JP4699415B2 - マイクロ波に補助されたdnaのpcr増幅 - Google Patents
マイクロ波に補助されたdnaのpcr増幅 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4699415B2 JP4699415B2 JP2007087814A JP2007087814A JP4699415B2 JP 4699415 B2 JP4699415 B2 JP 4699415B2 JP 2007087814 A JP2007087814 A JP 2007087814A JP 2007087814 A JP2007087814 A JP 2007087814A JP 4699415 B2 JP4699415 B2 JP 4699415B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- dna
- temperature
- annealing
- pcr
- denaturation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は、酵素に触媒される大きな生物学的分子の複製に関し、とりわけマイクロ波に補助されるDNAのPCR増幅に関する。
これまでに示したように、典型的なDNA増幅は約30PCRサイクルを必要とする。時間の観点から、変性工程は典型的には約2分間かかり、別個の鎖にプライマーをアニーリングする冷却工程は同様に約2分間かかり、そして伸長工程は更に約2分間かかる。したがって、各PCRサイクルは約6分間かかる。同様に、30サイクルの増幅は全部で約2〜3時間かかることになる。
別の因子として、典型的なPCRサイクル(たとえば、Taqポリメラーゼを使用すること;Cantor,上記)は組成物の温度を上方(92〜96℃で30〜60秒間の変性)、その後下方(55〜60℃で約30秒間のアニーリング)、そして再び上方(約72℃で約60秒間の伸長)に移動させることを包含するため、温度の変動が望ましくない変更を引き起こす可能性があり、それらは急速に拡大される。当該技術分野で一般によく理解されているように、典型的なPCR装置は複数のチューブホルダー又はマイクロタイタープレートホルダーを使用し、それらは加熱部分と冷却浴により、又は熱電気的加熱及び冷却により、又は強制対流加熱及び冷却により、又は2つ及びそれ以上の水浴間を移動させることにより温度制御されている。Cantor、上記、103ページを参照されたい。
さらに別の因子として、変性工程が比較的高温を必要とするため、PCR試料中に存在する別の化合物、そして最も典型的には伸長酵素はこれらの高い変性温度で安定を維持しなくてはならない。したがって、これらの温度要求性がPCRに利用可能な酵素の選択を事実上限定する。
要旨
一側面では、本発明は、DNAのPCR増幅を実行するための方法であって、DNAと、プライマー(単数又は複数)と、複製酵素(単数又は複数)とからなる組成物を約60℃未満の温度に維持し、該DNAを約60℃未満の温度に維持しながら、該DNAを変性させるために十分なマイクロ波放射の第1のパルスを該DNAに向け、該DNAを約60℃未満の温度に維持しながら、該プライマーを別個のDNA鎖上にアニーリングさせ、そして、該DNAを約60℃未満の温度に維持しながら、一次配列を複製しかつ伸長させるために十分なマイクロ波放射の第2のパルスを該アニーリングしたDNA鎖に向けることを含む、前記方法である。
具体的な説明
本発明は、DNAのPCR増幅を実行する方法である。当該技術分野でよく理解されているように、PCR増幅は具体的な核酸配列及びDNA又はRNAに対して実行することができる。そのもっとも広い意味において、本発明は、核酸、とりわけDNAに見出される任意の1以上の所望する具体的な核酸配列を増幅することができる。したがって、本発明は、この比較的広い意味で理解されることになる。
マイクロ波放射を適用しながら、前もって化学反応を冷却するための装置及び技術の適切な説明は、本発明の譲受人に譲渡された、米国特許第6,744,024号及び6,917,023号に示され、それらのそれぞれの内容は参照によりそのまま本明細書に援用される。試薬を前もって冷却しながら、マイクロ波に補助された化学反応を実行するための市販の装置は本発明の譲受人、CEM Corporation,Matthews,North Calolina,USAから、商品名DISCOVER(登録商標)COOLMATE(登録商標)という名称で入手可能である。
ある態様では、方法は開始から終了まで試料の温度を50℃以下、そしてある態様では45℃以下に維持することを含む。
最も一般的な態様では、増幅はDNA試料に対して実行され、そして単一の試料又は(共存する)複数の試料のいずれかを包含する。複数の試料の場合、本方法は同一DNA試料を同時に伸長するか、又は異なるDNA試料を同時に伸長することを含んでいてもよい。ある態様では、本方法はマイクロタイタープレート使用の場合のように、少なくとも96個のDNA試料を伸長することを含んでいてもよい。
P/S=(1+E)nであり、
ここで、Sは出発物質の量であり、Pは産物の量であり、そしてnはサイクル数である。
以下は本発明の各種の態様である。
1.DNAのPCR増幅を実行するための方法であって:
DNAと、プライマーと、複製酵素とからなる組成物を約60℃未満の温度に維持し;
該DNAを約60℃未満の温度に維持しながら、該DNAを変性させるために十分なマイクロ波放射の第1パルスを該DNAに向け;
該DNAを約60℃未満の温度に維持しながら、該プライマーを別個のDNA鎖上にアニーリングさせ;
該DNAを約60℃未満の温度に維持しながら、一次配列を複製しかつ伸長させるために十分なマイクロ波放射の第2パルスを該アニーリングしたDNA鎖に向けること
を含む、前記方法。
