JP2819455B2 - α−リノレン酸の分離精製方法 - Google Patents
α−リノレン酸の分離精製方法Info
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、荏の油（perilla
oil;エゴマ油）からα−リノレン酸を分離精製する方法
に係り、より詳しくは、溶離液としてアセトン−ヘキサ
ン混合溶媒を用いる硝酸銀含侵シリカゲルカラムクロマ
トグラフィーを利用したα−リノレン酸の分離精製方法
に関する。
oil;エゴマ油）からα−リノレン酸を分離精製する方法
に係り、より詳しくは、溶離液としてアセトン−ヘキサ
ン混合溶媒を用いる硝酸銀含侵シリカゲルカラムクロマ
トグラフィーを利用したα−リノレン酸の分離精製方法
に関する。
【０００２】
【従来の技術】α−リノレン酸（α−linolenic acid;
18:3n-3 、以下「ＡＬＡ」と称する）は、エイコサペン
タエン酸（eicosapentaenoic acid; 20:5n-3, ＥＰＡ）
及びドコサヘキサエン酸（docosahexaenoic acid; 22:6
n-3,ＤＨＡ）等のようなｎ−３系不飽和脂肪酸であっ
て、多様な生理活性作用が認められ、例えば、抗癌作
用、血栓性疾患の抑制作用、血圧上昇抑制作用、抗アレ
ルギー作用、記憶学習能力の向上作用等が知られてい
る。
18:3n-3 、以下「ＡＬＡ」と称する）は、エイコサペン
タエン酸（eicosapentaenoic acid; 20:5n-3, ＥＰＡ）
及びドコサヘキサエン酸（docosahexaenoic acid; 22:6
n-3,ＤＨＡ）等のようなｎ−３系不飽和脂肪酸であっ
て、多様な生理活性作用が認められ、例えば、抗癌作
用、血栓性疾患の抑制作用、血圧上昇抑制作用、抗アレ
ルギー作用、記憶学習能力の向上作用等が知られてい
る。
【０００３】ＡＬＡは、荏の油に特に多量に含有され、
通常の加水分解法により荏の油から分離される。しか
し、加水分解法によって得られるＡＬＡは、リノール酸
（linoleic acid;以下「１８：２ｎ−６」と称する）、
又は、オレイン酸（oleic acid；以下「１８：１ｎ−
９」と称する）等の炭素数１８個の不飽和脂肪酸と共に
混合物の形態で提供されてきた。
通常の加水分解法により荏の油から分離される。しか
し、加水分解法によって得られるＡＬＡは、リノール酸
（linoleic acid;以下「１８：２ｎ−６」と称する）、
又は、オレイン酸（oleic acid；以下「１８：１ｎ−
９」と称する）等の炭素数１８個の不飽和脂肪酸と共に
混合物の形態で提供されてきた。
【０００４】しかるに、一般に、特定成分の生理機能実
験においては９０％以上の高純度製品が要求されるの
で、通常の加水分解法によって得られるＡＬＡ生成物
は、このような生理機能実験に利用することができな
い。それ故に、通常の加水分解法によって得られるＡＬ
Ａは実用的でなく、９０％以上の純度、望ましくは９５
％以上の純度を持つＡＬＡを生産することができる新し
い方法が求められてきた。
験においては９０％以上の高純度製品が要求されるの
で、通常の加水分解法によって得られるＡＬＡ生成物
は、このような生理機能実験に利用することができな
い。それ故に、通常の加水分解法によって得られるＡＬ
Ａは実用的でなく、９０％以上の純度、望ましくは９５
％以上の純度を持つＡＬＡを生産することができる新し
い方法が求められてきた。
【０００５】最近、特開平１−２０７２５７号公報に
は、ＡＬＡ、１８：２ｎ−６及び１８：１ｎ−９の混合
物からＡＬＡを分離精製する方法として、オクタデシル
基結合系シリカゲル又はスチレン−ジビニルベンゼン系
共重合体を担体とし、溶離液としてＮ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド水溶液、メタノール水溶液、ジメチルスルホ
キシド等を使用した逆相分配クロマトグラフィー法が開
示され、この方法に従えば純度９０％以上のＡＬＡを得
ることができる。
は、ＡＬＡ、１８：２ｎ−６及び１８：１ｎ−９の混合
物からＡＬＡを分離精製する方法として、オクタデシル
基結合系シリカゲル又はスチレン−ジビニルベンゼン系
共重合体を担体とし、溶離液としてＮ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド水溶液、メタノール水溶液、ジメチルスルホ
キシド等を使用した逆相分配クロマトグラフィー法が開
示され、この方法に従えば純度９０％以上のＡＬＡを得
ることができる。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】このような状況下、本
