JP3914519B2 - グリセロ糖脂質化合物を含有してなるリパーゼ活性阻害剤 - Google Patents
グリセロ糖脂質化合物を含有してなるリパーゼ活性阻害剤 Download PDFInfo
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、リパーゼの活性、特に、膵リパーゼの活性を阻害するグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有するリパーゼ活性阻害剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
肥満は、糖尿病、高血圧、高脂血症、動脈硬化などの成人病の大きな要因とされており、近年、その増加傾向が懸念されている。肥満の主要な原因は、食事に含まれている脂肪（主に高級脂肪酸のトリグリセリド）が体内の脂肪組織（脂肪細胞）に過度に蓄積されることであり、従って、脂肪が脂肪組織に過度に蓄積されないようにすることで肥満を防止したり改善したりすることができるものである。
【０００３】
従来より、肥満を防止したり改善したりするためには、食事の内容や量を制限する食事療法や適度の運動を行なう運動療法が試みられているが、いずれの療法も効果を得るために長期間を要して負担が大きいものであった。
【０００４】
そこで、キチンやキトサンあるいはコンドロイチン硫酸を摂取することにより、食事療法や運動療法よりも手軽に肥満を防止したり改善したりすることが考えられている（例えば、非特許文献１参照）。キチンやキトサンあるいはコンドロイチン硫酸は膵リパーゼ（ステアプシン）等のリパーゼが脂肪を脂肪酸と２−モノグリセリドに分解するのを阻害することにより、小腸で脂肪酸と２−モノグリセリドの吸収を抑えるようにするものであり、これにより、脂肪が脂肪組織に過度に蓄積されないようにするものである。
【０００５】
そして、本発明者はキチンやキトサンあるいはコンドロイチン硫酸と同等あるいはそれら以上に膵リパーゼ等のリパーゼの活性を阻害する化合物を見出して本発明に至った。
【０００６】
【非特許文献１】
奥田拓道著「肥満と食品中の機能物質」（臨床栄養Ｖｏｌ．９７、Ｎｏ．３、２０００．９、Ｐ２５３−２５６、医歯薬出版株式会社）
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は上記の点に鑑みてなされたものであり、食事療法や運動療法よりも手軽に肥満を防止したり改善したりすることができる新規化合物であるグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有するリパーゼ活性阻害剤を提供することを目的とするものである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明の請求項１に係るリパーゼ活性阻害剤は、下記（１）の構造式を有するグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有して成ることを特徴とするものである。
【０００９】
【化２】
【００１０】
そして、（１）式における脂質部分が脂肪とほぼ同等の構造を有するために、このグリセロ糖脂質化合物が膵リパーゼ等のリパーゼの基質結合部位に作用してリパーゼによる脂肪の分解を阻害することができ、従って、脂肪が体内に摂取されるのを少なくすることができて食事療法や運動療法よりも手軽に肥満を防止したり改善したりすることができるものである。
【００１１】
また、本発明の請求項２に係るリパーゼ活性阻害剤は、請求項１に加えて、スピルリナからの抽出物であることを特徴とするものである。
【００１２】
また、本発明の請求項３に係るリパーゼ活性阻害剤は、請求項１又は２に加えて、フィコシアニンを有効成分として含有して成ることを特徴とするものであり、上記のグリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの相乗効果により、リパーゼによる脂肪の分解を強く阻害することができるものである。
【００１３】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施の形態を説明する。
【００１４】
まず、体内への脂肪の吸収機構について説明する。食事に含まれている脂肪はそのままの形では吸収されず、膵臓から分泌される膵リパーゼ等のリパーゼによって脂肪酸と２−モノグリセリドに分解された後、小腸の上皮細胞に吸収される。上皮細胞に吸収された脂肪酸と２−モノグリセリドはこの細胞内で再びトリグリセリドに合成され、アポ蛋白やリン脂質やコレステロールとともにカイロミクロンを形成する。このカイロミクロンはリンパ管を経て血液中に分泌されて全身を循環する。そして、カイロミクロンは脂肪組織の血管壁に存在するリポ蛋白リパーゼにより脂肪酸と２−モノグリセリドに分解された後、脂肪組織（脂肪細胞）に取り込まれ、脂肪組織内で再びトリグリセリドに合成されて蓄積される。このようにして脂肪は体内に吸収されるものである。
【００１５】
本発明で用いる新規化合物であるグリセロ糖脂質化合物は上記のような脂肪の吸収機構において、小腸での膵リパーゼ等のリパーゼの活性作用、すなわち、脂肪を脂肪酸と２−モノグリセリドに分解する活性作用を阻害することにより、脂肪の分解を抑制して脂肪の代謝を高めるようにするものであり、この結果、脂肪が脂肪組織に蓄積されにくくして肥満を防止したり改善したりすることができるものである。
【００１６】
本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物は上記（１）の構造式で示される化合物である。このグリセロ糖脂質化合物の糖質部分は環状構造の単糖類（残基）であるα−グルコース（α−Ｄ−グルコピラノース）である。また、グリセロ糖脂質化合物の脂質部分（脂溶性基）はグリセリド（残基）である。
【００１７】
このグリセロ糖脂質化合物は具体的にはヘキサデカノイル基とオクタノイル基を有する上記（１）の構造式で示される化合物である。
【００１８】
本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物が膵リパーゼ等のリパーゼの活性を阻害するメカニズムは明らかでないが、（１）式における脂質部分が脂肪（高級脂肪酸のトリグリセリドやジグリセリド等）とほぼ同等の構造を有するために、このグリセロ糖脂質化合物が膵リパーゼ等のリパーゼの基質結合部位に作用（結合）し、この作用により膵リパーゼ等のリパーゼの基質結合部位が脂肪に作用（結合）するのを少なくして脂肪の分解を阻害するものと考えられる。
【００１９】
本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物はスピルリナなどの藍藻類からの抽出物（抽出エキス）として得ることができる。スピルリナ(Spirulina platensis)は藍藻類紐子目ユレモ属スピルリナ科に属するものであって、細胞が多数連結した一本の細長い糸状体を形成し、規則正しい螺旋状（スパイラル）を呈しているものである。
【００２０】
スピルリナから本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物を抽出する方法には、特に制限はなく、通常の抽出法を採用することができる。例えば、スピルリナをその全質量に対して５〜１０倍の水あるいは有機溶媒あるいはこれらの混合溶媒に浸漬し、１時間〜１週間静置した後、ろ過することにより抽出液を得る。このようにして上記（１）式で示すグリセロ糖脂質化合物を抽出液中に得ることができる。上記の抽出において、スピルリナとしては乾燥粉末にしたものであってもよいし、乾燥粉末でない生のものを用いてもよい。また、有機溶媒としては例えばエタノールやメタノールやブタノールなどのアルコールを用いることができるが、その他の公知の有機溶媒を用いてもよい。また、水または有機溶媒の温度は常温（室温）であってもよいし、加熱により３０〜１００℃にしてもよい。尚、上記ではグリセロ糖脂質化合物をスピルリナから抽出する方法を例示したが、これに限らず、スピルリナ以外の他の藍藻類を用いてもよいし、また、他の方法によりスピルリナから抽出してもよい。
【００２１】
本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物は上記の抽出液をそのまま使用したりあるいは上記の抽出液を希釈したり濃縮したりすることにより抽出液に含有された状態で使用することができる。また、このグリセロ糖脂質化合物は上記の抽出液を単独であるいは適当な担体とともに噴霧乾燥、凍結乾燥、減圧乾燥、流動乾燥等の方法により粉末状あるいはペースト状にして使用することができる。さらに、このグリセロ糖脂質化合物はクロマトグラフィーなどを用いた公知の手法により上記の抽出液から単離精製してから使用することができる。尚、ここでいう「使用」とは、上記のグリセロ糖脂質化合物を経口あるいは非経口で体内に摂取すること及び後述のような本発明のリパーゼ活性阻害剤を調製すること等の意味を含むものである。
【００２２】
本発明のリパーゼ活性阻害剤は上記のグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有して調製されるものである。リパーゼ活性阻害剤の形態は特に限定されず、液剤、錠剤、丸剤、散剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、懸濁剤、注射剤、スプレー剤等にすることができ、また、賦形剤、充填剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤、溶剤、増量剤などの公知の材料及び公知の製法を用いて製剤化することができるものである。錠剤や散剤等の賦形剤としては、例えば、乳糖、澱粉、デキストリン、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、酸化マグネシウム、乾燥水酸化アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、重炭酸ナトリウム、乾燥酵母等が挙げられる。液剤における賦形剤としては、例えば、水、グリセリン、プロピレングリコール、単シロップ、エタノール、脂肪油、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール等が挙げられる。
【００２３】
リパーゼ活性阻害剤中における上記グリセロ糖脂質化合物の量は、特に限定されないが、リパーゼ活性阻害剤の全質量に対して０．０１〜９９．９％、好ましくは０．５〜５％とすることができる。また、リパーゼ活性阻害剤の投与方法は特に限定されず、製剤の形態、症状、患者の年齢、性別、その他の条件に応じて経口あるいは非経口などの公知の方法を適宜採用することができる。さらに、リパーゼ活性阻害剤の投与量としては特に限定されず、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件に応じて設定すればよいが、例えば、１日あたり体重１ｋｇに対して上記グリセロ糖脂質化合物を０．０１〜１ｍｇで投与するように設定することができる。
【００２４】
本発明のリパーゼ活性阻害剤には有効成分としてフィコシアニンを含有するのが好ましい。フィコシアニンは従来より可食な青色色素として利用されているが、膵リパーゼ等のリパーゼの活性を阻害することは知られていない。そこで、本発明のリパーゼ活性阻害剤は上記グリセロ糖脂質化合物の他に、さらにフィコシアニンを含有させることによって、上記グリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンとの二つの相乗効果によりリパーゼ活性阻害の効果を向上させることができるものである。
【００２５】
フィコシアニンは発色団であるフィコシアノビリンがタンパク質に化学的に結合した構造を有する色素タンパク質であって、特公昭５７−５１８６５号公報、特開平６−２７１７８３号公報、特開平１１−２９９４５０号公報等に記載されているような公知の手法により、藍藻類等から抽出して単離精製して得ることができるものである。従って、製剤化の際に上記グリセロ糖脂質化合物とともにフィコシアニンを配合することによって、上記グリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの両方を有効成分として含有するリパーゼ活性阻害剤を調製することができるものである。しかしながら、スピルリナの上記抽出液には上記グリセロ糖脂質化合物とともにフィコシアニンが含有されているので、この抽出液を単離精製せずに用いることによって、上記グリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの両方を有効成分として含有するリパーゼ活性阻害剤を調製することができる。リパーゼ活性阻害剤中のフィコシアニンの量は、特に限定されないが、リパーゼ活性阻害剤の全質量に対して０．０１〜９９．９％とすることができる。
【００２６】
本発明のリパーゼ活性阻害剤は、一般的に食されたり飲用されている食品や飲料に添加して配合することができ、例えば、パン、麺、菓子、ビスケット、ケーキ等の穀粉や澱粉を主成分とする食品、ソーセージやハム等の肉加工食品、かまぼこやちくわ等の水産加工食品、ヨーグルトやアイスクリームやバターやチーズやミルク等の乳製品、ジュースや水や茶などの飲料、味噌や醤油等の調味料、ゼリーやプリン等のデザートなどに配合することができる。これらの上記グリセロ糖脂質化合物及びリパーゼ活性阻害剤を含有する食品や飲料は脂肪が吸収されにくいものであり、従って、健康食品や健康飲料あるいはダイエット食品やダイエット飲料などとして用いられるものである。食品や飲料の上記グリセロ糖脂質化合物の配合量は、特に限定されないが、食品や飲料の全質量に対して上記グリセロ糖脂質化合物が０．０１〜１％とすることができる。
【００２７】
スピルリナは、現在健康食品、飼料または色素の抽出原料として広く利用され、微細藻類であるため、抽出も比較的容易な形状の粉体である。当該グリセロ糖脂質化合物は新規物質として他の植物から抽出された報告はなく、フィコシアニンもスピルリナなどごく一部の藻類に特有な色素としてのみ知られているために、スピルリナから抽出されることは非常に簡便であり効率的であるといえる。
【００２８】
【実施例】
以下本発明を実施例によって具体的に説明する。
【００２９】
乾燥粉末にしたスピルリナをその全質量に対して１０倍の水に浸漬し、常温で約２４時間静置した後、ろ過することにより水抽出液を得た。次に、この水抽出液を凍結乾燥した。得られた乾燥物をメタノールに溶解し、シリカゲルカラムを用いて分画した。溶出溶媒はメタノールおよびブタノール／エタノール／水（４／１／０．５）の混合溶媒を用いた。この分画により上記式（１）に示すグリセロ糖脂質化合物を得た。
【００３０】
上記のようにして得られた式（１）の画分を紫外線吸収スペクトル、赤外線吸収スペクトル、１ＨＮＭＲ、１３ＣＮＭＲで測定した。結果を以下に示す。また、１ＨＮＭＲ、１３ＣＮＭＲも測定結果を表１に示す。また、１ＨＮＭＲの測定結果を図１に示す。
ＵＶ λＭｅＯＨｎｍ：221,264
ＩＲ νＫＢｒｃｍ−１：3396.55,2927.12,2855.6,1738.67,1461.35,1378.99,1167.1,1074.82,980.315
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）：δ5.24(1H,H-2),4.41(1H,d,J=11.5Hz,H-1a),4.22(1H,d,J=7.5,H-1'''),4.21(1H,H-1β),3.97(1H,dd,J=5.5Hz 11.0Hz,H-2 a),3.48(1H,d,H-5'''),3.72(1H,dd,H-2β,H-6'''),3.81(1H,H-4'''),3.50(1H,H-2'''),3.45(1H,d,H-3'''),2.32(H-2',H-2''),1.60(H-3',H-3''),1.28(H-4〜15',H-4''〜7''),0.89(6H,t,J=9Hz,H-16',H-8'')
１３ＣＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）：δ174.8(C-1',1''),105.3(C-1'''),76.7(C-5'''),74.8(C-3'''),δ72.3(C-2'''),71.7(C-2),70.2(C-4'''),68.7(C-3),64.09(C-1),62.4(C-6'''),35.1(C-2',2''),33.0(C-14',C-6''),30.1〜30.8(C-4',C-13',C-4'',C-5''),26.0(C-3',3''),23.7(C-15',7''),14.4(C-16',8'')
【００３１】
【表１】
【００３２】
【化３】
【００３３】
従って、上記の画分は上記（１）に示すグリセロ糖脂質化合物であることが確認された。尚、［化３］におけるＭ１〜Ｍ６は分子量を示す。
【００３４】
（実施例１）
上記のようにブタノールを含む混合溶媒で分画後に、溶媒を除去して乾燥することによって、上記（１）に示すグリセロ糖脂質化合物のみを含む粉末を得た。
【００３５】
（実施例２）
上記の水抽出液の水を凍結乾燥により除去することによって、上記（１）に示すグリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの両方を含む粉末を得た。
【００３６】
実施例１、２について、膵リパーゼの活性の阻害を測定した。測定方法は、トリオレイン８０ｍｇとホスファチジルコリン１０ｍｇ及びタウロコール酸ナトリウム５ｍｇとを９ｍＬの０．１Ｍトリス（ヒドロキシルメチル）−２−アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）緩衝液（０．１ＭＮａＣｌを含有、ｐＨ７．０）中で乳化したものを基質液として用い、この基質液１００μＬに、実施例１または２を溶解させたＴＥＳ緩衝液１００μＬ及び酵素液（シグマ社製のブタ膵リパーゼ）を加え、３７℃、３０分間反応させた後、遊離する脂肪酸を銅試薬法（辻田、Eur.J.Biochem.,133,215〜220,1983に記載）により定量した。
【００３７】
比較のために、実施例１、２の代えて、フィコシアニンとβ−カロチン（いずれもシグマ社製）とクロロフィルａ（和光純薬工業株式会社製）とをそれぞれ用いて上記の同様の膵リパーゼの活性の阻害の測定を行なった。結果を図２に示す。図２から明らかなように、実施例１、２ともに膵リパーゼ活性を強く阻害するものであり、特に、上記（１）に示すグリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの両方を含む実施例２は、膵リパーゼの活性の５０％阻害を示すのが５μｇ／ｍＬ（ＴＥＳ緩衝液中の濃度）、９５％阻害を示すのが４０μｇ／ｍＬ（ＴＥＳ緩衝液中の濃度）であり、非常に強い阻害を示すものであった。
【００３８】
スピルリナに含まれているフィコシアニンも膵リパーゼの活性の阻害作用を示すが、５０％阻害を示す濃度は５０μｇ／ｍＬであり、実施例１、２よりも膵リパーゼの活性の阻害作用が小さかった。また、同じくスピルリナに含まれているクロロフィルａやβ−カロチンには阻害作用は認められなかった。従って、上記（１）のグリセロ糖脂質化合物は強力に膵リパーゼの活性の阻害するものであり、しかも、その阻害作用はフィコシアニンとの併用による相乗効果でさらに高められるものである。
【００３９】
（実施例３）
実施例２の粉末を５％（ｗ／ｗ）、結晶セルロースを３０％（ｗ／ｗ）、乳糖３０％（ｗ／ｗ）、馬鈴薯でんぷん３０％（ｗ／ｗ）、ショ糖脂肪酸エステル３％（ｗ／ｗ）、ナタネ硬化油２％（ｗ／ｗ）を配合し、直径８ｍｍ重量２００ｍｇの円柱状に打錠し、製剤とした。
【００４０】
（実施例４）
ドリンク剤（果糖ブドウ糖液糖１５％、ガラクトオリゴ糖１０％配合）に実施例２の粉末を全体量の３％（ｗ／ｗ）になるように混ぜた。この場合、実施例２の粉末が飲みやすくなった。また、実施例２の粉末をふりかけなどに混ぜて食べやすくすることもできる。
【００４１】
【発明の効果】
上記のように本発明の請求項１の発明は、上記（１）の構造式を有するので、（１）式における脂質部分が脂肪とほぼ同等の構造を有するために、グリセロ糖脂質化合物が膵リパーゼ等のリパーゼの基質結合部位に作用してリパーゼによる脂肪の分解を阻害することができ、従って、脂肪が体内に摂取されるのを少なくすることができて食事療法や運動療法よりも手軽に肥満を防止したり改善したりすることができるものである。
【００４２】
また、本発明の請求項２の発明は、スピルリナからの抽出物であるので、上記（１）の構造式を有するグリセロ糖脂質化合物を容易に効率的に得ることができるものである。
【００４３】
また、本発明の請求項３の発明は、フィコシアニンを有効成分として含有して成ることを特徴とするものであり、グリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの相乗効果により、リパーゼによる脂肪の分解を強く阻害することができるものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】 １ＨＮＭＲの測定結果を示す図である。
【図２】 実施例１、２及びフィコシアニンとクロロフィルａとβ−カロチンによる膵リパーゼの活性阻害を示すグラフである。
【発明の属する技術分野】
本発明は、リパーゼの活性、特に、膵リパーゼの活性を阻害するグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有するリパーゼ活性阻害剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
肥満は、糖尿病、高血圧、高脂血症、動脈硬化などの成人病の大きな要因とされており、近年、その増加傾向が懸念されている。肥満の主要な原因は、食事に含まれている脂肪（主に高級脂肪酸のトリグリセリド）が体内の脂肪組織（脂肪細胞）に過度に蓄積されることであり、従って、脂肪が脂肪組織に過度に蓄積されないようにすることで肥満を防止したり改善したりすることができるものである。
【０００３】
従来より、肥満を防止したり改善したりするためには、食事の内容や量を制限する食事療法や適度の運動を行なう運動療法が試みられているが、いずれの療法も効果を得るために長期間を要して負担が大きいものであった。
【０００４】
そこで、キチンやキトサンあるいはコンドロイチン硫酸を摂取することにより、食事療法や運動療法よりも手軽に肥満を防止したり改善したりすることが考えられている（例えば、非特許文献１参照）。キチンやキトサンあるいはコンドロイチン硫酸は膵リパーゼ（ステアプシン）等のリパーゼが脂肪を脂肪酸と２−モノグリセリドに分解するのを阻害することにより、小腸で脂肪酸と２−モノグリセリドの吸収を抑えるようにするものであり、これにより、脂肪が脂肪組織に過度に蓄積されないようにするものである。
【０００５】
そして、本発明者はキチンやキトサンあるいはコンドロイチン硫酸と同等あるいはそれら以上に膵リパーゼ等のリパーゼの活性を阻害する化合物を見出して本発明に至った。
【０００６】
【非特許文献１】
奥田拓道著「肥満と食品中の機能物質」（臨床栄養Ｖｏｌ．９７、Ｎｏ．３、２０００．９、Ｐ２５３−２５６、医歯薬出版株式会社）
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は上記の点に鑑みてなされたものであり、食事療法や運動療法よりも手軽に肥満を防止したり改善したりすることができる新規化合物であるグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有するリパーゼ活性阻害剤を提供することを目的とするものである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明の請求項１に係るリパーゼ活性阻害剤は、下記（１）の構造式を有するグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有して成ることを特徴とするものである。
【０００９】
【化２】
そして、（１）式における脂質部分が脂肪とほぼ同等の構造を有するために、このグリセロ糖脂質化合物が膵リパーゼ等のリパーゼの基質結合部位に作用してリパーゼによる脂肪の分解を阻害することができ、従って、脂肪が体内に摂取されるのを少なくすることができて食事療法や運動療法よりも手軽に肥満を防止したり改善したりすることができるものである。
【００１１】
また、本発明の請求項２に係るリパーゼ活性阻害剤は、請求項１に加えて、スピルリナからの抽出物であることを特徴とするものである。
【００１２】
また、本発明の請求項３に係るリパーゼ活性阻害剤は、請求項１又は２に加えて、フィコシアニンを有効成分として含有して成ることを特徴とするものであり、上記のグリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの相乗効果により、リパーゼによる脂肪の分解を強く阻害することができるものである。
【００１３】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施の形態を説明する。
【００１４】
まず、体内への脂肪の吸収機構について説明する。食事に含まれている脂肪はそのままの形では吸収されず、膵臓から分泌される膵リパーゼ等のリパーゼによって脂肪酸と２−モノグリセリドに分解された後、小腸の上皮細胞に吸収される。上皮細胞に吸収された脂肪酸と２−モノグリセリドはこの細胞内で再びトリグリセリドに合成され、アポ蛋白やリン脂質やコレステロールとともにカイロミクロンを形成する。このカイロミクロンはリンパ管を経て血液中に分泌されて全身を循環する。そして、カイロミクロンは脂肪組織の血管壁に存在するリポ蛋白リパーゼにより脂肪酸と２−モノグリセリドに分解された後、脂肪組織（脂肪細胞）に取り込まれ、脂肪組織内で再びトリグリセリドに合成されて蓄積される。このようにして脂肪は体内に吸収されるものである。
【００１５】
本発明で用いる新規化合物であるグリセロ糖脂質化合物は上記のような脂肪の吸収機構において、小腸での膵リパーゼ等のリパーゼの活性作用、すなわち、脂肪を脂肪酸と２−モノグリセリドに分解する活性作用を阻害することにより、脂肪の分解を抑制して脂肪の代謝を高めるようにするものであり、この結果、脂肪が脂肪組織に蓄積されにくくして肥満を防止したり改善したりすることができるものである。
【００１６】
本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物は上記（１）の構造式で示される化合物である。このグリセロ糖脂質化合物の糖質部分は環状構造の単糖類（残基）であるα−グルコース（α−Ｄ−グルコピラノース）である。また、グリセロ糖脂質化合物の脂質部分（脂溶性基）はグリセリド（残基）である。
【００１７】
このグリセロ糖脂質化合物は具体的にはヘキサデカノイル基とオクタノイル基を有する上記（１）の構造式で示される化合物である。
【００１８】
本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物が膵リパーゼ等のリパーゼの活性を阻害するメカニズムは明らかでないが、（１）式における脂質部分が脂肪（高級脂肪酸のトリグリセリドやジグリセリド等）とほぼ同等の構造を有するために、このグリセロ糖脂質化合物が膵リパーゼ等のリパーゼの基質結合部位に作用（結合）し、この作用により膵リパーゼ等のリパーゼの基質結合部位が脂肪に作用（結合）するのを少なくして脂肪の分解を阻害するものと考えられる。
【００１９】
本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物はスピルリナなどの藍藻類からの抽出物（抽出エキス）として得ることができる。スピルリナ(Spirulina platensis)は藍藻類紐子目ユレモ属スピルリナ科に属するものであって、細胞が多数連結した一本の細長い糸状体を形成し、規則正しい螺旋状（スパイラル）を呈しているものである。
【００２０】
スピルリナから本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物を抽出する方法には、特に制限はなく、通常の抽出法を採用することができる。例えば、スピルリナをその全質量に対して５〜１０倍の水あるいは有機溶媒あるいはこれらの混合溶媒に浸漬し、１時間〜１週間静置した後、ろ過することにより抽出液を得る。このようにして上記（１）式で示すグリセロ糖脂質化合物を抽出液中に得ることができる。上記の抽出において、スピルリナとしては乾燥粉末にしたものであってもよいし、乾燥粉末でない生のものを用いてもよい。また、有機溶媒としては例えばエタノールやメタノールやブタノールなどのアルコールを用いることができるが、その他の公知の有機溶媒を用いてもよい。また、水または有機溶媒の温度は常温（室温）であってもよいし、加熱により３０〜１００℃にしてもよい。尚、上記ではグリセロ糖脂質化合物をスピルリナから抽出する方法を例示したが、これに限らず、スピルリナ以外の他の藍藻類を用いてもよいし、また、他の方法によりスピルリナから抽出してもよい。
【００２１】
本発明で用いるグリセロ糖脂質化合物は上記の抽出液をそのまま使用したりあるいは上記の抽出液を希釈したり濃縮したりすることにより抽出液に含有された状態で使用することができる。また、このグリセロ糖脂質化合物は上記の抽出液を単独であるいは適当な担体とともに噴霧乾燥、凍結乾燥、減圧乾燥、流動乾燥等の方法により粉末状あるいはペースト状にして使用することができる。さらに、このグリセロ糖脂質化合物はクロマトグラフィーなどを用いた公知の手法により上記の抽出液から単離精製してから使用することができる。尚、ここでいう「使用」とは、上記のグリセロ糖脂質化合物を経口あるいは非経口で体内に摂取すること及び後述のような本発明のリパーゼ活性阻害剤を調製すること等の意味を含むものである。
【００２２】
本発明のリパーゼ活性阻害剤は上記のグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有して調製されるものである。リパーゼ活性阻害剤の形態は特に限定されず、液剤、錠剤、丸剤、散剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、懸濁剤、注射剤、スプレー剤等にすることができ、また、賦形剤、充填剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤、溶剤、増量剤などの公知の材料及び公知の製法を用いて製剤化することができるものである。錠剤や散剤等の賦形剤としては、例えば、乳糖、澱粉、デキストリン、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、酸化マグネシウム、乾燥水酸化アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、重炭酸ナトリウム、乾燥酵母等が挙げられる。液剤における賦形剤としては、例えば、水、グリセリン、プロピレングリコール、単シロップ、エタノール、脂肪油、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール等が挙げられる。
【００２３】
リパーゼ活性阻害剤中における上記グリセロ糖脂質化合物の量は、特に限定されないが、リパーゼ活性阻害剤の全質量に対して０．０１〜９９．９％、好ましくは０．５〜５％とすることができる。また、リパーゼ活性阻害剤の投与方法は特に限定されず、製剤の形態、症状、患者の年齢、性別、その他の条件に応じて経口あるいは非経口などの公知の方法を適宜採用することができる。さらに、リパーゼ活性阻害剤の投与量としては特に限定されず、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件に応じて設定すればよいが、例えば、１日あたり体重１ｋｇに対して上記グリセロ糖脂質化合物を０．０１〜１ｍｇで投与するように設定することができる。
【００２４】
本発明のリパーゼ活性阻害剤には有効成分としてフィコシアニンを含有するのが好ましい。フィコシアニンは従来より可食な青色色素として利用されているが、膵リパーゼ等のリパーゼの活性を阻害することは知られていない。そこで、本発明のリパーゼ活性阻害剤は上記グリセロ糖脂質化合物の他に、さらにフィコシアニンを含有させることによって、上記グリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンとの二つの相乗効果によりリパーゼ活性阻害の効果を向上させることができるものである。
【００２５】
フィコシアニンは発色団であるフィコシアノビリンがタンパク質に化学的に結合した構造を有する色素タンパク質であって、特公昭５７−５１８６５号公報、特開平６−２７１７８３号公報、特開平１１−２９９４５０号公報等に記載されているような公知の手法により、藍藻類等から抽出して単離精製して得ることができるものである。従って、製剤化の際に上記グリセロ糖脂質化合物とともにフィコシアニンを配合することによって、上記グリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの両方を有効成分として含有するリパーゼ活性阻害剤を調製することができるものである。しかしながら、スピルリナの上記抽出液には上記グリセロ糖脂質化合物とともにフィコシアニンが含有されているので、この抽出液を単離精製せずに用いることによって、上記グリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの両方を有効成分として含有するリパーゼ活性阻害剤を調製することができる。リパーゼ活性阻害剤中のフィコシアニンの量は、特に限定されないが、リパーゼ活性阻害剤の全質量に対して０．０１〜９９．９％とすることができる。
【００２６】
本発明のリパーゼ活性阻害剤は、一般的に食されたり飲用されている食品や飲料に添加して配合することができ、例えば、パン、麺、菓子、ビスケット、ケーキ等の穀粉や澱粉を主成分とする食品、ソーセージやハム等の肉加工食品、かまぼこやちくわ等の水産加工食品、ヨーグルトやアイスクリームやバターやチーズやミルク等の乳製品、ジュースや水や茶などの飲料、味噌や醤油等の調味料、ゼリーやプリン等のデザートなどに配合することができる。これらの上記グリセロ糖脂質化合物及びリパーゼ活性阻害剤を含有する食品や飲料は脂肪が吸収されにくいものであり、従って、健康食品や健康飲料あるいはダイエット食品やダイエット飲料などとして用いられるものである。食品や飲料の上記グリセロ糖脂質化合物の配合量は、特に限定されないが、食品や飲料の全質量に対して上記グリセロ糖脂質化合物が０．０１〜１％とすることができる。
【００２７】
スピルリナは、現在健康食品、飼料または色素の抽出原料として広く利用され、微細藻類であるため、抽出も比較的容易な形状の粉体である。当該グリセロ糖脂質化合物は新規物質として他の植物から抽出された報告はなく、フィコシアニンもスピルリナなどごく一部の藻類に特有な色素としてのみ知られているために、スピルリナから抽出されることは非常に簡便であり効率的であるといえる。
【００２８】
【実施例】
以下本発明を実施例によって具体的に説明する。
【００２９】
乾燥粉末にしたスピルリナをその全質量に対して１０倍の水に浸漬し、常温で約２４時間静置した後、ろ過することにより水抽出液を得た。次に、この水抽出液を凍結乾燥した。得られた乾燥物をメタノールに溶解し、シリカゲルカラムを用いて分画した。溶出溶媒はメタノールおよびブタノール／エタノール／水（４／１／０．５）の混合溶媒を用いた。この分画により上記式（１）に示すグリセロ糖脂質化合物を得た。
【００３０】
上記のようにして得られた式（１）の画分を紫外線吸収スペクトル、赤外線吸収スペクトル、１ＨＮＭＲ、１３ＣＮＭＲで測定した。結果を以下に示す。また、１ＨＮＭＲ、１３ＣＮＭＲも測定結果を表１に示す。また、１ＨＮＭＲの測定結果を図１に示す。
ＵＶ λＭｅＯＨｎｍ：221,264
ＩＲ νＫＢｒｃｍ−１：3396.55,2927.12,2855.6,1738.67,1461.35,1378.99,1167.1,1074.82,980.315
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）：δ5.24(1H,H-2),4.41(1H,d,J=11.5Hz,H-1a),4.22(1H,d,J=7.5,H-1'''),4.21(1H,H-1β),3.97(1H,dd,J=5.5Hz 11.0Hz,H-2 a),3.48(1H,d,H-5'''),3.72(1H,dd,H-2β,H-6'''),3.81(1H,H-4'''),3.50(1H,H-2'''),3.45(1H,d,H-3'''),2.32(H-2',H-2''),1.60(H-3',H-3''),1.28(H-4〜15',H-4''〜7''),0.89(6H,t,J=9Hz,H-16',H-8'')
１３ＣＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）：δ174.8(C-1',1''),105.3(C-1'''),76.7(C-5'''),74.8(C-3'''),δ72.3(C-2'''),71.7(C-2),70.2(C-4'''),68.7(C-3),64.09(C-1),62.4(C-6'''),35.1(C-2',2''),33.0(C-14',C-6''),30.1〜30.8(C-4',C-13',C-4'',C-5''),26.0(C-3',3''),23.7(C-15',7''),14.4(C-16',8'')
【００３１】
【表１】
【化３】
従って、上記の画分は上記（１）に示すグリセロ糖脂質化合物であることが確認された。尚、［化３］におけるＭ１〜Ｍ６は分子量を示す。
【００３４】
（実施例１）
上記のようにブタノールを含む混合溶媒で分画後に、溶媒を除去して乾燥することによって、上記（１）に示すグリセロ糖脂質化合物のみを含む粉末を得た。
【００３５】
（実施例２）
上記の水抽出液の水を凍結乾燥により除去することによって、上記（１）に示すグリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの両方を含む粉末を得た。
【００３６】
実施例１、２について、膵リパーゼの活性の阻害を測定した。測定方法は、トリオレイン８０ｍｇとホスファチジルコリン１０ｍｇ及びタウロコール酸ナトリウム５ｍｇとを９ｍＬの０．１Ｍトリス（ヒドロキシルメチル）−２−アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）緩衝液（０．１ＭＮａＣｌを含有、ｐＨ７．０）中で乳化したものを基質液として用い、この基質液１００μＬに、実施例１または２を溶解させたＴＥＳ緩衝液１００μＬ及び酵素液（シグマ社製のブタ膵リパーゼ）を加え、３７℃、３０分間反応させた後、遊離する脂肪酸を銅試薬法（辻田、Eur.J.Biochem.,133,215〜220,1983に記載）により定量した。
【００３７】
比較のために、実施例１、２の代えて、フィコシアニンとβ−カロチン（いずれもシグマ社製）とクロロフィルａ（和光純薬工業株式会社製）とをそれぞれ用いて上記の同様の膵リパーゼの活性の阻害の測定を行なった。結果を図２に示す。図２から明らかなように、実施例１、２ともに膵リパーゼ活性を強く阻害するものであり、特に、上記（１）に示すグリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの両方を含む実施例２は、膵リパーゼの活性の５０％阻害を示すのが５μｇ／ｍＬ（ＴＥＳ緩衝液中の濃度）、９５％阻害を示すのが４０μｇ／ｍＬ（ＴＥＳ緩衝液中の濃度）であり、非常に強い阻害を示すものであった。
【００３８】
スピルリナに含まれているフィコシアニンも膵リパーゼの活性の阻害作用を示すが、５０％阻害を示す濃度は５０μｇ／ｍＬであり、実施例１、２よりも膵リパーゼの活性の阻害作用が小さかった。また、同じくスピルリナに含まれているクロロフィルａやβ−カロチンには阻害作用は認められなかった。従って、上記（１）のグリセロ糖脂質化合物は強力に膵リパーゼの活性の阻害するものであり、しかも、その阻害作用はフィコシアニンとの併用による相乗効果でさらに高められるものである。
【００３９】
（実施例３）
実施例２の粉末を５％（ｗ／ｗ）、結晶セルロースを３０％（ｗ／ｗ）、乳糖３０％（ｗ／ｗ）、馬鈴薯でんぷん３０％（ｗ／ｗ）、ショ糖脂肪酸エステル３％（ｗ／ｗ）、ナタネ硬化油２％（ｗ／ｗ）を配合し、直径８ｍｍ重量２００ｍｇの円柱状に打錠し、製剤とした。
【００４０】
（実施例４）
ドリンク剤（果糖ブドウ糖液糖１５％、ガラクトオリゴ糖１０％配合）に実施例２の粉末を全体量の３％（ｗ／ｗ）になるように混ぜた。この場合、実施例２の粉末が飲みやすくなった。また、実施例２の粉末をふりかけなどに混ぜて食べやすくすることもできる。
【００４１】
【発明の効果】
上記のように本発明の請求項１の発明は、上記（１）の構造式を有するので、（１）式における脂質部分が脂肪とほぼ同等の構造を有するために、グリセロ糖脂質化合物が膵リパーゼ等のリパーゼの基質結合部位に作用してリパーゼによる脂肪の分解を阻害することができ、従って、脂肪が体内に摂取されるのを少なくすることができて食事療法や運動療法よりも手軽に肥満を防止したり改善したりすることができるものである。
【００４２】
また、本発明の請求項２の発明は、スピルリナからの抽出物であるので、上記（１）の構造式を有するグリセロ糖脂質化合物を容易に効率的に得ることができるものである。
【００４３】
また、本発明の請求項３の発明は、フィコシアニンを有効成分として含有して成ることを特徴とするものであり、グリセロ糖脂質化合物とフィコシアニンの相乗効果により、リパーゼによる脂肪の分解を強く阻害することができるものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】 １ＨＮＭＲの測定結果を示す図である。
【図２】 実施例１、２及びフィコシアニンとクロロフィルａとβ−カロチンによる膵リパーゼの活性阻害を示すグラフである。
Claims (3)
- 下記（１）の構造式を有するグリセロ糖脂質化合物を有効成分として含有して成ることを特徴とするリパーゼ活性阻害剤。
- グリセロ糖脂質化合物がスピルリナからの抽出物であることを特徴とするリパーゼ活性阻害剤。
- フィコシアニンを有効成分として含有して成ることを特徴とする請求項１又は２に記載のリパーゼ活性阻害剤。
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