JPS61171431A - アミラ−ゼ阻害物質およびその製造法 - Google Patents
アミラ−ゼ阻害物質およびその製造法Info
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- JPS61171431A JPS61171431A JP60011500A JP1150085A JPS61171431A JP S61171431 A JPS61171431 A JP S61171431A JP 60011500 A JP60011500 A JP 60011500A JP 1150085 A JP1150085 A JP 1150085A JP S61171431 A JPS61171431 A JP S61171431A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は新規なアミラーゼ阻害物及び製造法に関する。
（従来の技術）
近年、先進諸国において、栄養過多が原因となる種々疾
患が増加している。なかでも消化吸収性の良い糖類、特
にテ゛ン粉の過料摂取による血糖の上昇とそれに関連し
た糖尿病、肥満症、動脈硬化症等の代謝性疾患が急増し
ている。しかしながら、現在のところこれら疾患に対す
る満足すべき予防並びに治療法が確立されていない。
患が増加している。なかでも消化吸収性の良い糖類、特
にテ゛ン粉の過料摂取による血糖の上昇とそれに関連し
た糖尿病、肥満症、動脈硬化症等の代謝性疾患が急増し
ている。しかしながら、現在のところこれら疾患に対す
る満足すべき予防並びに治療法が確立されていない。
この結果、糖尿病、肥満症、動脈硬化症等の代謝性疾患
を予防又は治療できるとの考えに基づき、近年いくつか
のアミラーゼ阻害物質が微生物培養液あるいは豆類等の
食品よシ単１１に、精製され、その有効性が検討され次
。
を予防又は治療できるとの考えに基づき、近年いくつか
のアミラーゼ阻害物質が微生物培養液あるいは豆類等の
食品よシ単１１に、精製され、その有効性が検討され次
。
（発明が解決しようとする問題点）
しかし、これまで単離、精製されたアミラーゼ阻害物質
は、安全性あるいは有効性の点で問題点を有し、そのほ
とんどが実用化されるには至っていない。ま几、一部実
用化されるに至つ次阻害物質についても人での有効性が
疑問視されている（例えば、 Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇ
ｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃ−ｉｎｅ
３０７．１４１３−１４１６（１９８２））。例えば
現在、実用に供されているインゲン豆より抽出、精製さ
れたアミラーゼ阻害物質、ファセオラミン（Ｊ、Ｂｉｏ
ｌ、Ｃｈｅｍ＝ ２５０．（２０） ８０３０−８０
３７（１９７５））はその作用至適ｐＨが５．５、作用
有効ｐＨ範囲がｐＨ４，０〜６．５であり１人での作用
の有効性について疑問が持たれている。すなわち人アミ
ラーゼの生理的作用至適ｐＨは７．２であ九この生理条
件下ではファセオラミンは阻害作用を強く発現しえない
。
は、安全性あるいは有効性の点で問題点を有し、そのほ
とんどが実用化されるには至っていない。ま几、一部実
用化されるに至つ次阻害物質についても人での有効性が
疑問視されている（例えば、 Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇ
ｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃ−ｉｎｅ
３０７．１４１３−１４１６（１９８２））。例えば
現在、実用に供されているインゲン豆より抽出、精製さ
