JP5175940B2 - 魚類ワクチン - Google Patents

魚類ワクチン Download PDF

Info

Publication number
JP5175940B2
JP5175940B2 JP2010531535A JP2010531535A JP5175940B2 JP 5175940 B2 JP5175940 B2 JP 5175940B2 JP 2010531535 A JP2010531535 A JP 2010531535A JP 2010531535 A JP2010531535 A JP 2010531535A JP 5175940 B2 JP5175940 B2 JP 5175940B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
nocardia
vaccine
fish
streptococcus
virus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP2010531535A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2011502972A (ja
Inventor
ラブリー，ラウラ
ン，チヨウ・ヨン
ウオン，フオン・シーアン
Original Assignee
インターベツト・インターナシヨナル・ベー・ベー
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by インターベツト・インターナシヨナル・ベー・ベー filed Critical インターベツト・インターナシヨナル・ベー・ベー
Publication of JP2011502972A publication Critical patent/JP2011502972A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP5175940B2 publication Critical patent/JP5175940B2/ja
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/107—Vibrio
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/05—Actinobacteria, e.g. Actinomyces, Streptomyces, Nocardia, Bifidobacterium, Gardnerella, Corynebacterium; Propionibacterium
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
    • A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

本発明は、魚類における細菌感染に対抗するための混合ワクチン、そのようなワクチンの製造のための細菌の使用、そのようなワクチンの製造方法、およびパーツ・キット（ｋｉｔ−ｏｆ−ｐａｒｔｓ）に関する。
過去数十年の間に、世界中で魚類の消費量の著しい増加が認められる。これは、サケ、ターバット（ｔｕｒｂｏｔ）、オヒョウおよびタラのような冷水魚ならびにアジアシーバス（Ａｓｉａｎ ｓｅａ ｂａｓｓ）、ティラピア、サバヒー、ブリ、アンバージャック（ａｍｂｅｒｊａｃｋ）、ハタ、フエダイおよびスギのような熱帯魚の消費量でも同じである。その結果として、市場の需要の増大を満たすために、養魚場の数および大きさの増大が見られる。
例えば畜産学から公知のとおり、過密状態で一緒に住む多数の動物はあらゆる種類の疾患に罹りやすく、また、大規模商業的飼育の時代の前にはほとんど知られておらず認識されていなかった又は更には未知であった疾患にさえも罹りやすい。養魚の場合にも、これと同じことが言える。魚類に対して病原性であることが判明している細菌は、とりわけ、ノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属、ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ）属、パスツレラ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）属、フォトバクテリウム（Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、テナシバクラム（Ｔｅｎａｃｉｂａｃｕｌｕｍ）属、フラボバクテリウム（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、フレキシバクター（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ）属、サイトファガ（Ｃｙｔｏｐｈａｇａ）属、フランシセラ（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ）属、マイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）属またはエドワージエラ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ）属に属する。
ノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属種のうち、ノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）は温水魚において慢性的な問題を引き起こす。ノカルジア感染により養魚業において引き起こされる損害は長年にわたって増大している。特に、ブリ（セリオレ・クインクエラジアタ（Ｓｅｒｉｏｌａｅ ｑｕｉｎｑｕｅｒａｄｉａｔａ）、アンバージャック（セリオレ・デュメレルリ（Ｓｅｒｉｏｌａｅ ｄｕｍｅｒｅｌｌｉ））、シーバス（ｓｅａ ｂａｓｓ）（ラテオラブラクス・ジャポニクス（Ｌａｔｅｏｌａｂｒａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ））、イエロークローカー（ｙｅｌｌｏｗ ｃｒｏａｃｋｅｒ）（ラミチクチス・クロセア（Ｌａｍｉｔｉｃｈｔｈｙｓ ｃｒｏｃｅａ））、シマガツオ（Ｐｏｍｆｒｅｔ）（パムプス・アーゲンテウス（Ｐａｍｐｕｓ ａｒｇｅｎｔｅｕｓ））、ツバメコノシロ（エリューセロネマ・テトラダクチルム（Ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｎｅｍａ ｔｅｔｒａｄａｃｔｙｌｕｍ））、フエダイ（ｓｎａｐｐｅｒ）（ルトジャヌス（Ｌｕｔｊａｎｕｓ）属種）、ハタ（ｇｒｏｕｐｅｒ）（エピネフェルス（Ｅｐｉｎｅｐｈｅｌｕｓ）属種）およびカイワリ（ｔｒｅｖａｌｌｉ）（カランクス・セクスファシアツス（Ｃａｒａｎｘ ｓｅｘｆａｓｃｉａｔｕｓ））がノカルジア感染に冒されている。
海洋ノカルジア症としばしば称される該疾患は無症状感染として始まる。該細菌は脾臓、肝臓および腎臓のような主要臓器内で増殖する。
低い増殖速度のため、いずれかの視認症状が生じる前に該細菌は魚類組織内で長期にわたって増殖しうる。したがって、該疾患は慢性とみなされる。慢性特性の結果として、該突発的発生が明白になる前に既に魚類の体重が３００〜１００ｇになっていることだけからも、経済的損失は著しい。病気に罹った幼魚（生ノカルジアが予め注射されたもの）と水槽空間を共有するブリは、３ヶ月の同棲の後、最終的に内部病変（それらの脾臓における肉芽腫）を示すことを、研究は示している。海洋養魚においては、ノカルジア感染は、水温が２４℃以上に達する夏季に、より急速に進行するようであるが、ノカルジアによる致死は、秋季および初冬に、より頻繁に見られる。なぜなら、魚は新たな環境に順応しなければならず、その免疫系が弱まるからである。
ノカルジアは、それ自体に対する免疫系の、非常に乏しい誘導因子であるらしい。なぜなら、該疾患の非常に遅い進行にもかかわらず、免疫系は該感染をうまく排除できないからである。これは、ノカルジア感染に対する有効なワクチンが存在しないことの説明にもなりうる。生弱毒化または不活化細菌を含むワクチンは自然感染を或る程度模擬するが、自然感染でさえも適度な免疫応答を誘導しない場合には、ワクチンがそれより良好に働くことは期待されないであろう。有効なワクチンが大いに必要とされていることは明らかである。
ノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）感染に対抗するための有効なワクチンを提供することが本発明の目的である。
驚くべきことに、ノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）だけでなく、さらに少なくとも、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、フォトバクテリウム・ダムセレ（Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄａｍｓｅｌａｅ）亜種ピスシシデ（ｐｉｓｃｉｃｉｄａｅ）（＝パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ））およびビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）種の細菌をも含む混合ワクチンが、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）およびビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）に対して高レベルの防御をもたらすだけでなく、ノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）感染に対しても、単価ノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）ワクチンにより得られるものより高い予想外のレベルの防御をもたらすことが、本発明において見出された。
したがって、本発明の第１の実施形態は、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の細菌と医薬上許容される担体とを含むことを特徴とする、魚類におけるノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）感染に対抗するための混合ワクチンに関する。
そのようなワクチンの製造では、該細菌の状態（生または不活化）はそれほど重要ではない。重要なのは、ノカルジアに対する魚類におけるノカルジア特異的免疫の刺激因子が尚も存在することである。これは、とりわけ、全細菌調製物を使用することにより保証されうる。前記のとおり、該調製物中の細菌が生きているか、死んでいるか、または更には（例えばフレンチプレスを用いることにより）断片化されていることは重要ではない。不活化のために用いられる方法は該細菌の活性にそれほど重要ではない、と当業者は理解するであろう。ＵＶ照射、ガンマ線照射、ホルマリンでの処理、二成分エチレン−イミン、チメロサールなどのような、全て当技術分野でよく知られている不活化のための古典的な方法が適用可能である。例えばフレンチプレスを用いる物理的ストレスによる細菌の不活化は、本発明のワクチンの製造のための同等に適した出発物質を与える。したがって、不活化細菌は、必ずしも、不活化全細胞の形態である必要はなく、該細胞は破壊されていてもよい。生弱毒化細菌と比べて、不活化細菌は、非常に安全であるという利点を有する。後記実施例によると、本発明の混合ワクチンの一部として使用されるノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）細菌ワクチンは容易に製造可能であり、有効に働く。
したがって、本発明の好ましい形態においては、本発明は、該細菌種が不活化されている、本発明の混合ワクチンに関する。
生弱毒化細菌も非常に好適である。なぜなら、それは、本質的に、ノカルジアに対する交差特異的免疫を刺激する因子を担持するからである。そして、不活化細菌と比べて、生弱毒化細菌は、アジュバントを伴わずに投与された場合に特に、それが不活化細菌より有効であるという利点を有する。さらに、それは、免疫系により阻止されるまで或る程度は複製され、その結果として、より少数の細胞の投与が可能である。生弱毒化細菌は、その野生型対応物ほどは病原性ではないが有効な免疫応答を尚も誘導する細菌である。弱毒化株は、当技術分野において古くから公知の古典的な方法、例えば連続継代、温度順応、化学的突然変異誘発、ＵＶ照射など、または部位特異的突然変異誘発により入手可能である。
したがって、もう１つの好ましい形態においては、本発明は、該細菌種の少なくとも１つが生弱毒化形態である、本発明の混合ワクチンに関する。
本発明のワクチンは、当業者によく知られた技術に従う細菌培養から製造されうる。魚類ワクチンおよびそれらの製造に関する総説としては、とりわけ、Ｓｏｍｍｅｒｓｅｔ，Ｌ，Ｋｒｏｓｓｏｙ，Ｂ．，Ｂｉｅｒｉｎｇ，Ｅ．およびＦｒｏｓｔ，Ｐ．，Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｖａｃｃｉｎｅｓ ４：８９−１０１（２００５）、Ｂｕｃｈｍａｎｎ，Ｋ．，Ｌｉｎｄｅｎｓｔｒｏｍ，Ｔ．およびＢｒｅｓｃｉａｎｉ，Ｊ．Ａｃｔａ Ｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｉｃａ ４６：７１−８１（２００１）、Ｖｉｎｉｔｎａｎｔｈａｒａｔ，Ｓ．，Ｇｒａｖｎｉｎｇｅｎ，Ｋ．およびＧｒｅｇｅｒ，Ｅ．，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ４１：５３９−５５０（１９９９）ならびにＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ｄ．Ｐ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ ｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ ９０：２５７−２６５（１９９７）が挙げられる。
本発明のワクチンは、基本的には、本発明の細菌の有効量と、医薬上許容される担体とを含む。本明細書中で用いる「有効」なる語は、野生型ノカルジアでの感染の後、同一条件下で未ワクチン接種魚類で見られる病理発生の５０％未満である病理発生のレベルをもたらす、標的魚類において免疫応答を誘導するのに十分な量と定義される。
投与すべき細胞の量は、とりわけ、使用する各抗原の細菌の量、該細菌の状態、弱毒化生形態であるか又は不活化形態であるか、アジュバントの存在、および投与経路に左右される。
商業的に入手可能なワクチンから出発する場合には、その製造業者がこの情報を提供するであろう。そうでなければ、当業者は、前記参考文献、および後記の情報、特に実施例における情報から、十分な指針を見出す。
前記のとおり、本発明のワクチンは、当業者によく知られた技術に従う細菌培養から製造されうる。実施例において、本発明のワクチンの製造の具体例を示す。
一般的に言えば、不活化細菌に基づく、本発明に従い製造されたワクチンは、一般に、１０３〜１０１０、好ましくは、１０６〜１０９、より好ましくは、１０８〜１０９細菌の投与量で投与されうる。１０１０細菌を超える用量は、免疫学的には適しているが、経済的な理由から、それほど魅力的でないであろう。
生弱毒化細菌に基づく、本発明に従い製造されたワクチンは、より低い用量で投与されうる。なぜなら、該細菌は投与後の或る時間にわたって複製され続けるからである。生弱毒化細菌に基づく、本発明に従い製造されたワクチンは、一般に、１０２〜１０８、好ましくは、１０３〜１０５細菌の投与量で投与されうる。
本発明のワクチンにおいて特に好適な医薬上許容される担体の具体例としては、塩類液（食塩水）、水性バッファー、例えばＰＢＳなどが挙げられる。また、本発明のワクチンは、後記のとおり、アジュバント、安定剤、抗酸化剤などのような他の添加剤を含みうる。
本発明に記載されているとおりに製造されたワクチンは、好ましい形態においては、免疫刺激物質、いわゆるアジュバントを含有しうる。アジュバントは、一般に、宿主の免疫応答を非特異的に増強する物質を含む。多種多様なアジュバントが当技術分野で公知である。魚類および甲殻類の養殖において頻繁に使用されるアジュバントの具体例としては、ムラミルジペプチド、リポ多糖、いくつかのグルカンおよびグリカンならびにカルボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ）（登録商標）が挙げられる。魚類および甲殻類ワクチンに適したアジュバントの広範な概要が、Ｊａｎ Ｒａａ（Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ ４（３）：２２９−２８８（１９９６））による総説に記載されている。該ワクチンは、いわゆる「ビヒクル」をも含みうる。ビヒクルは、それに共有結合することなく細菌が付着する化合物である。そのようなビヒクルとしては、とりわけ、バイオ−マイクロカプセル、マイクロ−アルギナート、リポソームおよびマクロゾールが挙げら、これらは全て、当技術分野で公知である。抗原がビヒクル中に部分的に包埋された、そのようなビヒクルの特別な形態として、いわゆるＩＳＣＯＭ（欧州特許ＥＰ １０９．９４２、ＥＰ １８０．５６４、ＥＰ ２４２．３８０）が挙げられる。また、該ワクチンは、１以上の適当な界面活性化合物または乳化剤、例えばＳｐａｎまたはＴｗｅｅｎを含みうる。
したがって、この実施形態の、より好ましい形態においては、本発明の混合ワクチンはアジュバントを含む。
本発明の混合ワクチンでは、通常、油アジュバントが若干、より効率的であることが判明している。油中水型エマルションにおける使用に適した油アジュバントとしては、例えば、鉱油または代謝可能な油が挙げられる。鉱油としては、例えば、Ｂａｙｏｌ（登録商標）、Ｍａｒｃｏｌ（登録商標）およびＤｒａｋｅｏｌ（登録商標）が挙げられる。代謝可能な油としては、例えば植物油、例えばラッカセイ油およびダイズ油、動物油、例えば魚油スクアランおよびスクアレン、ならびにトコフェロールおよびその誘導体が挙げられる。適当なアジュバントとしては、例えば、ｗ／ｏエマルション、ｏ／ｗエマルションおよびｗ／ｏ／ｗ二重エマルションが挙げられる。非常に好適なｏ／ｗエマルションとしては、例えば、５〜５０％ ｗ／ｗ 水相および９５〜５０％ ｗ／ｗ 油アジュバント、より好ましくは、２０〜５０％ ｗ／ｗ 水相、および８０〜５０％ ｗ／ｗ 油アジュバントが挙げられる。
したがって、この実施形態の、より一層好ましい形態においては、本発明の混合ワクチンは、油アジュバントであるアジュバントを含む。
前記のとおり、大まかに、油アジュバントは、鉱油を含むアジュバントと、非鉱油を含むアジュバントとに分類されうる。鉱油は、食物安全性の観点およびそれが引き起こす病変の両方から、幾分かは魅力に欠けるかもしれない。したがって、好ましい油アジュバントは非鉱油を含む。
より好ましい非鉱油としては、例えば、ＳＥＰＰＩＣ Ｆｒａｎｃｅから商業的に入手可能なＩＳＡ ７６３Ａ ＶＧ油が挙げられる。
添加されるアジュバントの量はアジュバント自体の性質に左右され、そのような量に関する情報はその製造業者により提供されるであろう。
しばしば、例えば、分解し易いタンパク質の分解を防ぐため、該ワクチンの貯蔵寿命を改善するため、または凍結乾燥効率を改善するために、該ワクチンは安定剤と混合される。有用な安定剤としては、とりわけ、ＳＰＧＡ（Ｂｏｖａｒｎｉｋら；Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ５９：５０９（１９５０））、炭水化物、例えばソルビトール、マンニトール、トレハロース、デンプン、スクロース、デキストランまたはグルコース、タンパク質、例えばアルブミンまたはカゼインあるいはそれらの分解産物、およびバッファー、例えばリン酸アルカリ金属が挙げられる。
好ましくは、記載されているワクチンは凍結乾燥形態で提供される。
また、該ワクチンは、生理的に許容される希釈剤に懸濁されうる。言うまでもなく、アジュバント化、ビヒクル化合物もしくは希釈剤の添加、乳化またはタンパク質の安定化のための他の方法も本発明に含まれる。
当技術分野で全て公知である多数の投与方法が適用されうる。記載されているワクチンは、好ましくは、注射、例えば腹腔内注射または筋肉内注射により、あるいは他の経路、例えば液浸、噴霧、浸漬または経口経路により、魚類に投与される。しかし、投与経路はワクチンのタイプにも左右されうることに留意されるべきである。該ワクチンが生弱毒化ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）細菌を含む場合、それは浸漬により容易に投与されうるであろう。一方、該ワクチンが不活化細菌の形態のラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）細菌を含む場合、あるいはより一般的に言えば、アジュバントを配合することにより該ワクチンが改善されうる場合には、好ましい投与方法は腹腔内経路であろう。免疫学的観点からは、不活化細菌の場合には疑いなく、腹腔内ワクチン接種が魚類における有効なワクチン接種経路である。なぜなら、それはアジュバントの取り込みを可能にするからである。
本発明のワクチンの簡便な製造方法は、商業的に入手可能なワクチンを利用することによるものである。ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）ワクチン、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）ワクチンおよびビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）ワクチンは商業的に入手可能であり、および／または、それらの製造方法は文献に記載されている。該ワクチンのノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）成分として、好ましくは、不活化ノカルジアバクテリン、より好ましくは、ノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）バクテリンが使用される。
投与手法は標準的なワクチン接種の慣例に従い最適化されうる。
ノカルジア感染に対しては、明らかに、早い段階でワクチン接種することが望まれるであろうが、ワクチン接種される魚類の年齢は決定的には重要でない。多数のワクチンの場合、魚類が１０〜３５グラムの体重を有する時にそれらが投与される。これは、ノカルジアに対してワクチン接種するための非常に好適な時期でもある。
経口投与の場合、好ましくは、該ワクチンを、例えば経口投与用の適当な担体、例えばセルロース、食事または代謝可能な物質、例えばアルファ−セルロースまたは植物もしくは動物由来の種々の油と混合する。また、魅力的な方法はバイオカプセル化による該ワクチンの投与であり、この場合、生きた飼料生物を高濃度の該ワクチンにさらし、ついでその生きた飼料生物を魚類に給餌する。本発明のワクチンの経口運搬のための特に好ましい食事担体は、該ワクチンを被包（カプセル化）する生きた飼料生物である。適当な生きた飼料生物には、プランクトン様非選択的濾過飼料用動物、好ましくは、ワムシ綱のメンバー、アルテミア（Ａｒｔｅｍｉａ）などが含まれる。非常に好ましいのは、海水シュリンプであるアルテミア属種（Ａｒｔｅｍｉａ ｓｐ．）である。
魚類に対して病原性であるウイルスおよび生物が多数存在することを考慮すれば、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）細菌と共に、１以上の他の魚類病原性細菌またはウイルス、それらの細菌もしくはウイルスの抗原、またはワクチンの製造のためのそのような抗原をコードする遺伝物質をも投与することが有益であろう。
有名な商業的に重要な魚類病原体の具体例としては、タイ国特許出願ＴＨ ９２８４０に記載されている、ビッグ・ベリー（Ｂｉｇ Ｂｅｌｌｙ）症候群を引き起こす最近見出された細菌（この新規細菌の一例（ＢＢ Ｅ３Ｆ１）はＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ Ｎａｔｉｏｎａｌｅ ｄｅ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｄｅ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ（ＣＮＣＭ），Ｉｎｓｔｉｔｕｔ Ｐａｓｔｅｕｒ，２５ Ｒｕｅ ｄｕ Ｄｏｃｔｅｕｒ Ｒｏｕｘ，Ｆ−７５７２４ Ｐａｒｉｓ Ｃｅｄｅｘ １５，Ｆｒａｎｃｅに受託番号ＣＮＣＭ １−３２５７として寄託されている）、テナシバクラム・マリチマム（Ｔｅｎａｃｉｂａｃｕｌｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フラボバクテリウム・コルムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）、フレキシバクター・マリチマス（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ ｍａｒｉｔｉｍｕｓ）（テナシバクラム・マリチマムの旧名）、ストレプトコッカス・イニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディフィシレ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ）、エドワージエラ・タルダ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｔａｒｄａ）、エドワージエラ・イクタルリ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｉｃｔａｌｕｒｉ）、マイコバクテリウム・マリチマム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フランシセラ属種（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｓｐ．）およびウイルス、例えばノダウイルス、イリドウイルス、コイヘルペスウイルス、チャネルキャトフィシュ（ｃｈａｎｎｅｌ ｃａｔｆｉｓｈ）ウイルスが挙げられる。
そのような混合ワクチンの利点は、それがノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）およびビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）感染に対する防御をもたらすだけでなく、他の疾患に対する防御をももたらすことである。
したがって、好ましい実施形態においては、本発明の混合ワクチンは、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の細菌に加えて、魚類に病原性である少なくとも１つの他の微生物またはウイルス、あるいはそのような微生物もしくはウイルスの他の抗原の１つ又はそのような他の抗原をコードする遺伝物質を含む。
より好ましい実施形態においては、魚類に病原性である前記の少なくとも１つの他の微生物またはウイルスは、ビッグ・ベリー（Ｂｉｇ Ｂｅｌｌｙ）症候群を引き起こす細菌、フラボバクテリウム・コルムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）、テナシバクラム・マリチマム（Ｔｅｎａｃｉｂａｃｕｌｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、ストレプトコッカス・イニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディフィシレ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ）、エドワージエラ・タルダ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｔａｒｄａ）、エドワージエラ・イクタルリ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｉｃｔａｌｕｒｉ）、マイコバクテリウム・マリチマム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フランシセラ属種（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｓｐ．）、ノダウイルス、イリドウイルス、コイヘルペスウイルス、チャネルキャトフィシュ（ｃｈａｎｎｅｌ ｃａｔｆｉｓｈ）ウイルスよりなる細菌の群から選ばれる。
本発明の更にもう１つの実施形態は、魚類におけるノカルジア感染に対抗するための本発明の混合ワクチンの製造方法に関する。そのような方法は、生弱毒化または不活化形態のラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）細菌と医薬上許容される担体とを混合する工程を含む。
この実施形態の好ましい形態は、アジュバントの混合を更に含む方法に関する。
前記のとおり、単価（一価）ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）およびビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）ワクチンは現在、商業的に入手可能である。したがって、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）およびビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）ワクチン成分のために既製ワクチンを使用する場合、投与前にそれらをノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）ワクチンと混合することが可能である。それらを経口投与したい場合には、投与前の混合が、好ましい選択であろう。該ワクチンを注射により投与する場合、同時投与のためには、それらを混合することが可能であり、また、それらを別々に又は連続的に一連の連続的な注射により投与することも可能である。
いずれかの商業的に入手可能なラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）ワクチン、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）ワクチンおよびビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）ワクチン、または実施例に記載されているとおりに製造されるワクチン（例えば、実施例に記載されているノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）ワクチン）が使用されることにかかわらず、当業者は、該細菌種のそれぞれに対する免疫応答を誘導するために必要な該細菌のそれぞれの量を使用することを好むであろう。単なる一例として示すと、本発明の混合ワクチンにおけるラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）細菌の量は、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）感染に対する免疫応答を誘導するのに十分なものである。
該混合ワクチンにおけるラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の細菌は同時に、別々に又は連続的に投与されうる。それでも尚、それらは、短い間隔で投与されるのであれば、後記で説明されるとおり、混合ワクチンとみなされうる。同時投与は、好ましくは混合物として注射される、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）細菌の、時間的に同一の瞬間における投与である。取り扱いの容易さのため、勿論、これが好ましい投与方法であろう。別々の投与は、（部分的または完全な）ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）細菌の、好ましくは時間的に同一の瞬間における、２以上の異なる注射部位における別々の投与である。連続的投与は、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）細菌が時間的に異なる瞬間において投与される投与である。別々の又は連続的な注射が行われる場合、これらは、好ましくは、同じ日に、より好ましくは、１２、１０、８、６、４、２または１時間（その順に好ましい）以内に行われることが明らかである。より一層好ましいのは、互いの投与の後の５０、４０、３０、２０、１０または５分以内の投与である。該混合ワクチンの全ワクチンの投与が１０分以内、より一層好ましくは５分以内に行われる場合には、各魚類の取り扱いのための単一の機会で十分であり、それは、ほぼ即時的で完全な、免疫系の惹起を可能にするであろう。
本発明のもう１つの実施形態は、魚類におけるノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）感染に対抗するための混合ワクチンの製造のための、少なくともラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の細菌の使用に関する。
この実施形態の好ましい形態においては、ノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）感染の防御対象である魚類、およびそのように製造される該ワクチンの対象である魚類は、ブリ（セリオレ・クインクエラジアタ（Ｓｅｒｉｏｌａｅ ｑｕｉｎｑｕｅｒａｄｉａｔａ）、アンバージャック（セリオレ・デュメレルリ（Ｓｅｒｉｏｌａｅ ｄｕｍｅｒｅｌｌｉ））、シーバス（ｓｅａ ｂａｓｓ）（ラテオラブラクス・ジャポニクス（Ｌａｔｅｏｌａｂｒａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ））、イエロークローカー（ｙｅｌｌｏｗ ｃｒｏａｃｋｅｒ）（ラミチクチス・クロセア（Ｌａｍｉｔｉｃｈｔｈｙｓ ｃｒｏｃｅａ））、シマガツオ（Ｐｏｍｆｒｅｔ）（パムプス・アーゲンテウス（Ｐａｍｐｕｓ ａｒｇｅｎｔｅｕｓ））、ツバメコノシロ（エリューセロネマ・テトラダクチルム（Ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｎｅｍａ ｔｅｔｒａｄａｃｔｙｌｕｍ））、フエダイ（ｓｎａｐｐｅｒ）（ルトジャヌス（Ｌｕｔｊａｎｕｓ）属種）、ハタ（ｇｒｏｕｐｅｒ）（エピネフェルス（Ｅｐｉｎｅｐｈｅｌｕｓ）属種）およびカイワリ（ｔｒｅｖａｌｌｉ）（カランクス・セクスファシアツス（Ｃａｒａｎｘ ｓｅｘｆａｓｃｉａｔｕｓ））種に属する。
この実施形態のもう１つの好ましい実施形態においては、該製造に使用される細菌種の少なくとも１つは生弱毒化形態である。
この実施形態の更にもう１つの好ましい形態においては、該製造に使用されるノカルジア種は不活化されている。
この実施形態の更にもう１つの好ましい形態においては、該製造に使用される細菌種は不活化されている。
この実施形態のより好ましい形態においては、該ワクチンの製造のために、魚類に病原性である更に少なくとも１つの他の微生物もしくはウイルス、またはそのような微生物もしくはウイルスの他の抗原の１つ、またはそのような他の抗原をコードする遺伝物質が使用される。
