JP4549699B2 - ラン共生菌及びシナノショウキランの人工発芽方法・人工増殖方法 - Google Patents
ラン共生菌及びシナノショウキランの人工発芽方法・人工増殖方法 Download PDFInfo
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Description
発芽促進剤を入れた培地に種子を播種して培養する第一の培養工程と、
発根促進剤を入れた培地で培養する第二の培養工程を設けて苗を生長させる培養工程と、
培養した苗を培地から培養土に移し替えて順化(適応)、育苗させる工程とからなるものである。
極東社・・・ペプトン、
雪印社・・・オートミール
ハイポネックス社・・・ハイポネックス
difco社・・・「PDA(potato dextrose agar)」PDA培地、モルトエキス
<共生菌の単離>
共生菌の単離のため、1)自生の植物組織(リゾーム)内から採る方法、2)土壌から採る方法、3)種子を埋めて発芽後発生したプロトコーム(原塊体)から採る、の三つの菌の採取方法を試みた。
この他、腐生ランの共生菌で知られる、ナラタケ菌5系統及びナラタケモドキ菌1系統を取り寄せ、計9系統の菌について共生するか確認を行ったが、いずれも細胞内への菌糸の進入は見られなかった。
<共生発芽>
無菌培養では発芽しなかったシナノショウキランの種子を使って共生発芽試験を実施した。
人工増殖させたシナノショウキランのリゾームを生育場所に戻し、定着可能であるかを確認した。無菌リゾーム及び特定ラン共生菌に感染させたリゾームを不織布の袋に現地土壌とともに入れ、資料採取した群落確認場所に埋め戻し、50日後、130日後、490日後に掘り返して、リゾームの成長を観察した。
全く葉緑素を持たないショウキラン属の生育には、共生菌が必要でありシナノショウキランを自然へ戻し保護を図るには、共生菌の発見が必須であった。腐生ランの共生菌としては、リゾクトニア属やナラタケ菌が知られているが、本研究で発見した共生菌はこれらとは異なっていた。これまでの同定では、1973年に記載されたSpinulospora-pucciniiphila (Deighton 1973)に類似した分生子をつくることが分かっているが、いずれにせよ、これまでラン科植物との共生が知られていない菌であることは明らかである。
Claims (11)
- スピヌロスポラ(Spinulospora)と分生子が形態的に似ているが、分生子のサイズが相対的に大きく且つ表面突起物の形状が異なるとともに、生育地がかけ離れていることから新属に属すると考えられる糸状菌(仮名:SLF(Spinulospora-like fungus)株)で、寄託番号:FERM−P−19696で特定されるものからなることを特徴とするラン共生菌。
- 請求項1記載のラン共生菌(以下「特定ラン共生菌」という。)を予め継代用培地で育成して隣接する水寒天まで繁茂させた菌糸上に、シナノショウキランの種子を播種し、前記特定ラン共生菌と共生させながら発芽させることを特徴とするシナノショウキランの人工発芽方法。
- 前記継代用培地の成分組成が、モルトエキス:10〜30kgm-3、炭素源:10〜30kgm-3、窒素源:0.1〜3.0kgm-3、必要により凝固剤:5〜60kgm-3の組成要件を満たすことを特徴とする請求項2記載のシナノショウキランの人工発芽方法。
- シナノショウキランの種子を、請求項1に記載の特定ラン共生菌(FERM−P−19696)とともに、該特定ラン共生菌の栄養分を含む無菌発芽用培地上に共生させてシナノショウキランを発芽させることを特徴とするシナノショウキランの人工発芽方法。
- 前記特定ラン共生菌の栄養分が、麦系穀粉であることを特徴とする請求項4記載のシナノショウキランの人工発芽方法。
- 雰囲気温度を、約10〜30℃に設定して発芽をさせることを特徴とする請求項2〜5いずれか一記載のシナノショウキランの人工発芽方法。
- 請求項1に記載の特定ラン共生菌(FERM−P−19696)を予め継代用培地で育成して隣接する水寒天まで繁茂させた菌糸上で、無菌のシナノショウキランの組織を該特定ラン共生菌と共生させながら成長させることを特徴とするシナノショウキランの人工増殖方法。
- 前記無菌のシナノショウキランの組織が、培養したリゾーム(根茎)であることを特徴とする請求項7記載のシナノショウキランの人工増殖方法。
- 前記継代用培地が、モルトエキス:10〜30kgm-3、炭素源:10〜30kgm-3、窒素源:0.1〜3kgm-3、必要により凝固剤:kgm-3の組成要件を満たすことを特徴とする請求項7又は8記載のシナノショウキランの人工増殖方法。
- ショウキラン属の種子を、請求項1に記載の特定ラン共生菌(FERM−P−19696)とともに、該特定ラン共生菌の栄養分を含む培地上に共生させてショウキラン属を発芽させることを特徴とするショウキラン属の人工発芽方法。
- 請求項1に記載の特定ラン共生菌(FERM−P−19696)を予め継代用培地で育成して隣接する水寒天まで繁茂させた菌糸上で、無菌のショウキラン属の組織を前記特定ラン共生菌と共生させながら成長させることを特徴とするショウキラン属の人工増殖方法。
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