発明者らは、更に９５％以上の純度を持つＡＬＡを生産
することができるＡＬＡの分離精製方法について鋭意研
究を重ねた結果、通常の加水分解法により荏の油から得
られたＡＬＡ含有脂肪酸混合物から、各々の脂肪酸に含
まれた二重結合の数の差に起因する極性の差を利用する
ことにより、特定の脂肪酸を選択的に分離し得ることを
見出し、本発明を完成した。
発明者らは、更に９５％以上の純度を持つＡＬＡを生産
することができるＡＬＡの分離精製方法について鋭意研
究を重ねた結果、通常の加水分解法により荏の油から得
られたＡＬＡ含有脂肪酸混合物から、各々の脂肪酸に含
まれた二重結合の数の差に起因する極性の差を利用する
ことにより、特定の脂肪酸を選択的に分離し得ることを
見出し、本発明を完成した。
【０００７】詳しくは、カラムクロマトグラフィー法を
用いた分離精製法において、硝酸銀（ＡｇＮＯ3 ）含侵
シリカゲルを固定相として使用した場合、この固定相の
銀イオン（Ａｇ+ ）が脂肪酸の二重結合に作用して可逆
的に極性複合体を形成して各脂肪酸を吸着し、溶離液の
極性を調整して連続的にカラムに流すことによって、脂
肪酸混合物からＡＬＡを選択的に分離することができ
る。
用いた分離精製法において、硝酸銀（ＡｇＮＯ3 ）含侵
シリカゲルを固定相として使用した場合、この固定相の
銀イオン（Ａｇ+ ）が脂肪酸の二重結合に作用して可逆
的に極性複合体を形成して各脂肪酸を吸着し、溶離液の
極性を調整して連続的にカラムに流すことによって、脂
肪酸混合物からＡＬＡを選択的に分離することができ
る。
【０００８】従って、本発明の目的は、ＡＬＡ含有脂肪
酸混合物からＡＬＡを分離精製する方法を提供すること
にある。
酸混合物からＡＬＡを分離精製する方法を提供すること
にある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、カ
ラムクロマトグラフィーを用いてα−リノレン酸含有脂
肪酸混合物からα−リノレン酸を分離し精製する方法で
あり、固定相として硝酸銀含侵シリカゲルをカラムに充
填する段階と、α−リノレン酸含有脂肪酸混合物をカラ
ムに通過させてＡｇ+ 錯体として固定相に吸着させる段
階と、アセトン−ヘキサン混合物で脂肪酸を溶出させる
段階と、純度９５％以上のα−リノレン酸を含有する分
画を回収する段階、とを有するα−リノレン酸の分離精
製方法である。
ラムクロマトグラフィーを用いてα−リノレン酸含有脂
肪酸混合物からα−リノレン酸を分離し精製する方法で
あり、固定相として硝酸銀含侵シリカゲルをカラムに充
填する段階と、α−リノレン酸含有脂肪酸混合物をカラ
ムに通過させてＡｇ+ 錯体として固定相に吸着させる段
階と、アセトン−ヘキサン混合物で脂肪酸を溶出させる
段階と、純度９５％以上のα−リノレン酸を含有する分
画を回収する段階、とを有するα−リノレン酸の分離精
製方法である。
【００１０】ここで、本発明でいう「ＡＬＡ含有脂肪酸
混合物」とは、荏の油（perilla oil;エゴマ油）を加水
分解して得られた加水分解物、又は、これを低温分別結
晶法で濃縮して得られた濃縮物、又は、それらの原料を
問わず下記の表１又は表２に示したと同様の組成を有す
る脂肪酸混合物を意味する。
混合物」とは、荏の油（perilla oil;エゴマ油）を加水
分解して得られた加水分解物、又は、これを低温分別結
晶法で濃縮して得られた濃縮物、又は、それらの原料を
問わず下記の表１又は表２に示したと同様の組成を有す
る脂肪酸混合物を意味する。
【００１１】下記表１は、荏の油から得られた加水分解
物の典型的組成であり、ＡＬＡが６３．１％、１８：１
ｎ−９が１４．１％、１８：２ｎ−６が１４．０％、ま
た、その他の主要脂肪酸として１６：０（パルミチン
酸）、１８：０（ステアリン酸）等が９．０％程含まれ
ている。また、表２は、上記加水分解物を低温分別結晶
法で濃縮して得られた濃縮物の組成物を示し、ＡＬＡが
７６％程含まれている。このように、低温分別結晶法を
利用して荏の油から得られた加水分解物を一時的に濃縮
して適用する場合、ＡＬＡの分離効率を一段と増加させ
得る。
物の典型的組成であり、ＡＬＡが６３．１％、１８：１
ｎ−９が１４．１％、１８：２ｎ−６が１４．０％、ま
た、その他の主要脂肪酸として１６：０（パルミチン
酸）、１８：０（ステアリン酸）等が９．０％程含まれ
ている。また、表２は、上記加水分解物を低温分別結晶
法で濃縮して得られた濃縮物の組成物を示し、ＡＬＡが
７６％程含まれている。このように、低温分別結晶法を
利用して荏の油から得られた加水分解物を一時的に濃縮
して適用する場合、ＡＬＡの分離効率を一段と増加させ
得る。
【００１２】
【表１】
【００１３】
【表２】
【００１４】本発明によれば、固定相で硝酸銀含侵シリ
カゲルが充填されたカラムクロマトグラフィーを使用し
てＡＬＡ含有脂肪酸混合物からＡＬＡを分離する。硝酸
銀含侵シリカゲルは、７０〜２３０メッシュのシリカゲ
ルにその１００ｇ当たり硝酸銀１０ｇを含侵させたもの
である。
カゲルが充填されたカラムクロマトグラフィーを使用し
てＡＬＡ含有脂肪酸混合物からＡＬＡを分離する。硝酸
銀含侵シリカゲルは、７０〜２３０メッシュのシリカゲ
ルにその１００ｇ当たり硝酸銀１０ｇを含侵させたもの
である。
【００１５】次に、本発明の分離精製方法で用いる溶離
液について説明する。ＡＬＡ含有脂肪酸混合物に含まれ
ている不飽和脂肪酸類、すなわち、ＡＬＡ、１８：２ｎ
−６及び１８：１ｎ−９は、その何れも炭素数１８であ
るが、分子内に含まれている二重結合の数が異なり、そ
の結果、極性も１８：１ｎ−９＜１８：２ｎ−６＜１
８：３ｎ−３（ＡＬＡ）の順で異なっている。
液について説明する。ＡＬＡ含有脂肪酸混合物に含まれ
ている不飽和脂肪酸類、すなわち、ＡＬＡ、１８：２ｎ
−６及び１８：１ｎ−９は、その何れも炭素数１８であ
るが、分子内に含まれている二重結合の数が異なり、そ
の結果、極性も１８：１ｎ−９＜１８：２ｎ−６＜１
８：３ｎ−３（ＡＬＡ）の順で異なっている。
【００１６】そこで、このＡＬＡ含有脂肪酸混合物を硝
酸銀含侵シリカゲルが充填されたカラムに通し、ＡＬＡ
含有脂肪酸混合物に含有された各脂肪酸を、銀イオン
（Ａｇ + ）との極性複合体の形態で固定相に吸着させ、
次いで溶離液の極性を順次変化させながら溶離させる
と、各脂肪酸はその極性の低いものから高いものへと順
に選択的に溶出される。
酸銀含侵シリカゲルが充填されたカラムに通し、ＡＬＡ
含有脂肪酸混合物に含有された各脂肪酸を、銀イオン
（Ａｇ + ）との極性複合体の形態で固定相に吸着させ、
次いで溶離液の極性を順次変化させながら溶離させる
と、各脂肪酸はその極性の低いものから高いものへと順
に選択的に溶出される。
【００１７】本発明では、この溶離液としてアセトン−
ヘキサン混合物を用い、このアセトン−ヘキサン混合物
中のアセトン含有量を変えることにより溶離液の極性を
調整している。言い換えれば、溶離液の極性を増加させ
ることによって、すなわち、溶離液中のアセトン含有量
を増やすことによって、脂肪酸を１８：１ｎ−９、１
８：２ｎ−６及びＡＬＡの順に溶出させることができ
る。この際、溶離液であるアセトン−ヘキサン混合物中
のアセトン含有量は２〜７容量％（ｖ／ｖ）の範囲で変
化させる。具体的に言えば、アセトン含有量が約２容量
％、５容量％及び７容量％程の３種のアセトン−ヘキサ
ン混合物を順次使用する。
ヘキサン混合物を用い、このアセトン−ヘキサン混合物
中のアセトン含有量を変えることにより溶離液の極性を
調整している。言い換えれば、溶離液の極性を増加させ
ることによって、すなわち、溶離液中のアセトン含有量
を増やすことによって、脂肪酸を１８：１ｎ−９、１
８：２ｎ−６及びＡＬＡの順に溶出させることができ
る。この際、溶離液であるアセトン−ヘキサン混合物中
のアセトン含有量は２〜７容量％（ｖ／ｖ）の範囲で変
化させる。具体的に言えば、アセトン含有量が約２容量
％、５容量％及び７容量％程の３種のアセトン−ヘキサ
ン混合物を順次使用する。
【００１８】また、ＡＬＡ含有脂肪酸混合物は、固定相
１００ｇ当たり２〜３ｇ程度カラムに通して吸着させれ
ばよい。次いで、３種の溶離液が各々２００ｍｌ程度に
なるように１〜２ｍｌ／ｍｉｎの流出速度でカラムを通
過させる。
１００ｇ当たり２〜３ｇ程度カラムに通して吸着させれ
ばよい。次いで、３種の溶離液が各々２００ｍｌ程度に
なるように１〜２ｍｌ／ｍｉｎの流出速度でカラムを通
過させる。
【００１９】
【発明の実施の形態】硝酸銀（ＡｇＮＯ3 ）をエタノー
ルに溶解し、この溶液中に７０〜２３０メッシュのシリ
カゲルを分散させ、所定時間混合した後にエタノールを
完全に取り除き、一定時間所定の温度に加熱して活性化
させる。得られた硝酸銀含侵シリカゲルをアセトン−ヘ
キサン混合溶媒に分散させ、ガラスカラムに充填する。
ルに溶解し、この溶液中に７０〜２３０メッシュのシリ
カゲルを分散させ、所定時間混合した後にエタノールを
完全に取り除き、一定時間所定の温度に加熱して活性化
させる。得られた硝酸銀含侵シリカゲルをアセトン−ヘ
キサン混合溶媒に分散させ、ガラスカラムに充填する。
【００２０】次に、このカラムにＡＬＡ含有脂肪酸混合
物を導入し、硝酸銀含侵シリカゲルに吸着させ、次いで
溶離液として３種のアセトン−ヘキサン混合物（各々の
アセトン：ヘキサン容積比＝２：９８、５：９５及び
７：９３）を用い、順次カラムを通過させ、その際に流
出する分画をフラクションコレクター（fraction colle
ctor）で一定量ずつ分取する。
