JP5641142B2 - 構造化照明装置、構造化照明顕微鏡、構造化照明方法 - Google Patents
構造化照明装置、構造化照明顕微鏡、構造化照明方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5641142B2 JP5641142B2 JP2013524609A JP2013524609A JP5641142B2 JP 5641142 B2 JP5641142 B2 JP 5641142B2 JP 2013524609 A JP2013524609 A JP 2013524609A JP 2013524609 A JP2013524609 A JP 2013524609A JP 5641142 B2 JP5641142 B2 JP 5641142B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- phase
- diffracted light
- sound wave
- structured illumination
- propagation path
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/36—Microscopes arranged for photographic purposes or projection purposes or digital imaging or video purposes including associated control and data processing arrangements
- G02B21/365—Control or image processing arrangements for digital or video microscopes
- G02B21/367—Control or image processing arrangements for digital or video microscopes providing an output produced by processing a plurality of individual source images, e.g. image tiling, montage, composite images, depth sectioning, image comparison
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/06—Means for illuminating specimens
- G02B21/08—Condensers
- G02B21/14—Condensers affording illumination for phase-contrast observation
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02F—OPTICAL DEVICES OR ARRANGEMENTS FOR THE CONTROL OF LIGHT BY MODIFICATION OF THE OPTICAL PROPERTIES OF THE MEDIA OF THE ELEMENTS INVOLVED THEREIN; NON-LINEAR OPTICS; FREQUENCY-CHANGING OF LIGHT; OPTICAL LOGIC ELEMENTS; OPTICAL ANALOGUE/DIGITAL CONVERTERS
- G02F1/00—Devices or arrangements for the control of the intensity, colour, phase, polarisation or direction of light arriving from an independent light source, e.g. switching, gating or modulating; Non-linear optics
- G02F1/01—Devices or arrangements for the control of the intensity, colour, phase, polarisation or direction of light arriving from an independent light source, e.g. switching, gating or modulating; Non-linear optics for the control of the intensity, phase, polarisation or colour
- G02F1/11—Devices or arrangements for the control of the intensity, colour, phase, polarisation or direction of light arriving from an independent light source, e.g. switching, gating or modulating; Non-linear optics for the control of the intensity, phase, polarisation or colour based on acousto-optical elements, e.g. using variable diffraction by sound or like mechanical waves
- G02F1/113—Circuit or control arrangements
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Multimedia (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Nonlinear Science (AREA)
- Computer Vision & Pattern Recognition (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Description
のコントラストを制御する制御手順とを含む。
以下、本発明の第1の実施形態として構造化照明顕微鏡システムを説明する。
例えば、2光束構造化照明S’の縞本数のズレを0.15本以下に抑える必要があったならば、その関係式は、φ/L≦0.15となる。
なお、図3(C)において点線で示したのは2光束構造化照明S’の理想パターン(縞本数のズレがゼロである場合のパターン)であり、実線で示したのは2光束構造化照明S’の実際のパターンであるが、わかりやすくするために両者のズレを強調して描いた。
Ii(r) = I0 + 2I+ 4・√I0・√I・cos(kxX)・cos(kzZ)+ 2・I・cos(2kxX)…(1)
Ii(r) = I0 + 2I+ 4・√I0・√I・cos(kxX-π)・cos(kzZ)+ 2・I・cos(2kxX-2π) …(2)
なお、Xは、3光束構造化照明において位相型回折格子のピッチ方向に対応した方向の位置を示し、Zは、3光束構造化照明の光軸方向の位置を示し、I0は、0次回折光の強度を示し、Iは、±1次回折光の強度を示し、kは、波数を示している。式(1)、(2)における第1項は、0次回折光の強度であり、第2項は、+1次回折光の強度と−1次回折光の強度との和であり、第3項は、±1次回折光と0次回折光との間の干渉強度分布であり、第4項は、±1次回折光同士の干渉強度分布である。式(1)と式(2)との間では、第3項のみが異なる。
Ii(r) = I0 + 2I+ 4・√I0・√I・cos(kxX-π)・cos(kzZ)+ 2・I・cos(2kxX)…(1')
つまり、0次回折光の位相変調が行われた場合の3光束構造化照明は、前半期には、式(1’)のパターンとなり、後半期には、式(2)のパターンとなる。この式(1’)を式(2)と比較すると、両者のパターンは互いに同じであることがわかる。
また、本システムの3次元モードでは、屈折率の時間変化波形と0次回折光の位相変調量の時間変化波形との間の位相差ΔΨの調整を、制御装置19が自動で行ったが、システムのユーザが手動で行ってもよい。但し、その場合は、調整中の画像のコントラストをユーザが確認できるよう、撮像装置12から出力される画像を制御装置19がリアルタイムで画像表示装置14へ表示する必要がある。
なお、本システムの2次元モードでは、トランスデューサに与えられる交流電圧の周波数の変化パターンを、超音波定在波の波本数が1/2本ずつ変化するようなパターンとし、かつ、第1方向及び第2方向及び第3方向の各々の2光束構造化照明の位相シフトピッチを2π/3とするために、スポット(有効径)Sの中心から超音波伝搬路の一端までの距離Dを、超音波伝搬路Rの伝搬方向の長さLの1/3倍に設定した(D=L/3)が、これに限定されることはない。
なお、標本面10に干渉縞を形成するためには、超音波光変調器3の超音波伝搬路Rにおける射出光束の通過領域(スポット)が、必ずしも超音波伝搬路Rの両端から離れた部分領域に制限されていなくてもよく、例えば、視野絞り5Bにより超音波伝搬路Rを通過した光束を絞る場合などには、超音波伝搬路Rにおける有効な射出光束の通過領域、すなわち、超音波伝搬路Rのうち標本面10の照明領域(観察領域、視野領域)に形成される干渉縞(構造化照明S’)に寄与する射出光束の通過した部分領域が、D:L=Δψ/M:2πの関係を満たしていればよい。
また、本実施形態の説明では、回折光による干渉縞の位相を変化させるために、超音波伝播路Ra、Rb、Rcで生起される超音波定在波の波本数(即ち、超音波定在波の波長)を所定のパターンで変化させると共に、超音波定在波の波長を変化させる方法の一つとして、超音波光変調器3のトランスデューサ18a、18b、18cに与えられる交流電圧の周波数を変化させることを説明したが、この方法に限られないことは言うまでもない。
1)米国特許発明第6239909号公報
2)US8115806
3)Proceedings of the SPIE - The International Society for Optical Engineering (2000) vol.3919, p.141-50
Claims (15)
- 光源からの射出光束の光路中に配置され、その射出光束を横切る方向に音波伝搬路を配した光変調器と、
前記音波伝搬路の媒体を振動させるための駆動信号を前記光変調器へ与えることにより、前記音波伝搬路内に音波定在波を生起させる駆動手段と、
前記音波伝搬路を通過した前記射出光束の少なくとも3つの回折光を干渉させ、その干渉縞を被観察物に形成する照明光学系と、
前記回折光の少なくとも1つの回折光の位相を、前記駆動信号の周波数の1/N倍の周波数を有した変調信号で変調することで、検出器によって検出される前記干渉縞の像のコントラストを制御する制御手段と(ただし、Nは1以上の整数)、
を備えたことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項1に記載の構造化照明装置において、
前記制御手段は、
前記回折光の少なくとも2つの回折光の位相差が前記被観察物においてπとなるように前記位相を制御する
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項1又は2に記載の構造化照明装置において、
前記制御手段は、
変調信号により前記回折光の位相を変調する
