JP4036500B2 - アミノアルコール誘導体及びそれを含有する医薬 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、セラミド類縁体であるアミノアルコール誘導体及びそれを含有する医薬、特に神経疾患の治療剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
スフィンゴ糖脂質（以下、ＧＳＬという）は、哺乳動物細胞の細胞表面膜構成成分として存在しており、生理活性物質のレセプター機能、細胞間相互認識機能、又は細胞間相互作用等を介しての発生、増殖、分化、癌化及び免疫反応等の細胞機能と密接に関係していることが知られている。
【０００３】
なかでもガングリオシドはシアル酸を含有するＧＳＬで、末梢神経損傷や中枢神経障害等の神経疾患の回復、すなわち神経の再生促進や神経伝達過程に活性を持つといわれ、現在までに神経系の種々の病態モデルに対する外因性ガングリオシドの有効性が検討されている。既に、これを利用した薬剤としてイタリアでクロナシアル（CronassialTM) なる薬剤が上市され、関連する特許出願がなされている（特開昭５２−３４９１２号）。
【０００４】
現在、ガングリオシドの機能を探る手法として最も多く使われているものは、実験系に外からガングリオシドを添加するというタイプのものであるが、その場合内因性ガングリオシドとの関連が問題となる。つまり、細胞膜に存在する内因性ガングリオシドが種々の細胞表面受容体等と既に複合体を形成している中に、更にガングリオシドを添加して導きだされる結果は、内因性ガングリオシドの真の細胞生理学的意義を常に反映しているとは限らないと考えられる。したがって、ガングリオシドの細胞生理学上における本来の役割を知るためには、内因性ＧＳＬの生合成を特異的に変化させる方法が必要であった。本発明者等は先に、セラミドのアナログである１−フェニル−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−プロパノール (ＰＤＭＰ) を合成し、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰがグルコシルセラミド生合成酵素を特異的に阻害し、グルコシルセラミドを出発物質とする全てのＧＳＬの細胞内含量を著しく減少させることを証明した（J. Lipid. Res., vol.28, 565-571, 1987)。
【０００５】
更に、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰによってＧＳＬ含量が低下し、このことにより神経突起の伸展が抑制されることが報告されている（J. Biochem., 110, 96-103, 1991）。また、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰがシナプス機能を抑制し、この抑制は種々のガングリオシドのなかでＧＱ１ｂにより特異的に解除されることが見出されている（Biochem. Biophys. Res. Commun., 222, 494-498, 1996）。この結果より、ガングリオシドＧＱ１ｂはシナプス機能に必須の活性分子であることが示唆され、内因性ガングリオシドの神経機能に及ぼす重要性が認識されている。
【０００６】
一方、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰの光学対掌体であるＬ−トレオ−ＰＤＭＰは、ＧＳＬの生合成を促進する可能性があることを本発明者らは見出している（J. Cell. Physiol., 141, 573-583(1989))。しかしながら、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰが神経細胞の内因性ガングリオシドレベルを増加させるか否か、また内因性ガングリオシドの増加が神経細胞の機能を活性化するかということに関しては全く未知の問題であり、検討がなされていなかった。
【０００７】
そこで本発明者らは、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰ等の２−アシルアミノプロパノール誘導体が、神経細胞のガングリオシド生合成を促進することにより、神経突起伸展促進効果（J. Neurochem., 67,1821-1830(1996))及びシナプス形成促進効果を発揮し、神経疾患治療剤として有望であることを見出している（ＰＣＴ国際公開ＷＯ９５／０５１７７）。
【０００８】
最近、本発明者らはＬ−トレオ−ＰＤＭＰの神経栄養因子様活性の作用機序の解明を目的として、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）や脳由来神経栄養因子（Brain Derived Neurotrophic Factor; BDNF)等でシナプス伝達を持続的に亢進したときに活性化されるMAP キナーゼ(MAPkinase; mitogen-activated proteinkinase)への該物質の影響を検討した。その結果、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰはシナプス形成促進効果に比例してMAP キナーゼを長時間活性化することが判明している。さらにＬ−トレオ−ＰＤＭＰによるＧＱ１ｂ合成酵素活性の活性化効果も見出している。
【０００９】
しかし、上記のＬ−トレオ−ＰＤＭＰは、in vivo で薬効を発揮させる際、血中半減期及び脳内移行性について更に改良の余地があると判断された。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰ等の２−アシルアミノプロパノール誘導体の水酸基をエステル化することにより、溶解性が著しく改善されることを見出した。また、エステル化したＬ−トレオ−ＰＤＭＰを哺乳動物に投与した際、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰよりも優れた神経疾患治療効果及び脳保護作用を有することを確認した。これらの知見に基づいて本発明を完成させるに至った。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明は、
〔１〕一般式（１）
【００１２】
【化４】
【００１３】
〔式中、Ｒ1 はアルキル基、アルケニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、又は置換基を有していてもよいアリール基を示し、Ｒ2 はアルキル基、ヒドロキシアルキル基、アルケニル基、ヒドロキシアルケニル基、アルコキシル基又はアラルキルオキシ基を示し、Ｒ3 は下記式（Ｉ）〜（VI）で表される置換アミノ基を示し、Ｒ4 は水素原子、低級アルキル基、アミノ基、モノ若しくはジ低級アルキルアミノ基、低級アルコキシル基又はカルボキシル基を示し、ｎは１〜４の整数を示す〕
【００１４】
【化５】
【００１５】
〔式中、Ｒ5 及びＲ6 は、同一又は異なり、水素原子、低級アルキル基、低級アルケニル基、ヒドロキシ低級アルキル基、低級アルコキシアルキル基、アミノ低級アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシシクロアルキル基、アラルキル基又は低級アルキルが置換されていてもよいピペラジノ基を表し、Ｒ7 及びＲ8 は同一又は異なり、水素原子、ヒドロキシル基、低級アルキル基、低級アルコキシル基、ヒドロキシ低級アルキル基、カルボキシル基、低級アルコキシカルボニル基、アラルキル基、ピペリジノ基、アシルオキシ基、アミノ基及びアミノ低級アルキル基から選ばれる基を表し、Ｒ9 は酸素で中断されていてもよい低級アルキレン基を表し、Ｒ10及びＲ11は、同一又は異なり、水素原子、低級アルキル基又はヒドロキシ低級アルキル基を表すか、あるいはＲ10とＲ11は、それらが結合している窒素原子と共に、低級アルキルが置換していてもよいピペリジノ基又はモルホリノ基を表し、ｍは２〜６の整数を表し、ｐは２又は３を表し、Ｘは下記式（VII)又は（VIII）を表す。
【００１６】
【化６】
【００１７】
（式中、Ｒ12は低級アルキル基、アシル基、低級アルコキシカルボニル基又はピリジル基を表す）〕で示されるアミノアルコール誘導体及び薬学的に許容されるその塩に関する。
【００１８】
また本発明は、
〔２〕一般式（１）において、Ｒ1 が置換基を有していてもよいフェニル基であり、Ｒ2 が炭素数２〜１９のアルキル基、アルコキシル基又はアラルキルオキシ基を示し、Ｒ3 がモルホリノ基；低級アルキルアミノ基；モルホリノ低級アルキルアミノ基；ヒドロキシルで置換されていてもよいシクロアルキルアミノ基；ヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピロリジノ基；低級アルキルで置換されていてもよいピペラジノ基；ビス（ヒドロキシ低級アルキル）アミノ基；及びヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピペリジノ基から選ばれる置換アミノ基であり、Ｒ4 が前記のとおりであるアミノアルコール誘導体；
〔３〕一般式（１）において、Ｒ1 がフェニル基であり、Ｒ2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3 がモルホリノ基、シクロヘキシルアミノ基、シクロペンチルアミノ基、ピロリジノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基、ジエタノールアミノ基、ヒドロキシピペリジノ基又はピペリジノ基であり、Ｒ4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であるアミノアルコール誘導体；
〔４〕一般式（１）において、Ｒ1 がフェニル基であり、Ｒ2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3 がモルホリノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基、又はジエタノールアミノ基であり、Ｒ4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）であるアミノアルコール誘導体；
〔５〕一般式（１）において、Ｒ1 がフェニル基であり、Ｒ2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3 がヒドロキシピペリジノ基であり、Ｒ4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）、（１Ｒ，２Ｓ）又は（１Ｓ，２Ｒ）であるアミノアルコール誘導体；
〔６〕一般式（１）において、Ｒ1 がフェニル基であり、Ｒ2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3 がモルホリノ基、ピロリジノ基、ピペリジノ基、シクロヘキシルアミノ基又はシクロペンチルアミノ基であり、Ｒ4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）であるアミノアルコール誘導体；に関する。
さらに、本発明は、上記一般式（１）で表されるアミノアルコール誘導体又は薬学的に許容されるその塩を含有する医薬に関し、特に神経疾患の治療剤又は脳保護剤に関する。
なお、上記〔４〕〜〔６〕における一般式（１）の化合物の立体配置、（１Ｓ，２Ｓ）、（１Ｒ，２Ｓ）、（１Ｓ，２Ｒ）又は（１Ｒ，２Ｒ）は、それぞれＬ−トレオ体、Ｌ−エリトロ体、Ｄ−エリトロ体又はＤ−トレオ体に相当する。
【００１９】
以下、本発明を具体的に説明する。
【００２０】
本発明において、低級とは炭素数が１〜６であることを意味する。
【００２１】
上記式中、Ｒ1 が表す基の炭素数は６〜１５が好ましく、置換基は低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシ低級アルキル又はニトロ基が好ましい。置換基を有していてもよいアリール基としては、好ましくは低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシ低級アルキル及びニトロから選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、例えばフェニル基、ジメトキシフェニル基、ジヒドロキシフェニル基が挙げられ、更に好ましくはフェニル基が挙げられる。またシクロアルキル基としてはシクロヘキシル基が挙げられる。
【００２２】
式中、Ｒ2 が表す基の炭素数は２〜１９が好ましく、より好ましくは炭素数７〜１５のアルキル基（例えばへプチル、ノニル、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル等）若しくはヒドロキシアルキル基（例えばヒドロキシへプチル、ヒドロキシノニル、ヒドロキシウンデシル、ヒドロキシトリデシル、ヒドロキシペンタデシル等）、炭素数４〜１４のアルコキシル基（例えばｔ−ブトキシ、ｎ−オクチルオキシ）、又はアラルキルオキシ基（例えばベンジルオキシ）である。Ｒ2 の最も好ましい例は、ノニル基、ｎ−オクチルオキシ基若しくはベンジルオキシ基である。
【００２３】
式中、Ｒ3 は、好ましくはモルホリノ基；低級アルキルアミノ基；モルホリノ低級アルキルアミノ基；ヒドロキシルで置換されていてもよいシクロアルキルアミノ基；ヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピロリジノ基；低級アルキルで置換されていてもよいピペラジノ基；ビス（ヒドロキシ低級アルキル）アミノ基；ヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピペリジノ基が挙げられる。より好ましくは、モルホリノ基、シクロヘキシルアミノ基、シクロペンチルアミノ基、ピロリジノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基、ジエタノールアミノ基、ヒドロキシピペリジノ基又はピペリジノ基が挙げられる。最も好ましい基は、本発明のアミノアルコール誘導体の使用目的、不斉炭素原子おける立体配置によって異なる。Ｒ3 がモルホリノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基又はジエタノールアミノ基であり、立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）である場合、又はＲ3 がヒドロキシピペリジノ基であり、立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）、（１Ｒ，２Ｓ）又は（１Ｓ，２Ｒ）である場合、糖脂質生合成促進作用及び神経突起伸長活性が強く、神経疾患の治療剤として特に有用である。一方、Ｒ3 がモルホリノ基、ピロリジノ基、ピペリジノ基、シクロヘキシルアミノ基又はシクロペンチルアミノ基であり、立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）である場合、糖脂質生合成抑制作用又は分化誘導作用が強く、癌治療剤として有用である。
【００２４】
式中、Ｒ4 が表す低級アルキル基としては、炭素数１〜４のアルキル基（メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル等）が好ましい。モノ若しくはジ低級アルキルアミノ基としては、１又は２個の前記低級アルキルを有するアミノ基（メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ブチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジブチルアミノ等）が好ましい。低級アルコキシル基としては、炭素数１〜４のアルコキシル基（メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ等）が好ましい。ｎは１〜４の整数であるが、好ましくは１又は２である。Ｒ4 としてより好ましい基は、水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基あるいはカルボキシル基であり、最も好ましくは水素原子である。−（ＣＨ2)n −Ｒ4 の好ましい一例としては、
【００２５】
【化７】
【００２６】
が挙げられる。
【００２７】
式（１）で示される本発明のアミノアルコール誘導体は、式（２）で示されるアミノアルコール誘導体の水酸基をＣＯ−（ＣＨ2)n −Ｒ4 に対応するカルボン酸又はその反応性誘導体を用い、自体既知の方法であるエステル化反応によって得られるが、このような方法に限定されるものではない。
【００２８】
式（２）で示されるアミノアルコール誘導体のＲ1 、Ｒ2 又はＲ3 に、エステル化試薬に対して反応性の官能基が含まれる場合は、この官能基をあらかじめ適当な保護基で保護し、エステル化反応を行った後、脱保護させてもよい。
【００２９】
【化８】
【００３０】
エステル化方法としては、上記カルボン酸と縮合剤を用いる方法、酸無水物を用いる方法、酸ハロゲン化物を用いる方法等が例示される。
具体的には、式（２）で示されるアミノアルコール誘導体又はその酸付加塩（例えば塩酸塩）を塩化メチレン、ピリジン等の有機溶媒中、上記カルボン酸と縮合剤（例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ))とエステル化触媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、Ｎ−ピロリジノピリジン）を用いて反応させる方法、酸無水物又は酸ハロゲン化物（例えば酸塩化物）と塩基（例えばピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウムのような無機塩基）を用いて反応させる方法等が例示される。なお、上記有機溶媒は、エステル化反応を阻害せず、上記アミノアルコール誘導体を溶解するものであれば、特に限定されるものではなく、また上記エステル化触媒もエステル化反応を促進するものであれば、特に限定されない。
【００３１】
エステル化反応は、通常約０〜５０℃、好ましくは室温下（５〜３５℃（ＪＩＳ Ｋ００５０))、数時間〜数日間、好ましくは１０時間〜２日間行われるが、反応条件は当業者であれば予備実験によって適宜に設定することができる。
エステル化反応の後、酢酸エチル、クロロホルム等による溶媒抽出、各種クロマトグラフィー（吸着クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー等）、結晶化の自体既知の精製手段を適宜に組み合わせて、式（１）で表される本発明化合物を精製・単離することができる。
【００３２】
上記式（２）で表される化合物は、例えばJ. Lipid. Res., Vol.28, 565-571(1987）及びJ. Biochem., Vol.111, 191-196(1992）に記載された次の方法に準じて合成し、必要に応じて光学分割することによって得られる。
【００３３】
【化９】
【００３４】
すなわち、例えば式（２）で表される化合物において、Ｒ1 がフェニル基で、Ｒ2 ＣＯがアシル基である場合、２−アシルアミノアセトフェノンをマンニッヒ反応で２級アミン（Ｒ3 Ｈ）と縮合させた後、水素化ホウ素ナトリウムで還元する。これにより得られた４つの異性体の混合物を、クロロホルム／エーテルで分別結晶化（ジアステレオマー分割）して、Ｄ，Ｌ−トレオ体及びＤ，Ｌ−エリトロ体をそれぞれラセミ体として得た後、更にまた、このラセミ体を酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、カンフル酸等の光学活性な塩で分別結晶化（光学分割）することにより、所望の立体配置を有する化合物を光学活性な塩として得ることができる。更に当業者が容易に行える方法で塩を除去し、目的化合物を遊離の塩基性化合物として得ることができる。
【００３５】
また、上記式（２）で表される化合物は、次に示すように、式（３）で表されるキラル化合物を出発物質として使用し、順次反応させることにより所望の立体配置を有する化合物として得られる。
【００３６】
【化１０】
【００３７】
〔式中、＊は不斉炭素を表し；Ｐ1 はアミノ基の保護基であり、例えばベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、ベンゼンスルホニル基、フルオレニルメチルオキシカルボニル基等が挙げられ；Ｙはメタンスルホニル、トリハロゲノメタンスルホニル、Ｐ−トルエンスルホニル、ベンゼンスルホニル、Ｐ−ブロモベンゼンスルホニル基等の脱離基を表す〕
【００３８】
すなわち、式（３）で示されるアミノアルコール誘導体の１級水酸基のみに脱離基（Ｙ）を導入して式（４）で示される化合物とした後、該化合物に式Ｒ3 Ｈで示されるアミンを反応させ、式（５）で示されるアミノアルコール誘導体とし、該化合物よりＰ1 を脱離させて式（６）で示されるアミノアルコール誘導体とし、ついでＲ2 ＣＯＯＨで示されるカルボン酸又はその反応性誘導体を反応させることにより、式（２）で示されるキラルなアミノアルコール誘導体を得ることができる。
【００３９】
また、上記式（２）で示される化合物は、次に示すように、キラル化合物（７）を出発物質として、オキサゾリン環を有する化合物（８）を合成中間体とする合成経路を踏襲することにより、所望の立体配置を有する化合物として得られる。
【００４０】
【化１１】
【００４１】
すなわち、化合物（７）の１級水酸基のみに脱離基（Ｙ）を導入後、塩基性条件下で閉環させてオキサゾリン環を有する化合物（８）とした後、再度１級水酸基に脱離基を導入し、アミン（Ｒ3 Ｈ）と反応させて化合物（９）とした後、酸処理によってオキサゾリン環を開環させることにより、キラルなアミノアルコール誘導体（２）を得ることができる。
式（１）で示される化合物の薬学的に許容される塩としては、塩酸、リン酸、硫酸、硝酸等の無機酸塩、ギ酸、酢酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸（メシル酸）、Ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸の塩を挙げることができる。このような塩の製造は自体既知の方法によって行うことができ、例えば式（１）で示される化合物（遊離型）をアルコール等の適宜な溶媒に溶解し、通常等モル程度の上記の酸を添加して反応させ、所望により溶媒を溜去すればよい。
【００４２】
〔溶解性〕
本発明化合物は遊離型である場合よりも、塩酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、コハク酸塩等の塩型である場合の方が、水又は生理食塩水に対する溶解性が向上する。
例えば、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰ塩酸塩の生理食塩水に対する溶解度は０．５mg/ml 程度であるのに対し、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰをアセチルエステル化した実施例１の化合物の塩酸塩（実施例１−２）は非常に溶解性が改善され、生理食塩水及び１％トウィーン８０(Tween８０）含有生理食塩水に対する溶解度はそれぞれ１００mg/ml 以上であった。また、実施例１−１の化合物のクエン酸塩（実施例１−２）も非常に溶解性が向上し、生理食塩水及び１％トウィーン８０含有生理食塩水に対する溶解度は１００mg/ml 以上であった。
【００４３】
〔作用〕
本発明化合物は、糖脂質の生合成を制御する作用を有し、該作用に基づく医薬としての有用性を有している。
式（１）で示される化合物は、その立体配置（Ｌ−トレオ、Ｌ−エリトロ、Ｄ−トレオ、Ｄ−エリトロ）により、上記生合成制御作用が異なる。このうち糖脂質（ガングリオシド等）生合成促進作用を有する化合物は、神経突起伸展促進効果、シナプス形成促進効果、神経細胞死防止効果、ＭＡＰキナーゼ活性化効果を有し、in vivo において記憶障害改善効果、シアン化カリウム惹起低酸素症モデル動物に対する脳保護効果を有しているので、このような効果に基づく神経疾患治療剤として有用である。したがって、本発明化合物の有効量を、末梢神経又は中枢神経の障害に起因する神経疾患に罹患したヒトを含む哺乳動物に投与することによって、該動物を治療することができる。代表的な疾患として、例えば脳卒中、脳梗塞、脳血管障害後遺症、脳出血、脳外傷、記憶障害、老年痴呆、アルツハイマー病やパーキンソン氏病等の、神経繊維が再生されることによって治療効果が期待される種々の中枢神経系疾患；並びに、例えば代謝障害性多発性神経障害、機械的神経障害、毒性神経障害等の種々の末梢神経系疾患が挙げられる。特に立体配置がＬ−トレオである本発明化合物は、神経疾患治療剤としての作用が強いが、糖脂質生合成促進作用を有する限り、立体配置には限定されず、例えばＬ−トレオ体である前記〔４〕に記載の化合物だけでなく、前記〔５〕に記載の化合物のように、Ｌ−トレオ体以外の立体配置の化合物も神経疾患治療剤の有効成分として使用できる。また、上記のような本発明化合物は、海馬ＣＡ１領域の神経細胞死を防止する効果が認められ、また本発明化合物の母体化合物（式（１）における−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ2)n −Ｒ4 の部分が−ＯＨである化合物）に比較して脳内移行性が高く、かつ脳内からの消失も緩慢であるため、中枢神経系疾患治療剤、特に脳保護剤若しくは脳神経賦活・保護剤として、例えば脳血管障害後遺症の治療に有効である。
【００４４】
一方、本発明化合物のうち、糖脂質合成阻害作用を有する化合物は、未分化な状態で異常増殖する細胞の分化を誘導する作用又は癌細胞を正常化する作用を有し、癌治療剤として有用である。立体配置がＤ−トレオ又はＬ−トレオである本発明化合物はこのような用途には好ましく用いられ、Ｄ−トレオ体が特に好ましい。例えば、前記〔６〕に記載の化合物をこのような目的に使用し得る。
【００４５】
〔製剤化〕
本発明化合物は、担体、賦形剤、その他の添加物と共に、経口又は非経口的に投与する製剤とすることができ、ヒトを含む哺乳動物の各種疾患（例えば神経疾患、癌）の治療に用いることができる。
【００４６】
経口製剤としては、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤等の固形製剤；シロップ剤、エリキシル剤、乳剤等の液状製剤を挙げることができる。散剤は、例えば乳糖、デンプン、結晶セルロース、乳酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水ケイ酸等の賦形剤と混合して得ることができる。顆粒剤は、上記賦形剤のほか、必要に応じて、例えば白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン等の結合剤や、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤を更に加え、湿式又は乾式で造粒して得ることができる。錠剤は、上記散剤又は顆粒剤をそのまま、又はステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤を加えて打錠して得ることができる。また、上記錠剤又は顆粒剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸メチルコポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースサクシネート等の腸溶性基剤で被覆し、あるいはエチルセルロース、カルナウバロウ、硬化油、白色セラック等で被覆し、これらを腸溶性又は持続性製剤にすることができる。硬カプセル剤は、上記散剤又は顆粒剤を硬カプセルに充填して得ることができる。また軟カプセル剤は、本発明化合物を、グリセリン、ポリエチレングリコール、ゴマ油、オリーブ油等に溶解し、これをゼラチン膜で被覆して得ることができる。シロップ剤は、白糖、ソルビトール、グリセリン等の甘味剤と本発明化合物とを、水に溶解して得ることができる。また、甘味剤及び水のほかに、精油、エタノール等を加えてエリキシル剤とするか、あるいはアラビヤゴム、トラガント、ポリソルベート類（ポリソルベート２０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０（トウィーン８０）等）、カルボキシメチルセルロースナトリウム等を加えて、乳剤又は懸濁剤にすることもできる。またこれらの液状製剤には、必要に応じ、矯味剤、着色剤、保存剤等を加えることができる。
【００４７】
非経口製剤としては、注射剤、直腸投与剤、ペッサリー、皮膚外用剤、吸入剤、エアゾール剤、点眼剤等を挙げることができる。注射剤は、本発明化合物に、必要に応じてポリソルベート類等の非イオン界面活性剤；塩酸、水酸化ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム等のpH調整剤；塩化ナトリウム、ブドウ糖等の等張化剤；アミノ酸類等の安定化剤；及び注射用蒸留水又は生理食塩水を加え、滅菌濾過した後、アンプルに充填して得ることができる。また更にマンニトール、デキストラン、ゼラチン等を加えて真空凍結乾燥し、用時溶解型の注射剤とすることができる。その他、粉末充填型の注射剤とすることもできる。また本発明化合物に、レシチン、ポリソルベート類、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、マクロゴール等の乳化剤を加えた後、水中で乳化させた注射用乳剤にすることもできる。
【００４８】
また、注射剤としては、溶解性、目標臓器への移行速度の改善が可能なリポソーム製剤やリピッドマイクロスフェア等が挙げられる。特にナノスフェア−リポソーム（脂質超微粒子）は、網内系組織に取り込まれることなく血中濃度を高め、薬効発現に必要な最小有効投与量を低下させることができるだけでなく、脳血管関門を１０倍程度通過しやすくするので、脳の神経疾患の治療に使用する場合に好適である。リポソーム製剤は、公知のリポソーム調製法(C.G. Knight, Liposomes: From Physical Structure to Therapeutic Applications, pp. 51-82, Elsevier, Amsterdam (1981); Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A., Vol.75, 4194(1978))に従って調製することができる。
【００４９】
すなわち、リポソーム膜を形成する両親媒性物質としては、天然リン脂質（卵黄レシチン、大豆レシチン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ジホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミン、カルジオリピン等）、合成リン脂質（ジステアロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン等）等のリン脂質が使用される。また、膜の安定性、流動性、薬剤の膜透過性を改善するために、コレステロール類（コレステロール、エルゴステロール、フィトステロール、シトステロール、スチグマステロール等）、リポソームに負電荷を付与することが知られている物質（ホスファチジン酸、ジセチルホスフェート等）、正電荷を付与することが知られている物質（ステアリルアミン、ステアリルアミンアセテート等）、酸化防止剤（トコフェロール等）、油性物質（大豆油、綿実油、ゴマ油、肝油等）等、公知の種々の添加剤を使用してもよい。
【００５０】
リポソームの製造は、例えば以下の方法で行うことができる。上記両親媒性物質及び添加剤と本発明化合物を、有機溶媒（クロロホルム、ジクロロメタン、エタノール、メタノール、ヘキサン等の単独又は混合溶媒）にそれぞれ溶解し、両溶液を混合し、フラスコ等の容器中において不活性ガス（窒素ガス、アルゴンガス等）の存在下で有機溶媒を除去し、器壁に薄膜を付着させる。次いで、この薄膜を適当な水性媒体（生理食塩水、緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等）に加え、撹拌機で撹拌する。小粒径のリポソームを得るためには、超音波乳化機、加圧型乳化機、フレンチプレス細胞破砕機等を用いて更に分散させる。このようにリポソーム化に必要な両親媒性物質等と本発明化合物が水性媒体に分散した液を、メンブランフィルター処理することによってリポソーム化が進行し、粒径分布が制御されたナノスフェア−リポソーム（脂質超微粒子；粒径２５〜５０nm程度）を得ることができる。また、リポソームを限外濾過、遠心分離、ゲル濾過等の分画処理に付し、担持されなかった薬剤を除去してもよい。
【００５１】
また、膜形成物質として、上記両媒性物質、添加剤の他に、β−オクチルグルコシド、Ｌ−チロシン−７−アミド−４−メチルクマリン、フェニルアミノマンノシド又はスルファチドを添加することによって得られる、グルコース残基、チロシン残基、マンノース残基又はスルファチドを膜上に有するリポソームに、本発明化合物を担持させることによって、脳血管関門を通過しやすくすることもできる（特開平４−６９３３２号参照）。
【００５２】
リピッドマイクロスフェアは、本発明化合物を大豆油、ゴマ油等に溶解し、天然リン脂質、グリセリン、水等を加え撹拌機で撹拌し、更に超音波乳化機、加圧型乳化機、フレンチプレス細胞破砕機等を用いて分散させることにより得られる。
【００５３】
直腸投与剤は、本発明化合物にカカオ脂肪酸のモノ、ジ又はトリグリセリド、ポリエチレングリコール等の坐剤用基剤を加えた後、加温して溶融し、これを型に流し込んで冷却するか、あるいは本発明化合物をポリエチレングリコール、大豆油等に溶解した後、ゼラチン膜で被覆して得ることができる。
【００５４】
皮膚外用剤は、本発明化合物に白色ワセリン、ミツロウ、流動パラフィン、ポリエチレングリコール等を加え、必要に応じ加温し、混練して得ることができる。
【００５５】
テープ剤は、本発明化合物にロジン、アクリル酸アルキルエステル重合体等の粘着剤を混練し、これを不織布等に展延して得ることができる。
【００５６】
吸入剤は、例えば薬学的に許容される不活性ガス等の噴射剤に、本発明化合物を溶解又は分散し、これを耐圧容器に充填して得ることができる。
【００５７】
本発明化合物を神経疾患の治療剤、特に脳保護剤若しくは脳神経賦活・保護剤として使用する場合、注射剤が好ましく、静脈注射剤がより好ましい。このような注射剤は、本発明化合物の脳内移行性を考慮して、リピッドマイクロスフェア製剤、界面活性剤を含む製剤としてもよい。
【００５８】
〔投与方法〕
本発明化合物を有効成分として含有する薬剤の投与方法は、特に限定されないが、中枢神経系の障害に起因する神経疾患の治療に使用する場合、筋肉内注射、静脈内注射、皮下注射又は腹腔内注射等の注射、経直腸投与、経肺投与、点眼等が好ましい。
投与量は、患者の年令、健康状態、体重等に応じ適宜決定するが、一般には、０．２５〜２００mg/kg 、好ましくは０．５〜１００mg/kg を一日１回あるいはそれ以上に分けて投与する。
【００５９】
〔毒性〕
５週齢のWister系ラットを用い、実施例１−２の本発明化合物（塩酸塩）及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰ塩酸塩（調製例４−２の化合物）の安全性を検討した。賦形剤（Vehicle)として１．５％〜２．５％Tween ８０含有生理食塩水を用いて各化合物を含む注射剤を調製し、上記ラットに静脈注射（i.v.) により投与した結果を表１に示す。
【００６０】
【表１】
【００６１】
【実施例】
次に本発明を実施例により更に詳細に説明するが、本発明はその要旨を越えない限り、以下の実施例に限定されものではない。
なお、中間体の合成例を調製例として示す。
【００６２】
調製例１ （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステルの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール１５．４ｇ（５１．０mmol）を塩化メチレン１５０mlに溶かし、ピリジン１２．１ml（１４９．６mmol）を加えた後、氷浴上でメタンスルホニルクロリド４．５ml（５８．１mmol）を５分間かけて滴下した。氷浴上で３０分間撹拌した後、室温で一晩撹拌した。反応が終了していることをＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で確認した後、水１００ml及びクロロホルム５０mlを加え、有機層を１N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び水それぞれ１００mlで順次洗浄した後、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過した。溶媒を留去し、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１（１００ml）を加え、一夜放置した。析出した結晶をろ取し、ｎ−へキサン：酢酸エチル＝２：１で洗浄して、白色結晶の標記物質１６．６ｇ（収率８５．７％）を得た。
【００６３】
調製例２ （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル１．２１ｇ（３．１９mmol）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６mlに溶かし、室温下、モルホリン１．１１ｇ（１２．８mmol）を加え、４０℃で２４時間撹拌した。反応がほぼ終了していることをＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２、酢酸エチル）で確認した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液７０ml及び酢酸エチル１００mlを加え、有機層を水及び飽和食塩水それぞれで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）で精製し、無色油状の標記物質５０７．５mg（収率４３．０％）を得た。
【００６４】
調製例３ （１Ｓ，２Ｓ）−２−アミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール４３８．８mg（１．１９mmol）をメタノール１０mlに溶かし、１０％パラジウム炭素１２６．５mg（１０．０mol ％）を加え、水素雰囲気下、室温で一夜撹拌した。ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝９：１及び７：３）で反応が終了していることを確認した後、パラジウム炭素をろ過除去した。ろ液を濃縮して、無色油状の標記物質２７５．６mg（収率９８．５％）を得た。
【００６５】
調製例４−１ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−アミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール９４４．０mg（４．００mmol）をメタノール４mlに溶かし、トリエチルアミン６６８．０μl(４．８mmol）を加え、氷冷下にてデカノイルクロリド０．８２ml（４．０mmol）を滴下した。３０分後、ＴＬＣ（酢酸エチル、クロロホルム：メタノール＝２０：１、クロロホルム：メタノール＝７：３）で反応がほとんど終了していることを確認した後、メタノール３０mlを加え、９０分間放置した。反応溶液を減圧濃縮後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液２０mlを加え、酢酸エチル５０mlで抽出した。有機層を水及び飽和食塩水それぞれ２０mlで順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し、無色油状の標記物質９３０．５mg（収率５９．６％）を得た。
【００６６】
調製例４−２ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩の調製
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール（１７９ｇ，４５９．０mmol）に２N 塩酸（２５０ml）を加え、氷冷下にて一夜放置した。析出した結晶をグラスフィルター上でろ取し、水（１００ml×５）、エーテル（１００ml×５）で順次洗浄後、室温下４８時間減圧乾燥し、白色結晶の（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩（９８．０ｇ、収率５０．０％）を得た。
【００６７】
調製例５ （１Ｓ，２Ｓ）−２−オクチルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
調製例３で得られた（１Ｓ，２Ｓ）−２−アミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール６２７．７mg（２．６６mmol）をメタノール１０mlに溶かし、室温下、トリエチルアミン０．５１８ml（３．７２３mmol）を加えた後、氷浴上にてクロロギ酸ｎ−オクチルエステル０．６２５ml（３．１９mmol）を加え、室温下１５時間撹拌した。反応終了後、メタノール５mlを加え２０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去し、酢酸エチル１００mlを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）で精製し、無色油状の標記物質８１４．５mg（収率７８．１％）を得た。
TLC Rf 0.21(n-Hexane:AcOEt=1: 2), 0.32(CHCl3:MeOH=20:1), 0.36(AcOEt)
1H-NMR(CDCl3) δ: 7.38-7.26(5H, m, aromatic), 4.99(1H, d, J=3.42Hz, H--1), 4.08(1H, m, H-2), 3.98(2H, m, COOCH2), 3.73(4H, m, (CH2)2O), 2.66-2.45(6H, m, CH2N(CH2)2), 1.54(2H, m, COOCH2CH 2 ), 1.27(10H, m,(CH 2 )5CH3), 0.88(3H, t, CH2CH 3 )
13C-NMR(CDCl3)δ: 156.5, 140.7, 128.3, 127.6, 126.2, 75.4, 66.9, 65.3, 60.1, 54.4, 52.0, 31.7, 29.2, 29.0, 28.9, 25.7, 22.6, 14.0
前記の方法（表１参照）と同様の方法によって測定した本化合物のＬＤ50値（i.v.投与）は６９mg/kg であり、２週反復投与での無影響量（反復投与後の一般状態、体重、摂餌量、尿検査、血液学的検査、剖検及び肝臓・腎臓の組織学的検査の全てに異常が認められない安全性を示す投与量）は２０mg/kg であった。
【００６８】
調製例６ （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル１．５２ｇ（４．０１mmol）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）８mlに溶かし、ピロリジン１．１４ｇ（１６．０mmol）を加え、４０〜５０℃で１８時間撹拌した後、酢酸エチル１００mlを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質１．２１ｇ（収率８５．５％）を得た。
【００６９】
調製例７ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−ノネン−３−オールの合成
（１）（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−４−ノネン−１，３−ジオール２．３ｇ（７．０２mmol）のピリジン１０ml溶液に、窒素雰囲気下０℃で、メタンスルホニルクロリド０．６５ml（８．４３mmol）を滴下した。０℃で１時間撹拌後、モルホリン６．１ml（７０．２mmol）を加え、４４時間撹拌した。酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ3 Ｃｌ）で精製し、標記物質１．４６ｇ（収率６７％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.77(1H, dt, J=15.5, 6.6Hz, =CH-CH2), 5.49(1H, dd, J=15.5, 8.3Hz, CH-CH=), 4.69(1H, t, J=8.3Hz, O-CH), 3.80(2H, m), 3.50(1H, m, CH-OH), 2.27(2H, t, J=7.6Hz, N=C-CH2), 2.07(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.62(2H, m), 1.26(16H, m), 0.89(6H, m, CH3)
TOF-Mass: 310(M+H+), 333(M+Na+H+), (C19H35NO2 309)
HRMS(FAB)C19H36NO2(M+H+), 理論値; 310.2746 測定値; 310.2750
〔α〕D 23=-75.9 °(c=1.10, CHCl3)
【００７０】
（２）（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−モリホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン７００mg（２．２６mmol）の塩化メチレン１５ml溶液に、窒素雰囲気下−４５℃で、ピリジン０．５５ml（６．７９mmol）と無水トリフルオロ酢酸０．４６ml（２．７１mmol）を滴下した。−４５℃で１時間撹拌後、モルホリン１．９８ml（２２．６mmol）を加えた。−４５℃で１時間、室温で２時間撹拌後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、標記物質１４１．０mg（収率３９％）を得た。
1H-NMR(CDCl3): 5.76(1H, dt, J=15.2，6.9Hz, =CH-CH2), 5.46(1H, dd, J=15.2，7.6Hz, CH-CH=)，4.62(1H, t, J=7.6Hz, O-CH)，3.87(1H, q, J=6.9Hz, N-CH)，3.68(4H, m, (CH2)2O)，2.63-2.32(6H, m, CH2N(CH2)2)，2.26(2H, t, J=8.0Hz, N=C-CH2), 2.06(2H, m, =CH-CH 2 ), 1.61(2H, m)，1.26(16H, m)，0.89(6H, m, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 167.7, 134.7, 128.1, 84.5, 69.7, 66.7, 62.9, 54.0, 31.7, 31.0, 29.3, 29.1, 29.0, 28.2, 25.9, 22.5, 22.0, 14.0, 13.7
TOF-Mass: 379(M+H+), (C23H42N2O2 378)
HRMS(FAB)C23H43N2O2(M+H+), 理論値; 379.3325 測定値; 379.3322
〔α〕D 23=-38.4 °(c=1.00, CHCl3)
【００７１】
（３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−ノネン−３−オール
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−モリホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン３９mg（０．１０３mmol）に３N 塩酸３mlを加え、室温で１３時間撹拌した。１N ＮａＯＨでpH９に調整した後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：３）で精製し、標記物質２４．５mg（収率６０％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.73(1H, dt, J=15.5, 6.6Hz, H-5), 5.42(1H, dd, J=15.2, 6.3Hz, H-4), 4.28(1H, dd, J=5.9, 3.3Hz, H-3), 4.05(1H, m, H-2), 3.69(4H, t, J=4.6Hz, (CH2)2O), 2.69(1H, dd, J=13.2, 6.6Hz, H-1a), 2.56(4H, t, J=4.6Hz, N(CH2)2), 2.51(1H, dd, J=13.2, 5.9Hz, H-1b), 2.17(2H, t, J=7.9Hz, CO-CH2), 2.06(2H, m, =CH-CH 2 ), 1.60(2H, m), 1.26(16H, m), 0.89(6H, m, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 173.5, 133.5, 128.8, 73.5, 66.7, 59.6, 54.1, 49.8, 36.7, 31.9, 31.2, 29.3, 29.1, 25.7, 22.5, 22.1, 14.0, 13.8
TOF-Mass: 397(M+H+), 420(M+Na+)(C23H44N2O3 396)
HRMS(FAB)C23H45N2O3(M+H+), 理論値; 397.3430 測定値; 397.3430
〔α〕D 23=-23.3 °(c=0.49, CHCl3)
【００７２】
調製例８ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−オクタデセン−３−オールの合成
（１）（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−４−オクタデセン−１，３−ジオール２．４８ｇ（５．４７mmol）のピリジン２０ml溶液に、窒素雰囲気下０℃で、メタンスルホニルクロリド０．５５ml（７．１１mmol）を滴下した。０℃で１時間撹拌後、モルホリン４．８ml（５４．７mmol）を加え、室温下１５時間撹拌した。クロロホルムで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物にヘキサンを加え、析出した結晶をろ過除去し、ろ液を減圧濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ3 Ｃｌ）で精製し、標記物質１．６４ｇ（収率６９％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.77(1H, dt, J=15.3, 6.6Hz, =CH-CH2), 5.48(1H, dd, J=15.3, 8.1Hz, CH-CH=), 4.70(1H, t, J=8.1Hz, O-CH), 3.80(2H, m, CH-OH, N-CH), 3.49(1H, dd, J=11.6, 4.3Hz, CH-OH), 2.26(2H, t, J=7.9Hz, N=C-CH2), 2.05(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.61(2H, m, N=C-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 169.0, 135.6, 127.5, 82.4, 73.4, 62.6, 32.1, 31.8, 29.5, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0, 28.7, 28.2, 25.9, 22.6, 14.0
TOF-Mass: 436(M+H+) ，459(M+Na+H+), (C28H53NO2 435)
HRMS(FAB)C28H54NO2(M+H+), 理論値; 436.4155 測定値; 436.4147
〔α〕D 23=-54.4 °(c=1.00, CHCl3)
【００７３】
（２）（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン１．５８ｇ（３．６３mmol）の塩化メチレン２００ml溶液に、窒素雰囲気下−４５℃で、ピリジン０．８８ml（１０．９mmol）と無水トリフルオロ酢酸０．７３ml（４．３５mmol）を滴下した。−４５℃で２時間撹拌後、モルホリン３．２ml（３６．３mmol）を加えた。−４５℃で２時間、室温で８時間撹拌後、クロロホルムで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、標記物質４３２mg（収率２４％）を得た。
1H-NMR(CDCl3): 5.75(1H, dt, J=15.2, 6.9Hz, =CH-CH2), 5.46(1H, dd, J=15.2, 7.6Hz, CH-CH=), 4.62(1H, t, J=7.6Hz, O-CH), 3.87(1H, q, J=6.9Hz, N-CH), 3.68(4H, m, (CH2)2O), 2.63-2.32(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.26(2H, t, J=8.0Hz, N=C-CH2), 2.05(2H, q, J=6.9Hz, =CH-CH 2 ), 1.62(2H, m, N=C-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 167.8, 134.8, 128.1, 84.5, 69.7, 66.8, 62.9, 54.1, 32.1, 31.8, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 29.0, 28.9, 28.3, 26.0, 22.6, 14.0
TOF-Mass: 505(M+H+), (C32H60N2O2 504)
HRMS(FAB)C32H61N2O2(M+H+), 理論値; 505.4733 測定値; 505.4736
〔α〕D 23=-18.8 °(c=1.00, CHCl3)
【００７４】
（３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−オクタデセン−３−オール
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン３１４mg（０．６２mmol）に３N 塩酸３mlを加え、室温で２時間撹拌した。反応液に１N ＮａＯＨを加えpH９に調整した後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：４）で精製し、標記物質１８７．０mg（収率５８％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.73(1H, dt, J=15.2, 6.9Hz, H-5), 5.42(1H, dd, J=15.2, 6.3Hz, H-4), 4.27(1H, dd, J=6.3, 3.6Hz, H-3), 4.04(1H, m, H-2), 3.69(4H, t, J=4.6Hz, (CH2)2O), 2.69(1H, dd, J=12.9, 6.6Hz, H-1b), 2.55(4H, t, J=4.6Hz,N(CH2)2), 2.49(1H, dd, J=12.9, 5.6Hz, H-1b), 2.17(2H, t, J=7.6Hz, CO-CH2), 2.04(2H, q, J=6.6Hz，=CH-CH 2 )，1.60(2H, m，CO-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz，CH3)
13C-NMR(CDCl3): 173.4, 133.5, 128.8, 73.6, 66.8, 59.7, 54.2, 49.8, 36.7, 32.2, 31.8, 31.7, 29.6, 29.4, 29.3, 29.2, 25.7, 22.5, 14.0
TOF-Mass: 524(M+H+), 546(M+Na+)(C32H62N2O3 522)
HRMS(FAB)C32H63N2O3(M+H+), 理論値; 523.4838 測定値; 523.4837
〔α〕D 23=-17.6 °(c=1.00, CHCl3)
【００７５】
調製例９ （２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−ノネン−３−オール
（１）（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−４−ノネン−１，３−ジオール８８．８mg（０．３０５mmol）の塩化メチレン２ml溶液に、窒素雰囲気下０℃で、トリエチルアミン１２８μl(０．９１６mmol）及びメタンスルホニルクロリド２８μl(０．３６６mmol）を滴下した。０℃で１時間撹拌後、モルホリン（２６７μl(３．０５mmol）を加え、室温で１９時間撹拌した。酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ3 Ｃｌ）で精製し、標記物質４８．５mg（収率５１％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.77(1H, dt, J=15.5, 6.6Hz, =CH-CH2), 5.49(1H, dd, J=15.5, 8.3Hz, CH-CH=), 4.69(1H, t, J=8.3Hz, O-CH), 3.80(2H, m), 3.50(1H, m, CH-OH), 2.27(2H, t, J=7.6Hz, N=C-CH2), 2.07(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.62(2H, m), 1.26(16H, m), 0.89(6H, m, CH3)
TOF-Mass: 310(M+H+), 333(M+Na+H+), (C19H35NO2 309)
HRMS(FAB)C19H36NO2(M+H+), 理論値; 310.2746 測定値; 310.2750
〔α〕D 23=+75.9 °(c=1.10, CHCl3)
【００７６】
（２）（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン２９８．０mg（０．９６３mmol）の塩化メチレン２ml溶液に、窒素雰囲気下−４５℃で、ピリジン２３４μl(２．８９mmol）と無水トリフルオロ酢酸１９４μl(１．１６mmol）を滴下した。−４５℃で１．５時間撹拌後、モルホリン０．８４ml（９．６３mmol）を加えた。−４５℃で１時間、室温で２時間撹拌後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、標記物質１４１．０mg（収率３９％）を得た。
1H-NMR(CDCl3): 5.76(1H, dt, J=15.2, 6.9Hz, =CH-CH2), 5.46(1H, dd, J=15.2, 7.6Hz, CH-CH=), 4.62(1H, t, J=7.6Hz, O-CH), 3.87(1H, q, J=6.9Hz, N-CH), 3.68(4H, m, (CH2)2O), 2.63-2.32(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.26(2H, t, J=8.0Hz, N=C-CH2), 2.06(2H, m, =CH-CH 2), 1.61(2H, m), 1.26(16H, m), 0.89(6H, m, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 167.7, 134.7, 128.1, 84.5, 69.7, 66.7, 62.9, 54.0, 31.7, 31.0, 29.3, 29.1, 29.0, 28.2, 25.9, 22.5, 22.0, 14.0, 13.7
TOF-Mass: 379(M+H+), (C23H42N2O2 378)
HRMS(FAB)C23H43N2O2(M+H+), 理論値; 379.3325 測定値; 379.3322
〔α〕D 23=+32.5 °(c=0.43, CHCl3)
【００７７】
（３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−ノネン−３−オール
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン１７４．０mg（０．４６mmol）に３N 塩酸３mlを加え、室温で１３時間撹拌した。反応溶液に１N ＮａＯＨを加えpH９に調整した後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：３）で精製し、標記物質１０６．４mg（収率５９％）を得た。
1H-NMR(CDCl3;D2O exchange): 5.73(1H, dt, J=15.5, 6.6Hz, H-5), 5.42(1H, dd, J=15.2, 6.3Hz, H-4), 4.28(1H, dd, J=5.9, 3.3Hz, H-3), 4.05(1H, m, H-2), 3.69(4H, t, J=4.6Hz, (CH2)2O), 2.69(1H, dd, J=13.2, 6.6Hz, H-1a), 2.56(4H, t, J=4.6Hz, N(CH2)2), 2.51(1H, dd, J=13.2, 5.9Hz, H-1b), 2.17(2H, t, J=7.9Hz, CO-CH2), 2.06(2H, m, =CH-CH 2 ),1.60(2H,m), 1.26(16H,m), 0.89(6H, m, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 173.5, 133.5, 128.8, 73.5, 66.7, 59.6, 54.1, 49.8, 36.7, 31.9, 31.2, 29.3, 29.1, 25.7, 22.5, 22.1, 14.0, 13.8
TOF-Mass: 397(M+H+), 420(M+Na+)(C23H44N2O3 396)
HRMS(FAB)C23H45N2O3(M+H+), 理論値; 397.3430 測定値; 397.3430
〔α〕D 23=+23.0 °(c=1.00, CHCl3)
【００７８】
調製例１０ （２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−オクタデセン−３−オールの合成
（１）（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−４−オクタデセン−１，３−ジオール１．３８ｇ（３．０４mmol）のピリジン１０ml溶液に、窒素雰囲気下０℃で、メタンスルホニルクロリド０．３３ml（４．２６mmol）を滴下した。０℃で２時間撹拌後、モルホリン２．７ml（３０．４mmol）を加え、室温下１８時間撹拌した。クロロホルムで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物にヘキサンを加え、析出した結晶をろ過除去し、ろ液を減圧濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ3 Ｃｌ）で精製し、標記物質４９６mg（収率３７％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.77(1H, dt, J=15.3, 6.6Hz, =CH-CH2), 5.48(1H, dd, J=15.3, 8.1Hz, CH-CH=), 4.70(1H, t, J=8.1Hz, O-CH), 3.80(2H, m, CH-OH, N-CH), 3.49(1H, dd, J=11.6, 4.3Hz, CH2-OH), 2.26(2H, t, J=7.9Hz, N=C-CH2), 2.05(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.61(2H, m, N=C-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 169.0, 135.6, 127.5, 82.4, 73.4, 62.6, 32.1, 31.8, 29.5, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0, 28.7, 28.2, 25.9, 22.6, 14.0
TOF-Mass: 436(M+H+), 459(M+Na+H+), (C28H53NO2 435)
HRMS(FAB)C28H54NO2 (M+H+), 理論値; 436.4155 測定値; 436.4147
〔α〕D 23=+54.7 °(c=2.94, CHCl3)
【００７９】
（２）（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン８０２mg（１．８４mmol）の塩化メチレン４０ml溶液に、窒素雰囲気下−４５℃で、ピリジン０．４５ml（５．５２mmol）と無水トリフルオロ酢酸３７２μl(２．２１mmol）を滴下した。−４５℃で２時間撹拌後、モルホリン１．６１ml（１８．４mmol）を加えた。−４５℃で１時間、室温で５時間撹拌後、クロロホルムで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、標記物質２１９mg（収率２４％）を得た。
1H-NMR(CDCl3): 5.75(1H, dt, J=15.2，6.9Hz, =CH-CH2), 5.46(1H, dd, J=15.2，7.6Hz, CH-CH=)，4.62(1H, t, J=7.6Hz, O-CH)，3.87(1H, q, J=6.9Hz, N-CH)，3.68(4H, m, (CH2)2O)，2.63-2.32(6H, m, CH2N(CH2)2)，2.26(2H, t, J=8.0Hz, N=C-CH2), 2.05(2H, q, J=6.9Hz，=CH-CH 2 )，1.62(2H, m, N=C-CH2-CH 2 )，1.26(34H, m)，0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 167.8, 134.8, 128.1, 84.5, 69.7, 66.8, 62.9, 54.1, 32.1, 31.8, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 29.0, 28.9, 28.3, 26.0, 22.6, 14.0
TOF-Mass: 505(M+H+), (C32H60N2O2 504)
HRMS(FAB)C32H61N2O2(M+H+), 理論値; 505.4733 測定値; 505.4736
〔α〕D 23=+19.4 °(c=0.32, CHCl3)
【００８０】
（３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−オクタデセン−３−オール
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン１９０mg（０．３８mmol）に３N 塩酸３mlを加え、室温で２時間撹拌した。反応液に１N ＮａＯＨを加えpH９に調整した後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：３）で精製し、標記物質１２５mg（収率６３％）を得た。
1H-NMR(CDCl3;D2O exchange): 5.73(1H, dt, J=15.2, 6.9Hz, H-5), 5.42(1H, dd, J=15.2, 6.3Hz, H-4), 4.27(1H, dd, J=6.3, 3.6Hz, H-3), 4.04(1H, m, H-2), 3.69(4H, t, J=4.6Hz, (CH2)2O), 2.69(1H, dd, J=12.9, 6.6Hz, H-1b), 2.55(4H, t, J=4.6Hz, N(CH2)2), 2.49(1H, dd, J=12.9, 5.6Hz, H-1b), 2.17(2H, t, J=7.6Hz, CO-CH2), 2.04(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.60(2H, m, CO-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 173.4, 133.5, 128.8, 73.6, 66.8, 59.7, 54.2, 49.8, 36.7, 32.2, 31.8, 31.7, 29.6, 29.4, 29.3, 29.2, 25.7, 22.5, 14.0
TOF-Mass: 524(M+H+), 546(M+Na+)(C32H62N2O3 522)
HRMS(FAB)C32H63N2O3(M+H+), 理論値; 523.4838 測定値; 523.4837
〔α〕D 23=+16.9 °(c=0.95, CHCl3)
【００８１】
実施例１−１ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩１０．００ｇ（２２．４７mmol）を塩化メチレン２２０mlに溶かし、室温下、ピリジン９．１０ml（１１２．５１mmol）及び無水酢酸８．５０ml（９０．１７mmol）を加え一夜撹拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え３０分間撹拌した後、有機層を水、１N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ１５０mlで順次洗浄し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をヘキサンと酢酸エチルの混合溶媒に溶解後、室温下放置し、析出した結晶をろ取し、白色結晶の標記物質５．３５ｇ（収率５５．２％）を得た。
TLC Rf. 0.23（酢酸エチル）、0.36（クロロホルム：メタノール＝20:1）
1H-NMR(CDCl3): 7.35-7.26(5H, m, aromatic), 6.05(1H, d, J=4.88Hz, H-1), 5.57(1H, d, J=9.28Hz, NH), 4.51(1H, m, H-2), 3.64(4H, m, (CH2)2O), 2.49-2.39 及び2.38-2.29(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.18-2.06(5H, m, COCH3, COCH2), 1.54(2H, m, COCH2CH 2 ), 1.25(12H, m, (CH 2)6CH3), 0.88(3H, t, CH2CH 3 )
13C-NMR(CDCl3): 172.8, 169.9, 137.6, 128.5, 128.2, 126.5, 75.0, 67.0, 59.1, 53.9, 50.4, 36.8, 31.8, 29.4, 29.3, 29.2, 25.7, 22.6, 21.0, 14.1
【００８２】
実施例１−２ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテート塩酸塩及びその他の塩の調製
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテート １，４１４．６mg（３．２７５mmol）をエタノール３０mlに溶かし、室温下２N 塩酸１，６３８μl(３．２７６mmol）を加え、１０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去した。この後エタノール３０mlを加え、減圧留去する操作を３回繰り返し、室温下４８時間減圧乾燥し、白色無晶状の（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテート塩酸塩１．５４ｇ（収率１００％）を得た。
また、上記塩酸塩の調製法において、塩酸の代わりにＬ−乳酸、クエン酸又はコハク酸を使用し、（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテートの上記各カルボン酸の塩を調製した。
【００８３】
実施例２ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノアセテートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩９０２．１mg（２．０３mmol）、ジシクロヘキシルカルボジイミド７０９．６mg（３．４４mmol）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン２１６．２mg（２．１０mmol）及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン９８．５mg（０．８０６mmol）に塩化メチレン２０mlを加え、室温下２日間撹拌した。反応終了後、白色結晶をろ過除去し、ろ液を濃縮後、クロロホルム１００mlを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝９：１）で精製し、赤色油状の標記物質７１３．８mg（収率７４．１％）を得た。
TLC Rf. 0.33（クロロホルム：メタノール＝20:1）、0.19（酢酸エチル：メタノール＝9:1)
1H-NMR(CDCl3): 7.34-7.26(5H, m, aromatic), 6.13(1H, d, J=4.39Hz, H-1), 5.95(1H, d, J=8.79Hz, NH), 4.51(1H, m, H-2), 3.65(4H, m, (CH2)2O), 3.25(2H, d, J=2.93Hz, COCH2N), 2.44(4H, m, N(CH2)2), 2.35-2.32(8H, m, H-3, N(CH3)2), 2.11(2H, m, COCH2), 1.53(2H, m, COCH2CH 2 ), 1.25(12H, m, (CH 2 )6CH3), 0.88(3H, t, CH2CH 3 )
13C-NMR(CDCl3): 172.8, 169.5, 137.5, 128.4, 128.2, 126.5, 75.1, 67.0, 60.5, 59.2, 53.8, 50.4, 45.3, 36.7, 31.8, 29.4, 29.3, 29.2, 25.7, 22.6, 14.1
【００８４】
実施例３ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル メトキシアセテートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩９８２．２mg（２．２０７mmol）を塩化メチレン２０mlに溶かし、室温下ピリジン０．３５７ml（４．４１mmol）及びメトキシアセチルクロリド０．２４２ml（２．６５mmol）を加えて撹拌し、２４時間後ピリジン０．１７９ml（２．２０７mmol）及びメトキシアセチルクロリド０．２０２ml（２．２０７mmol）を追加した。反応終了後、メタノール５mlを加え、２０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去し、酢酸エチル１００mlを加え、有機層を１N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝４０：１）で精製し、無色油状の標記物質１，０００．８mg（収率９８．２％）を得た。
TLC Rf. 0.39（クロロホルム：メタノール＝20:1）、0.48（酢酸エチル：メタノール＝20:1）
1H-NMR(CDCl3): 7.36-7.27(5H, m, aromatic), 6.14(1H, d, J=4.88Hz, H-1), 5.64(1H, d, J=9.28Hz, NH), 4.54(1H, m, H-2), 4.09(2H, m, CH 2 OCH3), 3.64(4H, m, (CH2)2O), 3.44(3H, s, OCH3), 2.48-2.37及び2.35-2.30(6H, m, CH2N(CH2)2)，2.12(2H, m, COCH2)，1.54(2H, m, COCH2CH 2 ), 1.25(12H, m, (CH 2 )6CH3)，0.88(3H, t, CH2CH3)
13C-NMR(CDCl3): 172.8, 169.3, 137.1, 128.5, 128.4, 126.6, 75.5, 69.8, 66.9, 59.4, 59.0, 53.8, 50.3, 36.8, 31.8, 29.4, 29.3, 29.2, 29.1, 25.7, 22.6, 14.0
【００８５】
実施例４ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル ヒドロゲンサクシネートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩９５０．６mg（２．１３６mmol）を塩化メチレン２２０mlに溶かし、室温下ピリジン０．３４６ml（４．２７２mmol）及び無水コハク酸３４６．１mg（３．４５９mmol）を加えて撹拌し、２４時間後ピリジン０．１４１ml（１．７３７mmol）及び無水コハク酸１７３．８mg（１．７３７mmol）を追加した。反応終了後、１N 塩酸７０mlを加え、２０分間撹拌した後、クロロホルム１００mlで抽出し、有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、白色無晶状の標記物質６３７．１mg（収率５４．７％）を得た。
TLC Rf. 0.24（クロロホルム：メタノール＝9:1)、0.12（酢酸エチル：メタノール＝9:1)
1H-NMR(CDCl3): 7.35-7.26(5H, m, aromatic), 6.40(1H, d, J=9.27Hz, NH), 5.96(1H, d, J=4.39Hz, H-1), 4.63(1H, m, H-2), 3.74-3.62(4H, m, (CH2)2O), 2.82-2.57及び2.39-2.35(10H, m, COCH2CH2CO, CH2N(CH2)2), 2.14(2H, m, COCH2), 1.51(2H, m, COCH2CH 2 ), 1.25(12H, m, (CH 2 )6CH3), 0.88(3H, t, CH2CH 3 )
13C-NMR(CDCl3): 176.8, 173.5, 171.5, 137.0, 128.6, 128.4，126.4, 75.3, 65.6, 58.3, 53.0, 49.3, 36.5, 31.9, 30.4, 30.3, 29.5, 29.4, 29.3, 25.5, 22.6, 14.1
【００８６】
実施例５ （１Ｓ，２Ｓ）−２−オクチルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−オクチルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール１０３４．５mg（２．６３９mmol）を塩化メチレン２６mlに溶かし、室温下ピリジン０．５４ml（６．６７７mmol）及び無水酢酸０．５ml（５．３０４mmol）を加えて撹拌し、１４時間後ピリジン０．５４ml（６．６７７mmol）及び無水酢酸０．５ml（５．３０４mmol）を追加した。反応終了後、メタノール５mlを加え２０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で精製し、無色油状の標記物質９１５．２mg（収率７９．９％）を得た。
TLC Rf. 0.44（CHCl3:MeOH＝20:1）、0.21（n-Hexane:AcOEt=1:2）
1H-NMR(CDCl3): 7.35-7.26(5H, m, aromatic), 6.02(1H, d, J=3.91Hz, H-1) ，4.83(1H, d, J=7.81Hz, NH), 4.13(1H, m, H-2), 3.97(2H, m, COO-CH2), 3.67(4H, m, (CH2)2O), 2.50-2.31(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.12(3H, s, COCH3), 1.53(2H, m, COOCH2CH 2 ), 1.27(10H, m, (CH 2 )5CH3)，0.89(3H, t, CH2CH3)
13C-NMR(CDCl3): 169.7, 156.4, 137.8, 128.4, 128.1, 126.5, 74.9, 67.0, 65.2, 59.6, 53.9, 52.7, 31.8, 29.2, 29,0, 25.8, 22.6, 21.0, 14.0
【００８７】
実施例６ （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロピル アセテートの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−３−ピロリジノ−１−プロパノール２８４．２mg（０．８０３mmol）をピリジン５mlに溶かし、氷浴上にて、無水酢酸１５１．４μl(１．６１mmol）を加え、室温下撹拌し、１６時間後、無水酢酸３８．０μl(０．４０３mmol）を追加した。反応終了後１N 塩酸３０mlを加え、２０分間撹拌した後、酢酸エチル５０mlで抽出し、有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ３０mlで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。また、合わせた洗液をクロロホルム７０mlで３回抽出し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物を合わせてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１、酢酸エチル：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質２３０．９mg（収率７２．６％）を得た。
TLC Rf. 0.24（クロロホルム：メタノール＝20:1）、0.31（酢酸エチル：メタノール＝9:1)
1H-NMR(CDCl3): 7.34-7.25(10H, m, aromatic), 5.95(1H, d, J=4.88Hz, H-1), 5.10-4.94(2H, m, COOCH2), 4.17(1H, m, H-2), 2.51(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.03(3H, s, COCH3), 1.73(4H, m, H-3', H-4')
13C-NMR(CDCl3): 169.7, 156.1, 137.7, 136.6, 128.6, 128.3, 128.2, 128.0, 127.9, 126.6, 75.3, 66.5, 56.5, 54.5, 54.3, 23.5, 20.8
実施例２〜６の化合物も、実施例１に示した方法で、同様に塩酸塩を調製することができる。
【００８８】
実施例７〜１０
また、調製例７〜１０に示した化合物を原料に用い、実施例１〜４に示した各カルボン酸若しくはその反応性誘導体を用い、基本的に同様の方法で水酸基のエステル化を行うことによって、各原料に対応するエステルを得ることができる。
【００８９】
実施例１１ 繰り返し脳虚血ラットの空間認知記憶障害に対するＬ−トレオ−ＰＤＭＰ及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの改善効果
〔実験方法〕
動物はWister系雄性ラット（体重：２５０〜２８０ｇ）を用い、８方向放射状迷路課題の訓練を１日１回行い、空間認知を獲得させた。空間認知を獲得したラットにPulsinelli and Brierlyらの方法(Stroke, 10,267, 1979)に従って椎骨動脈の焼灼と総頸動脈の剥離手術を行い、その翌日、手術が迷路課題の遂行に影響がないことを確認できたラットのみを用いて虚血処置を行った。虚血処置は無麻酔下で総頸動脈を１０分間クリップを用いて結紮し、血流再開１時間後に更に１０分間結紮し、２回の繰り返し虚血を行った。再生試行は虚血処置１週間後に行い、成績は最初の８回の選択の内の正選択数と最大１０分間の観察時間中の誤選択数として表した（図１参照）。また薬物の効果は改善の程度を著効（正選択数が７以上かつ誤選択数が１以下を示す）、有効（正選択数が７以上かつ誤選択数が２又は３を示す）及び無効（誤選択数が４以上を示す）の３段階に評価してその改善率として表した（図２参照）。
【００９０】
〔結果〕
ラットを用いた８方向放射状迷路課題における繰り返し脳虚血１週間後の空間認知記憶障害に対して、ガングリオシド生合成促進効果が確認されているＬ−トレオ−ＰＤＭＰとＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの効果を比較検討した。具体的には両化合物を１．５％Tween ８０含有生理食塩水に溶解させ、２mg/kg(i.v.) を虚血処置２４時間後から１日２回、６日間連続投与した。
【００９１】
各試験群についての正選択数と誤選択数を図１に示す。その結果、両化合物の６日間連続投与群は、対照群（１．５％Tween ８０含有生理食塩水を投与；図１中、ischemiaと表す）に対し、有意な正選択数の増加及び有意な誤選択数の減少が認められた。すなわち繰り返し脳虚血による空間認知記憶障害モデルにおいて、既に急性期の神経細胞障害が生じている虚血後２４時間からの投与でも改善作用を示すことが判明し、臨床的価値が非常に高い脳血管障害後遺症治療薬として期待されることがわかった。また、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートは、正選択数の増加及び誤選択数の減少の両方において、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰより優れていることが判明し、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの有用性が証明された。なお、図１中shamは、椎骨動脈の焼灼と総頸動脈の剥離手術を行った翌日、手術が迷路課題の遂行に影響がないことを確認できたラットのうち、虚血処置を行わなかったラットを表す。
【００９２】
また、各薬剤投与の成績を個体レベルでの改善率（著効：正選択数７以上かつ誤選択数１以下、有効：正選択数７以上かつ誤選択数２又は３、無効：誤選択数４以上）として図２に示した。その結果、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートは、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰと比較して著効の比率が高いことが判明した。
なお、図１、２中、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰをＬ−ＰＤＭＰと略して記載した。
【００９３】
実施例１２ Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰ及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの神経突起伸長活性
〔実験方法〕
妊娠１７日のWister系ラット（日本ＳＬＣ）より胎児を無菌的に取り出した後（胎児８匹）、胎児より脳を取り出し、実体顕微鏡下で小脳を取り外し、大脳から中脳を取り外した。更に大脳皮質から髄膜を剥ぎ取り、大脳皮質だけにした。８匹分の大脳皮質を６０mm皿上で安全カミソリで縦横に各々１００回細切し、５mlリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を２回加えて外植片（Explant)を皿より洗い取り、５００rpm ×１分の遠心をした。単一細胞（single cell)を含む上清を除き、ペレットにＤＭＥＭ(Dulbecco's modified Eagle's medium)４mlを加えて懸濁させ、１mlづつ５０mlのファルコンチューブに分注し、ＤＭＥＭ １２mlを加えた。チューブを振りながら懸濁させた状態で、０．１％ポリエチレンイミンでコートした２４穴プレート（２cm2)４枚にまいた（１．６６×１０5cells／５００μl/well）。
【００９４】
培養２時間後に上清５０μl を抜き取り、実施例１−１で合成した化合物Ａ（Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテート）５０μl 及び実施例５で合成した化合物Ｂを終濃度５〜２０μM になるよう添加した。２日間培養した後、１％グルタルアルデヒド／ＰＢＳを５００μl 加え、室温で２０分間固定した。サクションで上清を除去した後、０．５mlＰＢＳをゆっくり重層し、すぐにサクションで除去した。２０％ギムザ液／リン酸カリウム緩衝液（リン酸二水素カリウム６．６３ｇ及びリン酸水素二ナトリウム２．５６ｇを蒸留水で１，０００mlにし、pH試験紙でpH６．４であることを確認した後、１０倍希釈して使用した）をゆっくり重層し、室温で２時間置いた。サクションで上清を除去した後、５％メタノール／ＰＢＳ １．０mlをゆっくり重層し、２０分間室温で脱染した。サクションで上清を除去した後、ＰＢＳ ０．５mlを加えた。顕微鏡下×４０〜×１００倍で、５０〜２００μm の Explantの神経突起伸展の程度を、一群１００個以上計測した。評価は、それぞれの Explantの直径より長い神経突起を有する Explantの数を、コントロール（無添加）を１００％として存在率で表記した。
【００９５】
〔結果〕
図３に、化合物Ａ及びＢの最大有効濃度（共に１０μM)における神経突起伸長活性（％）を示した。この結果から、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートのin vitroでの神経突起伸長促進活性が明らかとなった。
【００９６】
実施例１３ シアン化カリウム惹起低酸素症（KCN Hypoxia)マウスモデルに対するＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの延命効果
本発明化合物の脳保護作用を確認するため、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの１．５％Tween ８０含有生理食塩水溶液を、該化合物２、８及び２０mg/kg の各用量でマウス（ｎ＝５）の静脈内に投与し、さらにその１時間後にシアン化カリウム（KCN)２．４mg/kg を静脈内に投与して、１時間後の生存率を検討した。
【００９７】
その結果、コントロール群(KCNのみ投与、ｎ＝５) は、５％の生存率（ＬＤ95）であるのに対し、８及び２０mg/kg の本発明化合物投与群は、８０％の生存率を示した。また、２mg/kg の本発明化合物投与群は、４０％の生存率を示した。
【００９８】
以上の結果は、本発明化合物の脳保護作用に基づくものと考えられ、本発明化合物の脳保護剤としての有用性が示された。
【００９９】
なお、上記各用量において、ＳＨＲラット及び正常ラットに対する血圧、心拍数への本発明化合物の影響は認められなかった。
【図面の簡単な説明】
【図１】繰り返し脳虚血ラットの空間認知障害に対するＬ−トレオ−ＰＤＭＰ及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの正選択数及び誤選択数に及ぼす効果を表す。
【図２】Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテート及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰ連続投与後の個体レベルでの空間認知記憶障害改善効果を表す。
【図３】Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテート（化合物A)及び実施例５で合成した化合物（化合物Ｂ) の神経突起伸長活性を表す。
【発明の属する技術分野】
本発明は、セラミド類縁体であるアミノアルコール誘導体及びそれを含有する医薬、特に神経疾患の治療剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
スフィンゴ糖脂質（以下、ＧＳＬという）は、哺乳動物細胞の細胞表面膜構成成分として存在しており、生理活性物質のレセプター機能、細胞間相互認識機能、又は細胞間相互作用等を介しての発生、増殖、分化、癌化及び免疫反応等の細胞機能と密接に関係していることが知られている。
【０００３】
なかでもガングリオシドはシアル酸を含有するＧＳＬで、末梢神経損傷や中枢神経障害等の神経疾患の回復、すなわち神経の再生促進や神経伝達過程に活性を持つといわれ、現在までに神経系の種々の病態モデルに対する外因性ガングリオシドの有効性が検討されている。既に、これを利用した薬剤としてイタリアでクロナシアル（CronassialTM) なる薬剤が上市され、関連する特許出願がなされている（特開昭５２−３４９１２号）。
【０００４】
現在、ガングリオシドの機能を探る手法として最も多く使われているものは、実験系に外からガングリオシドを添加するというタイプのものであるが、その場合内因性ガングリオシドとの関連が問題となる。つまり、細胞膜に存在する内因性ガングリオシドが種々の細胞表面受容体等と既に複合体を形成している中に、更にガングリオシドを添加して導きだされる結果は、内因性ガングリオシドの真の細胞生理学的意義を常に反映しているとは限らないと考えられる。したがって、ガングリオシドの細胞生理学上における本来の役割を知るためには、内因性ＧＳＬの生合成を特異的に変化させる方法が必要であった。本発明者等は先に、セラミドのアナログである１−フェニル−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−プロパノール (ＰＤＭＰ) を合成し、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰがグルコシルセラミド生合成酵素を特異的に阻害し、グルコシルセラミドを出発物質とする全てのＧＳＬの細胞内含量を著しく減少させることを証明した（J. Lipid. Res., vol.28, 565-571, 1987)。
【０００５】
更に、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰによってＧＳＬ含量が低下し、このことにより神経突起の伸展が抑制されることが報告されている（J. Biochem., 110, 96-103, 1991）。また、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰがシナプス機能を抑制し、この抑制は種々のガングリオシドのなかでＧＱ１ｂにより特異的に解除されることが見出されている（Biochem. Biophys. Res. Commun., 222, 494-498, 1996）。この結果より、ガングリオシドＧＱ１ｂはシナプス機能に必須の活性分子であることが示唆され、内因性ガングリオシドの神経機能に及ぼす重要性が認識されている。
【０００６】
一方、Ｄ−トレオ−ＰＤＭＰの光学対掌体であるＬ−トレオ−ＰＤＭＰは、ＧＳＬの生合成を促進する可能性があることを本発明者らは見出している（J. Cell. Physiol., 141, 573-583(1989))。しかしながら、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰが神経細胞の内因性ガングリオシドレベルを増加させるか否か、また内因性ガングリオシドの増加が神経細胞の機能を活性化するかということに関しては全く未知の問題であり、検討がなされていなかった。
【０００７】
そこで本発明者らは、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰ等の２−アシルアミノプロパノール誘導体が、神経細胞のガングリオシド生合成を促進することにより、神経突起伸展促進効果（J. Neurochem., 67,1821-1830(1996))及びシナプス形成促進効果を発揮し、神経疾患治療剤として有望であることを見出している（ＰＣＴ国際公開ＷＯ９５／０５１７７）。
【０００８】
最近、本発明者らはＬ−トレオ−ＰＤＭＰの神経栄養因子様活性の作用機序の解明を目的として、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）や脳由来神経栄養因子（Brain Derived Neurotrophic Factor; BDNF)等でシナプス伝達を持続的に亢進したときに活性化されるMAP キナーゼ(MAPkinase; mitogen-activated proteinkinase)への該物質の影響を検討した。その結果、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰはシナプス形成促進効果に比例してMAP キナーゼを長時間活性化することが判明している。さらにＬ−トレオ−ＰＤＭＰによるＧＱ１ｂ合成酵素活性の活性化効果も見出している。
【０００９】
しかし、上記のＬ−トレオ−ＰＤＭＰは、in vivo で薬効を発揮させる際、血中半減期及び脳内移行性について更に改良の余地があると判断された。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰ等の２−アシルアミノプロパノール誘導体の水酸基をエステル化することにより、溶解性が著しく改善されることを見出した。また、エステル化したＬ−トレオ−ＰＤＭＰを哺乳動物に投与した際、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰよりも優れた神経疾患治療効果及び脳保護作用を有することを確認した。これらの知見に基づいて本発明を完成させるに至った。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明は、
〔１〕一般式（１）
【００１２】
【化４】
〔式中、Ｒ1 はアルキル基、アルケニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、又は置換基を有していてもよいアリール基を示し、Ｒ2 はアルキル基、ヒドロキシアルキル基、アルケニル基、ヒドロキシアルケニル基、アルコキシル基又はアラルキルオキシ基を示し、Ｒ3 は下記式（Ｉ）〜（VI）で表される置換アミノ基を示し、Ｒ4 は水素原子、低級アルキル基、アミノ基、モノ若しくはジ低級アルキルアミノ基、低級アルコキシル基又はカルボキシル基を示し、ｎは１〜４の整数を示す〕
【００１４】
【化５】
〔式中、Ｒ5 及びＲ6 は、同一又は異なり、水素原子、低級アルキル基、低級アルケニル基、ヒドロキシ低級アルキル基、低級アルコキシアルキル基、アミノ低級アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシシクロアルキル基、アラルキル基又は低級アルキルが置換されていてもよいピペラジノ基を表し、Ｒ7 及びＲ8 は同一又は異なり、水素原子、ヒドロキシル基、低級アルキル基、低級アルコキシル基、ヒドロキシ低級アルキル基、カルボキシル基、低級アルコキシカルボニル基、アラルキル基、ピペリジノ基、アシルオキシ基、アミノ基及びアミノ低級アルキル基から選ばれる基を表し、Ｒ9 は酸素で中断されていてもよい低級アルキレン基を表し、Ｒ10及びＲ11は、同一又は異なり、水素原子、低級アルキル基又はヒドロキシ低級アルキル基を表すか、あるいはＲ10とＲ11は、それらが結合している窒素原子と共に、低級アルキルが置換していてもよいピペリジノ基又はモルホリノ基を表し、ｍは２〜６の整数を表し、ｐは２又は３を表し、Ｘは下記式（VII)又は（VIII）を表す。
【００１６】
【化６】
（式中、Ｒ12は低級アルキル基、アシル基、低級アルコキシカルボニル基又はピリジル基を表す）〕で示されるアミノアルコール誘導体及び薬学的に許容されるその塩に関する。
【００１８】
また本発明は、
〔２〕一般式（１）において、Ｒ1 が置換基を有していてもよいフェニル基であり、Ｒ2 が炭素数２〜１９のアルキル基、アルコキシル基又はアラルキルオキシ基を示し、Ｒ3 がモルホリノ基；低級アルキルアミノ基；モルホリノ低級アルキルアミノ基；ヒドロキシルで置換されていてもよいシクロアルキルアミノ基；ヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピロリジノ基；低級アルキルで置換されていてもよいピペラジノ基；ビス（ヒドロキシ低級アルキル）アミノ基；及びヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピペリジノ基から選ばれる置換アミノ基であり、Ｒ4 が前記のとおりであるアミノアルコール誘導体；
〔３〕一般式（１）において、Ｒ1 がフェニル基であり、Ｒ2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3 がモルホリノ基、シクロヘキシルアミノ基、シクロペンチルアミノ基、ピロリジノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基、ジエタノールアミノ基、ヒドロキシピペリジノ基又はピペリジノ基であり、Ｒ4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であるアミノアルコール誘導体；
〔４〕一般式（１）において、Ｒ1 がフェニル基であり、Ｒ2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3 がモルホリノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基、又はジエタノールアミノ基であり、Ｒ4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）であるアミノアルコール誘導体；
〔５〕一般式（１）において、Ｒ1 がフェニル基であり、Ｒ2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3 がヒドロキシピペリジノ基であり、Ｒ4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）、（１Ｒ，２Ｓ）又は（１Ｓ，２Ｒ）であるアミノアルコール誘導体；
〔６〕一般式（１）において、Ｒ1 がフェニル基であり、Ｒ2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3 がモルホリノ基、ピロリジノ基、ピペリジノ基、シクロヘキシルアミノ基又はシクロペンチルアミノ基であり、Ｒ4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）であるアミノアルコール誘導体；に関する。
さらに、本発明は、上記一般式（１）で表されるアミノアルコール誘導体又は薬学的に許容されるその塩を含有する医薬に関し、特に神経疾患の治療剤又は脳保護剤に関する。
なお、上記〔４〕〜〔６〕における一般式（１）の化合物の立体配置、（１Ｓ，２Ｓ）、（１Ｒ，２Ｓ）、（１Ｓ，２Ｒ）又は（１Ｒ，２Ｒ）は、それぞれＬ−トレオ体、Ｌ−エリトロ体、Ｄ−エリトロ体又はＤ−トレオ体に相当する。
【００１９】
以下、本発明を具体的に説明する。
【００２０】
本発明において、低級とは炭素数が１〜６であることを意味する。
【００２１】
上記式中、Ｒ1 が表す基の炭素数は６〜１５が好ましく、置換基は低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシ低級アルキル又はニトロ基が好ましい。置換基を有していてもよいアリール基としては、好ましくは低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシ低級アルキル及びニトロから選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、例えばフェニル基、ジメトキシフェニル基、ジヒドロキシフェニル基が挙げられ、更に好ましくはフェニル基が挙げられる。またシクロアルキル基としてはシクロヘキシル基が挙げられる。
【００２２】
式中、Ｒ2 が表す基の炭素数は２〜１９が好ましく、より好ましくは炭素数７〜１５のアルキル基（例えばへプチル、ノニル、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル等）若しくはヒドロキシアルキル基（例えばヒドロキシへプチル、ヒドロキシノニル、ヒドロキシウンデシル、ヒドロキシトリデシル、ヒドロキシペンタデシル等）、炭素数４〜１４のアルコキシル基（例えばｔ−ブトキシ、ｎ−オクチルオキシ）、又はアラルキルオキシ基（例えばベンジルオキシ）である。Ｒ2 の最も好ましい例は、ノニル基、ｎ−オクチルオキシ基若しくはベンジルオキシ基である。
【００２３】
式中、Ｒ3 は、好ましくはモルホリノ基；低級アルキルアミノ基；モルホリノ低級アルキルアミノ基；ヒドロキシルで置換されていてもよいシクロアルキルアミノ基；ヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピロリジノ基；低級アルキルで置換されていてもよいピペラジノ基；ビス（ヒドロキシ低級アルキル）アミノ基；ヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピペリジノ基が挙げられる。より好ましくは、モルホリノ基、シクロヘキシルアミノ基、シクロペンチルアミノ基、ピロリジノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基、ジエタノールアミノ基、ヒドロキシピペリジノ基又はピペリジノ基が挙げられる。最も好ましい基は、本発明のアミノアルコール誘導体の使用目的、不斉炭素原子おける立体配置によって異なる。Ｒ3 がモルホリノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基又はジエタノールアミノ基であり、立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）である場合、又はＲ3 がヒドロキシピペリジノ基であり、立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）、（１Ｒ，２Ｓ）又は（１Ｓ，２Ｒ）である場合、糖脂質生合成促進作用及び神経突起伸長活性が強く、神経疾患の治療剤として特に有用である。一方、Ｒ3 がモルホリノ基、ピロリジノ基、ピペリジノ基、シクロヘキシルアミノ基又はシクロペンチルアミノ基であり、立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）である場合、糖脂質生合成抑制作用又は分化誘導作用が強く、癌治療剤として有用である。
【００２４】
式中、Ｒ4 が表す低級アルキル基としては、炭素数１〜４のアルキル基（メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル等）が好ましい。モノ若しくはジ低級アルキルアミノ基としては、１又は２個の前記低級アルキルを有するアミノ基（メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ブチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジブチルアミノ等）が好ましい。低級アルコキシル基としては、炭素数１〜４のアルコキシル基（メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ等）が好ましい。ｎは１〜４の整数であるが、好ましくは１又は２である。Ｒ4 としてより好ましい基は、水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基あるいはカルボキシル基であり、最も好ましくは水素原子である。−（ＣＨ2)n −Ｒ4 の好ましい一例としては、
【００２５】
【化７】
が挙げられる。
【００２７】
式（１）で示される本発明のアミノアルコール誘導体は、式（２）で示されるアミノアルコール誘導体の水酸基をＣＯ−（ＣＨ2)n −Ｒ4 に対応するカルボン酸又はその反応性誘導体を用い、自体既知の方法であるエステル化反応によって得られるが、このような方法に限定されるものではない。
【００２８】
式（２）で示されるアミノアルコール誘導体のＲ1 、Ｒ2 又はＲ3 に、エステル化試薬に対して反応性の官能基が含まれる場合は、この官能基をあらかじめ適当な保護基で保護し、エステル化反応を行った後、脱保護させてもよい。
【００２９】
【化８】
エステル化方法としては、上記カルボン酸と縮合剤を用いる方法、酸無水物を用いる方法、酸ハロゲン化物を用いる方法等が例示される。
具体的には、式（２）で示されるアミノアルコール誘導体又はその酸付加塩（例えば塩酸塩）を塩化メチレン、ピリジン等の有機溶媒中、上記カルボン酸と縮合剤（例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ))とエステル化触媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、Ｎ−ピロリジノピリジン）を用いて反応させる方法、酸無水物又は酸ハロゲン化物（例えば酸塩化物）と塩基（例えばピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン等の有機塩基、炭酸水素ナトリウムのような無機塩基）を用いて反応させる方法等が例示される。なお、上記有機溶媒は、エステル化反応を阻害せず、上記アミノアルコール誘導体を溶解するものであれば、特に限定されるものではなく、また上記エステル化触媒もエステル化反応を促進するものであれば、特に限定されない。
【００３１】
エステル化反応は、通常約０〜５０℃、好ましくは室温下（５〜３５℃（ＪＩＳ Ｋ００５０))、数時間〜数日間、好ましくは１０時間〜２日間行われるが、反応条件は当業者であれば予備実験によって適宜に設定することができる。
エステル化反応の後、酢酸エチル、クロロホルム等による溶媒抽出、各種クロマトグラフィー（吸着クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー等）、結晶化の自体既知の精製手段を適宜に組み合わせて、式（１）で表される本発明化合物を精製・単離することができる。
【００３２】
上記式（２）で表される化合物は、例えばJ. Lipid. Res., Vol.28, 565-571(1987）及びJ. Biochem., Vol.111, 191-196(1992）に記載された次の方法に準じて合成し、必要に応じて光学分割することによって得られる。
【００３３】
【化９】
すなわち、例えば式（２）で表される化合物において、Ｒ1 がフェニル基で、Ｒ2 ＣＯがアシル基である場合、２−アシルアミノアセトフェノンをマンニッヒ反応で２級アミン（Ｒ3 Ｈ）と縮合させた後、水素化ホウ素ナトリウムで還元する。これにより得られた４つの異性体の混合物を、クロロホルム／エーテルで分別結晶化（ジアステレオマー分割）して、Ｄ，Ｌ−トレオ体及びＤ，Ｌ−エリトロ体をそれぞれラセミ体として得た後、更にまた、このラセミ体を酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、カンフル酸等の光学活性な塩で分別結晶化（光学分割）することにより、所望の立体配置を有する化合物を光学活性な塩として得ることができる。更に当業者が容易に行える方法で塩を除去し、目的化合物を遊離の塩基性化合物として得ることができる。
【００３５】
また、上記式（２）で表される化合物は、次に示すように、式（３）で表されるキラル化合物を出発物質として使用し、順次反応させることにより所望の立体配置を有する化合物として得られる。
【００３６】
【化１０】
〔式中、＊は不斉炭素を表し；Ｐ1 はアミノ基の保護基であり、例えばベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、ベンゼンスルホニル基、フルオレニルメチルオキシカルボニル基等が挙げられ；Ｙはメタンスルホニル、トリハロゲノメタンスルホニル、Ｐ−トルエンスルホニル、ベンゼンスルホニル、Ｐ−ブロモベンゼンスルホニル基等の脱離基を表す〕
【００３８】
すなわち、式（３）で示されるアミノアルコール誘導体の１級水酸基のみに脱離基（Ｙ）を導入して式（４）で示される化合物とした後、該化合物に式Ｒ3 Ｈで示されるアミンを反応させ、式（５）で示されるアミノアルコール誘導体とし、該化合物よりＰ1 を脱離させて式（６）で示されるアミノアルコール誘導体とし、ついでＲ2 ＣＯＯＨで示されるカルボン酸又はその反応性誘導体を反応させることにより、式（２）で示されるキラルなアミノアルコール誘導体を得ることができる。
【００３９】
また、上記式（２）で示される化合物は、次に示すように、キラル化合物（７）を出発物質として、オキサゾリン環を有する化合物（８）を合成中間体とする合成経路を踏襲することにより、所望の立体配置を有する化合物として得られる。
【００４０】
【化１１】
すなわち、化合物（７）の１級水酸基のみに脱離基（Ｙ）を導入後、塩基性条件下で閉環させてオキサゾリン環を有する化合物（８）とした後、再度１級水酸基に脱離基を導入し、アミン（Ｒ3 Ｈ）と反応させて化合物（９）とした後、酸処理によってオキサゾリン環を開環させることにより、キラルなアミノアルコール誘導体（２）を得ることができる。
式（１）で示される化合物の薬学的に許容される塩としては、塩酸、リン酸、硫酸、硝酸等の無機酸塩、ギ酸、酢酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸（メシル酸）、Ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸の塩を挙げることができる。このような塩の製造は自体既知の方法によって行うことができ、例えば式（１）で示される化合物（遊離型）をアルコール等の適宜な溶媒に溶解し、通常等モル程度の上記の酸を添加して反応させ、所望により溶媒を溜去すればよい。
【００４２】
〔溶解性〕
本発明化合物は遊離型である場合よりも、塩酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、コハク酸塩等の塩型である場合の方が、水又は生理食塩水に対する溶解性が向上する。
例えば、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰ塩酸塩の生理食塩水に対する溶解度は０．５mg/ml 程度であるのに対し、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰをアセチルエステル化した実施例１の化合物の塩酸塩（実施例１−２）は非常に溶解性が改善され、生理食塩水及び１％トウィーン８０(Tween８０）含有生理食塩水に対する溶解度はそれぞれ１００mg/ml 以上であった。また、実施例１−１の化合物のクエン酸塩（実施例１−２）も非常に溶解性が向上し、生理食塩水及び１％トウィーン８０含有生理食塩水に対する溶解度は１００mg/ml 以上であった。
【００４３】
〔作用〕
本発明化合物は、糖脂質の生合成を制御する作用を有し、該作用に基づく医薬としての有用性を有している。
式（１）で示される化合物は、その立体配置（Ｌ−トレオ、Ｌ−エリトロ、Ｄ−トレオ、Ｄ−エリトロ）により、上記生合成制御作用が異なる。このうち糖脂質（ガングリオシド等）生合成促進作用を有する化合物は、神経突起伸展促進効果、シナプス形成促進効果、神経細胞死防止効果、ＭＡＰキナーゼ活性化効果を有し、in vivo において記憶障害改善効果、シアン化カリウム惹起低酸素症モデル動物に対する脳保護効果を有しているので、このような効果に基づく神経疾患治療剤として有用である。したがって、本発明化合物の有効量を、末梢神経又は中枢神経の障害に起因する神経疾患に罹患したヒトを含む哺乳動物に投与することによって、該動物を治療することができる。代表的な疾患として、例えば脳卒中、脳梗塞、脳血管障害後遺症、脳出血、脳外傷、記憶障害、老年痴呆、アルツハイマー病やパーキンソン氏病等の、神経繊維が再生されることによって治療効果が期待される種々の中枢神経系疾患；並びに、例えば代謝障害性多発性神経障害、機械的神経障害、毒性神経障害等の種々の末梢神経系疾患が挙げられる。特に立体配置がＬ−トレオである本発明化合物は、神経疾患治療剤としての作用が強いが、糖脂質生合成促進作用を有する限り、立体配置には限定されず、例えばＬ−トレオ体である前記〔４〕に記載の化合物だけでなく、前記〔５〕に記載の化合物のように、Ｌ−トレオ体以外の立体配置の化合物も神経疾患治療剤の有効成分として使用できる。また、上記のような本発明化合物は、海馬ＣＡ１領域の神経細胞死を防止する効果が認められ、また本発明化合物の母体化合物（式（１）における−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ2)n −Ｒ4 の部分が−ＯＨである化合物）に比較して脳内移行性が高く、かつ脳内からの消失も緩慢であるため、中枢神経系疾患治療剤、特に脳保護剤若しくは脳神経賦活・保護剤として、例えば脳血管障害後遺症の治療に有効である。
【００４４】
一方、本発明化合物のうち、糖脂質合成阻害作用を有する化合物は、未分化な状態で異常増殖する細胞の分化を誘導する作用又は癌細胞を正常化する作用を有し、癌治療剤として有用である。立体配置がＤ−トレオ又はＬ−トレオである本発明化合物はこのような用途には好ましく用いられ、Ｄ−トレオ体が特に好ましい。例えば、前記〔６〕に記載の化合物をこのような目的に使用し得る。
【００４５】
〔製剤化〕
本発明化合物は、担体、賦形剤、その他の添加物と共に、経口又は非経口的に投与する製剤とすることができ、ヒトを含む哺乳動物の各種疾患（例えば神経疾患、癌）の治療に用いることができる。
【００４６】
経口製剤としては、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤等の固形製剤；シロップ剤、エリキシル剤、乳剤等の液状製剤を挙げることができる。散剤は、例えば乳糖、デンプン、結晶セルロース、乳酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水ケイ酸等の賦形剤と混合して得ることができる。顆粒剤は、上記賦形剤のほか、必要に応じて、例えば白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン等の結合剤や、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤を更に加え、湿式又は乾式で造粒して得ることができる。錠剤は、上記散剤又は顆粒剤をそのまま、又はステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤を加えて打錠して得ることができる。また、上記錠剤又は顆粒剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸メチルコポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースサクシネート等の腸溶性基剤で被覆し、あるいはエチルセルロース、カルナウバロウ、硬化油、白色セラック等で被覆し、これらを腸溶性又は持続性製剤にすることができる。硬カプセル剤は、上記散剤又は顆粒剤を硬カプセルに充填して得ることができる。また軟カプセル剤は、本発明化合物を、グリセリン、ポリエチレングリコール、ゴマ油、オリーブ油等に溶解し、これをゼラチン膜で被覆して得ることができる。シロップ剤は、白糖、ソルビトール、グリセリン等の甘味剤と本発明化合物とを、水に溶解して得ることができる。また、甘味剤及び水のほかに、精油、エタノール等を加えてエリキシル剤とするか、あるいはアラビヤゴム、トラガント、ポリソルベート類（ポリソルベート２０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０（トウィーン８０）等）、カルボキシメチルセルロースナトリウム等を加えて、乳剤又は懸濁剤にすることもできる。またこれらの液状製剤には、必要に応じ、矯味剤、着色剤、保存剤等を加えることができる。
【００４７】
非経口製剤としては、注射剤、直腸投与剤、ペッサリー、皮膚外用剤、吸入剤、エアゾール剤、点眼剤等を挙げることができる。注射剤は、本発明化合物に、必要に応じてポリソルベート類等の非イオン界面活性剤；塩酸、水酸化ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム等のpH調整剤；塩化ナトリウム、ブドウ糖等の等張化剤；アミノ酸類等の安定化剤；及び注射用蒸留水又は生理食塩水を加え、滅菌濾過した後、アンプルに充填して得ることができる。また更にマンニトール、デキストラン、ゼラチン等を加えて真空凍結乾燥し、用時溶解型の注射剤とすることができる。その他、粉末充填型の注射剤とすることもできる。また本発明化合物に、レシチン、ポリソルベート類、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、マクロゴール等の乳化剤を加えた後、水中で乳化させた注射用乳剤にすることもできる。
【００４８】
また、注射剤としては、溶解性、目標臓器への移行速度の改善が可能なリポソーム製剤やリピッドマイクロスフェア等が挙げられる。特にナノスフェア−リポソーム（脂質超微粒子）は、網内系組織に取り込まれることなく血中濃度を高め、薬効発現に必要な最小有効投与量を低下させることができるだけでなく、脳血管関門を１０倍程度通過しやすくするので、脳の神経疾患の治療に使用する場合に好適である。リポソーム製剤は、公知のリポソーム調製法(C.G. Knight, Liposomes: From Physical Structure to Therapeutic Applications, pp. 51-82, Elsevier, Amsterdam (1981); Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A., Vol.75, 4194(1978))に従って調製することができる。
【００４９】
すなわち、リポソーム膜を形成する両親媒性物質としては、天然リン脂質（卵黄レシチン、大豆レシチン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ジホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミン、カルジオリピン等）、合成リン脂質（ジステアロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン等）等のリン脂質が使用される。また、膜の安定性、流動性、薬剤の膜透過性を改善するために、コレステロール類（コレステロール、エルゴステロール、フィトステロール、シトステロール、スチグマステロール等）、リポソームに負電荷を付与することが知られている物質（ホスファチジン酸、ジセチルホスフェート等）、正電荷を付与することが知られている物質（ステアリルアミン、ステアリルアミンアセテート等）、酸化防止剤（トコフェロール等）、油性物質（大豆油、綿実油、ゴマ油、肝油等）等、公知の種々の添加剤を使用してもよい。
【００５０】
リポソームの製造は、例えば以下の方法で行うことができる。上記両親媒性物質及び添加剤と本発明化合物を、有機溶媒（クロロホルム、ジクロロメタン、エタノール、メタノール、ヘキサン等の単独又は混合溶媒）にそれぞれ溶解し、両溶液を混合し、フラスコ等の容器中において不活性ガス（窒素ガス、アルゴンガス等）の存在下で有機溶媒を除去し、器壁に薄膜を付着させる。次いで、この薄膜を適当な水性媒体（生理食塩水、緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等）に加え、撹拌機で撹拌する。小粒径のリポソームを得るためには、超音波乳化機、加圧型乳化機、フレンチプレス細胞破砕機等を用いて更に分散させる。このようにリポソーム化に必要な両親媒性物質等と本発明化合物が水性媒体に分散した液を、メンブランフィルター処理することによってリポソーム化が進行し、粒径分布が制御されたナノスフェア−リポソーム（脂質超微粒子；粒径２５〜５０nm程度）を得ることができる。また、リポソームを限外濾過、遠心分離、ゲル濾過等の分画処理に付し、担持されなかった薬剤を除去してもよい。
【００５１】
また、膜形成物質として、上記両媒性物質、添加剤の他に、β−オクチルグルコシド、Ｌ−チロシン−７−アミド−４−メチルクマリン、フェニルアミノマンノシド又はスルファチドを添加することによって得られる、グルコース残基、チロシン残基、マンノース残基又はスルファチドを膜上に有するリポソームに、本発明化合物を担持させることによって、脳血管関門を通過しやすくすることもできる（特開平４−６９３３２号参照）。
【００５２】
リピッドマイクロスフェアは、本発明化合物を大豆油、ゴマ油等に溶解し、天然リン脂質、グリセリン、水等を加え撹拌機で撹拌し、更に超音波乳化機、加圧型乳化機、フレンチプレス細胞破砕機等を用いて分散させることにより得られる。
【００５３】
直腸投与剤は、本発明化合物にカカオ脂肪酸のモノ、ジ又はトリグリセリド、ポリエチレングリコール等の坐剤用基剤を加えた後、加温して溶融し、これを型に流し込んで冷却するか、あるいは本発明化合物をポリエチレングリコール、大豆油等に溶解した後、ゼラチン膜で被覆して得ることができる。
【００５４】
皮膚外用剤は、本発明化合物に白色ワセリン、ミツロウ、流動パラフィン、ポリエチレングリコール等を加え、必要に応じ加温し、混練して得ることができる。
【００５５】
テープ剤は、本発明化合物にロジン、アクリル酸アルキルエステル重合体等の粘着剤を混練し、これを不織布等に展延して得ることができる。
【００５６】
吸入剤は、例えば薬学的に許容される不活性ガス等の噴射剤に、本発明化合物を溶解又は分散し、これを耐圧容器に充填して得ることができる。
【００５７】
本発明化合物を神経疾患の治療剤、特に脳保護剤若しくは脳神経賦活・保護剤として使用する場合、注射剤が好ましく、静脈注射剤がより好ましい。このような注射剤は、本発明化合物の脳内移行性を考慮して、リピッドマイクロスフェア製剤、界面活性剤を含む製剤としてもよい。
【００５８】
〔投与方法〕
本発明化合物を有効成分として含有する薬剤の投与方法は、特に限定されないが、中枢神経系の障害に起因する神経疾患の治療に使用する場合、筋肉内注射、静脈内注射、皮下注射又は腹腔内注射等の注射、経直腸投与、経肺投与、点眼等が好ましい。
投与量は、患者の年令、健康状態、体重等に応じ適宜決定するが、一般には、０．２５〜２００mg/kg 、好ましくは０．５〜１００mg/kg を一日１回あるいはそれ以上に分けて投与する。
【００５９】
〔毒性〕
５週齢のWister系ラットを用い、実施例１−２の本発明化合物（塩酸塩）及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰ塩酸塩（調製例４−２の化合物）の安全性を検討した。賦形剤（Vehicle)として１．５％〜２．５％Tween ８０含有生理食塩水を用いて各化合物を含む注射剤を調製し、上記ラットに静脈注射（i.v.) により投与した結果を表１に示す。
【００６０】
【表１】
【実施例】
次に本発明を実施例により更に詳細に説明するが、本発明はその要旨を越えない限り、以下の実施例に限定されものではない。
なお、中間体の合成例を調製例として示す。
【００６２】
調製例１ （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステルの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール１５．４ｇ（５１．０mmol）を塩化メチレン１５０mlに溶かし、ピリジン１２．１ml（１４９．６mmol）を加えた後、氷浴上でメタンスルホニルクロリド４．５ml（５８．１mmol）を５分間かけて滴下した。氷浴上で３０分間撹拌した後、室温で一晩撹拌した。反応が終了していることをＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で確認した後、水１００ml及びクロロホルム５０mlを加え、有機層を１N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び水それぞれ１００mlで順次洗浄した後、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過した。溶媒を留去し、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１（１００ml）を加え、一夜放置した。析出した結晶をろ取し、ｎ−へキサン：酢酸エチル＝２：１で洗浄して、白色結晶の標記物質１６．６ｇ（収率８５．７％）を得た。
【００６３】
調製例２ （１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル１．２１ｇ（３．１９mmol）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６mlに溶かし、室温下、モルホリン１．１１ｇ（１２．８mmol）を加え、４０℃で２４時間撹拌した。反応がほぼ終了していることをＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２、酢酸エチル）で確認した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液７０ml及び酢酸エチル１００mlを加え、有機層を水及び飽和食塩水それぞれで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）で精製し、無色油状の標記物質５０７．５mg（収率４３．０％）を得た。
【００６４】
調製例３ （１Ｓ，２Ｓ）−２−アミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール４３８．８mg（１．１９mmol）をメタノール１０mlに溶かし、１０％パラジウム炭素１２６．５mg（１０．０mol ％）を加え、水素雰囲気下、室温で一夜撹拌した。ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝９：１及び７：３）で反応が終了していることを確認した後、パラジウム炭素をろ過除去した。ろ液を濃縮して、無色油状の標記物質２７５．６mg（収率９８．５％）を得た。
【００６５】
調製例４−１ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−アミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール９４４．０mg（４．００mmol）をメタノール４mlに溶かし、トリエチルアミン６６８．０μl(４．８mmol）を加え、氷冷下にてデカノイルクロリド０．８２ml（４．０mmol）を滴下した。３０分後、ＴＬＣ（酢酸エチル、クロロホルム：メタノール＝２０：１、クロロホルム：メタノール＝７：３）で反応がほとんど終了していることを確認した後、メタノール３０mlを加え、９０分間放置した。反応溶液を減圧濃縮後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液２０mlを加え、酢酸エチル５０mlで抽出した。有機層を水及び飽和食塩水それぞれ２０mlで順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し、無色油状の標記物質９３０．５mg（収率５９．６％）を得た。
【００６６】
調製例４−２ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩の調製
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール（１７９ｇ，４５９．０mmol）に２N 塩酸（２５０ml）を加え、氷冷下にて一夜放置した。析出した結晶をグラスフィルター上でろ取し、水（１００ml×５）、エーテル（１００ml×５）で順次洗浄後、室温下４８時間減圧乾燥し、白色結晶の（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩（９８．０ｇ、収率５０．０％）を得た。
【００６７】
調製例５ （１Ｓ，２Ｓ）−２−オクチルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
調製例３で得られた（１Ｓ，２Ｓ）−２−アミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール６２７．７mg（２．６６mmol）をメタノール１０mlに溶かし、室温下、トリエチルアミン０．５１８ml（３．７２３mmol）を加えた後、氷浴上にてクロロギ酸ｎ−オクチルエステル０．６２５ml（３．１９mmol）を加え、室温下１５時間撹拌した。反応終了後、メタノール５mlを加え２０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去し、酢酸エチル１００mlを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）で精製し、無色油状の標記物質８１４．５mg（収率７８．１％）を得た。
TLC Rf 0.21(n-Hexane:AcOEt=1: 2), 0.32(CHCl3:MeOH=20:1), 0.36(AcOEt)
1H-NMR(CDCl3) δ: 7.38-7.26(5H, m, aromatic), 4.99(1H, d, J=3.42Hz, H--1), 4.08(1H, m, H-2), 3.98(2H, m, COOCH2), 3.73(4H, m, (CH2)2O), 2.66-2.45(6H, m, CH2N(CH2)2), 1.54(2H, m, COOCH2CH 2 ), 1.27(10H, m,(CH 2 )5CH3), 0.88(3H, t, CH2CH 3 )
13C-NMR(CDCl3)δ: 156.5, 140.7, 128.3, 127.6, 126.2, 75.4, 66.9, 65.3, 60.1, 54.4, 52.0, 31.7, 29.2, 29.0, 28.9, 25.7, 22.6, 14.0
前記の方法（表１参照）と同様の方法によって測定した本化合物のＬＤ50値（i.v.投与）は６９mg/kg であり、２週反復投与での無影響量（反復投与後の一般状態、体重、摂餌量、尿検査、血液学的検査、剖検及び肝臓・腎臓の組織学的検査の全てに異常が認められない安全性を示す投与量）は２０mg/kg であった。
【００６８】
調製例６ （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロパノールの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−１，３−プロパンジオール−３−メタンスルホニルエステル１．５２ｇ（４．０１mmol）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）８mlに溶かし、ピロリジン１．１４ｇ（１６．０mmol）を加え、４０〜５０℃で１８時間撹拌した後、酢酸エチル１００mlを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質１．２１ｇ（収率８５．５％）を得た。
【００６９】
調製例７ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−ノネン−３−オールの合成
（１）（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−４−ノネン−１，３−ジオール２．３ｇ（７．０２mmol）のピリジン１０ml溶液に、窒素雰囲気下０℃で、メタンスルホニルクロリド０．６５ml（８．４３mmol）を滴下した。０℃で１時間撹拌後、モルホリン６．１ml（７０．２mmol）を加え、４４時間撹拌した。酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ3 Ｃｌ）で精製し、標記物質１．４６ｇ（収率６７％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.77(1H, dt, J=15.5, 6.6Hz, =CH-CH2), 5.49(1H, dd, J=15.5, 8.3Hz, CH-CH=), 4.69(1H, t, J=8.3Hz, O-CH), 3.80(2H, m), 3.50(1H, m, CH-OH), 2.27(2H, t, J=7.6Hz, N=C-CH2), 2.07(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.62(2H, m), 1.26(16H, m), 0.89(6H, m, CH3)
TOF-Mass: 310(M+H+), 333(M+Na+H+), (C19H35NO2 309)
HRMS(FAB)C19H36NO2(M+H+), 理論値; 310.2746 測定値; 310.2750
〔α〕D 23=-75.9 °(c=1.10, CHCl3)
【００７０】
（２）（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−モリホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン７００mg（２．２６mmol）の塩化メチレン１５ml溶液に、窒素雰囲気下−４５℃で、ピリジン０．５５ml（６．７９mmol）と無水トリフルオロ酢酸０．４６ml（２．７１mmol）を滴下した。−４５℃で１時間撹拌後、モルホリン１．９８ml（２２．６mmol）を加えた。−４５℃で１時間、室温で２時間撹拌後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、標記物質１４１．０mg（収率３９％）を得た。
1H-NMR(CDCl3): 5.76(1H, dt, J=15.2，6.9Hz, =CH-CH2), 5.46(1H, dd, J=15.2，7.6Hz, CH-CH=)，4.62(1H, t, J=7.6Hz, O-CH)，3.87(1H, q, J=6.9Hz, N-CH)，3.68(4H, m, (CH2)2O)，2.63-2.32(6H, m, CH2N(CH2)2)，2.26(2H, t, J=8.0Hz, N=C-CH2), 2.06(2H, m, =CH-CH 2 ), 1.61(2H, m)，1.26(16H, m)，0.89(6H, m, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 167.7, 134.7, 128.1, 84.5, 69.7, 66.7, 62.9, 54.0, 31.7, 31.0, 29.3, 29.1, 29.0, 28.2, 25.9, 22.5, 22.0, 14.0, 13.7
TOF-Mass: 379(M+H+), (C23H42N2O2 378)
HRMS(FAB)C23H43N2O2(M+H+), 理論値; 379.3325 測定値; 379.3322
〔α〕D 23=-38.4 °(c=1.00, CHCl3)
【００７１】
（３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−ノネン−３−オール
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−モリホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン３９mg（０．１０３mmol）に３N 塩酸３mlを加え、室温で１３時間撹拌した。１N ＮａＯＨでpH９に調整した後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：３）で精製し、標記物質２４．５mg（収率６０％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.73(1H, dt, J=15.5, 6.6Hz, H-5), 5.42(1H, dd, J=15.2, 6.3Hz, H-4), 4.28(1H, dd, J=5.9, 3.3Hz, H-3), 4.05(1H, m, H-2), 3.69(4H, t, J=4.6Hz, (CH2)2O), 2.69(1H, dd, J=13.2, 6.6Hz, H-1a), 2.56(4H, t, J=4.6Hz, N(CH2)2), 2.51(1H, dd, J=13.2, 5.9Hz, H-1b), 2.17(2H, t, J=7.9Hz, CO-CH2), 2.06(2H, m, =CH-CH 2 ), 1.60(2H, m), 1.26(16H, m), 0.89(6H, m, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 173.5, 133.5, 128.8, 73.5, 66.7, 59.6, 54.1, 49.8, 36.7, 31.9, 31.2, 29.3, 29.1, 25.7, 22.5, 22.1, 14.0, 13.8
TOF-Mass: 397(M+H+), 420(M+Na+)(C23H44N2O3 396)
HRMS(FAB)C23H45N2O3(M+H+), 理論値; 397.3430 測定値; 397.3430
〔α〕D 23=-23.3 °(c=0.49, CHCl3)
【００７２】
調製例８ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−オクタデセン−３−オールの合成
（１）（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−４−オクタデセン−１，３−ジオール２．４８ｇ（５．４７mmol）のピリジン２０ml溶液に、窒素雰囲気下０℃で、メタンスルホニルクロリド０．５５ml（７．１１mmol）を滴下した。０℃で１時間撹拌後、モルホリン４．８ml（５４．７mmol）を加え、室温下１５時間撹拌した。クロロホルムで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物にヘキサンを加え、析出した結晶をろ過除去し、ろ液を減圧濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ3 Ｃｌ）で精製し、標記物質１．６４ｇ（収率６９％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.77(1H, dt, J=15.3, 6.6Hz, =CH-CH2), 5.48(1H, dd, J=15.3, 8.1Hz, CH-CH=), 4.70(1H, t, J=8.1Hz, O-CH), 3.80(2H, m, CH-OH, N-CH), 3.49(1H, dd, J=11.6, 4.3Hz, CH-OH), 2.26(2H, t, J=7.9Hz, N=C-CH2), 2.05(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.61(2H, m, N=C-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 169.0, 135.6, 127.5, 82.4, 73.4, 62.6, 32.1, 31.8, 29.5, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0, 28.7, 28.2, 25.9, 22.6, 14.0
TOF-Mass: 436(M+H+) ，459(M+Na+H+), (C28H53NO2 435)
HRMS(FAB)C28H54NO2(M+H+), 理論値; 436.4155 測定値; 436.4147
〔α〕D 23=-54.4 °(c=1.00, CHCl3)
【００７３】
（２）（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン１．５８ｇ（３．６３mmol）の塩化メチレン２００ml溶液に、窒素雰囲気下−４５℃で、ピリジン０．８８ml（１０．９mmol）と無水トリフルオロ酢酸０．７３ml（４．３５mmol）を滴下した。−４５℃で２時間撹拌後、モルホリン３．２ml（３６．３mmol）を加えた。−４５℃で２時間、室温で８時間撹拌後、クロロホルムで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、標記物質４３２mg（収率２４％）を得た。
1H-NMR(CDCl3): 5.75(1H, dt, J=15.2, 6.9Hz, =CH-CH2), 5.46(1H, dd, J=15.2, 7.6Hz, CH-CH=), 4.62(1H, t, J=7.6Hz, O-CH), 3.87(1H, q, J=6.9Hz, N-CH), 3.68(4H, m, (CH2)2O), 2.63-2.32(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.26(2H, t, J=8.0Hz, N=C-CH2), 2.05(2H, q, J=6.9Hz, =CH-CH 2 ), 1.62(2H, m, N=C-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 167.8, 134.8, 128.1, 84.5, 69.7, 66.8, 62.9, 54.1, 32.1, 31.8, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 29.0, 28.9, 28.3, 26.0, 22.6, 14.0
TOF-Mass: 505(M+H+), (C32H60N2O2 504)
HRMS(FAB)C32H61N2O2(M+H+), 理論値; 505.4733 測定値; 505.4736
〔α〕D 23=-18.8 °(c=1.00, CHCl3)
【００７４】
（３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−オクタデセン−３−オール
（４Ｓ，５Ｓ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン３１４mg（０．６２mmol）に３N 塩酸３mlを加え、室温で２時間撹拌した。反応液に１N ＮａＯＨを加えpH９に調整した後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：４）で精製し、標記物質１８７．０mg（収率５８％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.73(1H, dt, J=15.2, 6.9Hz, H-5), 5.42(1H, dd, J=15.2, 6.3Hz, H-4), 4.27(1H, dd, J=6.3, 3.6Hz, H-3), 4.04(1H, m, H-2), 3.69(4H, t, J=4.6Hz, (CH2)2O), 2.69(1H, dd, J=12.9, 6.6Hz, H-1b), 2.55(4H, t, J=4.6Hz,N(CH2)2), 2.49(1H, dd, J=12.9, 5.6Hz, H-1b), 2.17(2H, t, J=7.6Hz, CO-CH2), 2.04(2H, q, J=6.6Hz，=CH-CH 2 )，1.60(2H, m，CO-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz，CH3)
13C-NMR(CDCl3): 173.4, 133.5, 128.8, 73.6, 66.8, 59.7, 54.2, 49.8, 36.7, 32.2, 31.8, 31.7, 29.6, 29.4, 29.3, 29.2, 25.7, 22.5, 14.0
TOF-Mass: 524(M+H+), 546(M+Na+)(C32H62N2O3 522)
HRMS(FAB)C32H63N2O3(M+H+), 理論値; 523.4838 測定値; 523.4837
〔α〕D 23=-17.6 °(c=1.00, CHCl3)
【００７５】
調製例９ （２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−ノネン−３−オール
（１）（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−４−ノネン−１，３−ジオール８８．８mg（０．３０５mmol）の塩化メチレン２ml溶液に、窒素雰囲気下０℃で、トリエチルアミン１２８μl(０．９１６mmol）及びメタンスルホニルクロリド２８μl(０．３６６mmol）を滴下した。０℃で１時間撹拌後、モルホリン（２６７μl(３．０５mmol）を加え、室温で１９時間撹拌した。酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ3 Ｃｌ）で精製し、標記物質４８．５mg（収率５１％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.77(1H, dt, J=15.5, 6.6Hz, =CH-CH2), 5.49(1H, dd, J=15.5, 8.3Hz, CH-CH=), 4.69(1H, t, J=8.3Hz, O-CH), 3.80(2H, m), 3.50(1H, m, CH-OH), 2.27(2H, t, J=7.6Hz, N=C-CH2), 2.07(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.62(2H, m), 1.26(16H, m), 0.89(6H, m, CH3)
TOF-Mass: 310(M+H+), 333(M+Na+H+), (C19H35NO2 309)
HRMS(FAB)C19H36NO2(M+H+), 理論値; 310.2746 測定値; 310.2750
〔α〕D 23=+75.9 °(c=1.10, CHCl3)
【００７６】
（２）（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン２９８．０mg（０．９６３mmol）の塩化メチレン２ml溶液に、窒素雰囲気下−４５℃で、ピリジン２３４μl(２．８９mmol）と無水トリフルオロ酢酸１９４μl(１．１６mmol）を滴下した。−４５℃で１．５時間撹拌後、モルホリン０．８４ml（９．６３mmol）を加えた。−４５℃で１時間、室温で２時間撹拌後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、標記物質１４１．０mg（収率３９％）を得た。
1H-NMR(CDCl3): 5.76(1H, dt, J=15.2, 6.9Hz, =CH-CH2), 5.46(1H, dd, J=15.2, 7.6Hz, CH-CH=), 4.62(1H, t, J=7.6Hz, O-CH), 3.87(1H, q, J=6.9Hz, N-CH), 3.68(4H, m, (CH2)2O), 2.63-2.32(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.26(2H, t, J=8.0Hz, N=C-CH2), 2.06(2H, m, =CH-CH 2), 1.61(2H, m), 1.26(16H, m), 0.89(6H, m, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 167.7, 134.7, 128.1, 84.5, 69.7, 66.7, 62.9, 54.0, 31.7, 31.0, 29.3, 29.1, 29.0, 28.2, 25.9, 22.5, 22.0, 14.0, 13.7
TOF-Mass: 379(M+H+), (C23H42N2O2 378)
HRMS(FAB)C23H43N2O2(M+H+), 理論値; 379.3325 測定値; 379.3322
〔α〕D 23=+32.5 °(c=0.43, CHCl3)
【００７７】
（３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−ノネン−３−オール
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ヘキセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン１７４．０mg（０．４６mmol）に３N 塩酸３mlを加え、室温で１３時間撹拌した。反応溶液に１N ＮａＯＨを加えpH９に調整した後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：３）で精製し、標記物質１０６．４mg（収率５９％）を得た。
1H-NMR(CDCl3;D2O exchange): 5.73(1H, dt, J=15.5, 6.6Hz, H-5), 5.42(1H, dd, J=15.2, 6.3Hz, H-4), 4.28(1H, dd, J=5.9, 3.3Hz, H-3), 4.05(1H, m, H-2), 3.69(4H, t, J=4.6Hz, (CH2)2O), 2.69(1H, dd, J=13.2, 6.6Hz, H-1a), 2.56(4H, t, J=4.6Hz, N(CH2)2), 2.51(1H, dd, J=13.2, 5.9Hz, H-1b), 2.17(2H, t, J=7.9Hz, CO-CH2), 2.06(2H, m, =CH-CH 2 ),1.60(2H,m), 1.26(16H,m), 0.89(6H, m, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 173.5, 133.5, 128.8, 73.5, 66.7, 59.6, 54.1, 49.8, 36.7, 31.9, 31.2, 29.3, 29.1, 25.7, 22.5, 22.1, 14.0, 13.8
TOF-Mass: 397(M+H+), 420(M+Na+)(C23H44N2O3 396)
HRMS(FAB)C23H45N2O3(M+H+), 理論値; 397.3430 測定値; 397.3430
〔α〕D 23=+23.0 °(c=1.00, CHCl3)
【００７８】
調製例１０ （２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−オクタデセン−３−オールの合成
（１）（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−４−オクタデセン−１，３−ジオール１．３８ｇ（３．０４mmol）のピリジン１０ml溶液に、窒素雰囲気下０℃で、メタンスルホニルクロリド０．３３ml（４．２６mmol）を滴下した。０℃で２時間撹拌後、モルホリン２．７ml（３０．４mmol）を加え、室温下１８時間撹拌した。クロロホルムで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物にヘキサンを加え、析出した結晶をろ過除去し、ろ液を減圧濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ3 Ｃｌ）で精製し、標記物質４９６mg（収率３７％）を得た。
1H-NMR(CDCl3; D2O exchange): 5.77(1H, dt, J=15.3, 6.6Hz, =CH-CH2), 5.48(1H, dd, J=15.3, 8.1Hz, CH-CH=), 4.70(1H, t, J=8.1Hz, O-CH), 3.80(2H, m, CH-OH, N-CH), 3.49(1H, dd, J=11.6, 4.3Hz, CH2-OH), 2.26(2H, t, J=7.9Hz, N=C-CH2), 2.05(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.61(2H, m, N=C-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 169.0, 135.6, 127.5, 82.4, 73.4, 62.6, 32.1, 31.8, 29.5, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0, 28.7, 28.2, 25.9, 22.6, 14.0
TOF-Mass: 436(M+H+), 459(M+Na+H+), (C28H53NO2 435)
HRMS(FAB)C28H54NO2 (M+H+), 理論値; 436.4155 測定値; 436.4147
〔α〕D 23=+54.7 °(c=2.94, CHCl3)
【００７９】
（２）（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−ヒドロキシメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン８０２mg（１．８４mmol）の塩化メチレン４０ml溶液に、窒素雰囲気下−４５℃で、ピリジン０．４５ml（５．５２mmol）と無水トリフルオロ酢酸３７２μl(２．２１mmol）を滴下した。−４５℃で２時間撹拌後、モルホリン１．６１ml（１８．４mmol）を加えた。−４５℃で１時間、室温で５時間撹拌後、クロロホルムで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、標記物質２１９mg（収率２４％）を得た。
1H-NMR(CDCl3): 5.75(1H, dt, J=15.2，6.9Hz, =CH-CH2), 5.46(1H, dd, J=15.2，7.6Hz, CH-CH=)，4.62(1H, t, J=7.6Hz, O-CH)，3.87(1H, q, J=6.9Hz, N-CH)，3.68(4H, m, (CH2)2O)，2.63-2.32(6H, m, CH2N(CH2)2)，2.26(2H, t, J=8.0Hz, N=C-CH2), 2.05(2H, q, J=6.9Hz，=CH-CH 2 )，1.62(2H, m, N=C-CH2-CH 2 )，1.26(34H, m)，0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 167.8, 134.8, 128.1, 84.5, 69.7, 66.8, 62.9, 54.1, 32.1, 31.8, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 29.0, 28.9, 28.3, 26.0, 22.6, 14.0
TOF-Mass: 505(M+H+), (C32H60N2O2 504)
HRMS(FAB)C32H61N2O2(M+H+), 理論値; 505.4733 測定値; 505.4736
〔α〕D 23=+19.4 °(c=0.32, CHCl3)
【００８０】
（３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｅ）−２−デカノイルアミノ−１−モルホリノ−４−オクタデセン−３−オール
（４Ｒ，５Ｒ）−５−（１−（Ｅ）−ペンタデセニル）−４−モルホリノメチル−２−ノニル−２−オキサゾリン１９０mg（０．３８mmol）に３N 塩酸３mlを加え、室温で２時間撹拌した。反応液に１N ＮａＯＨを加えpH９に調整した後、酢酸エチルで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム上で乾燥、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：３）で精製し、標記物質１２５mg（収率６３％）を得た。
1H-NMR(CDCl3;D2O exchange): 5.73(1H, dt, J=15.2, 6.9Hz, H-5), 5.42(1H, dd, J=15.2, 6.3Hz, H-4), 4.27(1H, dd, J=6.3, 3.6Hz, H-3), 4.04(1H, m, H-2), 3.69(4H, t, J=4.6Hz, (CH2)2O), 2.69(1H, dd, J=12.9, 6.6Hz, H-1b), 2.55(4H, t, J=4.6Hz, N(CH2)2), 2.49(1H, dd, J=12.9, 5.6Hz, H-1b), 2.17(2H, t, J=7.6Hz, CO-CH2), 2.04(2H, q, J=6.6Hz, =CH-CH 2 ), 1.60(2H, m, CO-CH2-CH 2 ), 1.26(34H, m), 0.88(6H, t, J=6.9Hz, CH3)
13C-NMR(CDCl3): 173.4, 133.5, 128.8, 73.6, 66.8, 59.7, 54.2, 49.8, 36.7, 32.2, 31.8, 31.7, 29.6, 29.4, 29.3, 29.2, 25.7, 22.5, 14.0
TOF-Mass: 524(M+H+), 546(M+Na+)(C32H62N2O3 522)
HRMS(FAB)C32H63N2O3(M+H+), 理論値; 523.4838 測定値; 523.4837
〔α〕D 23=+16.9 °(c=0.95, CHCl3)
【００８１】
実施例１−１ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩１０．００ｇ（２２．４７mmol）を塩化メチレン２２０mlに溶かし、室温下、ピリジン９．１０ml（１１２．５１mmol）及び無水酢酸８．５０ml（９０．１７mmol）を加え一夜撹拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え３０分間撹拌した後、有機層を水、１N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ１５０mlで順次洗浄し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をヘキサンと酢酸エチルの混合溶媒に溶解後、室温下放置し、析出した結晶をろ取し、白色結晶の標記物質５．３５ｇ（収率５５．２％）を得た。
TLC Rf. 0.23（酢酸エチル）、0.36（クロロホルム：メタノール＝20:1）
1H-NMR(CDCl3): 7.35-7.26(5H, m, aromatic), 6.05(1H, d, J=4.88Hz, H-1), 5.57(1H, d, J=9.28Hz, NH), 4.51(1H, m, H-2), 3.64(4H, m, (CH2)2O), 2.49-2.39 及び2.38-2.29(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.18-2.06(5H, m, COCH3, COCH2), 1.54(2H, m, COCH2CH 2 ), 1.25(12H, m, (CH 2)6CH3), 0.88(3H, t, CH2CH 3 )
13C-NMR(CDCl3): 172.8, 169.9, 137.6, 128.5, 128.2, 126.5, 75.0, 67.0, 59.1, 53.9, 50.4, 36.8, 31.8, 29.4, 29.3, 29.2, 25.7, 22.6, 21.0, 14.1
【００８２】
実施例１−２ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテート塩酸塩及びその他の塩の調製
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテート １，４１４．６mg（３．２７５mmol）をエタノール３０mlに溶かし、室温下２N 塩酸１，６３８μl(３．２７６mmol）を加え、１０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去した。この後エタノール３０mlを加え、減圧留去する操作を３回繰り返し、室温下４８時間減圧乾燥し、白色無晶状の（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテート塩酸塩１．５４ｇ（収率１００％）を得た。
また、上記塩酸塩の調製法において、塩酸の代わりにＬ−乳酸、クエン酸又はコハク酸を使用し、（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテートの上記各カルボン酸の塩を調製した。
【００８３】
実施例２ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノアセテートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩９０２．１mg（２．０３mmol）、ジシクロヘキシルカルボジイミド７０９．６mg（３．４４mmol）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン２１６．２mg（２．１０mmol）及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン９８．５mg（０．８０６mmol）に塩化メチレン２０mlを加え、室温下２日間撹拌した。反応終了後、白色結晶をろ過除去し、ろ液を濃縮後、クロロホルム１００mlを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝９：１）で精製し、赤色油状の標記物質７１３．８mg（収率７４．１％）を得た。
TLC Rf. 0.33（クロロホルム：メタノール＝20:1）、0.19（酢酸エチル：メタノール＝9:1)
1H-NMR(CDCl3): 7.34-7.26(5H, m, aromatic), 6.13(1H, d, J=4.39Hz, H-1), 5.95(1H, d, J=8.79Hz, NH), 4.51(1H, m, H-2), 3.65(4H, m, (CH2)2O), 3.25(2H, d, J=2.93Hz, COCH2N), 2.44(4H, m, N(CH2)2), 2.35-2.32(8H, m, H-3, N(CH3)2), 2.11(2H, m, COCH2), 1.53(2H, m, COCH2CH 2 ), 1.25(12H, m, (CH 2 )6CH3), 0.88(3H, t, CH2CH 3 )
13C-NMR(CDCl3): 172.8, 169.5, 137.5, 128.4, 128.2, 126.5, 75.1, 67.0, 60.5, 59.2, 53.8, 50.4, 45.3, 36.7, 31.8, 29.4, 29.3, 29.2, 25.7, 22.6, 14.1
【００８４】
実施例３ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル メトキシアセテートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩９８２．２mg（２．２０７mmol）を塩化メチレン２０mlに溶かし、室温下ピリジン０．３５７ml（４．４１mmol）及びメトキシアセチルクロリド０．２４２ml（２．６５mmol）を加えて撹拌し、２４時間後ピリジン０．１７９ml（２．２０７mmol）及びメトキシアセチルクロリド０．２０２ml（２．２０７mmol）を追加した。反応終了後、メタノール５mlを加え、２０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去し、酢酸エチル１００mlを加え、有機層を１N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝４０：１）で精製し、無色油状の標記物質１，０００．８mg（収率９８．２％）を得た。
TLC Rf. 0.39（クロロホルム：メタノール＝20:1）、0.48（酢酸エチル：メタノール＝20:1）
1H-NMR(CDCl3): 7.36-7.27(5H, m, aromatic), 6.14(1H, d, J=4.88Hz, H-1), 5.64(1H, d, J=9.28Hz, NH), 4.54(1H, m, H-2), 4.09(2H, m, CH 2 OCH3), 3.64(4H, m, (CH2)2O), 3.44(3H, s, OCH3), 2.48-2.37及び2.35-2.30(6H, m, CH2N(CH2)2)，2.12(2H, m, COCH2)，1.54(2H, m, COCH2CH 2 ), 1.25(12H, m, (CH 2 )6CH3)，0.88(3H, t, CH2CH3)
13C-NMR(CDCl3): 172.8, 169.3, 137.1, 128.5, 128.4, 126.6, 75.5, 69.8, 66.9, 59.4, 59.0, 53.8, 50.3, 36.8, 31.8, 29.4, 29.3, 29.2, 29.1, 25.7, 22.6, 14.0
【００８５】
実施例４ （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル ヒドロゲンサクシネートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール塩酸塩９５０．６mg（２．１３６mmol）を塩化メチレン２２０mlに溶かし、室温下ピリジン０．３４６ml（４．２７２mmol）及び無水コハク酸３４６．１mg（３．４５９mmol）を加えて撹拌し、２４時間後ピリジン０．１４１ml（１．７３７mmol）及び無水コハク酸１７３．８mg（１．７３７mmol）を追加した。反応終了後、１N 塩酸７０mlを加え、２０分間撹拌した後、クロロホルム１００mlで抽出し、有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ７０mlで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）で精製し、白色無晶状の標記物質６３７．１mg（収率５４．７％）を得た。
TLC Rf. 0.24（クロロホルム：メタノール＝9:1)、0.12（酢酸エチル：メタノール＝9:1)
1H-NMR(CDCl3): 7.35-7.26(5H, m, aromatic), 6.40(1H, d, J=9.27Hz, NH), 5.96(1H, d, J=4.39Hz, H-1), 4.63(1H, m, H-2), 3.74-3.62(4H, m, (CH2)2O), 2.82-2.57及び2.39-2.35(10H, m, COCH2CH2CO, CH2N(CH2)2), 2.14(2H, m, COCH2), 1.51(2H, m, COCH2CH 2 ), 1.25(12H, m, (CH 2 )6CH3), 0.88(3H, t, CH2CH 3 )
13C-NMR(CDCl3): 176.8, 173.5, 171.5, 137.0, 128.6, 128.4，126.4, 75.3, 65.6, 58.3, 53.0, 49.3, 36.5, 31.9, 30.4, 30.3, 29.5, 29.4, 29.3, 25.5, 22.6, 14.1
【００８６】
実施例５ （１Ｓ，２Ｓ）−２−オクチルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテートの合成
（１Ｓ，２Ｓ）−２−オクチルオキシカルボニルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロパノール１０３４．５mg（２．６３９mmol）を塩化メチレン２６mlに溶かし、室温下ピリジン０．５４ml（６．６７７mmol）及び無水酢酸０．５ml（５．３０４mmol）を加えて撹拌し、１４時間後ピリジン０．５４ml（６．６７７mmol）及び無水酢酸０．５ml（５．３０４mmol）を追加した。反応終了後、メタノール５mlを加え２０分間撹拌した後、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で精製し、無色油状の標記物質９１５．２mg（収率７９．９％）を得た。
TLC Rf. 0.44（CHCl3:MeOH＝20:1）、0.21（n-Hexane:AcOEt=1:2）
1H-NMR(CDCl3): 7.35-7.26(5H, m, aromatic), 6.02(1H, d, J=3.91Hz, H-1) ，4.83(1H, d, J=7.81Hz, NH), 4.13(1H, m, H-2), 3.97(2H, m, COO-CH2), 3.67(4H, m, (CH2)2O), 2.50-2.31(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.12(3H, s, COCH3), 1.53(2H, m, COOCH2CH 2 ), 1.27(10H, m, (CH 2 )5CH3)，0.89(3H, t, CH2CH3)
13C-NMR(CDCl3): 169.7, 156.4, 137.8, 128.4, 128.1, 126.5, 74.9, 67.0, 65.2, 59.6, 53.9, 52.7, 31.8, 29.2, 29,0, 25.8, 22.6, 21.0, 14.0
【００８７】
実施例６ （１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ピロリジノ−１−フェニル−１−プロピル アセテートの合成
（１Ｒ，２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１−フェニル−３−ピロリジノ−１−プロパノール２８４．２mg（０．８０３mmol）をピリジン５mlに溶かし、氷浴上にて、無水酢酸１５１．４μl(１．６１mmol）を加え、室温下撹拌し、１６時間後、無水酢酸３８．０μl(０．４０３mmol）を追加した。反応終了後１N 塩酸３０mlを加え、２０分間撹拌した後、酢酸エチル５０mlで抽出し、有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水及び飽和食塩水それぞれ３０mlで順次洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。また、合わせた洗液をクロロホルム７０mlで３回抽出し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物を合わせてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１、酢酸エチル：メタノール＝２０：１）で精製し、無色油状の標記物質２３０．９mg（収率７２．６％）を得た。
TLC Rf. 0.24（クロロホルム：メタノール＝20:1）、0.31（酢酸エチル：メタノール＝9:1)
1H-NMR(CDCl3): 7.34-7.25(10H, m, aromatic), 5.95(1H, d, J=4.88Hz, H-1), 5.10-4.94(2H, m, COOCH2), 4.17(1H, m, H-2), 2.51(6H, m, CH2N(CH2)2), 2.03(3H, s, COCH3), 1.73(4H, m, H-3', H-4')
13C-NMR(CDCl3): 169.7, 156.1, 137.7, 136.6, 128.6, 128.3, 128.2, 128.0, 127.9, 126.6, 75.3, 66.5, 56.5, 54.5, 54.3, 23.5, 20.8
実施例２〜６の化合物も、実施例１に示した方法で、同様に塩酸塩を調製することができる。
【００８８】
実施例７〜１０
また、調製例７〜１０に示した化合物を原料に用い、実施例１〜４に示した各カルボン酸若しくはその反応性誘導体を用い、基本的に同様の方法で水酸基のエステル化を行うことによって、各原料に対応するエステルを得ることができる。
【００８９】
実施例１１ 繰り返し脳虚血ラットの空間認知記憶障害に対するＬ−トレオ−ＰＤＭＰ及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの改善効果
〔実験方法〕
動物はWister系雄性ラット（体重：２５０〜２８０ｇ）を用い、８方向放射状迷路課題の訓練を１日１回行い、空間認知を獲得させた。空間認知を獲得したラットにPulsinelli and Brierlyらの方法(Stroke, 10,267, 1979)に従って椎骨動脈の焼灼と総頸動脈の剥離手術を行い、その翌日、手術が迷路課題の遂行に影響がないことを確認できたラットのみを用いて虚血処置を行った。虚血処置は無麻酔下で総頸動脈を１０分間クリップを用いて結紮し、血流再開１時間後に更に１０分間結紮し、２回の繰り返し虚血を行った。再生試行は虚血処置１週間後に行い、成績は最初の８回の選択の内の正選択数と最大１０分間の観察時間中の誤選択数として表した（図１参照）。また薬物の効果は改善の程度を著効（正選択数が７以上かつ誤選択数が１以下を示す）、有効（正選択数が７以上かつ誤選択数が２又は３を示す）及び無効（誤選択数が４以上を示す）の３段階に評価してその改善率として表した（図２参照）。
【００９０】
〔結果〕
ラットを用いた８方向放射状迷路課題における繰り返し脳虚血１週間後の空間認知記憶障害に対して、ガングリオシド生合成促進効果が確認されているＬ−トレオ−ＰＤＭＰとＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの効果を比較検討した。具体的には両化合物を１．５％Tween ８０含有生理食塩水に溶解させ、２mg/kg(i.v.) を虚血処置２４時間後から１日２回、６日間連続投与した。
【００９１】
各試験群についての正選択数と誤選択数を図１に示す。その結果、両化合物の６日間連続投与群は、対照群（１．５％Tween ８０含有生理食塩水を投与；図１中、ischemiaと表す）に対し、有意な正選択数の増加及び有意な誤選択数の減少が認められた。すなわち繰り返し脳虚血による空間認知記憶障害モデルにおいて、既に急性期の神経細胞障害が生じている虚血後２４時間からの投与でも改善作用を示すことが判明し、臨床的価値が非常に高い脳血管障害後遺症治療薬として期待されることがわかった。また、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートは、正選択数の増加及び誤選択数の減少の両方において、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰより優れていることが判明し、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの有用性が証明された。なお、図１中shamは、椎骨動脈の焼灼と総頸動脈の剥離手術を行った翌日、手術が迷路課題の遂行に影響がないことを確認できたラットのうち、虚血処置を行わなかったラットを表す。
【００９２】
また、各薬剤投与の成績を個体レベルでの改善率（著効：正選択数７以上かつ誤選択数１以下、有効：正選択数７以上かつ誤選択数２又は３、無効：誤選択数４以上）として図２に示した。その結果、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートは、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰと比較して著効の比率が高いことが判明した。
なお、図１、２中、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰをＬ−ＰＤＭＰと略して記載した。
【００９３】
実施例１２ Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰ及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの神経突起伸長活性
〔実験方法〕
妊娠１７日のWister系ラット（日本ＳＬＣ）より胎児を無菌的に取り出した後（胎児８匹）、胎児より脳を取り出し、実体顕微鏡下で小脳を取り外し、大脳から中脳を取り外した。更に大脳皮質から髄膜を剥ぎ取り、大脳皮質だけにした。８匹分の大脳皮質を６０mm皿上で安全カミソリで縦横に各々１００回細切し、５mlリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を２回加えて外植片（Explant)を皿より洗い取り、５００rpm ×１分の遠心をした。単一細胞（single cell)を含む上清を除き、ペレットにＤＭＥＭ(Dulbecco's modified Eagle's medium)４mlを加えて懸濁させ、１mlづつ５０mlのファルコンチューブに分注し、ＤＭＥＭ １２mlを加えた。チューブを振りながら懸濁させた状態で、０．１％ポリエチレンイミンでコートした２４穴プレート（２cm2)４枚にまいた（１．６６×１０5cells／５００μl/well）。
【００９４】
培養２時間後に上清５０μl を抜き取り、実施例１−１で合成した化合物Ａ（Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテート）５０μl 及び実施例５で合成した化合物Ｂを終濃度５〜２０μM になるよう添加した。２日間培養した後、１％グルタルアルデヒド／ＰＢＳを５００μl 加え、室温で２０分間固定した。サクションで上清を除去した後、０．５mlＰＢＳをゆっくり重層し、すぐにサクションで除去した。２０％ギムザ液／リン酸カリウム緩衝液（リン酸二水素カリウム６．６３ｇ及びリン酸水素二ナトリウム２．５６ｇを蒸留水で１，０００mlにし、pH試験紙でpH６．４であることを確認した後、１０倍希釈して使用した）をゆっくり重層し、室温で２時間置いた。サクションで上清を除去した後、５％メタノール／ＰＢＳ １．０mlをゆっくり重層し、２０分間室温で脱染した。サクションで上清を除去した後、ＰＢＳ ０．５mlを加えた。顕微鏡下×４０〜×１００倍で、５０〜２００μm の Explantの神経突起伸展の程度を、一群１００個以上計測した。評価は、それぞれの Explantの直径より長い神経突起を有する Explantの数を、コントロール（無添加）を１００％として存在率で表記した。
【００９５】
〔結果〕
図３に、化合物Ａ及びＢの最大有効濃度（共に１０μM)における神経突起伸長活性（％）を示した。この結果から、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートのin vitroでの神経突起伸長促進活性が明らかとなった。
【００９６】
実施例１３ シアン化カリウム惹起低酸素症（KCN Hypoxia)マウスモデルに対するＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの延命効果
本発明化合物の脳保護作用を確認するため、Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの１．５％Tween ８０含有生理食塩水溶液を、該化合物２、８及び２０mg/kg の各用量でマウス（ｎ＝５）の静脈内に投与し、さらにその１時間後にシアン化カリウム（KCN)２．４mg/kg を静脈内に投与して、１時間後の生存率を検討した。
【００９７】
その結果、コントロール群(KCNのみ投与、ｎ＝５) は、５％の生存率（ＬＤ95）であるのに対し、８及び２０mg/kg の本発明化合物投与群は、８０％の生存率を示した。また、２mg/kg の本発明化合物投与群は、４０％の生存率を示した。
【００９８】
以上の結果は、本発明化合物の脳保護作用に基づくものと考えられ、本発明化合物の脳保護剤としての有用性が示された。
【００９９】
なお、上記各用量において、ＳＨＲラット及び正常ラットに対する血圧、心拍数への本発明化合物の影響は認められなかった。
【図面の簡単な説明】
【図１】繰り返し脳虚血ラットの空間認知障害に対するＬ−トレオ−ＰＤＭＰ及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰアセテートの正選択数及び誤選択数に及ぼす効果を表す。
【図２】Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテート及びＬ−トレオ−ＰＤＭＰ連続投与後の個体レベルでの空間認知記憶障害改善効果を表す。
【図３】Ｌ−トレオ−ＰＤＭＰアセテート（化合物A)及び実施例５で合成した化合物（化合物Ｂ) の神経突起伸長活性を表す。
Claims (12)
- 下記式（１）で示されるアミノアルコール誘導体又は薬学的に許容されるその塩。
Ｒ2は、炭素数２〜１９のアルキル基、炭素数２〜１９のアルコキシル基、又はアラルキルオキシ基を示し、
Ｒ3は、モルホリノ基；低級アルキルアミノ基；モルホリノ低級アルキルアミノ基；ヒドロキシルで置換されていてもよいシクロヘキシルアミノ基又はシクロペンチルアミノ基；ヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピロリジノ基；低級アルキルで置換されていてもよいピペラジノ基；ビス（ヒドロキシ低級アルキル）アミノ基；及びヒドロキシル若しくはヒドロキシ低級アルキルで置換されていてもよいピペリジノ基から選ばれる置換アミノ基を示し、
Ｒ4は、水素原子、低級アルキル基、アミノ基、モノ若しくはジ低級アルキルアミノ基、炭素数１〜６のアルコキシル基又はカルボキシル基を示し、
ｎは１〜４の整数を示す。
但し、前記低級アルキルとは、炭素数１〜６のアルキル基を意味する。〕 - 一般式（１）において、Ｒ1がフェニル基であり、Ｒ2がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3がモルホリノ基、シクロヘキシルアミノ基、シクロペンチルアミノ基、ピロリジノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基、ジエタノールアミノ基、ヒドロキシピペリジノ基又はピペリジノ基であり、Ｒ4が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基である、請求項１記載のアミノアルコール誘導体。
- 一般式（１）において、Ｒ1がフェニル基であり、Ｒ2がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3がモルホリノ基、Ｎ−メチルピペラジノ基又はジエタノールアミノ基であり、Ｒ4が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）である、請求項１記載のアミノアルコール誘導体。
- 一般式（１）において、Ｒ1がフェニル基であり、Ｒ2がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3がヒドロキシピペリジノ基であり、Ｒ4が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）、（１Ｒ，２Ｓ）又は（１Ｓ，２Ｒ）である、請求項１記載のアミノアルコール誘導体。
- 一般式（１）において、Ｒ1がフェニル基であり、Ｒ2がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ3がモルホリノ基、ピロリジノ基、ピペリジノ基、シクロヘキシルアミノ基又はシクロペンチルアミノ基であり、Ｒ4が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基であり、その立体配置が（１Ｒ，２Ｒ）である、請求項１記載のアミノアルコール誘導体。
- 一般式（１）において、Ｒ 1 がフェニル基、ヘキセニル基又はペンタデセニル基であり、Ｒ 2 がノニル基、オクチルオキシ基又はベンジルオキシ基であり、Ｒ 3 がモルホリノ基又はピロリジノ基であり、Ｒ 4 が水素原子、ジメチルアミノ基、メトキシ基又はカルボキシル基である、請求項１記載のアミノアルコール誘導体。
- 一般式（１）において、Ｒ 1 がフェニル基であり、Ｒ 2 がノニル基又はオク チルオキシ基であり、Ｒ 3 がモルホリノ基であり、Ｒ 4 が水素原子であり、その立体配置が（１Ｓ，２Ｓ）である、請求項１記載のアミノアルコール誘導体。
- （１Ｓ，２Ｓ）−２−デカノイルアミノ−３−モルホリノ−１−フェニル−１−プロピル アセテート塩酸塩又はクエン酸塩。
- 請求項１〜８のいずれか１項記載のアミノアルコール誘導体又は薬学的に許容されるその塩を有効成分として含有する、神経疾患の治療剤である医薬。
- アミノアルコール誘導体が、請求項３又は４記載のアミノアルコール誘導体である、請求項９記載の医薬。
- アミノアルコール誘導体が、請求項６〜８のいずれか１項に記載のアミノアルコール誘導体である、請求項９記載の医薬。
- 神経疾患の治療剤が脳保護剤である、請求項９〜１１いずれか１項記載の医薬。
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