JP4081645B2

JP4081645B2 - 抗変異原性剤

Info

Publication number: JP4081645B2
Application number: JP2001300207A
Authority: JP
Inventors: 俊訓白石; 三雄宮澤; 高穂済陽
Original assignee: Fuso Chemical Co Ltd
Current assignee: Fuso Chemical Co Ltd
Priority date: 2001-09-28
Filing date: 2001-09-28
Publication date: 2008-04-30
Anticipated expiration: 2021-09-28
Also published as: JP2003104880A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗変異原性剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、健康に対する関心の高さから、特定保健用食品や健康食品の開発が急増している。また、各種の機能性を有する新規な素材の開発も増加しており、キノコを始めとする各種の植物の樹皮や根等の抽出物に抗変異原性が確認さている。
【０００３】
一方、従来より、果実は健康に良いものとされ、生活習慣病などの予防などへの期待から果実に含まれる成分に対する関心が高まっており、例えば、キウイフルーツの抽出物に抗変異原効果や抗ウィルス効果があることが報告されている（特開平３−２５４３４０号公報）。また、バラ科の果実の搾汁や抽出物に酸化防止効果、血圧降下作用、抗変異原性等があることなども報告されている（特開平７−２８５８７６号公報）。
【０００４】
しかしながら、これらの物質は、何れも天然物の抽出物又は搾汁であることから製造に手間がかかり、しかも、産地や採れる時期等によっても含量や成分がばらつくなど安定性が悪く、価格も高く利用し難いという問題がある。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の主な目的は、品質が一定で容易に入手可能な物質を有効成分として用いた新規な抗変異原性剤を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、上記した如き目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、簡単に入手でき、しかも比較的安価な特定の有機酸又はその塩が優れた変異原抑制作用を有することを見出し、ここに本発明を完成するに至った。
【０００７】
即ち、本発明は、下記の抗変異原性剤を提供するものである。
１．クエン酸、リンゴ酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、酢酸、α−ケトグルタル酸、イソクエン酸、オキザロ酢酸、シス−アコニット酸及びこれらの塩よりなる群から選ばれた少なくとも一種の有機酸類を有効成分として含有することを特徴とする抗変異原性剤。
２．食品添加物として用いられるものである上記項１に記載の抗変異原性剤。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明の抗変異原性剤は、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、酢酸、α−ケトグルタル酸、イソクエン酸、オキザロ酢酸、シス−アコニット酸及びこれらの塩よりなる群から選ばれた少なくとも一種の有機酸類を有効成分として含むものである。
【０００９】
これらの成分は、いずれも簡単に入手できる物質であり、これらの成分を有効成分とすることによって、品質が一定で安価であって、しかも優れた抗変異原作用を有する抗変異原性剤を得ることができる。
【００１０】
上記した有機酸の内で、クエン酸は無水物及び１水和物の何れでも良い。リンゴ酸は、ＤＬ−体だけでなく、光学異性体のＤ−体、Ｌ−体の何れも用いることができる。また、酒石酸としても、Ｌ−体、Ｄ−体、ＤＬ−体のいずれを用いても良く、乳酸としても、Ｌ−体、Ｄ−体、ＤＬ−体のいずれを用いても良い。
【００１１】
上記した有機酸の塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩等を例示できる。
【００１２】
本発明では、上記した有機酸類は、一種単独又は二種以上混合して用いることができる。
【００１３】
本発明の抗変異原性剤では、上記した有機酸類をそのまま粉体として用いても良く、或いは、水等の適当な溶剤に溶解して液体として用いても良い。液体として用いる場合には、濃度については特に限定はなく、溶解可能な範囲内で適宜溶解して用いればよい。また、必要に応じて、アスコルビン酸、酢酸等の他の酸味料、グリシン等のアミノ酸や核酸等の調味料、ビタミン、ミネラル等の栄養成分等と併用しても良く、予め混合し、製剤として用いても良い。
【００１４】
本発明の抗変異原性剤の摂取方法については、特に限定はなく、経口、非経口の何れも可能であるが、特に経口的に摂取することが好ましく、例えば、食品添加剤として食品に添加して摂取することが好ましい。
【００１５】
食品添加剤として用いる場合には、その添加量については、特に限定的ではなく、食品の種類に応じて、酸味の程度などを考慮して適宜決めればよい。例えば、清涼飲料、炭酸飲料などの液体食品に添加して用いる場合には、上記した有機酸類の濃度として、通常、０．００５重量％程度以上とすればよいが、酸味や抗変異原作用等を考慮すると、０．００５〜３重量％程度の範囲とすることが好ましい。また、菓子類やその他の各種食品等の固形食品に添加して用いる場合にも、同様に食品の種類に応じて適宜決めればよいが、一般的には、上記した有機酸類の含有率として、０．０１〜５重量％程度とすることが好ましい。
【００１６】
食品の種類による好ましい添加量の一例を示すと、例えば、液体飲料の内で、清涼飲料の場合には、上記した有機酸類の濃度として０．０５〜０．５重量％程度とすれば良く、炭酸飲料の場合には、上記した有機酸類の濃度として０．１〜０．５重量％程度とすれば良い。また、菓子類の内で、グミ類の場合には、２重量％程度の添加量とすれば良く、ゼリー類の場合には、０．５〜０．８重量％程度の添加量とすればよい。
【００１７】
また、その他に、本発明の抗変異原性剤を人体に投与する場合の投与方法及び投与量の一例を示すと次の通りである。
【００１８】
投与は、種々の方法で行うことができ、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤等による経口投与とすることができる。投与量については、経口投与の場合には、通常、成人において、有効成分量として０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ程度が適当であり、これを１日１回〜数回に分けて投与すればよい。経口投与剤は、通常の製造方法に従って製造することができる。例えば、デンプン、乳糖、マンニット等の賦形剤、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース等の結合剤、結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、軽質無水ケイ酸等の流動性向上剤等を適宜組み合わせて処方することにより、錠剤、カプセル剤、顆粒剤等として製造することができる。
【００１９】
本発明の抗変異原性剤は、上記した食品添加剤として用いる方法、或いは、その他の投与方法によって摂取又は投与することによって、突然変異に基づく諸疾患、例えば、癌等の予防、治療等に有効に利用することができる。また、これだけではなく、広く生化学の分野において、細菌の突然変異を抑制する必要がある場合、例えば、培養、生化学的分析等の場合にも使用できる。
【００２０】
【発明の効果】
本発明の抗変異原性剤は、比較的簡単に入手し得る有機酸類を有効成分として含むものであり、安価で品質の安定性が良く、しかも優れた抗変異原作用を有するものである。
【００２１】
【実施例】
以下、試験例及び配合例を示して本発明を更に詳細に説明する。
【００２２】
試験例１
本発明の抗変異原性剤の変異原抑制効果を、ＳＯＳ反応の誘導を指標とした変異原物質検出法（ＵＭＵテスト；科学と工業、第６２巻、第４号、１４２頁、１９８８年）により調べた。ここで、「ＵＭＵテスト」とは、大腸菌のＤＮＡ損傷時にみられるＳＯＳ反応を利用した変異原検出試験であり、短時間で結果が出るなど多くの利点を備えている。
【００２３】
尚、変異原物質としてはTrp-P-1（和光純薬製、０．３μｇ／ｍｌ）とフリルフラミドを用い、菌株としてはネズミチフス菌（Salmonella typhimurium TA1535/pSK1002）を用いた。試験方法の概略を以下に説明する。
【００２４】
即ち、ＬＢ培地（トリプトン１％、酵母エキス０．５％、食塩０．５％）にて３７℃で一夜培養した試験菌液を、ＴＧＡ培地（トリプトン１％、食塩０．５％、グルコース０．２％にアンピシリンを５０μｇ／ｍｌの割で加えたもの）に１／５０量植菌し、３７℃で振とう培養した。
【００２５】
そして、菌濃度が対数増殖期（Ａ₆₀₀が０．２５〜０．３０）に達したとき、菌液を２．０ｍｌずつ試験管にとり、これに変異原物質（Trp-P-1（０．３μｇ／ｍｌ）又はフリルフラミド０．１ｍｌ及び０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）０．３ｍｌを加え、更に下記図１及び図２の各グラフに示された各濃度となる量の試験物質を加えて、３７℃で２時間培養した。
【００２６】
試験物質としては、クエン酸（無水）、クエン酸（結晶）、ＤＬ−リンゴ酸、Ｄ−リンゴ酸、Ｌ−リンゴ酸、ＤＬ−乳酸、Ｌ−乳酸、発酵乳酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、Ｌ−酒石酸又はＤ−乳酸を用いた。
【００２７】
培養後に菌液を遠沈し集菌した後、菌を生理的食塩水に再懸濁し、この菌液の一部で菌量を測定し、他の一部でβ−ガラクトシダーゼ活性を測定した。尚、ここで、対数増殖期とは、細菌や細胞の数が対数的に増加していく時期で、指数増殖期ともいわれるものである。
【００２８】
β−ガラクトシダーゼ活性の測定は、Millerの方法（Miller,J.H: Experiments in molecular genetics, Cold spring Harbor Laboratory, New York, P352-355 (1972))に準じて行った。即ち、Ｚ緩衝液２．２５ｍｌに上記試験菌液０．２５ｍｌを加えた後、０．１％のドデシル硫酸ナトリウム水溶液５０μｌ及びクロロホルム１０μｌを加え強く攪拌した。その液に基質（o - nitrophenyl- β- D - galactopyranoside 4 ｍｇ／ｍｌ) ０．２５ｍｌを加え、２８℃で反応させた。そして、１５分後に１ＭＮａ₂ＣＯ₃を１．２５ｍｌ加えて反応を止め、分光光度計でＡ₄₂₀、Ａ₅₅₀及びＡ₆₀₀（吸光度）を測定した。
【００２９】
ここで、β−ガラクトシダーゼ活性値は、次式により算出した。
【００３０】
β−ガラクトシダーゼ活性値（unit)＝１０００(Ａ₄₂₀−１．７５×Ａ₅₅₀)／１．５×Ａ₆₀₀
また、ＳＯＳ反応抑制率は、次式により算出した。
【００３１】
ＳＯＳ反応抑制率（％）＝［１−（Ａ−Ｃ）／（Ｂ−Ｃ）］×１００
但し、上式中Ａは変異原物質に試験物質を加えた場合のβ−ガラクトシダーゼ活性値を、Ｂは変異原物質のみにより誘導されたβ−ガラクトシダーゼ活性値を、Ｃはコントロールのβ−ガラクトシダーゼ活性値をそれぞれ示す。尚、コントロールには同量の純水を使用した。また、各試験は試行を１組として行い、その平均をとった。
【００３２】
以上の試験結果を、図１及び図２においてＳＯＳ反応抑制率を示すグラフとして示す。
【００３３】
配合例１
下記処方の粉末健康飲料を調製した。
【００３４】
（処方）
クエン酸（無水）３５重量％
ＤＬ−リンゴ酸３重量％
クエン酸Ｎａ３重量％
ブドウ糖４５重量％
ビタミン類５重量％
ミネラル類４重量％
重曹５重量％
上記組成の粉末飲料５グラムを水１００〜２００ｍｌに溶解して、飲料として摂取する。
【図面の簡単な説明】
【図１】試験例１におけるフリルフラミドに対する抑制効果を示すグラフ。
【図２】試験例１におけるTrp-P-1に対する抑制効果を示すグラフ。

Claims

リンゴ酸、コハク酸、酒石酸及びこれらの塩よりなる群から選ばれた少なくとも一種の有機酸類を有効成分として含有することを特徴とする抗変異原性剤。