2.約60℃より高い温度で変性する複製酵素でDNAを増幅することを含む、上記1に記載の方法。
3.約45℃より高い温度で変性する複製酵素でDNAを増幅することを含む、上記1に記載の方法。
4.変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程の間、組成物を約45℃より低い温度に維持することを含む、上記1に記載の方法。
5.DNAと、プライマーと、複製酵素とからなる複数の組成物に対して、同時に変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程を実行することを含む、上記1に記載の方法。
6.複数の同一試料に対して、同時の変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程を実行することを含む、上記5に記載の方法。
7.少なくとも2種の異なる試料に対して同時の変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程を実行することを含む、上記5に記載の方法。
8.変性工程の温度より低い温度でプライマーをアニーリングさせることを含む、上記1に記載の方法。
9.伸長工程の温度より低い温度でプライマーをアニーリングさせることを含む、上記1に記載の方法。
10.変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程の間、所望する温度を維持するために、DNAと、プライマーと、複製酵素とからなる組成物を前もって冷却することを含む、上記1に記載の方法。
11.DNAのパルス適用工程が、1秒以下の間に約50〜250ワットのパルスを適用することを含む、上記1に記載の方法。
12.不活性ガスで試料を前もって冷却することにより所望する温度を維持することを含む、上記1に記載の方法。
13.液体で試料を前もって冷却することにより所望する温度を維持することを含む、上記1に記載の方法。
14.アニーリング工程の間に組成物にマイクロ波放射のパルスを向けることを更に含む、上記1に記載の方法。
15.マイクロ波に補助されたPCRによる核酸増幅の方法であって:
核酸試料を変性、アニーリング、及び伸長させ、ここで、少なくとも該変性工程及び伸長工程はマイクロ波放射の影響下で実行し;
同時に開始から終了まで該試料の温度が40℃より大きく変化することを妨げ;
そして同時に開始から終了まで該試料の温度を60℃以下に維持すること
を含む、前記方法。
16.開始から終了まで試料の温度が20℃より大きく変化するのを妨げることを含む、上記15に記載の方法。
17.開始から終了まで試料の温度が10℃より大きく変化するのを妨げることを含む、上記15に記載の方法。
18.開始から終了まで試料の温度を50℃以下に維持することを含む、上記15に記載の方法。
19.開始から終了まで試料の温度を45℃以下に維持することを含む、上記15に記載の方法。
20.少なくとも2サイクルの変性、アニーリング、及び伸長を含む、上記15に記載の方法。
21.少なくとも30サイクルの変性、アニーリング、及び伸長を含む、上記15に記載の方法。
22.DNA試料の変性、アニーリング、及び伸長を含む、上記15に記載の方法。
23.単一のDNA試料の変性、アニーリング、及び伸長を含む、上記22に記載の方法。
24.少なくとも2種のDNA試料の変性、アニーリング、及び伸長を含む、上記22に記載の方法。
25.異なるDNA試料の変性、アニーリング、及び伸長を含む、上記24に記載の方法。
26.少なくとも96種のDNA試料の変性、アニーリング、及び伸長を含む、上記22に記載の方法。
27.異なるDNA試料の変性、アニーリング、及び伸長を含む、上記26に記載の方法。
28.マイクロ波放射の影響下でサイクルを実行する工程が、DNA試料にパルス放射を適用することを含む、上記15に記載の方法。
29.変性工程のためにマイクロ波放射の第1のパルスを適用し、そして伸長工程のためにマイクロ波放射の第2のパルスを適用することを含む、上記28に記載の方法。
30.マイクロ波に補助されたPCRによる核酸増幅の方法であって:
少なくとも20PCRサイクルを含み、各サイクルが、
DNA試料を変性、アニーリング、及び伸長させ、ここで、少なくとも変性工程及び伸長工程はマイクロ波放射の影響下で実行し;
同時に開始から終了まで該試料の温度が20℃より大きく変化するのを妨げ;
そして同時に開始から終了まで該試料の温度を50℃以下に維持すること
を含む、前記方法。
31.1時間未満で20サイクルを実行することを含む、上記30に記載の方法。
32.30分間未満で20サイクルを実行することを含む、上記30に記載の方法。
33.0.6〜0.9の効率を含む、上記30に記載の方法。
34.PCRによるDNA増幅サイクルを実行する方法であって:
約60℃より高い温度で変性する複製酵素の存在下で、DNAを複製させるために十分なマイクロ波放射の第1のパルスを、DNAと、プライマーと、複製酵素とからなる組成物に向け;
該プライマーを別個のDNA鎖上にアニーリングさせ;
一次配列を複製しかつ伸長させるために十分なマイクロ波放射の第2のパルスを該アニーリングしたDNA鎖に向け;そして
該複製酵素を補充することなく、少なくとも2回、変性、アニーリング、及び伸長サイクルを反復すること
を含む、前記方法。
35.各PCRサイクルを通して、DNAと、プライマーと、複製酵素とからなる組成物を約60℃未満の温度に維持することを含む、上記34に記載の方法。
36.各PCRサイクルを通して、DNAと、プライマーと、複製酵素とからなる組成物を約45℃未満の温度に維持することを含む、上記34に記載の方法。
37.約45℃より高い温度で変性する複製酵素を含む組成物に、マイクロ波放射の第1のパルスを向けることを含む、上記34に記載の方法。
38.複製酵素を補充することなく、少なくとも20回、変性、アニーリング、及び伸長サイクルを反復することを含む、上記34に記載の方法。
