JP2676166B2 - エイズウイルスに対する合成ワクチン - Google Patents
エイズウイルスに対する合成ワクチンInfo
- Publication number
- JP2676166B2 JP2676166B2 JP1508125A JP50812589A JP2676166B2 JP 2676166 B2 JP2676166 B2 JP 2676166B2 JP 1508125 A JP1508125 A JP 1508125A JP 50812589 A JP50812589 A JP 50812589A JP 2676166 B2 JP2676166 B2 JP 2676166B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- peptides
- cells
- antigen
- mice
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 title abstract description 27
- 229940126577 synthetic vaccine Drugs 0.000 title 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 111
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 20
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 22
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 10
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 10
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 claims description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 claims 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 claims 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 claims 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 claims 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 4
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 abstract description 2
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 abstract 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 abstract 1
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 abstract 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 63
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 37
- 230000004044 response Effects 0.000 description 26
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 21
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 21
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 13
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 12
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 230000009696 proliferative response Effects 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 7
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 6
- 101800001690 Transmembrane protein gp41 Proteins 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 3
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical class N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000007402 cytotoxic response Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 208000033065 inborn errors of immunity Diseases 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 108010034897 lentil lectin Proteins 0.000 description 1
- 238000005567 liquid scintillation counting Methods 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 208000028529 primary immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
- C12N2740/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/22—Viral peptide or viral protein
- Y10S930/221—Retrovirus related, or human immunodeficiency virus related, or simian immunodeficiency virus related
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 本発明は、ヒト免疫不全性ウイルス（HIV）に対する
ワクチンの一般的な発展に関するものである。更に特別
には、本発明はHIV膜蛋白質を特定的に認識するヘルパ
ーＴリンパ球を刺激し、それにより抗体産生を高めるペ
プチド抗原並びにエイズウイルスによる発病及びエイズ
ウイルスにより引き起こされる感染症を抑制する細胞毒
性Ｔ細胞を提供することに関するものである。
ワクチンの一般的な発展に関するものである。更に特別
には、本発明はHIV膜蛋白質を特定的に認識するヘルパ
ーＴリンパ球を刺激し、それにより抗体産生を高めるペ
プチド抗原並びにエイズウイルスによる発病及びエイズ
ウイルスにより引き起こされる感染症を抑制する細胞毒
性Ｔ細胞を提供することに関するものである。
発明の背景 ヒト免疫不全性ウイルス（HIV）に対するワクチンの
発展は、広まった免疫不全性症候群（AIDS）の更なる拡
散を妨げる決定的な方法である。安全性の理由のため
に、全てのウイルスワクチンをHIVの場合について適用
することはできない。しかしながら、如何なるサブユニ
ットワクチンも、原抗原への暴露に応答してヘルパーＴ
細胞免疫性を引き出すことができる免疫優性ヘルパーＴ
細胞サイトを含むべきである。ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細
胞増殖及び抗体産生細胞に対する差別化を起こすことに
よるＢ細胞の活性化のための、並びに細胞毒性Ｔ細胞の
誘導の両方のために必要である。ヘルパーＴ細胞は、人
口の蛋白質抗原よりもむしろ蛋白質分子内の固有サイト
を認識するということを記載すべきである。前記サイト
のうち、2,3のものは通常応答の塊を引き出し、それ
故、“免疫優性”と呼ばれる。これより、有効な細胞毒
性又は免疫性応答を引き出すために、合成抗原は好まし
くは分子内に免疫優性領域を含むべきである。更に、合
成抗原ペプチドは、合成フラグメントワクチンにおいて
しばしば遭遇するMHC制限の問題を克服すべきである。
発展は、広まった免疫不全性症候群（AIDS）の更なる拡
散を妨げる決定的な方法である。安全性の理由のため
に、全てのウイルスワクチンをHIVの場合について適用
することはできない。しかしながら、如何なるサブユニ
ットワクチンも、原抗原への暴露に応答してヘルパーＴ
細胞免疫性を引き出すことができる免疫優性ヘルパーＴ
細胞サイトを含むべきである。ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細
胞増殖及び抗体産生細胞に対する差別化を起こすことに
よるＢ細胞の活性化のための、並びに細胞毒性Ｔ細胞の
誘導の両方のために必要である。ヘルパーＴ細胞は、人
口の蛋白質抗原よりもむしろ蛋白質分子内の固有サイト
を認識するということを記載すべきである。前記サイト
のうち、2,3のものは通常応答の塊を引き出し、それ
故、“免疫優性”と呼ばれる。これより、有効な細胞毒
性又は免疫性応答を引き出すために、合成抗原は好まし
くは分子内に免疫優性領域を含むべきである。更に、合
成抗原ペプチドは、合成フラグメントワクチンにおいて
しばしば遭遇するMHC制限の問題を克服すべきである。
発明の要約 したがって本発明の目的は、全ての又は大部分のMHC
型のＴ細胞により認識され、且つ少なくとも一部は、HI
V感染に対して高度のヘルパーＴ細胞応答性を引き出す
免疫優性サイトからなる合成ペプチド抗原を提供するこ
とである。
型のＴ細胞により認識され、且つ少なくとも一部は、HI
V感染に対して高度のヘルパーＴ細胞応答性を引き出す
免疫優性サイトからなる合成ペプチド抗原を提供するこ
とである。
本発明の更なる目的は、実質的に、異なった主要組織
適合性型により生じる制限に起因する制約のないHIV感
染に対する合成又は組み換え型フラグメントワクチンを
提供することである。
適合性型により生じる制限に起因する制約のないHIV感
染に対する合成又は組み換え型フラグメントワクチンを