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項3に記載の構造化照明装置において、
前記制御手段は、
前記変調信号の周波数を、前記駆動信号が有する周波数の1/N倍に設定すると共に、前記変調信号のデューティー比を、1/(2N)以下に設定する(但し、Nは1以上の整数)
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項3又は4に記載の構造化照明装置において、
前記制御手段は、
前記回折光の少なくとも1つの回折光の光路に配置された位相変調器と、前記位相変調器を前記変調信号で駆動する駆動部と
を備えることを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項1〜請求項5の何れか一項に記載の構造化照明装置において、
前記回折光は、0次回折光と、±1次回折光である
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項6に記載の構造化照明装置において、
前記0次回折光を基準とした前記+1次回折光の位相をαだけオフセットすると共に、前記0次回折光を基準とした前記−1次回折光の位相を−αだけオフセットするオフセット手段を更に備え、
前記制御手段は、
前記±1次回折光の位相がオフセットされた状態から前記変調を行うことにより、前記干渉縞のコントラストを制御すると共に、それらのオフセットの量αを所定のパターンで切り換えることにより、前記干渉縞の位相を切り換える
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項1〜請求項6の何れか一項に記載の構造化照明装置において、
前記干渉縞は、
前記音波伝搬路の両端から離れた所定の部分領域を通過した前記射出光束により形成されたものであり、
前記駆動手段は、
前記音波定在波の波長を所定のパターンで切り換えることにより、前記干渉縞の位相を切り換える
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項8に記載の構造化照明装置において、
前記駆動手段は、
前記音波定在波の全体の波本数がM/2本ずつ変化するようなパターンで前記音波定在波の波長を変化させることが可能であり(但し、|M|は1以上の整数)、
前記干渉縞の位相シフトピッチをΔψとおくと、前記音波伝搬路の何れか一方の端部から前記部分領域までの距離Dと、前記音波伝搬路の全長Lとは、D:L=Δψ/M:2πの関係を満たす
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項8又は請求項9に記載の構造化照明装置において、
前記駆動手段は、
前記光変調器へ与える前記駆動信号の周波数を所定のパターンで切り換えることで、前記音波定在波の波長を切り換える
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項1〜請求項10の何れか一項に記載の構造化照明装置において、
前記射出光束の3つの回折光を前記干渉縞に反映させる3次元モードと、前記射出光束の2つの回折光のみを前記干渉縞に反映させる2次元モードとの間で前記構造化照明装置のモードを切り換える切換手段を更に備えた
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項11に記載の構造化照明装置において、
前記干渉縞は、
前記音波伝搬路の両端から離れた所定の部分領域を通過した前記射出光束により形成されたものであり、
前記駆動手段は、
前記音波定在波の波長を所定のパターンで切り換えることにより、前記干渉縞の位相を切り換え、
前記音波伝搬路の何れか一方の端部から前記部分領域までの距離Dと、前記音波伝搬路の全長Lとは、D:L=1:6の関係を満たす
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項1〜請求項12の何れか一項に記載の装置構造化照明装置において、
前記超音波光変調器は、
前記射出光束の通過領域で交差した複数の前記音波伝搬路を有し、それら音波伝搬路の間で有効な音波伝搬路を切り換えることにより、前記音波定在波の方向を切り換えることが可能である
ことを特徴とする構造化照明装置。 - 請求項1〜請求項13の何れか一項に記載の構造化照明装置と、
前記照明装置で照明された被観察物からの観察光束を検出する検出器で取得された、前記音波定在波のパターンの異なる複数の状態での各々の像に基づき、前記被観察物の超解像画像を算出する演算手段を更に備えた
ことを特徴とする構造化照明顕微鏡。 - 光源からの射出光束の光路中に配置され、その射出光束を横切る方向に音波伝搬路を配した光変調器を用意する光変調手順と、
前記音波伝搬路の媒質を振動させるための駆動信号を前記光変調器へ与えることにより、前記音波伝搬路内に音波定在波を生起させる駆動手順と、
前記音波伝搬路を通過した前記射出光束の少なくとも3つの回折光を干渉させ、その干渉縞を被観察物に形成する照明手順と、
前記回折光の少なくとも1つの回折光の位相を、前記駆動信号の周波数の1/N倍の周波数を有した変調信号で変調することで、検出器によって検出される前記干渉縞の像のコントラストを制御する制御手順と(ただし、Nは1以上の整数)、
を含むことを特徴とする構造化照明方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013524609A JP5641142B2 (ja) | 2011-07-15 | 2012-07-13 | 構造化照明装置、構造化照明顕微鏡、構造化照明方法 |
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2011156456 | 2011-07-15 | ||
JP2011156456 | 2011-07-15 | ||
PCT/JP2012/004548 WO2013011680A1 (ja) | 2011-07-15 | 2012-07-13 | 構造化照明装置、構造化照明顕微鏡、構造化照明方法 |
JP2013524609A JP5641142B2 (ja) | 2011-07-15 | 2012-07-13 | 構造化照明装置、構造化照明顕微鏡、構造化照明方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP5641142B2 true JP5641142B2 (ja) | 2014-12-17 |
JPWO2013011680A1 JPWO2013011680A1 (ja) | 2015-02-23 |
Family
ID=47557880
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013524609A Expired - Fee Related JP5641142B2 (ja) | 2011-07-15 | 2012-07-13 | 構造化照明装置、構造化照明顕微鏡、構造化照明方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9146393B2 (ja) |
JP (1) | JP5641142B2 (ja) |
WO (1) | WO2013011680A1 (ja) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2629133A4 (en) * | 2010-10-14 | 2017-12-13 | Nikon Corporation | Structured illumination device, structured illumination microscope device, and surface shape measurement device |
JP6183915B2 (ja) * | 2012-02-24 | 2017-08-23 | 国立大学法人 東京大学 | 照明方法および顕微観察装置 |
JP5958779B2 (ja) * | 2012-10-12 | 2016-08-02 | 株式会社ニコン | 顕微鏡及び観察方法 |
JP6409260B2 (ja) * | 2013-09-06 | 2018-10-24 | 株式会社ニコン | 構造化照明装置及び構造化照明顕微鏡装置 |
JP6690424B2 (ja) * | 2016-06-13 | 2020-04-28 | 株式会社ニコン | 顕微鏡装置、観察方法、及び制御プログラム |
US11428916B2 (en) | 2016-08-15 | 2022-08-30 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Light sheet microscope |
US11287627B2 (en) | 2017-06-30 | 2022-03-29 | Chrysanthe Preza | Multi-focal light-sheet structured illumination fluorescence microscopy system |
DE102018113208A1 (de) * | 2018-06-04 | 2019-12-05 | Carl Zeiss Microscopy Gmbh | Verfahren zum Betreiben eines Lichtmikroskops mit strukturierter Beleuchtung und Optikanordnung |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007043313A1 (ja) * | 2005-10-11 | 2007-04-19 | Nikon Corporation | 顕微鏡装置及び観察方法 |
JP2007199572A (ja) * | 2006-01-30 | 2007-08-09 | Nikon Corp | 顕微鏡装置 |
JP2007279287A (ja) * | 2006-04-05 | 2007-10-25 | Nikon Corp | 構造化照明光学系、及びそれを備えた構造化照明顕微鏡 |
JP2008216778A (ja) * | 2007-03-06 | 2008-09-18 | Nikon Corp | 構造化照明顕微鏡 |
WO2010037487A1 (de) * | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Carl Zeiss Microimaging Gmbh | Verbesserte verfahren und vorrichtungen für die mikroskopie mit strukturierter beleuchtung |
JP2010540999A (ja) * | 2007-09-28 | 2010-12-24 | カール ツァイス マイクロイメージング ゲーエムベーハー | 照明された試料を光学的に捕捉するための方法および装置 |
WO2011135819A1 (ja) * | 2010-04-26 | 2011-11-03 | 株式会社ニコン | 構造化照明顕微鏡装置 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH11242189A (ja) | 1997-12-25 | 1999-09-07 | Olympus Optical Co Ltd | 像形成法、像形成装置 |
EP1865355B1 (en) | 2005-03-30 | 2013-03-06 | Nikon Corporation | Image forming method and microscope device |
EP2629133A4 (en) * | 2010-10-14 | 2017-12-13 | Nikon Corporation | Structured illumination device, structured illumination microscope device, and surface shape measurement device |
-
2012
- 2012-07-13 JP JP2013524609A patent/JP5641142B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2012-07-13 WO PCT/JP2012/004548 patent/WO2013011680A1/ja active Application Filing
-
2013
- 2013-12-03 US US14/095,453 patent/US9146393B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007043313A1 (ja) * | 2005-10-11 | 2007-04-19 | Nikon Corporation | 顕微鏡装置及び観察方法 |
JP2007199572A (ja) * | 2006-01-30 | 2007-08-09 | Nikon Corp | 顕微鏡装置 |
JP2007279287A (ja) * | 2006-04-05 | 2007-10-25 | Nikon Corp | 構造化照明光学系、及びそれを備えた構造化照明顕微鏡 |
JP2008216778A (ja) * | 2007-03-06 | 2008-09-18 | Nikon Corp | 構造化照明顕微鏡 |
JP2010540999A (ja) * | 2007-09-28 | 2010-12-24 | カール ツァイス マイクロイメージング ゲーエムベーハー | 照明された試料を光学的に捕捉するための方法および装置 |
WO2010037487A1 (de) * | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Carl Zeiss Microimaging Gmbh | Verbesserte verfahren und vorrichtungen für die mikroskopie mit strukturierter beleuchtung |
WO2011135819A1 (ja) * | 2010-04-26 | 2011-11-03 | 株式会社ニコン | 構造化照明顕微鏡装置 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20140092463A1 (en) | 2014-04-03 |
US9146393B2 (en) | 2015-09-29 |
JPWO2013011680A1 (ja) | 2015-02-23 |
WO2013011680A1 (ja) | 2013-01-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5594429B2 (ja) | 構造化照明顕微鏡及び構造化照明観察方法 | |
JP5641142B2 (ja) | 構造化照明装置、構造化照明顕微鏡、構造化照明方法 | |
JP5549740B2 (ja) | 構造化照明装置、構造化照明顕微鏡装置、及び面形状測定装置 | |
JP6197880B2 (ja) | 構造化照明顕微鏡、構造化照明方法、及びプログラム | |
JP6264377B2 (ja) | 構造化照明装置及び構造化照明顕微鏡装置 | |
JP4899408B2 (ja) | 顕微鏡装置 | |
JP5751328B2 (ja) | 構造化照明光学系および構造化照明顕微鏡装置 | |
JP6194710B2 (ja) | 構造化照明装置及び構造化照明顕微鏡装置 | |
JP2008039882A (ja) | 光学顕微鏡及び観察方法 | |
WO2013021615A1 (ja) | 構造化照明装置及び構造化照明方法、並びに構造化照明顕微鏡装置 | |
JP4844862B2 (ja) | 格子照明顕微鏡 | |
JP2012037911A (ja) | 顕微鏡装置 | |
JP6270615B2 (ja) | 標本像データ生成装置、及び、標本像データ生成方法 | |
JP6413364B2 (ja) | 照明光学系及び顕微鏡装置 | |
JP5741709B2 (ja) | 構造化照明装置、その構造化照明装置の調整方法、コンピュータ実行可能な調整プログラム、構造化照明顕微鏡装置、面形状測定装置 | |
JP6269239B2 (ja) | 構造化照明装置及び構造化照明顕微鏡装置 | |
WO2015052920A1 (ja) | 構造化照明装置及び構造化照明顕微鏡装置 | |
JP2017223726A (ja) | 顕微鏡装置、観察方法、及び制御プログラム |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140930 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20141013 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5641142 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |