JP4118618B2 - 試料分析装置 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、試料分析装置に関し、より詳細には、試料の分析結果が試薬溶液との反応温度によって敏感に影響されるような試料を分析するための試料分析装置に関し、これらの試料を分析するために最適な温度を準備することが可能な試料分析装置に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
通常、血液、尿などの試料に含まれ、微量で直接分析するのが困難な成分は、試薬溶液中に希釈したり、その試料に試薬を反応させたりして分析することが一般的である。しかし、試料によっては試薬溶液との反応の進行が温度、光、湿度等の条件に大きく影響を受け、同一試料から得られる分析結果が大きく変化することがある。
【０００３】
例えば、血液中の末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ：peripheral blood stem cell）の分析においては、わずかな温度の変化によって、得られる分析結果が大きく変化する。
ＰＢＳＣは、白血病等の治療手段として血液細胞の源である幹細胞を移植する方法（骨髄移植）において重要な細胞であり、その細胞の数を正確に知ることが非常に重要である。具体的には、ＰＢＳＣは、幹細胞の移植として、近年普及してきている末梢血幹細胞移植（ＰＢＳＣＴ：peripheral blood stem cell transplantation）において非常に重要な細胞である。
ＰＢＳＣＴは、以下のようにして行われる。まず、患者に通常量の化学薬剤等を投与する。すると、まず末梢血中の白血球が減少し、その後５〜７日目から白血球数が上昇しはじめる。この時期に末梢血中にＰＢＳＣが増加する。
【０００４】
末梢血中に大量にＰＢＳＣが動員された時点（５〜２０日前後）において、血液成分分離装置によりＰＢＳＣを採取し、凍結保存する。ＰＢＳＣの採取の際には、末梢血中のＰＢＳＣの数の増加を正確に知る必要がある。移植に十分な量のＰＢＳＣを採取するためには、ＰＢＳＣが大量に動員されたタイミングにＰＢＳＣの採取を行う必要があるからである。
【０００５】
次に、骨髄破壊的な大量の化学・放射線療法を患者に施行し、癌細胞を壊滅させる。その後、予め採取しておいたＰＢＳＣを該患者に移植することにより、患者の造血機能の速やかな回復を図る。
末梢血中のＰＢＳＣを検出する方法として、簡便に造血前駆細胞（ＨＰＣ：Hematopoietic progenitor cell）を検出および／または計数する方法が既に報告されている（米国特許第５，８３０，７０１号）。なお、ＨＰＣとは、多能性幹細胞から各系統の血液細胞へと分化していく血液細胞分化の過程で、芽球以前の分化段階の細胞の総称であり、これが末梢血中に存在するとＰＢＳＣと称される。この方法では、免疫学的な手法を用いることなく幼若細胞を検出できる試薬（米国特許第５，４１３，９３８号）と血液試料とを反応させてＨＰＣのみを検出および／または計数することができる。
しかし、この方法によるＨＰＣの検出はわずかな温度変化によって分析結果が大きく変化する。
【０００６】
一方、従来の試料分析装置としては、加温手段を有する試薬溶液供給部と、試料を分析する分析部と、試薬溶液供給部と分析部とを接続する流路を備えた装置が既に販売されている。従来の装置では、常温より高い温度を必要とする反応については、試薬溶液を好適な反応温度を考慮して予め設定された温度にまで加温手段中で加温して、試料との反応に供することにより、温度変化による分析結果への影響を最小化していた。しかし、このような装置においては、環境温度（装置周辺の温度であり、装置内部のヒータ等が発生する熱に影響されない場所であれば装置外部のみならず装置内部の温度であってもよい。以下、この明細書において同じ）が好適な反応温度よりかなり低い場合は流路の温度も低下しており、試薬溶液供給部から分析部へ試薬溶液が供給される際に試薬溶液が流路と接触することによりその温度が低下することがある。その結果、分析に必要な反応の進行が適切に達成されず、試料の分析結果にばらつき、すなわち誤差が生じる。
【０００７】
本発明は、このような課題を解決するためになされたものであり、最適な条件で試料の分析をすることにより、正確な分析結果を得ることができる試料分析装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
本発明によれば、試薬溶液と混合された試料を分析する分析部と、分析部に試薬溶液を供給する試薬溶液供給部と、試薬溶液供給部から分析部に供給する試薬溶液を加温する加温手段と、加温手段と分析部を接続する流路と、試料を分析部に供給する試料供給部と、環境温度測定手段と、分析部内または流路内の試薬溶液の液温を測定する液温測定手段と、環境温度測定手段から得られる環境温度および／または液温測定手段から得られる液温に基づいて、加温手段によって加温された試薬溶液を試薬溶液供給部から分析部へ供給させるか否かを制御する動作制御部と、を備えることを特徴とする試料分析装置が提供される。
本発明の試料分析装置をこのような構成とすることにより、試料を分析部に供給する前に分析部や流路などの温度を試料の測定に最適な温度とすることができ、正確な分析結果を得ることが可能となる。
【０００８】
【発明の実施の形態】
分析部に供給する液体としては、試薬溶液を用いることが好ましいが、本発明の液体供給部は流路の温度を安定化させることを目的とするものであるため、水などを使用してもよい。
試薬溶液としては、試料を希釈するための希釈液、試料に含まれる成分を染色するための染色液、赤血球などの血球成分を溶血するための溶血剤などが挙げられる。
液体供給部は、試薬溶液などの液体を保管するために備えられているもの（例えば、容器、瓶、バイアルなどが挙げられる）と、容器などから所定量の液体を吸引して流路に供給するためのダイアフラムポンプやシリンジと、ダイアフラムポンプに圧力を供給する圧力源やシリンジを作動させるモータ、流路の開閉を行うバルブ、それらを接続するチューブなどからなる。
【０００９】
加温手段としては、例えば、米国特許第５，３８７，３３４号に記載の液温調整装置も使用できる。加温手段により液体は所定温度まで温められるが、その温度は、液体の種類や、所望の反応に適した温度に応じて選択されるのが好ましい。例えば、幼若細胞検出試薬であるＩＭＩ（Immatureleulocyte information）試薬（米国特許第５，４１３，９３８号）が使用される場合、試薬溶液を約32.5〜40℃に加温するのが好ましい。