提供することである。
本発明の別の目的は、AIDSウイルスに対するＴ細胞免
疫性の特定性及び／又は水準を決定するための試薬を提
供することである。
疫性の特定性及び／又は水準を決定するための試薬を提
供することである。
本発明の他の目的及び利点は、本発明に関する下記の
詳細な記載から明らかになるであろう。
詳細な記載から明らかになるであろう。
図面の簡単な説明 本発明の前記及び他の目的、特長及び多くの注目すべ
き利点は、添付図面を参照して考えた場合に下記の詳細
な記載を読むことにより一層良く理解されるであろう。
き利点は、添付図面を参照して考えた場合に下記の詳細
な記載を読むことにより一層良く理解されるであろう。
図１は、HIV膜蛋白質のアミノ酸残基を示す。44種の
重複した合成ペプチドのアミノ酸連鎖部が表わされてい
る。HP-6（Ｒ）において、アルギニンはカルボキシ末端
リシンにより置換されている。ペプチドHP-17及び33
は、HIV連鎖において存在しない外部カルボキシ末端シ
ステイン残基を有する。
重複した合成ペプチドのアミノ酸連鎖部が表わされてい
る。HP-6（Ｒ）において、アルギニンはカルボキシ末端
リシンにより置換されている。ペプチドHP-17及び33
は、HIV連鎖において存在しない外部カルボキシ末端シ
ステイン残基を有する。
図２は、T2（HP-5）クラスターの重複したペプチドの
アミノ酸残基を示す。略記したアミノ酸符号が使用され
ている:A＝Ala,C＝Cys,D＝Asp,E＝Glu,F＝Phe,G＝Gly,H
＝His,I＝Ile,K＝Lys,L＝Leu,M＝Met,N＝Asn,P＝Pro,Q
＝Gln,R＝Arg,S＝Ser,T＝Thr,V＝Val,W＝Trp,Y＝Tyr。
アミノ酸残基を示す。略記したアミノ酸符号が使用され
ている:A＝Ala,C＝Cys,D＝Asp,E＝Glu,F＝Phe,G＝Gly,H
＝His,I＝Ile,K＝Lys,L＝Leu,M＝Met,N＝Asn,P＝Pro,Q
＝Gln,R＝Arg,S＝Ser,T＝Thr,V＝Val,W＝Trp,Y＝Tyr。
図３は、免疫優性領域HP-52ないし57における重複し
たペプチドのアミノ酸残基を示す。
たペプチドのアミノ酸残基を示す。
図４は、B10.BR（H-2k）マウスにおけるHP-52ないし5
7についての投与量応答曲線を示す。B10.BRマウスは、g
p160を用いて免疫化され、そしてリンパ球結節増殖分析
は本文記載の通りに行われた。ペプチドHP-52ないし57
に対する応答は、投与量応答検査により評価された。刺
激指数は、抗原のないバックグラウンド計数を越える実
験計数比を示す。
7についての投与量応答曲線を示す。B10.BRマウスは、g
p160を用いて免疫化され、そしてリンパ球結節増殖分析
は本文記載の通りに行われた。ペプチドHP-52ないし57
に対する応答は、投与量応答検査により評価された。刺
激指数は、抗原のないバックグラウンド計数を越える実
験計数比を示す。
図５は、B10.D2（H-2d）マウスにおけるHP-52ないし5
7についての投与量応答曲線を示す。B10.D2マウスは、g
p160を用いて免疫化され、そしてリンパ球結節増殖分析
は本文記載の通りに行われた。ペプチドHP-52ないし57
に対する応答は、投与量応答検査により評価された。刺
激指数は、抗原のないバックグラウンド計数を越える実
験計数比を示す。
7についての投与量応答曲線を示す。B10.D2マウスは、g
p160を用いて免疫化され、そしてリンパ球結節増殖分析
は本文記載の通りに行われた。ペプチドHP-52ないし57
に対する応答は、投与量応答検査により評価された。刺
激指数は、抗原のないバックグラウンド計数を越える実
験計数比を示す。
図６は、B10.S（9R）（H-2t4）マウスにおけるHP-52
ないし57についての投与量応答曲線を示す。B10.S（9
R）マウスは、gp160を用いて免疫化され、そしてリンパ
球結節増殖分析は本文記載の通りに行われた。ペプチド
HP-52ないし57に対する応答は、投与量応答検査により
評価された。刺激指数は、抗原のないバックグラウンド
計数を越える実験計数比を示す。
ないし57についての投与量応答曲線を示す。B10.S（9
R）マウスは、gp160を用いて免疫化され、そしてリンパ
球結節増殖分析は本文記載の通りに行われた。ペプチド
HP-52ないし57に対する応答は、投与量応答検査により
評価された。刺激指数は、抗原のないバックグラウンド
計数を越える実験計数比を示す。
図７は、B10.A（5R）（H-2i5）マウスにおけるHP-52
ないし57についての投与量応答曲線を示す。B10.A（5
R）マウスは、gp160を用いて免疫化され、そしてリンパ
球結節増殖分析は本文記載の通りに行われた。ペプチド
HP-52ないし57に対する応答は、投与量応答検査により
評価された。刺激指数は、抗原のないバックグラウンド
計数を越える実験計数比を示す。
ないし57についての投与量応答曲線を示す。B10.A（5
R）マウスは、gp160を用いて免疫化され、そしてリンパ
球結節増殖分析は本文記載の通りに行われた。ペプチド
HP-52ないし57に対する応答は、投与量応答検査により
評価された。刺激指数は、抗原のないバックグラウンド
計数を越える実験計数比を示す。
図８は、指示された範囲内に横たわる幾何学的手段に
よる応答を用いて多数のペプチドを示す棒グラフを表わ
す。前記範囲の下限は、Ｘ軸上に示されている（例え
ば、“1.5"は1.5ないし2.0の範囲を示す）。
よる応答を用いて多数のペプチドを示す棒グラフを表わ
す。前記範囲の下限は、Ｘ軸上に示されている（例え
ば、“1.5"は1.5ないし2.0の範囲を示す）。
図9A及び9Bは、リーサス猿１〜４（＝RhM1〜RhM4）を
１）群1:完全フロイント助剤（CFA）を用いた乳剤中の
３種のペプチドHP-5,HP-26及びHP-53の各々の39ナノモ
ル;2）群2:CFAを用いて、０及び39日目に処理した結果
を示す。これらの猿は、不完全フロイント助剤（IFA）
中で0.2ナノモルのgp160を用いて47日目に免疫化され
た。抗−gp41抗体は、0,27,52,55,59,62,68及び80日目
に測定された。結果を‘正味cpms'として表わす：ウェ
スターンブロット（Western Blot）のgp41バンド上の抗
体に結合した125-I−蛋白質Ａは、バックグラウンドか
ら引く（予め採血した血清:642±187cpm）。
１）群1:完全フロイント助剤（CFA）を用いた乳剤中の
３種のペプチドHP-5,HP-26及びHP-53の各々の39ナノモ
ル;2）群2:CFAを用いて、０及び39日目に処理した結果
を示す。これらの猿は、不完全フロイント助剤（IFA）
中で0.2ナノモルのgp160を用いて47日目に免疫化され
た。抗−gp41抗体は、0,27,52,55,59,62,68及び80日目
に測定された。結果を‘正味cpms'として表わす：ウェ
スターンブロット（Western Blot）のgp41バンド上の抗
体に結合した125-I−蛋白質Ａは、バックグラウンドか
ら引く（予め採血した血清:642±187cpm）。
発明の簡単な説明 本発明の上記の及び種々の他の目的及び利点は、多数
の異なったMHC型にわたる制限なしに、HIV膜蛋白質を示
す細胞を認識することが可能なＴ細胞の増殖を刺激する
ペプチド抗原により達成される。
の異なったMHC型にわたる制限なしに、HIV膜蛋白質を示
す細胞を認識することが可能なＴ細胞の増殖を刺激する
ペプチド抗原により達成される。
特記しない限りは、本文中で使用される全ての技術的
及び科学的表現は、本発明が属する技術分野において当
業者により通常理解されるものと同一の意味を有する。
本文中に記載した方法及び材料と同一又は等価な何れの
方法及び材料も本発明の実施例又は試験において使用す
ることができるが、好ましい方法及び材料を下記する。
下記本文中の全ての文献は、参考のために本文中に加え
られている。特記しない限りは、本文中で用いられた技
術は前記技術分野において当業者に公知の標準的な方法
論である。
及び科学的表現は、本発明が属する技術分野において当
業者により通常理解されるものと同一の意味を有する。
本文中に記載した方法及び材料と同一又は等価な何れの
方法及び材料も本発明の実施例又は試験において使用す
ることができるが、好ましい方法及び材料を下記する。
下記本文中の全ての文献は、参考のために本文中に加え
られている。特記しない限りは、本文中で用いられた技
術は前記技術分野において当業者に公知の標準的な方法
論である。
本文中で使用される表現“多数のMHC類又は型”は、
少なくとも３種又はそれより多くのMHC類又は型を意味
する。
少なくとも３種又はそれより多くのMHC類又は型を意味
する。
本文中で使用される表現“実質的に純粋”は、標準的
な精製技術により得ることができる可能なかぎり純粋で
あることを意味する。
な精製技術により得ることができる可能なかぎり純粋で
あることを意味する。
本文中で使用される表現“合成”ペプチドは、何らか
の適する手段例えば遺伝子組み換え技術等により化学的
に合成されたことを意味する。
の適する手段例えば遺伝子組み換え技術等により化学的
に合成されたことを意味する。
材料及び方法 マウス B10.BR/SgSn（H-2k）及びB10.D2/nSn（H-2d）マウス
は、ジャクソン実験室（Jackson Laboratories）〔バー
ハーバ（Bar Harbor）,ME）から得た。B10.S（9R）/S
g（H-2t4）及びB10.A（5R）/SgSn（H-2i5）マウスは、
ディ．ジェイ．スティムプフリング（D.J.Stimpfling）
〔グレート フォールス（Great Falls）,MT〕から、及
びジャクソン実験室から得た繁殖ペアからNIH繁殖コロ
ニーで繁殖させた。B10.S（9R）及びB10.A（5R）株から
のマウスは、H-2s及びH-2bハプロタイプのＩ−Ａ及びＩ
−Ｅ分子の両方が前記組み換え株中に発現し、反対にＩ
−Ｅは非組み換えH-2b及びH-2sマウス中で発現しないの
で選んだ。
は、ジャクソン実験室（Jackson Laboratories）〔バー
ハーバ（Bar Harbor）,ME）から得た。B10.S（9R）/S
g（H-2t4）及びB10.A（5R）/SgSn（H-2i5）マウスは、
ディ．ジェイ．スティムプフリング（D.J.Stimpfling）
〔グレート フォールス（Great Falls）,MT〕から、及
びジャクソン実験室から得た繁殖ペアからNIH繁殖コロ
ニーで繁殖させた。B10.S（9R）及びB10.A（5R）株から
のマウスは、H-2s及びH-2bハプロタイプのＩ−Ａ及びＩ