れたアミラーゼ阻害物質、ファセオラミン（Ｊ、Ｂｉｏ
ｌ、Ｃｈｅｍ＝ ２５０．（２０） ８０３０−８０
３７（１９７５））はその作用至適ｐＨが５．５、作用
有効ｐＨ範囲がｐＨ４，０〜６．５であり１人での作用
の有効性について疑問が持たれている。すなわち人アミ
ラーゼの生理的作用至適ｐＨは７．２であ九この生理条
件下ではファセオラミンは阻害作用を強く発現しえない
。
（問題点を解決する九めの手段）
本発明者は有効性、安全性にすぐれたアミラーゼ阻害物
質を鋭意種々食品蛋白中に検索した。この結果、グルテ
ン中に目的とする性質を有するアミラーゼ阻害物質を見
い出し、その製造法を確立する事により１本発明を完成
するに至った。すなわち１本発明は下記の理化学的！ｔ
ｌを有するアミラーゼ阻害物質及びグルテンよジアルコ
ール抽出し次回溶性成分を必要によりゲルロ過した後、
陰イオン交換体にアミラーゼ阻害物質を吸着させ、次い
で遊離する事を特徴とするアミラーゼ阻害物質の製造法
を提供するものである。
質を鋭意種々食品蛋白中に検索した。この結果、グルテ
ン中に目的とする性質を有するアミラーゼ阻害物質を見
い出し、その製造法を確立する事により１本発明を完成
するに至った。すなわち１本発明は下記の理化学的！ｔ
ｌを有するアミラーゼ阻害物質及びグルテンよジアルコ
ール抽出し次回溶性成分を必要によりゲルロ過した後、
陰イオン交換体にアミラーゼ阻害物質を吸着させ、次い
で遊離する事を特徴とするアミラーゼ阻害物質の製造法
を提供するものである。
以下１本発明のアミラーゼ阻害物質をＴＹＢ −Ａ Ｉ
と称する。
と称する。
ＴＹＢ−ＡＩの理化学的性状及び生理学的性質を次に示
す。
す。
（１）外観：白色粉末
（２） 分子針は４９０００±３０００ （ゲルロ過
法）本物質の分子量はセファデックスＧ−１００（ファ
ルマシア社製）のカラムによるゲルロ過法（Ｔｈｅ Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ９Ｌ ２２２
−２３３＋１９６４）で約４．９ Ｘ １０４の値を得
次。
法）本物質の分子量はセファデックスＧ−１００（ファ
ルマシア社製）のカラムによるゲルロ過法（Ｔｈｅ Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ９Ｌ ２２２
−２３３＋１９６４）で約４．９ Ｘ １０４の値を得
次。
（３）蛋白質の性状を有する。
（４） アミノ酸組成
本物質を６Ｎ−塩酸１１０℃で一定時間（２４〜７２時
間）加水分解後、−アミノ酸分析機により構成アミノ酸
を定量した。以下に阻害物質１モル（分子量４．９ Ｘ
Ｌ０４ ）当りの残基数を示す。
間）加水分解後、−アミノ酸分析機により構成アミノ酸
を定量した。以下に阻害物質１モル（分子量４．９ Ｘ
Ｌ０４ ）当りの残基数を示す。
±２．０．スレオニン２４．６±０．８．セリン２３．
４±０．７．グルタミン酸４８．５±０．７．プロリン
５２．９±４．５．グリシン３８．６±０．１．アラニ
ン２２．９±０．３．システィン７．２±０．２．バリ
ン３１．３±０．３．メチオニン１０．７±０．２．イ
ンロイシン１５．７±０．２ 、ロイシフ３９．１±０
．３ 、チロシン９．７±ｏ、ｉ 、フェニルアラニン
９．５±０．５ （５） 元素分析値 Ｃ：約３７．０％、Ｈ：約５．３％、Ｎ：約１１．５チ （６）融点；２１４℃以上で分解 （７） 紫外線吸収スペクトル 第１図に示す。２８０ｊ０１付近に極大吸収を有する。
４±０．７．グルタミン酸４８．５±０．７．プロリン
５２．９±４．５．グリシン３８．６±０．１．アラニ
ン２２．９±０．３．システィン７．２±０．２．バリ
ン３１．３±０．３．メチオニン１０．７±０．２．イ
ンロイシン１５．７±０．２ 、ロイシフ３９．１±０
