JP5020938B2 - 魚の季節的な可動期間を延ばすための方法 - Google Patents
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Description
多くの魚類が、水温又は日中の長さが一定値以下に下がると休息期間を取ることはよく知られている現象である。移動度が減っている期間中は魚の代謝は劇的に減少する。その結果、魚は温度及び/又は日中条件が臨界レベル以下に保持されている限りは食物を消費せず、静止状態で留まる。水温及び/又は日中の長さが、例えば季節の変化によって再び増加すると魚は移動するようになり、再び食べ始める。
鯉の所有者らは、明白な理由のために彼らの鯉の活動又は可動期間を増加させようと試みた。春になると、気温は水温よりも素早く上昇することが良く知られている。従って鯉の所有者らは、彼ら自身が外で休養したいのとほぼ同時に彼らの魚が水面に現れるのを望んでいる。
驚くべきことに、ここで魚の季節的な可動期間が魚の食事に干渉することによって延長され得ることが見出された。我々は、魚の季節的な可動期間を、2℃程度に低い温度でも活動的であるような程度まで増加させることができることを見出した。これは、天然物質を魚の飼料に加えることによって達成され得る。
植物ホルモンは、ここでは植物成長及び発育を調整する役割を果たす分子として定義される。植物ホルモンと考えられる化合物は、例えば:インドール-3-酢酸(IAA、オーキシン)、サイトカイニン、ジベレリン、ジベレリン酸、エチレン、アブシジン酸である。さらに、ブラシノステロイド、ジャスモン酸及びサリチル酸が重要な成長調節活性を有することが示され、植物ホルモンとして機能すると考えられている。
遊離IAA及び共役IAAは公知の化合物である。遊離IAAは、広く研究されている天然植物成長植物ホルモンである。植物ではIAAの大部分が共役形態で生じ(Slovin et al. 1999, Biochemistry and molecular biology of plant hormones, Elsevier, Amsterdam. P115-140)、エステル結合を介して糖に共役されているか、又はアミド結合を介してアミノ酸及びペプチドに共役されている。
遊離IAAを製造することのできるよく知られている細菌は、Azospirillum Brasilense(AB)である。通常の発酵方法における成長期の終わりに、ABはL-トリプトファンを遊離IAAに転化することができる。この転化率を増加させるために、少量の合成遊離IAAを該培地に加えてよい。フィードバック機構により、ABは遊離IAAへのL-トリプトファンの転化を増加させる。
発酵終了後、微生物を溶解してよく、遊離IAAが豊富な粉末は噴霧乾燥又は培養液を乾燥させる任意の他の従来技術によって得られ得る。他の技術を用いて液体を部分的又は完全に除去してもよい。
ここで、植物ホルモン及びベータ-グルカンが、魚の季節的可動期間を延ばすのに広い範囲の濃度で作用することが見出された。最適な濃度は異なる種類の魚の間でいくらか変化するが、当業者は所定種に最適な濃度を得る方法を知っており、例えば、該魚飼料への所望の化合物の滴定及びこれが最適な効果を有するときの試験による。以下を本方法の手引きとして用いてよい。
鯉は、遊離IAAが1日に生体重(life weight)1kg当たり0.02〜240μg(ug/kglw/日)で与えられたときに移動度を増加させて応答した。コスト及び利益の間の最適値は0.2〜24ug/kglw/日の濃度で達成され、特に1〜5ug/kglw/日、例えば2,4ug/kglw/日の遊離IAAを含有する飼料が非常に有効であった。
このために特に好適なのは、魚飼料1kg当たり0.3〜3000mgの遊離IAAを含む魚飼料である。従って、別の特徴では、本発明は、魚の季節的可動期間を延ばすための飼料1kg当たり0.3〜3000mgの植物ホルモンを含む魚飼料の使用に関する。
魚に1〜10.000ug/kglw/日の乾燥Agaricus blazei murill(1kglw/日当たり10〜100.000ugの乾燥させていないAgaricus blazei murillに相当)を与えると、魚の季節的可動期間を延ばす所望の効果を生み出すことが見出された。これは、約0.1〜2000ug/kglw/日の1,3及び1,6ベータ-グルカンに相当する。優れた結果は、魚に10〜200ug/kglw/日の1,3及び1,6ベータ-グルカンを与えたときに得られ、コスト利益の最適値は、約60ug/kglw/日の1,3及び1,6ベータ-グルカン又は600ug/kglw/日の乾燥Agaricus blazei murillであることが見出された。
このために特に好適なものは、魚飼料1kg当たり0.015〜150gを含む魚飼料である。従って、別の特徴では、本発明は、魚の季節的可動期間を延ばすための飼料1kg当たり0.015〜150gのベータ-グルカンを含む魚飼料の使用に関する。
本発明で用いられ得るジベレリン酸を含む好適な飼料物質が記載されている。米国特許出願第2943938号明細書及びSvihusら(Journal of Animal Science, 64, 1997, p257-272)は、組成物1kg当たりの好適な量のジベレリン酸を含む動物飼料を記載している。
実施例1:遊離IAAを含有する調製物の微生物学的生産
Azospirillum brasilence Sp7(ATCC)を、培養チューブにおいて寒天培養として得た。LB培地を用い、終夜28℃の175rpmで菌株を成長させた。グリセロールを10%まで該培養物に加え、混合し、及びNalgene creovials上で分割し、-80℃で凍結させた。系統は-80℃でcreovialsに保存した。
A. brasilenceの種培養物を調製するために、1つの系統(1.2〜1.8mL)を解凍して1リットルのLB培地に加え、約20時間28℃の175rpmで約2.5の光学密度(OD620nm)まで成長させた。
10リットルの発酵槽を水ですすぎ、pH電極を較正した。9リットルのLB培地を調製し、1g/LのL-トリプトファン及び0.1g/Lの遊離IAAを加えた。該培地を2mLの消泡剤と共に発酵槽に入れた。該発酵槽を30分間121℃で滅菌した。28℃に冷却後、O2プローブをN2及びO2で較正し、それぞれ0及び100%の空気飽和状態とした。
種培養物を、オートクレーブで別々に滅菌したフラスコ及びパイプで発酵槽に移した。添加が完了したら該パイプ及びフラスコを取り除き、発酵を以下のパラメーターで開始した:
攪拌器速度 400rpm
温度 28℃
通気 0.75Nl/分
PH 7
3,0gの量のAgaricus Blazei Murill(Agaricus Farm)、自然源のベータ-グルカンを100mLのオリーブオイルに懸濁した。本発明の魚飼料は、1kgの市場で入手可能な(Coppens) Cyprico White 3mmのフローター(floater)飼料を100mLのオイル懸濁液で真空含浸することによって調製した。対照飼料は、同量の飼料をオリーブオイルのみで真空含浸することによって調製した。
12mgの遊離IAAに相当する実施例1に記載の噴霧乾燥調合物の一定量を、100mLのオリーブオイルに懸濁した。本発明の魚飼料は、1kgの市場で入手可能な(Coppens) Cyprico White 3mmのフローター飼料を100mLのオイル懸濁液で真空含浸することによって調製した。対照飼料は、同量の飼料をオリーブオイルのみで真空含浸することによって調製した。
3,0グラムの量のAgaricus Blazei Murill(ABM、Agaricus Farm)、自然源のベータ-グルカン及び12mgの遊離IAAに相当する実施例1に記載の一定量の噴霧乾燥調合物を、100mLのオリーブオイルに懸濁した。本発明の魚飼料は、1kgの市場で入手可能な(Coppens) Cyprico White 3mmのフローター飼料を100mLのオイル懸濁液で真空含浸することによって調製した。対照飼料は、同量の飼料をオリーブオイルのみで真空含浸することによって調製した。
延ばすための使用
全体重が約50kgの鯉50匹が全てに入っているそれぞれ40立方メートルの4つの池を用いて、本発明の魚飼料の有効性を示した。対照として用いた1つの池では魚に対照飼料を与え、他の池の魚には上記実施例2〜4で調製された本発明の飼料を与えた。実験は水温が約2℃となったときに始めた。
対照池の魚に、1日当たり10gのCyprico White 3 mmフローター飼料を与え、他の池の魚には、実施例2、3及び4に記載の10gの飼料を与えた(表1)。
試験グループの魚は水面で泳いで飼料を食べ始め、対照グループは活動の兆候を示さないことが観察された。この効果は毎日徐々に増加して5日後には魚は可動となったが、水温は依然として2〜3℃であった。魚の移動度を1〜5の相対的指標で評点し、表2)で1は完全に静止し、5は完全に可動である。対照池の水は他の池の水と正確に同じ温度であるが、対照池の魚は完全に静止していた。4週間後、水温が徐々に6℃まで上昇したときに有害な副作用は試験グループで観察されなかった。魚は健康的で十分に可動であり、対照グループはほぼ完全に静止していた。
Claims (4)
- 魚が可動となる最小温度を下げる方法であって、魚に、1日に生体重1kg当たり0.02〜240μgの範囲の遊離インドール−3−酢酸と、1日に生体重1kg当たり0.1〜2000μgの1,3及び/又は1,6ベータ−グルカンと、を与えることを特徴とする、前記方法。
- 魚に与える遊離インドール−3−酢酸の量が、1日に生体重1kg当たり0.2〜24μgの範囲である、請求項1に記載の方法。
- 魚に与える遊離インドール−3−酢酸の量が、1日に生体重1kg当たり1〜5μgの範囲である、請求項2に記載の方法。
- 前記魚が鯉である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
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