−Ｅ分子の両方が前記組み換え株中に発現し、反対にＩ
−Ｅは非組み換えH-2b及びH-2sマウス中で発現しないの
で選んだ。
抗原 組み換えgp160は、ラッチェ（Rusche）他,1987,PNAS,
アメリカ合衆国,84:6924に記載された様なHIVのHTLVIII
B単離体のgp160に対して遺伝子を発現する組み換えバク
ロウイルスにより感染させた細胞から調製した。それ
は、標準的なレンズ豆レクチンクロマトグラフィ及びゲ
ル濾過技術により特に精製した。合成ペプチドは、多重
ペプチド合成又はホウテン（Houghten）他,1986,生物技
術（Bio Techniques）,4:522に記載された様な“ティー
バック（Tea Bag）法”により作られた。ペプチドは、
“低−高”弗化水素法によりそれらの樹脂から分解され
た。分解ペプチドは、セップ−パック（Sep-pak）〔ウ
ォータース（Waters），ミルフォード（Milford）,MA〕
により脱塩され、次いで純度及び濃度が分析的HPLCによ
り決定された。ペプチドが充分に純粋ではない場合は、
それらは標準的な製造的HPLCを用いて再精製された。
アメリカ合衆国,84:6924に記載された様なHIVのHTLVIII
B単離体のgp160に対して遺伝子を発現する組み換えバク
ロウイルスにより感染させた細胞から調製した。それ
は、標準的なレンズ豆レクチンクロマトグラフィ及びゲ
ル濾過技術により特に精製した。合成ペプチドは、多重
ペプチド合成又はホウテン（Houghten）他,1986,生物技
術（Bio Techniques）,4:522に記載された様な“ティー
バック（Tea Bag）法”により作られた。ペプチドは、
“低−高”弗化水素法によりそれらの樹脂から分解され
た。分解ペプチドは、セップ−パック（Sep-pak）〔ウ
ォータース（Waters），ミルフォード（Milford）,MA〕
により脱塩され、次いで純度及び濃度が分析的HPLCによ
り決定された。ペプチドが充分に純粋ではない場合は、
それらは標準的な製造的HPLCを用いて再精製された。
リンパ結節Ｔ細胞精製分析 マウスは、尾を基準として完全フロイント助剤（CF
A）に対して1:1で組み換えgp160を10-30ug用いて皮下的
に免疫化された。（この投与量は、gp160調製の純度の
基づいて決定された。）８ないし10日後、大動脈周囲の
及び鼠径部のリンパ結節は、バーコワー（Berkower）
他,1984,J.Immunol.,132:1370の方法に従って完全Ｔ細
胞媒体中の単細胞懸濁液中で除去及び調製した。穴当た
り４×105細胞のリンパ結節細胞は、平底の96−穴ミク
ロ滴定プレート〔コスター（Costar），ケンブリッジ
（Cambridge）,MA〕の各穴に加えられた。44種のペプチ
ドは、溶媒により最終容積0.2mlとするように前記穴に
加えられた。培養40日目に、〔3H〕チミジンluCi〔6.7C
i/mmol;ニュー イングランド ニュークリアー（New E
ngland Nuclear），ボストン（Boston）,MA〕が各穴に
加えられた。18時間後、増殖の尺度として、DNAに対す
る〔3H〕チミジン配合比は、液体シンチレーション計数
を使用して決定された。刺激指数は、抗原なしのバック
グラウンド計数に対する実験計数の比を表わす。
A）に対して1:1で組み換えgp160を10-30ug用いて皮下的
に免疫化された。（この投与量は、gp160調製の純度の
基づいて決定された。）８ないし10日後、大動脈周囲の
及び鼠径部のリンパ結節は、バーコワー（Berkower）
他,1984,J.Immunol.,132:1370の方法に従って完全Ｔ細
胞媒体中の単細胞懸濁液中で除去及び調製した。穴当た
り４×105細胞のリンパ結節細胞は、平底の96−穴ミク
ロ滴定プレート〔コスター（Costar），ケンブリッジ
（Cambridge）,MA〕の各穴に加えられた。44種のペプチ
ドは、溶媒により最終容積0.2mlとするように前記穴に
加えられた。培養40日目に、〔3H〕チミジンluCi〔6.7C
i/mmol;ニュー イングランド ニュークリアー（New E
ngland Nuclear），ボストン（Boston）,MA〕が各穴に
加えられた。18時間後、増殖の尺度として、DNAに対す
る〔3H〕チミジン配合比は、液体シンチレーション計数
を使用して決定された。刺激指数は、抗原なしのバック
グラウンド計数に対する実験計数の比を表わす。
実施例 H-2k,H-2d,H-2i5，及びH-2t4ハプロタイプのマウス
は、マウス当たり20-30ugの投与量でCFA中の組み換えgp
160を用いて尾に対して皮下的に免疫化された。８ない
し10日後、このマウスは犠牲にされ、大動脈周囲の及び
鼠径部のリンパ結節が単離され、次いで抗原の存在下又
は不存在下でのリンパ結節細胞の増殖は、上記本文中に
記載された様に決定された。
は、マウス当たり20-30ugの投与量でCFA中の組み換えgp
160を用いて尾に対して皮下的に免疫化された。８ない
し10日後、このマウスは犠牲にされ、大動脈周囲の及び
鼠径部のリンパ結節が単離され、次いで抗原の存在下又
は不存在下でのリンパ結節細胞の増殖は、上記本文中に
記載された様に決定された。
試験された４種のハプロタイプのマウスのＴ細胞増殖
分析の結果を表Ｉに要約する。強い増殖応答が、予め同
定された膜T2サイト（HP-5）（図２）を取り囲んで構成
されたペプチドHP-4ないし８に対して、H-2kマウスで見
られた。最高の応答は、ペプチドHP-5（残基112-124,HE
DIISLWDQSLK）及びHP-6（残基112-124,HEDIISLWDQSLR）
（これは、リシンに対するアルギニンの置換のみが異な
る）を用いて見られた。漸減する応答は、ペプチドHP-4
（残基110-124,QMHEDIISLWDQSLK）、HP-7（残基114-12
8,DIISLWDQSLKPCVK）、及びHP-8（残基119-134,WDQSLKP
CVKLTPLCV）について見られた．正の増殖応答は、ペプ
チドHP-26（残基428-443,KQIINMWQEVGKAMYA）（これ
は、ヘルパーＴ細胞外膜，膜Ｔと同一である）について
観察された。この応答は、1uMの投与量において見られ
た。2uMの投与量においては、増殖指数は２より大きか
ったが、しかし統計的に充分なものではなかった。ペプ
チドHP-29（残基437-451,VGKAMYAPPISGQIR）（これは、
６種のアミノ酸がペプチドHP-26と重複する）も正の応
答を引き出した。試験された４種のハプロタイプのマウ
スにおいて、正の増殖応答はgp41分子のCOOH基末端でペ
プチドHP-52ないし57（図３）に重複する群中のペプチ
ドの１種又はそれより多くで認められた。H-2kマウスに
おける前記ペプチドに対する投与応答曲線（図４）は、
ペプチドHP-52（残基828-842,AVAEGTDRVIEVVQG）及びHP
-53（残基834-848,DRVIEVVQGAYRAIR）に対する好ましい
応答を示す。
分析の結果を表Ｉに要約する。強い増殖応答が、予め同
定された膜T2サイト（HP-5）（図２）を取り囲んで構成
されたペプチドHP-4ないし８に対して、H-2kマウスで見
られた。最高の応答は、ペプチドHP-5（残基112-124,HE
DIISLWDQSLK）及びHP-6（残基112-124,HEDIISLWDQSLR）
（これは、リシンに対するアルギニンの置換のみが異な
る）を用いて見られた。漸減する応答は、ペプチドHP-4
（残基110-124,QMHEDIISLWDQSLK）、HP-7（残基114-12
8,DIISLWDQSLKPCVK）、及びHP-8（残基119-134,WDQSLKP
CVKLTPLCV）について見られた．正の増殖応答は、ペプ
チドHP-26（残基428-443,KQIINMWQEVGKAMYA）（これ
は、ヘルパーＴ細胞外膜，膜Ｔと同一である）について
観察された。この応答は、1uMの投与量において見られ
た。2uMの投与量においては、増殖指数は２より大きか
ったが、しかし統計的に充分なものではなかった。ペプ
チドHP-29（残基437-451,VGKAMYAPPISGQIR）（これは、
６種のアミノ酸がペプチドHP-26と重複する）も正の応
答を引き出した。試験された４種のハプロタイプのマウ
スにおいて、正の増殖応答はgp41分子のCOOH基末端でペ
プチドHP-52ないし57（図３）に重複する群中のペプチ
ドの１種又はそれより多くで認められた。H-2kマウスに
おける前記ペプチドに対する投与応答曲線（図４）は、
ペプチドHP-52（残基828-842,AVAEGTDRVIEVVQG）及びHP
-53（残基834-848,DRVIEVVQGAYRAIR）に対する好ましい
応答を示す。
H-2dハプロタイプのマウスにおける44種のペプチドに
対するＴ細胞増殖応答を、表Ｉの第２欄に示す。膜T2領
域におけるペプチドHP-3（残基109-123,EQMHEDIISLWDQS
L）に対する充分な増殖応答が観察された。ペプチドHP-
3はHP-5（膜T2）に重複しているが、しかしその分子の
アミノ末端方向において３種のアミノ酸の分だけ長く、
且つその分子のカルボキシ末端方向において１種のアミ
ノ酸の分だけ短い。正の応答は、HP-26に対して認めら
れ且つ重複しているHP-29に対して認められた。初期の
スクリーニングにおいて、正の応答はHP-52ないし57群
のHP-55（残基841-855,QGAYRAIRHIPRRIR）のみに対して
認められた。投与量応答検査を用いたより詳細な研究に
より、正の且つ好ましい応答がHP-55及びHP-56（残基84
6-860,AIRHIPRRIRQGLER）に対して認められた（図
５）。H-2t4ハプロタイプのマウス（ASEβSEαk）（表
Ｉ）は、膜T2領域においてペプチドHP-3ないし８に対し
て応答しなかった。この株のマウスは、膜T1サイトペプ
チドHP-26、並びに重複しているペプチドHP-28（残基43
2-446,NMWQEVGKAMYAPPI）及びHP-29に対して応答した。
初期のスクリーニングにおいて、正の応答は1uMの投与
量でペプチドHP-55及びHP-56に対して見られた。投与量
応答検査により、HP-55及びHP-56に対する好ましい応答
（図６）を伴う前記見解が確証された。
対するＴ細胞増殖応答を、表Ｉの第２欄に示す。膜T2領
域におけるペプチドHP-3（残基109-123,EQMHEDIISLWDQS
L）に対する充分な増殖応答が観察された。ペプチドHP-
3はHP-5（膜T2）に重複しているが、しかしその分子の
アミノ末端方向において３種のアミノ酸の分だけ長く、
