JP4963547B2 - オキソリン化合物を有効成分とする医薬 - Google Patents

Description

本発明は、オキソリン化合物を有効成分として含有する医薬、特にガン細胞増殖抑制のために用いる医薬に関するものである。

オキソリン化合物のうち、リン酸エステル、亜リン酸エステルは、以前からよく知られた化合物であり、金属錯化合物の配位子やリン含有生理活性物質、例えばリン脂質誘導体の合成原料として用いられ、その特定構造の誘導体も多数知られている。

例えば、炭素数３以上のアルキル基又はその置換体をもつリン酸又は亜リン酸エステル（特許文献１参照）、２‐フェニルエテニルベンジル基をもつリン酸エステル（特許文献２参照）、ブチロイルオキシ基又は４‐フェニルブチロイルオキシ基をもつリン酸エステル（特許文献３参照）などが知られている。

また、エチレン性二重結合をもつオキソリン化合物としても、例えばフェニル（１‐オクテン‐１‐イル）ホスフィン酸メンチルのような光学活性ホスフィン酸エステル（特許文献４参照）、リン原子上にキラル性をもつ光学的に活性なアルケニルフォスフィン酸エステル及びその製造方法（特許文献５参照）などがこれまでに提案されている。

そのほか、用途を特定したオキソリン化合物の発明として、一般式

（式中のＲは水素原子又はアルキル基、Ａｒはアリール基、Ｘは連結基）
で表わされるホスフィンオキシド基で置換された芳香族化合物を用いた発光素子（特許文献６参照）、ポリイソプレニルモノホスフェート化合物を活性成分とした制ガン剤（特許文献７参照）などが知られている。

しかしながら、これらのオキソリン化合物について、その生理的特性についての研究はほとんど行われていないため、実用的な用途は見出されていなかった。

特開昭５９−４２３９４号公報（特許請求の範囲その他） 特開昭６１−８５３９５号公報（特許請求の範囲その他） 特表２００１−５１４６６５号公報（特許請求の範囲その他） 特開２００２−２６５４７９号公報（特許請求の範囲その他） 米国特許出願公開第０１／６４３６２号明細書（特許請求の範囲その他） 特開２００４−９５２２１号公報（特許請求の範囲その他） 特開昭６０−６７４２４号公報（特許請求の範囲その他）

本発明は、このような事情のもとで、ある種のオキソリン化合物についての生理的特性を解明し、その新規かつ有用な用途開発を目的としてなされたものである。

本発明者らは、各種オキソリン化合物の生理的活性について種々試験した結果、特定の化学構造をもつオキソリン化合物がガン細胞増殖抑制作用を示すことを見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。

すなわち、本発明は、一般式

（式中のＲ^１は炭素数１〜１８の炭化水素基、Ｒ^２及びＲ^３はそれぞれ水素原子、Ｒ^４及びＲ^５はアリール基である）
で表わされるオキソリン化合物を有効成分として含有するガン細胞増殖抑制剤を提供するものである。

本発明の医薬の有効成分として用いる上記の一般式（Ｉ）で表わされるオキソリン化合物において、式中のＲ^１の炭化水素基は、脂肪族炭化水素基、脂環族炭化水素基、芳香族炭化水素基のいずれでもよい。

この脂肪族炭化水素基は、飽和又は不飽和、直鎖状又は枝分れ状のいずれでもよいが、炭素数１〜１８、好ましくは１〜１０、特に１〜４のアルキル基が好適である。

このようなアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ‐プロピル基、イソプロピル基、ｎ‐ブチル基、ｓｅｃ‐ブチル基、ｔ‐ブチル基、ｎ‐ペンチル基、ｎ‐ヘキシル基、２‐メチルペンチル基、ｎ‐デシル基などがある。

また、脂環族炭化水素基は、炭素数３〜１８、好ましくは５〜１０であり、これは単環状又は多環状のいずれでもよく、また構造中に不飽和結合を含んでいてもよい。このようなものとしては、例えばシクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロオクチル基、シクロヘキセニル基、シクロオクチニル基、シクロドデシル基、ビシクロドデシル基などがある。

芳香族炭化水素基は、炭素数６〜１８、好ましくは６〜１４、特に６〜１０の単環状、多環状のアリール基及び炭素数７〜１８、好ましくは７〜１４、特に７〜１０のアラルキル基が含まれる。

このようなアリール基としては、例えば、フェニル基、トリル基、キシリル基、ナフチル基、ビフェニル基が、アラルキル基としては、例えばベンジル基、フェネチル基、ベンジルフェニル基、フェニルベンジル基、ナフチルメチル基などを挙げることができる。

また、Ｒ^４及びＲ^５のアリール基としてはフェニル基、トリル基、キシリル基などが好ましい。

したがって、一般式（Ｉ）で表わされる化合物として好ましいのは、メチルビニルケトンなどのアルキルアルケニルケトンにジフェニルホスフィンオキシド基などのオキソリン基が結合したものである。

これらのオキソリン化合物は、固形ガン及びリンパ腫、特に皮膚ガン、膀胱ガン、乳ガン、子宮ガン、卵巣ガン、前立腺ガン、肺ガン、大腸ガン、膵臓ガン、腎臓ガン、胃ガンなどのガン細胞の増殖を抑制する作用を有し、ガンの予防薬又は治療薬として用いることができる。

本発明の化合物を医薬として用いる場合は、これを通常の製剤に際して使用されている賦形剤と混合し、注射液、経鼻投与剤、散剤、錠剤、糖衣錠、舌下錠、カプセル剤、トローチ剤、坐薬、クリーム剤、軟膏剤、皮膚適用ゲル剤、液剤などに製剤する。

この際用いられる賦形剤としては、例えば生理塩水、水、ブドウ糖液、エタノール、ジメチルスルホキシドなどの液状賦形剤、乳糖、ブドウ糖、亜硫酸ナトリウム、リン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、合成ケイ酸アルミニウム、炭酸水素ナトリウム、カオリン、タルク、酸化亜鉛、デンプン、ゼラチン、ヨウ化カリウム、塩化ナトリウム、ホウ酸などの固体賦形剤を挙げることができる。

前記一般式（Ｉ）のオキソリン化合物を医薬として投与する場合の投与量は、経口投与の場合、１日の投与量は、体重当り約０．００１から５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．０１から３０ｍｇ／ｋｇが適当である。静脈投与される場合、１日の投与量は、体重当り約０．０００１から５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．００１から１０ｍｇ／ｋｇが適当であり、これを１日１回乃至複数回に分けて投与するか、持続的に点滴投与することが好ましい。投与頻度、投与量、点滴投与時間などは、症状、年令、性別などを考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。

本発明のリン化合物を有効成分とする抗ガン剤は、ガン細胞に対し選択的に作用し、良好なガン細胞増殖抑制活性を示す。特に固形ガン細胞（大腸ガン）に対して、既存抗ガン剤を上回るガン細胞増殖抑制活性を有する。

次に実施例により本発明を実施するための最良の形態を説明するが、これにより本発明はなんら限定されるものではない。

供試化合物について、ヒト白血病Ｕ９３７、ヒト結腸ガンＨＴ２９、ヒト前立線ガンＰＣ−３、マウス筋繊維ガンＳ１８０、及びマウスの正常線維芽細胞株ＮＩＨ３Ｔ３細胞を用い、以下の方法により抗ガン作用を評価した。

Ｕ９３７細胞については、１０％ウシ胎児血清、グルタミン２ｍＭを含むＲＰＭＩ１６４０培地で１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるように細胞を調製し、９６穴マイクロプレート（Ｆａｌｃｏｎ社製）に２００μｌ／ｗｅｌｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ₂条件で培養した。２４時間後、エタノールで段階希釈した各被検化合物溶液２μｌを添加し、培養を７２時間行った。対照サンプルとしては、被検化合物を加えないでエタノール２μｌのみを添加したサンプルを用いた。同じ条件下で７２時間培養を行い、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）により細胞増殖活性を評価した。被検化合物溶液を加えない対照群の細胞増殖量を１００％としたときに各処理群の細胞増殖量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。

ＨＴ−２９細胞については１０％ウシ胎児血清、グルタミン２ｍＭを含むＭｃＣｏｙ’ｓ ５ａ培地で、１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう細胞を調製し、９６穴マイクロプレート（Ｆａｌｃｏｎ社製）に１００μｌ／ｗｅｌｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ₂条件で培養した。４８時間後、エタノールで段階希釈した各被検化合物溶液２μｌを添加し、培養を７２時間行った。対照サンプルとして、被検化合物を加えないで、エタノール２μｌ添加サンプルを用いた。同じ条件下で培養を行い、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）により細胞増殖活性を評価した。被検化合物溶液を加えない対照群の細胞増殖量を１００％としたときに各処理群の細胞増殖量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。被検化合物溶液を加えない対照群のタンパク質量を１００％としたときに各処理群の残存タンパク質量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。

Ｓ１８０とＮＩＨ３Ｔ３細胞については１０％ウシ胎児血清、グルタミン２ｍＭを含むＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥＭで、１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう細胞を調製し、９６穴マイクロプレート（Ｆａｌｃｏｎ社製）に１００μｌ／ｗｅｌｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ₂条件で培養した。２４時間後、エタノールで段階希釈した各被検化合物溶液２μｌを添加し、培養を７２時間行った。対照サンプルとして、被検化合物を加えない、エタノール２μｌのみの添加サンプルを用いた。同じ条件下で７２時間培養を行い、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）により細胞増殖活性を評価した。被検化合物溶液を加えない対照群の細胞増殖量を１００％としたときに各処理群の細胞増殖量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。被検化合物溶液を加えない対照群のタンパク質量を１００％としたときに各処理群の残存タンパク質量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。

ＰＣ−３細胞については、１０％ウシ胎児血清、グルタミン２ｍＭを含む完全ＲＰＭＩ１６４０培地で、１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう細胞を調製し、９６穴マイクロプレート（Ｆａｌｃｏｎ社製）に２００μｌ／ｗｅｌｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ₂条件で培養した。翌日、エタノールで段階希釈した各被検化合物溶液２μｌを添加し、培養を７２時間行った。対照サンプルとして、被検化合物を加えない、エタノール２μｌ添加サンプルも作製した。同条件下で７２時間培養を行い、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）により細胞増殖活性を評価した。被検化合物溶液を加えていない対照群の細胞増殖量を１００％としたときに各処理群の細胞増殖量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。被検化合物溶液を加えない対照群のタンパク質量を１００％としたときに各処理群の残存タンパク質量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。

式

（ただし、Ｐｈはフェニル基）
で表わされるオキソリン化合物について試験した結果を表１に示す。また、比較のために公知の抗ガン剤のシスプラチンについても試験し、その結果を併記した。

本発明の医薬は、ヒトの各種ガンの治療薬として有用である。

Claims (4)

1. 一般式
   

   

   （式中のＲ^１は炭素数１〜１８の炭化水素基、Ｒ ^２及びＲ^３はそれぞれ水素原子、Ｒ^４及びＲ^５ はアリール基である）
   で表わされるオキソリン化合物を有効成分として含有するガン細胞増殖抑制剤。
2. 式中のＲ^４及びＲ^５がフェニル基である請求項１記載のガン細胞増殖抑制剤。
3. ガン細胞が固形ガン細胞又はリンパ腫細胞である請求項１又は２記載のガン細胞増殖抑制剤。
4. ガン細胞が皮膚ガン、膀胱ガン、乳ガン、子宮ガン、卵巣ガン、前立腺ガン、肺ガン、大腸ガン、膵臓ガン、腎臓ガン又は胃ガン細胞である請求項１〜３のいずれかに記載のガン細胞増殖抑制剤。