【００１０】
分析部は、試料を分析するために備えられているものであって、例えば、複数の細胞情報を分析できる粒子分析装置に備えられている分析部が挙げられる。そのような分析部としては、光学式の分析部では公知のフローサイトメーター、電気抵抗式の分析部ではＲＦ／ＤＣ検出法を採用したものなどを用いることができる。ＨＰＣを分析するには、ＲＦ／ＤＣ検出法を用いる分析部を備える粒子分析装置を用いるのが好ましく、例えば、ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社製）が使用できる。
【００１１】
細胞情報としては、細胞の大きさまたは形態の情報および細胞の内部情報が挙げられる。細胞の大きさまたは形態の情報としては、直流電流が流されたアパーチャ（微細孔）を細胞が通過する際に生じる細胞の電気抵抗の違いに基づく信号（ＤＣ信号）や、低角度（例えば、光軸に対して１〜６度）散乱光が挙げられる。また、細胞の内部情報としては、高周波電流が流されたアパーチャを細胞が通過する際に生じる細胞の誘電率の違いに基づく信号（ＲＦ信号）や、高角度（例えば、光軸に対して８〜２０度）前方散乱光、側方（光軸に対して７０〜１１０度）散乱光、後方散乱光（光軸に対して１２０〜１８０度）、偏光解消度等が挙げられる。
【００１２】
流路は、加温手段から分析部へ液体を通過させるためのものであって、管状や溝状のもの等、形態は限定されない。流路の材質は装置の構成によって種々異なるが、金属、プラスチック等いずれのものであってもよい。流路の長さも装置の構成によって種々異なるが、どのような長さであってもよい。流路としては例えば、一般にチューブと呼ばれるものも使用できる。なお、本発明の流路とは、加温手段と分析部を接続する流路のことであり、加温後の液体を通過させる流路である。
【００１３】
試料供給部は、試料を一定量採取する手段、すなわちモーター、シリンジ、サンプリングバルブおよびピペット等とからなっている。試料供給部は、分析の行われる分析部に試料を供給するものであれば流路のいずれの位置に接続されていてもよい。試料供給部は、例えばペリスタポンプのようなものが使用されてもよい。
試料供給部に供給された試料は、希釈液や染色液や溶血剤などの液体（試薬溶液）と流路内で混合してもよく、試料供給部や流路に混合のための空洞をさらに備えて、その空洞内で混合させてもよく、分析部内で混合させてもよい。
【００１４】
試料と試薬溶液を混合すると、試料および試薬溶液の種類によっては、試料に含まれる成分は試薬溶液と反応する。例えば血液を試料とし、ＩＭＩ試薬を試薬溶液とすると、反応により血液中の赤血球が溶血し、幼若球以外の白血球が裸核化して縮小する。
【００１５】
環境温度測定手段は、環境温度（装置周辺の温度であり、装置内部のヒータ等が発生する熱に影響されない場所であれば装置外部のみならず装置内部の温度であってもよい）を測定するためのものであって、サーミスタ、熱電対のような温度計からなる。
液温測定手段は、分析部内または流路内の液体の液温を得るためのものであって、サーミスタのような温度計からなる。
【００１６】
動作制御部は、環境温度測定手段および／または液温測定手段から得られた環境温度および液温に基づいて、液体供給部からの液体の供給の作動を制御するためのものであって、Windows2000（マイクロソフト社製Windowsは商標）をOSとして搭載する市販のパーソナルコンピュータやＣＰＵ，ＲＯＭ，ＲＡＭなどからなるマイクロコンピュータを用いることができる。動作制御部は、環境温度測定手段から得られる環境温度と第１の所定値とを比較し、環境温度が第1の所定値以下のとき、液体供給部から分析部へ液体を供給させるのが好ましい。環境温度が第１の所定値以下であれば流路の温度が低下しているので、加温手段で温められた液体を供給させて流路を温めるためである。
【００１７】
第１の所定値は、流路を通過する液体の液温より環境温度の方が低いことによって、液体の液温が低下してしまうことがない温度を選択することができる。第１の所定値は、流路の長さや材質、所望の試薬溶液と試料の反応温度等を考慮に入れて決定することができる。具体的には、加温された液体を実際に供給させて、環境温度が何℃のとき、加温された液体の温度が低下せずに分析部まで供給されるかを調べる。そのような環境温度を、第１の所定値と規定する。
【００１８】
動作制御部は、液温測定手段から得られる液体の液温と第２の所定値とを比較し、液温が第２の所定値以下のとき、液体供給部から分析部へ液体を供給させ、再度液温測定手段にて液温を測定し、再度測定した液温が第２の所定値より大きいとき、液体供給部から分析部への液体の供給を停止させるのが好ましい。液体の液温が、第２の所定値より高ければ流路及び分析部は十分に温められていることを意味するので、もはや液体を供給する必要はないからである。逆に、液体の液温が第２の所定値以下であれば流路及び分析部の温度が液体の液温よりも低いことを意味するので、液体供給部から加温された液体を分析部へ供給して流路及び分析部を温める必要がある。このようにして、必要量のみ液体を分析部へ供給し、試料を分析する前に流路及び分析部を最適な温度にすることができる。
【００１９】
第２の所定値としては、加温された液体が分析部に達したときの液温が、試料の分析に最適な液温となるような温度を選択することができる。具体的には、加温された液体を実際に供給させて、液温測定手段で得られる液温が何℃のとき、所望の分析結果が得られるかを調べる。そのような液温を、第２の所定値と規定する。
【００２０】
動作制御部が、環境温度測定手段から得られる環境温度と第１の所定値とを比較し、環境温度が第１の所定値より大きいとき、または
液温測定手段から得られる液体の液温と第２の所定値とを比較し、液温が第２の所定値より大きいとき、分析部による分析を可能とすることが好ましい。
この状態で試料の分析を開始すれば、所望の温度での分析を行うことができ、温度による誤差を最小限に抑えることができる。
【００２１】
また、本発明の試料分析装置において、分析部は、ＨＰＣ（造血前駆細胞）、ＰＢＳＣ、白血球、赤血球、血小板のような血液成分、白血球、赤血球、細菌のような尿中の成分、測定に際して染色処理が必要な工業用粒子の分析に使用できる。中でもＨＰＣの分析においては本発明の試料分析装置は非常に有用である。ＨＰＣを分析するための試薬（例えばＩＭＩ試薬）とＨＰＣとの反応最適温度が非常に狭く、反応時のＩＭＩ試薬を最適な液温に保つことが、ＨＰＣを測定するのに重要だからである。
【００２２】