．３ 、チロシン９．７±ｏ、ｉ 、フェニルアラニン
９．５±０．５ （５） 元素分析値 Ｃ：約３７．０％、Ｈ：約５．３％、Ｎ：約１１．５チ （６）融点；２１４℃以上で分解 （７） 紫外線吸収スペクトル 第１図に示す。２８０ｊ０１付近に極大吸収を有する。
（８） ＩＨ−ＮＭＲスペクトル
第２図に３００ＭＨｚ プロトンＮＭＲスペクトｐを
示す。
示す。
（９）ＩＲスペクトル
第３図にＫＢｒ法によるスペクトｐを示す。
αＱ 作用至適ｐＨ
第４図に本阻害物質の活性のｐＨ依存注を示す。本阻害
物質の作用至適ｐＨは６゜Ｏ〜７．５である。
物質の作用至適ｐＨは６゜Ｏ〜７．５である。
（１リ 熱安定性
ｐＨ７，０において６０℃、６０分間処理するも活性の
低下は認められない。ｐＨ７，０において８７℃、１０
分間の処理によυ約１０％活性ラーゼの活性を阻害する
。
低下は認められない。ｐＨ７，０において８７℃、１０
分間の処理によυ約１０％活性ラーゼの活性を阻害する
。
（１１ラット、マウスの経口による急性毒性（ＬＤｓｏ
）は５０００・’ｆ／に９以上である。
）は５０００・’ｆ／に９以上である。
ＴＹＢ−ＡＩの生理活性はラット等を用いた種々の動物
実験によジ調らべられ、その有効性が確認された。例え
ば体重約’１９−Ｏｆのウィスター系雄性ラットを２１
時間絶食させ、絶食後小麦デン粉２．５ｆ／梅を経口投
与した。これと同時にＴＹＢ−ＡＩ３８１１Ｆを経口投
与し、３０分後、ラット心臓より採血し、常法により血
糖値を測定し友。この結果、ＴＹＢ−ＡＩを投与し几勧
物はデンプンのみを与えた対照群にくらべ、投与後３０
分で血糖値の上昇が６５％抑制され九〇 ＴＹＢ−ＡＩについて種々の動物を用いた毒性試験が実
施され、その高い安全性が確認された。
実験によジ調らべられ、その有効性が確認された。例え
ば体重約’１９−Ｏｆのウィスター系雄性ラットを２１
時間絶食させ、絶食後小麦デン粉２．５ｆ／梅を経口投
与した。これと同時にＴＹＢ−ＡＩ３８１１Ｆを経口投
与し、３０分後、ラット心臓より採血し、常法により血
糖値を測定し友。この結果、ＴＹＢ−ＡＩを投与し几勧
物はデンプンのみを与えた対照群にくらべ、投与後３０
分で血糖値の上昇が６５％抑制され九〇 ＴＹＢ−ＡＩについて種々の動物を用いた毒性試験が実
施され、その高い安全性が確認された。
例えば１体重約１９０９のウィスター系雄性ラットに１
日２０００ダ／ｋｆのＴＹＢ−ＡＩを２０日間連続経口
投与し、各臓器の組織学的及び組織化学的検索を行った
。この結果、全ての臓器においてなんらの異常も認めら
れなかった。またｄｄＹ系雄性マウスに５０００ＩＩＩ
ｉ／ｋｆのＴＹＢ−Ａ Ｉを経口投与し、その後７日間
に亘って症状観察と死亡動物の有無を調べた。この結果
、死亡例はもとより。
日２０００ダ／ｋｆのＴＹＢ−ＡＩを２０日間連続経口
投与し、各臓器の組織学的及び組織化学的検索を行った
。この結果、全ての臓器においてなんらの異常も認めら
れなかった。またｄｄＹ系雄性マウスに５０００ＩＩＩ
ｉ／ｋｆのＴＹＢ−Ａ Ｉを経口投与し、その後７日間
に亘って症状観察と死亡動物の有無を調べた。この結果
、死亡例はもとより。
何らの症状変化も認められなかった。
本発明におけるＴＹＢ−Ａ Ｉの製造法はグルテンよジ
アルコール抽出した可溶性成分を必要によりゲルロ過し
た後、陰イオン交換体にアミラーゼ阻害物を吸着させ、
次いで遊離する方法である。
アルコール抽出した可溶性成分を必要によりゲルロ過し
た後、陰イオン交換体にアミラーゼ阻害物を吸着させ、
次いで遊離する方法である。
アルコール抽出に使用するアルコールとしては例えば１
０〜９０％のエタノ−／Ｌ／、好ましくは７０チのエタ
ノールを用いる。ゲルロ過に使用する材料としては１例
えばセファデックスＧ−１００カラム、 ）ヨバー１
ｖＨＷ５０． トａバー／Ｌ’ＨＷ５５ 。
０〜９０％のエタノ−／Ｌ／、好ましくは７０チのエタ
ノールを用いる。ゲルロ過に使用する材料としては１例
えばセファデックスＧ−１００カラム、 ）ヨバー１
ｖＨＷ５０． トａバー／Ｌ’ＨＷ５５ 。
カラムなどを用いる。陣イオン交換体としては。
例えばワットマンＤＥＡＥ５２カラム、ＤＥＡＥトヨバ
ール６５０８カラム、アンバーライトＩＲＰ−６４カラ
ム等のカラムを用いる。
ール６５０８カラム、アンバーライトＩＲＰ−６４カラ
ム等のカラムを用いる。
本発明に用いるグルテンは小麦グルテンが好ましい。
本発明においてアルコール抽出、ゲルロ過および陰イオ
ン交換体へのアミラーゼ阻害物質の吸着プレンフィルタ
ー等を用いる分子量分画法を付加してもよい。
ン交換体へのアミラーゼ阻害物質の吸着プレンフィルタ
ー等を用いる分子量分画法を付加してもよい。
ＴＹＢ−ＡＩのグルテンよ、りの抽出１分離精製は、具
体的には例えば次の方法によって行なわれる。すなわち
５１の７０・チアルコール溶液を用いて３ ｋｒのグル
テンより室温下、４時間抽出し、抽出したアルコール溶
液を透析チューブに入れ０．１Ｍ食塩溶液を外液として
透析し、透析後、析出し次不溶物質を遠心分離により除
去し１次いで必要によシセファデツクスｃ−ｉｏｏカラ
ム等のゲルロ過に付した後、陰イオンクロマトに付すこ
とによりＴＹＢ−ＡＩを得る事ができる。
体的には例えば次の方法によって行なわれる。すなわち
５１の７０・チアルコール溶液を用いて３ ｋｒのグル
テンより室温下、４時間抽出し、抽出したアルコール溶
液を透析チューブに入れ０．１Ｍ食塩溶液を外液として
透析し、透析後、析出し次不溶物質を遠心分離により除
去し１次いで必要によシセファデツクスｃ−ｉｏｏカラ
ム等のゲルロ過に付した後、陰イオンクロマトに付すこ
とによりＴＹＢ−ＡＩを得る事ができる。
（実施例）
次に実施例ならびに試験例をあげ本発明を具体的に説明
する。
する。
実施例１
グルテン３．０神を７０％エタノ−ＩＶＢ、０１と混合
し、室温にて約４時間攪拌した。攪拌後、遠心分離によ
り、上滑（エタノール抽出液）を収集し、得られた上清
を透析チューブに入れ、０．１Ｍ食塩溶液を外液として
透析し次。じゅうぶんに透析後、析出した不溶物を遠心
分離により除去した。次に得られた溶液を分子量カッ）
１００００のメンプレ５０カラムを用いたゲルロ過に付
した。第５図にゲルロ過溶出パターンを示シタ。
し、室温にて約４時間攪拌した。攪拌後、遠心分離によ
り、上滑（エタノール抽出液）を収集し、得られた上清
を透析チューブに入れ、０．１Ｍ食塩溶液を外液として
透析し次。じゅうぶんに透析後、析出した不溶物を遠心
分離により除去した。次に得られた溶液を分子量カッ）
１００００のメンプレ５０カラムを用いたゲルロ過に付
した。第５図にゲルロ過溶出パターンを示シタ。
溶出画分よりアミラーゼ阻害活性を示す両分ＤＥＡＥ−
）コバール６５０８カラムを用いた隘イオン交換クロマ
トに付した。
）コバール６５０８カラムを用いた隘イオン交換クロマ
トに付した。
ナオ、アミラーゼ阻害活性は、ブタのすい型アミラーゼ
（ＰＰＡ）のデン粉に対する消化力を見るアミラーゼ活
性測定法を用い常法により検定した（例えば澱粉科学２
６，１３４−１４４，１９７９）。
（ＰＰＡ）のデン粉に対する消化力を見るアミラーゼ活
性測定法を用い常法により検定した（例えば澱粉科学２
６，１３４−１４４，１９７９）。
隘イオン交換カラムからの溶出は０．０から０．４Ｍの
塩化ナトリウムを含む１０ｍＭ５ん酸緩衝液。
塩化ナトリウムを含む１０ｍＭ５ん酸緩衝液。
ｐｉ（８，０による濃度勾配溶出法により行つ友。得ら
れた溶出パターンを第６図に示し九〇阻害活性画分（第
６図中画分Ｉ、０．０３５Ｍ塩化ナトリウムで溶出）を
集め、透析チューブに入れ。
れた溶出パターンを第６図に示し九〇阻害活性画分（第
６図中画分Ｉ、０．０３５Ｍ塩化ナトリウムで溶出）を
集め、透析チューブに入れ。
蒸留水を外液として透析し念。透析後、凍結乾燥社製ト
ーヨーソーダ３０００ＳＷカラムを用いた高速液体クロ
マトグラフィーにより行なった。第７図に０．３Ｍの塩
化カリウムを含む０．１ Ｍのりん酸緩衡液を溶媒とし
て用いた同カラムによるＴＹＢ−ＡＩの亮速液体りロマ
トダラム溶出パターンを示した。
ーヨーソーダ３０００ＳＷカラムを用いた高速液体クロ
マトグラフィーにより行なった。第７図に０．３Ｍの塩
化カリウムを含む０．１ Ｍのりん酸緩衡液を溶媒とし
て用いた同カラムによるＴＹＢ−ＡＩの亮速液体りロマ
トダラム溶出パターンを示した。
この結果より、ＴＹＢ−ＡＩの分子量約４．６×１０４
を得た（第８図）。なお、第８図中、ＢＳＡ。
を得た（第８図）。なお、第８図中、ＢＳＡ。
ＯＡｔ ＴＮ＋ Ｌｙｓｏは各々牛血清アルグミン、オ
プアルブミン、トリプシノーゲン、リゾチームの分子址
マーカーを示す。
プアルブミン、トリプシノーゲン、リゾチームの分子址
マーカーを示す。
また同様に高速液体クロマトグラムに代えて。
セファデックスＧ−１００カラムを用い几ゲμロ過法（
Ｔｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊｏｕｒｎａｌ ９Ｌ ２２
２−２３３（１９６４））を実施し、ＴＹＢ−ＡＩの分
子量約４．９ Ｘ １０４の値を得た。
Ｔｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊｏｕｒｎａｌ ９Ｌ ２２
２−２３３（１９６４））を実施し、ＴＹＢ−ＡＩの分
子量約４．９ Ｘ １０４の値を得た。
試験例１
１０単位／Ｍｔのα−アミラーゼ溶液（グタスイ型アミ
ラーゼ）２５μノとＴＹＢ−ＡＩを含む試験液７５μＪ
を混合し％３０℃で１５分間インキュベートした。次い
で同混合液中に０．２５ Ｔｏ可溶性デン粉溶液０．４
−を添加し、３０℃で１５分間反応後、ＩＭ酢酸２．０
ｇｌを添加し友。添加後。
ラーゼ）２５μノとＴＹＢ−ＡＩを含む試験液７５μＪ
を混合し％３０℃で１５分間インキュベートした。次い
で同混合液中に０．２５ Ｔｏ可溶性デン粉溶液０．４
−を添加し、３０℃で１５分間反応後、ＩＭ酢酸２．０
ｇｌを添加し友。添加後。
０．０２ ｆｂ ａｔ素を含む０．２ ’１６ヨウ化ナ
トリトリ液九ｍ。
トリトリ液九ｍ。
２．５ｍｌを加え、認められる６８０Ｗの発色を吸光度
計にて測定した。なお反応は０．０２５ Ｍの塩化ナト
リウムを含む０．０４ Ｍグリセロリン酸ナトリウム緩
衝液、 ｐＨ６，９中で行なった。この結果０．２５単
位のアミラーゼ活性を５０チ阻害しつる阻害活性を１単
位と定翰すると、ＴＹＢ−ＡＩは１本条件下、約４００
単位／ｌｑ蛋白の活性を示した。
計にて測定した。なお反応は０．０２５ Ｍの塩化ナト
リウムを含む０．０４ Ｍグリセロリン酸ナトリウム緩
衝液、 ｐＨ６，９中で行なった。この結果０．２５単
位のアミラーゼ活性を５０チ阻害しつる阻害活性を１単
位と定翰すると、ＴＹＢ−ＡＩは１本条件下、約４００
単位／ｌｑ蛋白の活性を示した。
試験例２
ＴＹＢ −Ａ Ｉとファセオラミン（アミラーゼインヒ
ビター； Ｊ、Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２５匹８０３０−
８０３７゜１９７５）の人スイ型アミラーゼに対する阻
害活性比較試験を試験例１と同様な方法により実施した
。
ビター； Ｊ、Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２５匹８０３０−
８０３７゜１９７５）の人スイ型アミラーゼに対する阻
害活性比較試験を試験例１と同様な方法により実施した
。
０．１Ｍの塩化ナトリウムを含む、 ｐＨ７，０，２０
ｍＭ ｐん酸緩衝液中、３７℃において３２２単位／ｊ
の人スイ型アミラーゼの活性をＴＹＢ−Ａ Ｉは〜１０
−４ｍｙ／Ｍｌ、ファセオラミンは〜１０ｑ／ｇ／の濃
度で各々５０％阻害した。この試験の結果を第９図に示
した。
ｍＭ ｐん酸緩衝液中、３７℃において３２２単位／ｊ
の人スイ型アミラーゼの活性をＴＹＢ−Ａ Ｉは〜１０
−４ｍｙ／Ｍｌ、ファセオラミンは〜１０ｑ／ｇ／の濃
度で各々５０％阻害した。この試験の結果を第９図に示
した。
試験例３
２４時間絶食させたウィスター系雄性ラット（〜１９０
Ｆ）６匹を１群の検体として４群用意し、でん粉として
小麦でん粉を用い、でん粉投与後のラット血糖値上昇に
対するＴＹＢ−Ａ Ｉの抑制作用を検討した。
Ｆ）６匹を１群の検体として４群用意し、でん粉として
小麦でん粉を用い、でん粉投与後のラット血糖値上昇に
対するＴＹＢ−Ａ Ｉの抑制作用を検討した。
すなわち第１群にはベヒクル、第２群にはでん粉２．５
ｆ／ｋｆ、第３群にはでん粉２．５ｆ／ｋｇとＴＹＢ−
ＡＩ９．５■、第４群にはでん粉２．５ｆ／ｋｌとＴＹ
Ｂ−ＡＩ３８”９を各群構成のラットに経口投与した＠
その後３０分経過時に検体の心臓より採血し、検体血清
中のグルコース量（Ｆ／１００ｍ１ ）を日立製作折制
７０５型分析計にょ９測定した。測定結果をラットの平
均血中グルコース量（”Ｆ ／ １００ ｍｌ ）とし
て下表に示した。
ｆ／ｋｆ、第３群にはでん粉２．５ｆ／ｋｇとＴＹＢ−
ＡＩ９．５■、第４群にはでん粉２．５ｆ／ｋｌとＴＹ
Ｂ−ＡＩ３８”９を各群構成のラットに経口投与した＠
その後３０分経過時に検体の心臓より採血し、検体血清
中のグルコース量（Ｆ／１００ｍ１ ）を日立製作折制
７０５型分析計にょ９測定した。測定結果をラットの平
均血中グルコース量（”Ｆ ／ １００ ｍｌ ）とし
て下表に示した。
第 １ 表
試験例４
体重的１８ｆのｄｄＹ系雄性マウスを１群１０匹とし、
ＴＹＢ−ＡＩを生理食塩液に溶解して経口投与し、その
後７日間に亘って症状の観察と死亡動物の有無を調べた
。
ＴＹＢ−ＡＩを生理食塩液に溶解して経口投与し、その
後７日間に亘って症状の観察と死亡動物の有無を調べた
。
その結果、ＴＹＢ−ＡＩ ２０００ｄ９／ｋｆの経口投
与によっても死亡例はもとより何らの症状変化も認めら
れなかつ尺。
与によっても死亡例はもとより何らの症状変化も認めら
れなかつ尺。
（発明の効果）
以上の結果、ＴＹＢ−ＡＬは強力な血糖上昇抑制作用を
有し、また薬理作用発現用量から考えて極めて高い安全
性を有するアミラーゼ阻害勧賞である事が明らかになつ
九。このためＴＹＢ−ＡＩを例えば、肥満症、糖尿病、
動脈硬化症、脂質体謝障害等の代謝性疾患の予防並びに
治療に使用する事ができる。
有し、また薬理作用発現用量から考えて極めて高い安全
性を有するアミラーゼ阻害勧賞である事が明らかになつ
九。このためＴＹＢ−ＡＩを例えば、肥満症、糖尿病、
動脈硬化症、脂質体謝障害等の代謝性疾患の予防並びに
治療に使用する事ができる。
ＴＹＢ −Ａ Ｉは経口的に１例えば錠剤、カプセル剤
として投与する事ができる。投与量は年令。
として投与する事ができる。投与量は年令。
症状１体重等によって異なるが通常成人に対し１日約５
〜５００キを１〜４回投与される。しかし必要に応じそ
れ以上の量又はそれ以上の回数投与する事ができる。
〜５００キを１〜４回投与される。しかし必要に応じそ
れ以上の量又はそれ以上の回数投与する事ができる。
第１図はＴＹＢ−ＡＩの紫外線吸収スペクトルを示す。
第２図はＴＹＢ−Ａ ＩのＩＨ−ＮＭＲスペクトル（重
水中、３００ＭＨｚ）を示す。 第３図はＫＢｒベレット中のＩＲスベク）／Ｌ／を示す
Ｏ 第４図はＴＹＢ −Ａ Ｉのアミラーゼ阻害活性のｐＨ
依存性を示す。 第５図はトヨパー／ｌ／ＨＷ５０カラムからのＴＹＢ−
ＡＩの溶出パターンを示す。 第６図はＤＥＡＥトヨバール６５０３カラムからのＴＹ
Ｂ−ＡＩの溶出パターンを示す。 第７図はトーヨーソーダ３０００ＳＷカラムを用いた高
速液体クロマトグラフィーによるＴＹＢ−。 ＡＩの溶出パターンを示す。 第８図は高速液体クロマトグラフィーによって得られた
ＴＹＢ −Ａ Ｉの溶出所用時間と分子量の関係を示す
。 第９図はＴＹＢ−ＡＩとファセオラミンの人スイ型アミ
ラーゼに対する阻害の濃度依存性を示す。
水中、３００ＭＨｚ）を示す。 第３図はＫＢｒベレット中のＩＲスベク）／Ｌ／を示す
Ｏ 第４図はＴＹＢ −Ａ Ｉのアミラーゼ阻害活性のｐＨ
依存性を示す。 第５図はトヨパー／ｌ／ＨＷ５０カラムからのＴＹＢ−
ＡＩの溶出パターンを示す。 第６図はＤＥＡＥトヨバール６５０３カラムからのＴＹ
Ｂ−ＡＩの溶出パターンを示す。 第７図はトーヨーソーダ３０００ＳＷカラムを用いた高
速液体クロマトグラフィーによるＴＹＢ−。 ＡＩの溶出パターンを示す。 第８図は高速液体クロマトグラフィーによって得られた
ＴＹＢ −Ａ Ｉの溶出所用時間と分子量の関係を示す
。 第９図はＴＹＢ−ＡＩとファセオラミンの人スイ型アミ
ラーゼに対する阻害の濃度依存性を示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）下記の理化学的性質を有するアミラーゼ阻害物質。 （１）分子量は４９０００±３０００（ゲルロ過法）。 （２）蛋白質の性状を有する。 （３）元素分析値 Ｃ：約３７．０％、Ｈ：約５．３％、Ｎ：約１１．５％ （４）アミノ酸分析値（１モル当りの残基数）リジン１
０．９±１．２、ヒスチジン８．４±０．５、アルギニ
ン２８．３±０．３、アスパラギン酸３３．８±２．０
、スレオニン２４．６±０．８、セリン２３．４±０．
７、グルタミン酸４８．５±０．７、プロリン５２．９
±４．５、グリシン３８．６±０．１、アラニン２２．
９±０．３、システイン７．２±０．３、パリン３１．
３±０．３、メチオニン１０．７±０．２、イソロイシ
ン１５．７±０．２、ロイシン３９．１±０．３、チロ
シン９．７±０．２、フェニルアラニン９．５±０．５ （５）融点；２１４℃以上で分解 ２）グルテンよりアルコール抽出した可溶性成分を必要
によりゲルロ過した後、陰イオン交換体にアミラーゼ阻
害物質を吸着させ、次いで遊離する事を特徴とするアミ
ラーゼ阻害物質の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60011500A JPS61171431A (ja) | 1985-01-23 | 1985-01-23 | アミラ−ゼ阻害物質およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60011500A JPS61171431A (ja) | 1985-01-23 | 1985-01-23 | アミラ−ゼ阻害物質およびその製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61171431A true JPS61171431A (ja) | 1986-08-02 |
Family
ID=11779739
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60011500A Pending JPS61171431A (ja) | 1985-01-23 | 1985-01-23 | アミラ−ゼ阻害物質およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61171431A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0464300A2 (en) * | 1990-07-04 | 1992-01-08 | Kyodo Milk Industry Corporation Limited | Process for producing alpha-amylase inhibitor derived from wheat seed |
| EP0543076A2 (en) * | 1991-11-18 | 1993-05-26 | Yakurigaku Chuo Kenkyusho | Wheat alpha-amylase inhibitor for the treatment of diabetes |
| US5444046A (en) * | 1993-03-29 | 1995-08-22 | Nisshin Flour Milling Co., Ltd. | Amylase inhibitors |
| EP0785214A2 (en) | 1996-01-18 | 1997-07-23 | Nisshin Flour Milling Co., Ltd. | Amylase inhibitors |
| US6858234B2 (en) | 2002-01-25 | 2005-02-22 | Nisshin Pharma Inc. | Process for the preparation of amylase inhibitor |
| WO2023162796A1 (ja) * | 2022-02-22 | 2023-08-31 | 不二製油グループ本社株式会社 | 茶飲料及び茶飲料の製造方法 |
-
1985
- 1985-01-23 JP JP60011500A patent/JPS61171431A/ja active Pending
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| EP0543076A3 (en) * | 1991-11-18 | 1994-07-06 | Yakurigaku Chuo Kenkyusho | Wheat alpha-amylase inhibitor for the treatment of diabetes |
| US5444046A (en) * | 1993-03-29 | 1995-08-22 | Nisshin Flour Milling Co., Ltd. | Amylase inhibitors |
| EP0785214A2 (en) | 1996-01-18 | 1997-07-23 | Nisshin Flour Milling Co., Ltd. | Amylase inhibitors |
| US5726291A (en) * | 1996-01-18 | 1998-03-10 | Nisshin Flour Milling Co., Ltd. | Amylase inhibitors |
| US6858234B2 (en) | 2002-01-25 | 2005-02-22 | Nisshin Pharma Inc. | Process for the preparation of amylase inhibitor |
| WO2023162796A1 (ja) * | 2022-02-22 | 2023-08-31 | 不二製油グループ本社株式会社 | 茶飲料及び茶飲料の製造方法 |
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