JP5053624B2 - 歯質強化剤及びその製造方法 - Google Patents

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Description

本発明は、歯質強化剤及びその製造方法に関する。
一般に、齲蝕は、ストレプトコッカス・ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ）やストレプトコッカス・ソブリナス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｏｂｒｉｎｕｓ）等の口腔内レンサ球菌（虫歯菌）が歯牙表面に付着し、これらの細菌が持っているグルコシルトランスフェラーゼ酵素の働きでグルカンを産生し、プラーク（歯垢）を形成することから始まる。そのプラーク中で、上記細菌が食物残渣中の砂糖やデンプン等を代謝することにより生成される酸が、歯牙エナメル質を脱灰し、いわゆる初期の齲蝕状態とする。
唾液にはカルシウムとりん酸塩が存在し、これらが、上記脱灰部分を修復すなわち再石灰化することによって、歯を元の状態に戻す作用をしている。つまり、歯牙表面では、脱灰と再石灰化という相反する現象が常に生起し、通常は所要のバランスを保っている。しかし、そのバランスはプラークが増大すると脱灰の方に傾き、齲蝕が進行する。
歯牙表面のエナメル質を構成する結晶は、六方晶系のハイドロキシアパタイトＣａ１０（ＰＯ４）６ＯＨ２で、りん酸カルシウムから構成されている。初期の齲蝕で認められる脱灰は歯牙エナメル質無機成分の溶解であり、再石灰化は溶け残った既存のりん酸カルシウム結晶の修復と再成長および本来のエナメル質には存在していない結晶の出現であるということができる。齲蝕予防とは、虫歯菌に対する付着阻害、抗菌、あるいはまた虫歯菌のグルカン合成に関わるグルコシルトランスフェラーゼに対する阻害、歯の再石灰化促進、歯の耐酸性向上等をいい、その中でも特に歯の再石灰化促進、耐酸性向上等の効果を付与することを歯質強化という。
また、象牙質の知覚過敏症は酸等が露出した象牙質から石灰分を溶出せしめることで象牙細管が開口し、そこに入り込んだ液体が熱や物理的な力などを受け、歯随の神経を刺激し痛みを感じるものである。従って、治療及び予防のためには象牙細管を閉塞もしくは象牙質の耐酸性を向上させる必要がある。根面う蝕の予防および治療においても、セメント質ならびに象牙質の耐酸性を向上させる必要がある。
従来、齲蝕予防のために、虫歯菌に対する歯牙付着阻害剤、抗菌剤、あるいはまた、虫歯菌のグルカン形成を抑制するグルコシルトランスフェラーゼ酵素阻害剤等が開発されている。しかし、たとえば抗菌剤は虫歯菌のみに抗菌作用を示す特異的な素材ではなく、安全性に問題があり、グルコシルトランスフェラーゼ酵素阻害剤は唾液による影響を受けやすいという問題がある。
また、歯牙の無機成分と類似の結晶構造を有するハイドロキシアパタイトとフッ化物を配合し、歯脱灰表層部を再石灰化する虫歯予防組成物が知られているが（例えば、特許文献１参照）、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウムまたはフッ化第一スズ等のフッ化物を口腔用組成物や飲食物に配合することは、安全性の点から問題がある。
さらに、ハイドロキシアパタイトの微粒子とキシリトールを組み合せ使用することによって、脱灰した歯牙エナメル質を再石灰化することが知られているが（例えば、特許文献２参照）、工業的に製造されたハイドロキシアパタイトは、化学的に安定な化合物で反応性に乏しく、厳密には生体における歯牙を構成するハイドロキシアパタイトとはその結晶構造が異なるため、再石灰化の効果が十分でない。
なお、食品等への使用を考慮すると天然物由来の組成物を齲蝕予防組成物として用いることが適当であると考えられ、この条件に合うものを探してみると例えば茶抽出物がある。しかし、単なる茶抽出物では、従来、抗菌やグルコシルトランスフェラーゼ阻害等の齲蝕予防効果は知られているが、再石灰化促進や耐酸性向上等といった歯質強化効果は全く知られていない。また、茶抽出物からポリフェノール類を除去することにより、歯質強化にとってプラスに働くミネラルの比率を相対的に高めた歯質強化剤が知られているが（例えば、特許文献３参照）、この歯質強化剤は、天然物由来ではあるが、安全性、効果の面で十分とは言えないものである。
また、象牙質の知覚過敏症の治療に用いられてきた薬剤としては、フッ化ジアミン銀、硝酸銀、塩化ストロンチウム、フッ化第一スズ、フッ化ナトリウム、フッ化アルミニウム、乳酸アルミニウム、塩化亜鉛、水酸化カルシウム、パラホルムアルデヒド、ホルムアルデヒドなどの化合物がある。これらのうち、銀化合物は、象牙細管の閉塞性には優れるものの、著しい着色性を有し、一般的な使用には適していないという欠点を有している。また、それ以外の化合物についても、未だ充分な効果が得られているとはいえない。
