JP3088005B2 - Ｈｉｖ―２ウイルス変異株 - Google Patents

Ｈｉｖ―２ウイルス変異株

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Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、HIV−２ウイルス変異株、即ち、対応する
ウイルス分離体HIV D194（ECACC Ｖ 87122303）か
ら、又は、感染した細胞系HUT 194（ECACC Ｖ 87122
306）から、及び、ウイルス分離体HIV D205（ECACC
Ｖ 87122304）から、それぞれ、リボ核酸（RNA）又はR
NA断片及びそれから誘導されたデオキシリボ核酸（DN
A）及びDNA断片及び／又は蛋白質にクローンを発生でき
る、ウイルスHIV D194及びHIV D205、並びに、診断及
び治療のためのその用法に関する。
［発明の背景］ 「大食細胞へよく複製する二つの西アフリカヒト免疫
不全ウイルス型２分離体の分子クローニング：神経性後
天性免疫不全症候群の症例からのガンビア分離体及び高
開散ガーネシア分離体」（Molecular cloning of two W
est African humanimmunodeficiency virus type 2 iso
lates which replicate well on macrophages:a Gamian
isolate from a case of neurologic aquiredimmunodef
iciency syndrome,and a highlydivergent Ghanesian i
solate）［キューネル，エッチ、ヴィ・ブリーセン，エ
ッチ、ディートリッヒ，ユー、アダムスキー，エム、ミ
ックス，ディ、ビーゼルト，エル、クロイツ，アール、
インメルマン，エー、ヘンコ，ケー、メイチュナー，シ
ーエッチ、アンドレーセン，アール、ゲルデルブロム，
エッチ、及びリューブザメン−ワイグマン，エッチ、
（Kuhel,H.,v.Briesen,H.,Dietrich,U.,Adamski,M.,Mi
x,D.,Biesert,L.,Kreutz,R.,Immelmann,A.,Henco,K.,Me
ichsner,Ch.,Andreesen,R.,Gelderblom,H.,＆ Rubsamen
−Waigmann,H.,）1989年、Proc.Natl.Acad.Sci.86,4,23
83−2387］ 診断において、二つの診断基準、即ち、検出される抗
原についての特異性と感度とが要求される。エイズ（AI
DS）の診断において、他の感染からのHIV感染を特定
し、そうして、「HIV−２関係感染」又は「HIV−１関係
感染」の分類におおまかに帰属させるために、特異性に
ついての要求が分離体HTLV−IIIB及びLAV−２を使用す
ることにより確かに応えられている（ガイヤダー，エム
他（Guyader,M.et al.）、“Nature"326,1987年、662〜
669頁）。しかしながら、診断の感度による問題があ
る。所謂血清変換、即ち、感染した人の抗体の最初の発
生の範囲において、感度の減少は「間違った陰性」の試
験結果の数の増加を意味する。従って、試験感度を改良
することによって、感染とこの感染の検出との間の期間
をできるだけ短縮することが一つの主な目的である。
広範囲に使用されるELISA診断の実施において、減少
した交差反応性は、例えば減少した感度において示され
る。そうして、上記HIV−１分離体を使用することは、H
IV−２血清に対する試験感度を100〜1000の係数だけ平
均的に減少することを意味し、一方分離体HTLV−III
Bは、もはや殆ど検出できない。
HIVにより生じる疾病の悲惨な本質は、HIV−１及びHI
V−２ウイルス表現型及び遺伝子型のそれぞれの一つの
型のみ存在するのではないという事実に存在する。前提
とすべきものは、むしろ大きな群の関連するウイルスで
あり、お互いから厳密に分離する手段がないが互いに連
続的に浸透し更に更に増加する開散への進化する展開を
受ける集団（Population）でさえ可能であり、他方、同
時にそれらは再組合せ現象によりゲノムの互いの部分の
間で交換することを始める。そうして、存在するHIV種
は、一つのウイルス変異株の狭く範囲を定めた小集団が
存在しない広い連続集団レベルを形成する。時間と共に
永久的な変動を受ける連続体が混在することがむしろ推
定される。
分類されたウイルス変異株HIV−１及びHIV−２は、部
分的交差反応性によってのみ示される比較的低い程度の
関係を有する広く限定された小集団の代表例である。他
方、HIV−１群の変異株があり（リューブザメン−ワイ
グマン，エッチ他、“AIDS−Forschung"10,1987年、572
〜575頁；リューブザメン−ワイグマン，エッチ他、J.M
ed.Virol.19,1986年、335〜344頁；ヴィ・ブリーセン，
エッチ他、J.Med.Virol.23,1987年、51〜66頁）、これ
は、最初に特徴付けたHIV−１分離体自身よりもHIV−２
と著しく強い交差反応をする［ハーン，ビー他（Hahn,
B.et al.）“Nature"312,1984年、166〜169頁］。この
ような分離体からなる商品は、上記標準分離体HTLV−II
IBよりも、HIV−２陽性であるとして明瞭に血清を診断
する。
理想的な診断又は治療製品は、互いに著しく生物学的
に区別されるような、集団からの少なくとも一種の代表
を含有すべきである。
多くの高度に多形遺伝子突然変異株中のHIV−１ウイ
ルスは、ARC、LAS、AIDS及び脳障害（ARC:AIDS関連錯
体、LAS:リンパ節症候群、AIDS:後天性免疫不全症候
群）のような異なった疾病を起し得る。クローン化ウイ
ルス変異株は、それらが若し同時に、同じ場所で、同じ
患者からでさえも分離されたときでさえも、連鎖及び制
限パターンにおいて区別される（リューブザメン，エッ
チ他、1986年）。HIV−１型のウイルス変異株は、約15
％までのある種のウイルス抗原中で区別されることが示
される。HIVP2は、置換、挿入、及び削除を考慮して、
ある種の抗原のアミノ酸の40％以上で異なっている（ガ
イヤダー，エム他1987年：ラブソン，エー．ビー．及び
マーチン，エム．エー．“Cell"40,1985年、477〜480
頁）。
［発明の詳細な記述］ 本発明は、HIV−２ウイルスの二個の変異株を提供す
る。一つの変異株は無症候患者から分離され、そして一
つの変異株は末端エイズ所謂神経エイズを患った患者か
ら分離された。このウイルス分離体はウイルス抗原に関
すると同様にDNA/RNAに関し、前エイズ及びエイズ段階
で型HIV−２による感染を血清学的に直接同定するため
の診断剤であることが証明された。
本発明は、ウイルス分離体HIV D194（ECACC Ｖ 87
122303）及びウイルス分離体HIV D205（ECACC Ｖ 87
122304）にある。
本発明の好ましい態様は次の通りである。
（１）上記の本発明のウイルス分離体のcDNA。
（２）上記の本発明のウイルス分離体から得られるウイ
ルス性RNA。
（３）上記の本発明のウイルス分離体から得られるDNA
を含む組み換えDNA。
（４）相補的にラベル化されたDNAまたはRNA鎖とのハイ
ブリッドとして存在する、上記のいずれかの項に記載の
ウイルス分離体のDNAまたはRNA。
（５）ウイルス性DNAに対して相補的である上記のいず
れかの項に記載のDNA。
本発明は、細胞系統HUT 194（ECACC Ｖ 8712230
6）にもある。
本発明によるウイルス分離体は、ウイルス及びプロウ
イルスからなり、その特性はクローン化した部分領域の
開示された制限マップ及び連鎖のもの（第２図〜第８
図）と同一である。更に、ウイルス分離体は、そのヌク
レオチド連鎖が上記ウイルスとは５％まで、好ましくは
２％まで、特に好ましくは１％まで異なっている、上記
ウイルス及びプロウイルスから区別される変異株から成
る。
本発明によるウイルス変異株は、リンパ節症（更に、
LAS/AIDSと言う）又は重い神経障害（脳障害）を起すか
も知れない。また、該ウイルス変異株の表出生成物も利
用できる。表出生成物には、クローン化RNA又はDNAのポ
ジ鎖（strand）又はネガ鎖にコード化した、グリコシル
化及び／又はメリスチル化（meristylated）形で全ての
ポリペプチドを含めることを意図する。
更に好ましい態様は、ウイルス変異株のゲノムのRNA
及びDNAとハイブリド化できるクローン化したDNA連鎖か
ら成る。試験される試料、特に生物学的又は半合成試料
中の上記ゲノムのRNA及びDNA、及び他のHIV変異株又は
関連ウイルス又はDNAプロウイルスのハイブリダイゼー
ションの検出のために有用であるようなDNA連鎖を含む
安定な遺伝子（ゲン）プローブを本願の特許請求の範囲
に入れる。
本発明の更に好ましい態様は、厳しい条件下でRNA/DN
A又はそれぞれの断片が、本発明によるウイルス変異
株、特にｃ−DNA、ゲノムDNA、組換えDNA、合成DNA又は
それらの断片にハイブリド化するウイルス変異株RNA/DN
Aからなる。これらは、本発明のウイルス変異株に比較
して削除及び挿入を示す変異株又は断片を含むものと理
解される。
ハイブリダイゼーション及び洗浄の厳しい条件は、若
し、ハイブリダイゼーション及び洗浄条件下の100％相
同核酸錯体の融点が、使用される緩衝剤条件下で５℃以
下に入るならば、実験又は計算の方法により起こる条件
として理解されることを意味する。
また、上記ウイルス変異株から誘導され、真核生物又
は原核生物のベクター系で増量されることができるクロ
ーン化合成遺伝子プローブも利用できる。上記クローン
化DNA断片は、ウイルス変異株の診断的検出の目的のた
めの相補的核酸（DNA/RNA）とのハイブリダイゼーショ
ンのために適している。本発明による診断的検査は、DN
A又はRNAプローブを使用して行なわれる。プローブは放
射性であるか、又は蛍光生物若しくは化学ルミネセンス
基又は酵素でラベル付けされているか、又は特に結合し
た反応系を介して酵素で検出できる。ハイブリダイゼー
ションは、溶液の均一相又は固体固定化核酸で不均一相
で行なうことができ、その固体は膜、粒子、細胞又は組
織であってよく、ハイブリダイゼーションはin situで
行なうこともできる。
本発明のウイルス分離体から、対応するDNA連鎖（第
２図）は、ウイルス分離体で感染されたリンパ球のDNA
から出発するゲノムラムダゲンバンクを確立することに
よりE.coliバクテリア中でクローン化できる。所望のク
ローンは、gag−pol範囲のSTLV−III連鎖でプラークス
クリーニングを行なうことによって得られる。更に特定
の方法において、プローブとして、公表された連鎖HIV
−２ RODから誘導されたDNA（ガイヤダー，エム他、
“Nature"326,1987年、662〜669頁）、又は本発明の分
離体HIV−２ D194及びHIV−２ D205の部分連鎖から誘
導されたDNAプローブを使用することができる。そうし
て第３図から、厳しい条件下で型HIV−２ D194の変異
株とのみハイブリド化するが、型HIV−２ RODの変異株
とはハイブリド化しないプローブが誘導される。
本発明のウイルスの使用に基づく診断方法は、下記の
工程からなる。生物学的試料からのRNA又はDNAの抽出、
可能な限り制限酵素による酵素処理、核酸結合キャリヤ
のためのゲル電気泳動及び／又は直接ブロット法（dire
ct blot method）による分離、及び本発明のウイルスの
クローン化断片の一部での継続ハイブリダイゼーショ
ン。ハイブリダイゼーションはまた、化学的に処理され
た細胞又は組織中で直接行なうことができる。そこで組
織又は液体の起源は重要ではない。
特に、本発明のウイルスの表出生成物に対する抗原の
in vitro検出のための方法は、そのウイルス表出生成物
又はその一部を免疫学的方法の手段により検出すること
に特徴を有する。この方法は、表出生成物が、特許請求
の範囲第１項記載の特徴を有するプロウイルス部分連鎖
のDNAの読み取り枠（open reading frame）の意味の範
囲内でコード化された蛋白質、ポリペプチド又はその一
部であり、合成法又はバイオ合成法により製造されるこ
とに特徴がある。
この方法は更に、表出生成物又はその部分の一定量又
は組合せを前もって微量滴定板上に固定し、次いで生物
学的試料（希釈又は非希釈）を被覆した微量滴定板と接
触させ、インキュベーション及び続く洗浄工程の後で、
検出試薬又はラベル化抗−HIV抗体の手段で同定できる
ことに特等を有する。
また、濾紙片及びプラスチック片又は棒が微量滴定板
の代わりに使用され、その場合ウイルスの表出生成物
は、異なった抗原の分離された適用によりそれぞれの特
定の位置に固定される。
表出生成物又はその部分は、また、ゲル電気泳動によ
り分離でき、次いで、ブロットにより移動され抗−HIV
抗体と共にインキュベーションしその検出を行なう。検
出は、抗原決定基が結合されており、粒子からなる固体
相キャリヤ上で行なわれる。
表出生成物はin vitro−感染細胞から誘導されたウイ
ルス抗原であってよく、該抗原は固定された細胞に結合
した抗原として生物学的検査物質と接触され、続く抗体
結合は、例えば細胞蛍光光度計付きの装置の手段か又は
目視により、免疫学的検出試薬で決定できる。
抗原は競争ELISAで決定できる。HIV関係核酸（DNA及
びRNA）は、本発明の核酸を使用することにより生物学
的試料、細胞及び分離された形態中で検出できる。
表出生成物は、他のHIV変異株に関連するが本発明の
分離体の物質とは生物学的性質において区別される物質
により補足される。
診断及び治療目的のために、上記DNAセグメントは、
表出コード化抗原、その部分又は異質の抗原との組合せ
のためにも使用できる。調節連鎖の狙った制御の下にDN
Aセグメントを、それによりコード化された抗原、その
部分又は異質の抗原との組合せを生成するために刺激す
るために、原核若しくは真核標的細胞、組織又は複細胞
有機体に導入する。抗原は、特にそれぞれの患者の血清
からの抗−HIV−２抗体との反応を介して検出できる。
より長い読み取り枠（＞50アミノ酸）を有する抗原は、
それ自身を、RNAレベル上でプライシング工程を受けそ
してより長い読み取り枠を形成するためにのみ構成され
るものと同様にさせる。
本願の特許請求の範囲には、更に、同様の抗原決定基
を含有する検査物質中の抗原を検出し、それにより免疫
学的交差反応をさせるための、本発明によるクローン化
ウイルス変異株から生じるポリペプチドが入る。これ
は、血液から誘導されるそれぞれウイルスキャリヤ又は
無症候ウイルスキャリヤ又はウイルス生成物のエイズ及
び前エイズの診断のために特に適当である。また、本発
明のウイルスの表出生成物としてこれらの抗原性ポリペ
プチドに指向する抗体の血清学的検出が、ELISAのよう
な従来の系を使用することにより可能になる。免疫抗原
性のポリペプチドは、エイズ感染に対し保護を与えるた
めのワクチンとしての保護ポリペプチドとして使用でき
る。
本発明のポリペプチドは、産出菌株中の蛋白質分解酵
素により、又はプロテアーゼの使用によるin vitroで得
られるものと同様に、長い読み取り枠から出発する、遺
伝子工学方法の手段により意図的に得られるフラグメン
トを含むと理解される。
本発明のウイルス分離体及びそれから誘導される生成
物は、検査系における部分集合体HIV−２の他の分離
体、即ち、例えば、分離体HIV−２ ROD（ガイヤダー，
エム他1987年）のような、上記集合体レベルでできるだ
け遠くに離れているものと組み合わせることができる。
それにより、それは一つの検査で離れた関係の集合体を
検出するための感度も可能になる。
本発明のウイルス変異株はHIV−１変異株のスペクト
ルとは非常に異なっており、重要な範囲で区別されるけ
れども（第１図、第２図、第３図）、ガイヤダーにより
記述されたHIV−２ウイルスに近接した分子関係を有す
る。また、生物学的性質は、上記HIV−２分離体から明
らかに区別される。そうして、本発明の変異株は有効な
in vitro複製のために、ミエロイド系統から誘導される
細胞を好む。反対に、ウイルスはリンパ球性系統でそれ
自体殆ど再生しない。この性質は特にHIV−D194に関係
している。
本発明のHIV D194は、感染した患者に漏れなく脳障
害症状を起し、そのために患者が非常に短い時間の後に
疾病の激しい進行の後に死亡した。本発明のウイルスの
試料は、ブダペスト条約により、European Collection
of Animal Cell Culiuresに、それぞれ指定名HIV D194
（承認番号V87122303）及び指定名HIV D205（承認番号
V87122304）で、それらの分離体の形で寄託している。
ウイルス分離体HIV D194で感染した細胞系統は、上
記と同じ寄託機関にHUT194（ECACC V87122306）で寄託
している。
第１図は、そのヌクレオチド連鎖及びアミノ酸連鎖に
おいてラムダＤ−194及びHIV−2ROD27/35からの蛋白質p
24及びgp41の偏向を示す。（ガイヤダー，エム他、1987
年“Nature"326,662〜669頁） 第２図は、公知のHIV連鎖と比較して本発明のウイル
ス分離体の制限マップを示す。
第３図は、エンベロープ蛋白質gp120のコード化範囲
で本発明の変異株HIV−２ D194の重要な分岐を示す、H
IV−２ ROD（ガイヤダー，エム他、1987年）及びHIV−
２ D194との間の連鎖の比較部分を示す。
連鎖の部分は、ヌクレオチド連鎖と比較したgp120領
域の範囲、及びHIV−２ D194とHIV−２ RODとの間の
単字表示法での対応アミノ酸連鎖を示す（ガイヤター，
エム他、1987年）。位置の表示はHIV−２ ROD参照。
（−）は、削除／挿入を表示する。（・）は同じヌクレ
オチドを表示する。
第４図は、クローンHIV−D194を特徴付けるヌクレオ
チド連鎖を示す。
Ｎ又はＯで示したヌクレオチド位置は、ゲルパターン
から明瞭に引き出すことはできなかった。該連鎖は、R/
U5領域LTRで始まり、U5領域で終っている。該連鎖はサ
ブクローンL10から誘導される（制限マップ）。このク
ローンは、クローンHIV−194,5から誘導される5kb相同
体連鎖と比較して決定したとき、ヌクレオチド連鎖にお
いて約１％だけ同じ患者／血液試料から誘導された他の
ものとは異なっている。
第５図は、HIV−D205の部分ヌクレオチド連鎖を示す
（第２図のクローンHIV−２ A7.1に対応する）。
第６図は、HIV−D194とHIVP2 RODとの間の連鎖相同
体を（％）で、官能要素について別々に示す。
第７図は、HIV/SIV群に比較したHIV−２ D205,7の連
鎖相同体を示す（遺伝子レベル;nt/aa）。
第８図は、HIV及びSIV菌株とのHIV−２ D205のヌク
レオチド連鎖比較を示す。
第９図は、機能的に公知の抗ウイルス抗原で読み取り
枠の対応を示す。
第10図は、適当なベクター中に対応する制限断片とし
て挿入されたプライマー仲介構成を示す。
HIV−D194及びHIV−D205の実験結果および特徴は、カ
ーネル，エイチ他、1989年、Proc.Natl.Acad.Sci.86,4,
2383〜2387に記載されている。
HIV−D194の連鎖は、HIV−D205の断片として多数の所
謂「読み取り枠」を示す。これらの読み取り枠の大部分
は、相同体の前記HIVウイルスに対する比較により、感
染したHUT78又はU937細胞から誘導されるHIV−D194及び
HIV−D205抗原で行なわれるウエスターン法（Western B
lot）の比較により、そして対応する患者及び参照血清
からの血清でプローブすることにより、in vivo表出蛋
白質／抗原に関係付けることができる。第９図は、機能
的に公知の抗ウイルス抗原で読み取り枠の対応を示す
（数は第４図及び第５図を参照）。
他の読み取り枠は、ウエスターン法での抗体染色にお
ける官能性により定義されるその表出抗原レベルと同一
ではない。しかしながら、それらはあるin vivo環境下
で示される。他の読み取り枠は、短いものでさえ、スプ
ライシング方法のために核酸連鎖データを基準にして単
独で予測することが困難な方法でよく示すことができ
る。
表出蛋白質における抗原決定基は、それらが生物学的
機能のために重要であるとき、診断における又は免疫法
のための目的抗原のために、表出蛋白質連鎖の全てに亙
って展開する。これらの連鎖の一部は抗原サイトのため
のペプチドスクリーニング／マップ化により示され得る
ので、他のものよりも一般的な抗原特性を有する。これ
らのサイトは単一エピトープとして又は連続ポリペプチ
ドとして又はin vitroの変形、又は合成的にスプライス
した抗原において示すことができる。表出生成物の抗原
性は、ウエスターン法分析における抗原固定化及びブロ
ット化により示すことができる。E.coliにおける抗原表
出のための構築は、合成遺伝子、クローン化ウイルスゲ
ノムからの制御断片、そのトリミング生成物を使用する
従来の技術を使用することにより、エキソヌクレアーゼ
又はデオキシリボヌクレアーゼＩを使用することによ
り、又は適当な制限サイトと共に示される断片の所望の
５′及び３′末端を定義する連鎖特定合成プライマー
（第10図）を使用することにより行なうことができる。
これらの制御サイトは、PLc24（レマウル他（Remault e
t al）1981年、Gene15、81〜83）から誘導されるものの
ような異なった有機体の表出ベクターのパネルに、マル
チクローン化サイト（pEX）で結ぶために容易に使用で
きる。
表出抗原は患者の血清と特定的に反応することを示し
た。HIV−D205のgagからのp27（24）は、典型的なHIV−
１血清及び典型的なHIV−２血清の両者と非常に感度よ
く反応する（キューネル他（Kuhnel et al）参照）。第
３図に示す領域に対応する抗原連鎖は、このHIV−変異
株の特別の亜科のために非常に特定的である。
［実施例１］ HIV−D194のgag−pol領域からなるkpn−kpn断片のよ
うなクローン化小断片を、相同体連鎖のために適当であ
るハイブリダイゼーション及び洗浄条件で30〜40℃の条
件下にハイブリドすることにより、HIV−２型及びSIV型
連鎖のためのプローブとして使用する。
HIV−１連鎖は、この領域は抗HIV−１血清と強く交差
反応するp24/27コード化領域を含むけれども、in blot
及びin situハイブリダイゼーションを明らかに示さな
い。しかしながら、第３図に示されそれに対応するよう
な核酸プローブは、全ての他の公知のHIV分離体に比較
してHIV−D194の特定の亜科を非常に特定的に検出す
る。これは、この特別の領域のランオフRNAを使用するi
n situハイブリダイゼーションにより示される。
【図面の簡単な説明】
第１図は、そのヌクレオチド連鎖及びアミノ酸連鎖にお
いてラムダＤ−194及びHIV−2ROD27/35からの蛋白質p24
及びgp41の偏向を示す。 第２図は、公知のHIV連鎖と比較して本発明のウイルス
分離体の制限マップを示す。 第３図は、エンベロープ蛋白質gp120のコード化範囲で
本発明の変異株HIV−２ D194の重要な分岐を示す、HIV
−２ ROD及びHIV−２ D194との間の連鎖の比較部分を
示す。 第４図は、クローンHIV−D194を特徴付けるヌクレオチ
ド連鎖を示す。 第５図は、HIV−D205の部分ヌクレオチド連鎖を示す
（第１図のクローンHIV−２ A7.1に対応する）。 第６図は、HIV−D194とHIV−２ RODとの間の連鎖相同
体を（％）で、官能要素について別々に示す。 第７図は、HIV/SIV群に比較したHIV−２ D205,7の連鎖
相同体を示す（遺伝子レベル;nt/aa）。 第８図は、HIV及びSIV菌株とのHIV−２ D205のヌクレ
オチド連鎖比較を示す。 第９図は、機能的に公知の抗ウイルス抗原で読み取り枠
の対応を示す。 第10図は、適当なベクター中に対応する制限断片として
挿入されたプライマー仲介構成を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (73)特許権者 999999999 ヘモテラポイティシュ・フォルシュンク インスティテュート・ゲオルグ―スペイ エル―ハウス ドイツ連邦共和国、フランクフルト／エ ム、6000、パウル‐エーリッヒ‐シュト ラーセ、42‐44 (72)発明者 カルシュテン・ヘンコ ドイツ連邦共和国、エアークラート、 ２、4006、シュリックメアー・ヴェー ク、23 (72)発明者 ハーゲン・フォン・ブリーゼン ドイツ連邦共和国、コロンベルグ、 6242、リングシュトラーセ、31 (72)発明者 アンドリアス・インメルマン ドイツ連邦共和国、デュッセルドルフ、 12、4000、フェンシュトラーセ、158 (72)発明者 ヘルベルト・カーネル ドイツ連邦共和国、イーグルスバッハ、 6073、マインシュトラーセ、７イー (72)発明者 ウラズラー・デートリッヒ ドイツ連邦共和国、エッシュボーン、 6236、ゲハスピッツ、６ー (72)発明者 ヘルガ・リューブザメン―ワイグマン ドイツ連邦共和国、バート・ゾーデン ／タウナス、6232、コオェニッヒステイ ナル・シュトラーセ、113 (72)発明者 ミハリーナ・アダムスキー ドイツ連邦共和国、フランクフルト、 71、6000、バイケンバッハー ヴェー ク、22

Claims (7)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】ウイルス分離体HIV D194（ECACC Ｖ 87
    122303）及びウイルス分離体HIV D205（ECACC Ｖ 87
    122304）。
  2. 【請求項２】請求項１に記載のウイルス分離体のcDNA。
  3. 【請求項３】請求項１に記載のウイルス分離体から得ら
    れるウイルス性RNA。
  4. 【請求項４】請求項１に記載のウイルス分離体から得ら
    れるDNAを含む組み換えDNA。
  5. 【請求項５】相補的にラベル化されたDNAまたはRNA鎖と
    のハイブリッドとして存在する、請求項１乃至３のうち
    のいずれかの項に記載のウイルス分離体のDNAまたはRN
    A。
  6. 【請求項６】ウイルス性DNAに対して相補的である請求
    項１乃至４のうちのいずれかの項に記載のDNA。
  7. 【請求項７】細胞系統HUT 194（ECACC Ｖ 8712230
    6）。
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