且つその分子のカルボキシ末端方向において１種のアミ
ノ酸の分だけ短い。正の応答は、HP-26に対して認めら
れ且つ重複しているHP-29に対して認められた。初期の
スクリーニングにおいて、正の応答はHP-52ないし57群
のHP-55（残基841-855,QGAYRAIRHIPRRIR）のみに対して
認められた。投与量応答検査を用いたより詳細な研究に
より、正の且つ好ましい応答がHP-55及びHP-56（残基84
6-860,AIRHIPRRIRQGLER）に対して認められた（図
５）。H-2t4ハプロタイプのマウス（ASEβSEαk）（表
Ｉ）は、膜T2領域においてペプチドHP-3ないし８に対し
て応答しなかった。この株のマウスは、膜T1サイトペプ
チドHP-26、並びに重複しているペプチドHP-28（残基43
2-446,NMWQEVGKAMYAPPI）及びHP-29に対して応答した。
初期のスクリーニングにおいて、正の応答は1uMの投与
量でペプチドHP-55及びHP-56に対して見られた。投与量
応答検査により、HP-55及びHP-56に対する好ましい応答
（図６）を伴う前記見解が確証された。
ｐ値を用いた刺激指数（S.I.）（実施例cpm/対照cpm） マウスの４種の株における各ペプチドに対する（対照と
比較した研究者のｔ試験実施例）が示されている。ペプ
チドは、特記しない限り２μＭの濃度で試験された。ｐ
値が統計的に充分な２よりも大きな刺激指数は、肉太活
字型で示す。a ペプチド濃度1.3μＭb ペプチド濃度１μＭc ペプチド濃度0.3μＭd gp160濃度0.1μＭe gp160濃度0.02μＭf PPD濃度25μg/ml 各株内で最も強い応答を有する10種のペプチドが同定
された。前記ペプチドは、本表の目的のために、その株
を強く刺激すると言われる（25％最大刺激ペプチド）。
試験された41種のペプチドの各々に対して、我々はその
ペプチドが株のない場合（０）或いは1,2,3,又は４種全
ての株に対して25％最大刺激ペプチドの中にあるかどう
かを決定した。各範疇の多数のペプチドが与えられた多
数の株を強く刺激することが示されている。
比較した研究者のｔ試験実施例）が示されている。ペプ
チドは、特記しない限り２μＭの濃度で試験された。ｐ
値が統計的に充分な２よりも大きな刺激指数は、肉太活
字型で示す。a ペプチド濃度1.3μＭb ペプチド濃度１μＭc ペプチド濃度0.3μＭd gp160濃度0.1μＭe gp160濃度0.02μＭf PPD濃度25μg/ml 各株内で最も強い応答を有する10種のペプチドが同定
された。前記ペプチドは、本表の目的のために、その株
を強く刺激すると言われる（25％最大刺激ペプチド）。
試験された41種のペプチドの各々に対して、我々はその
ペプチドが株のない場合（０）或いは1,2,3,又は４種全
ての株に対して25％最大刺激ペプチドの中にあるかどう
かを決定した。各範疇の多数のペプチドが与えられた多
数の株を強く刺激することが示されている。
H-2i5（AbEβbEαk）ハプロタイプのマウスは、H-2d
ハプロタイプのマウスがするようにHP-5よりもむしろ膜
T2領域においてペプチドHP-3に応答する。初期のスクリ
ーニングにおいて、HP-52ないし57群中の全てのペプチ
ドは正の応答を引き出す。しかしながら、投与量応答検
査を用いた更なる研究（図７）により、最大応答がペプ
チドHP-53及びHP-55においてみられた。
ハプロタイプのマウスがするようにHP-5よりもむしろ膜
T2領域においてペプチドHP-3に応答する。初期のスクリ
ーニングにおいて、HP-52ないし57群中の全てのペプチ
ドは正の応答を引き出す。しかしながら、投与量応答検
査を用いた更なる研究（図７）により、最大応答がペプ
チドHP-53及びHP-55においてみられた。
T1又はT2サイト及びHP-52ないし57群とは別の領域か
らのペプチドは、試験された株の幾つかに対して正であ
ることが見出された。正の応答は、試験された４種の株
のうちの３種に対して、ペプチドHP-30（残基483-497,R
DNWRSELYKYKVVK）、HP-35（残基560-581,NNLLRAIEAQQHL
LQLTVWGIK）、HP-47（残基787-801,RIVELLGRRGWEAL
K）、HP-50（残基801-815,KYWWNLLQYWSQELK）、及びHP-
51（残基806-820,LLQYWSQELKNSAVS）について見られ
た。ペプチドHP-29及びHP-30は、全ての株について正の
応答を引き出す。前記の免疫化ペプチドの幾つかは重複
する。ペプチドHP-30及びHP-33は、５種の残基において
重複する。H-2i5ハプロタイプのマウスは、HP-30に対し
て応答しなかったが、しかしペプチドHP-33（これは、
その分子のカルボキシ末端方向において９種の残基の分
だけ長い）に対して応答した。同様に、ペプチドHP-26
（膜T1サイト）に対する応答は、H-2i5マウスにおいて
は見られなかったが、しかし応答は重複しているペプチ
ドHP-29（これは、その分子のカルボキシ末端方向にお
いて８種の残基の分だけ長い）に対して見られた。全て
の株についての重複しているペプチドに対する最も顕著
な応答は、群HP-52ないし57中のペプチドに対して見ら
れた応答である。
らのペプチドは、試験された株の幾つかに対して正であ
ることが見出された。正の応答は、試験された４種の株
のうちの３種に対して、ペプチドHP-30（残基483-497,R
DNWRSELYKYKVVK）、HP-35（残基560-581,NNLLRAIEAQQHL
LQLTVWGIK）、HP-47（残基787-801,RIVELLGRRGWEAL
K）、HP-50（残基801-815,KYWWNLLQYWSQELK）、及びHP-
51（残基806-820,LLQYWSQELKNSAVS）について見られ
た。ペプチドHP-29及びHP-30は、全ての株について正の
応答を引き出す。前記の免疫化ペプチドの幾つかは重複
する。ペプチドHP-30及びHP-33は、５種の残基において
重複する。H-2i5ハプロタイプのマウスは、HP-30に対し
て応答しなかったが、しかしペプチドHP-33（これは、
その分子のカルボキシ末端方向において９種の残基の分
だけ長い）に対して応答した。同様に、ペプチドHP-26
（膜T1サイト）に対する応答は、H-2i5マウスにおいて
は見られなかったが、しかし応答は重複しているペプチ
ドHP-29（これは、その分子のカルボキシ末端方向にお
いて８種の残基の分だけ長い）に対して見られた。全て
の株についての重複しているペプチドに対する最も顕著
な応答は、群HP-52ないし57中のペプチドに対して見ら
れた応答である。
gp160分子を用いて免疫化された４種のMHCハプロタイ
プのマウス中のgp160膜蛋白質の重複しているペプチド
に対するＴ細胞増殖応答を反映した前記の結果は、膜T1
及びT2サイトは免疫化領域を表わすということを確証さ
せる。H-2k,H-2d，及びH-2t4ハプロタイプのマウスは、
膜T1サイトに応答する。H-2i5マウスは、重複している
ペプチドHP-29にたいして応答する。膜T2サイト，ペプ
チドHP-5は、H-2kハプロタイプのマウスにより認識さ
れ、一方H-2d及びH-2i5マウスは、重複しているペプチ
ドHP-3を認識する。
プのマウス中のgp160膜蛋白質の重複しているペプチド
に対するＴ細胞増殖応答を反映した前記の結果は、膜T1
及びT2サイトは免疫化領域を表わすということを確証さ
せる。H-2k,H-2d，及びH-2t4ハプロタイプのマウスは、
膜T1サイトに応答する。H-2i5マウスは、重複している
ペプチドHP-29にたいして応答する。膜T2サイト，ペプ
チドHP-5は、H-2kハプロタイプのマウスにより認識さ
れ、一方H-2d及びH-2i5マウスは、重複しているペプチ
ドHP-3を認識する。
それ故、５種のペプチド（HP-30,35,47,50,及び51）
は、試験された４種の株のうちの３種によりＴ細胞膜と
して認識されて同定され、そして２種のペプチド（HP-2
9及び33）は、試験された全ての株により認識された。
ペプチド47,50,及び51は、重複している外膜の群を形成
する。更に、ペプチドの群（HP-52ないし57）は、gp41
分子（これに、マウスの各株は応答する）のCOOH基領域
中のヘルパーＴ細胞外膜として同定された。この特徴
は、gp120分子の多数の高度に変わり得る領域に比べて
比較的維持された領域であるgp41分子中に見出されたの
で、ワクチンの製造においては特に充分なものである。
試験された４種のハプロタイプのマウスは、この群中の
異なるペプチドに応答する。
は、試験された４種の株のうちの３種によりＴ細胞膜と
して認識されて同定され、そして２種のペプチド（HP-2
9及び33）は、試験された全ての株により認識された。
ペプチド47,50,及び51は、重複している外膜の群を形成
する。更に、ペプチドの群（HP-52ないし57）は、gp41
分子（これに、マウスの各株は応答する）のCOOH基領域
中のヘルパーＴ細胞外膜として同定された。この特徴
は、gp120分子の多数の高度に変わり得る領域に比べて
比較的維持された領域であるgp41分子中に見出されたの
で、ワクチンの製造においては特に充分なものである。
試験された４種のハプロタイプのマウスは、この群中の
異なるペプチドに応答する。
H-2dハプロタイプのマウスは、ペプチドHP-55及びHP-
56に好ましく応答した。この結果は、連鎖部のＴ細胞外
膜はアミノ酸連鎖部AIRHIPRRI（HP-55及びHP-56の重複
しているアミノ酸を表わす）であってよいことを示唆し
ている（図４）。反対に、２種の固有サイトが２種の重
複しているペプチド中に存在し得る。H-2t4ハプロタイ
プのマウスは、同様な応答を示した；再び、ペプチドHP
-55及びHP-56は好ましく認識された。それ故、H-2t4ハ
プロタイプのＴ細胞のための認識サイトは、同一の９種
のアミノ酸連鎖部の地図形成をしてよい。対照的に、H-
2kハプロタイプのマウスは、最初にペプチドHP-52及びH
P-53に対して増殖応答を示し、次いでこのサイトを２種
のペプチドにより造形された９種のアミノ酸（DRVIEVVQ
G）に対して地図形成する。H-2i5ハプロタイプのマウス
は、ペプチドHP-53及びHP-55に対して最高に応答する。
前記ペプチドの重複は、Ｔ細胞外膜は８種のアミノ酸連
鎖部QGAYRAIRであるが、しかし再び、前記２種のペプチ
ドは反対に２種の固有サイトを表わし得るということを
示唆する。
56に好ましく応答した。この結果は、連鎖部のＴ細胞外
膜はアミノ酸連鎖部AIRHIPRRI（HP-55及びHP-56の重複