この実施形態のより一層好ましい形態においては、前記の他の微生物またはウイルスは、ビッグ・ベリー（Ｂｉｇ Ｂｅｌｌｙ）症候群を引き起こす細菌、テナシバクラム・マリチマム（Ｔｅｎａｃｉｂａｃｕｌｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フラボバクテリウム・コルムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）、ストレプトコッカス・イニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディフィシレ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ）、エドワージエラ・タルダ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｔａｒｄａ）、エドワージエラ・イクタルリ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｉｃｔａｌｕｒｉ）、マイコバクテリウム・マリチマム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フランシセラ属種（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｓｐ．）、ノダウイルス、イリドウイルス、コイヘルペスウイルス、チャネルキャトフィシュ（ｃｈａｎｎｅｌ ｃａｔｆｉｓｈ）ウイルスよりなる細菌の群から選ばれる。
最後に、もう１つの実施形態はパーツ・キット（ｋｉｔ ｏｆ ｐａｒｔｓ）に関する。該キットは少なくとも２つのワクチンバイアルを含み、これらの少なくとも２つのバイアルは全体として、魚類におけるノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）感染に対抗するためのラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の細菌と医薬上許容される担体とを含む。単なる一例として示すと、該キットが、ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の細菌を全体として含む２つのバイアルを含む場合、これは、これらの４つの種類の細菌のそれぞれが該バイアルの少なくとも１つに存在することを意味する。その結果、それらの４つの種類の細菌は全て、該キット中に存在する。この例では、一方のバイアルがラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）を含み、他方のバイアルがパスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）を含みうるであろう。あるいは、一方のバイアルがラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）およびパスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）を含み、他方のバイアルがビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）を含みうるであろう。該キットが例えば４つのバイアルを含む場合、各種類の細菌が１つのバイアルに存在しうる。
（実施例）
動物の管理：
試験系
動物
種：ブリ（セリオレ・クインクエラジアタ（Ｓｅｒｉｏｌａｅ ｑｕｉｎｑｕｅｒａｄｉａｔａ）
起源：野生捕獲幼魚
実験開始時の平均体重：約２０ｇ
該魚は野生捕獲幼魚であったため、それらはどのようなワクチン接種をも予め受けていなかった。該魚を、それらが該実験のための適切なサイズになるまで、到着直後に隔離タンク内に配置した。
参加−除外基準
健常動物のみを使用した。ワクチン接種後は、病気の動物の治療も動物の除外も行わなかった。
水
・塩度：天然海水２５〜３５ｐｐｔ
・温度：ワクチン接種後は２４℃＋／−２℃、チャレンジ後は２６℃＋／−２℃。
給餌
前処理期間中は、１日数回、任意量の飼料を与えた。十分な数の魚が約２０ｇの所望の体重に達し、感染していないことが示されたら直ちに、それらを実験タンクに移した。実験期間（ワクチン接種後）中は、該魚の体重の２〜４％の飼料を与えた（毎週調節）。体重１ｋｇ当たりの飼料の量は、ワクチン接種魚と模擬ワクチン接種魚とで可能な限り類似するよう維持された。週間隔で、１群当たり１０〜１５匹の魚を群において秤量して、飼料量の再計算のために平均魚体重を決定した。注射による内臓への損傷を予防するために胃腸管が完全に空になることが保証されるよう、ワクチン接種前の２４時間にわたって魚類を絶食させた。チャレンジ後は、体重の１〜４％の飼料を魚に与えた。
タンク
実験開始時に、該魚を群分けし、ワクチン接種または模擬ワクチン接種し、ついで５００Ｌタンクに移した。魚の群を、該タンクを半分に分けるよう該タンクの中央部に垂直に配置された網により分離した。タンクの２分割部分をタンク番号および文字（ＡまたはＢ）により特定した。チャレンジ後、魚を５０Ｌタンク内に収容した。
群分け及び投与
ワクチン接種
魚の側面、すなわち、胸びれのほぼ末端部におけるＩＰ注射により、ワクチン接種を行った。１回使用用の小さな皮下注射針および１回使用用のシリンジを使用した。対照魚にＳＶＤＢ（標準ワクチン希釈バッファー＝ＰＢＳ）で模擬ワクチン接種した。
チャレンジ
チャレンジ物質の調製
野生型ノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）のチャレンジシード（ｃｈａｌｌｅｎｇｅ ｓｅｅｄ）を−５０℃未満の冷凍庫から取り出し、解凍した。バイアルの内容物をユーゴン（Ｅｕｇｏｎ）ブロス内に１％（ｖ／ｖ）の比率で接種し、１５０ＲＰＭに設定された振とう速度の回転振とう機上、２６℃で約６４〜７１時間インキュベートした。培養のＯＤ６６０ｎｍは、典型的には、１０７〜１０８ ＣＦＵ／ｍｌの概算生細胞数に対応する１．５〜１．６であった。チャレンジ懸濁液を調製するために、後期対数期に相当するこの懸濁液を使用した。１．５％食塩水を使用して３〜５×１０７の最終ｃｆｕ／ｍｌまで該培養の希釈を行うことにより、チャレンジ懸濁液を調製した。適当な希釈を食塩水中で行い、注射に使用した。
チャレンジ
チャレンジをＩＰ注射により行った。実験群からの魚に０．１ｍｌの標準化細菌懸濁液を注射した。各群を、鎮静するまでＡＱＵＩ−Ｓで麻酔し、胸びれの先端のちょうど裏側の身体の左側面に腹腔内注射した。注射直後に、該魚をそれらの割り当てられたタンクに移し、回復を見守った。胃腸管が完全に空になることが保証されるよう、該魚をチャレンジ前の２４時間にわたり絶食させた。
結果の評価
該ワクチン製剤のそれぞれに関して行ったチャレンジの結果を、対照の致死率が６０％以上に達した日に対照群との比較において各群ごとに相対生存率（ＲＰＳ）値を計算することにより評価した。
また、２×２分割表およびフィッシャー正確確率検定（片側、Ｓｔａｔ Ｓｏｆｔ Ｉｎｃ（２００４），Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａ，ｄａｔａ ａｎａｌｙｓｉｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ ｓｙｓｔｅｍ，ｖｅｒｓｉｏｎ ６）を用いて、処理群とそれぞれの対照群との間の最終確認累積致死率に関して統計分析を行った。
以下の式に従い、ＲＰＳ値を計算した。
Figure 0005175940
本実施例における抗原濃度は、しばしば、ＯＤＵ／ｍｌで表されている。ＯＤＵ／ｍｌは以下のとおりに決定される：抗原濃度（ＯＤＵ／ｍｌ）＝（（（ＯＤ６６０）．１＋（ＯＤ６６０）．２）／２）−０．２１１８）／０．００１８＊ＤＦ＊１０６（ここで、（ＯＤ６６０）．１＋（ＯＤ６６０）．２は２回のＯＤ６６０測定のＯＤ６６０値であり、ＤＦは希釈因子である）。
ここに記載されている全ての単価ワクチンはホルマリン不活化ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）抗原に由来し、油アジュバント化ワクチンとして製剤化されたものである。０．０５の注射容量を用いて、ワクチンＶ１およびＶ２を注射した。０．１ｍｌの注射およびワクチン希釈剤と等容量のワクチンを混合した後、ワクチンＶ３、Ｖ４およびＶ５を注射した。
試験品
ワクチン１： 種類：単価ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）／油アジュバント化
製剤 １．０×１０７ ＯＤＵ／ｍｌ（５．０×１０５ ＯＤＵ／魚）
ワクチン２： 種類：単価ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）／油アジュバント化
製剤 １．０×１０６ ＯＤＵ／ｍｌ（５．０×１０４ ＯＤＵ／魚）
ワクチン３： 種類：単価ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）／油アジュバント化
製剤 １．０×１０７ ＯＤＵ／ｍｌ（５．０×１０５ ＯＤＵ／魚）
ワクチン４： 種類：単価ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）／油アジュバント化
製剤 １．０×１０６ ＯＤＵ／ｍｌ（５．０×１０５ ＯＤＵ／魚）
ワクチン５： 種類：単価ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）／油アジュバント化
製剤 １．０×１０５ ＯＤＵ／ｍｌ（５．０×１０３ ＯＤＵ／魚）
ワクチン希釈剤
種類：油中の標準ワクチン希釈バッファー
ＳＶＤＢ
種類：標準ワクチン希釈バッファー（ＳＶＤＢ）
処理群、第３週および第６週に行ったチャレンジのための魚の個体数
Figure 0005175940
結果：ＲＰＳ値
最小抗原試験における種々のワクチン条件での第３週および第６週のチャレンジのＲＰＳ６０値
Figure 0005175940
該条件はいずれも、対照と有意には異ならなかった（片側フィッシャー正確確率検定，ｐ＜０．０５）。この表によれば、この実施例において使用した単価ノカルジアワクチンはノカルジア攻撃に対して有意な防御をもたらさない。
動物の管理：
試験系
動物
実施例１と同様。
参加−除外基準
実施例１と同様。
水
実施例１と同様。
給餌
実施例１と同様。
タンク
実施例１と同様。
群分け及び投与
ワクチン接種
実施例１と同様。
チャレンジ
チャレンジ物質の調製
実施例１と同様。
チャレンジ
実施例１と同様。
結果の評価
実施例１と同様。
試験品：
ワクチン１：
種類：４価ビブリオ・アンギララム（Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）／ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌ．ｇａｒｖｉａｅ）６．８×１０８ 細胞／ｍｌ、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）１．３６×１０９ 細胞／ｍｌ、ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）（１．０×１０７ ＯＤＵ／ｍｌ）／油アジュバント化。全ての細菌はホルマリン不活化体であった。
注射：０．０５ｍｌ
ワクチン２：
種類：４価ビブリオ・アンギララム（Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）／ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌ．ｇａｒｖｉａｅ）６．８×１０８ 細胞／ｍｌ、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）１．３６×１０９ 細胞／ｍｌ、ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）（１．０×１０６ ＯＤＵ／ｍｌ）／油アジュバント化。全ての細菌はホルマリン不活化体であった。
注射：０．０５ｍｌ
Figure 0005175940
 結果：ＲＰＳ値
Ｎｓチャレンジ後のＲＰＳ。（ｎ＝１０〜１５）。＊＊はワクチンと対照との間の統計的差を示す（片側フィッシャー正確確率検定，ｐ＜０．０５）。
Figure 0005175940
この表によれば、ビブリオ・アンギララム（Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）／ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌ．ｇａｒｖｉａｅ）／パスツレラ・ピスシシダ（Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）ワクチンと組合された実施例１のノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）ワクチンを含む混合ワクチンはノカルジアチャレンジに対する驚くほど高いレベルの防御をもたらす。
動物の管理：
試験系
動物
実施例１と同様。
参加−除外基準
実施例１と同様。
水
実施例１と同様。
給餌
実施例１と同様。
タンク
実施例１と同様。
群分け及び投与
ワクチン接種
実施例１と同様。
チャレンジ
チャレンジ物質の調製
実施例１と同様。
チャレンジ
実施例１と同様。
結果の評価
実施例１と同様。
試験品：
ワクチン：
種類：４価ビブリオ・アンギララム（Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）／ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌ．ｇａｒｖｉａｅ）６．８×１０８ 細胞／ｍｌ、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）１．３６×１０９ 細胞／ｍｌ、ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）（１．０×１０７ ＯＤＵ／ｍｌ）／油アジュバント化。全ての細菌はホルマリン不活化体であった。
注射：０．１ｍｌ（混合後）＊
ＳＶＤＢ−油希釈剤
種類：ＳＥＰＰＩＣ Ｆｒａｎｃｅから入手されたＩＳＡ ７６３Ａ ＶＧ油中の標準ワクチン希釈バッファー
ＳＶＤＢ
種類：ＰＢＳバッファー：標準ワクチン希釈バッファー（ＳＶＤＢ）
＊ 該ワクチンは、等容量のワクチンをＳＶＤＢ−油希釈剤と混合することにより製造した。
Figure 0005175940
結果：ＲＰＳ値
Ｎｓチャレンジ後のＲＰＳ。（ｎ＝２０）。＊はワクチンと対照との間の統計的差を示す（片側フィッシャー正確確率検定，ｐ＜０．０５）。
Figure 0005175940
この表によれば、ビブリオ・アンギララム（Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）／ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌ．ｇａｒｖｉａｅ）／パスツレラ・ピスシシダ（Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）ワクチンと組合された実施例１のＶ１またはＶ３によるノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）ワクチンを含む混合ワクチンはノカルジアチャレンジに対する驚くほど高いレベルの防御をもたらす。この実験は実施例２の結果を証明している。
動物の管理：
試験系
動物
実施例１と同様。
参加−除外基準
実施例１と同様。
水
実施例１と同様。
給餌
実施例１と同様。
タンク
実施例１と同様。
群分け及び投与
ワクチン接種
実施例１と同様。
チャレンジ
チャレンジ物質の調製
実施例１と同様。
チャレンジ
実施例１と同様。
結果の評価
実施例１と同様。
試験品：
ワクチン：
種類：４価ビブリオ・アンギララム（Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）／ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌ．ｇａｒｖｉａｅ）６．８×１０８ 細胞／ｍｌ、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）１．３６×１０９ 細胞／ｍｌ、ノカルジア・セリオレ（Ｎ．ｓｅｒｉｏｌａｅ）（１．０×１０６ ＯＤＵ／ｍｌ）／油アジュバント化。全ての細菌はホルマリン不活化体であった。
注射：０．１ｍｌ（混合後）＊
ＳＶＤＢ−油希釈剤
種類：油中の標準ワクチン希釈バッファー
ＳＶＤＢ
種類：標準ワクチン希釈バッファー（ＳＶＤＢ）
＊ 該ワクチンは、等容量のワクチンをＳＶＤＢ−油希釈剤と混合することにより製造した。
Figure 0005175940
結果：ＲＰＳ値
Ｎｓチャレンジ後のＲＰＳ。（ｎ＝１５）。＊はワクチンと対照との間の統計的差を示す（片側フィッシャー正確確率検定，ｐ＜０．０５）。
Figure 0005175940
この表によれば、ビブリオ・アンギララム（Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）／ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌ．ｇａｒｖｉａｅ）／パスツレラ・ピスシシダ（Ｐ．ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）ワクチンと組合された、比較的低い用量の実施例１のＶ２またはＶ４によるノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）ワクチンを含む混合ワクチンでさえも、ノカルジアチャレンジに対する驚くほど高いレベルの防御をもたらす。この実験は実施例２の結果を証明している。

Claims (13)

  1. ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の不活化された細菌と医薬上許容される担体とを含むことを特徴とする、魚類におけるノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）感染に対抗するための混合ワクチン。
  2. アジュバントを含むことを特徴とする、請求項１記載の混合ワクチン。
  3. 該アジュバントが油アジュバントであることを特徴とする、請求項２記載の混合ワクチン。
  4. 該アジュバントが非鉱油アジュバントであることを特徴とする、請求項３記載の混合ワクチン。
  5. 該アジュバントがＩＳＡ ７６３Ａ ＶＧであることを特徴とする、請求項２〜４のいずれか１項記載の混合ワクチン。
  6. 魚類に病原性である少なくとも１つの他の微生物またはウイルス、あるいはそのような微生物もしくはウイルスの他の抗原の１つ又はそのような他の抗原をコードする遺伝物質を含むことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項記載の混合ワクチン。
  7. 前記の少なくとも１つの他の微生物またはウイルスが、ビッグ・ベリー（Ｂｉｇ Ｂｅｌｌｙ）症候群を引き起こす細菌、テナシバクラム・マリチマム（Ｔｅｎａｃｉｂａｃｕｌｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フラボバクテリウム・コルムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）、ストレプトコッカス・イニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディフィシレ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ）、エドワージエラ・タルダ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｔａｒｄａ）、エドワージエラ・イクタルリ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｉｃｔａｌｕｒｉ）、マイコバクテリウム・マリチマム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フランシセラ属種（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｓｐ．）、ノダウイルス、イリドウイルス、コイヘルペスウイルスおよびチャネルキャトフィシュ（ｃｈａｎｎｅｌ ｃａｔｆｉｓｈ）ウイルスよりなる群から選ばれることを特徴とする、請求項６記載の混合ワクチン。
  8. ラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の細菌を医薬上許容される担体と混合する工程を含んでなることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項記載の混合ワクチンの製造方法。
  9. 魚類におけるノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）感染に対抗するための不活化混合ワクチンの製造のための、少なくともラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の細菌の使用。
  10. 該魚類が、ブリ（セリオレ・クインクエラジアタ（Ｓｅｒｉｏｌａｅ ｑｕｉｎｑｕｅｒａｄｉａｔａ）、アンバージャック（セリオレ・デュメレルリ（Ｓｅｒｉｏｌａｅ ｄｕｍｅｒｅｌｌｉ））、シーバス（ｓｅａ ｂａｓｓ）（ラテオラブラクス・ジャポニクス（Ｌａｔｅｏｌａｂｒａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ））、イエロークローカー（ｙｅｌｌｏｗ ｃｒｏａｃｋｅｒ）（ラミチクチス・クロセア（Ｌａｍｉｔｉｃｈｔｈｙｓ ｃｒｏｃｅａ））、シマガツオ（Ｐｏｍｆｒｅｔ）（パムプス・アーゲンテウス（Ｐａｍｐｕｓ ａｒｇｅｎｔｅｕｓ））、ツバメコノシロ（エリューセロネマ・テトラダクチルム（Ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｎｅｍａ ｔｅｔｒａｄａｃｔｙｌｕｍ））、フエダイ（ｓｎａｐｐｅｒ）（ルトジャヌス（Ｌｕｔｊａｎｕｓ）属種）、ハタ（ｇｒｏｕｐｅｒ）（エピネフェルス（Ｅｐｉｎｅｐｈｅｌｕｓ）属種）およびカイワリ（ｔｒｅｖａｌｌｉ）（カランクス・セクスファシアツス（Ｃａｒａｎｘ ｓｅｘｆａｓｃｉａｔｕｓ））種に属することを特徴とする、請求項９記載の使用。
  11. 該ワクチンの製造のために、さらに、魚類に病原性である少なくとも１つの他の微生物またはウイルス、あるいはそのような微生物もしくはウイルスの他の抗原の１つ又はそのような他の抗原をコードする遺伝物質を使用することを特徴とする、請求項９又は１０記載の使用。
  12. 前記の他の微生物またはウイルスが、ビッグ・ベリー（Ｂｉｇ Ｂｅｌｌｙ）症候群を引き起こす細菌、テナシバクラム・マリチマム（Ｔｅｎａｃｉｂａｃｕｌｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フラボバクテリウム・コルムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）、ストレプトコッカス・イニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディフィシレ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ）、エドワージエラ・タルダ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｔａｒｄａ）、エドワージエラ・イクタルリ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ ｉｃｔａｌｕｒｉ）、マイコバクテリウム・マリチマム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、フランシセラ属種（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｓｐ．）、ノダウイルス、イリドウイルス、コイヘルペスウイルスおよびチャネルキャトフィシュ（ｃｈａｎｎｅｌ ｃａｔｆｉｓｈ）ウイルスよりなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１１記載の使用。
  13. 少なくとも２つのワクチンバイアルを含んでなるパーツ・キットであって、該バイアルが全体として、魚類におけるノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）感染に対抗するためのラクトコッカス・ガルビエ（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｒｖｉａｅ）、パスツレラ・ピスシシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｐｉｓｃｉｃｉｄａ）、ビブリオ・アンギララム（Ｖｉｂｒｉｏ ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）およびノカルジア・セリオレ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｅｒｉｏｌａｅ）種の不活化された細菌と医薬上許容される担体とを含むことを特徴とする、パーツ・キット。
JP2010531535A 2007-11-02 2008-10-31 魚類ワクチン Expired - Fee Related JP5175940B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP07119868 2007-11-02
EP07119868.3 2007-11-02
PCT/EP2008/064805 WO2009056629A1 (en) 2007-11-02 2008-10-31 Fish vaccine

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2011502972A JP2011502972A (ja) 2011-01-27
JP5175940B2 true JP5175940B2 (ja) 2013-04-03

Family

ID=39769302

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2010531535A Expired - Fee Related JP5175940B2 (ja) 2007-11-02 2008-10-31 魚類ワクチン

Country Status (5)

Country Link
JP (1) JP5175940B2 (ja)
CN (1) CN101868248A (ja)
AU (1) AU2008320818A1 (ja)
CL (1) CL2008003262A1 (ja)
WO (1) WO2009056629A1 (ja)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011073990A (ja) * 2009-09-29 2011-04-14 Meiji Seika Kaisha Ltd 海産魚のノカルジア症に対するｄｎａワクチン及びｂｃｇワクチン
CN102166350B (zh) * 2011-04-13 2012-11-21 中国水产科学研究院黄海水产研究所 鲆鲽鱼类五联灭活疫苗及其制备方法
CN103495159B (zh) * 2013-09-17 2016-07-06 中国科学院水生生物研究所 柱状黄杆菌基因重组疫苗的制备方法
IL230970A0 (en) * 2014-02-13 2014-09-30 Univ Ramot Tilapia virus vaccines
CN104232535B (zh) * 2014-09-02 2017-04-26 广东海洋大学 鰤鱼诺卡氏菌诱变弱毒株及其应用
CN106754488A (zh) * 2016-11-30 2017-05-31 广西南宁市武鸣明山红农业科技开发有限公司 一种海豚链球菌病生物制剂及其制备方法与应用
CN107602685B (zh) * 2017-11-03 2020-09-15 宁波大学 一种从银鲳中分离的具有抗菌性能的多肽
CN109880766B (zh) * 2019-03-18 2021-05-07 宁波大学 一种银鲳美人鱼发光杆菌菌株及灭活疫苗
CN110250047B (zh) * 2019-06-14 2021-12-17 中国水产科学研究院南海水产研究所 一种工厂化养殖四指马鲅的方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001342141A (ja) * 2000-03-29 2001-12-11 Gotoo Yoshoku Kenkyusho:Kk 水棲動物・陸棲動物用薬剤及び飼料
JP2001342140A (ja) * 2000-03-29 2001-12-11 Gotoo Yoshoku Kenkyusho:Kk 魚類・甲殻類用薬剤及び飼料
JP3950924B2 (ja) * 2002-04-18 2007-08-01 株式会社三重ティーエルオー 水棲動物に対する有用物質含有リポソームの作製法と投与法
TWI347364B (en) * 2003-02-19 2011-08-21 Novartis Ag Inactivated nodavirus vaccine
WO2005053716A1 (en) * 2003-12-03 2005-06-16 Akzo Nobel N.V. Streptococcus phocae vaccine
JP4720282B2 (ja) * 2005-05-06 2011-07-13 株式会社微生物化学研究所 魚類用ワクチン

Also Published As

Publication number Publication date
AU2008320818A1 (en) 2009-05-07
CN101868248A (zh) 2010-10-20
CL2008003262A1 (es) 2009-06-26
JP2011502972A (ja) 2011-01-27
WO2009056629A1 (en) 2009-05-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5175940B2 (ja) 魚類ワクチン
Curtiss III et al. Live oral avirulent Salmonella vaccines
Shoemaker et al. Immunization of eyed channel catfish, Ictalurus punctatus, eggs with monovalent Flavobacterium columnare vaccine and bivalent F. columnare and Edwardsiella ictaluri vaccine
US7939088B2 (en) Streptococcus phocae vaccine
DK179542B1 (en) Fish vaccine
WO2007138036A1 (en) Vaccine against rickettsia-like organisms
JP2011506577A (ja) 魚類ワクチン
JP4720282B2 (ja) 魚類用ワクチン
Suwannasang et al. Growth, immune responses and protection of Nile tilapia Oreochromis niloticus immunized with formalin-killed Streptococcus agalactiae serotype Ia and III vaccines.
MX2008016248A (es) Vacuna combinada estreptococica.
EP2912198B1 (en) Immunogenic composition against aeromonas hydrophila
JP4905649B2 (ja) 魚用ワクチン、その製造方法、および魚類感染症の予防方法
WO2008074783A1 (en) Immune stimulant against fish pathogenic bacteria
JP4309601B2 (ja) 魚類用のイリドウイルス感染症，連鎖球菌感染症，及びこれ等の合併症に対する混合不活化ワクチン
TWI495478B (zh) 鏈球菌組合疫苗
CN110840841B (zh) 一种大菱鲆油乳化疫苗及其应用
JP4895711B2 (ja) 魚類用のイリドウイルス感染症，連鎖球菌感染症，及びこれ等の合併症に対する混合不活化ワクチン
CN101454021A (zh) 抗类立克次氏体的疫苗
CN118141909A (zh) 一种双佐剂红鳍东方鲀来源哈维氏弧菌灭活疫苗及应用

Legal Events

Date Code Title Description
A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20120821

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20121120

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20121218

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20130107

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees