JP2997747B2 - 試料中の物質の測定法 - Google Patents
試料中の物質の測定法Info
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- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
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Description
【発明の詳細な説明】 ＜産業上の利用分野＞ 本発明は免疫化学的測定法による試料中の物質の測定
法に関する。より詳細には、生化学、免疫学をはじめ医
学、薬学などの分野、とりわけ臨床検査の分野で利用さ
れる試料中の物質の測定方法に関する。
法に関する。より詳細には、生化学、免疫学をはじめ医
学、薬学などの分野、とりわけ臨床検査の分野で利用さ
れる試料中の物質の測定方法に関する。
＜従来の技術及び発明が解決しようとする課題＞ 臨床検査等の分野では、試料中の測定対象物質（例え
ば、抗原、ハプテン、抗体、薬物等）の測定（定量）法
として、測定対象物質と当該対象物質と抗原抗体反応可
能な物質（例えば、測定対象物質が抗原又はハプテンの
場合には抗体、測定対象物質が抗体の場合には抗原、
等）との抗原抗体反応を利用した免疫化学的測定法が汎
用されている。このような免疫化学的測定法としては、
抗原、抗体等に標識物質を結合させた標識体を用いる標
識法（例えば、放射免疫法、酵素免疫法、螢光免疫法
等）及び標識物質を用いない非標識法（例えば、免疫比
濁法、免疫比朧法、免疫凝集法等）が知られている（石
川栄治ら編“酵素免疫測定法"1982年医学書院発行、鎮
目和男ら編“新版ラジオイムノアッセイ"1977年朝倉書
店発行、軽部征夫ら編“バイオテクノロジー辞典"1986
年シーエムシー発行の“イムノアッシェイ”の項等参
照）。
ば、抗原、ハプテン、抗体、薬物等）の測定（定量）法
として、測定対象物質と当該対象物質と抗原抗体反応可
能な物質（例えば、測定対象物質が抗原又はハプテンの
場合には抗体、測定対象物質が抗体の場合には抗原、
等）との抗原抗体反応を利用した免疫化学的測定法が汎
用されている。このような免疫化学的測定法としては、
抗原、抗体等に標識物質を結合させた標識体を用いる標
識法（例えば、放射免疫法、酵素免疫法、螢光免疫法
等）及び標識物質を用いない非標識法（例えば、免疫比
濁法、免疫比朧法、免疫凝集法等）が知られている（石
川栄治ら編“酵素免疫測定法"1982年医学書院発行、鎮
目和男ら編“新版ラジオイムノアッセイ"1977年朝倉書
店発行、軽部征夫ら編“バイオテクノロジー辞典"1986
年シーエムシー発行の“イムノアッシェイ”の項等参
照）。
上記の標識物質を用いる免疫化学的測定法において、
従来、標識物質としては、ラジオアイソトープ、螢光色
素、酵素、化学発行性物質等が用いられている。
従来、標識物質としては、ラジオアイソトープ、螢光色
素、酵素、化学発行性物質等が用いられている。
標識物質としてのラジオアイソトープを用いた場合、
感度が高いので微量物質の測定に用いられるが、放射能
被爆の危険性があり、また安全性も悪く、取扱いにく
い。螢光色素を用いた場合には、測定時には標識螢光物
質以外に混在する螢光物質の栄光や励起光の迷光のため
S/N比が低くなりやすい。酵素を用いた場合には、酵素
は安定性に欠け、失活しやすいので、標識化操作が困難
であり、また調製された標識体も安定性があまり良好と
はいえない。また、測定時に基質等の試薬の添加が必要
であり、測定操作も他の方法に比べて長時間を要する等
の問題がある。化学発光性物質を用いた場合には、発行
させるために試薬の添加を必要とする。また、発光時間
の短いものが多く測定が困難である場合が多い。
感度が高いので微量物質の測定に用いられるが、放射能
被爆の危険性があり、また安全性も悪く、取扱いにく
い。螢光色素を用いた場合には、測定時には標識螢光物
質以外に混在する螢光物質の栄光や励起光の迷光のため
S/N比が低くなりやすい。酵素を用いた場合には、酵素
