JP5553515B2 - 精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法、精神的ストレス抑制もしくは増強物質スクリーニング用キット、哺乳動物の精神的ストレスの判定方法、患者のうつ病の判定又は同病からの回復の判定の際に使用するデータの収集方法、及び、精神的ストレスまたはうつ病の判定キット - Google Patents
精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法、精神的ストレス抑制もしくは増強物質スクリーニング用キット、哺乳動物の精神的ストレスの判定方法、患者のうつ病の判定又は同病からの回復の判定の際に使用するデータの収集方法、及び、精神的ストレスまたはうつ病の判定キット Download PDFInfo
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
ルチゾール濃度を測定する方法(特許文献3)、モノアミン類の濃度変化率を測定する方法(特許文献4)、V-1蛋白質量を測定する方法(特許文献5)、perl遺伝子とper2遺伝
子の発現レベルを指標とする方法(特許文献6)など、多くの方法が提案されている。
許文献5)については、脳その他の臓器の摘出が必要であり、操作の複雑さが問題となる。またヒトには適用できないという大きな欠点を持っている。
文献3)あるいはPer遺伝子mRNA等には、分析試料採取のタイミングに細かな制限を設け
る必要がある。さらにPer遺伝子mRNAについては調製方法が他の蛋白質マーカーに比べ格
段に難易度が高くなるという欠点もある。
者の慢性ストレス、うつ病の評価を行う方法が提唱されている(特許文献7、特許文献8)。しかし、この方法は難易度の高いmRNAの調製を必要とするばかりでなく、高額なDNA
マイクロアレイ及び測定器が必要になるという点においても、精神科医が日常の診断に利用するために簡便で有効な方法とは言い難い。また用いられるほとんどのマーカーがストレスによって高々50%程度の幅でしか増減を示しておらず、信頼できる診断をするために
は極めて高い分析技術が要求されるという難点も見られる。
上を定量し、その量を、前記被験物質が投与されず、前記精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血清あるいは血漿中の前記3種のタンパク質の量と比較して前記被験物質を評価することを特徴とする精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法。
体のうちのいずれか1種以上を定量し、その量を、前記被験物質が投与されず、前記精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血漿、あるいは血清中の前記抗体の量と比較して前記被験物質を評価することを特徴とする精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法。
を備えたことを特徴とする、精神的ストレス抑制もしくは増強物質スクリーニング用キット。
し、その量を、健常な哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の前記3種のタンパク質の量と比較・評価することを特徴とする前記哺乳動物の精神的ストレスの判定方法。
いずれか1種以上を定量し、その量を、健常な哺乳動物から採取された血液、血漿、あるいは血清中の前記抗体の量と比較・評価することを特徴とする前記哺乳動物の精神的ストレスの判定方法。
、その量を、健常なヒトから採取された血液、血漿、あるいは血清中の前記3種のタンパク質の量と比較・評価することを特徴とする前記患者のうつ病の判定または同病からの回復の判定方法。
れか1種以上を定量し、その量を、健常なヒトから採取された血液、血漿、あるいは血清中の前記抗体の量と比較・評価することを特徴とする前記患者のうつ病の判定または同病からの回復の判定方法。
1種以上のタンパク質、あるいはこれらのいずれかに結合する抗体又はそれらの標識物を備えたことを特徴とする精神的ストレスまたはうつ病の判定用キット。
本発明の精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法においては、(1)精神的ストレスを負荷され、該精神的ストレスを負荷される前から負荷中に亘り被験物質を投与された哺乳動物由来の血液、血清、あるいは血漿中の、血清アミ
ロイドP,血清アミロイドA1,ハプトグロビンα鎖の3種のタンパク質のうちのいずれ