上記の制御によって、反応時のＩＭＩ試薬を最適な液温に保った場合であっても、ＨＰＣの分析においては液温が分析結果へ与える影響が非常に大きいため、わずかな液温の変動によって正確な分析結果が得られないことがある。これに対処するため、最適な液温で分析されたＨＰＣ数を真のＨＰＣ数と仮定し、液温の変動によるＨＰＣ数の変動を真のＨＰＣ数へと補正すれば、正確なＨＰＣ数が得られるのでさらに好ましい。この補正に用いる液温には、ＩＭＩ試薬の反応時に液温測定手段で得られる液温を使用できる。
正確な補正をするために、種々の液温でのＨＰＣ数をＹ軸に、その液温をＸ軸にとり、一定の関係を見出して、その関係を用いて補正を行うことができる。
【００２３】
補正は、以下の式（１）：
【数１】
【００２４】
［式中、Ｈ２は補正後のＨＰＣ数、ａは反応の最適温度、Ｈ１は補正前のＨＰＣ数、ｔ０はＸ軸交点、ｔ１はＩＭＩ試薬の反応時に液温測定手段で得られる液温である］を用いることができる。式中、ｔ０は以下のようにして求める。補正前のＨＰＣ数をＹ軸に、液温測定手段で得られる液温をＸ軸にとり、複数の分析値をそのグラフにプロットして得られる直線のＸ軸との交点をｔ０とする。なお、図３は補正前のＨＰＣ数と液温の関係を示すグラフであり、図４は補正後のＨＰＣ数と液温の関係を示すグラフである。図３に示すグラフでは、ｔ０=３４．８℃である。図４に示すグラフから、この式（１）によって適切にＨＰＣ数が補正されていることが分かる。
【００２５】
本発明の試料分析装置の概要を、図１のブロック図に基づいて簡単に説明する。これによって本発明が限定されるものではない。
本発明の試料分析装置は、試薬溶液供給部６と、加温手段８と、分析部４と、流路５と、試料供給部１５（例えば、サンプリングバルブ７、ピペット９、シリンジ１０、モーター１１からなる）と、環境温度測定手段１と、液温測定手段３と、動作制御部２とを備える試料分析装置である。分析部４と加温手段８は流路５で接続され、流路５を通して加温された試薬溶液が分析部４に供給される。
【００２６】
試料供給部１５は、流路５中のいずれかの場所に接続されてもよいし、分析部４に直接試料を供給するよう構成されてもよい。
環境温度測定手段１は装置の周辺温度を測定するためのものであり、装置内部のヒータ等が発生する熱に影響されない場所であれば装置外部のみならず装置内部に配置されてもよい。
液温測定手段３は試薬溶液の液温を測定するためのものであり、例えば分析部４の入り口近傍の流路５や分析部４内に配置される。
環境温度測定手段１および液温測定手段３は、それぞれ動作制御部２と回路で接続している。動作制御部２は、環境温度測定手段１および液温測定手段３に環境温度および液温を測定するよう独立してそれぞれに対して指令し、それに応答して測定されたそれぞれの温度は動作制御部２へ入力される。
【００２７】
試薬溶液供給部６は動作制御部２と回路で接続している。環境温度や液温のデータに基づき動作制御部２が試薬溶液を供給するよう指令すると、試薬溶液供給部６は分析部４へ向けて流路５を通して試薬溶液を送り出す。
加温手段８は動作制御部２と回路で接続している。動作制御部２は試薬溶液が所定の温度になるよう、加温手段８を制御する。
試料供給部１５は、例えばサンプリングバルブ７と、ピペット９と、シリンジ１０と、モーター１１とからなっている。モーター１１が動作してシリンジ１０を介してピペット９で試料１２から一定量の試料を採取し、サンプリングバルブ７へ試料を供給する。この動作は回路で接続された動作制御部２により制御される。
【００２８】
【実施例】
以下、試料分析装置の一例として血球計数装置を利用してＨＰＣを分析する場合を例にとり、本発明の実施例を説明する。
図５は本実施例の血球計数装置１００の概略構成図であり、図1に示された試料分析装置の一実施例である。従って、図１と共通する要素については図１のものと同じ符号を使用している。
【００２９】
血球計数装置１００は、流路を開閉するバルブＶ１，Ｖ２，Ｖ３，Ｖ４，Ｖ５，Ｖ６，Ｖ７、試薬を滞留させる試薬チャンバ５０、所定量の液体を吸引・吐出するダイアフラムポンプ５１、液体を所定の温度まで加温する液体加温器８、検体容器５２から血液を吸引するためのピペット９、シリンジ１０、モータ１１、血液を定量するためのサンプリングバルブ７、検出器５３をカバーで覆いＨＰＣ数の分析を行う分析部４、検出器５３から所定量の試料および試薬溶液の吸引を行うシリンジ５４、モータ５５、排液を滞留させる排液チャンバ１３、各部を接続する流路、流路に陽圧を供給する陽圧源３０、流路に陰圧を供給する陰圧源５８，５９などからなる。検出器５３は電気的なノイズの影響を除去するためカバーで覆われており、分析部４の一部となっている。分析部４内の流路５には、流路５内を通過する液体の液温を測定するためのサーミスタ３が備えられている。サーミスタ３は動作制御部２に接続されている。動作制御部２は、装置周辺の空気の温度を測定するためのサーミスタ１が接続されており、キーボード２７、ＣＲＴ２８を含む。試薬チャンバ５０、バルブＶ１，Ｖ２、ダイアフラムポンプ５１、陽圧源５７、陰圧源５８およびこれらを接続する流路は試薬溶液供給部６を構成する。ピペット９、シリンジ１０、モータ１１、サンプリングバルブ７およびこれらを接続する流路は試料供給部１５を構成する。
【００３０】
以下、図５および図２を参照して、血球計数装置１００の動作を説明する。
＜ＨＰＣ分析準備（温度安定化）＞
ユーザがキーボード２７からＨＰＣ分析モードが選択すると、サーミスタ１によって環境温度が取得される（ステップＳ１）。血球計数装置１００はＨＰＣの分析を行うモードと行わないモードを備えており、ＨＰＣの分析を行うモードをＨＰＣ分析モードとよぶ。サーミスタ１から得られる環境温度が28℃以上であれば、血球計数装置１００はスタンバイ（以下、ＨＰＣ分析開始可能な状態をスタンバイとよぶ）となり、試料である血液を吸引可能な状態となる（ステップＳ２，Ｓ３）。環境温度が28℃より低い場合には、加温シーケンスを実施する（ステップＳ２，Ｓ４）。
【００３１】
ここで、加温シーケンスについて説明する。
なお、特に言及しなければバルブはクローズの状態である。
試薬溶液（本実施例では前述のＩＭＩ試薬）はあらかじめ液体加温器８に滞留しており、所定温度に加温されている。
バルブＶ１，Ｖ４をオープンにすると、陰圧源５７によって所定量の試薬溶液がダイアフラムポンプ５１に吸引される。
バルブＶ１，Ｖ４をクローズにし、バルブＶ２，Ｖ３をオープンにすると陽圧源５７によってダイアフラムポンプ５１内の所定量の試薬溶液が液体加温器８の方向へ押し出される。これによって液体加温器８にあらかじめ滞留していた試薬溶液が押し出され、検出器５３までの流路を試薬溶液が通過する。このとき、サーミスタ３で試薬溶液の液温をリアルタイムに測定する。
【００３２】
バルブＶ２、Ｖ３をクローズにし、バルブＶ７をオープンにすることによって検出器５３内の試薬溶液を排液チャンバ１３に排出する。その後、バルブＶ７をクローズにし、加温シーケンスを終了する。加温シーケンスを実行することにより、流路５や検出器５３が加温されるとともに、サーミスタ３によって液温が測定される。
ステップＳ４における加温シーケンスにおいてサーミスタ３で測定した試薬溶液の液温（リアルタイムで測定した液温のうちの最高液温。以下同じ）が30℃以上であれば、血球計数装置１００はスタンバイとなり、試料である血液を吸引可能な状態となる（ステップＳ５，Ｓ６）。
ステップＳ４における加温シーケンスにおいてサーミスタ３で測定した試薬溶液の液温が30℃より小さい場合は、再度加温シーケンスを実行することにより、試薬溶液の液温を測定する（ステップＳ５，Ｓ７）。
【００３３】
ステップＳ７で測定した試薬溶液の液温が29.5℃以下であれば、再度加温シーケンスを実行することにより、試薬溶液の液温を測定する（ステップＳ８，Ｓ７）。
ステップＳ７で測定した試薬溶液の液温が29.5℃より大きく、かつ、ステップＳ４で測定した試薬溶液の液温が28.5℃以下であれば（ステップＳ８，Ｓ９）、加温シーケンスを３回実行し（ステップＳ１０）、血球計数装置１００はスタンバイとなる（ステップＳ１３）。
ステップＳ７で測定した試薬溶液の液温が29.5℃より大きく（ステップＳ８）、かつ、ステップＳ４で測定した液温が28.5℃以上で（ステップＳ９）30.0℃よりも低い場合（ステップＳ１１）、加温シーケンスを1回実行し（ステップＳ１２）、血球計数装置１００はスタンバイとなる（ステップＳ１３）。
ステップＳ７における加温シーケンスを８回実行しても試薬溶液の液温が29.5℃以下の場合、上記と同様にしてステップＳ９以下の動作を実行する。
以上でＨＰＣ分析のための準備が終了し、血液の吸引が可能となる。
【００３４】
＜ＨＰＣ分析＞
以下、血液を吸引してからＨＰＣを分析するまでの動作について図５および図６を使用して説明する。なお、説明の便宜上、主要な動作のみ説明することとし、洗浄動作についての説明は省略する。
モータ１１を回転させシリンジ１０に吸引動作をさせることにより、検体容器５２からピペット９を介して所定量の血液を吸引する。これによってサンプリングバルブ７の血液定量用流路７ａに血液が充填される（ステップＳ５０）。
サンプリングバルブ７の可動弁を回転させることにより、血液を定量する（ステップＳ５１）。
バルブＶ１、Ｖ４をオープンにし、所定量の試薬溶液をダイアフラムポンプ５１内に吸引する（ステップＳ５２）。
バルブＶ１，Ｖ４をクローズにし、バルブＶ２、Ｖ３をオープンにし、ダイアフラムポンプ５１内の試薬溶液を液体加温器８の方向に吐出する。これによって、あらかじめ流路内に滞留していた試薬溶液とステップＳ５１で定量された血液が検出器５３内に吐出される（ステップＳ５２）。
【００３５】
バルブＶ６，Ｖ７をクローズにし、バルブＶ５をオープンにし、シリンジ５４に所定量の吸引動作をさせる。これによって、血液が検出器５３のオリフィス６０を通過し、このときの電圧の変化を検出する（ステップ５３）。これによって２次元分布（スキャッタグラム）を得る（ＲＦ／ＤＣ検出法）。このスキャッタグラムからＨＰＣ数を算出する（ステップＳ５４）。なお、ＨＰＣ数の算出方法については、米国特許第５，８３０，７０１号に詳述されているので、ここでは説明を省略する。
【００３６】
＜温度補正＞
ステップＳ５４で得られたＨＰＣ数は以下の式（２）：
【数２】
【００３７】
［式中、Ｈ２は補正後のＨＰＣ数、Ｈ１は補正前のＨＰＣ数（すなわちステップＳ５４で得られたＨＰＣ数）、ｔ１はサーミスタ３で得られたステップＳ５２における試薬溶液の液温である］を用いてＨＰＣの分析結果を補正した（ステップＳ５５）。この式（２）は、前述の式（１）に反応の最適温度ａとして３２．５℃を導入したものである。
以上でＨＰＣ分析の動作を終了する（ステップＳ５６）。なお、次検体の吸引までに所定時間が経過した場合には図２に示したステップＳ１〜ステップＳ１３までの動作を再度実行する。所定時間が経過していない場合には、ステップＳ５０の動作から始めればよい。短時間であれば流路５および検出器１１内の温度は大きく変動していないからである。
【００３８】
【発明の効果】
本発明の試料分析装置によれば、最適な条件で試料の分析をすることにより、正確な分析結果を得ることができる。
具体的には、必要最小限の液体を流路や検出器を温めるために用いることによって、分析に用いられる試薬溶液の温度を安定化させ、温度変化による分析結果の誤差を最小化させる。さらに、得られた分析結果を温度補正することによって、より正確な分析結果を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 本発明の試料分析装置の例を示す図である。
【図２】 本実施例の血球計数装置がスタンバイになるまでの動作を示すフローチャートである。
【図３】 液温と補正前のＨＰＣ数のグラフである。
【図４】 液温と補正後のＨＰＣ数のグラフである。
【図５】 本実施例の血球計数装置の内部構成を示す図である。
【図６】 本実施例の血球計数装置の分析動作を示すフローチャートである。
【符号の説明】
１ 環境温度測定手段（サーミスタ）
２ 動作制御部
３ 液温測定手段（サーミスタ）
４ 分析部
５ 流路
６ 試薬溶液供給部
７ サンプリングバルブ
８ 加温手段（液体加温器）
９ ピペット
１０ シリンジ
１１ モーター
１２ 試料
１３ 排液チャンバ
１５ 試料供給部
２７ キーボード
２８ ＣＲＴ
５０ 試薬チャンバ
５１ ダイアフラムポンプ
５２ 検体容器
５３ 検出器
５４ シリンジ
５５ モータ
５７ 陽圧源
５８、５９ 陰圧源
６０ オリフィス
【発明の属する技術分野】
本発明は、試料分析装置に関し、より詳細には、試料の分析結果が試薬溶液との反応温度によって敏感に影響されるような試料を分析するための試料分析装置に関し、これらの試料を分析するために最適な温度を準備することが可能な試料分析装置に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
通常、血液、尿などの試料に含まれ、微量で直接分析するのが困難な成分は、試薬溶液中に希釈したり、その試料に試薬を反応させたりして分析することが一般的である。しかし、試料によっては試薬溶液との反応の進行が温度、光、湿度等の条件に大きく影響を受け、同一試料から得られる分析結果が大きく変化することがある。
【０００３】
例えば、血液中の末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ：peripheral blood stem cell）の分析においては、わずかな温度の変化によって、得られる分析結果が大きく変化する。
ＰＢＳＣは、白血病等の治療手段として血液細胞の源である幹細胞を移植する方法（骨髄移植）において重要な細胞であり、その細胞の数を正確に知ることが非常に重要である。具体的には、ＰＢＳＣは、幹細胞の移植として、近年普及してきている末梢血幹細胞移植（ＰＢＳＣＴ：peripheral blood stem cell transplantation）において非常に重要な細胞である。
ＰＢＳＣＴは、以下のようにして行われる。まず、患者に通常量の化学薬剤等を投与する。すると、まず末梢血中の白血球が減少し、その後５〜７日目から白血球数が上昇しはじめる。この時期に末梢血中にＰＢＳＣが増加する。
【０００４】
末梢血中に大量にＰＢＳＣが動員された時点（５〜２０日前後）において、血液成分分離装置によりＰＢＳＣを採取し、凍結保存する。ＰＢＳＣの採取の際には、末梢血中のＰＢＳＣの数の増加を正確に知る必要がある。移植に十分な量のＰＢＳＣを採取するためには、ＰＢＳＣが大量に動員されたタイミングにＰＢＳＣの採取を行う必要があるからである。
【０００５】
次に、骨髄破壊的な大量の化学・放射線療法を患者に施行し、癌細胞を壊滅させる。その後、予め採取しておいたＰＢＳＣを該患者に移植することにより、患者の造血機能の速やかな回復を図る。
末梢血中のＰＢＳＣを検出する方法として、簡便に造血前駆細胞（ＨＰＣ：Hematopoietic progenitor cell）を検出および／または計数する方法が既に報告されている（米国特許第５，８３０，７０１号）。なお、ＨＰＣとは、多能性幹細胞から各系統の血液細胞へと分化していく血液細胞分化の過程で、芽球以前の分化段階の細胞の総称であり、これが末梢血中に存在するとＰＢＳＣと称される。この方法では、免疫学的な手法を用いることなく幼若細胞を検出できる試薬（米国特許第５，４１３，９３８号）と血液試料とを反応させてＨＰＣのみを検出および／または計数することができる。
しかし、この方法によるＨＰＣの検出はわずかな温度変化によって分析結果が大きく変化する。
【０００６】
一方、従来の試料分析装置としては、加温手段を有する試薬溶液供給部と、試料を分析する分析部と、試薬溶液供給部と分析部とを接続する流路を備えた装置が既に販売されている。従来の装置では、常温より高い温度を必要とする反応については、試薬溶液を好適な反応温度を考慮して予め設定された温度にまで加温手段中で加温して、試料との反応に供することにより、温度変化による分析結果への影響を最小化していた。しかし、このような装置においては、環境温度（装置周辺の温度であり、装置内部のヒータ等が発生する熱に影響されない場所であれば装置外部のみならず装置内部の温度であってもよい。以下、この明細書において同じ）が好適な反応温度よりかなり低い場合は流路の温度も低下しており、試薬溶液供給部から分析部へ試薬溶液が供給される際に試薬溶液が流路と接触することによりその温度が低下することがある。その結果、分析に必要な反応の進行が適切に達成されず、試料の分析結果にばらつき、すなわち誤差が生じる。
【０００７】
本発明は、このような課題を解決するためになされたものであり、最適な条件で試料の分析をすることにより、正確な分析結果を得ることができる試料分析装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
本発明によれば、試薬溶液と混合された試料を分析する分析部と、分析部に試薬溶液を供給する試薬溶液供給部と、試薬溶液供給部から分析部に供給する試薬溶液を加温する加温手段と、加温手段と分析部を接続する流路と、試料を分析部に供給する試料供給部と、環境温度測定手段と、分析部内または流路内の試薬溶液の液温を測定する液温測定手段と、環境温度測定手段から得られる環境温度および／または液温測定手段から得られる液温に基づいて、加温手段によって加温された試薬溶液を試薬溶液供給部から分析部へ供給させるか否かを制御する動作制御部と、を備えることを特徴とする試料分析装置が提供される。
本発明の試料分析装置をこのような構成とすることにより、試料を分析部に供給する前に分析部や流路などの温度を試料の測定に最適な温度とすることができ、正確な分析結果を得ることが可能となる。
【０００８】
【発明の実施の形態】
分析部に供給する液体としては、試薬溶液を用いることが好ましいが、本発明の液体供給部は流路の温度を安定化させることを目的とするものであるため、水などを使用してもよい。
試薬溶液としては、試料を希釈するための希釈液、試料に含まれる成分を染色するための染色液、赤血球などの血球成分を溶血するための溶血剤などが挙げられる。
液体供給部は、試薬溶液などの液体を保管するために備えられているもの（例えば、容器、瓶、バイアルなどが挙げられる）と、容器などから所定量の液体を吸引して流路に供給するためのダイアフラムポンプやシリンジと、ダイアフラムポンプに圧力を供給する圧力源やシリンジを作動させるモータ、流路の開閉を行うバルブ、それらを接続するチューブなどからなる。
【０００９】
加温手段としては、例えば、米国特許第５，３８７，３３４号に記載の液温調整装置も使用できる。加温手段により液体は所定温度まで温められるが、その温度は、液体の種類や、所望の反応に適した温度に応じて選択されるのが好ましい。例えば、幼若細胞検出試薬であるＩＭＩ（Immatureleulocyte information）試薬（米国特許第５，４１３，９３８号）が使用される場合、試薬溶液を約32.5〜40℃に加温するのが好ましい。
【００１０】
分析部は、試料を分析するために備えられているものであって、例えば、複数の細胞情報を分析できる粒子分析装置に備えられている分析部が挙げられる。そのような分析部としては、光学式の分析部では公知のフローサイトメーター、電気抵抗式の分析部ではＲＦ／ＤＣ検出法を採用したものなどを用いることができる。ＨＰＣを分析するには、ＲＦ／ＤＣ検出法を用いる分析部を備える粒子分析装置を用いるのが好ましく、例えば、ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社製）が使用できる。
【００１１】
細胞情報としては、細胞の大きさまたは形態の情報および細胞の内部情報が挙げられる。細胞の大きさまたは形態の情報としては、直流電流が流されたアパーチャ（微細孔）を細胞が通過する際に生じる細胞の電気抵抗の違いに基づく信号（ＤＣ信号）や、低角度（例えば、光軸に対して１〜６度）散乱光が挙げられる。また、細胞の内部情報としては、高周波電流が流されたアパーチャを細胞が通過する際に生じる細胞の誘電率の違いに基づく信号（ＲＦ信号）や、高角度（例えば、光軸に対して８〜２０度）前方散乱光、側方（光軸に対して７０〜１１０度）散乱光、後方散乱光（光軸に対して１２０〜１８０度）、偏光解消度等が挙げられる。
【００１２】
流路は、加温手段から分析部へ液体を通過させるためのものであって、管状や溝状のもの等、形態は限定されない。流路の材質は装置の構成によって種々異なるが、金属、プラスチック等いずれのものであってもよい。流路の長さも装置の構成によって種々異なるが、どのような長さであってもよい。流路としては例えば、一般にチューブと呼ばれるものも使用できる。なお、本発明の流路とは、加温手段と分析部を接続する流路のことであり、加温後の液体を通過させる流路である。
【００１３】
試料供給部は、試料を一定量採取する手段、すなわちモーター、シリンジ、サンプリングバルブおよびピペット等とからなっている。試料供給部は、分析の行われる分析部に試料を供給するものであれば流路のいずれの位置に接続されていてもよい。試料供給部は、例えばペリスタポンプのようなものが使用されてもよい。
試料供給部に供給された試料は、希釈液や染色液や溶血剤などの液体（試薬溶液）と流路内で混合してもよく、試料供給部や流路に混合のための空洞をさらに備えて、その空洞内で混合させてもよく、分析部内で混合させてもよい。
【００１４】
試料と試薬溶液を混合すると、試料および試薬溶液の種類によっては、試料に含まれる成分は試薬溶液と反応する。例えば血液を試料とし、ＩＭＩ試薬を試薬溶液とすると、反応により血液中の赤血球が溶血し、幼若球以外の白血球が裸核化して縮小する。
【００１５】
環境温度測定手段は、環境温度（装置周辺の温度であり、装置内部のヒータ等が発生する熱に影響されない場所であれば装置外部のみならず装置内部の温度であってもよい）を測定するためのものであって、サーミスタ、熱電対のような温度計からなる。
液温測定手段は、分析部内または流路内の液体の液温を得るためのものであって、サーミスタのような温度計からなる。
【００１６】
動作制御部は、環境温度測定手段および／または液温測定手段から得られた環境温度および液温に基づいて、液体供給部からの液体の供給の作動を制御するためのものであって、Windows2000（マイクロソフト社製Windowsは商標）をOSとして搭載する市販のパーソナルコンピュータやＣＰＵ，ＲＯＭ，ＲＡＭなどからなるマイクロコンピュータを用いることができる。動作制御部は、環境温度測定手段から得られる環境温度と第１の所定値とを比較し、環境温度が第1の所定値以下のとき、液体供給部から分析部へ液体を供給させるのが好ましい。環境温度が第１の所定値以下であれば流路の温度が低下しているので、加温手段で温められた液体を供給させて流路を温めるためである。
【００１７】
第１の所定値は、流路を通過する液体の液温より環境温度の方が低いことによって、液体の液温が低下してしまうことがない温度を選択することができる。第１の所定値は、流路の長さや材質、所望の試薬溶液と試料の反応温度等を考慮に入れて決定することができる。具体的には、加温された液体を実際に供給させて、環境温度が何℃のとき、加温された液体の温度が低下せずに分析部まで供給されるかを調べる。そのような環境温度を、第１の所定値と規定する。
【００１８】
動作制御部は、液温測定手段から得られる液体の液温と第２の所定値とを比較し、液温が第２の所定値以下のとき、液体供給部から分析部へ液体を供給させ、再度液温測定手段にて液温を測定し、再度測定した液温が第２の所定値より大きいとき、液体供給部から分析部への液体の供給を停止させるのが好ましい。液体の液温が、第２の所定値より高ければ流路及び分析部は十分に温められていることを意味するので、もはや液体を供給する必要はないからである。逆に、液体の液温が第２の所定値以下であれば流路及び分析部の温度が液体の液温よりも低いことを意味するので、液体供給部から加温された液体を分析部へ供給して流路及び分析部を温める必要がある。このようにして、必要量のみ液体を分析部へ供給し、試料を分析する前に流路及び分析部を最適な温度にすることができる。
【００１９】
第２の所定値としては、加温された液体が分析部に達したときの液温が、試料の分析に最適な液温となるような温度を選択することができる。具体的には、加温された液体を実際に供給させて、液温測定手段で得られる液温が何℃のとき、所望の分析結果が得られるかを調べる。そのような液温を、第２の所定値と規定する。
【００２０】
動作制御部が、環境温度測定手段から得られる環境温度と第１の所定値とを比較し、環境温度が第１の所定値より大きいとき、または
液温測定手段から得られる液体の液温と第２の所定値とを比較し、液温が第２の所定値より大きいとき、分析部による分析を可能とすることが好ましい。
この状態で試料の分析を開始すれば、所望の温度での分析を行うことができ、温度による誤差を最小限に抑えることができる。
【００２１】
また、本発明の試料分析装置において、分析部は、ＨＰＣ（造血前駆細胞）、ＰＢＳＣ、白血球、赤血球、血小板のような血液成分、白血球、赤血球、細菌のような尿中の成分、測定に際して染色処理が必要な工業用粒子の分析に使用できる。中でもＨＰＣの分析においては本発明の試料分析装置は非常に有用である。ＨＰＣを分析するための試薬（例えばＩＭＩ試薬）とＨＰＣとの反応最適温度が非常に狭く、反応時のＩＭＩ試薬を最適な液温に保つことが、ＨＰＣを測定するのに重要だからである。
【００２２】
上記の制御によって、反応時のＩＭＩ試薬を最適な液温に保った場合であっても、ＨＰＣの分析においては液温が分析結果へ与える影響が非常に大きいため、わずかな液温の変動によって正確な分析結果が得られないことがある。これに対処するため、最適な液温で分析されたＨＰＣ数を真のＨＰＣ数と仮定し、液温の変動によるＨＰＣ数の変動を真のＨＰＣ数へと補正すれば、正確なＨＰＣ数が得られるのでさらに好ましい。この補正に用いる液温には、ＩＭＩ試薬の反応時に液温測定手段で得られる液温を使用できる。
正確な補正をするために、種々の液温でのＨＰＣ数をＹ軸に、その液温をＸ軸にとり、一定の関係を見出して、その関係を用いて補正を行うことができる。
【００２３】
補正は、以下の式（１）：
【数１】
［式中、Ｈ２は補正後のＨＰＣ数、ａは反応の最適温度、Ｈ１は補正前のＨＰＣ数、ｔ０はＸ軸交点、ｔ１はＩＭＩ試薬の反応時に液温測定手段で得られる液温である］を用いることができる。式中、ｔ０は以下のようにして求める。補正前のＨＰＣ数をＹ軸に、液温測定手段で得られる液温をＸ軸にとり、複数の分析値をそのグラフにプロットして得られる直線のＸ軸との交点をｔ０とする。なお、図３は補正前のＨＰＣ数と液温の関係を示すグラフであり、図４は補正後のＨＰＣ数と液温の関係を示すグラフである。図３に示すグラフでは、ｔ０=３４．８℃である。図４に示すグラフから、この式（１）によって適切にＨＰＣ数が補正されていることが分かる。
【００２５】
本発明の試料分析装置の概要を、図１のブロック図に基づいて簡単に説明する。これによって本発明が限定されるものではない。
本発明の試料分析装置は、試薬溶液供給部６と、加温手段８と、分析部４と、流路５と、試料供給部１５（例えば、サンプリングバルブ７、ピペット９、シリンジ１０、モーター１１からなる）と、環境温度測定手段１と、液温測定手段３と、動作制御部２とを備える試料分析装置である。分析部４と加温手段８は流路５で接続され、流路５を通して加温された試薬溶液が分析部４に供給される。
【００２６】
試料供給部１５は、流路５中のいずれかの場所に接続されてもよいし、分析部４に直接試料を供給するよう構成されてもよい。
環境温度測定手段１は装置の周辺温度を測定するためのものであり、装置内部のヒータ等が発生する熱に影響されない場所であれば装置外部のみならず装置内部に配置されてもよい。
液温測定手段３は試薬溶液の液温を測定するためのものであり、例えば分析部４の入り口近傍の流路５や分析部４内に配置される。
環境温度測定手段１および液温測定手段３は、それぞれ動作制御部２と回路で接続している。動作制御部２は、環境温度測定手段１および液温測定手段３に環境温度および液温を測定するよう独立してそれぞれに対して指令し、それに応答して測定されたそれぞれの温度は動作制御部２へ入力される。
【００２７】
試薬溶液供給部６は動作制御部２と回路で接続している。環境温度や液温のデータに基づき動作制御部２が試薬溶液を供給するよう指令すると、試薬溶液供給部６は分析部４へ向けて流路５を通して試薬溶液を送り出す。
加温手段８は動作制御部２と回路で接続している。動作制御部２は試薬溶液が所定の温度になるよう、加温手段８を制御する。
試料供給部１５は、例えばサンプリングバルブ７と、ピペット９と、シリンジ１０と、モーター１１とからなっている。モーター１１が動作してシリンジ１０を介してピペット９で試料１２から一定量の試料を採取し、サンプリングバルブ７へ試料を供給する。この動作は回路で接続された動作制御部２により制御される。
【００２８】
【実施例】
以下、試料分析装置の一例として血球計数装置を利用してＨＰＣを分析する場合を例にとり、本発明の実施例を説明する。
図５は本実施例の血球計数装置１００の概略構成図であり、図1に示された試料分析装置の一実施例である。従って、図１と共通する要素については図１のものと同じ符号を使用している。
【００２９】
血球計数装置１００は、流路を開閉するバルブＶ１，Ｖ２，Ｖ３，Ｖ４，Ｖ５，Ｖ６，Ｖ７、試薬を滞留させる試薬チャンバ５０、所定量の液体を吸引・吐出するダイアフラムポンプ５１、液体を所定の温度まで加温する液体加温器８、検体容器５２から血液を吸引するためのピペット９、シリンジ１０、モータ１１、血液を定量するためのサンプリングバルブ７、検出器５３をカバーで覆いＨＰＣ数の分析を行う分析部４、検出器５３から所定量の試料および試薬溶液の吸引を行うシリンジ５４、モータ５５、排液を滞留させる排液チャンバ１３、各部を接続する流路、流路に陽圧を供給する陽圧源３０、流路に陰圧を供給する陰圧源５８，５９などからなる。検出器５３は電気的なノイズの影響を除去するためカバーで覆われており、分析部４の一部となっている。分析部４内の流路５には、流路５内を通過する液体の液温を測定するためのサーミスタ３が備えられている。サーミスタ３は動作制御部２に接続されている。動作制御部２は、装置周辺の空気の温度を測定するためのサーミスタ１が接続されており、キーボード２７、ＣＲＴ２８を含む。試薬チャンバ５０、バルブＶ１，Ｖ２、ダイアフラムポンプ５１、陽圧源５７、陰圧源５８およびこれらを接続する流路は試薬溶液供給部６を構成する。ピペット９、シリンジ１０、モータ１１、サンプリングバルブ７およびこれらを接続する流路は試料供給部１５を構成する。
【００３０】
以下、図５および図２を参照して、血球計数装置１００の動作を説明する。
＜ＨＰＣ分析準備（温度安定化）＞
ユーザがキーボード２７からＨＰＣ分析モードが選択すると、サーミスタ１によって環境温度が取得される（ステップＳ１）。血球計数装置１００はＨＰＣの分析を行うモードと行わないモードを備えており、ＨＰＣの分析を行うモードをＨＰＣ分析モードとよぶ。サーミスタ１から得られる環境温度が28℃以上であれば、血球計数装置１００はスタンバイ（以下、ＨＰＣ分析開始可能な状態をスタンバイとよぶ）となり、試料である血液を吸引可能な状態となる（ステップＳ２，Ｓ３）。環境温度が28℃より低い場合には、加温シーケンスを実施する（ステップＳ２，Ｓ４）。
【００３１】
ここで、加温シーケンスについて説明する。
なお、特に言及しなければバルブはクローズの状態である。
試薬溶液（本実施例では前述のＩＭＩ試薬）はあらかじめ液体加温器８に滞留しており、所定温度に加温されている。
バルブＶ１，Ｖ４をオープンにすると、陰圧源５７によって所定量の試薬溶液がダイアフラムポンプ５１に吸引される。
バルブＶ１，Ｖ４をクローズにし、バルブＶ２，Ｖ３をオープンにすると陽圧源５７によってダイアフラムポンプ５１内の所定量の試薬溶液が液体加温器８の方向へ押し出される。これによって液体加温器８にあらかじめ滞留していた試薬溶液が押し出され、検出器５３までの流路を試薬溶液が通過する。このとき、サーミスタ３で試薬溶液の液温をリアルタイムに測定する。
【００３２】
バルブＶ２、Ｖ３をクローズにし、バルブＶ７をオープンにすることによって検出器５３内の試薬溶液を排液チャンバ１３に排出する。その後、バルブＶ７をクローズにし、加温シーケンスを終了する。加温シーケンスを実行することにより、流路５や検出器５３が加温されるとともに、サーミスタ３によって液温が測定される。
ステップＳ４における加温シーケンスにおいてサーミスタ３で測定した試薬溶液の液温（リアルタイムで測定した液温のうちの最高液温。以下同じ）が30℃以上であれば、血球計数装置１００はスタンバイとなり、試料である血液を吸引可能な状態となる（ステップＳ５，Ｓ６）。
ステップＳ４における加温シーケンスにおいてサーミスタ３で測定した試薬溶液の液温が30℃より小さい場合は、再度加温シーケンスを実行することにより、試薬溶液の液温を測定する（ステップＳ５，Ｓ７）。
【００３３】
ステップＳ７で測定した試薬溶液の液温が29.5℃以下であれば、再度加温シーケンスを実行することにより、試薬溶液の液温を測定する（ステップＳ８，Ｓ７）。
ステップＳ７で測定した試薬溶液の液温が29.5℃より大きく、かつ、ステップＳ４で測定した試薬溶液の液温が28.5℃以下であれば（ステップＳ８，Ｓ９）、加温シーケンスを３回実行し（ステップＳ１０）、血球計数装置１００はスタンバイとなる（ステップＳ１３）。
ステップＳ７で測定した試薬溶液の液温が29.5℃より大きく（ステップＳ８）、かつ、ステップＳ４で測定した液温が28.5℃以上で（ステップＳ９）30.0℃よりも低い場合（ステップＳ１１）、加温シーケンスを1回実行し（ステップＳ１２）、血球計数装置１００はスタンバイとなる（ステップＳ１３）。
ステップＳ７における加温シーケンスを８回実行しても試薬溶液の液温が29.5℃以下の場合、上記と同様にしてステップＳ９以下の動作を実行する。
以上でＨＰＣ分析のための準備が終了し、血液の吸引が可能となる。
【００３４】
＜ＨＰＣ分析＞
以下、血液を吸引してからＨＰＣを分析するまでの動作について図５および図６を使用して説明する。なお、説明の便宜上、主要な動作のみ説明することとし、洗浄動作についての説明は省略する。
モータ１１を回転させシリンジ１０に吸引動作をさせることにより、検体容器５２からピペット９を介して所定量の血液を吸引する。これによってサンプリングバルブ７の血液定量用流路７ａに血液が充填される（ステップＳ５０）。
サンプリングバルブ７の可動弁を回転させることにより、血液を定量する（ステップＳ５１）。
バルブＶ１、Ｖ４をオープンにし、所定量の試薬溶液をダイアフラムポンプ５１内に吸引する（ステップＳ５２）。
バルブＶ１，Ｖ４をクローズにし、バルブＶ２、Ｖ３をオープンにし、ダイアフラムポンプ５１内の試薬溶液を液体加温器８の方向に吐出する。これによって、あらかじめ流路内に滞留していた試薬溶液とステップＳ５１で定量された血液が検出器５３内に吐出される（ステップＳ５２）。
【００３５】
バルブＶ６，Ｖ７をクローズにし、バルブＶ５をオープンにし、シリンジ５４に所定量の吸引動作をさせる。これによって、血液が検出器５３のオリフィス６０を通過し、このときの電圧の変化を検出する（ステップ５３）。これによって２次元分布（スキャッタグラム）を得る（ＲＦ／ＤＣ検出法）。このスキャッタグラムからＨＰＣ数を算出する（ステップＳ５４）。なお、ＨＰＣ数の算出方法については、米国特許第５，８３０，７０１号に詳述されているので、ここでは説明を省略する。
【００３６】
＜温度補正＞
ステップＳ５４で得られたＨＰＣ数は以下の式（２）：
【数２】
［式中、Ｈ２は補正後のＨＰＣ数、Ｈ１は補正前のＨＰＣ数（すなわちステップＳ５４で得られたＨＰＣ数）、ｔ１はサーミスタ３で得られたステップＳ５２における試薬溶液の液温である］を用いてＨＰＣの分析結果を補正した（ステップＳ５５）。この式（２）は、前述の式（１）に反応の最適温度ａとして３２．５℃を導入したものである。
以上でＨＰＣ分析の動作を終了する（ステップＳ５６）。なお、次検体の吸引までに所定時間が経過した場合には図２に示したステップＳ１〜ステップＳ１３までの動作を再度実行する。所定時間が経過していない場合には、ステップＳ５０の動作から始めればよい。短時間であれば流路５および検出器１１内の温度は大きく変動していないからである。
【００３８】
【発明の効果】
本発明の試料分析装置によれば、最適な条件で試料の分析をすることにより、正確な分析結果を得ることができる。
具体的には、必要最小限の液体を流路や検出器を温めるために用いることによって、分析に用いられる試薬溶液の温度を安定化させ、温度変化による分析結果の誤差を最小化させる。さらに、得られた分析結果を温度補正することによって、より正確な分析結果を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 本発明の試料分析装置の例を示す図である。
【図２】 本実施例の血球計数装置がスタンバイになるまでの動作を示すフローチャートである。
【図３】 液温と補正前のＨＰＣ数のグラフである。
【図４】 液温と補正後のＨＰＣ数のグラフである。
【図５】 本実施例の血球計数装置の内部構成を示す図である。
【図６】 本実施例の血球計数装置の分析動作を示すフローチャートである。
【符号の説明】
１ 環境温度測定手段（サーミスタ）
２ 動作制御部
３ 液温測定手段（サーミスタ）
４ 分析部
５ 流路
６ 試薬溶液供給部
７ サンプリングバルブ
８ 加温手段（液体加温器）
９ ピペット
１０ シリンジ
１１ モーター
１２ 試料
１３ 排液チャンバ
１５ 試料供給部
２７ キーボード
２８ ＣＲＴ
５０ 試薬チャンバ
５１ ダイアフラムポンプ
５２ 検体容器
５３ 検出器
５４ シリンジ
５５ モータ
５７ 陽圧源
５８、５９ 陰圧源
６０ オリフィス
Claims (6)
- 試薬溶液と混合された試料を分析する分析部と、
分析部に試薬溶液を供給する試薬溶液供給部と、
試薬溶液供給部から分析部に供給する試薬溶液を加温する加温手段と、
加温手段と分析部を接続する流路と、
試料を分析部に供給する試料供給部と、
環境温度測定手段と、
分析部内または流路内の試薬溶液の液温を測定する液温測定手段と、
環境温度測定手段から得られる環境温度および／または液温測定手段から得られる液温に基づいて、加温手段によって加温された試薬溶液を試薬溶液供給部から分析部へ供給させるか否かを制御する動作制御部と、を備えることを特徴とする試料分析装置。 - 動作制御部が、環境温度測定手段から得られる環境温度と第１の所定値とを比較し、環境温度が第１の所定値以下のとき、試薬溶液供給部から分析部へ試薬溶液を供給させる請求項１に記載の試料分析装置。
- 動作制御部が、液温測定手段から得られる試薬溶液の液温と第２の所定値とを比較し、液温が第２の所定値以下のとき、試薬溶液供給部から分析部へ試薬溶液を供給させ、再度液温測定手段にて液温を測定し、再度測定した液温が第２の所定値より大きければ、試薬溶液供給部から分析部への試薬溶液の供給を停止させる請求項２に記載の試料分析装置。
- 動作制御部が、環境温度測定手段から得られる環境温度と第１の所定値とを比較し、環境温度が第１の所定値より大きいとき、または、液温測定手段から得られる試薬溶液の液温と第２の所定値とを比較し、液温が第２の所定値より大きいとき、分析部による分析を可能とする請求項２または３に記載の試料分析装置。
- 分析部が、造血前駆細胞を分析する請求項１〜４のいずれか一つに記載の試料分析装置。
- 液温測定手段から得られる液温に基づいて分析部で得られる分析結果を補正する請求項５に記載の試料分析装置。
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