しているアミノ酸を表わす）であってよいことを示唆し
ている（図４）。反対に、２種の固有サイトが２種の重
複しているペプチド中に存在し得る。H-2t4ハプロタイ
プのマウスは、同様な応答を示した；再び、ペプチドHP
-55及びHP-56は好ましく認識された。それ故、H-2t4ハ
プロタイプのＴ細胞のための認識サイトは、同一の９種
のアミノ酸連鎖部の地図形成をしてよい。対照的に、H-
2kハプロタイプのマウスは、最初にペプチドHP-52及びH
P-53に対して増殖応答を示し、次いでこのサイトを２種
のペプチドにより造形された９種のアミノ酸（DRVIEVVQ
G）に対して地図形成する。H-2i5ハプロタイプのマウス
は、ペプチドHP-53及びHP-55に対して最高に応答する。
前記ペプチドの重複は、Ｔ細胞外膜は８種のアミノ酸連
鎖部QGAYRAIRであるが、しかし再び、前記２種のペプチ
ドは反対に２種の固有サイトを表わし得るということを
示唆する。
AIDSウイルスに対して免疫化サイトを構成する４種の
重複している外膜群（ペプチド３−8,26-29,47-51,及び
52-56）の発見は、AIDSウイルスに対するワクチンの発
展のために重要な意味を有する。単一ペプチドは試験さ
れた全てのマウス株において免疫化されないけれども、
幾つかのアミノ酸によるペプチド連鎖部の延長は、HP-
5,26,及び30の場合のように、より多くのハプロタイプ
のマウスからの応答を引き出す。それ故、前記の延長さ
れたペプチドは、人間の様な異部族結婚をする母集団に
対しては更に適切である。AIDS膜の比較的観察された領
域中に位置するペプチドHP-52ないし57の群の発見は、
人間接種用ワクチンのために特に満足できる。ペプチド
のこの群はgp41の細胞内の部分上に存在するけれども、
抗体と異なり、Ｔ細胞は原蛋白質が供与又は目的細胞上
に存在することを必要としないので、Ｔ細胞認識は損な
われないであろう；それらはMHC分子と結合した加工さ
れたフラグメントを認識することができる。
重複している外膜群（ペプチド３−8,26-29,47-51,及び
52-56）の発見は、AIDSウイルスに対するワクチンの発
展のために重要な意味を有する。単一ペプチドは試験さ
れた全てのマウス株において免疫化されないけれども、
幾つかのアミノ酸によるペプチド連鎖部の延長は、HP-
5,26,及び30の場合のように、より多くのハプロタイプ
のマウスからの応答を引き出す。それ故、前記の延長さ
れたペプチドは、人間の様な異部族結婚をする母集団に
対しては更に適切である。AIDS膜の比較的観察された領
域中に位置するペプチドHP-52ないし57の群の発見は、
人間接種用ワクチンのために特に満足できる。ペプチド
のこの群はgp41の細胞内の部分上に存在するけれども、
抗体と異なり、Ｔ細胞は原蛋白質が供与又は目的細胞上
に存在することを必要としないので、Ｔ細胞認識は損な
われないであろう；それらはMHC分子と結合した加工さ
れたフラグメントを認識することができる。
明らかに、本発明の重要な特徴は大部分のMHCハプロ
タイプにより認識される外膜群の発見であり、そして2,
3の残基により延長されているペプチド外膜は試験され
た全てのハプロタイプの各々により認識される単一ペプ
チドを産生するという観察である。初期のこの発見は、
特にHIV感染に関してＴ細胞免疫を引き出すことを目的
とするペプチド又はフラグメントワクチンにおけるMHC
制限及びIr遺伝子の困難な問題を克服するための手段を
提供する。
タイプにより認識される外膜群の発見であり、そして2,
3の残基により延長されているペプチド外膜は試験され
た全てのハプロタイプの各々により認識される単一ペプ
チドを産生するという観察である。初期のこの発見は、
特にHIV感染に関してＴ細胞免疫を引き出すことを目的
とするペプチド又はフラグメントワクチンにおけるMHC
制限及びIr遺伝子の困難な問題を克服するための手段を
提供する。
前記のペプチドが霊長類においても免疫化されたかど
うか、及びそれらが試験管内で原HIV膜蛋白質に応答す
る第２抗体を助けるためのヘルパーＴ細胞を用意するこ
とができるかどうかを評価するため、リーサス猿を前記
群の３種の代表的なもの、換言すればペプチドHP-5,HP-
26,及びHP-53を用いて免疫化した。図9A及び9Bに示され
る様に、グループ１の２匹の猿（RhM1,RhM2;これらは、
原膜蛋白質gp160を用いた免疫化の前に前記３種のペプ
チドの混合物を用いて免疫化された）は、グループ２の
２匹の猿（RhM3,RhM4;これらは、全gp160の前にペプチ
ドを受け取らなかった）に比べて膜蛋白質（gp41部分）
に応答する非常に増強された抗体を産生する。したがっ
て前記ペプチドは、HIVウイルス膜に応答する非常に増
強された抗体を誘導するための最初のヘルパーＴ細胞に
対して霊長類を免疫化するために使用することができ
る。更に、グループ１の猿はHP-26及びHP-53の両方に対
して良好な末梢血液単核細胞増殖応答を示した。この結
果は、前記ペプチドは試験管内でＴ細胞ヘルプ並びに増
殖を誘導することができ、そしてそれらはマウスと同様
に霊長類を免疫化するために使用することができるとい
うことを示す。
うか、及びそれらが試験管内で原HIV膜蛋白質に応答す
る第２抗体を助けるためのヘルパーＴ細胞を用意するこ
とができるかどうかを評価するため、リーサス猿を前記
群の３種の代表的なもの、換言すればペプチドHP-5,HP-
26,及びHP-53を用いて免疫化した。図9A及び9Bに示され
る様に、グループ１の２匹の猿（RhM1,RhM2;これらは、
原膜蛋白質gp160を用いた免疫化の前に前記３種のペプ
チドの混合物を用いて免疫化された）は、グループ２の
２匹の猿（RhM3,RhM4;これらは、全gp160の前にペプチ
ドを受け取らなかった）に比べて膜蛋白質（gp41部分）
に応答する非常に増強された抗体を産生する。したがっ
て前記ペプチドは、HIVウイルス膜に応答する非常に増
強された抗体を誘導するための最初のヘルパーＴ細胞に
対して霊長類を免疫化するために使用することができ
る。更に、グループ１の猿はHP-26及びHP-53の両方に対
して良好な末梢血液単核細胞増殖応答を示した。この結
果は、前記ペプチドは試験管内でＴ細胞ヘルプ並びに増
殖を誘導することができ、そしてそれらはマウスと同様
に霊長類を免疫化するために使用することができるとい
うことを示す。
AIDSのための生きているウイルスワクチン及び全て殺
した又はサブユニットウイルスワクチンは、潜在的な安
全性に対する危険を有するということは、ここで記載す
るのが適切であろう。対照的に、本文中に記載された様
な合成ペプチドは、本来安全なものである。更に、全ウ
イルス蛋白質に相当するがしかし組み換えDNA技術によ
り作られた分子は保護外膜に加えて免疫応答性の抑制を
潜在的に引き出す構造、及び抗体を引き出す構造を含
み、保護的であるよりもむしろウイルスの摂取を増強し
且つそれ故有毒性であり得る。これより、適する免疫型
を引き出し且つ他の有毒な作用を有しない選択されたペ
プチドのみを含むワクチンは、勿論、HIVの様な困難な
ウイルスのためにより望まれるべきである。本発明はそ
の様なワクチンを提供する。
した又はサブユニットウイルスワクチンは、潜在的な安
全性に対する危険を有するということは、ここで記載す
るのが適切であろう。対照的に、本文中に記載された様
な合成ペプチドは、本来安全なものである。更に、全ウ
イルス蛋白質に相当するがしかし組み換えDNA技術によ
り作られた分子は保護外膜に加えて免疫応答性の抑制を
潜在的に引き出す構造、及び抗体を引き出す構造を含
み、保護的であるよりもむしろウイルスの摂取を増強し
且つそれ故有毒性であり得る。これより、適する免疫型
を引き出し且つ他の有毒な作用を有しない選択されたペ
プチドのみを含むワクチンは、勿論、HIVの様な困難な
ウイルスのためにより望まれるべきである。本発明はそ
の様なワクチンを提供する。
シース（Cease）他,1987,Proc.Natl.Adad.Sci.84:424
9-4253による我々の研究は、AIDSウイルスに対するヘル
パーＴ細胞免疫性を刺激する２種の合成ペプチドを定義
する。しかしながら、前記ペプチドは組織適合性型のほ
とんど全ての個々のウイルスにおいては見られない。全
母集団を覆うためには、追加のペプチドを必要とするで
あろう。初期における本発明は、試験されたマウス並び
に試験された数種類の猿の全てのMHC型からＴ細胞によ
り認識されるものを包含するその様な追加のペプチドを
提供する。
9-4253による我々の研究は、AIDSウイルスに対するヘル
パーＴ細胞免疫性を刺激する２種の合成ペプチドを定義
する。しかしながら、前記ペプチドは組織適合性型のほ
とんど全ての個々のウイルスにおいては見られない。全
母集団を覆うためには、追加のペプチドを必要とするで
あろう。初期における本発明は、試験されたマウス並び
に試験された数種類の猿の全てのMHC型からＴ細胞によ
り認識されるものを包含するその様な追加のペプチドを
提供する。
診断上の又は予後の使用としては、抗体は一般に測定
される免疫性応答のみである。しかしながら、感染した
個体は抗体を作らないであろうし、且つそれ故負として
検査されるであろうから、感染後週ないし月の範囲の間
隔がある。この期間中、前記の個体は他を感染させるか
又は感染された血液を与える。ヘルパーＴ細胞は、抗体
よりも免疫性応答においてより早く発現すると信じられ
ており、そしてそれ故ヘルパーＴ細胞を検出するための
検査は一般に使用される抗体ベースの検査よりも早く感
染を検出することができる。限られた精製蛋白質のみを
ウイルスから得ることができ、そして組み換え分子には
通常、誤った正の結果を与え得るベクターからの他の物
質により汚染されている。これに加えて、前記物質の多
くは有糸分裂誘発性であることが証明され、それ故誤っ
た正の結果を与えるのであろう。対照的に、本文中に記
載された様な合成ペプチドは、高度に精製され且つ有糸
分裂誘発性ではない。更に、本文中に記載された異なる
ペプチドを使用することにより、病気の進行によって変
わり得るＴ細胞の異なる組を検出することができ、そし
てこれは全蛋白質抗体を使用することを特徴としないで
あろう。それ故、本発明の合成ペプチドは、病気の進行
を決定するために全く有効である。これは、例えばこの
分野の当業者に公知の末梢血液増殖芽細胞転換分析等の
標準的な免疫試験を行うことにより容易に成される。
される免疫性応答のみである。しかしながら、感染した
個体は抗体を作らないであろうし、且つそれ故負として
検査されるであろうから、感染後週ないし月の範囲の間
隔がある。この期間中、前記の個体は他を感染させるか