か1種以上を定量し、その量(以下単に「量1」ともいう)を、前記被験物質が投与されず、前記精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血清あるいは血漿中の前記3種のタンパク質の量(以下単に「量2」ともいう)と比較して前記被験物質を評価するか(以下、このような方法をスクリーニング方法[1]ともいう。)、あるいは、
精神的ストレスを負荷され、該精神的ストレスを負荷される前から負荷中に亘り被験物質を投与された哺乳動物由来の血液、血漿あるいは血清中の、血清アミロイドPに結合する抗体,血清アミロイドA1に結合する抗体,ハプトグロビンα鎖に結合する抗体のうち
のいずれか1種以上を定量し、その量(以下単に「量1」ともいう)を、前記被験物質が投与されず、前記精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血漿あるいは血清中の前記抗体の量(以下単に「量2」ともいう)と比較して前記被験物質を評価する(以下、このような方法をスクリーニング方法[2]ともいう。)。
さらに水浸法、拘束法、水浸拘束法、床電撃法等の公知のストレス負荷方法も挙げることができる。
好ましくは精神的ストレスを負荷される1日〜14日前である。
同じく血清アミロイドPの量を示す。すなわち、精神的ストレスを負荷され、被験物質を
投与された哺乳動物由来の血液、血清、あるいは血漿中の血清アミロイドPを定量した場
合には、被験物質を投与されず、精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血清、あるいは血漿中の血清アミロイドPを定量する。そして得られた二つの量を比較・評価
する。
験物質を評価するとは、量1の個体間での平均値が量2の個体間での平均値よりも統計学的に有意に高い、すなわち被験物質を投与しない場合と比較して、被験物質を投与した場合に、血清アミロイドP,血清アミロイドA1,ハプトグロビンα鎖の発現量の個体間での平均値が95%以上の確率で増加したと言えるときは、被験物質が精神的ストレス増強物
質であると評価する。他方、量1の個体間での平均値が量2の個体間での平均値よりも統計学的に有意に小さい、すなわち被験物質を投与しない場合と比較して、被験物質を投与した場合に、血清アミロイドP,血清アミロイドA1,ハプトグロビンα鎖の発現量が95
%以上の確率で減少したと言えるときは、被験物質が精神的ストレス抑制物質であると評
価するということである。ここで述べた確率とは、統計学上の常法であるt検定を用いて
評価されるもので、例えば宮原英夫・白鷹増男、医学統計学、朝倉書店、1992年、等の教科書に説明されている。
ポリアクリルアミドゲル(slab gel)に載せ、等電点電気泳動の展開方向に対して直角の方向に電気泳動することにより行うことができる。タンパク質の定量は、たとえば下記実施例に記載したタンパク質の増減を視覚化・定量する方法により行うことができる。
等を光学的手段により測定することで容易に行うことができる。また前記スポットを切り出し、トリプシン等のプロテアーゼで消化し抽出された成分を質量分析等により直接定量することにより行うこともできる。
血清アミロイドA1、ハプトグロビンα鎖の発現量が増加するのに伴って、これらに結合
する抗体の量も増加すると考えられるからである。
マ法、ヒトB細胞ハイブリドーマ法及びEBV−ハイブリドーマ法など任意の方法を用いる
ことができる。
なデータ、たとえば吸光度、発色強度、発光強度などを含む)として得られる。上記量2についても同様である。なお、量2は量1が示す抗体と対応する(同じ)抗体の量であり、たとえば量1が血清アミロイドPに結合する抗体の量を示しているのであれば、量2も
同じく血清アミロイドPに結合する抗体の量を示す。すなわち、精神的ストレスを負荷さ
れ、被験物質を投与された哺乳動物由来の血液、血漿、あるいは血清中の血清アミロイドPに結合する抗体を定量した場合には、被験物質を投与されず、精神的ストレスを負荷さ
れた哺乳動物由来の血液、血漿、あるいは血清中の血清アミロイドPに結合する抗体を定
量する。
ェスタンブロット法等の免疫学的検出法を挙げることができる。これらの方法に用いられる標識物質としては、アルカリフォスファターゼ、HRP(西洋わさび由来ペルオキシダー
ゼ)等の酵素、抗体のFc領域、GFP等の蛍光物質などを具体的に挙げることができる。ま
たペプチドタグとしては、HA、FLAG、Myc等のエピトープタグや、GST、マルトース結合タンパク質、ビオチン化ペプチド、オリゴヒスチジン等の親和性タグなどの従来知られているペプチドタグを具体的に例示することができる。
が公開されているため、前記3種の蛋白質は容易に合成することができる。
範囲の精神的ストレス抑制物質の効果を反映する、つまり多様な精神的ストレス抑制物質によって精神的ストレスを負荷された際の発現量の増加が抑制されるので、本発明のスクリーニング方法においては、まずこれらの蛋白質またはそれに結合する抗体を定量することが好ましい。
本発明の哺乳動物の精神的ストレスの判定方法では、哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の、血清アミロイドP,血清アミロイドA1,ハプトグロビンα鎖の3種のタンパク質のうちのいずれか1種以上を定量し、その量(以下単に「量3」ともいう)を、健常な哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の前記3種のタンパク質
の量(以下単に「量4」ともいう)と比較・評価する(以下、このような方法を精神的ストレスの判定方法[1]ともいう。)か、あるいは、
哺乳動物から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドPに結合する抗体,血清アミロイドA1に結合する抗体,ハプトグロビンα鎖に結合する抗体のいずれか1種以上を定量し、その量を、健常な哺乳動物から採取された血液、血漿、あるいは血清中の前記抗体の量と比較・評価する(以下、このような方法を精神的ストレスの判定方法[2]ともいう。)。これらの抗体の調製方法は、前述のとおりである。
量4も同じく血清アミロイドPの量を示す。すなわち、精神的ストレスを判定しようとす
る哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の血清アミロイドPを定量した場合
には、健常な哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の血清アミロイドPを定
量する。あるいは予め健常な哺乳動物由来の血液、血漿あるいは血清中の血清アミロイドPの量のデータを取っておき、そのデータと量3とを比較してもよい。
量4も同じく血清アミロイドPに結合する抗体の量を示す。すなわち、精神的ストレスを
判定しようとする哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の血清アミロイドP
に結合する抗体を定量した場合には、健常な哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の血清アミロイドPに結合する抗体を定量する。あるいは予め健常な哺乳動物由来
の血液、血漿あるいは血清中の血清アミロイドPに結合する抗体の量のデータを取ってお
き、そのデータと量3とを比較してもよい。
常範囲内と判定される者である。尚、アンケート調査の性格上、理解力が不足している幼年(0-4歳)については正常範囲の判定は困難である。
分類に従い、少年(5-14歳)、青年(15-24歳)、壮年(25-44歳)、中年(45-64歳)
、高年(65歳以上)という年齢層別に上記アンケート調査を行い、健常者と判断された男女各50名程度を調査して得られる3種の蛋白質またはこれらのいずれかに結合する抗体の量の平均値を、健常なヒトから採取された血液、血漿、あるいは血清中の3種の蛋白質またはこれらのいずれかに結合する抗体の量とする。
(試験動物へのストレス負荷及び採血)
[濡れたケージでの飼育によるストレス負荷]
5週齢のCD1(ICR)雄性マウス(体重26-31g)を1ケージ当たり3匹入れて7日間予備飼育を行う。最小規模の試験では2ケージ6匹の飼育が必要である。飼育ケージ(28cm x 17cm
)には床敷を入れ、マウスには通常の固形飼料と水を自由に摂取させた。飼育8日目から10日目にかけて、1台のケージのみ床敷の代わりに水深2mm程度の浅い水(25℃)を張り、マウスを昼間10-12時間だけこのケージに移すことにより弱いストレスを負荷した。この
間も餌と水は自由摂取させた。夜間は通常のケージに戻して飼育した。以下ではこの方法をWet Floor法と呼ぶ。なお、2台目のケージに入れたマウスについては、通常通りの飼育を継続した(ストレス無負荷)。
ストレス負荷期間(3日間)が終了した翌日にマウスをエーテル麻酔し、心臓より全血採取した。低侵襲的な採血が必要な場合には、尾静脈からの微量採血も可能である。
[調製法1]
得られた血清をAlbumine/IgG Removal Kit(Calbiochem社)に通して、血清中のアルブミンとイムノグロブリンを除去した後、ろ過濃縮した。濃縮液200μLにProtein Precipitation Reagent(以後PPRと表記、メルク社)を800μL加え、-20℃で1時間静置した。得
られた蛋白質の沈殿物を遠心分離(15,000 x g, 10分)により回収した。回収した沈殿物にSoluble Protein Resuspension Reagent(以後SPRRと表記、シグマ社)を100μL加え、沈殿物を完全に溶解させた後、2次元電気泳動(図1)に用いた。
前述のようなアルブミンとイムノグロブリンを除く操作は必ずしも特異的ではなく、この操作により幾つかの他の蛋白質も同時に除かれてしまう可能性がある。そこで、この操作を省略した解析も行った。この場合には血清26μLに前述のPPRを26μL加えることに
より蛋白質を沈殿させ、沈殿物を前述のSPRR40μLに溶解させた。得られた分析試料は後述する2次元電気泳動(図2)に用いた。
[2次元電気泳動による血清蛋白質の分離]
2次元電気泳動はToda, T. and Kimura, N. (1997) Jpn. J. Electroph. 41, 13-19.
に記載の方法に準じて行った。
アバイオサイエンス) 0.025mL, dithiothreitol 10mg, 0.1%Orange G 0.125mL, 0.1M酢酸
0.125mL)の中で1晩膨潤させた。泳動には等電点電気泳動装置CoolPhoreStar (アナテック社)を用い、20℃に保たれたシリコンオイルの中に前記ゲルストリップを配置し、等電点電気泳動を行った。
始した。泳動電圧は次のプログラムによって変化させた:(1)500V, 2時間;(2)700V, 1時間;(3)1000V, 1時間;(4)1500V, 1時間;(5)2000V, 1時間;(6)2500V, 1時間;(7)3000V, 1時間;(8)3500V, 10時間。
)を含む溶液を重合させて作製した。
2次元目の泳動後のゲルを、分析する蛋白質総量に応じて銀染色あるいはクマシーブルー染色によって染色して蛋白質を検出した。前者は比較的少量の血清の分析によるマーカー蛋白質の探索のために用いた。後者は、マーカー蛋白質の同定のため、比較的多量の蛋白質を泳動する場合に用いた。銀染色は銀染色キット(和光)、クマシーブルー染色はCBB染色キット(和光)により、メーカーのプロトコールに従って行った。
ストレス無負荷のマウスから得られる画像、ストレスを負荷したマウスから得られる画像を比較し、スポットの濃さが両者間で顕著な違いを示すスポットA(図1、銀染色)、B及
びC(図2、クマシーブルー染色)をピックアップした。図1において○で囲んだものが
スポットAであり、ストレスを負荷していないマウスでは非常に薄い。図2において○で
囲んだものがスポットB,Cであり、ストレスを負荷していないマウスでは非常に薄い。2
回の実験即ち6匹ずつのマウスの比較で再現性のある蛋白質については、部分的なアミノ酸配列の解析からその同定を行った。
クマシーブルー染色(銀染色で検出されたスポットAについては、蛋白量を増やして再
泳動し、クマシーブルー染色をした)をしたゲル上の蛋白質スポットA,B,Cをトリプシン
で消化した。その結果生ずるペプチドをnanoESI-MS/MS(エレクトロスプレーイオン化タ
ンデム質量分析装置)であるQ-Tof Ultima Global (Waters社製)によって分析してその分子量とアミノ酸配列を決定した。得られたペプチドの分子量とアミノ酸配列の情報を基にして遺伝子情報データーベースNCBInrを検索した。検索ソフトMASCOT(Matrix Science社)を用い、Peptide Mass Tolerance ±0.8Da、Maximum Missed Cleavage 1、Fragment Mass Tolerance ±0.02Daの条件でマッチする蛋白質を検索した。
(抗体を用いた血清アミロイドP、ハプトグロビンα鎖及び血清アミロイドA1の検出とストレス負荷に依存した発現)
[ストレス負荷と採血]
マウスにWet Floor法で1日当たり12時間ずつ3日間ストレスを負荷した。ストレスから
解放した1日後に採血し、血清中の3種のマーカー(血清アミロイドP、ハプトグロビン
α鎖、及び血清アミロイドA1)の検出を行った。比較対照のため、ストレスを負荷しないマウスの血清も分析した。
血清1.1μLをSDS-ポリアクリルアミド電気泳動(12.5%アクリルアミド)により分離し
た。泳動後のゲルをニトロセルロース膜に密着させ、Protein Transfer Buffer(25mM Tris, 192mM Glycine, 20%メタノール)の中で、30Vの電圧をゲル表面に対して垂直方向に
加え13時間の泳動により蛋白質をニトロセルロース膜上に移動(ブロッティング)させた。
ブロッティングしたニトロセルロース膜を、ブロッキング溶液(2%スキムミルクを含むTBS Buffer(50mM Tris-HCl pH7.6, 150mM NaCl))中に1時間浸してブロッキングした後、抗体を1:1000で含むブロッキング溶液中で1時間反応させた。ここで用いた抗体は、抗
ハプトグロビン抗体(ニワトリ・ポリクローナルIgY、Abcam社)、抗血清アミロイドP抗
体(ヤギ・ポリクローナルIgG、Santa Cruz社)あるいは抗血清アミロイドA1抗体(ヤギ
・ポリクローナルIgG、R&D Systems社)である。
たProtein Gを各1:1000で含むブロッキング溶液中で45分間反応させた後、0.1%Tween20を含む前述のTBS Bufferで洗浄した。
よって評価することにより得られる。なお、図3の右から3番目のパネルにおいては、用いた抗ハプトグロビン抗体がポリクローナルであり、抗原特異性が低いため、α鎖以外に高分子量のβ鎖との交差反応が見られる。
(マーカー蛋白質増加に対する抗うつ薬による抑制効果)
[抗うつ薬投与とストレス負荷]
現在うつ病の治療に用いられている薬剤は、脳内のノルアドレナリン濃度の低下を防ぐ効果のあるもの(例えばデシプラミン)、あるいはセロトニン濃度の低下を防ぐ効果のあるもの(例えばフルボキサミン)等が代表的である。そこでデシプラミンまたはセロトニンをマウスに経口投与して、ストレス負荷への影響を調べた。抗うつ薬は効果が見られるまでには少なくとも1〜2週間を要するため、ストレス負荷の7日前から15mg/kg/dayの量で前投与した。ストレス負荷は1日12時間のWet Floor法による負荷を3日間繰り返した。この期間も抗うつ薬の投与は継続して行った。
ストレス負荷終了の翌日にマウスから採血を行い、前述の抗体を用いた方法で3種のマーカーを検出・定量した。デシプラミン(シグマ社)はストレスによるハプトグロビンα鎖と血清アミロイドPの増加を有意に抑制した(図4、t検定でp<0.05であり、即ち95%以
上の確率で抑制効果があると言える)が、同じ条件下でフルボキサミン(シグマ社)は有意な抑制効果を示さなかった(図4)。したがってこれら2つのマーカーは、ストレスが、主としてノルアドレナリンが関与する神経経路に作用して増加するものと考えられる。
抗うつ薬や抗ストレス機能性食品等のスクリーニングを行うことが可能である。
(抗不安薬による血清アミロイドP及びハプトグロビンα鎖の増加抑制効果)
[抗不安薬投与とストレス負荷]
不安の抑制物質としてGABAが脳内に存在する。そのGABAの働きを増強することで知られている抗不安薬ジアゼパムをマウスに経口投与した。ジアゼパム(和光純薬工業)は 10mg/kg/dayの量で、ストレス負荷開始前日からストレス負荷期間(3日)にかけて経口投与した。
ストレス負荷終了の翌日にマウスから採血を行い、前述の抗体を用いた方法でマーカーを検出した(図6)。ジアゼパムは血清アミロイドPの増加を有意に抑制したが(t検定でp<0.05であり、即ち95%以上の確率で抑制効果があると言える)、ハプトグロビンα鎖の
増加は抑制しなかった。この結果から、両マーカーは共にノルアドレナリンが関与する神経経路によって増加するものの、GABAの関与の仕方は異なっていることが分かる。図4,5,6で示した結果を総合すると、ハプトグロビンα鎖、血清アミロイドP、血清アミロ
イドA1をストレスマーカーとして利用すると、広い範囲の向精神薬のスクリーニングに有効であると考えられる。
(過密飼育ストレスによる血清アミロイドPの増加)
[ストレス負荷と採血]
3匹のマウスは通常28cm x 17cmのケージで飼育するが、これを1日当り8時間だけ10cm x
5cmの狭いケージに移すことによって過密飼育のストレスを負荷した。このケージは3匹
のマウスが互いに接触しながらようやく動いたり眠ったりが可能な大きさであり、完全に拘束されてはいないためストレスとしては軽度な負荷であると考えられる。このストレス負荷を1日1回、6日間に亘り行い、飼育7日目に血清を採取して分析した。コントロールとして、狭いケージに移さず、ストレスを負荷しないマウスについても血清を採取して分
析した。
血清1.1μL中のマーカーを前述のように抗体により検出した結果を図7に示す。過密飼育ストレスにより、血清アミロイドPの増加が見られた。他方、ハプトグロビンα鎖の増
加は見られなかったので、図7には示していない。このことからも、実施例4で述べたように、両マーカーは異なる神経経路によって支配されているという考えが支持される。したがって、これらのマーカーを併用することによって、ストレスを2種に分類することも可能である。すなわち、Wet Floor法のような血清アミロイドP、血清アミロイドA1およびハプトグロビンα鎖の3種の蛋白質すべての発現量を増加させるストレスと、過密飼育のような、血清アミロイドPの発現量は増加させるが、ハプトグロビンα鎖の発現量は増加
させないストレスとに分類することが可能である。
Claims (15)
- 精神的ストレスを負荷され、該精神的ストレスを負荷される前から負荷中に亘り被験物質を投与された哺乳動物由来の血液、血清、あるいは血漿中の、血清アミロイドP,血清アミロイドA1およびハプトグロビンα鎖の3種のタンパク質を定量し、その量を、
前記被験物質が投与されず、前記精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血清あるいは血漿中の前記3種のタンパク質の量と比較して、前記被験物質を評価することを特徴とする精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法。 - 精神的ストレスを負荷され、該精神的ストレスを負荷される前から負荷中に亘り被験物質を投与された哺乳動物由来の血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドP,血清アミロイドA1およびハプトグロビンα鎖の3種のタンパク質を、血清アミロイドPに結合する抗体,血清アミロイドA1に結合する抗体およびハプトグロビンα鎖に結合する抗体を用いて定量し、その量を、
前記被験物質が投与されず、前記精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血漿、あるいは血清中の、前記3種類の抗体を用いて定量した前記3種のタンパク質の量と比較して前記被験物質を評価することを特徴とする精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法。 - ヒトを除く哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の、血清アミロイドP,血清アミロイドA1およびハプトグロビンα鎖の3種のタンパク質を定量し、その量を、
ヒトを除く健常な哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の前記3種のタンパク質の量と比較・評価することを特徴とする前記哺乳動物の精神的ストレスの判定方法。 - ヒトを除く哺乳動物から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドP,血清アミロイドA1およびハプトグロビンα鎖の3種のタンパク質を、血清アミロイドPに結合する抗体,血清アミロイドA1に結合する抗体およびハプトグロビンα鎖に結合する抗体を用いて定量し、その量を、
ヒトを除く健常な哺乳動物から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、前記3種類の抗体を用いて定量した前記3種のタンパク質の量と比較・評価することを特徴とする前記哺乳動物の精神的ストレスの判定方法。 - 患者から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドP,血清アミロイドA1およびハプトグロビンα鎖3種のタンパク質を定量し、その量を、
健常なヒトから採取された血液、血漿、あるいは血清中の前記3種類のタンパク質の量と比較・評価することを特徴とする、前記患者のうつ病の判定または同病からの回復の判定の際に使用するデータの収集方法。 - 患者から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドP,血清アミロイドA1およびハプトグロビンα鎖の3種のタンパク質を、血清アミロイドPに結合する抗体,血清アミロイドA1に結合する抗体およびハプトグロビンα鎖に結合する抗体を用いて定量し、その量を、
健常なヒトから採取された血液、血漿、あるいは血清中の、前記3種類の抗体を用いて定量した前記3種のタンパク質の量と比較・評価することを特徴とする前記患者のうつ病の判定または同病からの回復の判定の際に使用するデータの収集方法。 - 精神的ストレスを負荷され、該精神的ストレスを負荷される前から負荷中に亘り被験物質を投与された哺乳動物由来の血液、血清、あるいは血漿中の、血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1のタンパク質を定量し、その量を、
前記被験物質が投与されず、前記精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血清あるいは血漿中の血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1のタンパク質の量と比較して、前記被験物質を評価することを特徴とする精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法。 - 精神的ストレスを負荷され、該精神的ストレスを負荷される前から負荷中に亘り被験物質を投与された哺乳動物由来の血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1のタンパク質を、血清アミロイドPに結合する抗体または血清アミロイドA1に結合する抗体を用いて定量し、その量を、
前記被験物質が投与されず、前記精神的ストレスを負荷された哺乳動物由来の血液、血漿、あるいは血清中の、前記抗体を用いて定量した前記血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1の量と比較して前記被験物質を評価することを特徴とする精神的ストレス抑制物質又は精神的ストレス増強物質のスクリーニング方法。 - ヒトを除く哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の、血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1のタンパク質を定量し、その量を、
ヒトを除く健常な哺乳動物から採取された血液、血漿あるいは血清中の血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1のタンパク質の量と比較・評価することを特徴とする前記哺乳動物の精神的ストレスの判定方法。 - ヒトを除く哺乳動物から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1を、血清アミロイドPに結合する抗体,または、血清アミロイドA1に結合する抗体を用いて定量し、その量を、
ヒトを除く健常な哺乳動物から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、前記抗体を用いて定量した血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1の量と比較・評価することを特徴とする前記哺乳動物の精神的ストレスの判定方法。 - 患者から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1のタンパク質を定量し、その量を、
健常なヒトから採取された血液、血漿、あるいは血清中の血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1のタンパク質の量と比較・評価することを特徴とする、前記患者のうつ病の判定または同病からの回復の判定の際に使用するデータの収集方法。 - 患者から採取された血液、血漿、あるいは血清中の、血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1のタンパク質を、血清アミロイドPに結合する抗体または血清アミロイドA1に結合する抗体を用いて定量し、その量を、
健常なヒトから採取された血液、血漿、あるいは血清中の、前記抗体を用いて定量した血清アミロイドPまたは血清アミロイドA1の量と比較・評価することを特徴とする前記患者のうつ病の判定または同病からの回復の判定の際に使用するデータの収集方法。 - 定量した前記3種のタンパク質の量を併用して、精神的ストレスの分類を含む前記比較・評価を行うことを特徴とする請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法。
- 血清アミロイドPに結合する抗体,血清アミロイドA1に結合する抗体、およびハプトグロビンα鎖に結合する抗体のいずれか1種以上、又はその標識物を備え、請求項1,2,7または8に記載のスクリーニング方法に用いられることを特徴とする、精神的ストレス抑制もしくは増強物質スクリーニング用キット。
- 血清アミロイドPに結合する抗体,血清アミロイドA1結合する抗体、およびハプトグロビンα鎖に結合する抗体のいずれか1種以上、又はその標識物を備え、請求項3〜6、9〜12のいずれか一項に記載の方法に用いられることを特徴とする精神的ストレスまたはうつ病の判定用キット。
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