39.複製酵素を補充することなく、少なくとも30回、変性、アニーリング、及び伸長サイクルを反復することを含む、上記34に記載の方法。
Claims (18)
- マイクロ波に補助されたPCRによる核酸増幅の方法であって:
少なくとも20PCRサイクルを実行し、各サイクルが、
DNA試料を変性、アニーリング、及び伸長させ、ここで、少なくとも変性工程及び伸長工程はマイクロ波放射の影響下で実行し;
同時に各PCRサイクルの間は開始から終了まで該試料の温度が20℃より大きく変化するのを妨げ;そして
同時に各PCRサイクルの間及び少なくとも20PCRサイクルの全てのサイクル間において開始から終了まで該試料の温度を50℃以下に維持すること
を含む、前記方法。 - 1時間未満で20サイクルを実行することを含む、請求項1に記載の方法。
- 0.6〜0.9の効率を含む、請求項1に記載の方法。
- 約60℃より高い温度で変性する複製酵素の存在下で、DNA試料に対して十分なマイクロ波放射の第1のパルスを、DNAとプライマーとからなる組成物に向け;
該プライマーを別個のDNA鎖上にアニーリングさせ;
一次配列を複製しかつ伸長させるために十分なマイクロ波放射の第2のパルスを該アニーリングしたDNA鎖に向け;そして
該複製酵素を補充することなく、少なくとも2回、変性、アニーリング、及び伸長サイクルを反復すること
を含む、請求項1に記載の方法。 - 各PCRサイクルを通して、DNAと、プライマーと、複製酵素とからなる組成物を約45℃未満の温度に維持することを含む、請求項4に記載の方法。
- 約45℃より高い温度で変性する複製酵素を含む組成物に、マイクロ波放射の第1のパルスを向けることを含む、請求項4に記載の方法。
- 複製酵素を補充することなく、少なくとも20回、変性、アニーリング、及び伸長サイクルを反復することを含む、請求項4に記載の方法。
- 30分間未満で20サイクルを実行することを含む、請求項1に記載の方法。
- 60℃より高い温度で変性する複製酵素でDNAを増幅することを含む、請求項1に記載の方法。
- 約45℃より高い温度で変性する複製酵素でDNAを増幅することを含む、請求項1に記載の方法。
- 変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程の間、DNA試料を45℃より低い温度に維持することを含む、請求項1に記載の方法。
- 複数の同一試料に対して、同時に変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程を実行することを含む、請求項1に記載の方法。
- 少なくとも2種の異なる試料に対して同時に変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程を実行することを含む、請求項1に記載の方法。
- 変性工程の温度より低い温度でプライマーをアニーリングさせることを含む、請求項1に記載の方法。
- 伸長工程の温度より低い温度でプライマーをアニーリングさせることを含む、請求項1に記載の方法。
- 変性工程、アニーリング工程、及び伸長工程の間、所望する温度を維持するために、DNA試料を前もって冷却することを含む、請求項1に記載の方法。
- 第1のパルス又は第2のパルスを向ける工程が、50〜250ワットのパルスを適用することを含む、請求項4に記載の方法。
- DNA試料が複製酵素を含み、そして、複製酵素を補充することなく、20PCRサイクルを実行することをさらに含む、請求項1に記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US11/278,286 | 2006-03-31 | ||
US11/278,286 US7537917B2 (en) | 2006-03-31 | 2006-03-31 | Microwave assisted PCR amplification of DNA |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007267738A JP2007267738A (ja) | 2007-10-18 |
JP4699415B2 true JP4699415B2 (ja) | 2011-06-08 |
Family
ID=38075483
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007087814A Expired - Fee Related JP4699415B2 (ja) | 2006-03-31 | 2007-03-29 | マイクロ波に補助されたdnaのpcr増幅 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7537917B2 (ja) |
EP (1) | EP1840226A1 (ja) |
JP (1) | JP4699415B2 (ja) |
CA (1) | CA2582857A1 (ja) |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090047673A1 (en) | 2006-08-22 | 2009-02-19 | Cary Robert B | Miniaturized lateral flow device for rapid and sensitive detection of proteins or nucleic acids |
EP3067694A1 (en) | 2008-05-05 | 2016-09-14 | Los Alamos National Security, LLC | Lateral flow-based nucleic acid sample preparation device, integrated with passive fluid flow control |