一方、石化海藻については、免疫調節の不全に起因する体の異常を治療する効果や、固形又は半固形食品において官能特性や物理特性を向上させる効果、整腸効果等が知られている（例えば、特許文献４、５、６参照）。また、石化海藻には、高濃度にフッ素化合物が含まれていることが知られているが（例えば、特許文献７参照）、物理的方法による処理では、フッ素がほとんど作用せず、実際に歯質強化剤として使用することが出来ない。
特公平２−３１０４９号公報 特開平９−１７５９６３号公報 特開２００５−２９４９６号公報 特表２００２−５１１０５６号公報 特表２００２−５２８１０４号公報 特開２００５−４７８２０号公報 特開２００６−１６３５４号公報
上記に鑑み、本発明は、口腔用組成物や飲食物に使用しても安全性において問題がなく、しかも、脱灰した歯牙エナメル質の再石灰化を効果的に促進するとともに、歯の耐酸性を向上することができる歯質強化剤及びその製造方法の提供を目的とするものである。
本発明者は、鋭意研究を重ねた結果、フッ素化合物を高濃度に含む石化海藻と酸を有効成分とする歯質強化剤が上記目的を達成するとの知見を得て本発明を完成した。
すなわち、本発明の歯質強化剤は、石化海藻と酸を有効成分とするもの、あるいはまた、石化海藻と酸とキシリトールを有効成分とするものである。本発明の歯質強化剤は、石化海藻と酸が入っていれば良く、あらかじめ石化海藻と酸を混合処理して配合しても良い。
また、本発明の歯質強化用の口腔用組成物は、石化海藻と酸を配合するもの、あるいはまた、石化海藻と酸を混合処理したものを配合するもの、あるいはさらにキシリトールを配合するものである。
さらに、本発明の歯質強化用の飲食物は、石化海藻と酸を配合するもの、あるいはまた、石化海藻と酸を混合処理したものを配合するもの、あるいはさらにキシリトールを配合するものである。
また、本発明の歯質強化剤の製造方法は、石化海藻と酸を含有させる、もしくはあらかじめ石化海藻と酸を混合した処理物を混合するもの、あるいはさらにキシリトールを添加する方法である。
さらに、本発明の口腔用組成物の製造方法は、歯質強化剤として石化海藻と酸を各別に配合させる、あるいはまた、歯質強化剤として石化海藻と酸を混合処理したものを配合する、あるいはそれらの歯質強化剤にさらにキシリトールを配合する方法である。
本発明の石化海藻と酸を有効成分とする歯質強化剤およびその製造方法であれば、従来のフッ素を含有するカルシウム剤に比して歯質の耐酸性促進及び再石化促進という二つの優れた効果を有する歯質強化剤を提供することができ、安全性においても問題がない。
また、石化海藻と酸、さらにキシリトールを有効成分とする歯質強化剤およびその製造方法であれば、特に優れた歯質強化剤を提供することができる。
さらに、本発明の歯質強化剤およびその製造方法は、歯牙エナメル質の耐酸性を向上させることのみならず、象牙質の耐酸性をも向上させることができるので、それによって齲蝕を積極的に抑制し、象牙質知覚過敏症をも予防、治療することができる。
本発明で使用する石化海藻とは、海藻が海中のカルシウムやマグネシウム等のミネラル成分を吸着して得られるものであり、好ましくは紅藻類、より好ましくはサンゴモ科海藻の石灰質残渣である。
例えば、Ｌｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓ、Ｐｈｙｍａｔｏｌｉｔｈｏｎ ｃａｌｃａｒｅｕｍ及びＬｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｇｌａｃｉａｌｅ種等の、サンゴモ科の仲間を含む紅藻類の石灰質残渣が挙げられる。
サンゴモの一種であるＬｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓ（Ｌｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃａｌｃａｌｅｕｍ、Ｐｈｙｍａｔｏｌｉｔｈｏｎ ｃａｌｃａｒｅｕｍともいう）は冷たく穏やかな海に非常に豊富にある海藻であり、このサンゴモが枯れた後に残る石灰質残渣は、９０重量％以上が無機質であり、主に炭酸カルシウム及び炭酸マグネシウムからなる。
上記した石化海藻は、海底より浚渫された状態でも使用できるが、砂、貝殻等が含まれているので、これらの一部又は全部が、海水及び／又は真水での洗浄、篩別、手作業による選別等の方法によって除去されていることが好ましく、更に、過酸化水素水処理や加熱処理等で殺菌し、乾燥したものは、飲食品用途として、細菌等の食品衛生規制に適合するため、より好ましい。なお、アクアミネラル（日本バイオコン株式会社製）、ＡＱＵＡＭＩＮ（ＭＡＲＩＧＯＴ ＬＴＤ．製）等、市販の飲食品用石化海藻粉末も使用できる。
本発明で用いられる酸は、無機の強酸である塩酸や硫酸等、食品等への適用が認可されている酸味料等、酸味を呈するものであればよい。具体的には、アスコルビン酸、ソルビン酸、安息香酸、アジピン酸、クエン酸（結晶）（無水）、クエン酸三ナトリウム、グルコノデルタラクトン、グルコン酸、コハク酸、コハク酸一ナトリウム、コハク酸二ナトリウム、酢酸ナトリウム（結晶）（無水）、ＤＬ−酒石酸、Ｌ−酒石酸、ＤＬ−酒石酸ナトリウム、Ｌ−酒石酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム、二酸化炭素、酢酸、フマル酸、フマル酸一ナトリウム、ＤＬ−リンゴ酸、ＤＬ−リンゴ酸ナトリウム、リン酸、イタコン酸、α−ケトグルタル酸、フィチン酸、ピロリン酸二水素二ナトリウム、酸性メタリン酸ナトリウムの他、食酢や果汁等が挙げられる。これらのものを１種類もしくは２種類以上用いて使用しても良い。