又は感染された血液を与える。ヘルパーＴ細胞は、抗体
よりも免疫性応答においてより早く発現すると信じられ
ており、そしてそれ故ヘルパーＴ細胞を検出するための
検査は一般に使用される抗体ベースの検査よりも早く感
染を検出することができる。限られた精製蛋白質のみを
ウイルスから得ることができ、そして組み換え分子には
通常、誤った正の結果を与え得るベクターからの他の物
質により汚染されている。これに加えて、前記物質の多
くは有糸分裂誘発性であることが証明され、それ故誤っ
た正の結果を与えるのであろう。対照的に、本文中に記
載された様な合成ペプチドは、高度に精製され且つ有糸
分裂誘発性ではない。更に、本文中に記載された異なる
ペプチドを使用することにより、病気の進行によって変
わり得るＴ細胞の異なる組を検出することができ、そし
てこれは全蛋白質抗体を使用することを特徴としないで
あろう。それ故、本発明の合成ペプチドは、病気の進行
を決定するために全く有効である。これは、例えばこの
分野の当業者に公知の末梢血液増殖芽細胞転換分析等の
標準的な免疫試験を行うことにより容易に成される。
要約すると、本発明は４種の異なった多数組織適合性
型においてヘルパーＴ細胞によりAIDSウイルス膜蛋白質
内の多数の認識サイトであることが示された合成ペプチ
ドの組を提供する。前記ペプチドは、上記本文中に記載
されている特定のアミノ酸残基と共にラットナー（Ratn
er）他によりNature 313:277,1985に記載されたAIDSウ
イルス膜連鎖部（BH10単離体）の残基828-860（及びそ
の中で重複しているペプチド）、109-124、432-446、43
7-451、483-497、492-506、560-581、787-801、及び806
-820NI相当する。本発明は、前記サイトを含むために選
択された全ての組み換え又は原ペプチド及び、例えばAI
DSウイルスの他の変性単離体上の同一サイトに相当する
前記連鎖部に重複しているか又は前記連鎖部の変形を含
む全ての合成ペプチド；何らかの運搬体、助剤、施薬の
道における、又はＴ細胞免疫性を引き出す他の物質と配
合した、免疫化のためのその用途；及びAIDSウイルスに
対するＴ細胞免疫性の性質及び程度を評価するための診
断上の又は予後の試薬を包含する。勿論、前記ペプチド
は単独で又は本発明の１種より多くのペプチドとの配合
物として使用することができる。免疫応答性性を誘導す
るための方法は、HIV膜蛋白質による感染を許容し得る
ホストに対して、HIV感染に対するヘルパーＴ細胞免疫
性の増殖を誘導するための本発明の抗原の有効量を与え
ることから成る。HIV膜蛋白質に対する暴露を決定する
ための検査は、血液試料からの末梢血液単核細胞を本発
明のペプチドと共に培養し、次いで増殖、芽細胞転換又
はリンフォカインの生成を慣用の免疫学的技術、例えば
上記技術（正の反応は、固体がHIV膜蛋白質に暴露され
たことを示す）により決定することから成る。
型においてヘルパーＴ細胞によりAIDSウイルス膜蛋白質
内の多数の認識サイトであることが示された合成ペプチ
ドの組を提供する。前記ペプチドは、上記本文中に記載
されている特定のアミノ酸残基と共にラットナー（Ratn
er）他によりNature 313:277,1985に記載されたAIDSウ
イルス膜連鎖部（BH10単離体）の残基828-860（及びそ
の中で重複しているペプチド）、109-124、432-446、43
7-451、483-497、492-506、560-581、787-801、及び806
-820NI相当する。本発明は、前記サイトを含むために選
択された全ての組み換え又は原ペプチド及び、例えばAI
DSウイルスの他の変性単離体上の同一サイトに相当する
前記連鎖部に重複しているか又は前記連鎖部の変形を含
む全ての合成ペプチド；何らかの運搬体、助剤、施薬の
道における、又はＴ細胞免疫性を引き出す他の物質と配
合した、免疫化のためのその用途；及びAIDSウイルスに
対するＴ細胞免疫性の性質及び程度を評価するための診
断上の又は予後の試薬を包含する。勿論、前記ペプチド
は単独で又は本発明の１種より多くのペプチドとの配合
物として使用することができる。免疫応答性性を誘導す
るための方法は、HIV膜蛋白質による感染を許容し得る
ホストに対して、HIV感染に対するヘルパーＴ細胞免疫
性の増殖を誘導するための本発明の抗原の有効量を与え
ることから成る。HIV膜蛋白質に対する暴露を決定する
ための検査は、血液試料からの末梢血液単核細胞を本発
明のペプチドと共に培養し、次いで増殖、芽細胞転換又
はリンフォカインの生成を慣用の免疫学的技術、例えば
上記技術（正の反応は、固体がHIV膜蛋白質に暴露され
たことを示す）により決定することから成る。
本発明のAIDSのための診断上の又は予後のためのキッ
トは、単独又は混合物の何れかの本発明の抗原性ペプチ
ド、及び検査を行うための指令材料を含む容器から成
る。
トは、単独又は混合物の何れかの本発明の抗原性ペプチ
ド、及び検査を行うための指令材料を含む容器から成
る。
本文中に記載された実施例及び態様は単に説明の目的
のためのものであり、そしてその範囲内の種々の改良及
び変化はこの技術分野の当業者に示唆されるであろうし
且つ本願の思想及び範囲及び添付された請求の範囲の範
囲内に含まれているということが理解される。
のためのものであり、そしてその範囲内の種々の改良及
び変化はこの技術分野の当業者に示唆されるであろうし
且つ本願の思想及び範囲及び添付された請求の範囲の範
囲内に含まれているということが理解される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ヘイル，ポーラ エム. アメリカ合衆国，メリーランド 20852, ロックヴィル，パークローン テラス 5104 アパートメント ナンバー 201 (72)発明者 ホスマリン，アン アメリカ合衆国，メリーランド 20814, ベテスダ ナンバー202，ウェイマウス ストリート 10513 (72)発明者 マーガレット，ハナ アメリカ合衆国，メリーランド 20852, ロックヴィル ナンバー102，コング レッショナル レイン 252 (72)発明者 スポウジ，ジョン エル. アメリカ合衆国，メリーランド 20851, ロックヴィル，ツウィンブロック パー クウェイ 12813 (72)発明者 コーネット，ジェイムス エル. アメリカ合衆国，アイオワ 50010，ア メス，トレイ パインス サークル 2814 (56)参考文献 欧州公開273716（ＥＰ，Ａ１) Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ ｉ．ＵＳＡ 第85巻（1988年３月）ｐ ｐ．1932−1936 Ｎａｔｕｒｅ 第328巻（1987）ＰＰ. 721−723
Claims (4)
- 【請求項１】少なくとも３種の異なった主要組織適合性
型の個体中で、HIV膜蛋白質を発現する細胞を認識する
ことができるＴ細胞の増殖を刺激する合成ペプチド抗原
であって、以下の群： EQMHEDIISLWDQSL; HEDIISLWDQSLR; DIISLWDQSLKPCVK; WDQSLKPCVKLTPLCV; NMWQEVGKAMYAPPI; VGKAMYAPPISGQIR; RDNWRSELYKYKVVK; KYKVVKIEPLGVAPT; NNLLRAIEAQQHLLQLTVWGIK; RIVELLGRRGWEALK; KYWWNLLQYWSQELK; LLQYWSQELKNSAVS; AVAEGTDRVIEVVQG; DRVIEVVQGAYRAIR; VIEVVQGAYRAIRHI; QGAYRAIRHIPRRIR から選択されたアミノ酸配列を有する抗原。 - 【請求項２】HIV膜蛋白質に対するＴ細胞応答を引き出
すのに充分な量の抗原からなるワクチンであって、前記
抗原は以下の群： EQMHEDIISLWDQSL; HEDIISLWDQSLR; DIISLWDQSLKPCVK; WDQSLKPCVKLTPLCV; NMWQEVGKAMYAPPI; VGKAMYAPPISGQIR; RDNWRSELYKYKVVK; KYKVVKIEPLGVAPT; NNLLRAIEAQQHLLQLTVWGIK; RIVELLGRRGWEALK; KYWWNLLQYWSQELK; LLQYWSQELKNSAVS; AVAEGTDRVIEVVQG; DRVIEVVQGAYRAIR; VIEVVQGAYRAIRHI; QGAYRAIRHIPRRIR; AIRHIPRRIRQGLER から選択されたアミノ酸配列を有するワクチン。 - 【請求項３】血液試料からの末梢血液単核細胞を、以下
の群： EQMHEDIISLWDQSL; HEDIISLWDQSLR; DIISLWDQSLKPCVK; WDQSLKPCVKLTPLCV; NMWQEVGKAMYAPPI; VGKAMYAPPISGQIR; RDNWRSELYKYKVVK; KYKVVKIEPLGVAPT; NNLLRAIEAQQHLLQLTVWGIK; RIVELLGRRGWEALK; KYWWNLLQYWSQELK; LLQYWSQELKNSAVS; AVAEGTDRVIEVVQG; DRVIEVVQGAYRAIR; VIEVVQGAYRAIRHI; QGAYRAIRHIPRRIR; AIRHIPRRIRQGLER から選択されたアミノ酸配列を有するペプチドと共に培
養し、 次いで増殖、芽細胞転換、又はリンフォカインの生成
を、何れかの適用し得る慣用の免疫学的技術であって、
正の反応は血液試料がHIV膜蛋白質に暴露されたことを
示す免疫学的技術により決定することから成る、 HIV膜蛋白質に対する暴露を決定するための検査方法。 - 【請求項４】異なったペプチド抗原を含む少なくとも二
つの容器から成る、HIV膜蛋白質に対する暴露を決定す
るためのキットであって、 前記ペプチド抗原は、少なくとも３種の異なった主要組
織適合性型の個体中で、HIV膜蛋白質を発現する細胞を
認識することができるＴ細胞の増殖を刺激するペプチド
抗原であって、各々、以下の群： EQMHEDIISLWDQSL; HEDIISLWDQSLR; DIISLWDQSLKPCVK; WDQSLKPCVKLTPLCV; NMWQEVGKAMYAPPI; VGKAMYAPPISGQIR; RDNWRSELYKYKVVK; KYKVVKIEPLGVAPT; NNLLRAIEAQQHLLQLTVWGIK; RIVELLGRRGWEALK; KYWWNLLQYWSQELK; LLQYWSQELKNSAVS; AVAEGTDRVIEVVQG; DRVIEVVQGAYRAIR; VIEVVQGAYRAIRHI; QGAYRAIRHIPRRIR; AIRHIPRRIRQGLER から選択されたアミノ酸配列を有する抗原であるキッ
