JP5699377B2 - α−ガラクトースエピトープ発現ウイルス及びワクチンの作製方法 - Google Patents
α−ガラクトースエピトープ発現ウイルス及びワクチンの作製方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5699377B2 JP5699377B2 JP2011534305A JP2011534305A JP5699377B2 JP 5699377 B2 JP5699377 B2 JP 5699377B2 JP 2011534305 A JP2011534305 A JP 2011534305A JP 2011534305 A JP2011534305 A JP 2011534305A JP 5699377 B2 JP5699377 B2 JP 5699377B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- virus
- gal
- expressing
- vaccine
- cell line
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims description 179
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 52
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 48
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 title claims description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 46
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 41
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 30
- 101000718529 Saccharolobus solfataricus (strain ATCC 35092 / DSM 1617 / JCM 11322 / P2) Alpha-galactosidase Proteins 0.000 claims description 17
- NNISLDGFPWIBDF-MPRBLYSKSA-N alpha-D-Gal-(1->3)-beta-D-Gal-(1->4)-D-GlcNAc Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 NNISLDGFPWIBDF-MPRBLYSKSA-N 0.000 claims description 17
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 14
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 claims description 6
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 claims description 5
- 241000288906 Primates Species 0.000 claims description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 5
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 claims description 3
- 241000701047 Gallid alphaherpesvirus 2 Species 0.000 claims description 3
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 claims description 3
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 claims description 3
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 claims description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 119
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 20
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 19
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 14
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 13
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 13
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 13
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 13
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 11
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 10
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 9
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 9
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 6
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 4
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 4
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 4
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 4
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 4
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 3
- KFEUJDWYNGMDBV-UHFFFAOYSA-N (N-Acetyl)-glucosamin-4-beta-galaktosid Natural products OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 KFEUJDWYNGMDBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 2
