JP5727364B2 - 紫外線障害軽減組成物 - Google Patents

Description

本発明は、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、紫外線障害軽減組成物と、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を投与するステップを含む紫外線暴露による皮膚疾患及び皮膚の美容状態の改善方法と、前記化合物を投与するステップを含む白内障を治療及び／又は予防する方法とに関する。

紫外線は、約３２０ｎｍより長い長波長域紫外線（ＵＶ−Ａ）と、約３２０〜約２８０ｎｍの中波長域紫外線（ＵＶ−Ｂ）と、約２８０ｎｍより短い短波長域紫外線（ＵＶ−Ｃ）とに分類される。このうちＵＶ−Ｃはオゾン層に吸収されるので地上に達する太陽光には含まれない。ＵＶ−Ａはオゾン層に吸収されず、地上に達する紫外線の大部分を占める。また、ＵＶ−Ｂはオゾン層に一部が吸収されるが、ＵＶ−Ａの１０００分の１の光量で皮膚障害を起こす。したがって、ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂはともに皮膚障害の主な原因として重要である。非特許文献１によると、紫外線が関与する疾病には、シワ、紅斑、色素性乾皮症、慢性光線性皮膚炎、扁平上皮癌、基底細胞癌、悪性黒色腫、Ｂｏｗｅｎ病、日光角化症、光線過敏症、種痘様水疱症及び光接触皮膚炎が、非特許文献２によると、日光皮膚炎、慢性光線皮膚症、光線角化症、光線口唇炎、Ｆａｖｒｅ−Ｒａｃｏｕｃｈｏｔ病、光線過敏症、光接触皮膚炎、ベルロック皮膚炎、光線過敏性薬疹、多形日光疹、種痘様水泡症、日光蕁麻疹、慢性光線過敏性皮膚炎、色素性乾皮症、雀卵斑、ポルフィリン症、ペラグラ、Ｈａｒｔｎｕｐ病、日光角化症、皮膚筋炎、扁平苔癬、Ｄａｒｉｅｒ病、毛孔性紅色粃糠疹、酒さ、アトピー性皮膚炎、肝斑、単純性疱疹及びエリテマトーデス等が挙げられる。

皮膚疾患最新の治療 ２００５−２００６（南江堂） 標準皮膚科学 第７版（医学書院）

従来の紫外線による皮膚障害の予防及び／又は治療剤は、紫外線の皮膚吸収を阻害する酸化チタンのような紫外線散乱剤やパラメトキシケイ皮酸２エチルヘキシルのような紫外線吸収剤か、紫外線によって発生した遊離ラジカルを除去する抗酸化剤かが知られている。しかし、紫外線散乱剤、紫外線吸収剤は屋外での日焼け止めには有効だが、日常的に使用するものではない。また、抗酸化剤は安定性及び安全性に問題がある。さらに、紫外線による皮膚障害に対する治療剤は対症療法剤しか知られていない。そこで、日常的に使用でき、安定かつ安全な紫外線障害の予防及び／又は治療剤と、これを含む医薬品、化粧品及び食品とを開発する必要がある。

本発明は、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、紫外線障害軽減組成物を提供する。

本発明の紫外線障害軽減組成物は、皮膚外用剤として適用される場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物において、前記皮膚外用剤は化粧品として用いられる場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物において、前記化粧品はシワ抑制剤の場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物において、前記化粧品は日焼け止め剤の場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物において、前記皮膚外用剤は皮膚疾患用医薬品として用いられる場合がある。

前記皮膚疾患は、紅斑、日光皮膚炎、慢性光線皮膚症、光線角化症、光線口唇炎、Ｆａｖｒｅ−Ｒａｃｏｕｃｈｏｔ病、光線過敏症、光接触皮膚炎、ベルロック皮膚炎、光線過敏性薬疹、多形日光疹、種痘様水泡症、日光蕁麻疹、慢性光線過敏性皮膚炎、色素性乾皮症、雀卵斑、ポルフィリン症、ペラグラ、Ｈａｒｔｎｕｐ病、日光角化症、皮膚筋炎、扁平苔癬、Ｄａｒｉｅｒ病、毛孔性紅色粃糠疹、酒さ、アトピー性皮膚炎、肝斑、単純性疱疹、エリテマトーデス、扁平上皮癌、基底細胞癌及びＢｏｗｅｎ病からなるグループから選択される場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物において、前記皮膚疾患用医薬品は皮膚疾患用治療剤の場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物において、前記皮膚疾患用医薬品は皮膚疾患用予防剤の場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物は、食品として用いられる場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物は、白内障用医薬品として用いられる場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物において、前記白内障用医薬品は、白内障用治療剤又は白内障用予防剤の場合がある。

本発明の紫外線障害軽減組成物は、点眼薬として適用される場合がある。

前記白内障は老人性白内障の場合がある。

本発明は、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む組成物を投与するステップを含む、紫外線暴露による皮膚疾患を治療及び／又は予防する方法を提供する場合がある。前記皮膚疾患は、紅斑、日光皮膚炎、慢性光線皮膚症、光線角化症、光線口唇炎、Ｆａｖｒｅ−Ｒａｃｏｕｃｈｏｔ病、光線過敏症、光接触皮膚炎、ベルロック皮膚炎、光線過敏性薬疹、多形日光疹、種痘様水泡症、日光蕁麻疹、慢性光線過敏性皮膚炎、色素性乾皮症、雀卵斑、ポルフィリン症、ペラグラ、Ｈａｒｔｎｕｐ病、日光角化症、皮膚筋炎、扁平苔癬、Ｄａｒｉｅｒ病、毛孔性紅色粃糠疹、酒さ、アトピー性皮膚炎、肝斑、単純性疱疹、エリテマトーデス、扁平上皮癌、基底細胞癌及びＢｏｗｅｎ病からなるグループから選択される場合がある。

本発明は、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む組成物を投与するステップを含む、皮膚の美容状態の改善方法を提供する場合がある。前記皮膚の美容状態の改善方法において、前記Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む組成物は化粧品組成物又は食品組成物の場合がある。

本発明の皮膚の美容状態の改善方法において、皮膚の美容状態の改善とは、シワ抑制及び／又は日焼け止めの場合があるが、これらに限定されない。

本発明は、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む組成物を投与するステップを含む、白内障を治療及び／又は予防する方法を提供する。

本発明の白内障を治療及び／又は予防する方法において、前記白内障用医薬品は点眼薬の場合がある。

本発明の白内障を治療及び／又は予防する方法において、前記白内障は老人性白内障の場合がある。

本明細書において「塩」とは、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの紫外線障害の軽減効果を損なわないことを条件として、金属塩、アミン塩等を含むいずれかの塩をいう。前記金属塩は、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等を含む場合がある。前記アミン塩は、トリエチルアミン塩、ベンジルアミン塩等を含む場合がある。

本明細書において「それらの誘導体」とは、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの紫外線障害の軽減効果を損なわないことを条件として、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインか、アミノ基か、カルボキシル基か、側鎖かにおいて、いずれかの原子団と共有結合したものを指す。前記いずれかの原子団は、Ｎ−フェニルアセチル基、４，４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）基等のような保護基と、タンパク質、ペプチド、糖、脂質、核酸等のような生体高分子と、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリビニル、ポリエステル等のような合成高分子と、エステル基等のような官能基とを含むがこれらに限定されない。前記エステル基は、例えば、メチルエステル、エチルエステルその他の脂肪族エステルか、芳香族エステルかを含む場合がある。

アミノ酸には光学異性体としてＬ−体とＤ−体とがあるが、天然のタンパク質はＬ−アミノ酸がペプチド結合したものであり、細菌の細胞壁などの例外を除きＬ−アミノ酸のみが利用されていることから、ヒトを始めとする哺乳類にはＬ−アミノ酸のみが存在し、Ｌ−アミノ酸のみを利用していると考えられてきた。（木野内忠稔ら、蛋白質 核酸 酵素、５０：４５３−４６０ （２００５）、レーニンジャーの新生化学［上］第２版 ｐｐ１３２−１４７ （１９９３） 廣川書店、ハーパー・生化学 原書２２版 ｐｐ２１−３０（１９９１） 丸善）したがって、従前より、学術的にも産業的にもアミノ酸としてはＬ−アミノ酸のみが専ら使用されてきた。

例外的にＤ−アミノ酸が使用されるケースとしては、細菌に産生させる抗生物質の原料として使用する場合、およびアミノ酸を化学合成した際に等量得られるＬ−アミノ酸とＤ−アミノ酸混合物からＬ−アミノ酸のみを分取するコストを省くために、そのままＤＬ−アミノ酸混合物としてＤ−アミノ酸を使用している食品添加物の例がある。しかし、遊離あるいは単体のＤ−アミノ酸そのものを生理活性を持つ物質として産業的に使用している例は従来なかった。

近年、ヒトにおいてＤ−セリン、Ｄ−アスパラギン酸に生理作用があることが報告され、ヒトでもＤ−セリンラセマーゼが存在していることが明らかになるなど、哺乳類においてもＤ−アミノ酸が体内に存在して生理作用を発揮していることが明らかとなったが、ヒトにおいて生理作用が報告されているＤ−セリンとＬ−セリン、Ｄ−アスパラギン酸とＬ−アスパラギン酸は全く異なる生理作用を示すことから、Ｄ−アミノ酸はＬ−アミノ酸とは異なる物質として扱うべきことは明らかであり、従来知られていたアミノ酸に関する知見はＬ−アミノ酸に関する知見として理解することができる。

以下の実施例に示すとおり、Ｌ−プロリンには紫外線障害を軽減する効果はなく、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインについて紫外線障害を軽減する効果もこれまで知られていなかった。したがって本発明のＤ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システイン等からなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む紫外線障害軽減組成物は新規発明である。

近年、ｄｄＹマウスに１０ｍＭのＤ−アミノ酸水溶液を２週間自由摂取させた後、各器官でＤ−アミノ酸濃度を測定したところ、松果体では松果体１腺あたり３−１０００ｐｍｏｌであり、脳組織では湿重量１グラムあたり２−５００ｎｍｏｌであることが報告された（Ｍｏｒｉｋａｗａ，Ａ．ら、Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ，３２：１３−２０（２００７））。これに基づいて、以下に説明する本発明の組成物に含まれるＬ−又はＤ−グルタミン酸と、Ｄ−プロリンと、Ｌ−又はＤ−システインとの一日摂取量の下限が算出された。

本発明のＬ−及びＤ−グルタミン酸は、以下の実施例に示すとおり、単体で培養ヒトケラチノサイト及び線維芽細胞に対して０．１〜１００μＭの濃度範囲で紫外線障害を軽減する効果を有する。したがって、本発明の医薬品組成物と、シワ抑制剤及び日焼け止め剤と、化粧品組成物と、食品組成物とを含む本発明の組成物に含まれるＬ−及び／又はＤ−グルタミン酸の量は、この濃度範囲のＬ−及び／又はＤ−グルタミン酸単体が生体皮膚組織のケラチノサイト又は線維芽細胞に送達されることを条件として、いかなる含有量であってもかまわない。本発明の組成物が外用剤の場合におけるＬ−及び／又はＤ−グルタミン酸の含有量は、本発明の組成物全量中０．００００１５重量％から１０重量％か配合可能な最大重量濃度かまでの範囲であればよい。すなわち前記組成物が外用剤の場合におけるＬ−及び／又はＤ−グルタミン酸の含有量は、０．００００３重量％〜０．３重量％が望ましく、０．０００３重量％〜０．０３重量％が最も望ましい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＬ−及び／又はＤ−グルタミン酸の含有量は、０．００００１重量％〜１００重量％の範囲であればよい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＬ−及び／又はＤ−グルタミン酸の含有量は、０．００００２重量％〜８０重量％が望ましく、０．０００２重量％〜６０重量％であることが最も望ましい。なお、本発明の組成物に含まれるＤ−グルタミン酸の一日摂取量の下限は、体重１ｋｇあたり０．０１ｎｇであればよく、０．１ｎｇが好ましく、１ｎｇがより好ましい。本発明の組成物に含まれるＬ−グルタミン酸の一日摂取量の下限は、臨床薬の投与量（体重１ｋｇあたり８０ｍｇ以上）より少ない量であって、体重１ｋｇあたり０．１ｍｇであればよく、１ｍｇが好ましく、１０ｍｇがより好ましい。

本発明のＤ−プロリンは、以下の実施例に示すとおり、単体で培養ヒト線維芽細胞に対して０．０１〜１μＭの濃度範囲で紫外線障害を軽減する効果を有する。したがって、本発明の医薬品組成物と、シワ抑制剤及び日焼け止め剤と、化粧品組成物と、食品組成物とに含まれるＤ−プロリンの量は、この濃度範囲のＤ−プロリン単体が生体皮膚組織の線維芽細胞に送達されることを条件として、いかなる含有量であってもかまわない。本発明の組成物が外用剤の場合におけるＤ−プロリンの含有量は、本発明の組成物全量中０．００００１５重量％から５０重量％か配合可能な最大重量濃度かまでの範囲であればよい。すなわち前記組成物が外用剤の場合におけるＤ−プロリンの含有量は、０．００００３重量％〜３０重量％が望ましく、０．０００３重量％〜３重量％が最も望ましい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＤ−プロリンの含有量は、０．００００１重量％〜１００重量％の範囲であればよい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＤ−プロリンの含有量は、０．００００２重量％〜８０重量％が望ましく、０．０００２重量％〜６０重量％であることが最も望ましい。なお、本発明の組成物に含まれるＤ−プロリンの一日摂取量の下限は、体重１ｋｇあたり０．０１ｎｇであればよく、０．１ｎｇが好ましく、１ｎｇがより好ましい。

本発明のＬ−及びＤ−システインは、以下の実施例に示すとおり、単体で培養ヒトケラチノサイト及び線維芽細胞に対して０．１〜１００μＭの濃度で紫外線障害を軽減する効果を有する。したがって、本発明の医薬品組成物と、シワ抑制剤及び日焼け止め剤と、化粧品組成物と、食品組成物とを含む本発明の組成物に含まれるＬ−及び／又はＤ−システインの量は、この濃度のＬ−及び／又はＤ−システイン単体が生体皮膚組織のケラチノサイト又は線維芽細胞に送達されることを条件として、いかなる含有量であってもかまわない。本発明の組成物が外用剤の場合におけるＬ−及び／又はＤ−システインの含有量は、本発明の組成物全量中０．００００１５重量％から１０重量％か配合可能な最大重量濃度かまでの範囲であればよい。すなわち前記組成物が外用剤の場合におけるＬ−及び／又はＤ−システインの含有量は、０．００００３重量％〜０．３重量％が望ましく、０．０００３重量％〜０．０３重量％が最も望ましい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＬ−及び／又はＤ−システインの含有量は、０．００００１重量％〜１００重量％の範囲であればよい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＬ−及び／又はＤ−システインの含有量は、０．００００２重量％〜８０重量％が望ましく、０．０００２重量％〜６０重量％であることが最も望ましい。なお、本発明の組成物に含まれるＤ−システインの一日摂取量の下限は、体重１ｋｇあたり０．０１ｎｇであればよく、０．１ｎｇが好ましく、１ｎｇがより好ましい。本発明の組成物に含まれるＬ−システインの一日摂取量の下限は、臨床薬の投与量（体重１ｋｇあたり３ｍｇ以上）より少ない量であって、体重１ｋｇあたり０．０１ｍｇであればよく、０．１ｍｇが好ましく、１ｍｇがより好ましい。

本発明の医薬品組成物は、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの単体と、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの塩と、生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインを放出できる誘導体とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物に加えて、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの紫外線障害の軽減効果を損なわないことを条件として、さらに１種類又は２種類以上の薬学的に許容される添加物を含む場合がある。前記添加物は、希釈剤及び膨張剤と、結合剤及び接着剤と、滑剤と、流動促進剤と、可塑剤と、崩壊剤と、担体溶媒と、緩衝剤と、着色料と、香料と、甘味料と、防腐剤及び安定化剤と、吸着剤と、当業者に知られたその他の医薬品添加剤とを含むが、これらに限られない。

本発明のシワ抑制剤及び／又は日焼け止め剤は、有効成分として、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの単体、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの塩及び／又は生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインを放出できる誘導体のみを使用して調製することも可能であるが、通常本発明の効果を損なわない範囲で、医薬部外品を含む化粧品や医薬品等の皮膚外用剤等に用いられる他の成分を、必要に応じて適宜配合することができる。前記他の成分（任意配合成分）としては、例えば、油分、界面活性剤、粉末、色材、水、アルコール類、増粘剤、キレート剤、シリコーン類、酸化防止剤、紫外線吸収剤、保湿剤、香料、各種薬効成分、防腐剤、ｐＨ調整剤、中和剤等が挙げられる。

本発明の皮膚外用剤及び化粧品組成物とは、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等、従来皮膚外用剤及び化粧品組成物に用いるものであればいずれでもよく、剤型は特に問わない。

本発明の化粧品組成物は、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの紫外線障害の軽減効果を損なわないことを条件として、医薬部外品を含む化粧品や医薬品等の皮膚外用剤等に用いられる他の成分を、必要に応じて適宜配合することができる。前記他の成分（任意配合成分）としては、例えば、油分、界面活性剤、粉末、色材、水、アルコール類、増粘剤、キレート剤、シリコーン類、酸化防止剤、紫外線吸収剤、保湿剤、香料、各種薬効成分、防腐剤、ｐＨ調整剤、中和剤等が挙げられる。

本発明の食品組成物は、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの単体、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの塩及び／又は生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインを放出できる誘導体に加えて、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインの紫外線障害の軽減効果を損なわないことを条件として、調味料、着色料、保存料その他の食品として許容される成分を含む場合がある。

本発明の食品組成物は、例えば、清涼飲料、グミ、キャンディー、錠菓等、従来食品組成物に用いるものであればいずれでもよく、前記例示に限定されるものでない。

紫外線曝露は皮膚疾患だけでなく眼疾患、特に、白内障の原因の１つであると考えられている。マウスでは長時間紫外線曝露が水晶体の前部皮質に白濁を生じさせ、実験的に白内障モデルを作製することができることが知られている（前里多佳美及び岩田修造、「水晶体 その生化学的機構」、３１８−３２３頁、岩田修造編、メディカル葵出版、東京（１９８６））。また、老人性白内障の原因の１つは紫外線である考えられており（藤永豊、「白内障 眼科ＭＯＯＫ Ｎｏ．１７」、１０頁、三島濟一ら編、金原出版、東京（１９８２））、Ｚｉｇｍａｎらは、マニラ、タンパ及びロチェスターでの疫学的調査によって、紫外線の照射量と、白内障の発生率とに相関があり、紫外線は白内障のリスク因子であることを示した（Ｚｉｇｍａｎ， Ｓ．ら、Ｉｎｖｅｓｔ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ． Ｖｉｓｕａｌ Ｓｃｉ．１８：４６２−４６７（１９７９））。したがって、これらの知見と、以下の実施例とによれば、紫外線障害を軽減する効果を有するＤ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン及びＬ−システインは、白内障の予防又は治療に有効である。

正常ヒト表皮角化細胞でのＤ−グルタミン酸処理の効果を示すグラフ。 正常ヒト真皮線維芽細胞での紫外線照射後のＤ−プロリン処理の効果を示すグラフ。 正常ヒト真皮線維芽細胞での紫外線照射前のＤ−プロリン処理の効果を示すグラフ。 正常ヒト真皮線維芽細胞での紫外線照射前のＤ−プロリン処理及びグルタミン酸処理の効果を示すグラフ。 正常ヒト表皮角化細胞でのシステイン処理の効果を示すグラフ。 ＸＰ細胞でのＬ−及びＤ−グルタミン酸処理の効果を示すグラフ。 ＸＰ細胞でのＬ−及びＤ−プロリン処理の効果を示すグラフ。 ＸＰ細胞でのＬ−及びＤ−システイン処理の効果を示すグラフ。

以下に説明する本発明の実施例は例示のみを目的とし、本発明の技術的範囲を限定するものではない。本発明の技術的範囲は特許請求の範囲の記載によってのみ限定される。

Ｄ−グルタミン酸の紫外線障害軽減効果
細胞
細胞は、市販のヒト新生児表皮角化細胞（Ｃｒｙｏ ＮＨＥＫ−Ｎｅｏ、三光純薬）が用いられた。前記細胞は２ｘ１０^５個／ｍＬとなるように市販のタイプＩコラーゲンでコートされた３５ｍｍ径の培養ディッシュ（ＣＯＬ１、旭テクノグラス）に播種され、市販の無血清培地（Ｄｅｆｉｎｅｄ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ−ＳＦＭ、Ｇｉｂｃｏ社、以下、「通常培地１」という。）を用いて培養された。前記細胞は、２日ごとに培地を交換してコンフルエントになるまで３７°Ｃ、５％ＣＯ_２及び飽和水蒸気雰囲気下で５ないし７日間培養された。

紫外線照射前にグルタミン酸を添加する処理（以下、「前処理」という。）の効果を検討する場合には、照射２４時間前に０．１ないし１００μＭのＬ−又はＤ−グルタミン酸を添加した培地に切り替えた。

紫外線照射
ＵＶ―Ｂ照射前に培地はＰＢＳ１ｍＬに置換された。ＵＶ―Ｂ照射は、自作の紫外光露光装置（紫外線蛍光灯、東芝メディカルサプライ ＴＯＲＥＸ ＦＬ２０Ｓ−Ｅ−３０／ＤＭＲ、２本）を用いて、培養ディッシュの蓋を除去した状態で該培養ディッシュの４０ｃｍ上部から２８０ｎｍないし３２０ｎｍの紫外線を７５Ｊ／ｃｍ^２で照射して実施された。紫外線量はＵＶ ＲＡＤＩＯＭＥＴＥＲ ＵＶＲ−３０３６／Ｓ（株式会社トプコン）を用いて測定された。

紫外線照射処理された細胞は、通常培地１に戻して２１時間、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２及び飽和水蒸気雰囲気下で培養された。紫外線照射後にグルタミン酸を添加する処理（以下、「後処理」という。）の効果を検討する場合には、この２１時間の培養の培地に０．１ないし１００μＭのＬ−又はＤ−グルタミン酸を添加した。

細胞障害の定量
その後、培地にａｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標、Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ、バイオソース・インターナショナル）を最終濃度１０％となるように添加し、３時間後に、Ａｈｍｅｄ Ｓ．Ａ．ら、（Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄ． １７０，２１１−２２４（１９９４））及び製造者の指示書に従って励起波長５４４ｎｍ、蛍光波長５９０ｎｍで上清の蛍光強度が測定された。

結果
図１にＵＶ−Ｂ ７５ｍＪ／ｃｍ^２の紫外線照射によるケラチノサイトの細胞障害に対するＤ−グルタミン酸の効果を調べた実験の結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で８回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊）はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定でＰが１％未満であることを示す。ＵＶ非照射の場合にはａｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標）の蛍光強度が約２２０００で、ＵＶ−Ｂ照射により細胞障害が起こると５０００ないし７０００に低下した。ところが、Ｄ−グルタミン酸を添加すると、蛍光強度が増大し、細胞障害が軽減された。この細胞障害の軽減効果は、Ｄ−グルタミン酸処理をＵＶ照射の前後いずれに施すかには関係がなかったが、Ｄ−グルタミン酸の濃度を上げると軽減効果も大きかった。Ｌ−グルタミン酸の添加によっては細胞障害の軽減効果はみられなかった（図示されない）。以上の結果から、Ｄ−グルタミン酸はケラチノサイトのＵＶ−Ｂによる細胞障害を濃度依存的に軽減することが示された。

Ｄ−プロリンの紫外線障害軽減効果
細胞
細胞は、市販のヒト新生児真皮線維芽細胞（Ｃｒｙｏ ＮＨＤＦ−Ｎｅｏ、三光純薬）が用いられた。前記細胞は２ｘ１０^５個／ｍＬとなるように市販の３５ｍｍ径の培養ディッシュ（ＢＤ ＦＡＬＣＯＮ ３５３００１、日本ベクトン・ディッキンソン）に播種され、市販の細胞培養用培地（Ｄ−ＭＥＭ（１ｇ／Ｌグルコース）、和光純薬）に牛胎児血清を１０％添加した培地（以下、「通常培地２」という。）を用いて培養された。前記細胞は、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２及び飽和水蒸気雰囲気下で約２４時間培養された。

その後前記細胞を培養する培地は、グルタチオンの生合成阻害剤であるＢＳＯ（Ｌ−ｂｕｔｈｉｏｎｉｎｅ−（Ｓ，Ｒ）−ｓｕｌｆｏｘｉｍｉｎｅ、和光純薬）を１×１０^−３％添加したＢＳＯ培地１ｍＬに切り替えられ、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２及び飽和水蒸気雰囲気下で約２４時間培養された。前記ＢＳＯ培地は、０．２％ＢＳＯをエチルアルコールに溶解した保存用原液を前記通常培地２に２００倍希釈して調製された。

紫外線照射前にプロリンを添加する処理（以下、「前処理」という。）の効果を検討する場合には、照射２４時間前に０．１μＭのＬ−又はＤ−プロリンを添加した培地に切り換えた。

紫外線照射用培地
塩化鉄（ＩＩ）を蒸留水に２×１０^−３％となるように溶解し、その溶解液を２００倍希釈（終濃度１×１０^−５％）となるようにカルシウムイオン、マグネシウムイオンを含んだリン酸緩衝液ＰＢＳ（＋）で希釈して作製した培地（以下、「紫外線照射用培地」という。）を３７°Ｃに予め加温して用いた。

紫外線照射
ＵＶ−Ａ照射前に培地は前記紫外線照射用培地１ｍＬに置換された。ＵＶ−Ａ照射は紫外光均一露光装置ＵＶＥ−５０２Ｓ＋ＥＬ−１６０（三永電機製作所）を用いて、培養ディッシュの蓋を除去した状態で該培養ディッシュのおよそ２０ｃｍ上部から３２０ｎｍないし４００ｎｍの紫外線を１５Ｊ／ｃｍ^２及び２２．５Ｊ／ｃｍ^２で照射して実施された。紫外線量はＵＶ ＲＡＤＩＯＭＥＴＥＲ ＵＶＲ−３０３６／Ｓ（株式会社トプコン）を用いて測定された。

紫外線照射後にプロリンを添加する処理
紫外線照射処理後、前記通常培地２に戻して２１時間、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２及び飽和水蒸気雰囲気下で培養された。紫外線照射後にプロリンを添加する処理（以下、「後処理」という。）の効果を検討する場合には、この２１時間の培養の培地に０．０１ないし１０００μＭのＬ−又はＤ−プロリンを添加した。

後処理時の細胞障害の定量
その後、蛍光強度は、実施例１で説明された方法に従って測定された。

後処理の結果
図２にＵＶ―Ａ １５Ｊ／ｃｍ^２及び２２．５Ｊ／ｃｍ^２の紫外線照射による線維芽細胞の障害に対するＤ−プロリンの効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で４回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊）はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定でｐが５％未満であることを示す。ＵＶ非照射の場合にはａｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標）の蛍光強度が約１２０００で、ＵＶ−Ａ １５Ｊ／ｃｍ^２の照射により細胞障害が起こると約５０００に低下した。また、ＵＶ−Ａ ２２．５Ｊ／ｃｍ^２の照射により細胞障害が起こると約３０００に低下した。ところが、Ｄ−プロリンを添加すると、蛍光強度が増大し、細胞障害は軽減された。

表１にＵＶ―Ａ １２．５Ｊ／ｃｍ^２及び１５Ｊ／ｃｍ^２の紫外線照射による線維芽細胞の障害に対するＬ−及びＤ−プロリンの効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で４回ないし６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。ここで、アステリスク（＊）１はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定で対照と比較したｐが０．１％未満、Ｌ−プロリンと比較したＰが０．１％であることを示す。また、アステリスク（＊）２はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定で対照と比較したｐが０．１％未満、Ｌ−プロリンと比較したｐが５％未満であることを示す。ＵＶ非照射の場合にはａｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標）の蛍光強度が約１２０００で、ＵＶ−Ａ １２．５Ｊ／ｃｍ^２及びＵＶ−Ａ １５Ｊ／ｃｍ^２の照射により細胞障害が起こると約２５００及び約１０００に低下した。Ｌ−プロリンの添加によっては、細胞障害はほとんど軽減されなかった。しかし、Ｄ−プロリンを添加すると、蛍光強度が増大し、細胞障害は軽減された。

前処理時の細胞障害の定量
細胞障害性は、０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡ （ＧＩＢＣＯ）で５分間処理して細胞剥離後、遠心して洗浄し、０．２％トリパンブルー染色（ＧＩＢＣＯ）で生死を確認することにより定量された。

前処理の結果
図３に２２．５Ｊ／ｃｍ^２の紫外線照射による線維芽細胞の障害に対するＤ−プロリンの効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で４回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊）はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定でｐが１％未満であることを示す。

ＵＶ非照射の場合には、生細胞率が約９５％で、ＵＶ−Ａ ２２．５Ｊ／ｃｍ^２の照射により細胞障害が起こると約３０％に低下した。ところが、Ｄ−プロリンを添加すると、生細胞率が約５０％に増大し、細胞死は軽減された。以上の結果から、細胞障害の軽減効果はＤ−プロリン処理をＵＶ照射の前後いずれかに施すかには関係がないことが示された。また、Ｄ−プロリンは線維芽細胞のＵＶ−Ａによる細胞障害を濃度依存的に軽減することが示された。

Ｄ−プロリン及びＤ−グルタミン酸の紫外線障害軽減効果の比較
方法
細胞は、市販のヒト新生児真皮線維芽細胞（Ｃｒｙｏ ＮＨＤＦ−Ｎｅｏ、三光純薬）が用いられ、実施例２で説明された方法と同様に培養された。紫外線照射前にＤ−プロリン又はＤ−グルタミン酸を添加する処理の効果を検討する場合には、照射２４時間前に０．１μＭのＤ−プロリンか、１μＭのＬ−又はＤ−グルタミン酸かを添加した培地に切り換えた。これらのアミノ酸を添加しない培地のままでの紫外線照射を対照とした。ＵＶ−Ａの紫外線照射（２２．５Ｊ／ｃｍ^２）と、ａｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標）での細胞障害の定量とは、実施例２で説明された方法と同様に実施された。

結果
図４にＵＶ−Ａ ２２．５Ｊ／ｃｍ^２の紫外線照射による線維芽細胞の障害に対するＤ−プロリンと、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸との効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で４回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊）はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ検定でｐが１％未満であることを示す。

蛍光強度は、対照では約１１００であった。また、Ｄ−プロリンか、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸かを添加した場合の蛍光強度は、約１７５０、約１１００又は約１７００であった。以上の結果から、Ｄ−プロリン及びＤ−グルタミン酸は、正常ヒト真皮線維芽細胞のＵＶ−Ａによる細胞障害を統計的に有意に軽減することが示された。しかし、Ｌ−グルタミン酸には細胞障害の軽減効果はみられなかった。なお、Ｄ−プロリンは、Ｄ−グルタミン酸と比較して、１０分の１の濃度で紫外線障害を軽減することが示された。

Ｌ−及びＤ−システインの紫外線障害軽減効果
細胞
細胞は、市販のヒト新生児表皮角化細胞（Ｃｒｙｏ ＮＨＥＫ−Ｎｅｏ、三光純薬）が用いられた。前記細胞は１ｘ１０^５個／ｍＬとなるように市販のタイプＩコラーゲンでコートされた３５ｍｍ径の培養ディッシュ（ＣＯＬ１、旭テクノグラス）に播種された。前記細胞は、市販の無血清培地（Ｄｅｆｉｎｅｄ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ−ＳＦＭ、Ｇｉｂｃｏ社、以下、「通常培地３」という。）に増殖添加剤（Ｄｅｆｉｎｅｄ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ−ＳＦＭ Ｇｒｏｗｔｈ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ、Ｇｉｂｃｏ社）及び抗生物質（ＰＳＦ：ペニシリン、ストレプトマイシン及びファンギゾン）を添加して、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２及び飽和水蒸気雰囲気下で３日間培養された。その後、１００μＭのＤ−アラニン、Ｄ−セリン、Ｄ−ヒドロキシプロリン、Ｄ−アスパラギン酸、Ｄ−システイン又はＬ−システインが添加された２ｍＬの通常培地３で２日間培養された。対照としては、Ｄ−アミノ酸の代わりにＰＢＳが通常培地３に添加された。

紫外線照射
ＵＶ―Ｂ照射前に培地はＰＢＳ１ｍＬに置換された。ＵＶ―Ｂ照射は、自作の紫外光露光装置（紫外線蛍光灯、東芝メディカルサプライ ＴＯＲＥＸ ＦＬ２０Ｓ−Ｅ−３０／ＤＭＲ、２本）を用いて、培養ディッシュの蓋を除去した状態で該培養ディッシュの４０ｃｍ上部から２８０ｎｍないし３２０ｎｍの紫外線を２５Ｊ／ｃｍ^２で照射して実施された。紫外線量はＵＶ ＲＡＤＩＯＭＥＴＥＲ ＵＶＲ−３０３６／Ｓ（株式会社トプコン）を用いて測定された。

紫外線照射処理された細胞は、１００μＭのＤ−アラニン、Ｄ−セリン、Ｄ−ヒドロキシプロリン、Ｄ−アスパラギン酸、Ｄ−システイン又はＬ−システインが添加された９００μＬの通常培地３を用いて、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２及び飽和水蒸気雰囲気下で２４時間培養された。

細胞障害の定量
その後、蛍光強度は、実施例１で説明された方法に従って測定された。

結果
図５にＵＶ−Ｂ ２５ｍＪ／ｃｍ^２の紫外線照射によるケラチノサイトの細胞障害に対するシステインの効果を調べた実験の結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で４回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊）はステューデントｔ検定でｐが１％未満であることを示す。ＵＶ−Ｂ照射による細胞障害が生じた後のａｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標）の蛍光強度は、Ｄ−アラニンが添加された場合には約５７０であり、Ｄ−アラニンが添加されなかった場合には約５５０であった。Ｄ−セリンが添加された場合の蛍光強度は約４９０であり、Ｄ−セリンが添加されなかった場合の蛍光強度は約５００であった。Ｄ−ヒドロキシプロリンが添加された場合の蛍光強度は約５５０であり、Ｄ−ヒドロキシプロリンが添加されなかった場合の蛍光強度は約５５０であった。Ｄ−アスパラギン酸が添加された場合の蛍光強度は約６００であり、Ｄ−アスパラギン酸が添加されなかった場合の蛍光強度は約６００であった。Ｄ−システインが添加された場合の蛍光強度は約７００であり、Ｄ−システインが添加されなかった場合の蛍光強度は約６００であった。Ｌ−システインが添加された場合の蛍光強度は約７００であり、Ｌ−システインが添加されなかった場合の蛍光強度は約６００であった。以上の結果から、システインは、Ｌ−体及びＤ−体の両方とも統計的に有意に細胞障害を軽減することが示された。

ＸＰ細胞での紫外線障害軽減効果
方法
財団法人ヒューマンサイエンス振興財団から入手した色素性乾皮症（Ａ群）患者由来のヒト真皮繊維芽細胞（ＸＰ３０Ｓ（ＳＶＴ）、以下、「ＸＰ細胞」という。）が用いられ、実施例３で説明された方法と同様に培養された。０．１μＭのＬ−又はＤ−のグルタミン酸、プロリン及びシステインの前処理と、細胞障害の定量とは実施例３で説明された方法に従って行なわれた。また、ＵＶ−Ａ照射は紫外光均一露光装置ＵＶＥ−５０２Ｓ＋ＥＬ−１６０（三永電機製作所）を用いて、培養ディッシュの蓋を除去した状態で該培養ディッシュのおよそ２０ｃｍ上部から３２０ｎｍないし４００ｎｍの紫外線を１Ｊ／ｃｍ^２で照射して実施された。紫外線量はＵＶ ＲＡＤＩＯＭＥＴＥＲ ＵＶＲ−３０３６／Ｓ（株式会社トプコン）を用いて測定された。

Ｌ−及びＤ−のグルタミン酸の結果
図６に紫外線照射による線維芽細胞の障害に対するＬ−及びＤ−のグルタミン酸の効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で２回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。

蛍光強度は、紫外線非照射かつアミノ酸非添加の条件（以下、「紫外線非照射条件」という。）では約６９０であり、紫外線照射かつアミノ酸非添加の条件（以下、「陰性対照」という。）では約６３０であった。０．１μＭのＬ−又はＤ−グルタミン酸を添加した場合の蛍光強度は、約６５８又は約６７５であった。以上の結果から、Ｌ−及びＤ−グルタミン酸はともに、ＸＰ細胞のＵＶ−Ａによる細胞障害を軽減することが示された。

Ｌ−及びＤ−のプロリンの結果
図７に紫外線照射による線維芽細胞の障害に対するＬ−及びＤ−のプロリンの効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で２回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。

蛍光強度は、紫外線非照射条件では約６９０であり、陰性対照では約６３０であった。０．１μＭのＬ−又はＤ−プロリンを添加した場合の蛍光強度は、約５８３又は約６６４であった。以上の結果から、Ｄ−プロリンはＸＰ細胞のＵＶ−Ａによる細胞障害を軽減することが示された。

Ｌ−及びＤ−のシステインの結果
図８に紫外線照射による線維芽細胞の障害に対するＬ−及びＤ−のシステインの効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で２回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。

蛍光強度は、紫外線非照射条件では約６９０であり、陰性対照では約６３０であった。０．１μＭのＬ−又はＤ−システインを添加した場合の蛍光強度は、約６８８又は約６３８であった。以上の結果から、Ｌ−及びＤ−システインはともに、ＸＰ細胞のＵＶ−Ａによる細胞障害を軽減することが示された。

本発明にもとづいてＤ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン又はＬ−システイン等からなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、乳液製剤、貼付剤、錠剤、ソフトカプセル、顆粒、ドリンク、キャンディー、クッキー、味噌、フレンチドレッシング、マヨネーズ、フランスパン、醤油、ヨーグルト、ふりかけ、調味料・納豆のたれ、納豆、もろみ黒酢、クリーム、ボディー用クリーム、ジェル剤、ピールオフマスク、含浸マスク、乳液、化粧水及びエアゾール剤の配合例を以下に示す。これらの配合例は例示を目的として列挙されるものであって本発明の範囲を限定することを意図するものではない。

配合例１（乳液製剤）
（組成物） 配合量（重量％）
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ０．４２
ベヘニルアルコール ０．２
セタノール ０．５
グリセリンモノ脂肪酸エステル １．８
硬化ヒマシ油ＰＯＥ（６０） １．０
白色ワセリン ２．０
流動パラフィン １０．０
ミリスチン酸イソプロピル ３．０
メチルポリシロキサン（６ｃｓ） １．５
濃グリセリン １３．０
ジプロピレングリコール ２．０
カルボキシビニルポリマー ０．２５
ヒアルロン酸ナトリウム ０．００５
水酸化カリウム 適量
乳酸 適量
エデト酸ナトリウム 適量
エチルパラベン 適量
精製水 残余

１００．０００

配合例２（貼付剤）
（組成物） 配合量（重量％）
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ０．３
ポリアクリル酸 ３．０
ポリアクリル酸ナトリウム ２．５
ゼラチン ０．５
カルボキシメチルセルロースナトリウム ４．０
ポリビニルアルコール ０．３
濃グリセリン １４．０
１，３−ブチレングリコール １２．０
水酸化アルミニウム ０．１
エデト酸ナトリウム ０．０３
メチルパラベン ０．１
精製水 残余

１００．００

配合例３（錠剤）
（組成物） 配合量（ｍｇ／１錠中）
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ３６０．５
乳糖 １０２．４
カルボキシメチルセルロースカルシウム ２９．９
ヒドロキシプロピルセルロース ６．８
ステアリン酸マグネシウム ５．２
結晶セルロース １０．２

５１５．０

配合例４（錠剤）
（組成物） 配合量（ｍｇ／１錠中）
ショ糖エステル ７０
結晶セルロース ７４
メチルセルロース ３６
グリセリン ２５
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ４７５
Ｎ−アセチルグルコサミン ２００
ヒアルロン酸 １５０
ビタミンＥ ３０
ビタミンＢ６ ２０
ビタミンＢ２ １０
α−リポ酸 ２０
コエンザイムＱ１０ ４０
セラミド（コンニャク抽出物） ５０
Ｌ−プロリン ３００

１５００

配合例５（ソフトカプセル）
（組成物） 配合量（ｍｇ／１カプセル中）
食用大豆油 ５３０
トチュウエキス ５０
ニンジンエキス ５０
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １００
ローヤルゼリー ５０
マカ ３０
ＧＡＢＡ ３０
ミツロウ ６０
ゼラチン ３７５
グリセリン １２０
グリセリン脂肪酸エステル １０５

１５００

配合例６（ソフトカプセル）
（組成物） 配合量（ｍｇ／１カプセル中）
玄米胚芽油 ６５９
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ５００
レスベラトロール １
ハス胚芽エキス １００
エラスチン １８０
ＤＮＡ ３０
葉酸 ３０

１５００

配合例７（顆粒）
（組成物） 配合量（ｍｇ／１包中）
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ４００
ビタミンＣ １００
大豆イソフラボン ２５０
還元乳糖 ３００
大豆オリゴ糖 ３６
エリスリトール ３６
デキストリン ３０
香料 ２４
クエン酸 ２４

１２００

配合例８（ドリンク）
（組成物） 配合量（ｇ／６０ｍＬ中）
トチュウエキス １．６
ニンジンエキス １．６
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １．６
還元麦芽糖水飴 ２８
エリスリトール ８
クエン酸 ２
香料 １．３
Ｎ−アセチルグルコサミン １
ヒアルロン酸Ｎａ ０．５
ビタミンＥ ０．３
ビタミンＢ６ ０．２
ビタミンＢ２ ０．１
α−リポ酸 ０．２
コエンザイムＱ１０ １．２
セラミド（コンニャク抽出物） ０．４
Ｌ−プロリン ２
精製水 残余

６０

配合例９（キャンディー）
（組成物） 配合量（重量％）
砂糖 ５０
水飴 ４８
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １
香料 １

１００

配合例１０（クッキー）
（組成物） 配合量（重量％）
薄力粉 ４５．０
バター １７．５
グラニュー糖 ２０．０
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ４．０
卵 １２．５
香料 １．０

１００．０

配合例１０（クッキー）の製造方法
バターを撹拌しながらグラニュー糖を徐々に添加し、卵及び香料と、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインとを添加して撹拌した。十分に混合した後、均一に振るった薄力粉を加えて低速で撹拌し、塊状で冷蔵庫で寝かせた。その後、成型し１７０°Ｃ１５分間焼成しクッキーとした。

配合例１１（味噌）
（組成物） 配合量（ｇ）
大豆 １０００
米麹 １０００
塩 ４２０
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １５８
水 残余

４０００

配合例１１（味噌）の製造方法
米こうじと塩とをよく混ぜ合わせる。洗浄した大豆を３倍量の水に一晩つけた後に水を切り、新しい水を加えながら煮込み、ざるにあける。煮汁（種水）を集め、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを１０％ｗ／ｖとなるように溶解する。煮あがった豆を直ちにすりつぶし、塩を混ぜた米麹を加えて、上記のＬ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを溶解した種水を足しながら粘土程の固さになるまでむらなく混ぜ合わせる。団子状に丸めたものを桶に隙間のない様に隅々まで、しっかりと詰め込み、表面を平らにしてラップで覆い密封する。３箇月後に容器を移し変え、表面を平らにしてラップで覆う。なお、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを種水に加える代わりに、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを多く産生する米麹を用いてもよい。前記米麹を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＬ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを定量することにより選抜することができる。また、市販の味噌にＤ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン又はＬ−システインか、それらの塩かを加えてもよい。

配合例１２（フレンチドレッシング）
（組成物） 配合量（ｇ）
サラダ油 ２７．０
酢 ３０．０
塩化ナトリウム ０．９
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １．１
胡椒 １．０

６０．０

配合例１２（フレンチドレッシング）の製造方法
酢に塩化ナトリウムと、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインとを加えた後に、よく攪拌して溶解する。サラダ油を加えて、よく攪拌し胡椒を加える。

配合例１３（マヨネーズ）
（組成物） 配合量（ｇ）
サラダ油 １３４．０
酢 ５
塩化ナトリウム ０．９
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １
卵黄 １８
砂糖 ０．２
胡椒 ０．９

１６０．０

配合例１３（マヨネーズ）の製造方法
卵黄（室温）に酢、塩化ナトリウム及び胡椒と、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインとを加えて、泡立て器で十分に攪拌する。サラダ油を少しずつ加えながら攪拌を継続してエマルジョンにする。最後に砂糖を加えて攪拌する。

配合例１４（フランスパン）
（組成物） 配合量（ｇ）
強力粉 １４０
薄力粉 ６０
塩化ナトリウム ３
砂糖 ６
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ２
ドライイースト ４
ぬるま湯 １２８

３４３

配合例１４（フランスパン）の製造方法
ぬるま湯に砂糖１ｇ及びドライイーストを入れて予備発酵させる。強力粉、薄力粉、塩化ナトリウム及び砂糖５ｇと、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインとをボウルに入れ、その中に予備発酵させたイーストを入れる。十分捏ねた後に球状にして３０°Ｃで一次発酵させる。生地を再度捏ねてから休ませた後に適当な形に整形して電子発酵機を用いて最終発酵させる。クープを入れて２２０°Ｃのオーブンで３０分間焼く。

配合例１５（醤油）
（組成物） 配合量（ｇ）
市販の醤油 ９９０
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １０

１０００

配合例１６（醤油）
（組成物） 配合量（ｇ）
市販の醤油 ９００
Ｄ−プロリン １００

１０００

配合例１５及び１６（醤油）の製造方法
市販の醤油にＬ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを加えてよく攪拌する。また、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインやその塩を加える代わりに、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを多く産生する麹を用いて醤油を醸造してもよい。前記麹を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＬ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを定量することにより選抜することができる。また、市販の醤油にＤ−グルタミン酸Ｎａ、Ｌ−グルタミン酸Ｎａ、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン又はＬ−システインか、それらの塩かを加えてもよい。

配合例１７（ヨーグルト）
（組成物） 配合量（ｇ）
牛乳 ８８０
Ｌ．ブルガリカス菌 ５０
Ｓ．サーモフィルス菌 ５０
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ２０

１０００

配合例１７（ヨーグルト）の製造方法
４０°Ｃ〜４５°Ｃで発酵させる。他の市販の種菌を用いてもよく、市販のヨーグルトにＬ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを加えてもよい。また、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインその塩を加える代わりに、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを多く産生する菌を用いてもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＬ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを定量することにより選抜することができる。また、市販のヨーグルトにＤ−グルタミン酸Ｎａ、Ｌ−グルタミン酸Ｎａ、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン又はＬ−システインか、それらの塩かを加えてもよい。

配合例１８（ふりかけ）
（組成物） 配合量（ｇ）
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ５０
のり １５
Ｌ−グルタミン酸Ｎａ １０
塩化ナトリウム ２
煎りごま １０
さば削り節 １０
砂糖 １
醤油 ２

１００

配合例１９（調味料・納豆のたれ）
（組成物） 配合量（ｇ）
市販の納豆のたれ ９．９
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ０．１

１０

配合例２０（調味料・納豆のたれ）
（組成物） 配合量（ｇ）
市販の納豆のたれ ９
Ｄ−プロリン １

１０

配合例２１（納豆）
（組成物） 配合量（ｇ）
市販の納豆 １９．９
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ０．１

２０

配合例２１（納豆）の製造方法
市販の納豆にＬ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを加えてよく攪拌する。Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システイン又はその塩を加える代わりに、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを多く産生する菌を用いて納豆を作ってもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＬ−又はＤ−グルタミン酸Ｎａか、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを定量することにより選抜することができる。また、市販の納豆にＤ−グルタミン酸Ｎａ、Ｌ−グルタミン酸Ｎａ、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン又はＬ−システインか、それらの塩かを加えてもよい。

配合例２２（もろみ黒酢）
（組成物） 配合量（ｇ）
市販のもろみ黒酢 ９５０
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ５０

１０００

配合例２３（もろみ黒酢）
（組成物） 配合量（ｇ）
市販のもろみ黒酢 ９００
Ｄ−プロリン １００

１０００

配合例２２及び２３（もろみ黒酢）の製造方法
市販のもろみ黒酢にＬ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを加えてよく攪拌する。Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システイン又はその塩を加える代わりに、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを多く産生する菌を用いて酢、黒酢、もろみを作ってもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＬ−又はＤ−グルタミン酸か、Ｄ−プロリンか、あるいはＬ−又はＤ−システインを定量することにより選抜することができる。また、市販のもろみ黒酢にＤ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸Ｎａ、Ｄ−プロリン、Ｄ−システイン又はＬ−システインか、それらの塩かを加えてもよい。

配合例２４（クリーム）
（組成物） 配合量（％）
流動パラフィン ３
ワセリン １
ジメチルポリシロキサン １
ステアリルアルコール １．８
ベヘニルアルコール １．６
グリセリン ８
ジプロピレングリコール ５
マカデミアナッツ油 ２
硬化油 ３
スクワラン ６
ステアリン酸 ２
ヒドロキシステアリン酸コレステリル ０．５
２−エチルヘキサン酸セチル ４
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ０．５
自己乳化型モノステアリン酸グリセリン ３
水酸化カリウム ０．１５
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
トリメチルグリシン ２
α−トコフェロール ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム １
酢酸トコフェロール ０．１
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ４
パラベン 適量
エデト酸３ナトリウム ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン ０．０５
ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル ０．０５
色剤 適量
カルボキシビニルポリマー ０．０５
精製水 残余

１００．００

配合例２５（ボディー用クリーム）
（組成物） 配合量（％）
ジメチルポリシロキサン ３
デカメチルシクロペンタシロキサン １３
ドデカメチルシクロヘキサシロキサン １２
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体 １
エタノール ２
イソプロパノール １
グリセリン ３
ジプロピレングリコール ５
ポリエチレングリコール６０００ ５
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
酢酸トコフェロール ０．１
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ５
ウイキョウエキス ０．１
ハマメリスエキス ０．１
ニンジンエキス ０．１
Ｌ−メントール 適量
パラオキシ安息香酸エステル 適量
エデト酸三ナトリウム ０．０５
ジモルホリノピリダジノン ０．０１
トリメトキシ桂皮酸メチルビス（トリメチルシロキシ）
シリルイソペンチル ０．１
黄酸化鉄 適量
チタン酸コバルト 適量
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト １．５
ポリビニルアルコール ０．１
ヒドロキシエチルセルロース ０．１
トリメチルシロキシケイ酸 ２
香料 適量
精製水 残余

１００．００

配合例２６（ジェル剤）
（組成物） 配合量（％）
ジメチルポリシロキサン ５
グリセリン ２
１，３−ブチレングリコール ５
ポリエチレングリコール１５００ ３
ポリエチレングリコール２００００ ３
オクタン酸セチル ３
クエン酸 ０．０１
クエン酸ナトリウム ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．１
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ２
酢酸トコフェロール ０．１
オウゴンエキス ０．１
ユキノシタエキス ０．１
エデト酸三ナトリウム ０．１
キサンタンガム ０．３
アクリル酸・メタクリル酸
アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−２） ０．０５
寒天末 １．５
フェノキシエタノール 適量
ジブチルヒドロキシトルエン 適量
精製水 残余

１００．００

配合例２７（ピールオフマスク）
（組成物） 配合量（％）
エタノール １０
１，３−ブチレングリコール ６
ポリエチレングリコール４０００ ２
オリーブ油 １
マカデミアナッツ油 １
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル ０．０５
乳酸 ０．０５
乳酸ナトリウム ０．１
Ｌ−アスコルビン酸硫酸エステル２ナトリウム ０．１
α−トコフェロール ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム ０．１
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １０
魚コラーゲン ０．１
コンドロイチン硫酸トリウム ０．１
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．２
ポリビニルアルコール １２
パラオキシ安息香酸エステル 適量
香料 適量
精製水 残余

１００．００

配合例２８（含浸マスク）
（組成物） 配合量（％）
グリセリン １
１，３−ブチレングリコール ８
キシリット ２
ポリエチレングリコール１５００ ２
ローズマリー油 ０．０１
セージ油 ０．１
クエン酸 ０．０２
クエン酸ナトリウム ０．０８
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０１
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン ０．１
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ０．５
バーチエキス ０．１
ラベンダー油 ０．０１
キサンタンガム ０．０５
カルボキシビニルポリマー ０．１５
パラオキシ安息香酸エステル 適量
精製水 残余

１００．００

配合例２９（乳液）
（組成物） 配合量（％）
流動パラフィン ７
ワセリン ３
デカメチルシクロペンタシロキサン ２
ベヘニルアルコール １．５
グリセリン ５
ジプロピレングリコール ７
ポリエチレングリコール１５００ ２
ホホバ油 １
イソステアリン酸 ０．５
ステアリン酸 ０．５
ベヘニン酸 ０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット ３
２−エチルヘキサン酸セチル ３
モノステアリン酸グリセリン １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン １
水酸化カリウム ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
グリチルレチン酸ステアリル ０．０５
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン １
ローヤルゼリーエキス ０．１
酵母エキス ０．１
酢酸トコフェロール ０．１
アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム ０．１
エデト酸三ナトリウム ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン ０．１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル ０．１
カルボキシビニルポリマー ０．１５
パラベン 適量
香料 適量
精製水 残余

１００．００

配合例３０（乳液）
（組成物） 配合量（％）
ジメチルポリシロキサン ２
ベヘニルアルコール １
バチルアルコール ０．５
グリセリン ５
１，３−ブチレングリコール ７
エリスリトール ２
硬化油 ３
スクワラン ６
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ０．３
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット ２
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン １
水酸化カリウム 適量
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
フェノキシエタノール 適量
カルボキシビニルポリマー ０．１
精製水 残余

１００．００

配合例３１（化粧水）
（組成物） 配合量（％）
エチルアルコール ５
グリセリン １
１，３−ブチレングリコール ５
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン
デシルテトラデシルエーテル ０．２
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０３
トリメチルグリシン １
ポリアスパラギン酸ナトリウム ０．１
α−トコフェロール ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム ０．１
チオタウリン ０．１
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ８
ＥＤＴＡ３ナトリウム ０．１
カルボキシビニルポリマー ０．０５
水酸化カリウム ０．０２
フェノキシエタノール 適量
香料 適量
精製水 残余

１００．００

配合例３２（化粧水）
（組成物） 配合量（％）
エタノール １０
ジプロピレングリコール １
ポリエチレングリコール１０００ １
ポリオキシエチレンメチルグルコシド １
ホホバ油 ０．０１
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル ０．１
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ０．２
ジイソステアリン酸ポリグリセリル ０．１５
Ｎ−ステアロイル−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム ０．１
クエン酸 ０．０５
クエン酸ナトリウム ０．２
水酸化カリウム ０．４
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１
塩酸アルギニン ０．１
Ｌ−アスコルビン酸 ２−グルコシド ２
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ０．５
エデト酸三ナトリウム ０．０５
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル ０．０１
ジブチルヒドロキシトルエン 適量
パラベン 適量
海洋深層水 ３
香料 適量
精製水 残余

１００．００

配合例３３（エアゾール尿素外用剤原液）
（組成物） 配合量（重量％）
エタノール １５．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０ １．５
ジフェンヒドラミン １．０
ジブカイン ２．０
酢酸トコフェロール ０．５
Ｌ−又はＤ−グルタミン酸か、
Ｄ−プロリンか、
あるいはＬ−又はＤ−システイン ０．１
イソステアリン酸 ０．１
１，３−ブチレングリコール ３．０
ポリエチレングリコール４００ ３．０
カンフル ０．０５
尿素 ２０．０
精製水 残余

１００．００

配合例３４（エアゾール尿素噴射剤）
（組成物） 配合量（重量％）
エアゾール尿素外用剤原液 ６５．０
ジメチルエーテル ３５．０

１００．００

配合例３４（エアゾール尿素噴射剤）の充填方法
エアゾール尿素外用剤原液及びジメチルエーテルを内面テフロン（登録商標）コート処理耐圧エアゾールアルミ缶に充填してエアゾール剤を調製する。

Claims (6)

1. Ｄ−プロリンと、その塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含むことを特徴とする、紫外線障害軽減組成物。
2. シワ抑制剤であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
3. 日焼け止め剤であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
4. 白内障用医薬品として用いられることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
5. 前記白内障用医薬品は白内障用治療剤又は白内障用予防剤であることを特徴とする、請求項４に記載の組成物。
6. 点眼薬として適用されることを特徴とする、請求項４又は５に記載の組成物。

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