DE102008059985B3 (de) * | 2008-12-02 | 2010-04-01 | Ip Bewertungs Ag | Real-Time-PCR mittels Gigahertz- oder Terahertz-Spektrometrie |
CN102597264A (zh) * | 2009-10-21 | 2012-07-18 | 里博克斯艾克斯有限公司 | Rna指数式扩增的方法以及rna反应器 |
US20120202250A1 (en) * | 2009-10-21 | 2012-08-09 | Riboxx Gmbh | Method for Exponential Amplification of RNA Using Thermostable RNA-dependent RNA Polymerase |
EP2619318B1 (en) * | 2010-09-21 | 2014-12-24 | RiboxX GmbH | Microwave-driven rna polymerization by rna polymerases of caliciviruses |
US8795592B2 (en) | 2010-09-23 | 2014-08-05 | Analogic Corporation | Sample thermal cycling |
KR101878889B1 (ko) | 2011-04-20 | 2018-07-16 | 메사 바이오테크, 인크. | 핵산의 왕복 증폭 반응 |
US9255290B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-02-09 | The Regents Of The University Of California | Methods and devices for non-therman polymerase chain reaction |
GB201611469D0 (en) | 2016-06-30 | 2016-08-17 | Lumiradx Tech Ltd | Improvements in or relating to nucleic acid amplification processes |
GB2569965A (en) | 2018-01-04 | 2019-07-10 | Lumiradx Uk Ltd | Improvements in or relating to amplification of nucleic acids |
WO2020175406A1 (ja) * | 2019-02-28 | 2020-09-03 | 池田食研株式会社 | 遺伝子増幅法及び遺伝子増幅用キット |
WO2020210420A1 (en) | 2019-04-09 | 2020-10-15 | Sigma-Aldrich Co. Llc | Accelerated polymerase chain reaction based on thermocycling enabled by millimeter wave heating |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000047732A1 (de) * | 1999-02-12 | 2000-08-17 | Biotix Gmbh | Verfahren zur auftrennung von in lösung befindlichen doppelsträngigen nukleinsäuren in einzelsträngige nukleinsäuren |
JP2002532239A (ja) * | 1998-12-17 | 2002-10-02 | パーソナル ケミストリー イ ウプサラ アーベー | 化学反応を行うためのマイクロ波装置及び方法 |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4683202A (en) * | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4889818A (en) * | 1986-08-22 | 1989-12-26 | Cetus Corporation | Purified thermostable enzyme |
NL9000481A (nl) | 1990-02-28 | 1991-09-16 | Kreatech Biotech Bv | Inrichting voor het automatisch uitvoeren van een biotechnologisch proces bij verschillende gewenste temperaturen. |
US5432065A (en) * | 1993-03-30 | 1995-07-11 | United States Biochemical Corporation | Cycle sequencing with non-thermostable DNA polymerases |
GB9324843D0 (en) | 1993-12-03 | 1994-01-19 | Ray Ronnie A | Apparatus for performing chemical reaction |
WO1998006876A1 (en) | 1996-08-16 | 1998-02-19 | Pharmacia Biotech Inc. | Device and methods for remotely induced thermal transduction in chemical and biochemical reactions |
AUPO652997A0 (en) | 1997-04-30 | 1997-05-29 | Kindconi Pty Limited | Temperature cycling device and method |
US20020055148A1 (en) * | 1999-03-11 | 2002-05-09 | Jcr Pharmaceutical Co., Ltd. | Cloning method for DNA fragments using arbitrarily primed PCR |
JP5025844B2 (ja) * | 2000-06-02 | 2012-09-12 | 日産化学工業株式会社 | マイクロ波による膜透過制御方法 |
US6753517B2 (en) | 2001-01-31 | 2004-06-22 | Cem Corporation | Microwave-assisted chemical synthesis instrument with fixed tuning |
US6403341B1 (en) * | 2001-08-02 | 2002-06-11 | Wayne M. Barnes | Magnesium precipitate hot start method for PCR |
JP3779600B2 (ja) | 2001-11-27 | 2006-05-31 | 株式会社日立製作所 | Pcr用プライマーおよびpcr用プライマーの塩基配列決定法 |
AUPS205802A0 (en) | 2002-05-01 | 2002-06-06 | Bio-Molecular Holdings Pty Limited | Improved cycling device and method |
US6744024B1 (en) | 2002-06-26 | 2004-06-01 | Cem Corporation | Reaction and temperature control for high power microwave-assisted chemistry techniques |
US7144739B2 (en) | 2002-11-26 | 2006-12-05 | Cem Corporation | Pressure measurement and relief for microwave-assisted chemical reactions |
US20040179977A1 (en) | 2003-03-10 | 2004-09-16 | Cem Corporation | Controlled Pressure Release Vessel for Microwave Assisted Chemistry |
JP2005021120A (ja) | 2003-07-01 | 2005-01-27 | Yokogawa Electric Corp | 遺伝子増幅方法および遺伝子増幅装置 |
US6989519B2 (en) | 2003-09-02 | 2006-01-24 | Cem Corporation | Controlled flow instrument for microwave assisted chemistry with high viscosity liquids and heterogeneous mixtures |
US7041947B2 (en) | 2003-09-02 | 2006-05-09 | Cem Corporation | Controlled flow instrument for microwave assisted chemistry with high viscosity liquids and heterogeneous mixtures |
US7307248B2 (en) | 2003-12-09 | 2007-12-11 | Cem Corporation | Method and apparatus for microwave assisted high throughput high pressure chemical synthesis |
US20050260096A1 (en) * | 2004-05-18 | 2005-11-24 | Steris Inc. | Method and apparatus for vaporizing a sterilant fluid using microwave energy |
-
2006
- 2006-03-31 US US11/278,286 patent/US7537917B2/en active Active
-
2007
- 2007-03-16 EP EP07104375A patent/EP1840226A1/en not_active Ceased
- 2007-03-29 CA CA002582857A patent/CA2582857A1/en not_active Abandoned
- 2007-03-29 JP JP2007087814A patent/JP4699415B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002532239A (ja) * | 1998-12-17 | 2002-10-02 | パーソナル ケミストリー イ ウプサラ アーベー | 化学反応を行うためのマイクロ波装置及び方法 |
WO2000047732A1 (de) * | 1999-02-12 | 2000-08-17 | Biotix Gmbh | Verfahren zur auftrennung von in lösung befindlichen doppelsträngigen nukleinsäuren in einzelsträngige nukleinsäuren |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2582857A1 (en) | 2007-09-30 |
JP2007267738A (ja) | 2007-10-18 |
US20070231798A1 (en) | 2007-10-04 |
US7537917B2 (en) | 2009-05-26 |
EP1840226A1 (en) | 2007-10-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4699415B2 (ja) | マイクロ波に補助されたdnaのpcr増幅 | |
JP4426640B1 (ja) | ハウスキーピング遺伝子のmRNA検出のための核酸増幅用プライマー及び該プライマーを用いた検査方法 | |
CN108368503A (zh) | 用于受控dna片段化的方法 | |
JP2010268812A (ja) | 遺伝子発現の定量方法 | |
JPH05500012A (ja) | 核酸配列のプロモーターライゲーション活性化転写増幅 | |
JP7026248B2 (ja) | 二本鎖dnaを増幅するための方法およびキット | |
JP2006519621A5 (ja) | ||
JP2021506314A (ja) | 単一方向デュアルプローブプライマー伸長による標的濃縮 | |
Weissensteiner et al. | PCR technology: current innovations | |
JP2021000138A (ja) | 診断方法及び組成物 | |
JP2021536255A (ja) | Rnaライブラリーの構築のための方法及びキット | |
JPH09500539A (ja) | 核酸のリンクされた線形増幅 | |
KR20240006024A (ko) | 단일 가닥 dna의 증폭 | |
JP5798631B2 (ja) | Rt−pcr反応緩衝液中での細胞溶解のための方法 | |
Krawetz | The polymerase chain reaction: opportunities for agriculture. | |
JP5997407B1 (ja) | 多項目増幅手法 | |
JP6852267B2 (ja) | 核酸検出反応液中のプローブの安定化方法 | |
Bashari | Development of polymerase chain reaction knowledge | |
US20220411861A1 (en) | A Multiplex Method of Preparing a Sequencing Library | |
JP5077813B2 (ja) | 核酸の増幅方法 | |
US20140273099A1 (en) | Methods and devices for non-therman polymerase chain reaction | |
JP2002233385A (ja) | 核酸の増幅方法及びそれに用いられるプライマー固定化担体 | |
US20070092899A1 (en) | Multiple displacement amplification with blocker DNA | |
Labău | RESIDUAL DISEASE IN CHRONIC MYELOID LEUKEMIA AFTER INDUCTION OF MOLECULAR REMISSION | |
Han et al. | Multiple target loci assembly sequencing (mTAS) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080312 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080319 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100128 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100427 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100506 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100528 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100602 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100628 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100701 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100728 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100928 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101217 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20101217 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110202 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110302 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4699415 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |