _１−８アルキルＯＨ、ＯＨ、オキソ、Ｃ _１−８ハロアルキル、カルボキ
シＣ _１−８アルキル又はＳＯ _２Ｃ _１−８アルキル、ハロ、−ＯＣＨ _３、−ＯＣＦ _３、−Ｏ
Ｈ、−ＮＨ _２の１つ又は複数のものにより置換されていてよい。］の化合物である、前記
方法。
［１０］
前記ヘッジホッグ関連障害が癌である、請求項９に記載の方法。
［１１］
前記癌が髄芽腫である、請求項１０に記載の方法。
［１２］
前記コレステロール生合成経路阻害薬がスタチンである、請求項９に記載の方法。
［１３］
請求項１、５又は９に記載のスムースンド阻害薬並びにＧｌｉ阻害薬及びＰＩ３Ｋ阻害
薬の群から選択される１つ又は複数のものの組合せをそのような治療を必要とする対象に
投与することを含むヘッジホッグ関連障害を治療する方法であって、前記スムースンド阻
害薬が以下の式Ｉ

であり、
式中、
Ｒａは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロ
シクリルであり、
Ｒｂは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロ
シクリルであり、
Ｒｃ及びＲｄは、独立に水素、置換アルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロシ
クリルであるか、或いはＲｃ及びＲｄは一緒に、低級アルキレン又はＯ、Ｓ、Ｎ−（Ｈ、
アルキル、アリールアルキル）により中断された低級アルキレンを表し、
Ｒｅは、場合によって置換されているアルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロ
シクリル、アミノ又は置換アミノである。］の化合物、
並びにその薬学的に許容される塩である、前記方法。
［１４］
前記ヘッジホッグ関連障害が癌である、請求項１３に記載の方法。
［１５］
前記癌が髄芽腫である、請求項１４に記載の方法。
［１６］
前記Ｇｌｉ阻害薬がＧＡＮＴ６１及びＧＡＮＴ５８から選択される、請求項１３に記載
の方法。
［１７］
前記Ｇｌｉ阻害薬がゼルンボン、ゼルンボンエポキシド、スタウロスポリノン、６−ヒ
ドロキシスタウロスポリノン、アルシリアフラビンＣ及び５，６−ジヒドロキシアルシリ
アフラビンＡ、フィサリンＦ及びフィサリンＢから選択される、請求項１３に記載の方法
。
［１８］
前記ＰＩ３Ｋ阻害薬が以下の式Ａ

又はそれらの塩から選択される化合物である、請求項１３に記載の方法［式中、Ｗは、
ＣＲｗ又はＮであり、Ｒｗは、からなる群から選択され、ＷはＣＲ _ｗ又はＮであり、Ｒ _ｗ
は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ハロゲン、
（４）メチル、
（５）トリフルオロメチル、
（６）スルホンアミド、
からなる群から選択され、
Ｒ１は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）置換及び非置換アルキル、
（６）置換及び非置換アルケニル、
（７）置換及び非置換アルキニル、
（８）置換及び非置換アリール、
（９）置換及び非置換ヘテロアリール、
（１０）置換及び非置換ヘテロシクリル、
（１１）置換及び非置換シクロアルキル、
（１２）−ＣＯＲ１ａ、
（１３）−ＣＯ２Ｒ１ａ、
（１４）−ＣＯＮＲ１ａＲ１ｂ、
（１５）−ＮＲ１ａＲ１ｂ、
（１６）−ＮＲ１ａＣＯＲ１ｂ、
（１７）−ＮＲ１ａＳＯ２Ｒ１ｂ、
（１８）−ＯＣＯＲ１ａ、
（１９）−ＯＲ１ａ、
（２０）−ＳＲ１ａ、
（２１）−ＳＯＲ１ａ、
（２２）−ＳＯ２Ｒ１ａ及び
（２３）−ＳＯ２ＮＲ１ａＲ１ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ１ａ及びＲ１ｂは、
（ａ）水素、
（ｂ）置換又は非置換アルキル、
（ｃ）置換及び非置換アリール、
（ｄ）置換及び非置換ヘテロアリール、
（ｅ）置換及び非置換ヘテロシクリル及び
（ｆ）置換及び非置換シクロアルキル
からなる群から独立に選択され、
Ｒ２は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）ヒドロキシ、
（６）アミノ、
（７）置換又は非置換アルキル、
（８）−ＣＯＲ２ａ及び
（９）−ＮＲ２ａＣＯＲ２ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ２ａ及びＲ２ｂは、
（ａ）水素及び
（ｂ）置換又は非置換アルキル
からなる群から独立に選択され、
Ｒ３は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）置換又は非置換アルキル、
（６）置換又は非置換アルケニル、
（７）置換又は非置換アルキニル、
（８）置換又は非置換アリール、
（９）置換又は非置換ヘテロアリール、
（１０）置換又は非置換ヘテロシクリル、
（１１）置換又は非置換シクロアルキル、
（１２）−ＣＯＲ３ａ、
（１３）−ＮＲ３ａＲ３ｂ、
（１４）−ＮＲ３ａＣＯＲ３ｂ、
（１５）−ＮＲ３ａＳＯ２Ｒ３ｂ、
（１６）−ＯＲ３ａ、
（１７）−ＳＲ３ａ、
（１８）−ＳＯＲ３ａ、
（１９）−ＳＯ２Ｒ３ａ及び
（２０）−ＳＯ２ＮＲ３ａＲ３ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ３ａ及びＲ３ｂは、
（ａ）水素、
（ｂ）置換又は非置換アルキル、
（ｃ）置換及び非置換アリール、
（ｄ）置換及び非置換ヘテロアリール、
（ｅ）置換及び非置換ヘテロシクリル及び
（ｆ）置換及び非置換シクロアルキル
からなる群から独立に選択され、
Ｒ４は、
（１）水素及び
（２）ハロゲン
からなる群から選択される。］。
［１９］
前記ＰＩ３Ｋ阻害薬が以下の式Ｂ

［式中、
Ｒ _１は、ナフチル又はフェニルであり、前記フェニルは、
ハロゲン、
非置換又はハロゲン、シアノ、イミダゾリル若しくはトリアゾリルにより置換された低
級アルキル、
シクロアルキル、
低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコキシ及び低級アルコキシ低級アル
キルアミノからなる群から独立に選択される１つ又は２つの置換基により置換されたアミ
ノ、
非置換又は低級アルキル及び低級アルキルスルホニルからなる群から独立に選択される
１つ又は２つの置換基により置換されたピペラジニル、
２−オキソ−ピロリジニル、
低級アルコキシ低級アルキル、
イミダゾリル、
ピラゾリル、
並びにトリアゾリル
からなる群から独立に選択される１つ又は２つの置換基により置換されており、
Ｒ _２は、Ｏ又はＳであり、
Ｒ _３は、低級アルキルであり、
Ｒ _４は、非置換又はハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシにより置換され
たピリジル或いは非置換又は低級アルキルにより置換されたピペラジニル、
非置換又は低級アルコキシにより置換されたピリミジニル、
非置換又はハロゲンにより置換されたキノリニル、
キノキサリニル
或いはアルコキシにより置換されたフェニルであり、
Ｒ _５は、水素又はハロゲンであり、
ｎは、０又は１であり、
Ｒ _６は、オキシドであり、
ただし、ｎ＝１である場合、基Ｒ _６を有するＮ原子は、正電荷を有し、
Ｒ _７は、水素又はアミノである。］から選択される化合物
又はその互変異性体、又はその薬学的に許容される塩、又はその水和物若しくは溶媒和
物である、請求項１３に記載の方法。
［２０］
前記癌が抵抗性腫瘍に起因する、請求項２、６、１０及び１４のいずれか一項に記載の
方法。
［２１］
スムースンド阻害薬及びコレステロール生合成経路阻害薬の組合せをそのような治療を
必要とする対象に投与することを含み、前記スムースンド阻害薬がＮ−［４−クロロ−３
−（６−ジメチルアミノ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−３，５
−ジメトキシ−ベンズアミドである、ヘッジホッグ関連障害を治療する方法。
［２２］
前記ヘッジホッグ関連障害が癌である、請求項２１に記載の方法。
［２３］
前記癌が抵抗性腫瘍に起因する、請求項２２に記載の方法。
［２４］
スムースンド阻害薬及びコレステロール生合成経路阻害薬の組合せをそのような治療を
必要とする対象に投与することを含み、前記スムースンド阻害薬が２−クロロ−Ｎ−（４
−クロロ−３−（ピリジン−２−イル）フェニル）−４−（メチルスルホニル）ベンズア
ミドである、ヘッジホッグ関連障害を治療する方法。
［２５］
前記ヘッジホッグ関連障害が癌である、請求項２４に記載の方法。
［２６］
前記癌が抵抗性腫瘍に起因する、請求項２５に記載の方法。
［２７］
スムースンド阻害薬と、Ｇｌｉ阻害薬及びＰＩ３Ｋ阻害薬の群から選択される１つ又は
複数のものとの組合せをそのような治療を必要とする対象に投与することを含み、前記ス
ムースンド阻害薬がＮ−［４−クロロ−３−（６−ジメチルアミノ−１Ｈ−ベンゾイミダ
ゾール−２−イル）−フェニル］−３，５−ジメトキシ−ベンズアミドである、ヘッジホ
ッグ関連障害を治療する方法。
［２８］
前記ヘッジホッグ関連障害が癌である、請求項２７に記載の方法。
［２９］
前記癌が抵抗性腫瘍に起因する、請求項２８に記載の方法。
［３０］
スムースンド阻害薬と、Ｇｌｉ阻害薬及びＰＩ３Ｋ阻害薬の群から選択される１つ又は
複数のものとの組合せをそのような治療を必要とする対象に投与することを含み、前記ス
ムースンド阻害薬が２−クロロ−Ｎ−（４−クロロ−３−（ピリジン−２−イル）フェニ
ル）−４−（メチルスルホニル）ベンズアミドである、ヘッジホッグ関連障害を治療する
方法。
［３１］
前記ヘッジホッグ関連障害が癌である、請求項３０に記載の方法。
［３２］
前記癌が抵抗性腫瘍に起因する、請求項３１に記載の方法。

Claims

スムースンド阻害薬及びＰＩ３キナーゼ阻害薬を含む、患者におけるヘッジホッグ関連癌または腫瘍を治療するための併用医薬であって、
前記スムースンド阻害薬が、２−メチル−４’−トリフルオロメトキシ−ビフェニル−３−カルボン酸［６−（cis−２，６−ジメチル−モルホリン−４−イル）−ピリジン−３−イル］−アミドまたはそれらの薬学的に許容される塩であり、
前記ＰＩ３キナーゼ阻害薬が、５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル、８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン、またはそれらの薬学的に許容される塩であり、
前記ヘッジホッグ関連癌または腫瘍が、髄芽腫、神経膠芽腫および神経膠腫から選択される脳の癌または腫瘍である、併用医薬。
前記患者が髄芽腫を有する、請求項１に記載の併用医薬。
前記患者が神経膠芽腫を有する、請求項１に記載の併用医薬。
前記患者が神経膠腫を有する、請求項１に記載の併用医薬。