JP4384600B2 - カノーラタンパク質単離物の減色 - Google Patents
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- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
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-
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Description
本出願は、米国特許法第119条第(e)項に基づいて、同時係属の米国仮特許出願、2002年6月20日出願の第60/389,957号、および2002年11月6日出願の第60/432,985号からの優先権を主張する。
本発明は、カノーラ種子粗粉からのカノーラタンパク質単離物の回収に関する。
譲受者に譲受されその開示がここで参考のために取り込まれる米国特許第5,844,086号および第6,005,076号(「Murray II」)において、脂肪含量の多いカノーラ油糧種子粗粉を含む、脂肪含量の多い油糧種子粗粉からタンパク質単離物を単離するための方法が開示されている。このプロセスに含まれる工程は、油糧種子粗粉からのタンパク質材料を可溶化し、粗粉中の脂肪も可溶化し、得られるタンパク質水溶液から脂肪を除去することを含む。タンパク質水溶液は、脂肪除去工程の前または後に残留油糧種子粗粉から分離することができる。次に、イオン強度を実質的に一定に維持しつつ、脱脂タンパク質溶液を濃縮してタンパク質濃度を上昇させ、その後、濃縮されたタンパク質溶液をさらなる脂肪除去工程に付することができる。次に、濃縮されたタンパク質溶液を希釈して、ミセル状の分離したタンパク質滴として高度に会合したタンパク質分子の曇状塊の形成を引き起こす。タンパク質ミセルを沈降させて、「タンパク質ミセル塊」すなわちPMMと呼ばれる凝固し癒着した濃い無定形の粘着性のグルテン様タンパク質単離物塊を形成し、これを、残留水相から分離し乾燥する。
本発明者らは、本明細書で、カノーラ種子を処理してカノーラタンパク質粗粉を形成し、カノーラタンパク質粗粉を抽出に付してタンパク質水溶液を形成し、タンパク質水溶液を濃縮し、その濃縮タンパク質水溶液からカノーラタンパク質単離物を取り出す、カノーラタンパク質単離物を形成する方法の改善を提供する。
−カノーラ種子を処理
−粗粉の処理
−特定形態のカノーラタンパク質粗粉の利用
−特定条件下でカノーラタンパク質の抽出を行うこと
−抽出物の処理
−回収カノーラタンパク質単離物の処理
を含む1つまたは複数のいくつかのステップを採用できる。
を含むカノーラ油糧種子粗粉からのカノーラタンパク質単離物の調製方法が提供される。
を含むカノーラ油糧種子粗粉からのカノーラタンパク質単離物の調製方法が提供される。
を含むカノーラ油糧種子粗粉からのカノーラタンパク質単離物の調製方法が提供される。
を含むカノーラ油糧種子粗粉からのカノーラタンパク質単離物の調製方法が提供される。
を含むカノーラ油糧種子粗粉からのカノーラタンパク質単離物の調製方法が提供される。
を含むカノーラ油糧種子粗粉からのカノーラタンパク質単離物の調製方法が提供される。
着色の改善は種子を処理することによって達成できる。殻を除去した種子を蒸気を使用してミロシナーゼの加熱不活性化に付す。次いで、不活性化した種子を通常の方法で処理して種子から油糧を取り出し、カノーラ油糧種子粗粉を形成する。
実施例1:
この実施例ではタンパク質の抽出およびタンパク質溶液の着色に対する各種パラメーターの影響を示す。
この実施例では、抽出ステップに対する抗酸化剤添加の影響を例示する。
この実施例では、抗酸化剤を用いる抽出に対する塩濃度およびpHの影響を例示する。
この実施例では、低濃度亜硫酸ナトリウムの使用およびパージ抽出の影響を説明する。
この実施例では、抗酸化剤および透析濾過を使用する市販カノーラ粗粉からのカノーラタンパク質単離物の調製を例示する。
この実施例では、低温焙煎粗粉および気流脱溶媒粗粉からのタンパク質抽出物の着色に対する温度の影響を示す。
この実施例では、カノーラ油糧種子粗粉からのタンパク質抽出物の着色に対するいくつかのパラメーターの影響を示す。
この実施例では、製品着色に対するカノーラタンパク質単離物を溶媒抽出に付すことの影響を示す。
この実施例ではカノーラタンパク質単離物の製造における抗酸化剤および吸着剤の使用を例示する。
この実施例では、抽出ステップでの抗酸化剤および吸着剤の使用を例示する。
この実施例では、着色に対するカノーラ油糧種子粗粉のエタノール洗浄の影響を例示する。
この実施例では、粗粉のエタノール抽出を伴うカノーラタンパク質単離物の調製を例示する。
本開示の概要として、本発明は、単離物の調製中に着色物を生じさせる成分を除去するように設計された1つまたは複数の操作を実施すること、着色物を生じさせる成分の酸化を抑制すること、および着色物を除去することによる、着色の減少したカノーラタンパク質単離物の回収を提供する。本発明の範囲内で修正は可能である。
Claims (25)
- (a)塩水溶液を使用してカノーラ油糧種子粗粉を抽出し、カノーラ油糧種子粗粉中のタンパク質を可溶化し、5〜6.8のpHを有するタンパク質水溶液を形成すること、
(b)油糧種子粗粉残渣からタンパク質水溶液を分離すること、
(c)選択膜技術を使用してイオン強度を実質的に一定に維持しながら前記タンパク質水溶液のタンパク質濃度を高め、濃縮タンパク質溶液を準備すること、
(d)該濃縮タンパク質溶液を、温度が15℃未満の冷水中に希釈し、水相中に離散したタンパク質ミセルを形成すること、
(e)該タンパク質ミセルを沈降させて、無定形粘着性ゼラチン状グルテン様ミセル集合体を形成すること、および
(f)乾燥重量基準少なくとも90重量%(N×6.25)のタンパク質濃度を有する上澄みからタンパク質ミセルを回収すること、
を含むカノーラ油糧種子粗粉からのカノーラタンパク質単離物の調製方法であって、
(a)該カノーラ油糧種子粗粉をエタノール中に1:3〜1:10のw/v比で分散させ、生じたスラリーを15℃〜45℃の温度で5〜60分間攪拌し、および洗浄したカノーラ油糧種子粗粉を該スラリーから分離すること、ならびにさらなるフェノール化合物および/または目に見える着色が回収されなくなるまで複数回実施する、および/または
(b)該希釈工程の前に該濃縮タンパク質溶液を透析濾過する、および/または
(c)該タンパク質ミセル集合体を乾燥し、乾燥したカノーラタンパク質単離物をアルコール水溶液で抽出する、および/または
(d)前記濃縮したタンパク質溶液を該希釈工程の前に低温殺菌する、
ことを特徴とする、調製方法。 - 前記塩水溶液が抗酸化剤を含むことを特徴とする、請求項1に記載の方法。
- 前記抗酸化剤が、亜硫酸ナトリウムまたはアスコルビン酸であり、前記塩水溶液中に0.01〜1重量%含むことを特徴とする、請求項2に記載の方法。
- 前記透析濾過が、2〜20倍容の透析濾過溶液を用いて実施されることを特徴とする、請求項1〜3のいずれかに記載の方法。
- 前記抽出ステップが、5〜6.8の範囲のpHを有する塩水溶液を使用して実施され、前記の透析濾過溶液が前記抽出ステップで使用した溶液と同一の濃度およびpHを有する塩水溶液であることを特徴とする、請求項1〜4のいずれかに記載の方法。
- 前記透析濾過が、3000〜50000ダルトンの範囲の分画分子量を有する膜を使用することを特徴とする、請求項1〜5のいずれかに記載の方法。
- 前記膜が5000〜10000ダルトンの範囲の分画分子量を有する膜であることを特徴とする、請求項6に記載の方法。
- 前記透析濾過溶液が、前記透析濾過ステップの少なくとも一部において抗酸化剤を含むことを特徴とする、請求項1〜7のいずれかに記載の方法。
- 前記抗酸化剤が0.01〜1重量%の亜硫酸ナトリウムまたはアスコルビン酸であることを特徴とする、請求項8に記載の方法。
- 前記抽出ステップが、5〜6.8のpHを有し抗酸化剤を含む塩水溶液を用いることを特徴とする、請求項1〜9のいずれかに記載の方法。
- 前記上澄液を限外濾過を用いて濃縮して濃縮上澄液を準備し、該濃縮上澄液を透析濾過することを特徴とする、請求項1〜10のいずれかに記載の方法。
- 前記透析濾過が、2〜20倍容の透析濾過溶液を使用することを特徴とする、請求項11に記載の方法。
- 前記透析濾過が、3000〜50000ダルトンの範囲の分画分子量を有する膜を使用することを特徴とする、請求項11または12に記載の方法。
- 前記膜が5000〜10000ダルトンの範囲の分画分子量を有する膜であることを特徴とする、請求項13に記載の方法。
- 前記透析濾過溶液が、前記透析濾過ステップの少なくとも一部において抗酸化剤を含むことを特徴とする、請求項11〜14のいずれかに記載の方法。
- 前記抗酸化剤が0.01〜1重量%の亜硫酸ナトリウムまたはアスコルビン酸であることを特徴とする、請求項15に記載の方法。
- 前記透析濾過タンパク質溶液を前記希釈ステップの前に着色吸着剤と接触させることを特徴とする、請求項1〜16のいずれかに記載の方法。
- 前記着色吸着剤がポリビニルピロリドンであることを特徴とする、請求項17に記載の方法。
- 前記ポリビニルピロリドンを0.5〜6重量%使用することを特徴とする、請求項18に記載の方法。
- 前記低温殺菌ステップが、透析濾過されたタンパク質溶液を55〜70℃の温度で10〜15分間加熱することを特徴とする、請求項1〜19のいずれかに記載の方法。
- 前記アルコール水溶液が、2:1〜1:2のエタノール:水の容積比を有するエタノール水溶液であり、前記抽出ステップが、カノーラタンパク質単離物をアルコール水溶液中に5〜25重量%の量で分散させること、生じたスラリーを30〜60分間攪拌すること、および該スラリーから抽出したカノーラタンパク質単離物を分離することを特徴とする、請求項1〜20のいずれかに記載の方法。
- 前記抽出ステップを、好ましくはカノーラタンパク質単離物からさらなるフェノール化合物および/または目に見える着色が除去されなくなるまで繰り返すことを特徴とする、請求項21に記載の方法。
- 前記カノーラ油糧種子粗粉を、前記抽出ステップに先立って、油抽出用溶媒の残渣を除去するために50℃未満の温度で気流脱溶媒することを特徴とする、請求項1〜22のいずれかに記載の方法。
- 前記カノーラ油糧種子粗粉を、前記抽出ステップに先立って、油抽出用溶媒の残渣を除去するために100℃未満の温度で脱溶媒することを特徴とする、請求項1〜22のいずれかに記載の方法。
- 前記カノーラ油糧種子を処理して油糧種子に含まれるミロシナーゼを不活性化することを特徴とする、請求項1〜24のいずれかに記載の方法。
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