JP2936519B2 - 粉末αアミラーゼインヒビターの製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 αアミラーゼインヒビター（以下α−AIとする）の使
用は、腸管からのでん粉質の吸収阻害に非常に有用であ
り、その利用は抗肥満や糖尿病患者の治療食等多岐に亘
ると考えられ、この発明はそのα−AIの簡易な製造法に
関する。

〔従来の技術〕

麦類種子中のα−AIについては従来、詳細に研究され
ており、その調整法も幾つか報告されている。これら報
告されているα−AIの調整法は、いずれも抽出、塩析、
イオン交換及びゲル過の各方法を組み合わせたもので
ある。

〔発明が解決しようとする課題〕

これらの方法によるα−AIの製造を工業的規模で試み
た場合、製造コストは非常に高く、尚且つその回収率が
非常に低いことから、上述の目的でα−AIを一般的に用
いるのは非現実的である。そこで発明者らはα−AIの簡
易製造法の開発を試み、エタノールによる抽出と限外
過法を組み合わせた簡単な工程で、α−AIの回収率が高
く、α−アミラーゼやリパーゼなどの酸素類を全く含ま
ない簡易製造法を開発した。

〔課題を解決するための手段〕

すなわちこの発明は、60−70％エタノールにより、α
−AIを麦類粉末化物から抽出する方法及び、入口温度と
出口温度が各々90〜110℃と40〜50℃の条件による噴霧
乾燥方法を用いるα−AIの粉末化法を提案するものであ
る。

〔実施例〕

次にαーAIの簡易製造法を詳細に説明する。

（１）α−AIの抽出条件の検討 脱脂小麦粉からα−AIを０−90％エタノール溶液で室
温で抽出した。その結果を第１図し示す。

エタノール濃度25％では、この第１図に示したよう
に、リパーゼやプロテアーゼは抽出されないが、この濃
度ではα−AIばかりではなく、ほとんどのアミラーゼが
抽出される。エタノール濃度を50％に上昇させると、α
−AIの抽出率に変化は認められないものの、アミラーゼ
も約40％抽出された。エタノール濃度を60％に上昇させ
るとα−AIの抽出率は約92％と若干低下するものの、ア
ミラーゼの抽出率は約３％と、α−AIアミラーゼ比は顕
著に増加した。さらにエタノールの濃度を上昇させる
と、70％では約80％のα−AIが抽出され、アミラーゼは
検出不可能になつた。また80％以上のエタノール濃度で
のα−AIの抽出率は急激に低下した。これらのことか
ら、α−AIの抽出液はアミラーゼを若干含むものの、α
−AIを高率に回収できる60−70％エタノール溶液に決定
した。

（２）α−AIの粉末化条件の検討 凍結乾燥法を用いれば、α−AI活性に影響を与えず
に、α−AIを粉末化できるが、非常なコストの上昇を招
く。α−AIは熱に安定であることから、大量にしかも短
時間で処理できる噴霧乾燥法の使用を試みた。

60−70％エタノールによるα−AI抽出液を分画分子量
15Kdの限外過膜を用いて、エタノールを除去した後、
噴霧乾燥機（YAMATO社製DL−41型）を用いて粉末化し
た。結果を第１表に示す。

第１表に示したように、入口温度90〜100℃まではα
−AIの残存活性率に変化を認め得なかつた。しかし、入
口温度95℃までは時間当りの処理量を低下させるか、又
は減圧度を高める必要があり、処理能力の低下又は回収
率の低下を招く。したがつて、α−AI活性に殆ど影響を
与えず、時間当り１を処理でき、比較的低減圧を用い
れる入口温度100〜105℃、出口温度45〜47℃、減圧度30
〜40mmHgの条件を採用した。

（３）α−AIの純度 この発明の方法を用いて調整したα−AIの純度をゲル
過法により検討した。ゲル過カラムはShodex G 520
（HPLC用）を用い、溶出溶液及び流速はそれぞれ0.1Mト
リス−塩酸緩衝液（pH7.2）と1ml/minである。検出は21
0mmで行なった。なお図においてａはO'Connnorの方法に
準じて調整し、ｂはこの発明の方法によって調整した。
結果を第２図に示す。この第２図に示したように、α−
AIは18minの位置に溶出される。本物質のピーク高及び
面積から算出した純度は約60％であつた。

また本画分中にアミラーゼ、リパーゼ及びプロテアー
ゼ等、食品の分解、吸収を助長する酵素類は全く検出さ
れなかつた。

（４）α−AIの比活性及び回収率 この発明の方法を用いて調整したα−AIとオコナー
（O'Connor）の方法に準じて調整したそれの比活性と回
収率を比較検討した。結果を第２表に示す。

α−AI−Ｚ及び３の比活性はα−AI−１の約50％であ
つたが、これはこれらのα−AIの純度によるものであ
り、α−AI−２及び３の純度を上昇させればα−AI−１
と同等の比活性になる。またα−AI−２と３に比活性の
差異は認められず、この点からも噴霧乾燥法によるα−
AIの加熱変性は認められなかつた。

α−AIの回収率はα−AI−１が約50％であつたのに対
し、α−AI−２と３はそれぞれ約88％と85％であつた。
これは本製造工程が非常に簡素であるため、製造過程で
のα−AIの損失が極めて低位に納められたことを起因す
ると考えられる。

以上の項目の検討により、次のようなα−AIの簡易製
造法を開発した。すなわち、市販の小麦粉（薄力粉から
強力粉までいずれの物を用いてもよい。）をエタノール
を用いて脱脂した後、最終エタノール濃度が60−70％に
なるように加水する。ホモミキサー等で室温で30分間撹
拌し、遠心分離によりα−AI抽出液を得る。この抽出操
作を２回繰り返し、それぞれの抽出液を集め、減圧等に
よりエタノールを除去する。生じたグルテン等の沈殿物
を過又は遠心分離により除去し、分画分子量10Kd以下
の限外過膜を用いて過する。得た非過液を入口温
度が90〜110℃、出口温度が40〜50℃、減圧度が30〜40m
mHgの条件下で噴霧乾燥し、粉末化α−AIを得る。

上記例に用いた小麦粉及びその他の溶媒、器具類はこ
の発明を説明するためだけのものであり、原料及びその
他の溶媒、器具類を特に限定するものではない。

〔発明の効果〕

上記したようにしてこの発明によれば、エタノールに
よる抽出と限外過法を組み合わせた簡易な工程で、α
−AIの回収率が高く、α−アミラーゼやリパーゼなどの
酵素類を含まないαアミラーゼインヒビターが得られる
ものである。

【図面の簡単な説明】

第１図はエタノールによるα−AI抽出条件を示す図で、
第２図はα−AIの純度を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭46−1833（ＪＰ，Ａ) 特開 平２−157296（ＪＰ，Ａ) Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．, Ｖｏｌ．46（11）ｐ2873−2875（1982) Ｃｅｒｅａｌ Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ. 55（２）ｐ244−254（1978) Ｊ．Ｆｏｏｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ．，Ｖ ｏｌ．２（２）ｐ103−120（1978) (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C07K 14/415,1/14,1/34 C12N ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】小麦粉をエタノールを用いて脱脂した後
   に、最終エタノール濃度が60〜70％になるように加水
   し、室温で撹拌し、遠心分離によりαアミラーゼインヒ
   ビターを得、この注出操作を繰返し、それらの抽出液を
   集め、減圧によりエタノールを除去し、沈殿物を除い
   て、濾過により得た非濾過液を入口温度90〜110℃、出
   口温度40〜50℃、減圧度が30〜40mmHgの条件下で、噴霧
   乾燥することを特徴とする粉末αアミラーゼインヒビタ
   ーの製造方法。