ト。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/222,684 US5030449A (en) | 1988-07-21 | 1988-07-21 | Synthetic vaccine against AIDS virus |
| US222,684 | 1988-07-21 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03504384A JPH03504384A (ja) | 1991-09-26 |
| JP2676166B2 true JP2676166B2 (ja) | 1997-11-12 |
Family
ID=22833252
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1508125A Expired - Fee Related JP2676166B2 (ja) | 1988-07-21 | 1989-07-19 | エイズウイルスに対する合成ワクチン |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5030449A (ja) |
| EP (1) | EP0429477B1 (ja) |
| JP (1) | JP2676166B2 (ja) |
| AT (1) | ATE144143T1 (ja) |
| AU (1) | AU624628B2 (ja) |
| CA (1) | CA1339240C (ja) |
| DE (1) | DE68927348T2 (ja) |
| IL (1) | IL91007A (ja) |
| WO (1) | WO1990000901A1 (ja) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5939074A (en) * | 1986-12-30 | 1999-08-17 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Multideterminant peptide antigens |
| US5128319A (en) * | 1987-08-28 | 1992-07-07 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Prophylaxis and therapy of acquired immunodeficiency syndrome |
| US6210873B1 (en) | 1987-08-28 | 2001-04-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for the priming of specific cytotoxic T-lymphocyte response |
| US5456924A (en) * | 1988-12-23 | 1995-10-10 | Immunotec Research Corporation Ltd. | Method of treatment of HIV-seropositive individuals with dietary whey proteins |
| EP0362909A3 (en) * | 1988-08-26 | 1990-11-14 | Akzo N.V. | Synthetic polypeptides immunochemically reactive with hiv-antibodies |
| CA2035576A1 (en) * | 1990-02-07 | 1991-08-08 | Alexander R. Neurath | Conformational epitopes of human immunodeficiency virus envelope glycoprotein gp120 hiv-1 |
| BR9105921A (pt) * | 1990-09-25 | 1993-03-02 | Hiver Ltd | Substancia,vacina contra aids,tecnica de diagnostico para o deteccao de uma substancia,estojo,processo para o ensaio de uma atividade anti-aids de uma substancia e processo para a fabricacao de uma vacina |
| WO1992016234A1 (en) * | 1991-03-22 | 1992-10-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method of modulating mammalian t-cell response |
| US6419931B1 (en) * | 1991-08-26 | 2002-07-16 | Epimmune Inc. | Compositions and methods for eliciting CTL immunity |
| DK0601108T3 (da) * | 1991-08-29 | 2000-04-17 | Us Gov Health & Human Serv | Multideterminante peptidantigener, som stimulerer T-hjælpelymfocytrespons til HIV hos en gruppe mennesker |
| AU666160B2 (en) * | 1991-12-02 | 1996-02-01 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Compositions for eliciting cytotoxic T-lymphocyte responses against viruses |
| WO1993019775A1 (en) * | 1992-03-31 | 1993-10-14 | Medimmune, Inc. | Administration of liposomes containing peptides or proteins including ctl eptitopes of hiv proteins |
| ES2139017T3 (es) * | 1992-07-20 | 2000-02-01 | Univ Duke | Compuestos que inhiben la replicacion del vih. |
| DE4228787A1 (de) * | 1992-08-29 | 1994-03-03 | Chemotherapeutisches Forschungsinstitut Georg Speyer Haus | Neue HIV-1-Virusisolate eines Subtyps, Vakzine gegen HIV-1-Virusinfektionen dieses Subtyps und Verfahren zu ihrer Herstellung, Verwendung der HIV-1-Virusisolate |
| JP3277045B2 (ja) * | 1992-10-06 | 2002-04-22 | デイド・ベーリング・マルブルク・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング | Ｈｉｖ−グループのレトロウイルスおよびその使用 |
| US5607914A (en) * | 1993-01-13 | 1997-03-04 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Synthetic antimicrobial peptides |
| US5869624A (en) * | 1993-03-26 | 1999-02-09 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | HIV-1 vaccines, antibody compositions related thereto, and therapeutic and prophylactic uses thereof |
| US5603933A (en) * | 1993-08-31 | 1997-02-18 | Board Of Regents, The University Of Texas | CD4 peptides for binding to viral envelope proteins |
| DE4405810A1 (de) | 1994-02-23 | 1995-08-24 | Behringwerke Ag | Von einem Retrovirus aus der HIV-Gruppe abgeleitete Peptide und deren Verwendung |
| US6749856B1 (en) * | 1997-09-11 | 2004-06-15 | The United States Of America, As Represented By The Department Of Health And Human Services | Mucosal cytotoxic T lymphocyte responses |
| KR20020075789A (ko) | 2000-02-04 | 2002-10-05 | 듀크 유니버시티 | 인체 면역결핍 바이러스 백신 |
| WO2003008537A2 (en) * | 2001-04-06 | 2003-01-30 | Mannkind Corporation | Epitope sequences |
| AU2005321904B2 (en) * | 2004-12-29 | 2012-07-12 | Mannkind Corporation | Methods to elicit, enhance and sustain immune responses against MHC class I-restricted epitopes, for prophylactic or therapeutic purposes |
| CA2793959C (en) | 2010-03-25 | 2019-06-04 | Oregon Health & Science University | Cmv glycoproteins and recombinant vectors |
| US20140065601A1 (en) * | 2011-03-23 | 2014-03-06 | Tamar Jehuda-Cohen | Method and kit for estimating human immunodeficiency virus (hiv) incidence |
| WO2012170765A2 (en) | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Oregon Health & Science University | Cmv glycoproteins and recombinant vectors |
| CA2789539A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-12 | International Aids Vaccine Initiative | Immunoselection of recombinant vesicular stomatitis virus expressing hiv-1 proteins by broadly neutralizing antibodies |
| US9402894B2 (en) | 2011-10-27 | 2016-08-02 | International Aids Vaccine Initiative | Viral particles derived from an enveloped virus |
| ES2631608T3 (es) | 2012-06-27 | 2017-09-01 | International Aids Vaccine Initiative | Variante de la glicoproteína Env del VIH-1 |
| EP2848937A1 (en) | 2013-09-05 | 2015-03-18 | International Aids Vaccine Initiative | Methods of identifying novel HIV-1 immunogens |
| US10058604B2 (en) | 2013-10-07 | 2018-08-28 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble HIV-1 envelope glycoprotein trimers |
| DK3157529T3 (da) | 2014-06-17 | 2021-11-08 | Univ New York State Res Found | Ship-hæmning til at inducere aktivering af naturlige dræberceller |
| EP3069730A3 (en) | 2015-03-20 | 2017-03-15 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble hiv-1 envelope glycoprotein trimers |
| US9931394B2 (en) | 2015-03-23 | 2018-04-03 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble HIV-1 envelope glycoprotein trimers |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1987002775A1 (en) * | 1985-10-24 | 1987-05-07 | Southwest Foundation For Biomedical Research | Synthetic peptides and use for diagnosis and vaccination for aids and arc |
| EP0273716B1 (en) * | 1986-12-30 | 1993-08-11 | THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the Secretary United States Department of Commerce | Synthetic peptides which induce cellular immunity to the aids virus and aids viral proteins |
| EP0400076B1 (en) * | 1988-01-26 | 1996-05-15 | THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the Secretary United States Department of Commerce | A synthetic antigen evoking anti-hiv response |
| EP0330359A3 (en) * | 1988-02-25 | 1991-06-05 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Composition useful in the diagnosis and treating of hiv-1 infection |
-
1988
- 1988-07-21 US US07/222,684 patent/US5030449A/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-07-17 IL IL9100789A patent/IL91007A/en not_active IP Right Cessation
- 1989-07-19 DE DE68927348T patent/DE68927348T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-07-19 JP JP1508125A patent/JP2676166B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1989-07-19 WO PCT/US1989/003123 patent/WO1990000901A1/en active IP Right Grant
- 1989-07-19 AU AU39670/89A patent/AU624628B2/en not_active Ceased
- 1989-07-19 EP EP89908567A patent/EP0429477B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-07-19 AT AT89908567T patent/ATE144143T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-07-20 CA CA000606251A patent/CA1339240C/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Ｎａｔｕｒｅ 第３２８巻（１９８７）ＰＰ．７２１−７２３ |
| Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ 第８５巻（１９８８年３月）ｐｐ．１９３２−１９３６ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5030449A (en) | 1991-07-09 |
| AU624628B2 (en) | 1992-06-18 |
| JPH03504384A (ja) | 1991-09-26 |
| IL91007A (en) | 1995-08-31 |
| EP0429477B1 (en) | 1996-10-16 |
| DE68927348D1 (de) | 1996-11-21 |
| EP0429477A4 (en) | 1991-11-13 |
| ATE144143T1 (de) | 1996-11-15 |
| DE68927348T2 (de) | 1997-02-13 |
| EP0429477A1 (en) | 1991-06-05 |
| AU3967089A (en) | 1990-02-19 |
| WO1990000901A1 (en) | 1990-02-08 |
| IL91007A0 (en) | 1990-02-09 |
| CA1339240C (en) | 1997-08-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2676166B2 (ja) | エイズウイルスに対する合成ワクチン | |
| AU2007202739B2 (en) | HIV peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by HIV | |
| JP5814331B2 (ja) | Ｈｉｖペプチド、抗原、ワクチン組成物、免疫学的検定キット及びｈｉｖによって誘発された抗体を検出する方法 | |
| AU2001282706A1 (en) | HIV peptides from conserved in gag p17 and 924 and their application in E.G. vaccines | |
| JP2003529319A (ja) | ＨＩＶ−１ｇｐ４１を標的化する広範に中和する抗体を誘発する方法 | |
| JP2004509601A (ja) | 非感染性ｈｉｖ様粒子の組換え発現 | |
| JPH05505616A (ja) | 天然のコンホメーションを保持している精製ｇｐ１２０組成物 | |
| IE83584B1 (en) | Purified gp120 composition retaining natural conformation | |
| WO2005090391A1 (en) | Novel tat complexes, and vaccines comprising them | |
| EP0426314B1 (en) | HIV related peptides | |
| Girard et al. | Candidate vaccines for HIV | |
| AU694204B2 (en) | Methods to diagnose and treat HIV-1 infection |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |