JP5279539B2 - コラーゲン産生促進剤、化粧料、コラーゲン産生促進方法 - Google Patents
コラーゲン産生促進剤、化粧料、コラーゲン産生促進方法 Download PDFInfo
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Description
ローマンカモミール(学名:Anthemis nobilis)の花を蒸留器の釜に入れ、水蒸気を下から送り込み植物にあてて、精油を気化させた。気化した精油を冷却管に通して冷やし、精油が混入した液体を回収した。回収した液体において、精油は水より軽く、水に溶けないために精油と水が分離しており、分離した精油成分を採取することでローマンカモミールの精油を得た。
(i) ジャーマンカモミールの精油
ジャーマンカモミール(学名:Matricaria chamomilla)の花から、上記ローマンカモミールの精油の場合と同様の水蒸気蒸留法によりジャーマンカモミールの精油を得た。
ローマンカモミール(Anthemis nobilis L.(Compositae))の頭花100gに、エキスの抽出媒体である50%の1,3−ブチレングリコール水溶液を1L加えて、ローマンカモミールの頭花を抽出媒体に3昼夜浸漬させた。ローマンカモミールを浸漬した溶液をろ過し、ろ液としてローマンカモミールエキスを約1.0kg得た。
ジャーマンカモミール(Matricaria chamomilla L.(Compositae))の花を細切し、自然乾燥した。この乾燥品100gに30w/v%エタノール溶液を1L加えて3昼夜浸漬した後、花の細片等の残渣と抽出を行った溶液とを圧搾分離し、第1の抽出液を約1.0kg得た。一方、上記残渣に30w/v%エタノール溶液を1L加え、残渣を上記と同様の方法で浸漬、分離した後、溶媒を減圧下で蒸発除去し、軟エキスを0.1〜2.0g得た。先に得られた抽出液にこの軟エキスを加えてよく攪拌した後、静置した。これをろ過し、そのろ液に1,3−ブチレングリコールを2L加えてよく攪拌した後、静置し、ろ過して、ろ液としてジャーマンカモミールエキスを約2.0kg得た。
(i) 線維芽細胞の培養
正常ヒト真皮線維芽細胞(クラボウ社製)を96穴プレートに播種し、5%子牛血清(FBS)含有ダルベッコ変法MEM(Minimum Essential Medium)(DMEM)(SIGMA−ALDRICH社製)を加えて、2×104 cells/wellの細胞密度で培養した。培養開始から24時間後に、上記培地(DMEM)を、各試料を下記表1に示す濃度でそれぞれ含有する0.5% FBS含有DMEMと交換した。試料含有培地で48時間、培養した後、培地上清を回収して、下記ELISA法により培地上清中のI型コラーゲン量を測定した。培地除去後にプレート穴に接着して残っている細胞は、0.5% Triton X−100溶液にて溶解した後、溶液内に含まれるタンパク質の量を定量した。タンパク質の量は、ビシンコニン酸(BCA)法でピアス製測定キットを用いて測定した。なお、I型コラーゲン産生促進作用を有するアスコルビン酸リン酸マグネシウム塩(VC−PMg)を、陽性コントロール(P.C.)として用いた。
上記培養方法により合成された、培地上清中のI型コラーゲンの量は、以下のELISA法にて測定した。回収した上記培地と、I型コラーゲン量を求めるために用いる検量線を作成するための検量線用I型コラーゲンを、高吸着型ELISAプレートの別々の穴に入れ、37℃にて2時間コーティングした後、1%牛血清アルブミン(BSA)(Sigma製)溶液を用いて37℃にて1時間ブロッキングした。
以上の試験の結果を表1に示す。なお上記のように、コラーゲン産生量は全細胞のタンパク質の量あたりのI型コラーゲン量であり、増加率は、コントロールのコラーゲン量(35.94 μg/mgタンパク質)に対する培養後の各実施例、比較例において産生されたコラーゲン量の比(%)である。
(1)ホホバオイル 30ml
(2)ローマンカモミール精油 1滴〜3滴
(1)スイートアーモンドオイル 10ml
(2)ミツロウ 2g
(3)ローマンカモミール精油 1〜2滴
Claims (3)
- ローマンカモミール(学名:Anthemis nobilis)を水蒸気蒸留して得られる精油からなることを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
- 前記精油は真皮の線維芽細胞のコラーゲン産生を促進することを特徴とする請求項1に記載のコラーゲン産生促進剤。
- 請求項1又は2に記載のコラーゲン産生促進剤を使用してコラーゲンの産生を促進させることを特徴とするコラーゲン産生促進方法。
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