本発明の歯質強化剤における石化海藻と酸との割合は、本発明の効果が得られれば適宜選択しそれらの割合を決定することができるが、好ましくは石化海藻１重量部に対して０．１〜１０重量部、更に好ましくは、０．３〜３重量部である。この範囲であれば、石化海藻中のフッ素の溶出性の向上が認められる。
上述した本発明の歯質強化剤は、上記した石化海藻と酸を、もしくはあらかじめ石化海藻と酸を混合した溶液、石化海藻と酸を混合した溶液を乾燥させた処理物を適当な液体担体に溶解するか若しくは分散させ、あるいは、適当な粉末担体と混合するか若しくはこれに吸着させ、場合によっては、乳化剤，分散剤，懸濁剤，展着剤，浸透剤，湿潤剤又は安定剤等を添加し、乳剤，水和剤，粉剤又は錠剤等に製剤化して使用に供することも可能である。
さらに、本発明の歯質強化剤は、石化海藻と酸を、もしくはあらかじめ石化海藻と酸を混合した処理物を使用しても、歯の耐酸性と再石灰化を促進することで歯質を十分に強化することができるが、さらにキシリトールを配合することにより、耐酸性と再石灰化を著しく促進させることができる。キシリトールの使用量としては、本発明の効果が得られれば適宜選択しその割合を決定することができるが、好ましくは石化海藻１重量部に対して1〜１００重量部、更に好ましくは、１０〜５０重量部である。
本発明においてあらかじめ石化海藻と酸を混合処理する方法としては、例えば、石化海藻と酸の粉末同士を混合しても、石化海藻と酸の粉末を水等の溶媒に溶解させて混合しても良い。もしくは、例えば、石化海藻を液状の酸や酸水溶液に溶解させて混合しても良い。また、石化海藻と酸を混合した石化海藻溶液を乾燥させた処理物を調製しても良く、石化海藻と酸との混合処理は、いずれの方法で行っても良い。
石化海藻と酸を混合することにより、石化海藻中のフッ素の溶出性を向上させ、石化海藻中のミネラル成分も相乗的に作用し、歯の耐酸性と再石灰化を促進することで歯質を強化することができる。
さらに、石化海藻と酸を有効成分とする歯質強化剤にキシリトールを併用することにより、歯の脱灰層深層からの再石灰化を促し、耐酸性と再石灰化を著しく促進させることができる。
歯質強化剤として石化海藻と酸、または石化海藻と酸を混合処理したもの、あるいはさらにそれらにキシリトールを含有する歯質強化用の口腔用組成物としては、練り歯磨，粉歯磨又は液状歯磨き等の歯磨類、洗口剤、歯肉マッサージクリーム、うがい用錠剤又はトローチ等があげられる。
また、歯質強化剤として石化海藻と酸、または石化海藻と酸を混合処理したもの、あるいはさらにそれらにキシリトールを含有する歯質強化用飲食物としては、チューインガム，キャンディ，錠菓，グミゼリー，チョコレート，ビスケット又はスナック等の菓子、アイスクリーム，シャーベット又は氷菓等の冷菓、飲料、パン、ホットケーキ、乳製品、ハム，ソーセージ等の畜肉製品類、カマボコ，チクワ等の魚肉製品、惣菜類、プリン、スープ又はジャム等が挙げられるが、口腔内に長く滞留することから本発明の効果が強く認められるチューインガム、キャンディ、錠菓が好ましい。
口腔用組成物への石化海藻の添加量としては、好ましくは０．１〜２０．０重量％、さらに好ましくは０．５〜１５重量％が好適である。酸の添加量としては、石化海藻1重量部に対し、好ましくは０．１〜１０重量部、さらに好ましくは０．３〜３重量部が好適である。また、石化海藻と併用するキシリトールの添加量は、利用する口腔用組成物種類や形態等により一概に決めることは困難であるが、好ましくは１〜９５重量％、さらに好ましくは１０〜７０重量％である。
飲食物への石化海藻の添加量としては、好ましくは０．１〜６．０重量％、さらに好ましくは０．５〜３重量％が好適である。酸の添加量としては、石化海藻１重量部に対し、好ましくは０．１〜１０重量部、さらに好ましくは０．３〜３重量部が好適である。また、石化海藻と併用するキシリトールの添加量は、利用する飲食物の種類や形態等により一概に決めることは困難であるが、好ましくは１〜９５重量％、さらに好ましくは１０〜７０重量％である。
上述した本発明の口腔用組成物及び飲食物において、歯質強化剤を添加せしめる方法としては、石化海藻と酸を各別に、または石化海藻と酸をあらかじめ混合処理したものを口腔用組成物あるいは飲食物に添加してもよく、さらには製造過程のいかなる時に添加し、また、残余の原料と混合してもよい。なお、石化海藻と酸とキシリトールを併用する場合には、これらを予め混合して、当該口腔用組成物あるいは飲食物に添加してもよいし、各別に添加してもよい。
以下に本発明実施例について説明するが、本発明の範囲がこれらによって限定されるものではない。
〔実施例１〕 酸添加による石化海藻からのフッ素溶出性
石化海藻中のフッ素量をアリザリンコンプレキソン吸光光度法によって調べたところ、１０１４ｐｐｍであった。石化海藻０．１％水溶液を調製し、クエン酸を添加後、フッ素イオン電極（オリオン社）を用い、フッ素イオン濃度を測定した。（溶液フッ素濃度）／（石化海藻中のフッ素量ｘ０．1／１００）ｘ１００を可溶化率（％）とした。
Figure 0005053624
その結果、石化海藻は酸の添加により、溶液中へのフッ素の溶出性が約８倍向上した。
〔実施例２〕 石化海藻と酸との混合処理物のフッ素溶出性
石化海藻１０ｇを１リットルの水に懸濁した溶液に、オートマチックタイトレーター（ＫＹＯＴＯ ＥＬＥＣＴＲＯＮＩＣＳ社製）を用い、ｐＨを７．０に設定し、１規定の塩酸を約１７０ミリリットル加え石化海藻を溶解した。石化海藻溶解液を濾過し、ろ液を凍結乾燥し、あらかじめ石化海藻と酸を混合した処理物（酸可溶化石化海藻）を得た。
石化海藻および、酸可溶化石化海藻中のフッ素量をアリザリンコンプレキソン吸光光度法によって調べたところ、石化海藻中のフッ素量が１０１４ｐｐｍ、酸可溶化石化海藻中のフッ素量が９２０ｐｐｍであった。これら０．５％水溶液を調製し、フッ素イオン電極（オリオン社）を用い、フッ素イオン濃度を測定した。（溶液フッ素濃度）／（粉体フッ素含量ｘ０．５／１００）ｘ１００を可溶化率（％）とした。
Figure 0005053624
以上より、石化海藻の酸処理により、水へのフッ素溶出性が約８倍向上した。
〔実施例３〕 再石灰化効果確認試験
実施例２で調製した酸可溶化石化海藻を使用した。
対照フッ素剤として、フッ化ナトリウム（和光純薬）、蛍石（フッ化カルシウム）（和光純薬）を使用した。
歯科学報Ｖｏｌ．８９，Ｎｏ．９，１４４１〜１４５５（１９８９）．に記載されているヒト抜去歯を用いる再石灰化促進効果確認試験による方法を参考に次のとおり行った。ヒト抜去歯エナメル質ブロックの表面を、３×４ｍｍの窓を残して、全体をスティッキーワックスで被覆し、これを、５０℃に加温した０．０１Ｍ酢酸・酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．０）に２日間浸漬し、脱灰層を形成させた。その後、窓の半分をワックスで被覆し試験用歯牙エナメル質ブロックを調製した。
再石灰化処理は、１ｍＭ ＣａＣｌ２、０．６ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、１００ｍＭ ＮａＣｌを含み、５０ｍＭ ＫＯＨ溶液で、ｐＨ７．３に調製した再石灰化溶液（１）とその再石灰化溶液を用いて次の８種類の再石灰化溶液（２〜９）を用意し、それを３７℃とし、かつ、その各々に試験用歯牙エナメル質ブロック各１個を２週間浸漬した。ただし、各再石灰化溶液は２日置きに新しい溶液に交換した。
１：再石灰化溶液
２：石化海藻を０．１重量％含んだ再石灰化溶液
３：キシリトールを５重量％含んだ再石灰化溶液
４：フッ化ナトリウムをフッ素として１.０ｐｐｍ含んだ再石灰化溶液
５：フッ化カルシウムに塩酸を加え溶解し、溶解液をフッ素として１．０ｐｐｍとなるように添加した再石灰化溶液
６：本発明の歯質強化剤として、石化海藻を０．１重量％とクエン酸を０．１重量％含んだ再石灰化溶液
７：本発明の歯質強化剤として、石化海藻を０．１重量％とクエン酸を０．１重量％、キシリトールを５重量％含んだ再石灰化液
８：本発明の歯質強化剤として、実施例２の酸可溶化石化海藻を０．１重量％含んだ再石灰化溶液
９：本発明の歯質強化剤として、実施例２の酸可溶化石化海藻を０．１重量％、キシリトールを５重量％含んだ再石灰化溶液
尚、本発明の歯質強化剤を使用した再石灰化溶液６，７，８，９のフッ素濃度は、実施例１及び２の結果より、ほぼ１ｐｐｍとなる。
再石灰化処理後、各試験用歯牙エナメル質ブロックのワックスを除去、ポリエステル樹脂（Ｒｅｇｏｌａｃ樹脂）で包埋し、厚さ１００μｍの研磨切片を作製し、コンタクトマイクロラジオグラムを撮影した。撮影条件は１０ｋＶ、３ｍＡ、照射時間３０分間とし、基準としてアルミ箔ステップウェッジと同時に撮影した。現像は通法に準じ行った。
また、マイクロラジオグラフィー（ＭＲ）による結果の再石灰化度を、視覚的に、次の５段階で評価することとした。
・再石灰化度０：エナメル質脱灰層に石灰化が認められない。
・再石灰化度１：エナメル質脱灰表層で、かすかに再石灰化が認められる。
・再石灰化度２：エナメル質脱灰表層で、比較的強い再石灰化が認められる。又はエナメル質脱灰表層及び深層で再石灰化が認められる。
・再石灰化度３：エナメル質脱灰表層から深層にかけて全体的に再石灰化が認められる。又は、エナメル質脱灰表層で強い再石灰化が認められる。
・再石灰化度４：エナメル質脱灰表層で、強い再石灰化が認められる。なおかつ、表層から深層にかけて全体的に再石灰化が認められる。
・再石灰化度５：エナメル質脱灰表層から深層にかけて全体的に強い再石灰化が認められる。
以下、上記実験の結果について述べる。
ＭＲの結果を表３に示す。
脱灰直後のＭＲでは、再石灰化が認められなかった（再石灰化度０）。試験用歯エナメル質ブロックに脱灰層を形成させた後、再石灰化溶液１で処理した場合には、脱灰面全体に、ゆるやかな再石灰化が認められた（再石灰化度１）。同じく試験用歯エナメル質ブロックに脱灰層を形成させた後、再石灰化溶液２で処理した場合には、脱灰面全体に、ゆるやかな再石灰化が認められた（再石灰化度１）。再石灰化溶液３で処理した場合には、エナメル質脱灰表層だけでなく、深層にも再石灰化が認められた（再石灰化度２）。再石灰化溶液４および再石灰化溶液５で処理した場合には、エナメル質脱灰表層で強い再石灰化が認められた（再石灰化度３）。同じく試験用歯エナメル質ブロックに脱灰層を形成させた後、再石灰化溶液６および８で処理した場合には、エナメル質脱灰表層に強い再石灰化が、なおかつ表層から深層にかけて全体的に再石灰化が認められた（再石灰化度４）。同じく試験用歯エナメル質ブロックに脱灰層を形成させた後、再石灰化溶液７及び９で処理した場合には、エナメル質脱灰表層及び深層の全体に強い再石灰化が認められた（再石灰化度５）。
Figure 0005053624
以上によれば、本発明の石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻（混合処理物）に再石灰化促進効果が認められた。さらに本発明の石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻は、再石灰化溶液に溶かしたときに同じフッ素濃度になるフッ化ナトリウム、蛍石（フッ化カルシウム）溶液と比較し、より強い再石灰化促進効果があることが確認され、しかも、石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻にキシリトールを併用することにより、その再石灰化促進効果が顕著に高まることが認められた。
〔実施例４〕 歯牙エナメル質の耐酸性向上効果確認試験１
Ｃａｒｉｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ３８：５５１〜５５６，２００４に記載されているヒト抜去歯を用いる耐酸性向上効果確認試験による方法を参考に次のとおり行った。ヒト抜去歯エナメル質ブロックの表面を、３×４ｍｍの窓を残して、全体をスティッキーワックスで被覆し、これを、３７℃に加温した、５００ｍｇ／ｌのハイドロキシアパタイト、２０ｇ／ｌのカルボポール、０．１Ｍ乳酸を含む脱灰溶液（ｐＨ４．８）に２日間浸漬し、脱灰層を形成させた。その後、窓の１／３をワックスで被覆し試験用歯牙エナメル質ブロックを調製した。
再石灰化処理は、１ｍＭ ＣａＣｌ２、０．６ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、１００ｍＭ ＮａＣｌを含み、５０ｍＭ ＫＯＨ溶液で、ｐＨ７．３に調製した再石灰化溶液を用いて、実施例３の９種類の再石灰化溶液を用意し、それを３７℃とし、かつ、その各々に試験用歯牙エナメル質ブロック各１個を２週間浸漬した。ただし、各再石灰化溶液は２日おきに新しい溶液に交換した。
再石灰化処理後、窓の半分をワックスで被覆し、耐酸性試験用歯牙エナメル質ブロックを調製した。耐酸性処理は、上記３７℃に加温した脱灰溶液に２日間浸漬した。
耐酸性処理後、各試験用歯牙エナメル質ブロックのワックスを除去、ポリエステル樹脂（Ｒｅｇｏｌａｃ樹脂）で包埋し、１００μｍの研磨切片を作製し、コンタクトマイクロラジオグラムを撮影した。撮影条件は１０ｋＶ、３ｍＡ、照射時間３０分間とし、基準としてアルミ箔ステップウェッジと同時に撮影した。現像は通法に準じ行った。
また、マイクロラジオグラフィー（ＭＲ）による結果の石灰化度を、視覚的に、次の５段階で評価することとした。
・石灰化度１：エナメル質表層から深層にかけて全体的に強い脱灰が認められる。
・石灰化度２：エナメル質表層から深層にかけて全体的に脱灰が認められる。
・石灰化度３：エナメル質表層または深層で比較的弱い脱灰が認められる。
・石灰化度４：エナメル質層にかすかに脱灰が認められる。
・石灰化度５： エナメル質層にほとんど脱灰が認められない。
試験用歯エナメル質ブロックを脱灰溶液に浸漬した直後のマイクロラジオグラフィーの結果、再石灰化溶液に浸漬した直後のマイクロラジオグラフィーの結果、再度脱灰液浸漬後のマイクロラジオグラフィーの結果を表４に示す。
Figure 0005053624
以上によれば、本発明の石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻（混合処理物）は、再石灰化溶液１や、再石灰化溶液に溶かしたときに同じフッ素濃度になるフッ化ナトリウム、蛍石（フッ化カルシウム）と比較し、より強い歯牙エナメル質の耐酸性を向上する効果があることが確認され、しかも、石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻にキシリトールを併用することにより、その耐酸性向上効果が顕著に高まることが認められた。
〔実施例５〕 歯牙エナメル質の耐酸性向上効果確認試験２
ヒト抜去歯エナメル質ブロックの表面を、３×４ｍｍの窓を残して、全体をスティッキーワックスで被覆した。
試験溶液処理は、１ｍＭ ＣａＣｌ２、０．６ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、１００ｍＭ ＮａＣｌを含み、５０ｍＭ ＫＯＨ溶液で、ｐＨ７．３に調製した試験溶液を用いて、９種類の試験溶液（実施例３の９種類の再石灰化溶液と同じ）を用意し、それを３７℃とし、かつ、その各々に試験用歯牙エナメル質ブロック各１個を２週間浸漬した。ただし、各試験溶液は２日置きに新しい溶液に交換した。
尚、本試験においては、上記した９種類の試験溶液には前もって浸漬しない未処理の歯牙エナメル質ブロックについても、以下の試験を行った。
試験溶液浸漬後、３７℃に加温した０．１Ｍ乳酸を含む脱灰溶液（ｐＨ４．５）に８時間浸漬した。
脱灰処理後、各試験用歯牙エナメル質ブロックのワックスを除去、ポリエステル樹脂（Ｒｅｇｏｌａｃ樹脂）で包埋し、厚さ１００μｍの研磨切片を作製し、コンタクトマイクロラジオグラムを撮影した。撮影条件は１０ｋＶ、３ｍＡ、照射時間３０分間とし、基準としてアルミ箔ステップウェッジと同時に撮影した。現像は通法に準じ行った。試験溶液を使用した試料の比較対照として、未処理のエナメル質ブロックを用いた。
また、マイクロラジオグラフィー（ＭＲ）による結果の脱灰度を、視覚的に、次の５段階で評価することとした。
・脱灰度０：エナメル質層にほとんど脱灰が認められない。
・脱灰度１：エナメル質層にかすかに脱灰が認められる。
・脱灰度２：エナメル質層表層または深層で脱灰が認められる。
・脱灰度３：エナメル質表層から深層にかけて全体的に脱灰が認められる。
・脱灰度４：エナメル質表層から深層にかけて全体的に強い脱灰が認められる。
試験用歯エナメル質ブロックを試験溶液に浸漬した直後のマイクロラジオグラフィーの結果、脱灰液浸漬後のマイクロラジオグラフィーの結果を表２に示す。
Figure 0005053624
以上によれば、本発明の石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻（混合処理物）は、再石灰化溶液１や、再石灰化溶液に溶かしたときに同じフッ素濃度になるフッ化ナトリウム、蛍石（フッ化カルシウム）と比較し、より強い歯牙エナメル質の耐酸性を向上する効果があることが確認され、しかも、石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻にキシリトールを併用することにより、その耐酸性向上効果が顕著に高まることが認められた。
〔実施例６〕 歯牙象牙質の耐酸性向上効果確認試験
健全な人歯牙の象牙質を切削により露出させたものを試料とした。ヒト抜去歯象牙質ブロックの表面を、３×４ｍｍの窓を残して、全体をスティッキーワックスで被覆した。
試験溶液処理は、１ｍＭ ＣａＣｌ２、０．６ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、１００ｍＭ ＮａＣｌを含み、５０ｍＭ ＫＯＨ溶液で、ｐＨ７．３に調製した試験溶液を用いて、実施例５の９種類の試験溶液を用意し、それを３７℃とし、かつ、その各々に試験用歯牙象牙質ブロック各１個を２週間浸漬した。ただし、各試験溶液は２日置きに新しい溶液に交換した。
尚、本試験においては、上記した９種類の溶液には前もって浸漬しない未処理の歯牙象牙質ブロックについても、以下の試験を行った。
試験溶液浸漬後、３７℃に加温した０．１Ｍ乳酸を含む脱灰溶液（ｐＨ４．５）に８時間浸漬した。
脱灰処理後、各試験用歯牙象牙質ブロックのワックスを除去、ポリエステル樹脂（Ｒｅｇｏｌａｃ樹脂）で包埋し、厚さ１００μｍの研磨切片を作製し、コンタクトマイクロラジオグラムを撮影した。撮影条件は１０ｋＶ、３ｍＡ、照射時間３０分間とし、基準としてアルミ箔ステップウェッジと同時に撮影した。現像は通法に準じ行った。試験溶液を使用した試料の比較対照として、未処理の象牙質ブロックを用いた。
また、マイクロラジオグラフィー（ＭＲ）による結果の脱灰度を、視覚的に、次の５段階で評価することとした。
・脱灰度０：象牙質層に脱灰がほとんど認められない。
・脱灰度１：象牙質層にかすかに脱灰が認められる。
・脱灰度２：象牙質層表層または深層で脱灰が認められる。
・脱灰度３：象牙質表層から深層にかけて全体的に脱灰が認められる。
・脱灰度４：象牙質表層から深層にかけて全体的に強い脱灰が認められる。
試験用歯象牙質ブロックを試験溶液に浸漬した直後のマイクロラジオグラフィーの結果、脱灰液浸漬後のマイクロラジオグラフィーの結果を表６に示す。
Figure 0005053624
以上によれば、本発明の石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻（混合処理物）は、再石灰化溶液１や、再石灰化溶液に溶かしたときに同じフッ素濃度になるフッ化ナトリウム、蛍石（フッ化カルシウム）と比較し、より強い歯牙象牙質の耐酸性を向上する効果があることが確認され、しかも、石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻にキシリトールを併用することにより、その耐酸性向上効果が顕著に高まることが認められた。石化海藻と酸の組み合わせおよび実施例２の酸可溶化石化海藻、さらにキシリトールを併用することにより、象牙質の耐酸性をも向上させることができるので、それによって歯根面および象牙質の齲蝕を積極的に抑制し、象牙質知覚過敏症をも予防、治療することができる。
〔実施例７〕（チューインガム）
酸可溶化石化海藻とキシリトールを使用し、表７の配合による実施例７及び比較例１のチューインガムを作製した。
Figure 0005053624
チューインガムの有効成分の抽出操作は、「食品および代用糖の齲蝕誘発性を総合的に評価するための基礎的研究（課題番号０４３０４０４５）平成５年度科学研究費補助金研究成果報告書（研究代表者 山田 正）；ｐ８６〜８９」を参考にして行った。
上記実施例７及び比較例１のチューインガムについて、それを細片化して１０ｇを秤量した。その各々に、実施例３の場合と同じ組成の再石灰化溶液（６０℃）５０ｍｌを加え、ガラス棒でよく擂り潰して含有成分を溶出し、それに、さらに上記再石灰化溶液（６０℃）５０ｍｌを加えて再び溶出操作を行った後、遠心分離により細かいガムベースを取り除くことにより、実施例７及び比較例１のチューインガムに対応する２種類のチューインガム抽出液を得た。
〔実施例８〕（チューインガム）
石化海藻とキシリトールを使用し、表８の配合による実施例８及び比較例２、３のチューインガムを作製した。
Figure 0005053624
チューインガムの有効成分の抽出操作は、「食品および代用糖の齲蝕誘発性を総合的に評価するための基礎的研究（課題番号０４３０４０４５）平成５年度科学研究費補助金研究成果報告書（研究代表者 山田 正）；ｐ８６〜８９」を参考に、実施例７、比較例１と同様の方法で行った。実施例８及び比較例２、３のチューインガムに対応する３種類のチューインガム抽出液を得た。
〔実施例９〕（錠菓）
酸可溶化石化海藻とキシリトールを使用し、表９の配合による実施例９及び比較例４の錠菓を作製した。
Figure 0005053624
錠菓の有効成分の抽出操作は、「食品および代用糖の齲蝕誘発性を総合的に評価するための基礎的研究（課題番号０４３０４０４５）平成５年度科学研究費補助金研究成果報告書（研究代表者 山田 正）；ｐ８６〜８９」を参考に、実施例７、比較例１と同様の方法で行った。実施例９及び比較例４の錠菓に対応する２種類の錠菓抽出液を得た。
〔実施例１０〕（錠菓）
石化海藻とキシリトールを使用し、表１０の配合による実施例１０及び比較例５、６の錠菓を作製した。
Figure 0005053624
錠菓の有効成分の抽出操作は、「食品および代用糖の齲蝕誘発性を総合的に評価するための基礎的研究（課題番号０４３０４０４５）平成５年度科学研究費補助金研究成果報告書（研究代表者 山田 正）；ｐ８６〜８９」を参考に、実施例７、比較例１と同様の方法で行った。実施例１０及び比較例５、６の錠菓に対応する３種類の錠菓抽出液を得た。
〔実施例１１〕（キャンディ）
酸可溶化石化海藻とキシリトールを使用し、表１１の配合による実施例１１及び比較例７のキャンディを作製した。
Figure 0005053624
キャンディの有効成分の抽出操作は、「食品および代用糖の齲蝕誘発性を総合的に評価するための基礎的研究（課題番号０４３０４０４５）平成５年度科学研究費補助金研究成果報告書（研究代表者 山田 正）；ｐ８６〜８９」を参考に、実施例７、比較例１と同様の方法で行った。実施例１１及び比較例７のキャンディに対応する２種類のキャンディ抽出液を得た。
〔実施例１２〕（キャンディ）
石化海藻とキシリトールを使用し、表１２の配合による実施例１２及び比較例８、９のキャンディを作製した。
Figure 0005053624
キャンディの有効成分の抽出操作は、「食品および代用糖の齲蝕誘発性を総合的に評価するための基礎的研究（課題番号０４３０４０４５）平成５年度科学研究費補助金研究成果報告書（研究代表者 山田 正）；ｐ８６〜８９」を参考に、実施例７、比較例１と同様の方法で行った。実施例１２及び比較例８、９のキャンディに対応する３種類のキャンディ抽出液を得た。
実施例７、８、９、１０、１１、１２、比較例１、２、３、４、５、６、７、８、９で得られた抽出液について、実施例３の方法で再石灰化促進効果を、実施例４、５、６の方法で耐酸性向上効果を評価した。各試験のマイクロラジオグラフィーの評価結果を表１３−１及び表１３−２に示す。
Figure 0005053624
Figure 0005053624
以上によれば、石化海藻と酸、もしくは、酸可溶化石化海藻を配合したガム、錠菓およびキャンディが歯牙エナメル質の再石灰化促進効果、歯牙エナメル質と象牙質の耐酸性向上効果を示した。
以下に実施例１３〜２８の配合割合（数字は重量％）を示す。
〔実施例１３〕（チューインガム）
ガムベース ２０．０
ソルビトール ５５．０
マルチトール ２３．８
軟化剤 １．０
酸可溶化石化海藻 ０．２
〔実施例１４〕（チューインガム）
ガムベース ２０．０
キシリトール ５５．０
マルチトール ２２．５
軟化剤 １．０
クエン酸 １．０
石化海藻 ０．５
〔実施例１５〕（キャンディ）
キシリトール ４８．０
還元麦芽糖水飴 ３６．５
酸可溶化石化海藻 １．０
香料 ０．４
精製水 １４．１
〔実施例１６〕（キャンディ）
パラチニット ４８．０
還元麦芽糖水飴 ３６．０
酸可溶化石化海藻 ０．５
香料 ０．４
精製水 １５．１
〔実施例１７〕（錠菓）
キシリトール ７５．０
乳糖 ２０．９
グリセリン脂肪酸エステル ０．１
クエン酸 ０．１
石化海藻 ０．１
精製水 ３．８
〔実施例１８〕（錠菓）
キシリトール ７５．０
乳糖 １２．１
グリセリン脂肪酸エステル ０．１
クエン酸 ３．０
石化海藻 ６．０
精製水 ３．８
〔実施例１９〕（錠菓）
キシリトール ７５．０
パラチニット ２０．０
グリセリン脂肪酸エステル ０．２
酸可溶化石化海藻 ０．５
精製水 ４．３
〔実施例２０〕（チョコレート）
カカオマス １５．０
全脂粉乳 ２５．０
キシリトール ４０．９
酸可溶化石化海藻 ０．５
ココアバター １８．０
乳化剤 ０．３
香料 ０．３
〔実施例２１〕（アイスクリーム）
クリーム（脂肪率４５％） ２５．０
牛乳（脂肪率３．７％） ３５．０
脱脂粉乳（無糖） ２４．３
キシリトール １０．４
第２リン酸カルシウム ０．１
コーンシロップ ４．４
安定剤 ０．７５
酸可溶化石化海藻 ０．１５
〔実施例２２〕（飲料）
加糖ブドウ糖液糖 ０．３
キシリトール ８．６
酸味料 １．０
香料 ０．４
クエン酸 ０．３
石化海藻 ０．３
精製水 ８９．１
〔実施例２３〕（歯磨）
水酸化アルミニウム ３５．０
無水ケイ酸 １５．０
キシリトール １０．０
ラウリル硫酸ナトリウム １．０
香料 ０．５
酸可溶化石化海藻 ０．５
精製水 ３８．０
〔実施例２４〕（歯磨）
水酸化アルミニウム １５．０
無水ケイ酸 １５．０
キシリトール １０．０
ラウリル硫酸ナトリウム １．０
香料 ０．５
酸可溶化石化海藻 ２０．０
精製水 ３８．５
〔実施例２５〕（洗口剤）
キシリトール ２０．０
グリセリン １０．０
ラウリル硫酸ナトリウム １．０
香料 ０．２
酸可溶化石化海藻 １．０
精製水 ６７．８
〔実施例２６〕（洗口剤）
キシリトール ７．４
酸可溶化石化海藻 ０．５
グリセリン １０．０
ラウリル硫酸ナトリウム １．５
香料 ０．４
精製水 ８０．２
〔実施例２７〕（洗口剤）
ソルビトール ７．４
グリセリン １０．０
ラウリル硫酸ナトリウム １．５
香料 ０．６
酸可溶化石化海藻 ０．５
精製水 ８０．０
〔実施例２８〕（洗口剤）
キシリトール １０．０
グリセリン １０．０
ラウリル硫酸ナトリウム １．０
香料 ０．２
酸可溶化石化海藻 ２０．０
精製水 ５８．８

Claims (6)

  1. Ｌｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣と酸を有効成分として、Ｌｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣１重量部に対して酸を０．１〜１０重量部で含有させることを特徴とする歯質強化剤。
  2. あらかじめＬｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣と酸を混合処理することを特徴とする請求項１記載の歯質強化剤。
  3. さらにキシリトールをＬｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣１重量部に対して１〜１００重量部添加することを特徴とする請求項１または２記載の歯質強化剤。
  4. 歯の耐酸性促進効果及び再石灰化促進効果を有する請求項１乃至３記載の歯質強化剤。
  5. Ｌｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣１重量部に対して酸を０．１〜１０重量部の割合で、Ｌｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣と酸をそれぞれ含有させる、あるいはあらかじめ粉末Ｌｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣と酸の粉末または液体を混合あるいは溶媒にて溶解させて混合するかまたはその混合液を乾燥処理して酸可溶化Ｌｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣物を得ることを特徴とする歯質強化剤の製造方法。
  6. さらにキシリトールをＬｉｔｈｏｔｈａｍｎｉｕｍ ｃｏｒａｌｌｉｏｉｄｅｓの石灰質残渣１重量部に対して１〜１００重量部添加することを特徴とする請求項５記載の歯質強化剤の製造方法。
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