は安定性に欠け、失活しやすいので、標識化操作が困難
であり、また調製された標識体も安定性があまり良好と
はいえない。また、測定時に基質等の試薬の添加が必要
であり、測定操作も他の方法に比べて長時間を要する等
の問題がある。化学発光性物質を用いた場合には、発行
させるために試薬の添加を必要とする。また、発光時間
の短いものが多く測定が困難である場合が多い。
最近、ユーロピウムキレートを標識した遅延螢光測定
法が報告されていが、この場合には特殊なキレート剤が
用いられたり、螢光強度を上げるために螢光増強剤が必
要であり、また測定に特別な装置も必要である（例え
ば、特開昭59−68673号、64−45365号等参照）。
法が報告されていが、この場合には特殊なキレート剤が
用いられたり、螢光強度を上げるために螢光増強剤が必
要であり、また測定に特別な装置も必要である（例え
ば、特開昭59−68673号、64−45365号等参照）。
本発明は上記従来技術の欠点を解消するためになされ
たもので、本発明の目的は従来標識物質として用いられ
てきたものの欠点を解決し、取扱いが簡便でS/N比が高
く、安定で特別な装置を必要としないものを提供するこ
とにある。
たもので、本発明の目的は従来標識物質として用いられ
てきたものの欠点を解決し、取扱いが簡便でS/N比が高
く、安定で特別な装置を必要としないものを提供するこ
とにある。
＜課題を解決するための手段＞ 本発明者らは、鋭意研究した結果、蓄光体の微粒子を
従来用いられていた標識物質の代りに用いることによ
り、上記問題点を解決できることを見い出して本発明を
完成した。即ち、本発明は、標識物質を用いる免疫科学
的測定法において、標識物質として蓄光体微粒子を用い
ることを特徴とするものである。
従来用いられていた標識物質の代りに用いることによ
り、上記問題点を解決できることを見い出して本発明を
完成した。即ち、本発明は、標識物質を用いる免疫科学
的測定法において、標識物質として蓄光体微粒子を用い
ることを特徴とするものである。
上記の構成からなる本発明において使用される蓄光体
としては種々の蓄光性物質を利用できるが、好ましくは
夜行塗料、ブラウン管等に使用されている蓄光性蛍光体
が用いられる。かかる蓄光性螢光体としては、例えば、
II族金属（例えば、Ca、Ba、Mg、Zn、Cd等）の酸化物、
硫化物、ケイ酸塩、タングステン酸塩、リン酸塩等の少
なくとも１種と、１種又は２種以上の賦活剤（例えば、
Mn、Cu、Au、Ag、Pb、Al、Zn、Sb等）とで構成される螢
光体が例示される。より具体的には、例えば、ZnS:Cu、
ZnS:Ag、ZnS:Pb、ZnS:CU,Al、ZnS:Pb,Mn、（Zn,Cd）S:C
u、（Zn,Cd）S:Cu,Al、ZnSiO4:Mn、MgSiO4:Zn、Zn3（PO
4）2:Mn、ZnO:Zn、CaWO4等が挙げられ、これらの２種以
上を混合して使用してもよい。上記の螢光体は、II族金
属の酸化物、硫化物、ケイ酸塩、タングステン酸塩、リ
ン酸塩などに0.001〜１％程度の賦活剤を加え、更に必
要に応じて融剤（例えば、塩化カリウム等）を添加し、
700〜1300℃程度で30分〜数時間焼成することにより調
製できるが、市販品を使用してもよい。蓄光体微粒子の
大きさは、微粒子状であれば特に限定されないが、10μ
ｍ以下が好ましい。
としては種々の蓄光性物質を利用できるが、好ましくは
夜行塗料、ブラウン管等に使用されている蓄光性蛍光体
が用いられる。かかる蓄光性螢光体としては、例えば、
II族金属（例えば、Ca、Ba、Mg、Zn、Cd等）の酸化物、
硫化物、ケイ酸塩、タングステン酸塩、リン酸塩等の少
なくとも１種と、１種又は２種以上の賦活剤（例えば、
Mn、Cu、Au、Ag、Pb、Al、Zn、Sb等）とで構成される螢
光体が例示される。より具体的には、例えば、ZnS:Cu、
ZnS:Ag、ZnS:Pb、ZnS:CU,Al、ZnS:Pb,Mn、（Zn,Cd）S:C
u、（Zn,Cd）S:Cu,Al、ZnSiO4:Mn、MgSiO4:Zn、Zn3（PO
4）2:Mn、ZnO:Zn、CaWO4等が挙げられ、これらの２種以
上を混合して使用してもよい。上記の螢光体は、II族金
属の酸化物、硫化物、ケイ酸塩、タングステン酸塩、リ
ン酸塩などに0.001〜１％程度の賦活剤を加え、更に必
要に応じて融剤（例えば、塩化カリウム等）を添加し、
700〜1300℃程度で30分〜数時間焼成することにより調
製できるが、市販品を使用してもよい。蓄光体微粒子の
大きさは、微粒子状であれば特に限定されないが、10μ
ｍ以下が好ましい。
上記の蓄光体微粒子と、抗体、抗原等との結合は、慣
用の方法で行うことができ、例えば、蓄光体微粒子に物
理的又は化学的に吸着させる吸着法；蓄光体微粒子を、
例えば、３−アミノプロピルトリエトキシシラン、３−
アミノプロピルトリクロロシラン等のシランカップリン
グ剤等を用いて処理して蓄光体微粒子を官能基を導入し
た後、グルタルアルデヒド法等の結合剤を用いる化学結
合法などの方法により行うことができる。
用の方法で行うことができ、例えば、蓄光体微粒子に物
理的又は化学的に吸着させる吸着法；蓄光体微粒子を、
例えば、３−アミノプロピルトリエトキシシラン、３−
アミノプロピルトリクロロシラン等のシランカップリン
グ剤等を用いて処理して蓄光体微粒子を官能基を導入し
た後、グルタルアルデヒド法等の結合剤を用いる化学結
合法などの方法により行うことができる。
本発明の測定法の測定操作は、蓄光体微粒子を標識物
質として用いる以外は、１ステップ法、２ステップ法、
競合法、サンドイッチ法等の従来の標識物質を用いる免
疫化学的測定法と同様な操作方法で行うことができる
（前掲“酵素免疫測定法”等参照）。その一例として、
固相を用いたサンドイッチ法で測定対象物質である抗原
を測定する場合を説明する。まず、測定対象物質の抗原
に対する抗体を、前記吸着法、化学結合法等の慣用の方
法で結合させた固相（例えば、マイクロプレート、プラ
スチック粒子、磁性体粒子等）を調製する。
質として用いる以外は、１ステップ法、２ステップ法、
競合法、サンドイッチ法等の従来の標識物質を用いる免
疫化学的測定法と同様な操作方法で行うことができる
（前掲“酵素免疫測定法”等参照）。その一例として、
固相を用いたサンドイッチ法で測定対象物質である抗原
を測定する場合を説明する。まず、測定対象物質の抗原
に対する抗体を、前記吸着法、化学結合法等の慣用の方
法で結合させた固相（例えば、マイクロプレート、プラ
スチック粒子、磁性体粒子等）を調製する。
当該固相に抗原を含む試料液を加え、抗原を固相上の
抗体で捕捉した後、洗浄してB/F分離を行う。次いで、
固相に、固体が結合した蓄光体微粒子を添加し、固相上
の抗原に結合させて蓄光体微粒子を固相上に固定し、洗
浄してB/F分離を行う。かくして固相上に固定された蓄
光体微粒子に励起光を照射した後、発光量を測定し、予
め作成された検量線と対比することにより、試料液中の
抗原量を測定することができる。
抗体で捕捉した後、洗浄してB/F分離を行う。次いで、
固相に、固体が結合した蓄光体微粒子を添加し、固相上
の抗原に結合させて蓄光体微粒子を固相上に固定し、洗
浄してB/F分離を行う。かくして固相上に固定された蓄
光体微粒子に励起光を照射した後、発光量を測定し、予
め作成された検量線と対比することにより、試料液中の
抗原量を測定することができる。
蓄光体の発光量の測定は、蓄光体を紫外線、電子線、
Ｘ線等で励起した後の発光量を測定することにより行わ
れる。蓄光体の発光は励起後、一定時間減衰しながら続
くので励起後、一定時の発光量を測定する方法でも、一
定時間の発光量を積算する方法でも、どちらでも測定で
きる。測定機器は特別な物を必要とせずに市販の発光計
や、隣光測定装置で行うことができる。
Ｘ線等で励起した後の発光量を測定することにより行わ
れる。蓄光体の発光は励起後、一定時間減衰しながら続
くので励起後、一定時の発光量を測定する方法でも、一
定時間の発光量を積算する方法でも、どちらでも測定で
きる。測定機器は特別な物を必要とせずに市販の発光計
や、隣光測定装置で行うことができる。
なお、本発明の測定法は上記の例に限定されるもので
はなく、適宜変更して行うことができる。また、蓄光体
微粒子に抗原、抗体等に代えて、アビジンとビオチン、
糖−コンカナバリンＡ等のような結合性を有する物質対
の一方を結合させたものを用いても測定を行うことがで
きる。この測定法は、抗原、、抗体等に結合性を有する
物質対の一方の物質を結合させた物質と、蓄光対微粒子
に当該他の物質を結合させた物質を用い、抗原抗体反応
生成物に結合性を有する物質等を介して蓄光対微粒子を
結合させて標識する方法である。かかる測定法を、前記
の固相を用いたサンドイッチ法で抗原を測定する例に基
づいて具体的に説明すると、結合性を有する物質対の一
方の物質を蓄光対微粒子に結合させた物質（例えば、ア
ビジンが結合した蓄光体微粒子）及び抗体に当該物質対
の他方の物質を結合させた物質（例えば、ビオチンが結
合した抗体）を予め調製しておく。そして、前記の例に
おいて、固相上に抗原を捕捉してB/F分離する工程まで
は同様に操作した後、上記ビオチンが結合した抗体を作
用させ、抗原抗体反応によりビオチンを固相上に結合さ
せ、洗浄することによりB/F分離を行う。次いで、固相
に、アビジンが結合した蓄光対微粒子を作用させて、ア
ビジン−ビオチン結合を介して固相上に蓄光対微粒子を
固定し、洗浄によりB/F分離を行う。以下、前記の例と
同様に、固相上に固定された蓄光対に励起光を照射して
発光量を測定することにより、抗原量を測定することが
できる。この測定法は、上記の例に限られず、競合法等
によっても行うことができる。なお、蓄光対粒子と結合
性を有する物質対の一方の物質との結合は、前記の吸着
法、化学結合法等により行うことができ、また抗原、抗
体等と結合性を有する物質対の他方の物質との結合は慣
用の化学結合法により行うことができる。特にアビジン
又はビオチンの導入は、所謂アビジン化剤やビオチン化
剤を用いることにより容易に行うことができる。
はなく、適宜変更して行うことができる。また、蓄光体
微粒子に抗原、抗体等に代えて、アビジンとビオチン、
糖−コンカナバリンＡ等のような結合性を有する物質対
の一方を結合させたものを用いても測定を行うことがで
きる。この測定法は、抗原、、抗体等に結合性を有する
物質対の一方の物質を結合させた物質と、蓄光対微粒子
に当該他の物質を結合させた物質を用い、抗原抗体反応
生成物に結合性を有する物質等を介して蓄光対微粒子を
結合させて標識する方法である。かかる測定法を、前記
の固相を用いたサンドイッチ法で抗原を測定する例に基
づいて具体的に説明すると、結合性を有する物質対の一
方の物質を蓄光対微粒子に結合させた物質（例えば、ア
ビジンが結合した蓄光体微粒子）及び抗体に当該物質対
の他方の物質を結合させた物質（例えば、ビオチンが結
合した抗体）を予め調製しておく。そして、前記の例に
おいて、固相上に抗原を捕捉してB/F分離する工程まで
は同様に操作した後、上記ビオチンが結合した抗体を作
用させ、抗原抗体反応によりビオチンを固相上に結合さ
せ、洗浄することによりB/F分離を行う。次いで、固相
に、アビジンが結合した蓄光対微粒子を作用させて、ア
ビジン−ビオチン結合を介して固相上に蓄光対微粒子を
固定し、洗浄によりB/F分離を行う。以下、前記の例と
同様に、固相上に固定された蓄光対に励起光を照射して
発光量を測定することにより、抗原量を測定することが
できる。この測定法は、上記の例に限られず、競合法等
によっても行うことができる。なお、蓄光対粒子と結合
性を有する物質対の一方の物質との結合は、前記の吸着
法、化学結合法等により行うことができ、また抗原、抗
体等と結合性を有する物質対の他方の物質との結合は慣
用の化学結合法により行うことができる。特にアビジン
又はビオチンの導入は、所謂アビジン化剤やビオチン化
剤を用いることにより容易に行うことができる。
本発明の測定法は種々の微量成分の測定（定量）に用
いることができ、測定対象物質としては、例えば、Ｃ反
応性蛋白（以下、CRPという）、α−フェトプロテイ
ン、ガン胎児性抗原、ハプトグロビン、免疫グロブリン
類等の結成蛋白質、インスリン、甲状腺刺激ホルモン、
成長ホルモン等のホルモン、HBs抗原、HBe抗原等のウイ
ルス抗原、カナマイシン、テオフィリン等の薬剤などが
挙げられ、これらの物質を含む検体としては、例えば、
血清、血漿、尿、髄液、リンパ液等が挙げられる。
いることができ、測定対象物質としては、例えば、Ｃ反
応性蛋白（以下、CRPという）、α−フェトプロテイ
ン、ガン胎児性抗原、ハプトグロビン、免疫グロブリン
類等の結成蛋白質、インスリン、甲状腺刺激ホルモン、
成長ホルモン等のホルモン、HBs抗原、HBe抗原等のウイ
ルス抗原、カナマイシン、テオフィリン等の薬剤などが
挙げられ、これらの物質を含む検体としては、例えば、
血清、血漿、尿、髄液、リンパ液等が挙げられる。
＜発明の作用及び効果＞ 本発明の測定法では、標識物質として蓄光体微粒子が
用いられており、蓄光体は夜光塗料やブラウン管に用い
られるように化学的に安定であるので、酵素や化学発光
物質のような従来の標識物質に比べ標識操作を容易に行
うことができる。また、蓄光体は発光させるために特別
に試薬の添加を必要とせずに紫外線ランプ等で励起する
だけでよく、発光の測定も短時間で行える。蓄光体の発
光は他の螢光に比べ励起後長時間続くため、混在する螢
光物質の螢光が消光した後に測光することで螢光物質の
影響を避けることができるし、励起光の迷光や散乱光の
影響を受けることもない。蓄光体は化学発光物質のよう
に発光反応によって消費されることがないので、繰り返
し励起、発光測定を行うことができ、測定精度の向上が
図れる。
用いられており、蓄光体は夜光塗料やブラウン管に用い
られるように化学的に安定であるので、酵素や化学発光
物質のような従来の標識物質に比べ標識操作を容易に行
うことができる。また、蓄光体は発光させるために特別
に試薬の添加を必要とせずに紫外線ランプ等で励起する
だけでよく、発光の測定も短時間で行える。蓄光体の発
光は他の螢光に比べ励起後長時間続くため、混在する螢
光物質の螢光が消光した後に測光することで螢光物質の
影響を避けることができるし、励起光の迷光や散乱光の
影響を受けることもない。蓄光体は化学発光物質のよう
に発光反応によって消費されることがないので、繰り返
し励起、発光測定を行うことができ、測定精度の向上が
図れる。
このように本発明の測定法は、調製や取扱いも簡便
で、容易に自動化もでき、臨床検査等において極めて有
用である。
で、容易に自動化もでき、臨床検査等において極めて有
用である。
＜実 施 例＞ 以下、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明する
が、本発明はこれらの実施例に限定されるものではな
い。
が、本発明はこれらの実施例に限定されるものではな
い。
実施例 （１）蓄光体微粒子で標識された抗体の調製 夜光塗料に用いられている硫化亜鉛蓄光体（ZnS:Cu）
微粒子（粒子径５〜10μｍ、20mg）と３−アミノプロピ
ルトリエトキシシラン（2m）を混合し室温で１時間反
応させた。精製水で洗浄後、2.5％グルタルアルデヒド
（4m）を加え室温で１時間反応後精製水で洗浄した。
そこにヤギ抗ヒトCRP抗体IgG（200μｇ）を加え２〜８
℃で一晩反応させ、微粒子を分離し、0.1Mリン酸緩衝液
（pH7.0）で洗浄して蓄光体微粒子と抗体との結合体を
調製した。次いで、上記緩衝液に１％（w/v）になるよ
うに懸濁し、標識体として下記の測定に使用した。
微粒子（粒子径５〜10μｍ、20mg）と３−アミノプロピ
ルトリエトキシシラン（2m）を混合し室温で１時間反
応させた。精製水で洗浄後、2.5％グルタルアルデヒド
（4m）を加え室温で１時間反応後精製水で洗浄した。
そこにヤギ抗ヒトCRP抗体IgG（200μｇ）を加え２〜８
℃で一晩反応させ、微粒子を分離し、0.1Mリン酸緩衝液
（pH7.0）で洗浄して蓄光体微粒子と抗体との結合体を
調製した。次いで、上記緩衝液に１％（w/v）になるよ
うに懸濁し、標識体として下記の測定に使用した。
（２）抗体が結合した磁性微粒子固相の調製 酸化鉄微粒子（粒子径１〜５μｍ）を上記（１）に記
載した方法と同じ方法で処理して抗CRP抗体が結合した
磁性微粒子を調製し、固相として下記の測定に使用し
た。
載した方法と同じ方法で処理して抗CRP抗体が結合した
磁性微粒子を調製し、固相として下記の測定に使用し
た。
（３）CRPの測定及び結果 上記（２）で調製された磁性微粒子固相（25μ）と
上記（１）で調製された標識体（25μ）を混合し、測
定量のCRPを含む試料（20μ）を添加して室温で５分
間反応させた後、磁石でB/F分離を行、、固相を0.1Mリ
ン酸緩衝液で３回洗浄した。この反応物を螢光灯で30秒
間励起後１秒〜６秒まで５秒間の発光量を発光測定器で
積算測定した。測定結果を下記第１表に示す。
上記（１）で調製された標識体（25μ）を混合し、測
定量のCRPを含む試料（20μ）を添加して室温で５分
間反応させた後、磁石でB/F分離を行、、固相を0.1Mリ
ン酸緩衝液で３回洗浄した。この反応物を螢光灯で30秒
間励起後１秒〜６秒まで５秒間の発光量を発光測定器で
積算測定した。測定結果を下記第１表に示す。
第１表に示されるように、CRP濃度に比例したシグナ
ルが得られており、本発明の方法によりCRPの測定が可
能であることが判明した。
ルが得られており、本発明の方法によりCRPの測定が可
能であることが判明した。
フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭59−141066（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−153568（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G01N 33/532 G01N 33/543
Claims (1)
- 【請求項１】標識物質を用いる免疫化学的測定法におい
て、標識物質として蓄光体微粒子を用いることを特徴と
する試料中の物質の測定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27173890A JP2997747B2 (ja) | 1990-10-09 | 1990-10-09 | 試料中の物質の測定法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27173890A JP2997747B2 (ja) | 1990-10-09 | 1990-10-09 | 試料中の物質の測定法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04147061A JPH04147061A (ja) | 1992-05-20 |
| JP2997747B2 true JP2997747B2 (ja) | 2000-01-11 |
Family
ID=17504146
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP27173890A Expired - Lifetime JP2997747B2 (ja) | 1990-10-09 | 1990-10-09 | 試料中の物質の測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2997747B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007055302A1 (ja) * | 2005-11-10 | 2007-05-18 | National University Corporation University Of Toyama | 生体物質と生体物質結合性物質との結合性評価方法 |
| JP4763005B2 (ja) * | 2008-03-05 | 2011-08-31 | 大日本印刷株式会社 | 積層体 |
-
1990
- 1990-10-09 JP JP27173890A patent/JP2997747B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04147061A (ja) | 1992-05-20 |
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