JP5724217B2 - デハロコッコイデス属細菌培養液の調製方法、塩素化エチレンの浄化剤及び浄化方法 - Google Patents
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Description
トリココッカス属細菌は、土や川など環境中に広く存在する。トリココッカス属細菌とデハロコッコイデス属細菌を含む土壌や地下水を採取し、適切な培地を用いて嫌気条件で培養することで目的とするコンソーシアを得ることができる。トリココッカス属細菌の割合としては全菌の95%以上、さらに望ましくは98%〜99.5%であることが望ましい。
培地には嫌気度を調べるための指示薬であるレサズリンが添加されてもよい。
培養の攪拌を止め、重力分離(自然沈降で沈殿させること)又は遠心分離により、デハロコッコイデス属細菌とトリココッカス属細菌を分離することができる。デハロコッコイデス属細菌等の単球菌と、連鎖状のトリココッカス属細菌とは、細胞の大きさを利用して容易に分離が可能である。嫌気条件とするため培地成分に塩化鉄と硫化ナトリウムを添加したときは、培地作成段階で硫化鉄が生成するのでトリココッカス属菌を硫化鉄のフロックとともに共沈させても良い。顕微鏡で観察するとトリココッカス属細菌は硫化鉄のフロックと凝集塊を形成しているケースが多く、デハロコッコイデス属細菌より凝集し易い性状も持つと考えられ、これによりトリココッカス属細菌を選択的に分離することができると考えられる。
本発明では、重力分離又は遠心分離による分画方法と、膜を利用した分画方法とは組み合わせて処理することができる。そして、重力分離又は遠心分離をした後に膜濾過することにより高度に分画できる上に、膜寿命を長期化できるので好ましい。
<地下水へ添加した培地成分>
C3H4(OH)(COOH)3:500mg/L
(NH4)2HPO4 :6mg/L
酵母エキス :100mg/L
Na2S・9H2O :50mg/L
FeCl2・4H2O :50mg/L
<合成培地の組成>
C3H4(OH)(COONa)3:500mg/L
酵母エキス :10mg/L
CaCl2・2H2O :15mg/L
NaHCO3 :2520mg/L
Tris :2290mg/L
レサズリン :1mg/L
CDCE :6mg/L
MgCl2・6H2O :500mg/L
NaCl :500mg/L
KH2PO4 :200mg/L
NH4Cl :300mg/L
KCl :300mg/L
Na2S・9H2O :480mg/L
FeCl2・4H2O :200mg/L
MnCl2・4H2O :1mg/L
CoCl2・2H2O :1.9mg/L
ZnCl2 :0.7mg/L
CuSO4・5H2O :0.04mg/L
H3BO3 :0.06mg/L
NiCl2・6H2O :0.25mg/L
Na2MoO4・2H2O :0.44mg/L
濃塩酸 :1μL/L
表2に見られるように攪拌停止前の培養液ではT菌の割合が98%以上でDHC菌の割合は1%程度であったが、一晩静置して硫化鉄とともにT菌を重力沈降せしめた結果、上澄み液中のT菌の濃度は攪拌停止前の1〜3%程度となり、全菌に対するDHC菌の割合は27〜38%と上昇した。また、このときDHC菌の回収率は概ね100%であった。
上澄み液をさらに孔径5μmの膜で膜濾過した結果、T菌の割合は著しく低下し、DHC菌の割合は52〜57%となった。また、膜濾過の前後の培養液中のDHC菌の濃度はどのサンプルでもほぼ等しく、DHC菌が膜に捕捉されることなく概ね100%の回収率で回収できることがわかった。つまりコンソーシアの中からDHC菌以外の菌のみを実質的に減量することができた。なお、従来技術(特開2009−213427の実施例)では、回収率は12%程度と非常に低い。
Claims (4)
- デハロコッコイデス属細菌とトリココッカス属細菌とを主菌体とするコンソーシアを、嫌気条件とするために塩化鉄と硫化ナトリウムを添加し、硫化鉄が生成した培地で培養し、前記硫化鉄のフロックとともに前記トリココッカス属細菌を共沈させた嫌気状態の培養液に対して、
嫌気条件で該培養液を重力又は遠心力により分離して上澄液を取得する第1分画工程と、
該第1分画工程後に、嫌気条件で該上澄液を孔径3μm〜100μmの膜で膜濾過して、デハロコッコイデス属細菌の占有度が50%以上の透過液を得る第2分画工程を行うことを特徴とするデハロコッコイデス属細菌培養液の調製方法。 - 請求項1において、前記コンソーシアはクエン酸及び/又はクエン酸塩を主炭素成分とする培地を用いて嫌気条件で培養されたものであることを特徴とするデハロコッコイデス属細菌培養液の調製方法。
- 請求項1又は2に記載の調製方法により得られた前記デハロコッコイデス属細菌の占有度が50%以上の透過液であるデハロコッコイデス属細菌培養液よりなる塩素化エチレン浄化剤。
- 請求項3に記載の塩素化エチレン浄化剤を土壌及び/又は地下水に添加することを特徴とする土壌及び/又は地下水中の塩素化エチレン浄化方法。
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