物を導入し、硝酸銀含侵シリカゲルに吸着させ、次いで
溶離液として３種のアセトン−ヘキサン混合物（各々の
アセトン：ヘキサン容積比＝２：９８、５：９５及び
７：９３）を用い、順次カラムを通過させ、その際に流
出する分画をフラクションコレクター（fraction colle
ctor）で一定量ずつ分取する。
【００２１】集めた分画をＮａＣｌ水溶液と蒸留水で洗
浄して不純物を取り除き、気−液クロマトグラフィー
（ＧＬＣ）でＡＬＡの純度を確かめた後、類似した純度
を持つＡＬＡ分画を集め、更に一定量を取り、これに内
部標準品を入れてＧＬＣで分析することによりＡＬＡの
純度と重量を求める。
浄して不純物を取り除き、気−液クロマトグラフィー
（ＧＬＣ）でＡＬＡの純度を確かめた後、類似した純度
を持つＡＬＡ分画を集め、更に一定量を取り、これに内
部標準品を入れてＧＬＣで分析することによりＡＬＡの
純度と重量を求める。
【００２２】このようにして求められた各分画中のＡＬ
Ａ純度から、９５％以上の分画を集め、溶離液を除去し
て目的のＡＬＡを得る。
Ａ純度から、９５％以上の分画を集め、溶離液を除去し
て目的のＡＬＡを得る。
【００２３】
【実施例】以下、実施例を挙げて本発明の分離精製方法
を具体的に説明する。
を具体的に説明する。
【００２４】実施例１ 先ず、固定相として用いられる硝酸銀含侵シリカゲルは
次のように準備した。硝酸銀１０ｇをエタノール３００
ｍｌに溶解し、この溶液中に７０〜２３０メッシュのシ
リカゲル１００ｇを分散させ、１０分間混合した後にエ
タノールを完全に取り除き、１２０℃で２時間活性化さ
せた後デシケーター内で３０分間定置した。
次のように準備した。硝酸銀１０ｇをエタノール３００
ｍｌに溶解し、この溶液中に７０〜２３０メッシュのシ
リカゲル１００ｇを分散させ、１０分間混合した後にエ
タノールを完全に取り除き、１２０℃で２時間活性化さ
せた後デシケーター内で３０分間定置した。
【００２５】得られた硝酸銀含侵シリカゲルをアセトン
−ヘキサン混合溶媒（２：９８、ｖ／ｖ）に分散させ、
ガラスカラム（２．５ｃｍ、ｉ．ｄ．×３０ｃｍ）に充
填した。
−ヘキサン混合溶媒（２：９８、ｖ／ｖ）に分散させ、
ガラスカラム（２．５ｃｍ、ｉ．ｄ．×３０ｃｍ）に充
填した。
【００２６】次に、このカラムに、ＡＬＡ含有脂肪酸混
合物として表１の組成を持つ荏の油の加水分解物を２．
５ｇ導入し、その脂肪酸をメチルエステル誘導体の形状
でカラムに通過させて硝酸銀含侵シリカゲルに吸着させ
た。次いで、溶離液として３種のアセトン−ヘキサン混
合物（各々のアセトン：ヘキサン容積比＝２：９８、
５：９５及び７：９３）をそれぞれ２００ｍｌづつ用
い、１〜２ｍｌ／ｍｉｎの流出速度で順次カラムを通過
させ、その際に流出する分画をフラクションコレクター
（fraction collector）で１０ｍｌずつ分取した。
合物として表１の組成を持つ荏の油の加水分解物を２．
５ｇ導入し、その脂肪酸をメチルエステル誘導体の形状
でカラムに通過させて硝酸銀含侵シリカゲルに吸着させ
た。次いで、溶離液として３種のアセトン−ヘキサン混
合物（各々のアセトン：ヘキサン容積比＝２：９８、
５：９５及び７：９３）をそれぞれ２００ｍｌづつ用
い、１〜２ｍｌ／ｍｉｎの流出速度で順次カラムを通過
させ、その際に流出する分画をフラクションコレクター
（fraction collector）で１０ｍｌずつ分取した。
【００２７】集めた分画を１％のＮａＣｌ水溶液と蒸留
水で洗浄して不純物を取り除き、気−液クロマトグラフ
ィー（ＧＬＣ）でＡＬＡの純度を確かめた後、類似した
純度を持つＡＬＡ分画を集め、更に一定量を取り、これ
に内部標準品として２３：０メチルエステル（ドコサン
酸のメチルエステル誘導体）を入れてＧＬＣで分析する
ことによりＡＬＡの純度と重量を求めた。
水で洗浄して不純物を取り除き、気−液クロマトグラフ
ィー（ＧＬＣ）でＡＬＡの純度を確かめた後、類似した
純度を持つＡＬＡ分画を集め、更に一定量を取り、これ
に内部標準品として２３：０メチルエステル（ドコサン
酸のメチルエステル誘導体）を入れてＧＬＣで分析する
ことによりＡＬＡの純度と重量を求めた。
【００２８】ＧＬＣの分析条件は次の通りである。 ＧＬＣ ： Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＧＣ １４Ａ カラム ： Ｓｕｐｅｌｃｏｗａｘ−１０が溶融された
シリカカラム(0.50mm, i. d. × 25m : wall coated op
en-tubular capillary) カ ラ ム 温 度：１８０〜２２０℃ インジェクター温度：２５０℃ 検 出 器 温 度：２５０℃ スプリット比 ：１：５０ 担体（気体） ：ヘリウム（Ｈｅ）（１．０ｋｇ／
ｃｍ2 ） 積 分 器 ：Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＣＲ−５
シリカカラム(0.50mm, i. d. × 25m : wall coated op
en-tubular capillary) カ ラ ム 温 度：１８０〜２２０℃ インジェクター温度：２５０℃ 検 出 器 温 度：２５０℃ スプリット比 ：１：５０ 担体（気体） ：ヘリウム（Ｈｅ）（１．０ｋｇ／
ｃｍ2 ） 積 分 器 ：Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＣＲ−５
【００２９】各分画の組成を調べた結果は図１に示す通
りである。各分画に含有されている脂肪酸中のＡＬＡの
純度は、分画Ｂにおいて７９．４％、分画Ｃにおいて８
８．２％、分画Ｄにおいて９９．６％であり、分画Ｅに
おいては９９．９％であった。また、分画からのＡＬＡ
の回収率は、ＡＬＡの純度が７９．４％以上の場合では
９０．２％（分画Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＋Ｅ）、ＡＬＡの純度が８
８．２％以上の場合では５２．８％（分画Ｃ＋Ｄ＋
Ｅ）、ＡＬＡの純度が９９．６％以上の場合では３６．
８％（分画Ｄ＋Ｅ）であり、ＡＬＡの純度が９９．９％
以上の場合では１６．４％（分画Ｅ）であった。分画Ｄ
とＥにおいて得られた脂肪酸を本発明のＡＬＡとした。
りである。各分画に含有されている脂肪酸中のＡＬＡの
純度は、分画Ｂにおいて７９．４％、分画Ｃにおいて８
８．２％、分画Ｄにおいて９９．６％であり、分画Ｅに
おいては９９．９％であった。また、分画からのＡＬＡ
の回収率は、ＡＬＡの純度が７９．４％以上の場合では
９０．２％（分画Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＋Ｅ）、ＡＬＡの純度が８
８．２％以上の場合では５２．８％（分画Ｃ＋Ｄ＋
Ｅ）、ＡＬＡの純度が９９．６％以上の場合では３６．
８％（分画Ｄ＋Ｅ）であり、ＡＬＡの純度が９９．９％
以上の場合では１６．４％（分画Ｅ）であった。分画Ｄ
とＥにおいて得られた脂肪酸を本発明のＡＬＡとした。
【００３０】実施例２ ＡＬＡ含有脂肪酸混合物として、荏の油の加水分解物を
低温分別結晶法で一次濃縮して得られた濃縮物を用いた
以外は、実施例１と同様の方法でＡＬＡの分離を実施し
た。ここで、低温分別結晶法による脂肪酸混合物の濃縮
は、具体的には次のように行った。荏の油の加水分解物
を約７倍量の９８％のアセトン水溶液に溶解し、−８０
℃で１時間凍結させ、次いでこの溶液をブフナー（Bｕc
hner ）漏斗で濾過して表２に示した組成の濃縮物を得
た。この濃縮物からのＡＬＡの分離は、実施例１と同様
の方法を用いた。
低温分別結晶法で一次濃縮して得られた濃縮物を用いた
以外は、実施例１と同様の方法でＡＬＡの分離を実施し
た。ここで、低温分別結晶法による脂肪酸混合物の濃縮
は、具体的には次のように行った。荏の油の加水分解物
を約７倍量の９８％のアセトン水溶液に溶解し、−８０
℃で１時間凍結させ、次いでこの溶液をブフナー（Bｕc
hner ）漏斗で濾過して表２に示した組成の濃縮物を得
た。この濃縮物からのＡＬＡの分離は、実施例１と同様
の方法を用いた。
【００３１】各分画の組成を調べた結果は図２に示す通
りである。各分画に含有されている脂肪酸中のＡＬＡの
純度は、分画Ｂにおいて８５．５％、分画Ｃにおいて９
５．４％であり、分画Ｄにおいては９９．９％であっ
た。また、分画からのＡＬＡの回収率は、ＡＬＡの純度
が８５．５％以上の場合では９０．０％（分画Ｂ＋Ｃ＋
Ｄ）、ＡＬＡの純度が９５．４％以上の場合では５４．
４％（分画Ｃ＋Ｄ）であり、ＡＬＡの純度が９９．９％
以上の場合では３１．５％（分画Ｄ）であった。分画Ｃ
とＤにおいて得られた脂肪酸を本発明のＡＬＡとした。
りである。各分画に含有されている脂肪酸中のＡＬＡの
純度は、分画Ｂにおいて８５．５％、分画Ｃにおいて９
５．４％であり、分画Ｄにおいては９９．９％であっ
た。また、分画からのＡＬＡの回収率は、ＡＬＡの純度
が８５．５％以上の場合では９０．０％（分画Ｂ＋Ｃ＋
Ｄ）、ＡＬＡの純度が９５．４％以上の場合では５４．
４％（分画Ｃ＋Ｄ）であり、ＡＬＡの純度が９９．９％
以上の場合では３１．５％（分画Ｄ）であった。分画Ｃ
とＤにおいて得られた脂肪酸を本発明のＡＬＡとした。
【００３２】実施例３ 硝酸銀含侵シリカゲルが充填されたカラムとして、実施
例１で用いたカラムを使用した以外は、実施例２と同様
の方法でＡＬＡの分離を実施した。
例１で用いたカラムを使用した以外は、実施例２と同様
の方法でＡＬＡの分離を実施した。
【００３３】各分画に含有されている脂肪酸中のＡＬＡ
の純度は、分画Ｂにおいて８５．６％、分画Ｃにおいて
９５．４％であり、分画Ｄにおいては９９．８％であっ
た。また、分画からのＡＬＡの回収率は、ＡＬＡの純度
が８５．６％以上の場合では８９．９％（分画Ｂ＋Ｃ＋
Ｄ）、ＡＬＡの純度が９５．４％以上の場合では５４．
５％（分画Ｃ＋Ｄ）であり、ＡＬＡの純度が９９．８％
以上の場合では３１．３％（分画Ｄ）であった。分画Ｃ
とＤにおいて得られた脂肪酸を本発明のＡＬＡとした。
の純度は、分画Ｂにおいて８５．６％、分画Ｃにおいて
９５．４％であり、分画Ｄにおいては９９．８％であっ
た。また、分画からのＡＬＡの回収率は、ＡＬＡの純度
が８５．６％以上の場合では８９．９％（分画Ｂ＋Ｃ＋
Ｄ）、ＡＬＡの純度が９５．４％以上の場合では５４．
５％（分画Ｃ＋Ｄ）であり、ＡＬＡの純度が９９．８％
以上の場合では３１．３％（分画Ｄ）であった。分画Ｃ
とＤにおいて得られた脂肪酸を本発明のＡＬＡとした。
【００３４】実施例４ 硝酸銀含侵シリカゲルが充填されたカラムとして、実施
例３で用いたカラムを使用した以外は、実施例２と同様
の方法でＡＬＡの分離を行った。
例３で用いたカラムを使用した以外は、実施例２と同様
の方法でＡＬＡの分離を行った。
【００３５】各分画に含有されている脂肪酸中のＡＬＡ
の純度は、分画Ｂにおいて８５．４％、分画Ｃにおいて
９５．２％であり、分画Ｄにおいては９９．９％であっ
た。また、分画からのＡＬＡの回収率は、ＡＬＡの純度
が８５．４％以上の場合では９０．２％（分画Ｂ＋Ｃ＋
Ｄ）、ＡＬＡの純度が９５．２％以上の場合では５６．
１％（分画Ｃ＋Ｄ）であり、ＡＬＡの純度が９９．９％
以上の場合では３１．３％（分画Ｄ）であった。分画Ｃ
とＤにおいて得られた脂肪酸を本発明のＡＬＡとした。
の純度は、分画Ｂにおいて８５．４％、分画Ｃにおいて
９５．２％であり、分画Ｄにおいては９９．９％であっ
た。また、分画からのＡＬＡの回収率は、ＡＬＡの純度
が８５．４％以上の場合では９０．２％（分画Ｂ＋Ｃ＋
Ｄ）、ＡＬＡの純度が９５．２％以上の場合では５６．
１％（分画Ｃ＋Ｄ）であり、ＡＬＡの純度が９９．９％
以上の場合では３１．３％（分画Ｄ）であった。分画Ｃ
とＤにおいて得られた脂肪酸を本発明のＡＬＡとした。
【００３６】
【発明の効果】本発明によれば、同じ炭素数を持つ脂肪
酸混合物から極性の相違を利用することによりＡＬＡを
高純度に分離することが可能であると共に、使用した溶
離液の極性が低いために銀イオン（Ａｇ+ ）の流出がほ
とんどなく、半永久的に使用し得るので、精製コストも
大幅に節減できるという付随的効果も有する。
酸混合物から極性の相違を利用することによりＡＬＡを
高純度に分離することが可能であると共に、使用した溶
離液の極性が低いために銀イオン（Ａｇ+ ）の流出がほ
とんどなく、半永久的に使用し得るので、精製コストも
大幅に節減できるという付随的効果も有する。
【図１】 図１は、本発明の実施例１において、ＡＬＡ
含有脂肪酸混合物から分離した各分画のＧＬＣによる分
析結果を示すグラフ図である。
含有脂肪酸混合物から分離した各分画のＧＬＣによる分
析結果を示すグラフ図である。
【図２】 図２は、本発明の実施例２において、ＡＬＡ
含有脂肪酸混合物から分離した各分画のＧＬＣによる分
析結果を示すグラフ図である。
含有脂肪酸混合物から分離した各分画のＧＬＣによる分
析結果を示すグラフ図である。
【図３】 図３は、本発明の実施例２において、ＡＬＡ
含有脂肪酸混合物から分離した各分画のＧＬＣクロマト
グラムである。
含有脂肪酸混合物から分離した各分画のＧＬＣクロマト
グラムである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 許 翰 淳 大韓民国京畿道水原市八達區梅灘２洞 810−１、現代アパート104棟407號 (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C07C 57/12 C07B 63/00 C07C 51/47
Claims (5)
- 【請求項１】 カラムクロマトグラフィーを用いてα−
リノレン酸含有脂肪酸混合物からα−リノレン酸を分離
し精製する方法であり、固定相として硝酸銀含侵シリカ
ゲルをカラムに充填する段階と、α−リノレン酸含有脂
肪酸混合物をカラムに通過させてＡｇ+ 錯体として固定
相に吸着させる段階と、アセトン−ヘキサン混合物で脂
肪酸を溶出させる段階と、純度９５％以上のα−リノレ
ン酸を含有する分画を回収する段階、とを有することを
特徴とするα−リノレン酸の分離精製方法。 - 【請求項２】 α−リノレン酸含有脂肪酸混合物が、荏
の油を加水分解して得られた脂肪酸混合物であるか、又
は、これを低温分別結晶法で濃縮したものである請求項
１記載のα−リノレン酸の分離精製方法。 - 【請求項３】 α−リノレン酸含有脂肪酸混合物は、固
定相１００ｇ当たり２〜３ｇの割合でカラムを通過させ
る請求項１記載のα−リノレン酸の分離精製方法。 - 【請求項４】 硝酸銀含侵シリカゲルは、７０〜２３０
メッシュのシリカゲル１００ｇ当たり硝酸銀約１０ｇが
含侵されているものである請求項１記載のα−リノレン
酸の分離精製方法。 - 【請求項５】 溶離液としてアセトン：ヘキサンの容量
比がそれぞれ約２：９８、約５：９５及び７：９３であ
る３種のアセトン−ヘキサン混合溶媒を用い、その順序
でこれら３種のアセトン−ヘキサン混合溶媒をカラムに
導入して通過させる請求項１記載のα−リノレン酸の分
離精製方法。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1994-33544 | 1994-12-09 | ||
| KR1019940033544A KR970002037B1 (ko) | 1994-12-09 | 1994-12-09 | 들깨유로부터 α-리놀렌산(ALA)을 분리, 정제하는 방법 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08208531A JPH08208531A (ja) | 1996-08-13 |
| JP2819455B2 true JP2819455B2 (ja) | 1998-10-30 |
Family
ID=19400912
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7277402A Expired - Lifetime JP2819455B2 (ja) | 1994-12-09 | 1995-10-25 | α−リノレン酸の分離精製方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
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| JP (1) | JP2819455B2 (ja) |
| KR (1) | KR970002037B1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11872201B2 (en) | 2018-06-21 | 2024-01-16 | Nuseed Nutritional Us Inc. | DHA enriched polyunsaturated fatty acid compositions |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE60012934T2 (de) | 1999-02-26 | 2005-08-25 | Martek Biosciences Corp. | Verfahren zum Abtrennen von einem Docosahexaensäure enthaltenden Triglycerid aus einem Triglyceridgemisch |
| IL146285A0 (en) | 1999-05-25 | 2002-07-25 | Fujisawa Pharmaceutical Co | Method for separating analogous organic compounds |
| US6340705B1 (en) * | 1999-09-10 | 2002-01-22 | Monsanto Technology, Llc | Use of α-linolenic acid metabolites for treatment or prevention of cancer |
| CN1095824C (zh) * | 2000-04-13 | 2002-12-11 | 胡德甫 | 一种高纯度α－亚麻酸的制备方法 |
| CA2436650A1 (en) * | 2003-08-06 | 2005-02-06 | Naturia Inc. | Conjugated linolenic acid (clnatm) compositions: synthesis, purification and uses |
| BRPI0515695A (pt) * | 2004-09-10 | 2008-03-04 | Ivax Pharmaceuticals Sro | processo para isolamento de tacrolimus cristalino |
| US20080269479A1 (en) * | 2004-09-10 | 2008-10-30 | Ivax Pharmaceuticals S.R.O. | Process for Isolation of Macrolide Compounds |
| BRPI0620310B1 (pt) * | 2005-12-16 | 2017-12-05 | Archer-Daniels-Midland Company | A method for preparing a composition enriched in compounds containing unsaturated carbon chains by simulated moving bed chromatography using an adsorbent containing silver ions |
| CN100363326C (zh) * | 2005-12-30 | 2008-01-23 | 安阳化学工业集团有限责任公司 | 纯度大于80%的α-亚麻酸的生产工艺 |
| JP4918259B2 (ja) * | 2006-01-06 | 2012-04-18 | 株式会社キャタラー | 低分子有機ガス吸収材及びこれを用いた燃料蒸気処理装置 |
| CN101624345B (zh) * | 2009-08-06 | 2013-04-17 | 浙江工业大学 | 一种从蚕蛹油中提取高纯度的α-亚麻酸乙酯的方法 |
| ES2363518B1 (es) * | 2010-01-23 | 2012-06-13 | Universidad De Almería | Procedimiento para la purificación de trigliceridos que contienen ácido estearidónico en posición sn-2. |
| JP6364538B2 (ja) | 2016-12-22 | 2018-07-25 | 花王株式会社 | 油脂組成物 |
| KR101985683B1 (ko) * | 2017-02-09 | 2019-06-04 | 농업회사법인 서우하 주식회사 | 식물성 유지로부터 알파-리놀렌산 농축 방법 |
| EP3586642A1 (en) * | 2018-06-21 | 2020-01-01 | Nuseed Pty Ltd | Ala enriched polyunsaturated fatty acid compositions |
| CN110054560A (zh) * | 2019-05-23 | 2019-07-26 | 河南农业大学 | 一种医药用木本α-亚麻酸的提纯方法及其应用 |
| CN110105199A (zh) * | 2019-05-23 | 2019-08-09 | 河南农业大学 | 一种静脉注射用木本α-亚麻酸的提纯方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01207257A (ja) * | 1988-02-15 | 1989-08-21 | Nippon Oil & Fats Co Ltd | α−リノレン酸の分離法 |
-
1994
- 1994-12-09 KR KR1019940033544A patent/KR970002037B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-08-09 US US08/512,829 patent/US5672726A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-10-25 JP JP7277402A patent/JP2819455B2/ja not_active Expired - Lifetime
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11872201B2 (en) | 2018-06-21 | 2024-01-16 | Nuseed Nutritional Us Inc. | DHA enriched polyunsaturated fatty acid compositions |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5672726A (en) | 1997-09-30 |
| KR960022971A (ko) | 1996-07-18 |
| KR970002037B1 (ko) | 1997-02-21 |
| JPH08208531A (ja) | 1996-08-13 |
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