- 101001089022 Axinella polypoides Lectin-2 Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 241000219726 Griffonia simplicifolia Species 0.000 description 2
- 241000197306 H1N1 subtype Species 0.000 description 2
- 241001473386 H9N2 subtype Species 0.000 description 2
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 241001272567 Hominoidea Species 0.000 description 2
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 2
- 241001521394 Maackia amurensis Species 0.000 description 2
- KFEUJDWYNGMDBV-LODBTCKLSA-N N-acetyllactosamine Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 KFEUJDWYNGMDBV-LODBTCKLSA-N 0.000 description 2
- HESSGHHCXGBPAJ-UHFFFAOYSA-N N-acetyllactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HESSGHHCXGBPAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 2
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 2
- 241000220010 Rhode Species 0.000 description 2
- 108010073443 Ribi adjuvant Proteins 0.000 description 2
- 240000006028 Sambucus nigra Species 0.000 description 2
- 235000003142 Sambucus nigra Nutrition 0.000 description 2
- 241000272534 Struthio camelus Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 229940028617 conventional vaccine Drugs 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 235000008995 european elder Nutrition 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 2
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 2
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 210000001985 kidney epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000014207 opsonization Effects 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 101710186708 Agglutinin Proteins 0.000 description 1
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000271560 Casuariidae Species 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 241000759568 Corixa Species 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 241000271571 Dromaius novaehollandiae Species 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287227 Fringillidae Species 0.000 description 1
- 101150099983 GT gene Proteins 0.000 description 1
- 101000834253 Gallus gallus Actin, cytoplasmic 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 241000282575 Gorilla Species 0.000 description 1
- 241000252870 H3N2 subtype Species 0.000 description 1
- 102100021519 Hemoglobin subunit beta Human genes 0.000 description 1
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 101710146024 Horcolin Proteins 0.000 description 1
- 241000282596 Hylobatidae Species 0.000 description 1
- 208000002979 Influenza in Birds Diseases 0.000 description 1
- 229940124873 Influenza virus vaccine Drugs 0.000 description 1
- 241001507252 Japanese monkeys Species 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 101710189395 Lectin Proteins 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 101710179758 Mannose-specific lectin Proteins 0.000 description 1
- 101710150763 Mannose-specific lectin 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710150745 Mannose-specific lectin 2 Proteins 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 241000282520 Papio Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000282405 Pongo abelii Species 0.000 description 1
- 241000287531 Psittacidae Species 0.000 description 1
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018265 Virus Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010066342 Virus Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010084455 Zeocin Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- 229940009859 aluminum phosphate Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 229940031567 attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 206010064097 avian influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- CWCMIVBLVUHDHK-ZSNHEYEWSA-N phleomycin D1 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC[C@@H](N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCCCNC(N)=N)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C CWCMIVBLVUHDHK-ZSNHEYEWSA-N 0.000 description 1
- 238000011197 physicochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000005727 virus proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
- C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16051—Methods of production or purification of viral material
- C12N2760/16052—Methods of production or purification of viral material relating to complementing cells and packaging systems for producing virus or viral particles
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
[1]
(1)α-ガラクトースエピトープ(Galα1-3Galβ1-4GlcNAc-R:以下α-Gal)を発現しない細胞系に、α1,3-ガラクトース転移酵素遺伝子を発現し得る状態で導入して、α-Galを発現し得る細胞系を得る工程、
(2)前記α-Galを発現し得る細胞系にウイルスを接種して、ウイルス感染した細胞系を得る工程、および
(3)前記ウイルス感染した細胞系を培養して、培養液からα-Galを発現するウイルスを得る工程
を含むα-Gal発現ウイルスの作製方法。
[2]
前記α-Galを発現しない細胞系が、鳥類または霊長類に属する生物に由来する細胞系である[1]に記載のα-Gal発現ウイルスの作製方法。
[3]
α1,3-ガラクトース転移酵素遺伝子の導入は、α1,3-ガラクトース転移酵素遺伝子を発現し得る状態で含むベクターを導入することで行う、[1]または[2]に記載のα-Gal発現ウイルスの作製方法。
[4]
α1,3-ガラクトース転移酵素遺伝子を発現し得る状態で含むベクターは、発現ベクターにα1,3-ガラクトース転移酵素遺伝子を含み、発現ベクターはCAGプロモーターまたはCMVプロモーターを有するものである[3]に記載のα-Gal発現ウイルスの作製方法。
[5]
α1,3-ガラクトース転移酵素遺伝子がマウス、ブタまたはウシ由来である[1]〜[4]のいずれかに記載のα-Gal発現ウイルスの作製方法。
[6]
前記ウイルスがインフルエンザウイルス、天然痘ウイルス、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、風疹ウイルス、エイズウイルス、ニューカッスル病ウイルス、またはマレック病ウイルスである[1]〜[5]のいずれかに記載のα-Gal発現ウイルスの作製方法。
[7]
[1]〜[6]のいずれかに記載の方法で、α-Galを発現するウイルスを作製し、得られたウイルスからワクチンを作製する、ワクチンの作製方法。
[8]
ワクチンの作製は、ウイルスを不活性化する工程を含む[7]に記載のワクチンの作製方法。
[9]
ウイルスの作製は、ウイルスをサブユニットとする工程を含む[7]に記載のワクチンの作製方法。
[10]
ウイルスの作製は、ウイルスを弱毒化ウイルスとする工程を含む[7]に記載のワクチンの作製方法。
[11]
ワクチンの作製は、ウイルスにアジュバントを含有させる工程をさらに含む[7]〜[10]のいずれかに記載のワクチンの作製方法。
本発明のα-Gal発現ウイルスの作製方法は、以下の(1)〜(3)の工程を含む。
(1)α-Galを発現しない細胞系に、α1,3-ガラクトース転移酵素遺伝子を発現し得る状態で導入して、α- Galを発現し得る細胞系を得る工程、
(2)前記α-Galを発現し得る細胞系にウイルスを接種して、ウイルス感染した細胞系を得る工程、および
(3)前記ウイルス感染した細胞系を培養して、培養液からα-Galを発現するウイルスを得る工程
工程(1)は、α-Galを発現し得る細胞系を得る工程である。工程(1)で用いる細胞系は、α-Galを発現しない細胞系である。α-Galを発現しない細胞系は、例えば、鳥類、並びに人、類人猿、及び旧世界サル類等の霊長類等に由来する細胞系を挙げることができる。但し、これらの種以外の種に由来する細胞系も、α-Galを発現しない細胞系を有するものであれば、特に制限なく、本発明では使用できる。
工程(2)は、α-Galを発現し得る細胞系にウイルスを接種して、ウイルス感染した細胞系を得る工程である。
工程(3)は、工程(2)で得られたウイルス感染した細胞系を培養して、培養液からα-Galを発現するウイルスを得る工程である。α-Galを発現するウイルスとは、ウイルスの表面にα-Galを有するものであり、ウイルスの表面に存在するα-Galは、α-Galに対する自然抗体を保有する人や鳥類では外来抗原として認識される。
本発明は、上記本発明の作製方法で得たα-Gal発現ウイルスを用いて、ワクチンを作製する方法を包含する。
以下の実施例で用いた試験方法について記載する。
(1a) Griffonia Simplicifolia lectin I-Isolectin B4(GS-IB4)を用いたフローサイトメトリー
細胞上に発現するα-Galをfluorescein isothiocyanate (FITC) 標識GS-IB4 (Vector Laboratories Inc.) を用いて4℃で30分間染色した後に洗浄し、FACSCanto flow cytometer (BD Biosciences) にて解析した。
細胞に発現するα2,3シアル酸またはα2,6シアル酸を、それぞれbiotin標識MAL II(Vector)もしくはbiotin標識SNA (Vector) と4℃で30分間反応させた後に洗浄し、Phycoerythrin (PE) 標識streptavidin (Vector)を用いて染色した。染色後の細胞をFACSCanto flow cytometer (BD Biosciences)にて解析した。
ウイルスに発現するα-Galを調べるためのELISA法は以下のように行った。精製したウイルスと2% Triton X-100及び1 M KClを含む溶液を9 :1の割合で混合した後に4℃に30分間静置した。その溶液をcarbonate buffer (pH 9.6) で希釈して5 mg/mlのウイルス液を作製し、96穴ELISAプレートに50 ml/wellずつコーティングした。その後、1% 牛血清アルブミンを含むPBS (BSA/PBS)によりブロッキングし、HRP標識GS-IB4 (Sigma-Aldrich) と室温で1時間反応させ、Tetramethyl benzidine(TMB: BD Bioscience)で発色させて吸光度 (O.D. 450 nm) を測定した。
ウイルスに発現するα-Galを調べるためのWestern blottingは以下のように行った。ウイルスのタンパクを2-mercaptoethanolの存在下でSodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) により分離した後、polyvinylidene difluoride (PVDF) membrane (Bio-Rad) に転写し、1% Alkali-soluble Casein (Novagen) を用いてブロッキングを行った。その後、HRP標識GS-IB4 (Sigma-Aldrich)と室温で1時間反応させ、反応後のPVDF membraneをECL Western blotting analysis system (Amersham Biosciences)によって発光させ、LAS-3000 (FujiFilm)を用いて解析した。
マウス血漿中の抗H9N2抗体価についてHI試験により評価した。具体的には、以下のとおりである。
マウス血漿をRDE (デンカ生研) で処理して非特異的な血球凝集抑制物質を除去した後、鶏赤血球 1容量に対して血漿5容量の体積比で混和して血漿中の自然凝集素を除いた。これを遠心して得られた上清を処理済みの血漿サンプルとしてHI試験に使用した。試験では、血漿サンプルをV字底96穴マイクロプレートにおいて2倍階段希釈した後、4単位の赤血球凝集素 (HA) を含むウイルス液を各ウェルに血漿サンプルと等量(25 ml)加え、室温で1時間反応させた。その後に0.5%鶏赤血球液(50 ml)を添加して赤血球凝集性を観察した。
遺伝子導入によりα-Galを発現させた細胞系
マウスのα1,3-ガラクトース転移酵素(α1,3GT)遺伝子を組み込んだpcDNA3.1(+)(Invitrogen)を用いて、FuGENE HD(Roche)により鶏胚線維芽細胞系CEF-DF1(ATCC CRL-12203:以下CEF)へα1,3GT遺伝子を導入した。CEFの培養には牛胎子血清、L-グルタミン、ペニシリン及びストレプトマイシンを添加したダルベッコ変法イーグル培地を使用した。遺伝子導入の翌日に細胞を継代し、更にその翌日から100μg/mlのG418を用いてセレクションを行い、その2週間後にクローニングを行った。セレクション以降の細胞培養は、培地にG418を加えて行った。
α-Galを発現させた細胞系で増殖したα-Galを発現するウイルス
実施例1で作製したCEF-galに、H9N2亜型鳥インフルエンザウイルス (A/chicken/Yokohama/aq55/01:H9N2ウイルス)(非特許文献5参照)を感染させ、その数日後、細胞変性効果がみられた細胞の培養上清を回収してウイルス液とした。WHOの方法(非特許文献6)に従い、ウイルスを接種する細胞の培養液はウイルス増殖培地に交換した。
α-Gal発現ウイルスワクチンの作製
上記実施例2で作製したウイルス液を、常法(非特許文献7)に従いスクロース液を用いた超遠心により精製した。得られた精製ウイルスをホルマリン、紫外線またはβ-プロピオラクトンにより不活化し、不活化ワクチンを作製した。
α-Gal発現ウイルスワクチンの評価
実験には、人や鳥類と同じくα-Galを発現せず抗α-Gal抗体を保有するα1,3GT遺伝子ノックアウトマウス(α1,3GT-KOマウス)を用いた。α-Galを発現しないH9N2ワクチンまたはα-Galを発現するH9N2-galワクチン各1.0μgをRibi adjuvant systemと混和してマウスに皮下投与した。ワクチンは、ホルマリン不活化サブユニットワクチンを用いた。ワクチン投与は2週間隔で2回行い、その後、マウス血漿中の抗H9N2抗体価についてHI試験により評価した。その結果、H9N2ワクチン投与マウスでは抗体産生が確認されなかったが、H9N2-galワクチン投与マウスではいずれも抗体産生が確認された。結果を図7に示す。
マウスのα1,3GT遺伝子を組み込んだ発現ベクターpCAGGSを、pcDNA3.1(+)とともにFuGENE HDによりCEF-DF1へトランスフェクションし、実施例1と同様の方法により、α1,3GT遺伝子が染色体に組み込まれた細胞クローン(CEF-gal2)を選択した。得られた細胞におけるα-Gal発現の程度は、GS-IB4を用いたフローサイトメトリー解析で確認した。結果を図8に示す。また、CEF-gal2にH9N2ウイルスを感染させる事によって得られたウイルス液の力価を測定し、同細胞におけるウイルスの増殖性を評価した。結果を表1に示す。更に、CEF-gal2から得られたH9N2ウイルスにおけるα-Gal発現をGS-IB4を用いたELISA及びWestern blottingにより確認した。結果を図9に示す。
Claims (9)
- (1)α−ガラクトースエピトープ(Galα1−3Galβ1−4GlcNAc−R:以下α−Gal)を発現しない細胞系に、α1,3−ガラクトース転移酵素遺伝子を発現し得る状態で導入して、α−Galを発現し得る細胞系を得る工程、
但し、α1,3−ガラクトース転移酵素遺伝子の導入は、α1,3−ガラクトース転移酵素遺伝子を発現し得る状態で含む発現ベクターを細胞系に導入することで行い、かつ発現ベクターはCAGプロモーターを有するものである、
(2)前記α−Galを発現し得る細胞系にウイルスを接種して、ウイルス感染した細胞系を得る工程、および
(3)前記ウイルス感染した細胞系を培養して、培養液からα−Galを発現するウイルスを得る工程
を含むα−Gal発現ウイルスの作製方法。 - 前記α−Galを発現しない細胞系が、鳥類または霊長類に属する生物に由来する細胞系である請求項1に記載のα−Gal発現ウイルスの作製方法。
- α1,3−ガラクトース転移酵素遺伝子がマウス、ブタまたはウシ由来である請求項1〜2のいずれかに記載のα−Gal発現ウイルスの作製方法。
- 前記ウイルスがインフルエンザウイルス、天然痘ウイルス、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、風疹ウイルス、エイズウイルス、ニューカッスル病ウイルス、またはマレック病ウイルスである請求項1〜2及び5のいずれかに記載のα−Gal発現ウイルスの作製方法。
- 請求項1〜2及び5〜6のいずれかに記載の方法で、α−Galを発現するウイルスを作製し、得られたウイルスからワクチンを作製する、ワクチンの作製方法。
- ワクチンの作製は、ウイルスを不活性化する工程を含む請求項7に記載のワクチンの作製方法。
- ウイルスの作製は、ウイルスをサブユニットとする工程を含む請求項7に記載のワクチンの作製方法。
- ウイルスの作製は、ウイルスを弱毒化ウイルスとする工程を含む請求項7に記載のワクチンの作製方法。
- ワクチンの作製は、ウイルスにアジュバントを含有させる工程をさらに含む請求項7〜10のいずれかに記載のワクチンの作製方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2011534305A JP5699377B2 (ja) | 2009-09-30 | 2010-09-30 | α−ガラクトースエピトープ発現ウイルス及びワクチンの作製方法 |
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2009227753 | 2009-09-30 | ||
JP2009227753 | 2009-09-30 | ||
JP2011534305A JP5699377B2 (ja) | 2009-09-30 | 2010-09-30 | α−ガラクトースエピトープ発現ウイルス及びワクチンの作製方法 |
PCT/JP2010/067082 WO2011040526A1 (ja) | 2009-09-30 | 2010-09-30 | α-ガラクトースエピトープ発現ウイルス及びワクチンの作製方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2011040526A1 JPWO2011040526A1 (ja) | 2013-02-28 |
JP5699377B2 true JP5699377B2 (ja) | 2015-04-08 |
Family
ID=43826338
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011534305A Active JP5699377B2 (ja) | 2009-09-30 | 2010-09-30 | α−ガラクトースエピトープ発現ウイルス及びワクチンの作製方法 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20130052219A1 (ja) |
EP (1) | EP2484757B1 (ja) |
JP (1) | JP5699377B2 (ja) |
WO (1) | WO2011040526A1 (ja) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2013001686A (ja) * | 2011-06-20 | 2013-01-07 | National Agriculture & Food Research Organization | 鳥インフルエンザに対する点眼ワクチン |
CN105779397B (zh) * | 2014-12-22 | 2019-07-19 | 彭霞 | 溶瘤异源重组新城疫病毒及其制备方法与应用 |
CN115103905A (zh) * | 2020-01-10 | 2022-09-23 | 香港大学 | 表达α-1,3-半乳糖基转移酶的重组病毒及其用途 |
CN113388586B (zh) * | 2021-06-15 | 2024-01-02 | 广西医科大学 | 一种溶瘤病毒ndv-nrp1及其构建方法与应用 |
CN114381435A (zh) * | 2022-01-19 | 2022-04-22 | 杨凌绿方生物工程有限公司 | 一种用cef转瓶培养h9n2亚型禽流感病毒的方法 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2824434B2 (ja) | 1989-11-28 | 1998-11-11 | 財団法人化学及血清療法研究所 | 新規発現ベクター |
FR2884255B1 (fr) | 2005-04-11 | 2010-11-05 | Vivalis | Utilisation de lignees de cellules souches aviaires ebx pour la production de vaccin contre la grippe |
JP4288259B2 (ja) | 2005-09-01 | 2009-07-01 | 大日本住友製薬株式会社 | 動物細胞感染用の組換えdnaウイルスベクター |
EP2134361A4 (en) * | 2007-03-26 | 2010-09-22 | Univ Massachusetts Medical | COMPOSITIONS AND METHODS FOR INCREASING THE IMMUNOGENICITY OF GLYCOPROTEIN VACCINES |
EP1995309A1 (en) * | 2007-05-21 | 2008-11-26 | Vivalis | Recombinant protein production in avian EBx® cells |
US20090123494A1 (en) * | 2007-07-31 | 2009-05-14 | William Staplin | Momlv-based pseudovirion packaging cell line |
-
2010
- 2010-09-30 WO PCT/JP2010/067082 patent/WO2011040526A1/ja active Application Filing
- 2010-09-30 EP EP20100820641 patent/EP2484757B1/en not_active Not-in-force
- 2010-09-30 JP JP2011534305A patent/JP5699377B2/ja active Active
- 2010-09-30 US US13/499,281 patent/US20130052219A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2011040526A1 (ja) | 2011-04-07 |
US20130052219A1 (en) | 2013-02-28 |
EP2484757A1 (en) | 2012-08-08 |
EP2484757A4 (en) | 2013-07-03 |
EP2484757B1 (en) | 2015-04-29 |
EP2484757A9 (en) | 2013-12-04 |
JPWO2011040526A1 (ja) | 2013-02-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2022091775A (ja) | インフルエンザウイルスワクチン及びその使用 | |
JP2021078505A (ja) | インフルエンザウイルスワクチン及びその使用 | |
US7504248B2 (en) | Production of viruses viral isolates and vaccines | |
JP4331432B2 (ja) | ワクチンの生成方法 | |
Lin et al. | Different immunity elicited by recombinant H5N1 hemagglutinin proteins containing pauci-mannose, high-mannose, or complex type N-glycans | |
JP5699377B2 (ja) | α−ガラクトースエピトープ発現ウイルス及びワクチンの作製方法 | |
Dong et al. | Status and challenges for vaccination against avian H9N2 influenza virus in China | |
Schoen et al. | Impact of protein glycosylation on the design of viral vaccines | |
CA2682047A1 (en) | Compositions and methods for increasing immunogenicity of glycoprotein vaccines | |
JP6978079B2 (ja) | ウシ免疫不全ウイルスgagタンパク質を使用する組換えウイルス様粒子 | |
do Nascimento et al. | An orf-virus (ORFV)-based vector expressing a consensus H1 hemagglutinin provides protection against diverse swine influenza viruses | |
JP5889890B2 (ja) | 改変されたウイルス株およびインフルエンザウイルスのワクチンシードの生産を改善する方法 | |
WO2003048197A1 (en) | Production and of viruses, viral isolates and vaccines | |
JP5688373B2 (ja) | α−ガラクトースエピトープを発現するトランスジェニック鳥類、ウイルス及びワクチン | |
Chen et al. | Addition of αGal HyperAcute™ technology to recombinant avian influenza vaccines induces strong low-dose antibody responses | |
Spruit et al. | Complex N-glycans are important for interspecies transmission of H7 influenza A viruses | |
Lee et al. | Virus-Like Particles Assembled Using Respiratory Syncytial Virus Matrix Protein Elicit Protective Immunity in Mice | |
Yang et al. | The Haemagglutinin Genes of the UK Clade 2.3. 4.4 b H5N1 Avian Influenza Viruses from 2020 to 2022 Retain Strong Avian Phenotype | |
Gromadzka et al. | Characterization of Immune Response towards Generation of Universal Anti-HA-Stalk Antibodies after Immunization of Broiler Hens with Triple H5N1/NA-HA-M1 VLPs | |
Barnard | Influenza Virus Interactions with Modified Sialic Acids | |
TWI494430B (zh) | 製備與真實流感病毒粒子高度相似的流感類病毒顆粒之轉殖基因哺乳動物細胞表現系統 | |
US20200188507A1 (en) | Influenza virus vaccine and method of making | |
Lindsay | The Structural Characterization of a Novel Influenza Vaccine by Transmission Electron Microscopy | |
EA042635B1 (ru) | Рекомбинантные вирусоподобные частицы (vlp) с использованием протеина группового антигена (gag) вируса бычьего иммунодефицита | |
Pankajavally Somanathan Pillai | Viral and Host Factors Affecting Infection, Pathogenicity and Transmission of Influenza Viruses |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130913 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20130913 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150106 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20150126 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5699377 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |