JP5461989B2 - ヌクレオシド類、これらを含有する薬物とその使用 - Google Patents
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- UEAMKJTXIJYMRC-OWOJBTEDSA-N O=C(C(/C=C/Br)=CN1C(C2)OC(CF)C2F)NC1=O Chemical compound O=C(C(/C=C/Br)=CN1C(C2)OC(CF)C2F)NC1=O UEAMKJTXIJYMRC-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
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Description
但し、下記ラジカルを有する化合物は除外される:
R1=N3、R2=OH、R3=R4=R5=H;
R1=N3、R2=O−アセチル、R3=R4=R5=H;
R1=N3、R2=O−トリフェニルメチル、R3=R4=R5=H;
R1=N3、R2=ホスフェート、R3=R4=R5=H;
R1=N3、R2=トリホスフェート、R3=R4=R5=H;
R1=NH2、R2=OH、R3=R4=R5=H;
R1=NH2、R2=トリホスフェート、R3=R4=R5=H;
R1=F、R2=OH、R3=R4=R5=H;
R1=F、R2=O−アセチル、R3=R4=R5=H;
R1=F、R2=トリホスフェート、R3=R4=R5=H;
R1=Cl、R2=OH、R3=R4=R5=H;
R1=OH、R2=N3、R3=R4=R5=H;
R1=OH、R2=NH2、R3=R4=R5=H;
R1=OH、R2=NH−SO2−(CH2)3−Cl、R3=R4=R5=H;
R1=OH、R2=NH−SO2−(CH2)3−SO3H、R3=R4=R5=H;
R1=OH、R2=Cl、R3=R4=R5=H;
R1=OH、R2=Br、R3=R4=R5=H;
R1=OH、R2=I、R3=R4=R5=H;
R1=OH、R2=プロドラッグ・ラジカル、R3=R4=R5=H;
R1=エステル、アミノ酸エステル、カーボネート及びエーテルから成る群から選択されるプロドラッグ・ラジカル、R2=OH、R3=R4=R5=H;
R1=エステル、アミノ酸エステル、カーボネート及びエーテルから成る群から選択されるプロドラッグ・ラジカル、R2=エステル、アミノ酸エステル、カーボネート及びエーテルから成る群から選択されるプロドラッグ・ラジカル、R3=R4=R5=H;
R1=N3、R2=N3、R3=R4=R5=H;
R1=NH2、R2=NHR9(R9=H、COCH3、COC3H7、COPh、COOC2H5、COOCH2CH=CH2、COCH=CHCH3、CHO又はCOOCH2Ph)、R3=R4=R5=H;
R1=NHR9(R9=COCH3、COOC2H5)、R2=NH2、R3=R4=R5=H;
R1=NHCOOCH2Ph、R2=NHCOOCH2CHCH2、R3=R4=R5=H;
R1=NHCOOCH2Ph、R2=NH2、R3=R4=R5=H;
R1=NHCOOCH2CH=CH2、R2=NH2、R3=R4=R5=H;及び
R1=NHCHO、R2=NHCHO、R3=R4=R5=H.
一般式Iで示されるヌクレオシドを含む薬物も同様に提供される。
但し、下記ラジカルを有する化合物は除外される:
R1=OH、R2=OH、R3=R4=R5=H;及び
R1=OH、R2=プロドラッグ・ラジカル、R3=R4=R5=H.
さらなる使用は、細菌、プラズモディウム又はリーシュマニアによって惹起される感染性疾患の無耐性療法(resistance-free therapy)に関する。
エダクツ(educts):5’−O−(4−クロロベンゾイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(P. Herdewijn, J.Balzarini, E. De Clerq, R..Pauwels, M.Baba, J. Med. Chem. 1987, 30, 1270-1278)、5’−O−メチルスルホニル−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(P.M.Reddy, T. C. Bruice; Bioorg. Med. Chem. Lett. 2003, 13; 1281 - 1286)、5’−O−トリチル−2’−デオキシ−5−エチル−ウリジン (C. K. Chu, R. F: Raymond, M. K: Ahn, V. Giliyar, Z. P. Gu, J. Med. Chem. 1989, 32, 612 - 617)、S−(2−ヒドロキシエチル)−チオピバロエート(I. Lefebvre, C. Perigaud, A. Pompon, A. -M. Aubertin, J. -L. Girardet, A. Kirn, G. Gilles 及びJ.-L. Imbach, J. Med. Chem. 1995, 38, 3941-3950)、5−(E)−ブロモビニルウリジン (E. De Clercq, C. Desgranges, P. Herdewijn, A. S. Jones, M. J. McLean, R. T. Walker, J. Med. Chem. 1986, 29, 213-217)、5−ヨードウラシル (J. Asakura, M. J. Robins, J. Org. Chem. 1990, 55, 4928 - 4933)、2’-デオキシ−2’−フルオロウリジン (Y. Saito, K. Utsumi, T. Maruyama, T. Kimura, I. Yamamoto, D. D. Richman, Chem. Pharm. Bull. 1994, 42, 595-598)、5−ヨード−2’−デオキシ−2’−フルオロウリジン (T.Kniess, M. Grote, B.Noll,B.Johannsen,P.Naturforsch.2003,58b,226-230) 、3−(2’−デオキシ−2’−フルオロウリジン−5−イル)−アクリル酸メチルエステル(J. Matulic-Adamic, A. T. Daniher, A. Karpeisky, P. Haeberli, D. Sweedler, L. Beigelman, Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 1299-1302)、3,5−ジ−O−ベンゾイル−2−デオキシ−2−フルオロ−α−D−アラビノシルブロミド、1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル (H. G. Howell, P. R. Brodfuehrer, S. R. Brundige, D. A. Benigni, C. Sapino, J. Org. Chem. 1988, 53, 85-88)、5−(E)−ブロモビニルウラシル(P. J. Barr, A. S. Jones, G. Verhelst, R. T. Walker, J. Chem. Soc. Perkin Transactions 1, 1981, 565-570)及び1−(2,3,6−トリ−O−アセチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−ヨードウラシル (M. J. Robins, S. Manfredini, S. G. Wood, R. J. Wanklin, B. A. Rennie, S.L.Sacks,J.Med.Chem.1991,34,2275-2280)、5’−アミノ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン、5’−ブロモ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン、5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン、5’−アジド−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン、3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン及び3’−アジド−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(R. Busson, L. Colla, H. Vanderhaeghe, E. De Clercq, Nucleic Acids Research, Symposium Series, 1981,9,49-52)、3’−O−(t−ブチルジメチルシリル−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン (P. Herdewijn, R. Ramamurthy, E. De. Clercq, W. Pfleiderer, Helv. Chim. Acta, 1989, 72, 1739-1748)、2’−デオキシ−3’−メトキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(M. Ashwell, A. S. Jones, A. Kumar, J. R. Sayers, R. T. Walker, Tetrahedron, 1987, 43, 20, 4601-4608)は、上記文献データと同様に合成した。
1.1. 3’−ハロゲン−BVDU
1.1.1. 2’,3’−ジデオキシ−3’−ブロモ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
1.1.1.1. 2,3’−アンヒドロ−2’−デオキシ−5’−O−ベンゾイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン
DMF(75ml)中のジイソプロピルアゾ二炭酸エステル(13.8g、68mmol)と安息香酸(8.3g,68mmol)との溶液を、BVDU(15.0g,45mmol)とトリフェニルホスフィン(17.8g,68mmol)との溶液に155分間内に滴加する。その後、室温においてさらに30分間撹拌を行ない、これに再び、トリフェニルホスフィン(17.8g)を加える。これに、DMF(10ml)中のジイソプロピルアゾ二炭酸エステル(13.8g,68mmol)の溶液を10分間内に滴加して、室温において3時間撹拌する。DCコントロール(DC-Kontrolle)(ジクロロメタン/メタノール5:1)は、反応が終了したことを示す。該反応混合物をジエチルエーテル(1.5L)中に注入して、沈降した沈殿を吸引で取り出して、ジエチルエーテルで洗浄する。乾燥後に、収量は10.1g(53.5%)である。
1.1.1.2. 2’,3’−ジデオキシ−3’−ブロモ−5’−O−ベンゾイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2,3’−アンヒドロ−2’−デオキシ−5’−O−ベンゾイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン(3.0g,7.16mmol)とピリジニウムヒドロブロミド(2.40g,15.0mmol)とをDMF(20ml)中に懸濁させて、100℃に加熱する。3時間後に、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール20:1によるDCコントロール)。得られた溶液を水(200ml)で希釈して、酢酸エステルによって抽出する。精製した酢酸エステル相をそれぞれ0.5M塩酸(100ml)で2回、そして塩化ナトリウム溶液(100ml)で3回洗浄し、硫酸マグネシウムによって乾燥させ、濾別して、最初に、ジクロロメタン/酢酸エステル(12:1)によって、次に、クロロホルム/メタノール(25:1)によって、数回カラムクロマトグラフィー精製する。収量は、無色フォーム2.0g(55.8%)である。
1.1.1.3. 2’,3’−ジデオキシ−3’−ブロモ−5’−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,3’−ジデオキシ−3’−ブロモ−5’−O−ベンゾイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.92g,3.84mmol)をTHF(25ml)中に溶解して、水(10ml)及び2M水酸化ナトリウム溶液(9.6ml,19.2mmol)と混合する。2.5時間後に、転化が終了する(クロロホルム/メタノール15:1によるDCコントロール)。このバッチを飽和塩化ナトリウム溶液(gesaettigte Kochsalzloesung)(50ml)中に注入して、酢酸エステルで抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過及び溶媒留去後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール15:1)による反復精製によって,白色固体フォーム(1.3g,81.2%)を得る。
1.1.2. 1−(3’−クロロ−2,3−ジデオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン
1.1.2.1. 1−(5’−O−(4−クロロベンゾイル)−3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン
5’−O−(4−クロロベンゾイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.0g,4.24mmol)をHMPT(40g)中に溶解して、これに塩化チオニル(1.6g,13.44mmol)を加える。45分間後に、反応は終了する。これに水を混合して、酢酸エステルによって抽出する。硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を遠心分離した後に、これをカラムクロマトグラフィー(シクロヘキサン/酢酸エステル7:3)によって精製する。融点89〜91℃を有する無色固体(1.32g,64%)が得られる。
1.1.2.2. 1−(3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン
1−(5’−O−(4−クロロベンゾイル)−3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン(0.9g,1.84mmol)をメタノール(50ml)中に溶解して、ナトリウムメチラート(0.15g,2.78mmol)を加える。2時間後に、DC−コントロール(ジクロロメタン/メタノール95:5)は、反応が終了したことを示す。イオン交換体(DOWEX-H+ 50 WX4(Merck, 105238), メタノール下で活性化)を加えて、濾過し、メタノールで再び洗浄する。メタノールを遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(酢酸エステル)による精製を行なう。融点183〜185℃を有する無色固体(0.43g,67%)が得られる。
1.2.1. 3’−ハロゲン−BVDUの5’-O−アセチル誘導体
1.2.1.1. 5’-O−ピバロイル−3’−クロロ−2’,3’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,3’−ジデオキシ−3’−クロロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.25g、3.55mmol)、4−ジメチルアミノピリジン(0.05g,0.41mmol)をTHF/ピリジン(各々、5ml)中に溶解し、0℃に冷却して、塩化ピバロイル(0.54g,4.44mol)と混合する。これを室温に温度上昇させる。
2’,3’−ジデオキシ−3’−クロロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(310mg,0.88mmol)をジクロロメタン/ピリジン(各3ml)中に溶解して、0℃においてエトキシカルボニルクロリド(108mg,1mmol)と混合する。2時間後に、反応は終了する(クロロホルム/メタノール25:1によるDC−コントロール)。ジクロロメタン(20ml)によって希釈して、1M塩酸及びリン酸塩緩衝液によって洗浄する。硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィーによる精製を、クロロホルム/メタノール25:1によって行なう。融点181℃を有する無色固体(200mg,53.6%)が得られる。
1.2.2.1. 5’−O−(t−ブトキシカルボニルアミノアセチル)−3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,3’−ジデオキシ−3’−クロロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.06g,3mmol)、N−BOC−グリシン(0.58g,3.3mmol)、1−ヒドロキシベンゾトリアゾール(0.45g,3.3mmol)及び1−(3−ジメチルアミノプロピル)−3−エチルカルボジイミド・メチオジド(0.99g,3.3mmol)を、ジクロロメタン(25ml)中に溶解する。8時間後に、それぞれ同量のN−BOC−グリシン、1−ヒドロキシベンゾトリアゾール及び1−(3−ジメチルアミノプロピル)−3−エチルカルボジイミド・メチオジドをもう一度加える。さらに16時間後に、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール25:1によるDC−コントロール)。ジクロロメタン溶液を水で洗浄して、硫酸ナトリウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/メタノール25:1)による精製を行なう。無色フォーム(1.03g,68%)が得られる。
5’−O−(t−ブトキシカルボニルアミノアセチル)−3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(0.81g,1.6mmol)をトリフルオロ酢酸(20ml)中に溶解する。45分間後に、BOC保護基の分割を完成させる(ジクロロメタン/メタノール95:5によるDC−コントロール)。トリフルオロ酢酸を遠心分離し、残渣を若干のメタノールに吸収させ、ジエチルエーテルによって処理する。沈降した沈殿を吸引で取り出し、ジエチルエーテルによって洗浄し、メタノール/ジエチルエーテルから再沈殿させる。濾別し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させた後に、収量は無色粉末0.38g(45.7%)である。
N−BOC−4−アミノブタン酸(2.0g,9.84mmol)と4−ジメチルアミノピリジン(1.2g,9.84mmol)をジクロロメタン(20ml)中に溶解する。これに、2’,3’−ジデオキシ−3’−クロロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(3.46g,9.84mmol)を加えて、0℃に冷却した後に、N,N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド(2.03g,9.84mmol)を加える。室温まで加熱し、室温において20時間撹拌した後に、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール20:1によるDC−コントロール)。バッチを濾過し、混合する。酢酸エステル中に溶解した後に、これを−20℃に冷却して、沈殿を濾別し、−20℃に冷却した、少量の酢酸エステルで洗浄する。濾液を混合して、ジクロロメタン/酢酸エステル(4:1)によるカラム・クロマトグラフィーによって数回精製する。無色フォーム(3.2g,60.6%)が得られる。
1.2.2.4. 4−アンモニウム−1−(3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン−5’−イル)ブタノエート−トリフルオロアセテート
4−(t−ブトキシカルボニル)アミノ−1−(3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン−5’−イル)ブタノエート(310mg,0.577mmol)をジクロロメタン(5ml)中に溶解して、トリフルオロ酢酸(5ml)と混合する。室温において30分間撹拌した後に、転化は完成する(ジクロロメタン/メタノール20:1によるDC−コントロール)。ジクロロメタンとトリフルオロ酢酸を留去させ、残渣をジエチルエーテル(20ml)と混合する。これを、微粉状沈殿が生じるまで、2時間撹拌状態にし、濾過し、ジエチルエーテルによって洗浄して、真空中で乾燥させる。89℃の融点を有する無色固体(250mg,78.7%)が得られる。
0℃において、3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.00g,2.84mmol)をジクロロメタン(20ml)中に入れる。次に、N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリン(618mg,2.84mmol,1.0当量)、N,N−ジメチルアミノピリジン(347mg,2.84mmol,1.0当量)、及びさらにN,N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド(587mg,2.84mmol,1.0当量)を加え、その後、反応混合物を室温において20時間撹拌する。生じた沈殿を濾別し、ジクロロメタンによって洗浄する。濾液を希薄なクエン酸溶液、NaHCO3溶液、及びさらにNaCl溶液によって洗浄し、続いて、Na2SO4によって乾燥させる。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(CHCl3/MeOH,95/5)による精製によって、5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリノイル)−3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.09g,1.98mmol,70%)を、融点75〜76℃を有する白色固体として得る。
0℃において、5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリノイル)-3’-クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(600mg,1.09mmol)をジクロロメタン(5ml)中に入れ、トリフルオロ酢酸(1.0ml,14mmol)を加えて、その後、反応混合物を室温において3時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。粗生成物をジエチルエーテル(5ml)と混合して、室温において20時間撹拌する。溶媒をデカント除去して、残渣を回転蒸発器上に40℃において1時間放置する。この結果、(3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5’−O−L−バリノイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン)トリフルオロアセテート(540mg,956μmol,88%)が、融点110〜112℃を有する白色固体として得られる。
0℃において、(3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.00g,2.84mmol)をジクロロメタン(20ml)中に入れる。次に、N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリン(880mg,2.78mmol,1.0当量)、N,N−ジメチルアミノピリジン(347mg,2.84mmol,1.0当量)、及びさらにN,N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド(587mg,2.84mmol,1.0当量)を加え、その後、反応混合物を室温において3日間撹拌する。生じた沈殿を濾別し、ジクロロメタンによって洗浄する。濾液を希薄なクエン酸溶液、NaHCO3溶液、及びNaCl溶液によって洗浄し、続いて、Na2SO4によって乾燥させる。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル,3/1)による精製によって、5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリノイル)−3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(610mg,939μmol,33%)を、融点102〜103℃を有する白色固体として得る。
0℃において、5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリノイル)-3’-クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(300mg,462μmol)をジクロロメタン(5ml)中に入れ、トリフルオロ酢酸(0.5ml,6.7mmol)を加えて、その後、混合物を室温において3時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。粗生成物をジエチルエーテル(5ml)と混合して、室温において1時間撹拌する。溶媒をデカントして、残渣を回転蒸発器上に40℃において1時間放置する。この結果、[3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5’−O−(L−バリル−L−バリノイル)−5−(E)−ブロモビニルウリジン]トリフルオロアセテート(280mg,422μmol,91%)が、融点169〜170℃を有する白色固体として得られる。
0℃において、3’−アジド−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.02g,2.84mmol)をジクロロメタン(20ml)中に入れる。次に、N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリン(880mg,2.78mmol,1.0当量)、N,N−ジメチルアミノピリジン(347mg,2.84mmol,1.0当量)、及びさらにN,N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド(587mg,2.84mmol,1.0当量)を加え、その後、反応混合物を室温において24時間撹拌する。生じた沈殿を濾別し、ジクロロメタンによって洗浄する。濾液を希薄なクエン酸溶液、NaHCO3溶液、及びさらにNaCl溶液によって洗浄し、続いて、Na2SO4によって乾燥させる。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル,3/1)による精製によって、3’−アジド−5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリノイル)−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(550mg,838μmol,30%)を、融点95〜97℃を有する白色固体として得る。
0℃において、3’−アジド−5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリノイル)−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(200mg,305μmol)をジクロロメタン(4ml)中に入れ、トリフルオロ酢酸(0.33ml,4.47mmol)を加えて、その後、反応混合物を室温において3時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。粗生成物をジエチルエーテル(5ml)と混合して、室温において1時間撹拌する。溶媒をデカントして、残渣を回転蒸発器上に40℃において1時間放置する。この結果、[3’−アジド−2’,3’−ジデオキシ−5’−O−(L−バリル−L−バリノイル)−5−(E)−ブロモビニルウリジン]トリフルオロアセテート(200mg,298μmol,98%)が、融点113〜115℃を有する白色固体として得られる。
1.2.3.1. (E)−5−(2−ブロモビニル)−3’−フルオロ−2’,3’−ジデオキシウリジン−5’−[フェニル−(メトキシ−L−アラニニル)]−ホスフェート
フェニルジクロロホスフェート(255mg,1.20mmol)と、L−アラニンメチルエステル塩酸塩(169mg,1.20mmol)をTHF(4ml)中に溶解若しくは懸濁させる。これをドライアイス浴で−78℃に冷却し、この温度において、THF(4ml)中に溶解したトリエチルアミン(244mg,2.40mmol)を滴加する。30分間後に、滴加を終了し、室温まで徐々に加熱し、撹拌を全体で24時間行なう。その後、2’,3’−ジデオキシ−3’−フルオロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(270mg,0.80mmol)を加えて、ドライアイス浴によって−78℃に冷却する。得られた懸濁液に、THF(5ml)中のN−メチルイミダゾール(265mg,3.22mmol)の溶液を滴加する。30分間後に、滴加を終了して、室温までに徐々に加熱する。さらに48時間後に、反応は終了する(クロロホルム/酢酸エステル3:2によるDC−コントロール)。このバッチを、リン酸塩緩衝液(20ml)と酢酸エステル(25ml)との混合物に加えて、水相を酢酸エステル各20mlでさらに2回抽出する。硫酸マグネシウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を遠心分離した後に、ジクロロメタン/酢酸エステル3:2によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。無色フォーム(180mg,38.8%)が得られる。
フェニルジクロロホスフェート(1.19g,5.67mmol)と、L−アラニンメチルエステル塩酸塩(0.79g,5.67mmol)をTHF(12ml)中に溶解若しくは懸濁させる。これをドライアイス浴で−78℃に冷却し、この温度において、THF(12ml)中に溶解したトリエチルアミン(1.15g,11.34mmol)を滴加する。30分間後に、滴加は終了し、室温まで徐々に加熱し、撹拌を全体で24時間行なう。
1.2.3.3. (E)−5−(2−ブロモビニル)−3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシウリジン−5’−[フェニル−ベンジルオキシ−L−アラニニル]−ホスフェート
フェニルジクロロホスフェート(606mg,2.87mmol)と、L−アラニンベンジルエステル・4−メチルベンゼンスルホネート(1010mg,2.87mmol)をTHF(15ml)中に溶解する。これをドライアイス浴で−78℃に冷却し、この温度において、THF(5ml)中に溶解したトリエチルアミン(582mg,5.75mmol)を滴加する。35分間後に、滴加は終了し、室温まで徐々に加熱し、撹拌を全体で24時間行なう。その後、2’,3’−ジデオキシ−3’−クロロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(505mg,1.44mmol)を加えて、ドライアイス浴によって−78℃に冷却する。得られた懸濁液に、THF(5ml)中のN−メチルイミダゾール(650mg,8.0mmol)の溶液を滴加する。30分間後に、滴加は終了し、室温までに徐々に加熱する。さらに48時間後に、反応は終了する(クロロホルム/メタノール25:1によるDC−コントロール)。このバッチを、リン酸塩緩衝液(50ml)と酢酸エステル(25ml)との混合物に加えて、水相を酢酸エステル各25mlでさらに2回抽出する。硫酸マグネシウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を遠心分離した後に、クロロホルム/酢酸エステル3:2によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。無色フォーム(520mg,53.0%)が得られる。
フェニルジクロロホスフェート(401mg,1.9mmol)と、L−アラニンメチルエステル塩酸塩(265mg,1.9mmol)をTHF(6ml)中に溶解又は懸濁させる。これをドライアイス浴で−78℃に冷却し、この温度において、THF(6ml)中に溶解したトリエチルアミン(385mg,3.8mmol)を滴加する。30分間後に、滴加は終了し、室温まで徐々に加熱し、撹拌を全体で24時間行なう。その後、2’,3’−ジデオキシ−3’−ブロモ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(500mg,1.26mmol)を加えて、ドライアイス浴によって−78℃に冷却する。得られた懸濁液に、THF(6ml)中のN−メチルイミダゾール(415mg,5.05mmol)の溶液を滴加する。30分間後に、滴加は終了し、室温までに徐々に加熱する。さらに48時間後に、反応は終了する(クロロホルム/酢酸エステル1:1によるDC−コントロール)。このバッチを、リン酸塩緩衝液(25ml)と酢酸エステル(25ml)との混合物に加えて、水相を酢酸エステル各20mlでさらに2回抽出する。硫酸マグネシウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を遠心分離した後に、ジクロロメタン/酢酸エステル3:2によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。無色フォーム(386mg,48.1%)が得られる。
フェニルジクロロホスフェート(600mg,2.84mmol,2当量)と、L−アラニンメチルエステル塩酸塩(397mg,2.84mmol,2当量)を−78℃においてTHF(7ml)中に入れる。トリエチルアミン(576mg,5.69mmol,4当量)をTHF(7ml)中に溶解して、30分間内に滴加して、続いて、室温において20時間撹拌する。反応混合物を−78℃に冷却して、3’−アジド−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(509mg,1.42mmol)を加える。得られた溶液に、THF(7ml)中のN−メチルイミダゾール(700mg,8.53mmol,6当量)の溶液を30分間内に滴加し、続いて、室温において20時間撹拌する。このバッチを、リン酸塩緩衝液(25ml)と酢酸エステル(25ml)との混合物に加えて、水相を酢酸エステル各20mlでさらに2回抽出する。一緒にした有機相をNa2SO4上で乾燥させ、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィーによる精製(ジクロロメタン/酢酸エステル、1/1;酢酸エステル)によって、[3’−アジド−5−(E)−ブロモビニル−2’,3’−ジデオキシウリジン]−5’−イル−(メトキシ−L−アラニニル)−フェニルホスフェート(250mg,417mmol,29%)が白色固体として得られる。
1.2.4.1. 3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−(2−ブロモビニルウリジン)−5’−イル−ジエチルホスフェート
2’,3’−ジデオキシ−3’-クロロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(500mg,1.42mmol)をTHF(10ml)とピリジン(1ml)中に溶解する。氷浴中で0℃に冷却し、ジエチルクロロホスフェート(735mg,4.3mmol)の溶液を5分間内に滴加する。18時間後に、ピリジン(1ml)とジエチルクロロホスフェート(735mg)を再度加えて、さらに18時間後に、転化が完成する(クロロホルム/メタノール10:1によるDC−コントロール)。このバッチをリン酸塩緩衝液(20ml)と酢酸エステル(25ml)との混合物に加えて、水相を酢酸エステル(15ml)によってさらに3回抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、反復カラムクロマトグラフィーによって精製する(クロロホルム/メタノール15:1)。得られた油状物は、シクロヘキサンによってペースト化した後に、凝固する。乾燥させた後に、無色フォーム(510mg,73.6%)が得られる。
2−ヒドロキシベンジルアルコール(265mg,2.13mmol)をTHF(5ml)中に溶解して、−78℃に冷却する(アセトン/ドライアイス)。その後、オキシ塩化リン(phosphoroxychloride)(327mg)を加え、最後に、THF中トリエチルアミン(431mg)の溶液(5ml)を加える。20分間後に、添加が終了する。−78℃においてさらに45分間撹拌し、次に、冷却浴(cold bath)を除去して、室温までに加熱する。得られた無色懸濁液を室温において2.5時間撹拌する。
S−(2−ヒドロキシエチル)-チオピバロエート(1.50g,9.24mmol)をTHF(80ml)中に溶解し、−78℃に冷却して、トリエチルアミン(0.95g,9.44mmol)と混合する。フェニルジクロロホスフェート(1.99g,9.44mmol)をTHF(5ml)中に溶解して、−78℃において滴加する。撹拌を20時間行ない、このときに、室温にまで徐々に温度上昇する。その後、濾過し、THF(2x10ml)によって洗浄し、溶媒を留去する。黄色がかった油状物をテトラクロロメタン(50ml)中に吸収させ、再び濾過し、残渣をテトラクロロメタンで洗浄する。溶媒を除去した後に、油状残渣を真空中で乾燥させる。(フェニル−S−(2−ヒドロキシエチル)−チオピバロエート)−モノクロロホスフェート(2.55g)が粗生成物として得られ、これをさらに精製せずに用いる。
1.3.1. 5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−ε−アミノカプロイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
0℃において、5−(E)−ブロモビニル−2’−デオキシウリジン(7.72g,23.2mmol)とトリフェニルホスフィン(9.12g,34.8mmol,1.5当量)をDMF(80ml)中に入れる。次に、N−t−ブチルオキシカルボニル−ε−アミノカプロン酸(8.04g,34.8mmol,1.5当量)と、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(7.03g,34.8mmol,1.5当量)をDMF(50ml)中に溶解して、1時間内に滴加する。続いて、反応混合物を室温において2時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(CHCl3/MeOH,95/5酢酸エステル)によって精製して、5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−ε−アミノカプロイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.98g,5.45mmol,23%)を融点121〜122℃を有する白色固体として得る。副生成物として、3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−ε−アミノカプロイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.05g,1.92mmol,8%)を、融点204〜205℃を有する白色固体として単離することができた。
3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−ε−アミノカプロイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
0℃において、5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−ε−アミノカプロイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(300mg,549μmol)をジクロロメタン(5ml)中に入れ、トリフルオロ酢酸(0.4ml,5.6mmol)を加えて、その後、反応混合物を室温において2時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。粗生成物をジエチルエーテル(5ml)と混合して、室温において20時間撹拌する。溶媒をデカント除去して、残渣を回転蒸発器上に40℃において1時間放置する。この結果、[5’−O−(ε−アミノカプロイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン]トリフルオロアセテート(300mg,535μmol,98%)が融点169〜170℃を有する白色固体として得られる。
0℃において、5’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−ε−アミノカプロイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(300mg,549μmol)をジクロロメタン(5ml)中に入れ、トリフルオロ酢酸(0.4ml,5.6mmol)を加えて、その後、反応混合物を室温において2時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。粗生成物をジエチルエーテル(5ml)と混合して、室温において20時間撹拌する。溶媒をデカント除去して、残渣を回転蒸発器上に40℃において1時間放置する。この結果、[3’−O−(ε−アミノカプロイル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン]トリフルオロアセテート(280mg,500μmol,91%)が、180℃を超える温度において分解する白色固体として、得られる。
1.4.1. 5’−アセトアミド−3’−クロロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
1.4.1.1. 5’−アセトアミド−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5’−アミノ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.41g,4.26mmol)を0℃においてDMF(15ml)中に入れて、ピリジン(674mg,8.52mmol)を加える。DMF(5ml)中の塩化アセチル(401mg,5.11mmol)を滴加し、続いて、さらに2時間撹拌する。この反応混合物を氷50g上に注入して、濃塩酸によってpH=7に調節する。この混合物を酢酸エステル各100mlによって3回抽出する。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(CHCl3/MeOH,9/1)によって精製して、5’−アセトアミド−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(870mg,2.33mmol,55%)を白色固体として得る。
1.4.1.2. 5’−アセトアミド−2’,3’−アンヒドロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5’−アセトアミド−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(870mg,2.33mmol)をDMF(15ml)中に入れて、PPH3(915mg,3.49mmol)を加える。次に、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(705mg,3.49mmol)をDMF(5ml)中に溶解して、滴加する。1時間後に、この反応混合物をジエチルエーテル(100ml)上に注入して、生じた固体を吸引によって取り出して(suctioned off)、ジエチルエーテル20mlによって3回洗浄する。乾燥後に、結果として、5’−アセトアミド−2’,3’−アンヒドロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(720mg,2.02mmol,87%)が白色固体として得られる。
1.4.1.3. 5’−アセトアミド−3’−クロロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5’−アセトアミド−2’,3’−アンヒドロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(720mg,2.02mmol)をDMF(10ml)中に入れ、ピリジン塩酸塩(467mg,4.04mmol)を加えて、続いて、2時間還流させながら加熱する。溶媒を回転蒸発器上で除去し、カラムクロマトグラフィー(CHCl3/MeOH,9/1,ジクロロメタン/酢酸エステル,1/2)によって精製して、5’−アセトアミド−3’−クロロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(460mg,1.17mmol,58%)を融点163〜165℃を有する白色固体として得る。
1.4.2.1. 3’−アセトアミド−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−アジド−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.00g,2.79mmol)をリン酸塩緩衝液(0.1M,pH=7.4)(40ml)中に入れる。チオ酢酸(638mg,8.38mmol)を加えて、60℃において30時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(CHCl3/MeOH,9/1)によって精製して、3’−アセトアミド−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(470mg,1.26mmol,45%)を白色固体として得る。
1.4.2.2. 3’−アセトアミド−5’−O−(メチルスルホニル)−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−アセトアミド−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(500mg,1.34mmol)を0℃においてピリジン(5ml)中に入れる。THF(2ml)中のメタンスルホン酸クロリド(160mg,1.40mmol)を滴加して、続いて、室温において4時間撹拌する。この反応混合物を氷上に注入し、濃塩酸でpH=5に調節して、酢酸エステルによって3回抽出する。有機相を希塩酸と飽和NaCl溶液で洗浄し、Na2SO4によって乾燥させ、溶媒を回転蒸発器上で除去する。結果として、3’−アセトアミド−5’−O−(メチルスルホニル)−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(440mg,973μmol,73%)を白色固体として得る。
1.4.2.3. 3’−アセトアミド−5’−ブロモ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−アセトアミド−5’−O−(メチルスルホニル)−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(440mg,973μmol)をDMF(5ml)中に入れる。LiBr(253mg,2.92mmol)を加えて、この反応混合物を3時間加熱する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。反応混合物を酢酸エステル(20ml)中に吸収させて、有機相をNaCl溶液で洗浄する。水相を酢酸エステルで3回抽出する。一緒にした有機相を飽和NaCl溶液で洗浄し、Na2SO4によって乾燥させ、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,9/1)によって精製して、3’−アセトアミド−5’−ブロモ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(290mg,663μmol,68%)を、融点178〜180℃を有する白色固体として得る。
2.1. 5’−ハロゲン−BVDU
2.1.1. 2’,5’−ジデオキシ−5’−フルオロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5’−O−メチルスルホニル−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(3.5g,7.18mmol)とテトラブチルアンモニウムフルオリド三水和物(9.06g,28.72mmol)をDMF(50ml)中に溶解する。モレキュラーシーブ(3Å)(20g)を添加した後に、40℃に加熱する。4.5時間後に、反応は終了する(クロロホルム/メタノール,10:1によるDCコントロール)。セライト上で濾過し、DMFによって完全に再洗浄して、DMFを留去する。キシレンを添加溶剤(entrainer)として加える。残渣を酢酸エステル中に溶解して、1M塩酸によって洗浄する。酢酸エステル相をリン酸塩緩衝液によって洗浄し、その後に飽和塩化ナトリウム溶液によって洗浄する。一緒にした水相を中和して、酢酸エステルによって抽出する。全ての酢酸エステル相を一緒にして、硫酸マグネシウム上で乾燥させる。濾過して、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,15:1)によって精製して、融点208℃を有する無色固体(1.05g,43.8%)が得られる。
2.1.2. 3’−O−メチル−5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,5’−ジデオキシ−5’−クロロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(0.55g,1.56mmol)をジオキサン(9ml)中に溶解する。これに、トルエン(3ml)、水(0.03ml)及び水酸化カリウム(0.46g,8.2mmol)を加える。2時間後に、微細な懸濁液が形成されていた。その後、ヨードメタン(0.44g,3.12mmol)を加える。1時間後に、同量のヨードメタンを加え、さらに1時間後に、もう一度加える。その後、反応は終了する(クロロホルム/メタノール,10:1によるDCコントロール)。このバッチを、酢酸エステル(25ml)とリン酸塩緩衝液(25ml)との二相混合物に加えて、水相を酢酸エステルで抽出する。一緒にした有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過して、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,60:1)によって精製して、融点145℃を有する無色固体(430mg,75.4%)を得る。
2’,5’−ジデオキシ−5’−フルオロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.24g,3.7mmol)をジオキサン(40ml)中に溶解して、トルエン(15ml)と混合する。その後、水酸化カリウム(1.12g,20mmol)を加え、水(65μl)を加える。撹拌を室温において2時間行ない微細な懸濁液を得る。これに、ヨウ化メチル(1.57g)を加え、2時間及び4時間撹拌した後に、同量のヨウ化メチルを再度加える。室温において16時間撹拌した後に、転化は完了する(クロロホルム/メタノール,10:1によるDCコントロール)。この反応混合物をリン酸塩緩衝液(100ml)中に注入して、酢酸エステル(3x50ml)によって抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過して、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/アセトン,50:1;シクロヘキサン/酢酸エステル,1:1)によって精製する。濃縮した溶液から、生成物をシクロヘキサンによって沈殿させて、乾燥させる。融点95℃を有する無色固体(0.63g,46.9%)が得られる。
2.1.4.1. 5’−O−(4,4’−ジメトキシトリチル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(8.20g,24.6mmol)をピリジン(100ml)中に溶解する。これに、4−N,N−ジメチルアミノピリジン(0.75g,6.15mmol)とトリエチルアミン(5.06g,50mmol)を加える。0℃に冷却して、各5gの4,4’−ジメトキシトリチルクロリド2部分(全体で10.0g,29.51mmol)を加える。30分間撹拌して、次に、冷却浴を除去して、室温にまで加熱する。22時間後に、転化は完了する(ジクロロメタン/メタノール,15:1によるDCコントロール)。エタノール(30ml)を添加し、20分間撹拌した後に、ピリジンをトルエンと共に数回留去する(wird Pyridin mit Toluol mehrfach abdestilliert)。得られた暗褐色油状物を酢酸エステル(200ml)中に溶解して、5%炭酸水素カリウム溶液によって洗浄する。水相をさらに3回、酢酸エステルによって抽出して、全ての酢酸エステル相を一緒にして、硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過して、溶媒を留去した後に、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/アセトン,35:1、1%トリエチルアミンと共に)によって精製する。無色フォーム(13.57g,86.8%)が得られる。
2.1.4.2. 3’−O−メチル−5’−O−(4,4’−ジメトキシトリチル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5’−O−(4,4’−ジメトキシトリチル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(7.5g,11.8mmol)をジオキサン(150ml)とトルエン(50ml)との混合物中に溶解して、これに水酸化カリウム(3.37g,60mmol)と水(0.29ml)を加える。室温において2時間撹拌した後に、微細な無色懸濁液が得られる。これに、ヨウ化メチル(6.71g,47.3mmol)を加えて、1時間撹拌状態にする。その後、同量のヨウ化メチルをもう一度加えて、さらに2時間後に、半量のヨウ化メチルを加える。1.5時間後に、転化が完了する(ジクロロメタン/メタノール,20:1;クロロホルム/メタノール,20:1によるDCコントロール)。このバッチをリン酸塩緩衝液(200ml)中に注入して、続いて、酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、溶媒(ジクロロメタン/メタノール,50:1)の遠心分離後に、カラムクロマトグラフィーによって精製する。黄色がかったフォーム(6.32g,82.5%)が得られる。
2.1.4.3. 3’−O−メチル−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−O−メチル−5’−O−(4,4’−ジメトキシトリチル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(6.32g,9.72mmol)をクロロホルム(120ml)中に溶解する。これに、メタノール(60ml)を加えて、0℃に冷却した後に、4−メチルスルホン酸一水和物(1.85g,9.72mmol)を加える。1時間後に、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール,15:1によるDCコントロール)。炭酸水素カリウム(2.3g,23mmol)を加え、5分間撹拌し、飽和塩化ナトリウム溶液(200ml)を混合する。クロロホルムと酢酸エステルによって抽出し、全ての抽出物を一緒にして、硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を留去した後に、シクロヘキサンによって抽出し、濾過し、残渣をシクロヘキサンによって洗浄する。乾燥後に、無色固体(3.33g,98.5%)が得られる。
2.1.4.4. 5’−O−(4−メチルベンゼンスルホニル)−3’-O-メチル−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−O−メチル−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(3.33g,9.6mmol)をピリジン(30ml)中に溶解し、得られた溶液を0℃に冷却する。次に、4−メチルベンゼンスルホニルクロリド(2.2g)を加え、0℃において30分間撹拌状態にしてから、室温に加熱する。7時間後に、4−メチルベンゼンスルホニルクロリド(1.55g,8.13mmol)をもう一度加え、20時間撹拌する。このときに、転化は完了する(ジクロロメタン/メタノール,15:1によるDCコントロール)。これを氷上に注入して、30分間撹拌して、6M塩酸によって酸性化する。酢酸エステルによって抽出した後に、一緒にした抽出物を1M塩酸によって洗浄し、その後、リン酸塩緩衝液によって洗浄し、硫酸マグネシウムによって乾燥させる。溶媒を留去し、カラムクロマトグラフィー(シクロヘキサン/アセトン,2:1)によって精製した後に、無色固体(3.32g,68.9%)が得られる。
2.1.4.5. 3’−O−メチル−5’−フルオロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5’−O−(4−メチルベンゼンスルホニル)−3’-O-メチル−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.5g,4.98mmol)をDMF(40ml)中に溶解し、テトラ−n−ブチルアンモニウムフルオリド三水和物(6.27g,20mmol)とモレキュラーシーブ(3Å)(15g)を加える。35℃に加熱する。1時間後に、反応は終了する(シクロヘキサン/酢酸エステル,1:1によるDCコントロール)。セライト上で濾過し、続いて、DMFによって洗浄する。DMFをキシレンと共に留去することによって除去し、残渣を酢酸エステル中に溶解して、1M塩酸(80ml)によって洗浄する。水相を酢酸エステルによって抽出して、一緒にした酢酸エステル相全てをリン酸塩緩衝液によって洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、溶媒を留去した後に、カラムクロマトグラフィー(シクロヘキサン/酢酸エステル,1:1)によって精製する。融点177℃を有する無色固体(0.99g,56.9%)が得られる。
2.2.1. 3’−O−アセチル−5’−フルオロ−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,5’−ジデオキシ−5’−フルオロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(300mg,0.9mmol)を、ジクロロメタン(5ml)とピリジン(1ml)との混合物中に懸濁させ、0℃に冷却し、塩化アセチル(190mg,2.4mmol)と混合する。2時間後に、転化は完了する(クロロホルム/メタノール,15:1によるDCコントロール)。酢酸エステル(25ml)によって希釈し、有機相を0.1M塩酸(2x25ml)によって洗浄する。リン酸塩緩衝液によって中和的に洗浄する。硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾別し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル,4:1)によって精製する。t−ブチルメチルエーテル/シクロヘキサンから沈降させた後に、融点81℃を有する無色固体(90mg,27%)が得られる。
2.2.2.1. 4−(t−ブトキシカルボニル)アミノ−1−(5’−フルオロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン−3’−イル)ブタノエート
N−BOC−4−アミノブタン酸(280mg,1.33mmol)と4−ジメチルアミノピリジン(290mg,2.39mmol)をジクロロメタン(20ml)中に溶解する。これに、2’,5’−ジデオキシ−5’−フルオロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(400mg,1.19mmol)とN,N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド(280mg,1.34mmol)を加える。2時間後に、反応は終了する(クロロホルム/メタノール,15:1によるDCコントロール)。このバッチを濾過し、遠心分離する。酢酸エステル中に溶解した後に、−20℃に冷却し、沈殿を濾別し、−20℃に冷却した、少量の酢酸エステルによって洗浄する。濾液を遠心分離して、ジクロロメタン/メタノール30:1によるカラムクロマトグラフィーによって、数回精製する。無色フォーム(400mg,64.1%)が得られる。
2.2.2.1.からの生成物(290mg,0.56mmol)をジクロロメタン(5ml)中に溶解して、トリフルオロ酢酸(5ml)と混合する。30分間後に、転化は完了する(ジクロロメタン/メタノール,25:1によるDCコントロール)。ジクロロメタンと共に数回遠心分離した後に、残渣をジエチルエーテルによって処理し、無色残渣を濾別し、ジエチルエーテルによって洗浄する。乾燥させた後に、融点129℃を有する無色粉末(270mg,90.6%)が得られる。
5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(500mg,1.42mmol)、N−BOC−4−アミノブタン酸(290mg,1.42mmol)及び4−ジメチルアミノピリジン(175mg,1.42mmol)をジクロロメタン(12ml)に加えて、得られた懸濁液を0℃に冷却し、その後、1−(3−ジメチルアミノプロピル)−3−エチルカルボジイミド・メチオジド(423mg,1.42mmol)を加える。冷却浴を除去した後に、6時間撹拌する。その後、反応は終了する(クロロホルム/メタン/メタノール,10:1によるDCコントロール)。ジクロロメタンを遠心分離して、残渣を酢酸エステル中に吸収させる。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液によって数回洗浄する。一緒にした水相を酢酸エステルで抽出する。全ての有機相を一緒にして、硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィーによって精製する(ジクロロメタン/メタノール50:1;シクロヘキサン/酢酸エステル1:1)。無色フォーム(520mg,68.2%)が得られる。
4−(t−ブトキシカルボニル)アミノ−1−(5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン−3’−イル)ブタノエート(200mg,0.372mmol)をジクロロメタン(4ml)中に溶解し、続いて、トリフルオロ酢酸(7ml)を加える。30分間後に、転化は完了する(シクロヘキサン/酢酸エステル,1:1によるDCコントロール)。ジクロロメタンと共に数回遠心分離した後に、残渣をジエチルエーテルによって処理し、無色沈殿を濾別して、乾燥させる。融点148℃を有する無色粉末(160mg,78.0%)が得られる。
2.2.2.5. 3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリノイル)−5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
0℃において、5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.00g,2.84mmol)をジクロロメタン(20ml)中に入れる。次に、N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリン(618mg,2.84mmol,1.0当量)、N,N−ジメチルアミノピリジン(347mg,2.84mmol,1.0当量)、及びさらにN,N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド(587mg,2.84mmol,1.0当量)を加え、その後、反応混合物を室温において20時間撹拌する。生じた沈殿を濾別し、ジクロロメタンによって洗浄する。濾液を希薄なクエン酸溶液、NaHCO3溶液、及びさらにNaCl溶液によって洗浄し、続いて、Na2SO4によって乾燥させる。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(CHCl3/MeOH,95/5、ジクロロメタン/酢酸エステル,3/1)による精製によって、3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリノイル)−5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.00g,1.82mmol,64%)を、融点87〜88℃を有する白色固体として得る。
0℃において、3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリノイル)-5’-クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(600mg,1.09mmol)をジクロロメタン(5ml)中に入れ、トリフルオロ酢酸(1.0ml,14mmol)を加えて、その後、反応混合物を室温において2時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。粗生成物をジエチルエーテル(5ml)と混合して、室温において20時間撹拌する。溶媒をデカント除去して、残渣を回転蒸発器上に40℃において1時間放置する。この結果、(5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−3’−O−L−バリノイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン)トリフルオロアセテート(450mg,797μmol,73%)が、融点108〜109℃を有する白色固体として得られる。
0℃において、5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.00g,2.84mmol)をジクロロメタン(20ml)中に入れる。次に、N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリン(900mg,2.84mmol,1.0当量)、N,N−ジメチルアミノピリジン(347mg,2.84mmol,1.0当量)、及びさらにN,N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド(587mg,2.84mmol,1.0当量)を加え、その後、反応混合物を室温において24時間撹拌する。生じた沈殿を濾別し、ジクロロメタンによって洗浄する。濾液を希薄なクエン酸溶液、NaHCO3溶液、及びNaCl溶液によって洗浄し、続いて、Na2SO4によって乾燥させる。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル,3/1)による精製によって、3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリノイル)−5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(850mg,1.31mmol,46%)を、融点114〜116℃を有する白色固体として得る。
0℃において、3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリノイル)-5’-クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(200mg,308μmol)をジクロロメタン(5ml)中に入れ、トリフルオロ酢酸(0.35ml,4.7mmol)を加えて、その後、反応混合物を室温において3時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。粗生成物をジエチルエーテル(5ml)と混合して、室温において1時間撹拌する。溶媒をデカント除去して、残渣を回転蒸発器上に40℃において1時間放置する。この結果、[5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−3’−O−(L−バリル−L−バリノイル)−5−(E)−ブロモビニルウリジン]トリフルオロアセテート(180mg,271μmol,88%)が、融点135〜136℃を有する白色固体として得られる。
0℃において、5’−アジド−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.10g,3.07mmol)をジクロロメタン(20ml)中に入れる。次に、N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリン(950mg,3.07mmol,1.0当量)、N,N−ジメチルアミノピリジン(375mg,3.07mmol,1.0当量)、及びさらにN,N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド(634mg,3.07mmol,1.0当量)を加え、その後、反応混合物を室温において2日間撹拌する。生じた沈殿を濾別し、ジクロロメタンによって洗浄する。濾液を希薄なクエン酸溶液、NaHCO3溶液、及びさらにNaCl溶液によって洗浄し、続いて、Na2SO4によって乾燥させる。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル,2/1)による精製によって、5’−アジド−3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリノイル)−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(600mg,914μmol,30%)を、融点133〜135℃を有する白色固体として得る。
2.2.2.10. [5’−アジド−2’,5’−ジデオキシ−3’−O−(L−バリル−L−バリノイル)−5−(E)−ブロモビニルウリジン]トリフルオロアセテート
0℃において、5’−アジド−3’−O−(N−t−ブチルオキシカルボニル−L−バリル−L−バリノイル)−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(200mg,305μmol)をジクロロメタン(5ml)中に入れ、トリフルオロ酢酸(0.33ml,4.47mmol)を加えて、その後、反応混合物を室温において4時間撹拌する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。粗生成物をジエチルエーテル(5ml)と混合して、室温において20時間撹拌する。溶媒をデカント除去して、残渣を回転蒸発器上に40℃において1時間放置する。この結果、[5’−アジド−2’,5’−ジデオキシ−3’−O−(L−バリル−L−バリノイル)−5−(E)−ブロモビニルウリジン]トリフルオロアセテート(160mg,239μmol,78%)が、融点122〜124℃を有する白色固体として得られる。
2.2.3.1. (E)−5−(2−ブロモビニル)−5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシウリジン−3’−[フェニル−(メトキシ−L−アラニニル)]−ホスフェート
フェニルジクロロホスフェート(1.55g,7.35mmol)と、L−アラニンメチルエステル塩酸塩(1.03g,7.35mmol)をジクロロメタン(15ml)中に溶解若しくは懸濁させて、−78℃に冷却する。トリエチルアミン(1.52g,15mmol)をジクロロメタン(15ml)中に溶解して、−78℃において2時間内に滴加する。滴加後に、室温までに加熱して、18時間撹拌する。ジクロロメタンを遠心分離して、残渣をジエチルエーテル中に吸収させ、溶解しない部分から濾別する。その後、ジエチルエーテルを回収し、油状粗生成物を、精製せずに、さらに処理する。
2.2.3.2. [5−(E)−ブロモビニル−5’−フルオロ−2’,5’−ジデオキシウリジン]−3’−イル−(メトキシ−L−アラニニル)−フェニルホスフェート
フェニルジクロロホスフェート(600mg,2.84mmol,2当量)と、L−アラニンメチルエステル塩酸塩(397mg,2.84mmol,2当量)を−78℃においてTHF(7ml)中に入れる。トリエチルアミン(576mg,5.69mol,4当量)をTHF(7ml)中に溶解して、30分間内に滴加し、続いて、室温において20時間撹拌する。この反応混合物を−78℃に冷却して、2’,5’−ジデオキシ−5’−フルオロ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(477mg,1.42mmol)を加える。得られた懸濁液に、THF(7ml)中のN−メチルイミダゾール(700mg,8.53mmol,6当量)の溶液を30分間内に滴加して、続いて、室温において20時間撹拌する。このバッチを、リン酸塩緩衝液(25ml)と酢酸エステル(25ml)との混合物に加えて、水相を酢酸エステル各20mlでさらに2回抽出する。一緒にした有機相をNa2SO4上で乾燥させ、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル,1/1;酢酸エステル)によって精製して、[5−(E)−ブロモビニル−5’−フルオロ−2’,5’−ジデオキシウリジン]−3’−イル−(メトキシ−L−アラニニル)−フェニルホスフェート(310mg,523μmol,37%)を得る。
フェニルジクロロホスフェート(600mg,2.84mmol,2当量)と、L−アラニンメチルエステル塩酸塩(397mg,2.84mmol,2当量)を−78℃においてTHF(7ml)中に入れる。トリエチルアミン(576mg,5.69mol,4当量)をTHF(7ml)中に溶解して、30分間内に滴加し、続いて、室温において20時間撹拌する。この反応混合物を−78℃に冷却して、5’−アジド−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(509mg,1.42mmol)を加える。得られた懸濁液に、THF(7ml)中のN−メチルイミダゾール(700mg,8.53mmol,6当量)の溶液を30分間内に滴加して、続いて、室温において20時間撹拌する。このバッチを、リン酸塩緩衝液(25ml)と酢酸エステル(25ml)との混合物に加えて、水相を酢酸エステル各20mlでさらに2回抽出する。一緒にした有機相をNa2SO4上で乾燥させ、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル,1/1;酢酸エステル)によって精製して、[5’−アジド−5−(E)−ブロモビニル−2’,5’−ジデオキシウリジン]−3’−イル−(メトキシ−L−アラニニル)−フェニルホスフェート(160mg,267μmol,19%)を白色固体として得る。
2.3.1. 2’,3’−O−イソプロピリデン−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.0g,2.86mmol)をアセトン(15ml)中に懸濁させる。これに、2,2−ジメトキシプロパン(3.13g,30mmol)とp−トルエンスルホン酸(0.05g)を加える。2時間後に、反応は完了する(クロロホルム/メタノール20:1によるDC−コントロール)。炭酸水素カリウム(0.50g)、水(20ml)及び酢酸エステル(25ml)を加え、相を分離して、水相を酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。乾燥剤を濾別し、溶媒を留去した後に、クロロホルム/メタノール30:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製して、無色フォーム(0.57g,51.2%)を得る。
2.3.2. 2’,3’−O−イソプロピリデン−5’−ブロモ−5’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,3’−O−イソプロピリデン−5−(E)−ブロモビニルウリジン(0.57g,1.46mmol)とトリフェニルホスフィン(0.81g,3.1mmol)をピリジン(12ml)中に溶解する。これに、ピリジン(8ml)中のテトラブロモメタン(0.92g,2.77mmol)の溶液を滴加する。90分間後に、転化は完了する(クロロホルム/メタノール30:1によるDC−コントロール)。ピリジンを酢酸エステルとの蒸留によって除去して(Pyridin wird Essigester abdestilliert)、残渣を、ジクロロメタン/酢酸エステル12:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。無色フォーム(380mg,57.7%)が得られる。
2.3.3. 5’−ブロモ−5’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,3’−O−イソプロピリデン−5’−ブロモ−5’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(0.38g,0.84mmol)をトリフルオロ酢酸(5ml)と水(1ml)中に溶解して、室温において30分間溶解させる。その後、転化は完了する(クロロホルム/メタノール30:1によるDC−コントロール)。これを乾燥するまで蒸発させ、メタノール中に数回吸収させて、再び蒸発させる。カラムクロマトグラフィーによって精製した後に、融点201℃を有する無色固体(0.25g,72.2%)が得られる。
2.4.1. [5−(E)−ブロモビニル−5’−メトキシ−2’−デオキシウリジン]−3’−イル−(2−シアノエチル)-ジイソプロピルホスホルアミダイト
2.4.1.1. 3’−O−(t−ブチルジメチルシリル)−5’−メトキシ−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−O−(t−ブチルジメチルシリル)−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.33g,2.97mmol)をジオキサン(17ml)とトルエン(6ml)中に溶解して、KOH(0.88g,15.6mmol)とさらに水(60μl,3.3mmol)を加える。反応混合物を室温において2時間半撹拌して、次に、MeI(0.85g,6.0mmol)を加える。さらに3時間撹拌した後に、リン酸塩緩衝液(pH=7)(120ml)を加えて、混合物を酢酸エステル(50ml)によって3回抽出する。一緒にした有機相をMgSO4上で乾燥し、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール100/1)によって精製して、3’−O−(t−ブチルジメチルシリル)−5’−メトキシ−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.04g,2.25mmol,76%)を白色固体として得る。
2.4.1.2. 2’−デオキシ−5’−メトキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−O−(t−ブチルジメチルシリル)−5’−メトキシ−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(26.2g,5.68mmol)をTHF(25ml)中に溶解して、THF(25ml)中のテトラブチルアンモニウムフルオリド(2.69g,8.52mmol)を滴加する。反応混合物を室温において4時間撹拌して、続いて、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール25/1)によって精製して、2’−デオキシ−5’−メトキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.73g,4.98mmol,88%)を白色固体として得る。
2.4.1.3. [5−(E)−ブロモビニル−5’−メトキシ−2’−デオキシウリジン]−3’−イル−(2−シアノエチル)-ジイソプロピルホスホルアミダイト
2’−デオキシ−5’−メトキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(200mg,574μmol)をジクロロメタン(5ml)中に溶解して、ジイソプロピルエチルアミン(200μl,1.15mmol)を加える。反応混合物を0℃に冷却して、次に、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホルアミダイト(192μl,861μmol)を加える。0℃における3時間後に、溶媒を回転蒸発器上で除去して、残渣をNaHCO3溶液(50ml)中に吸収させ、酢酸エステル(50ml)によって3回抽出する。一緒にした有機相を飽和NaCl溶液(50ml)で洗浄して、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール9/1、シクロヘキサン/酢酸エステル1/1)によって精製して、[5−(E)−ブロモビニル−5’−メトキシ−2’−デオキシウリジン]−3’−イル−(2−シアノエチル)-ジイソプロピルホスホルアミダイト(130mg,237μmol,41%)を得る。
2’−デオキシ−3’−メトキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(200mg,574μmol)をジクロロメタン(5ml)中に溶解して、ジイソプロピルエチルアミン(200μl,1.15mmol)を加える。反応混合物を0℃に冷却して、次に、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホルアミダイト(192μl,861μmol)を加える。0℃における2時間後に、溶媒を回転蒸発器上で除去して、残渣をNaHCO3溶液(50ml)中に吸収させ、酢酸エステル(50ml)によって3回抽出する。一緒にした有機相を飽和NaCl溶液(50ml)で洗浄して、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール9/1、ジクロロメタン/酢酸エステル1/1)によって精製して、[5−(E)−ブロモビニル−3’−メトキシ−2’−デオキシウリジン]−5’−イル−(2−シアノエチル)-ジイソプロピルホスホルアミダイト(120mg,219μmol,38%)を白色固体として得る。
3.1. 3’,5’−ジフルオロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3.1.1. 5’−O−トリチル−2,3’−アンヒドロ−2’−デオキシ−5−エチル−ウリジン
5’−O−トリチル−2’−デオキシ−5−エチル−ウリジン(17.84g,35.78mmol)とトリフェニルホスフィン(14.08g,53.67mmol)をTHF(170ml)中に溶解する。この溶液に、THF(120ml)中のジイソプロピルアゾジカルボン酸エステル(diisopropylazodicarbonester)(10.85g,53.67mmol)の溶液を40分間内に滴加する。室温において1時間撹拌した後に、転化が完了する(クロロホルム/メタノール10:1によるDC−コントロール)。混合した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール10:1)によって精製して、無色フォーム(13.00g,75.6%)を得る。
3.1.2. 1−(5’−O−トリチル−2’−デオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−エチル−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン
5’−O−トリチル−2,3’−アンヒドロ−2’−デオキシ−5−エチル−ウリジン(14.24g,29.63mmol)をエタノール(500ml)と水(140ml)との混合物中で、水酸化ナトリウム(3.03g,75.85mmol)と共に、沸騰するまで、90分間加熱する。その後、反応は終了する(クロロホルム/メタノール10:1によるDC−コントロール)。この溶液を混合し、リン酸塩緩衝液と酢酸エステルによって処理して、相を分離する。水相を酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした酢酸エステル相を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、得られた生成物を乾燥させて、無色固体(13.25g,90.4%)を得る。
3.1.3. 5’−O−トリチル−3’−フルオロ−2’,3’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン
1−(5’−O−トリチル−2’−デオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−エチル−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン(7.73g,15.51mmol)をジクロロメタン(130ml)中に溶解して、0℃において、ジエチルアミノスルファートリフルオリド(DAST)(5.0g,31.02mmol)の溶液を30分間内に滴加する。0℃において1時間撹拌した後に、転化は完了する(ジクロロメタン/メタノール20:1によるDC−コントロール)。このバッチを氷冷炭酸水素ナトリウム溶液(5%)中に注入して、相を分離し、水相をジクロロメタン各50mlによってさらに2回抽出する。一緒にした有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、濾過し、遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル5:1)によって精製して、無色フォーム(5.17g,66.6%)を得る。
3.1.4. 3’−フルオロ−2’,3’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン
5’−O−トリチル−3’−フルオロ−2’,3’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン(4.69g,9.37mmol)を酢酸(70ml)中に溶解して、水(18ml)を徐々に加える。20分間加熱して、90℃にする、その後、反応は終了する(クロロホルム/メタノール15:1によるDC−コントロール)。このバッチを氷浴中に1時間入れ、濾過し、残渣を80%酢酸によって洗浄する。濾液を水(400ml)によって希釈して、酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした抽出物を飽和塩化ナトリウム溶液によって洗浄して、硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール15:1)によって精製する。無色固体(1.33g,55.0%)が得られる。
3.1.5. 5’−O−メチルスルホニル−3’−フルオロ−2’,3’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン
3’−フルオロ−2’,3’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン(1.33g,5.15mmol)をピリジン(8ml)中に溶解して、これに、0℃において、THF(2.5ml)中のメチル−スルホニルクロリド(1.78g,15.5mmol)の溶液を20分間内に滴加する。室温までに加熱する。その後、反応は終了する(クロロホルム/メタノール10:1によるDC−コントロール)。このバッチを氷水中に注入して、15分間撹拌する。酸性化(pH約1.5)した後に、これを酢酸エステルによって抽出し、一緒にした抽出物をリン酸塩緩衝液によって洗浄する。硫酸マグネシウムによって乾燥させた後に、濾過し、溶媒を留去した後に、無色フォーム(1.68g,97.1%)が得られる。
3.1.6. 3’,5’−ジフルオロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−エチル−ウリジン
5’−O−メチルスルホニル−3’−フルオロ−2’,3’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン(1.68g,4.99mmol)とテトラブチルアンモニウムフルオリド三水和物(6.30g,20.00mmol)を、DMF(30ml)中に溶解して、モレキュラーシーブ(3Å)(20g)を加える。40℃に1.5時間加熱した後に、反応は終了する(クロロホルム/メタノール20:1によるDC−コントロール)。DMFをキシレンと共に除去して、残渣を酢酸エステル中に溶解する。酢酸エステル相を1M塩酸とリン酸塩緩衝液によって洗浄する。一緒にした水相を中和して、酢酸エステルによって抽出する。一緒にした酢酸エステル相全てを硫酸マグネシウムによって乾燥させる、そして濾過し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール30:1;クロロホルム/酢酸エステル3:1)によって数回精製する。無色固体(0.52g,40.0%)が得られる。
3.1.7. 3’,5’−ジフルオロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン
3’,5’−ジフルオロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−エチル−ウリジン(520mg,1.99mmol)をクロロホルム(15ml)中に溶解して、沸騰するまで加熱する。アゾ−ビス−イソブチロニトリル(AIBN)(10mg)を加えて、クロロホルム(2ml)中の臭素(702mg)の溶液を滴加する。この滴加の間中、500Wランプによって照射する。40分間後に、全ての臭素が加えられ、さらに1時間加熱還流させる。冷却後に、アルゴンを溶液に通して導入し、トリエチルアミン(304mg)を加える。室温において1.5時間撹拌した後に、これをリン酸塩緩衝液と共に振とうして、水相を再び酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール25:1;クロロホルム/酢酸エステル5:1)によって数回精製し、続いて、エタノール及びメタノール/水から再結晶する。融点177〜180℃を有する無色固体(211mg,31.3%)が得られる。
3.2. 3’−フルオロ−5’-クロロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン
3’−フルオロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(190mg,0.57mmol)とトリフェニルホスフィン(200mg,0.76mmol)をDMF(7ml)中に溶解して、これにテトラクロロメタン(440mg,2.83mmol)を加える。室温において18時間撹拌した後に、トリフェニルホスフィン(100mg,0.38mmol)とテトラクロロメタン(220mg,1.42mmol)を加える。22時間後に、反応は完了する(ジクロロメタン/酢酸エステル4:1によるDC−コントロール)。DMFをキシレンとの蒸留によって除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル5:1)によって精製する。融点203℃を有する結晶質固体(60ml,30%)が得られる。
3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(0.70g,2.0mmol)とトリフェニルホスフィン(0.70g,2.7mmol)をDMF(10ml)中に溶解して、これにテトラクロロメタン(1.59g,10.0mmol)を加える。室温において24時間撹拌した後に、反応は完了する(ジクロロメタン/酢酸エステル4:1によるDC−コントロール)。DMFをキシレンとの蒸留によって除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル4:1)によって精製する。n−ヘキサン/酢酸エステルからの再結晶後に、融点184℃を有する結晶質固体(180mg,24.3%)が得られる。
3.4.1. 2’,3’−ジデオキシ−3’−アジド−5’−O−(4−メチルフェニルスルホニル)−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,3’−ジデオキシ−3’−アジド−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.54g,7.09mmol)を0℃においてピリジン(20ml)中に溶解して、これに、4−メチルフェニルスルホニルクロリド(2.56g,13.42mmol)を加える。室温までに加熱して、20時間撹拌する。この後、反応は完了する(クロロホルム/メタノール20:1によるDC−コントロール)。このバッチを氷水(80ml)中に注入して、6M塩酸によって酸性化する。酢酸エステルによって抽出して、一緒にした抽出物を飽和塩化ナトリウム溶液によって洗浄し、硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、無色フォーム(3.32g,91.5%)が得られる。
3.4.2. 3’−アジド−5’−フルオロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,3’−ジデオキシ−3’−アジド−5’−O−(4−メチルフェニルスルホニル)−5−(E)−ブロモビニルウリジン(3.32g,6.48mmol)をDMF(50ml)中に溶解して、これに、モレキュラーシーブ(3Å)(20g)とテトラブチルアンモニウムフルオリド三水和物(8.17g)を加える。40℃に6時間加熱した後に、反応は終了する(シクロヘキサン/酢酸エステル1:1によるDC−コントロール)。DMFをキシレンと共に除去して、褐色油状残渣を酢酸エステル中に溶解して、1M塩酸(100ml)によって、リン酸塩緩衝液各50mlによって2回、及び飽和塩化ナトリウム溶液によって洗浄する。水相を一緒にし、中和して、酢酸エステルによって抽出する。一緒にした有機相全てを硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル5:1;シクロヘキサン/酢酸エステル1.2:1)によって精製する。融点135℃を有する無色固体(0.72g,19.2%)が得られる。
3.5.1. 2’,3’−ジデオキシ−3’−クロロ−5’−O−メチルスルホニル−5−(E)-ブロモビニルウリジン
3’−クロロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(1.0g,2.84mmol)をTHF/ピリジン(1:1)(5ml)中に溶解して、0℃において、THF(5ml)中に溶解したメチルスルホニルクロリド(1.10g,9.6mmol)を滴加する。室温にまで加熱し、全体で20時間撹拌する。この後、転化は完了する(ジクロロメタン/メタノール15:1によるDC−コントロール)。このバッチを氷水中に注入し、15分間撹拌状態にする。これを2M塩酸によって酸性化して、沈降する油状物を酢酸エステルによって抽出する。一緒にした酢酸エステル相をリン酸塩緩衝液によって洗浄して、硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を留去した後に、無色フォーム(1.22g,定量的収量)が得られる。
3.5.2. 3’−クロロ−5’−ブロモ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−クロロ−5’−O−(メチルスルホニル)−5−(E)-ブロモビニルウリジン(510mg,1.18mmol)を、臭化リチウム(515mg,6mmol)と共に、3時間加熱する。この後、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール25:1によるDC−コントロール)。DMFをキシレンとの蒸留によって除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール60:1;ジクロロメタン/メタノール40:1及びシクロヘキサン/酢酸エステル1.2:1)によって精製する。融点149℃を有する無色固体(240mg,49.1%)が得られる。
3’−クロロ−5’−O−(メチルスルホニル)−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(3.50g,8.15mmol)を、DMF(20ml)中のアジ化リチウム(1.20g,24.4mmol,3.0当量)と共に、1時間加熱する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,12/1)によって精製して、5’−アジド−3’−クロロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.12g,5.63mmol,69%)を融点58〜60℃を有する白色固体として得る。
3.5.4.1. 5’−クロロ−3’−O−(メチルスルホニル)−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン
5’−クロロ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(1.00g,2.84mmol)を0℃においてピリジン(10ml)中に入れる。メタンスルホン酸クロリド(0.34g,2.99mmol)をTHF(5ml)に滴加し、その後、室温において4時間撹拌する。反応混合物を氷中に注入して、濃塩酸によってpH=5に調節して、酢酸エステルによって3回抽出する。有機相を希塩酸と飽和NaCl溶液によって洗浄して、Na2SO4によって乾燥させ、溶媒を回転蒸発器上で除去する。この結果、5’−クロロ−3’−O−(メチルスルホニル)−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(1.03g,2.40mmol,84%)が白色固体として得られる。
3.5.4.2. 2,3’−アンヒドロ−2’−デオキシ−5’−クロロ−5−(E)-ブロモビニルウリジン
5’−クロロ−3’−O−(メチルスルホニル)−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(800mg,1.86mmol)をTHF(10ml)中に入れる。1,8−ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ−7−エン(DBU)(340mg,2.23mmol)を加えて、4時間加熱還流させる。溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,9/1)によって精製して、2,3’−アンヒドロ−2’−デオキシ−5’−クロロ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(470mg,1.41mmol,76%)を白色固体として得る。
3.5.4.3. 3’−アジド−5’−クロロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2,3’−アンヒドロ−5’−クロロ−2’−デオキシ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(470mg,1.41mmol)をDMF(10ml)中に入れる。LiN3(345mg,7.05mmol)を加えて、反応混合物を20時間加熱する。溶媒を回転蒸発器上で除去する。反応混合物を酢酸エステル(50ml)中に吸収させ、有機相をNaCl溶液によって洗浄する。水相を酢酸エステルによって3回抽出する。一緒にした有機相を飽和NaCl溶液によって洗浄し、Na2SO4によって乾燥させ、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,9/1)によって精製して、3’−アジド−5’−クロロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(370mg,982μmol,70%)を融点124〜125℃を有する白色固体として得る。
2’,3’−ジデオキシ−3’−ブロモ−5−(E)-ブロモビニルウリジン(0.52g,1.31mmol)をピリジン(15ml)中に溶解して、これに、トリフェニルホスフィン(0.69g,2.62mmol)を加える。この溶液に、ピリジン(5ml)中のテトラブロモメタン(0.79mg,2.36mmol)の溶液を10分間内に滴加する。1時間後に、反応は完了する(クロロホルム/メタノール20:1によるDC−コントロール)。これを氷中に注入して、37%塩酸によって酸性化する。次に、酢酸エステル(3x40ml)によって抽出し、一緒にした酢酸エステル相を1M塩酸及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。硫酸マグネシウムによって乾燥させ、濾過した後に、粗物質をカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル4:1)によって精製し、シクロヘキサン/酢酸エステルから再沈殿させる。乾燥後に、融点153℃を有する無色固体(0.21g,35.0%)が得られる。
4.1. 2’,3’−ジデヒドロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
4.1.1. 1−(2’−デオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4(1H,3H)−ピリミジンジオン
2,3’−アンヒドロ−2’−デオキシ−5’−O−ベンゾイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン(20.07g,47.87mmol)をエタノール(400ml)中に懸濁させ、水(95ml)中の水酸化ナトリウム(4.78g,120mmol)の溶液と混合する。これを2.5時間加熱沸騰させる、この後、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール10:1によるDC−コントロール)。塩酸によって中和した後に、溶媒を乾燥するまで留去し、残渣をアセトン/酢酸エステル混合物(1:1)によって数回抽出する。生成物(13.5g,84.6%)が得られる。
4.1.2. 5’−O−ベンゾイル−1−(2’−デオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4(1H,3H)−ピリミジンジオン
1−(2’−デオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4(1H,3H)−ピリミジンジオン(5.0g,15.00mmol)をピリジン(125ml)中に溶解して、0℃に冷却する。これに、この温度において、ピリジン(30ml)中の塩化ベンゾイル(2.53g,18.0mmol)の溶液を滴加する。60分間後に、滴加は終了する。0℃において、さらに60分間撹拌する。この後、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール20:1によるDC−コントロール)。このバッチを氷水(400ml)中に注入して、酢酸エステル(4x100ml)によって抽出し、一緒にした抽出物を5%炭酸水素カリウムと飽和塩化ナトリウム溶液によって洗浄する。硫酸マグネシウムによって乾燥させ、濾別し、溶媒を留去した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール20:1)によって精製する。無色固体(5.52g,84.1%)が得られる。
4.1.3. 3’−O−(メチルスルホニル)-5’−O−ベンゾイル−1−(2’−デオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4(1H,3H)−ピリミジンジオン
5’−O−ベンゾイル−1−(2’−デオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4(1H,3H)−ピリミジンジオン(3.50g,8.00mmol)をピリジン(15ml)中に溶解して、0℃においてメタンスルホン酸クロリド(1.14g,10.00mmol)と混合する。18時間後に、反応は終了する(クロロホルム/メタノール12:1によるDC−コントロール)。この後に、このバッチを氷上に注入して、20分間放置する。これを6M塩酸によって酸性化して、酢酸エステル(3x50ml)によって抽出する。一緒にした抽出物を中和的に洗浄して、硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、黄色がかったフォーム(3.95g,95.8%)が得られる。
4.1.4. 5’−O−ベンゾイル−2’,3’−ジデヒドロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−O−(メチルスルホニル)-5’−O−ベンゾイル−1−(2’−デオキシ−β−D−スレオペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4(1H,3H)−ピリミジンジオン(3.38g,6.56mmol)をTHF(120ml)中に溶解する。これに、テトラ−n−ブチルアンモニウムフルオリド三水和物(6.20g,19.68mmol)とモレキュラーシーブ(3Å)(25.0g)を加えて、室温において20時間撹拌状態にする。この後、反応は終了する(ジクロロメタン/酢酸エステル3:1によるDC−コントロール)。セライト上で濾過し、酢酸エステルによって完全に洗浄して、80mlになるまで濃縮して、飽和塩化ナトリウム溶液(3x80ml)によって洗浄する。硫酸マグネシウムによって乾燥させ、濾過し、カラムクロマトグラフィーによって精製した後に、無色固体(2.20g,80.0%)が得られる。
4.1.5. 2’,3’−ジデヒドロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5’-O-ベンゾイル−2’,3’−ジデヒドロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.47g,5.89mmol)をTHF(70ml)中に懸濁させ、2M水酸化ナトリウム溶液(8.8ml,17.6mmol)と混合する。5時間後に、転化は完了する(ジクロロメタン/メタノール20:1によるDC−コントロール)。このバッチをリン酸塩緩衝液(pH=7)(100ml)中に注入し、酢酸エステル(5x50ml)によって抽出する。硫酸マグネシウムによって乾燥させ、溶媒を留去し、クロロホルム/アセトン3:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製した後に、融点>250℃(分解)を有する無色固体(1.73g,93%)が得られる。
4.2.1. 5’−O−(4−メチルフェニルスルホニル)−2’,3’−ジデヒドロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,3’−ジデヒドロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(0.55g,1.75mmol)をピリジン(5ml)中に溶解して、0℃において、4−メチルフェニルスルホニルクロリド(0.67g,3.5mmol)と混合する。20時間後に、転化は完了する(クロロホルム/メタノール20:1によるDC−コントロール)。これを氷上に注入し、20分間撹拌状態にし、濾過する。水によって完全に洗浄した後に、塩化カルシウム上で乾燥させる。シクロヘキサン/アセトン2:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製した後に、無色固体(0.65g,79.4%)が得られる。
4.2.2. 2’,3’−ジデヒドロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5’-ブロモ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5’−O−(4−メチルフェニルスルホニル)−2’,3’−ジデヒドロ−2’,3’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(0.65g,1.39mmol)と、臭化リチウム(0.87g,10.00mmol)をDMF(10ml)中に溶解して、50℃に加熱する。3.5時間後に、さらに臭化リチウム(400mg,4.6mmol)を加える、さらに60分間後に、転化は完了する。このバッチを水(40ml)中に注入し、沈降した沈殿を濾別し、塩化カルシウム上で乾燥させる。シクロヘキサン/アセトン2:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製した後に、融点>150℃を有する無色固体(510mg,97.3%)が得られる。
5.1. 2’−フルオロ−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
5.1.1. 3−(2’−デオキシ−2’−フルオロウリジン−5−イル)−アクリル酸
3−(2’−デオキシ−2’−フルオロウリジン−5−イル)−アクリル酸メチルエステル(2.2g,6.66mmol)を2M水酸化ナトリウム溶液(20ml,40mmol)中に溶解する。3時間後に、これを12M塩酸によって酸性化して、氷浴中で1時間冷却する。濾過し、氷水によって洗浄し、デシケーター中で乾燥させた後に、無色固体(1.31g,62.1%)が得られる。
5.1.2. 2’−フルオロ−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3−(2’−デオキシ−2’−フルオロウリジン−5−イル)−アクリル酸(1.31g,3.97mmol)をDMF(40ml)中に溶解して、その後、炭酸水素カリウム(1.58g,16.04mmol)を加える。室温において20分間撹拌した後に、DMF(20ml)中に溶解したN−ブロモスクシンイミド(0.86g,4.81mmol)を30分間内に滴加する。室温において4時間撹拌した後に、濾過し、残渣をDMFによって洗浄して、DMFをキシレンとの蒸留によって除去する。残渣をクロロホルム/メタノール9:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。ジエチルエーテル中に浸漬して、乾燥させた後に(Nach digerieren in Diethylether und Trocknen)、融点182℃を有する無色生成物(0.84g,62.7%)が得られる。
2’−フルオロ−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(0.25g,0.71mmol)とトリフェニルホスフィン(0.37g,1.42mmol)をピリジン(10ml)中に溶解する。テトラブロモメタン(0.42g,1.28mmol)をピリジン(5ml)中に溶解して、5分間内に滴加する。1時間後に、反応は終了する(クロロホルム/メタノール10:1によるDC−コントロール)。ピリジンをトルエンと共に除去した後に、クロロホルム/メタノール30:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。融点223℃を有する無色固体(0.23g,78%)が得られる。
5.3.1. 5−ヨード−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−3’,5’−ジ−O−ベンゾイル−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル
5−ヨードウラシル(7.08g,29.75mmol)を1,2−ジクロロエタン(105ml)中に懸濁させる。これに、N,O−ビス−トリメチルシリルアセトアミド(BSA)(13.32g,65.47mmol)を加えて、室温において5時間撹拌させる。透明な無色溶液が得られる。これに、3,5−ジ−O−ベンゾイル−2−デオキシ−2−フルオロ−α−D−アラビノシル−ブロミド(11.40g,26.9mmol)を加える。これを22時間加熱還流させる。この後、転化は完了する(クロロホルム/メタノール100:1によるDC−コントロール)。このバッチを酢酸エステル(450ml)によって希釈し、リン酸塩緩衝液(pH=7)(400ml)によって処理する。有機相を分離して、水相を酢酸エステル(3x150ml)によって抽出する。一緒にした有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、乾燥剤を濾別し、溶媒を留去した後に、イソプロピルアルコールから再結晶する。無色生成物(8.47g,54.3%)が得られる。
5.3.2. 5−ヨード−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル
5−ヨード−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−3’,5’−ジ−O−ベンゾイル−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル(8.14g,14.03mmol)をTHF(250ml)中に溶解して、2M水酸化ナトリウム溶液(50ml,100mmol)と混合する。4時間後に、反応は終了する。該溶液を中和して、酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。濾過し、溶媒を遠心分離した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール10:1)によって精製する。無色固体(4.80g,91.8%)が得られる。
5.3.3. 3−((2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル−5−イル)−アクリル酸メチルエステル
トリフェニルホスフィン(0.75g,2.84mmol)、酢酸パラジウム(II)(0.34g,1.52mmol)及びトリエチルアミン(6.17g,61mmol)を1,4−ジオキサン(160ml)中で80℃に加熱する。深い暗赤色の着色が生じる。これをこの温度において10分間加熱してから、アクリル酸メチルエステル(6.54g,76mmol)、5−ヨード−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル(4.80g,12.9mmol)及び1,4−ジオキサン(40ml)を加える。1時間加熱還流させた後に、転化は完了する(クロロホルム/メタノール9:1によるDC−コントロール)。冷却後に、これをセライトによって非溶解部分から濾別して、濾液が無色になるまで、THFによって再び完全に洗浄する。濾液を遠心分離して、油状残渣をカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール10:1)によって精製する。無色固体(2.72g,54.4%)が得られる。
5.3.4. 3−((2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル−5−イル)−アクリル酸
3−((2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル−5−イル)−アクリル酸メチルエステル(2.72g,8.25mmol)を2M水酸化ナトリウム溶液(40ml,80mmol)中に溶解する。4時間後に、反応は終了する(クロロホルム/メタノール8:1によるDC−コントロール)。これを12M塩酸によって酸性化して、氷浴中に1時間放置する。沈殿を吸引によって取り出し、氷水によって洗浄し、デシケーター中で乾燥させる。無色生成物(2.61g,100%)が得られる。
5.3.5. 5−(E)−(2−ブロモビニル)−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル
3−((2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル−5−イル)−アクリル酸(2.61g,7.9mmol)をDMF(60ml)中に溶解して、炭酸水素カリウム(3.2g,32mmol)と混合する。室温において30分間撹拌し、その後、DMF(30ml)中の(1.78g,10mmol)の溶液を50分間内に滴加する。室温においてさらに3.5時間撹拌した後に、非溶解部分を濾別して、残渣をアセトン/メタノール1:1によって完全に洗浄して、遠心分離する。DMFをキシレンとの蒸留によって除去する。クロロホルム/メタノール9:1及びジクロロメタン/酢酸エステル1:2によるカラムクロマトグラフィーによって精製した後に、融点202℃を有する無色固体(1.51g,54.5%)が得られる。
5−(E)−(2−ブロモビニル)−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)ウラシル(0.60g,1.71mmol)と、トリフェニルホスフィン(950mg,3.62mmol)をピリジン(10ml)中に溶解する。その後、ピリジン(10ml)中のテトラブロモメタン(1.08g,3.25mmol)の溶液を10分間内に加える。15時間後に、転化は完了する(クロロホルム/メタノール10:1によるDC−コントロール)。ピリジンをトルエンと共に留去し、残渣をクロロホルム/メタノール30:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。融点237℃を有する無色生成物(0.63g,89.0%)が得られる。
6.1. 1−(2’−デオキシ−2’,2’−ジフルオロ−α−D−エリスロペントフラノス−1’−イル)−5−(E)−ブロモビニルウラシルと、1−(2’−デオキシ−2’,2’−ジフルオロ−β−D−エリスロペントフラノス−1’−イル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル
6.1.1. 1−(3’,5’−ジ−O−ベンゾイル−2’,2’−ジフルオロ−α−D−ペントフラノス−1’−イル)−5−(E)−ブロモビニルウラシルと、1−(3’,5’−ジ−O−ベンゾイル−2’,2’−ジフルオロ−β−D−ペントフラノス−1’−イル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル
5−(E)−ブロモビニルウラシル(1.89g,8.70mmol)を1,2−ジクロロエタン(40ml)中に懸濁させて、これに、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(4.28g,19.23mmol)と2,4,6−コリジン(2.14g,177mmol)を加える。1時間後に、透明な溶液が得られる。2-デオキシ−2,2−ジフルオロ−D−リボフラノース−3,5−ジベンゾエート−1−メタンスルホネート(α/β混合物)(3.98g,8.7mmol)を1,2−ジクロロエタン(25ml)中に溶解して、20分間内に滴加する。その後、1,2-ジクロロエタン(15ml)中のトリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(1.94g,8.7mmol)の溶液を10分間内に滴加して、18時間加熱還流させる。DC−コントロール(クロロホルム/メタノール10:1及び100:1)は、転化が完了したことを明らかにする。溶媒を留去して、油状残渣を酢酸エステル(80ml)中に溶解する。1M塩酸(2x80ml)、飽和塩化ナトリウム溶液(2x80ml)及びリン酸塩緩衝液(1x80ml)によって洗浄した後に、硫酸マグネシウムによって乾燥する。濾過して、溶媒を遠心分離した後に、粗物質をクロロホルム/メタノール125:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。無色フォーム(3.1g,61.7%)が得られる(α/β=1.2)。シクロヘキサン/酢酸エステル3:1によるカラムクロマトグラフィーを反復することによって、α−アノマーとβ−アノマーを分離する。
α−アノマー(1.49g)とβ−アノマー(1.15g)が得られる。
1−(3’,5’−ジ−O−ベンゾイル−2’,2’−ジフルオロ−α−D−ペントフラノス−1’−イル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル(1.49g,2.58mmol)をTHF(55ml)中に溶解して、2M水酸化ナトリウム溶液(13ml,26mmol)を加える。3時間後に、これを中和して、酢酸エステルによって抽出する。硫酸マグネシウムによって乾燥し、濾過して、溶媒を遠心分離した後に、クロロホルム/メタノール20:1及びジクロロメタン/メタノール20:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。乾燥後、融点192℃を有する無色固体(0.82g,86%)が得られる。
1−(3’,5’−ジ−O−ベンゾイル−2’,2’−ジフルオロ−β−D−ペントフラノス−1’−イル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル(1.15g,1.99mmol)をTHF(55ml)中に溶解して、水酸化ナトリウム溶液(10ml,20mmol)と混合する。α−アノマーに関して上述したと同様に、処理し、カラムクロマトグラフィーによって精製する。融点189℃を有する無色固体(740mg,100%)が得られる。
1−(2’−デオキシ−2’,2’−ジフルオロ−α−D−エリスロ−ペントフラノス−1’−イル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル(350mg,0.95mmol)をDMF(8ml)中に溶解する。トリフェニルホスフィン(337mg,1.29mmol)を加え、続いて、テトラクロロメタン(729mg,4.74mmol)を加える。室温において20時間撹拌した後に、転化は完了する(クロロホルム/メタノール15:1によるDC−コントロール)。メタノール(2ml)を加えた後に、DMFをキシレンと共に除去して、褐色残渣をクロロホルム/メタノール30:1によるカラムクロマトグラフィーによって数回精製する。融点208℃を有する無色生成物(240mg,65.2%)が得られる。
1−(2’−デオキシ−2’,2’−ジフルオロ−β−D−エリスロ−ペントフラノス−1’−イル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル(520mg,1.41mmol)と、トリフェニルホスフィン(500mg,1.90mmol)を、上述したと同様に、テトラクロロメタン(1083mg,7.04mmol)によって転化させ、処理する。クロロホルム/メタノール20:1によるカラムクロマトグラフィーによって数回精製した後に、融点191℃を有する無色生成物(460mg,84.1%)が得られる。
7.1. 3−(1−(2,3,6−トリ−O−アセチル−β−D−アラビノフラノシル)−ウラシル−5−イル)−アクリル酸メチルエステル
酢酸パラジウム(II)(0.84g,3.2mmol)と、トリフェニルホスフィン(0.89g,3.38mmol)と、トリエチルアミン(7.35g,73.56mmol)をジオキサン(135ml)中で70℃に加熱する。深い暗赤色の溶液が得られる。これをこの温度において10分間加熱して、新たに、アクリル酸メチルエステル(22.74g,264mmol)と、その後に、1−(2,3,6−トリ−O−アセチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−ヨードウラシル(9.0g,18.13mmol)と、さらにジオキサン(90ml)を加える。2.5時間加熱還流させた後に、反応は終了する(ジクロロメタン/酢酸エステル5:2によるDC−コントロール)。冷却後に、これを酢酸エステルで希釈し、非溶解部分から濾別し、濾液を蒸発させる。残渣をカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン/酢酸エステル5:2)によって精製する。無色フォーム(6.3g,76.5%)が得られる。
7.2. 3−(1−(β−D−アラビノフラノシル)−ウラシル−5−イル)−アクリル酸
3−(1−(2,3,6−トリ−O−アセチル−β−D−アラビノフラノシル)−ウラシル−5−イル)−アクリル酸メチルエステル(6.3g,13.86mmol)をTHF(140ml)中に溶解して、2M水酸化ナトリウム溶液(140ml,280mmol)と混合する。5時間後に、この溶液を濃縮して、12M塩酸によって酸性化する。このバッチを氷浴中に1時間保持して、沈殿を吸引によって取り出して、氷水によって洗浄する。デシケーター中で乾燥させた後に、無色固体(3.45g,79.4%)が得られる。
7.3. 1−(β−D−アラビノフラノシル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル
3−(1−(β−D−アラビノフラノシル)−ウラシル−5−イル)−アクリル酸(3.46g,11.01mmol)をDMF(100ml)中に溶解して、炭酸水素カリウム(5.51g,55.05mmol)を加える。室温において30分間撹拌した後に、N−ブロモスクシンイミド(2.37g,13.4mmol)の溶液を1時間内に滴加する。室温において4.5時間撹拌した後に、DMFをキシレンと共に除去して、残渣をジクロロメタン/メタノール10:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。メタノールからの再結晶後に、無色結晶質生成物(0.84g,21.8%)が得られる。
8.1. 5’−デオキシ−BVDU
8.1.1. 2’,5’−ジデオキシ−5’−ヨード−5−エチル−ウリジン
2’−デオキシ−5−エチル−ウリジン(8.0g,31.22mmol)と、トリフェニルホスフィン(10.66g,40.64mmol)をピリジン(50ml)中に溶解する。これに、ヨウ素(10.32g,40.64mmol)を数回に分けて加える。4時間後に、転化は完了する(ジクロロメタン/メタノール15:1によるDC−コントロール)。ピリジンを真空中で留去し、残渣を酢酸エステル中に溶解して、1M塩酸によって洗浄する。水相を酢酸エステルによって数回抽出し、一緒にした酢酸エステル相をリン酸塩緩衝液によって洗浄する。硫酸マグネシウムによって乾燥し、濾別し、酢酸エステルによって洗浄した後に、溶媒を乾燥するまで留去し、残渣をトルエン及びジクロロメタンによって洗浄する。淡黄色がかった生成物(7.5g,65.6%)が得られる。
8.1.2. 2’,5’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン
2’,5’−ジデオキシ−5’−ヨード−5−エチル−ウリジン(4.68g,12.78mmol)と、水酸化ナトリウム(1.08g,27.0mmol)をエタノール(280ml)中に溶解して、水素化用触媒(活性炭付きパラジウム、10%パラジウム)(780g)と混合して、12時間水素化する。この後、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール10:1によるDC−コントロール)。水素化用触媒を濾別した後に、乾燥するまで蒸発させ、残渣をリン酸塩緩衝液と混合する。沈殿を吸引によって取り出し、氷水によって洗浄して、水酸化カリウム上で乾燥させる。濾液を酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。乾燥剤を濾別し、酢酸エステルによって洗浄した後に、乾燥するまで蒸発させる。全体で2.97g(96.7%)の無色固体が得られる。
8.1.3. 2’,5’−ジデオキシ−3’−O−ベンゾイル−5−エチル−ウリジン
2’,5’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン(3.28g,13.65mmol)をピリジン(35ml)中に溶解して、0℃において塩化ベンゾイル(2.14g,15.21mmol)と混合する。30分間後に、冷却浴を除去し、室温においてさらに1時間撹拌する。この後、転化は完了する。ピリジンをトルエンと共に除去して、残渣をクロロホルム中に溶解する。0.1M塩酸によって洗浄し、リン酸塩緩衝液によって中和的に洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、乾燥剤を濾別し、溶媒を遠心分離した後に、ジクロロメタン/アセトン10:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。白色フォーム(3.82g,81.3%)が得られる。
8.1.4. 2’,5’−ジデオキシ−3’−O−ベンゾイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,5’−ジデオキシ−3’−O−ベンゾイル−5−エチル−ウリジン(2.79g,8.1mmol)と、AIBN(50mg)をクロロホルム(45ml)中に溶解して、沸騰するまで加熱する。これに、クロロホルム(15ml)中の臭素(2.88g,18mmol)の溶液を1.5時間内に滴加する。さらに0.5時間、沸騰するまで加熱し、室温に冷却した後にアルゴンを該溶液に通して1時間導入する。この後、トリエチルアミン(2.88g,19.8mmol)を該溶液に加えて、室温において1時間撹拌する。クロロホルムを留去し、残渣を酢酸エステル中に吸収させて、飽和塩化ナトリウム溶液によって洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、乾燥剤を濾別し、溶媒を遠心分離した後に、ジクロロメタン/アセトン20:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。白色フォーム(1.97g,57.8%)が得られる。
8.1.5. 2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,5’−ジデオキシ−3’−O−ベンゾイル−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.48g,5.88mmol)をTHF(25ml)中に溶解し、2M水酸化ナトリウム溶液(15ml,30mmol)と混合する。室温において3時間撹拌した後に、転化は完了する(ジクロロメタン/アセトン10:1によるDC−コントロール)。リン酸塩緩衝液(80ml)と混合して、酢酸エステルによって数回抽出する。有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、乾燥剤を濾別し、溶媒を遠心分離した後に、クロロホルム/メタノール20:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。融点174℃(分解)を有する無色固体(1.65g,88.7%)が得られる。
8.2.1. 2,3’−アンヒドロ−1−(2’,5’−ジデオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(1.47g,4.64mmol)と、トリフェニルホスフィン(1.83g,6.96mmol)をTHF(40ml)中に溶解して、この溶液に、THF(10ml)中のジイソプロピルアゾジカルボキシレート(1.44g,7.16mmol)の溶液を20分間内に滴加する。4時間後に、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール15:1によるDC−コントロール)。THFを留去し、残渣をトルエン中に吸収させる。これを濾別して、残渣をトルエンによって数回洗浄する。無色固体(1.19g,85.7%)が得られる。
8.2.2. 3’−クロロ−2’,3’,5’−トリデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2,3’−アンヒドロ−1−(2’,5’−ジデオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル(0.59g,1.97mmol)と、ピリジン塩酸塩(0.5g,4.33mmol)をDMF(5ml)中に懸濁させて、90℃に加熱する。1時間後に、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール15:1によるDC−コントロール)。DMFをキシレンと共に留去し、残渣を酢酸エステルと飽和塩化ナトリウム溶液によって処理する。水相を酢酸エステルによって数回抽出して、一緒にした酢酸エステル相を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。乾燥剤を濾別し、酢酸エステルによって洗浄し、溶媒を留去した後に、クロロホルム/メタノール100:1及びクロロホルム/酢酸エステル5:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。融点134℃を有する無色固体(0.25g,37.8%)が得られる。
2,3’−アンヒドロ−1−(2’,5’−ジデオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−ブロモビニルウラシル(0.59g,1.97mmol)と、ピリジン臭化水素酸塩(0.96g,6.0mmol)を、8.2.2で上述したように、DMF中で転化させて、処理する。生成物をクロロホルム/メタノール70:1によるカラムクロマトグラフィーによって数回精製して、融点128℃を有する無色固体(0.22g,29.4%)を得る。
9.1. 2’,5’−ジデオキシ−5’−ヨード−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(3.0g,9.0mmol)と、トリフェニルホスフィン(3.07g,11.7mmol)をピリジン(30ml)中に溶解して、10℃に冷却する。これに、ヨウ素(2.97g,11.7mmol)を数回に分けて加える。室温にまで加熱する。6時間後に、転化は完了する(ジクロロメタン/メタノール15:1によるDC−コントロール)。ピリジンを留去し、残渣を酢酸エステル/2−ブタノン(2:1)中に吸収させ、二硫酸ナトリウム溶液によって洗浄する。水相を酢酸エステルによって数回抽出して、一緒にした有機相を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。乾燥剤を濾別し、溶媒を留去した後に、残渣をトルエン/ジクロロメタン1:1によって処理し、得られた固体を乾燥させる。無色固体(3.77g,94.5%)が得られる。
9.2. 2’,5’−ジデオキシ−3’−O−アセチル−5’−ヨード−5−(E)−ブロモビニルウリジン
2’,5’−ジデオキシ−5’−ヨード−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.48g,5.59mmol)をピリジン(20ml)中に溶解して、無水酢酸(3.20g,31.34mmol)と混合する。90分間後に、反応は終了する(ジクロロメタン/メタノール10:1によるDC−コントロール)。このバッチをリン酸塩緩衝液中に注入して、15分間後に酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、通常の処理後に、クロロホルム/アセトン10:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。無色固体(2.14g,78.7%)が得られる。
9.3. 1−[3’−O−アセチル−2’,5’−ジデオキシ−β−D−グリセロ−ペント−4−エノフラノシル]−5−(E)−ブロモビニルウラシル
2’,5’−ジデオキシ−3’−O−アセチル−5’−ヨード−5−(E)−ブロモビニルウリジン(2.14g,4.41mmol)をアセトニトリル(45ml)中に溶解して、DBU(1,8−ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ−7−エン)(2.08g,13.73mmol)と混合する。室温において18時間撹拌した後に、転化は完了する(シクロヘキサン/酢酸エステル1:1によるDC−コントロール)。これをリン酸塩緩衝液中に注入して、酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、通常の処理後に、シクロヘキサン/酢酸エステル1:1及びクロロホルム・アセトン8:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。融点148℃を有する無色固体(1.24g,77.3%)が得られる。
1−[3’−O−アセチル−2’,5’−ジデオキシ−β−D−グリセロ−ペント−4−エノフラノシル]−5−(E)−ブロモビニルウラシル(0.86g,2.41mmol)をメタノール(10ml)中に溶解して、メタノール中アンモニアの飽和溶液(15ml)と混合する。7時間後に、転化は終了する(クロロホルム/メタノール15:1によるDC−コントロール)。溶媒を取り出し、残渣をクロロホルム/メタノール15:1及びジクロロメタン/酢酸エステル1:1によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。融点128℃(分解)を有する無色物質(210mg,27.6%)が得られる。
10.1. 5’−シアノ−2’,5’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン
5’−ヨード−2’,5’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン(2.54g,6.93mmol)をDMSO(50ml)中に溶解して、これに、シアン化ナトリウム(0.52g,10.61mmol)を加える。18時間後に、転化は完了する(酢酸エステルによるDC−コントロール)。このバッチを飽和塩化ナトリウム溶液中に注入して、酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、通常の処理後に、酢酸エステルによるカラムクロマトグラフィーによって精製する。無色物質(0.96g,52.1%)が得られる。
10.2. 3’−O−アセチル−5’−シアノ−2’,5’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン
5’−シアノ−2’,5’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン(0.96g,3.62mmol)をピリジン(15ml)中に溶解して、無水酢酸(1.77g,17.35mmol)と混合する。1時間後に、転化は完了する(酢酸エステルによるDC−コントロール)。このバッチをリン酸塩緩衝液中に注入して、酢酸エステルによって数回抽出する。一緒にした抽出物を硫酸マグネシウムによって乾燥させ、通常の処理後に、ジクロロメタン/酢酸エステルによるカラムクロマトグラフィーによって精製する。無色物質(0.82g,73.7%)が得られる。
10.3. 3’−O−アセチル−5’−シアノ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン
3’−O−アセチル−5’−シアノ−2’,5’−ジデオキシ−5−エチル−ウリジン(0.82g,2.67mmol)と、AIBN(アゾ−ビス−イソブチロニトリル)(0.01g)をクロロホルム(30ml)中に溶解して、沸騰するまで加熱する。これに、クロロホルム(10ml)中の臭素(0.94g,5.87mmol)の溶液を滴加する。65分間後に、滴加は終了する。さらに1時間加熱還流させ、室温に冷却し、トリエチルアミン(0.66g,6.52mmol)を加える。1時間後に、溶媒を留去し、残渣を酢酸エステルとリン酸塩緩衝液によって処理する。水相を酢酸エステルによって数回抽出し、一緒にした酢酸エステル相を硫酸マグネシウムによって乾燥させる。通常の処理後に、シクロヘキサン/酢酸エステル2:3によるカラムクロマトグラフィーによって精製する。融点96℃を有する無色物質(0.62g,59.7%)が得られる。
3’−O−アセチル−5’−シアノ−2’,5’−ジデオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(0.41g,1.07mmol)をメタノール(20ml)中に溶解して、メタノール中の塩化水素の飽和溶液(10ml)と混合する。36時間後に、転化は完了する(クロロホルム/メタノール15:1によるDC−コントロール)。溶媒を留去した後に、カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール15:1)によって精製する。融点177℃(分解)を有する無色物質(0.35g,95.9%)が得られる。
11.1. 1−(5’−ヨード−2’,5’−ジデオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン
11.1.1. 1−(2’−デオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン
2,3’−アンヒドロ−5’-O-ベンゾイル−2’−デオキシ−5−(E)−ブロモビニルウリジン(15.8g,37.6mmol)を2M水酸化ナトリウム溶液(65.7ml,132mmol,3.5当量)と共に、エタノール/水(5/1)混合物(600ml)中で1時間、加熱還流させる。この反応混合物を室温に冷却した後に、これを濃塩酸によって中和し、続いて、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(酢酸エステル/メタノール,9/1及びクロロホルム/メタノール,7/1)によって精製して、1−(2’−デオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン(10.9g,32.7mmol,87%)を白色固体として得る。
11.1.2. 1−(5’-メチルスルホニル−2’−デオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン
1−(2’−デオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン(10.9g,32.7mmol)を0℃においてピリジン(100ml)中に入れる。メチルスルホニルクロリド(3.94g,34.4mmol)をTHF(50ml)中に溶解して、徐々に滴加する。続いて、この反応混合物を0℃においてさらに3時間撹拌する。このバッチを氷(300g)上に注入して、濃塩酸によってpH=5に調節し、該混合物を酢酸エステル(3x100ml)によって抽出する。一緒にした有機相を1M塩酸によって洗浄し、さらにNaCl溶液によっても洗浄し、Na2SO4によって乾燥させ、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。この結果、1−(5’−メチルスルホニル−2’−デオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン(11.8g,28.7mmol)が白色固体として得られる。該生成物をさらに精製せずに転化させる。
11.1.3. 1−(5’-ヨード−2’,5’−ジデオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン
1−(5’-メチルスルホニル−2’−デオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン(0.50g,1.22mmol)をヨウ化ナトリウム(911mg,6.08mmol,5.0当量)と共に、DMF(10ml)中で20時間加熱する。この反応混合物を酢酸エステル(50ml)中に吸収させ、水とNaCl溶液によって洗浄し、Na2SO4によって乾燥させ、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,9/1)によって精製して、1−(5’−ヨード−2’,5’−ジデオキシ−β−D−スレオ−ペントフラノシル)−5−(E)−(2−ブロモビニル)−2,4−(1H,3H)−ピリミジンジオン(130mg,293μmol,24%)を融点79〜81℃を有する淡黄色がかった固体として得る。
12.1. 1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル
1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル(22.8g,83.2mmol)をピリジン(200ml)中に懸濁させ、塩化トリチル(25.5g,91.6mmol)を加える。この反応混合物を室温において24時間撹拌し、続いて、溶媒を回転蒸発器上で除去する。残渣を酢酸エステル(300ml)中に吸収させ、希塩酸、NaHCO3溶液及びNaCl溶液によって洗浄する。有機相をNa2SO4によって乾燥させ、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,9/1)によって精製して、1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル(26.1g,50.5mmol,61%)を白色固体として得る。
12.2. 2,3’−アンヒドロ−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル
1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル(26.1g,50.5mmol)をDMF(300ml)中に入れ、PPH3(19.9g,75.7mmol)を加える。続いて、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(15.3g,75.7mmol)をDMF(50ml)中に溶解して、滴加する。2時間後に、溶媒を回転蒸発器上で除去して、残渣をジエチルエーテル(1L)中に吸収させ、16時間激しく撹拌する。得られた固体を吸引によって取り出し、ジエチルエーテル(50ml)によって3回洗浄する。シクロヘキサン/酢酸エステルから再結晶して、2,3’−アンヒドロ−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル(25.5g,50.5mmol,100%)を白色固体として得る。
12.3. 1−(2’,3’−ジデヒドロ−2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル
2,3’−アンヒドロ−1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル(25.5g,50.5mmol)をエタノール(600ml)中に溶解して、水(125ml)と2M NaOH溶液(62.5ml,126mmol)を加え、この反応混合物を還流下で2時間加熱する。回転蒸発器上でエタノールを充分に除去する。残渣を希塩酸によって中和して、酢酸エステルによって抽出する。一緒にした有機相をNaCl溶液によって洗浄して、Na2SO4によって乾燥させ、濾過し、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,95/5)によって精製して、1−(2’,3’−ジデヒドロ−2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル(19.6g,39.2mmol,78%)を白色固体として得る。
12.4. 1−(2’,3’−ジデヒドロ−2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル
1−(2’,3’−ジデヒドロ−2’−デオキシ−2’−フルオロ−5’−O−トリチル−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル(5.00g,10.0mmol)をジオキサン(50ml)中に溶解して、0℃に冷却する。ジオキサン中4.8M HCl(4.2ml,20.0mmol)を徐々に滴加する。冷却浴を除去して、反応混合物を2時間撹拌する。続いて、溶媒を回転蒸発器上で除去する。カラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール,9/1)によって精製して、1−(2’,3’−ジデヒドロ−2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−D−アラビノフラノシル)−5−エチルウラシル(2.06g,8.04mmol,80%)を融点145〜146℃を有する白色固体として得る。
Claims (23)
- 一般式I:
ここで、プロドラッグ・ラジカルは、以下から選択される:
R3=H、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキル、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキレン;R4=H、ハロゲン、OR8、N3、NR6R7 ;R5=H、C1−C8アルキル又はアリール;R6及びR7は、相互から独立的に、H、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキル又はアセチルである;並びにR8は、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキルである]で示されることを特徴とするヌクレオシド。 - 請求項1〜11のいずれかに記載の少なくとも1つのヌクレオシドを含む薬剤。
- 薬剤がさらに、少なくとも1つの細胞増殖抑制剤を含む、請求項12記載の薬剤。
- 一般式I:
ここで、プロドラッグ・ラジカルは、以下から選択される:
R3=H、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキル、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキレン;R4=H、ハロゲン、OR8、N3、NR6R7 ;R5=H、C1−C8アルキル又はアリール;R6及びR7は、相互から独立的に、H、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキル又はアセチルである;並びにR8は、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキルである]で示されることを特徴とする少なくとも1つのヌクレオシド及び少なくとも1つの細胞増殖抑制剤を含む、細胞増殖抑制治療の場合における耐性発生を抑制する又は低減するための薬剤。 - 少なくとも1つのヌクレオシドと少なくとも1つの細胞増殖抑制剤を単独の製剤として用いる、請求項14〜18のいずれかに記載の薬剤。
- 少なくとも1つのヌクレオシドと少なくとも1つの細胞増殖抑制剤を別々の製剤として用いる、請求項14〜18のいずれかに記載の薬剤。
- 一般式I:
ここで、プロドラッグ・ラジカルは、以下から選択される:
R3=H、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキル、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキレン;R4=H、ハロゲン、OR8、N3、又はNR6R7;R5=H、C1−C8アルキル又はアリール;R6及びR7は、相互から独立的に、H、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキル又はアセチルである;並びにR8は、直鎖若しくは分枝鎖C1−C8アルキルである]で示される、少なくとも1つのヌクレオシド及び少なくとも1つの有効物質を含む、細菌、プラズモディウム又はリーシュマニアによって惹起される感染性疾患の無耐性療法のための薬剤。 - 少なくとも1つのヌクレオシドと少なくとも1つの細胞増殖抑制剤を単独の製剤として用いる、請求項21記載の薬剤。
- 少なくとも1つのヌクレオシドと少なくとも1つの細胞増殖抑制剤を別々の製剤として用いる、請求項21記載の薬剤。
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