JP4883753B2

JP4883753B2 - 医薬

Info

Publication number: JP4883753B2
Application number: JP2005258186A
Authority: JP
Inventors: 暁輝王; 立彪韓
Original assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Current assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Priority date: 2005-09-06
Filing date: 2005-09-06
Publication date: 2012-02-22
Anticipated expiration: 2025-09-06
Also published as: JP2007070278A

Description

本発明は、オキソリン化合物を有効成分として含有する医薬、特に癌細胞増殖抑制のために用いる医薬に関するものである。

オキソリン化合物のうち、リン酸エステル、亜リン酸エステルは、以前からよく知られた化合物であり、金属錯化合物の配位子やリン含有生理活性物質、例えばリン脂質誘導体の合成原料として用いられ、その特定構造の誘導体も多数知られている。

例えば、炭素数３以上のアルキル基又はその置換体をもつリン酸又は亜リン酸エステル（特許文献１参照）、２‐フェニルエテニルベンジル基をもつリン酸エステル（特許文献２参照）、ブチロイルオキシ基又は４‐フェニルブチロイルオキシ基をもつリン酸エステル（特許文献３参照）などが知られている。

また、エチレン性二重結合をもつオキソリン化合物としても、例えばフェニル（１‐オクテン‐１‐イル）ホスフィン酸メンチルのような光学活性ホスフィン酸エステル（特許文献４参照）、リン原子上にキラル性をもつ光学的に活性なアルケニルフォスフィン酸エステル及びその製造方法（特許文献５参照）などがこれまでに提案されている。

そのほか、用途を特定したオキソリン化合物の発明として、一般式

（式中のＲは水素原子又はアルキル基、Ａｒはアリール基、Ｘは連結基）
で表わされるホスフィンオキシド基で置換された芳香族化合物を用いた発光素子（特許文献６参照）、ポリイソプレニルモノホスフェート化合物を活性成分とした制癌剤（特許文献７参照）などが知られている。

しかしながら、これらのオキソリン化合物について、その生理的特性についての研究はほとんど行われていないため、実用的な用途は見出されていなかった。

特開昭５９−４２３９４号公報（特許請求の範囲その他）特開昭６１−８５３９５号公報（特許請求の範囲その他）特表２００１−５１４６６５号公報（特許請求の範囲その他）特開２００２−２６５４７９号公報（特許請求の範囲その他）米国特許出願公開第０１／６４３６２号明細書（特許請求の範囲その他）特開２００４−９５２２１号公報（特許請求の範囲その他）特開昭６０−６７４２４号公報（特許請求の範囲その他）

本発明は、このような事情のもとで、オキソリン化合物についての生理的特性を解明し、その新規かつ有用な用途開発を目的としてなされたものである。

本発明者らは、各種オキソリン化合物の生理的活性について種々試験した結果、特定の化学構造をもつオキソリン化合物が癌細胞増殖抑制作用を示すことを見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。

すなわち、本発明は、一般式

（式中のｎは０又は１である）
で表わされるオキソリン化合物を有効成分として含有する医薬であって、前記ｎが１のとき、一般式

（式中のＲ^１は水素原子、炭素数１〜１８のアルキル基、炭素数３〜１８の脂環族炭化水素基、炭素数６〜１８のアリール基、フェロセニル基又はアリールセレノ基、Ｒ^２は水素原子、Ｒ^３は水素原子、炭素数３〜１８の脂環族炭化水素基又は炭素数６〜１８のアリール基、Ｒ^４は炭素数６〜１８のアリール基、Ｒ^５は炭素数６〜１８のアリール基又は炭素数３〜１８の脂環族炭化水素オキシ基である）
で表わされるオキソリン化合物であり、前記ｎが０のとき、一般式

（式中のＲ^１は炭素数１〜１８のアルキル基又は炭素数３〜１８の脂環族炭化水素基、Ｒ^４は炭素数６〜１８のアリール基、Ｒ^５は炭素数３〜１８の脂環族炭化水素オキシ基である）
で表わされるオキソリン化合物である、癌細胞増殖抑制剤である医薬を提供するものである。

本発明医薬の有効成分としては、前記一般式（Ｉ）で示されるオキソリン化合物であるが、この一般式中のＲ¹〜Ｒ⁵の炭化水素基は、脂肪族炭化水素基、脂環族炭化水素基、芳香族炭化水素基のいずれでもよい。

この脂肪族炭化水素基は、飽和又は不飽和、直鎖状又は枝分れ状のいずれでもよいが、炭素数１〜１８、好ましくは１〜１０、特に１〜４のアルキル基、炭素数２〜１８、好ましくは２〜１０、特に２〜４のアルケニル基が好適である。

このようなアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ‐プロピル基、イソプロピル基、ｎ‐ブチル基、ｓｅｃ‐ブチル基、ｔ‐ブチル基、ｎ‐ペンチル基、ｎ‐ヘキシル基、２‐メチルペンチル基、ｎ‐デシル基などがあり、アルケニル基としては、例えば、エテニル基、１‐プロペニル基、２‐プロペニル基、１‐ブテニル基、２‐ブテニル基、３‐ペンテニル基などがある。

また、脂環族炭化水素基は、炭素数３〜１８、好ましくは５〜１０であり、これは単環状又は多環状のいずれでもよく、また構造中に不飽和結合を含んでいてもよい。このようなものとしては、例えばシクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロオクチル基、シクロヘキセニル基、シクロオクチニル基、シクロドデシル基、ビシクロドデシル基などがある。

芳香族炭化水素基は、炭素数６〜１８、好ましくは６〜１４、特に６〜１０の単環状、多環状のアリール基及び炭素数７〜１８、好ましくは７〜１４、特に７〜１０のアラルキル基が含まれる。

このようなアリール基としては、例えば、フェニル基、トリル基、キシリル基、ナフチル基、ビフェニル基が、アラルキル基としては、例えばベンジル基、フェネチル基、ベンジルフェニル基、フェニルベンジル基、ナフチルメチル基などを挙げることができる。

また、前記一般式（Ｉ）中のＲ¹ _、Ｒ⁴及びＲ⁵における炭化水素オキシ基の例としては、前記した炭化水素基に酸素原子が結合したものを挙げることができるが、特に好ましいものとして、メトキシ基、エトキシ基、ブトキシ基のようなアルコキシ基、フェノキシ基、ナフトキシ基のようなアリールオキシ基、ベンジルオキシ基、フェネチルオキシ基、ナフチルメトキシ基などのアラルキルオキシ基を挙げることができる。

これらの炭化水素基又は炭化水素オキシ基は、炭素原子にそれと結合し得る生理活性に対し悪影響を与えない不活性な置換基、例えば、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、アミノ基、置換アミノ基、例えばメチルアミノ基、ジメチルアミノ基など、アルコキシ基例えばメトキシ基、エトキシ基など、アルコキシカルボニル基例えばメトキシカルボニル基などを有していてもよい。

次にＲ¹の中のヘテロアリール基は、ヘテロ原子を含む芳香族性を有する複素環基を意味し、このようなものとしては、例えばフラニル基、テニル基、ピロリル基、ピリジル基、チアゾリル基、イミダゾリル基、キノリル基、ピペリジル基、モルホニル基、ピラニル基などがある。

また、シリル基は、ＳｉＨ₃基のみであるその中の水素原子がアルキル基、シクロアルキル基、アリール基で置換された置換シリル基、例えばトリメチルシリル基であってもよい。

次に、アリールセレノ基としては、セレン原子にアリール基が結合した置換基であり、例えばフェニルセレノ基、トリルセレノ基、キシリルセレノ基、ナフチルセレノ基などを挙げることができる。

前記一般式（Ｉ）において、ｎが１の場合は、一般式

（式中のＲ¹〜Ｒ⁵は前記と同じ意味をもつ）
で表わされるアルケニルホスフィンオキシドである。

このような化合物としては、例えばＲ⁴及びＲ⁵がフェニル基、Ｒ²及びＲ³が水素原子で、Ｒ¹がヘキシル基、シクロヘキセニル基、フェロセニル基のもの、Ｒ¹が水素原子、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴及びＲ⁵がフェニル基のもの、Ｒ¹及びＲ²が水素原子、Ｒ³がヘキシル基のものを挙げることができる。

一方、ｎが０の場合は、一般式

（式中のＲ¹、Ｒ⁴及びＲ⁵は前記と同じ意味をもつ）
で表わされるホスフィナートである。

このような化合物としては、例えば一般式（Ｉ）−ｂにおいて、Ｒ¹がヘキシル基、Ｒ⁴がフェニル基、Ｒ⁵が２‐イソプロピル‐５‐メチルシクロヘキシルオキシ基である化合物、Ｒ¹がシクロペンチル基、Ｒ⁴がフェニル基、Ｒ⁵が２‐イソプロピル‐５‐メチルシクロヘキシルオキシ基である化合物、Ｒ¹がシクロヘキシル基、Ｒ⁴がフェニル基、Ｒ⁵が２‐イソプロピル‐５‐メチルシクロヘキシルオキシ基である化合物、Ｒ¹がマンデル基、Ｒ⁴がフェニル基、Ｒ⁵が２‐イソプロピル‐５‐メチルシクロヘキシルオキシ基である化合物などを挙げることができる。

これらのオキソリン化合物は、固形癌及びリンパ腫、特に皮膚癌、膀胱癌、乳癌、子宮癌、卵巣癌、前立腺癌、肺癌、大腸癌、膵臓癌、腎臓癌、胃癌などの癌細胞の増殖を抑制する作用を有し、癌の予防薬又は治療薬として用いることができる。

本発明の化合物を医薬として用いる場合は、これを通常の製剤に際して使用されている賦形剤と混合し、注射液、経鼻投与剤、散剤、錠剤、糖衣錠、舌下錠、カプセル剤、トローチ剤、坐薬、クリーム剤、軟膏剤、皮膚適用ゲル剤、液剤などに製剤する。

この際用いられる賦形剤としては、例えば生理塩水、水、ブドウ糖液、エタノール、ジメチルスルホキシドなどの液状賦形剤、乳糖、ブドウ糖、亜硫酸ナトリウム、リン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、合成ケイ酸アルミニウム、炭酸水素ナトリウム、カオリン、タルク、酸化亜鉛、デンプン、ゼラチン、ヨウ化カリウム、塩化ナトリウム、ホウ酸などの固体賦形剤を挙げることができる。

前記一般式（Ｉ）のオキソリン化合物を医薬として投与する場合の投与量は、経口投与の場合、１日の投与量は、体重当り約０．００１から５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．０１から３０ｍｇ／ｋｇが適当である。静脈投与される場合、１日の投与量は、体重当り約０．０００１から５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．００１から１０ｍｇ／ｋｇが適当であり、これを１日１回乃至複数回に分けて投与するか、持続的に点滴投与することが好ましい。投与頻度、投与量、点滴投与時間などは、症状、年令、性別などを考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。

本発明によれば、癌細胞増殖抑制作用を有し、抗癌剤として好適な医薬が提供される。

次に実施例により本発明を実施するための最良の形態を説明するが、これにより本発明はなんら限定されるものではない。

実施例１〜１１
表１に示す化合物について、ヒト白血病Ｕ９３７、ヒト結腸癌ＨＴ２９、マウス筋繊維癌Ｓ１８０及びマウス正常線維芽細胞株ＮＩＨ３Ｔ３細胞を用いて癌細胞増殖抑制効果を試験した。

Ｕ９３７細胞は、１０％ウシ胎児血清、グルタミン２ｍＭを含むＲＰＭＩ１６４０培地にて、１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう細胞を調製し、９６穴マイクロプレート（Ｆａｌｃｏｎ社製）に２００μｌ／ｗｅｌｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ₂条件で培養した。翌日、エタノールで段階希釈した各被検化合物溶液２μｌを添加し、培養を７２時間行った。対照サンプルとして、被検化合物を加えない、エタノール２μｌ添加サンプルも作製した。同条件下で７２時間培養を行い、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）により細胞増殖活性を評価した。被検化合物溶液を加えていない対照群の細胞増殖量を１００％としたときに各処理群の細胞増殖量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。

ＨＴ−２９細胞は１０％ウシ胎児血清、グルタミン２ｍＭを含むＭｃＣｏｙ’ｓ５ａ培地にて、１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう細胞を調製し、９６穴マイクロプレート（Ｆａｌｃｏｎ社製）に１００μｌ／ｗｅｌｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ₂条件で培養した。二日後、エタノールで段階希釈した各被検化合物溶液２μｌを添加し、培養を７２時間行った。対照サンプルとして、被検化合物を加えない、エタノール２μｌ添加サンプルも作製した。同条件下で培養を行い、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）により細胞増殖活性を評価した。被検化合物溶液を加えていない対照群の細胞増殖量を１００％としたときに各処理群の細胞増殖量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。被検化合物溶液を加えていない対照群のタンパク質量を１００％としたときに各処理群の残存タンパク質量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。

Ｓ１８０とＮＩＨ３Ｔ３細胞は１０％ウシ胎児血清、グルタミン２ｍＭを含むＥａｇｌｅ’ｓＭＥＭにて、１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるよう細胞を調製し、９６穴マイクロプレート（Ｆａｌｃｏｎ社製）に１００μｌ／ｗｅｌｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ₂条件で培養した。翌日、エタノールで段階希釈した各被検化合物溶液２μｌを添加し、培養を７２時間行った。対照サンプルとして、被検化合物を加えない、エタノール２μｌ添加サンプルも作製した。同条件下で７２時間培養を行い、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）により細胞増殖活性を評価した。被検化合物溶液を加えていない対照群の細胞増殖量を１００％としたときに各処理群の細胞増殖量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。被検化合物溶液を加えていない対照群のタンパク質量を１００％としたときに各処理群の残存タンパク質量の割合を求め、残存細胞量を対照の５０％に抑制するのに必要な化合物濃度（ＩＣ₅₀）値を算出した。

また、既存抗がん剤との比較実験として、シスプラチン（シグマ社製）を用いた。
これらの結果を表１に示した。

実施例１２〜１６
表２に示す化合物について実施例１〜１１と同様にして、ヒト白血病Ｕ９３７、ヒト結腸癌ＨＴ２９、マウス筋繊維癌Ｓ１８０及びマウス正常線維芽細胞株ＮＩＨ３Ｔ３細胞を用いて癌細胞増殖抑制効果を試験した。
その結果を表２に示す。なお、比較のためにシスプラチンを用いた場合の結果も併記した。

本発明によれば、癌細胞増殖抑制作用を有し、抗癌剤として有用な医薬が得られる。

Claims

一般式

（式中のｎは０又は１である）
で表わされるオキソリン化合物を有効成分として含有する医薬であって、
前記ｎが１のとき、一般式

（式中のＲ ^１は水素原子、炭素数１〜１８のアルキル基、炭素数３〜１８の脂環族炭化水素基、炭素数６〜１８のアリール基、フェロセニル基又はアリールセレノ基、Ｒ ^２は水素原子、Ｒ ^３は水素原子、炭素数３〜１８の脂環族炭化水素基又は炭素数６〜１８のアリール基、Ｒ ^４は炭素数６〜１８のアリール基、Ｒ ^５は炭素数６〜１８のアリール基又は炭素数３〜１８の脂環族炭化水素オキシ基である）
で表わされるオキソリン化合物であり、
前記ｎが０のとき、一般式

（式中のＲ ^１は炭素数１〜１８のアルキル基又は炭素数３〜１８の脂環族炭化水素基、Ｒ ^４は炭素数６〜１８のアリール基、Ｒ ^５は炭素数３〜１８の脂環族炭化水素オキシ基である）
で表わされるオキソリン化合物である、
癌細胞増殖抑制剤である医薬。
癌細胞が固形癌細胞又はリンパ腫細胞である請求項１記載の医薬。
癌細胞が皮膚癌、膀胱癌、乳癌、子宮癌、卵巣癌、前立腺癌、肺癌、大腸癌、膵臓癌、腎臓癌又は胃癌の細胞である請求項１又は２記載の医薬。