JP2599599B2 - 生理活性物質ｆａ−４２８３，その誘導体および製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は新規生理活性物質FA-4283,その誘導体および
製造法に関する。

従来の技術 肥満は、脂肪組織での脂肪が過剰蓄積する病態であ
り、この状態になると糖尿病，高脂血症，循環器疾患，
関節炎などいわゆる成人病が合併して多く見られること
は良く知られていることであって、これらの脂肪の過剰
の蓄積が直接又は間接の原因となっていることが明らか
にされている。したがって脂肪合成能が阻害し脂肪蓄積
を軽減することによってこれら病態の治療および予防が
可能であると考えられる。

発明が解決しようとする問題点 肥満，肥満性II型糖尿病及びこれらの症状を伴う高脂
血症などを対象とした新規糖・脂質代謝異常の改善剤の
開発を目的として、脂肪酸の合成を阻害する物質を微生
物代謝産物中に求め、鋭意検索を行なった結果、ペニシ
リウム属に属する微生物の培養液中に脂肪酸の合成を阻
害する物質を見い出し、これを単離したところ、該物質
が新規物質であること、また優れた脂肪酸合成阻害作用
を有することを見い出し、これに基いてさらに研究した
結果、本発明を完成するにいたった。

問題点を解決するための手段 本発明は、一般式 ［式中、Ｒは水素または低級アルキルを示し、3,4−お
よび３′,4′−二重結合は飽和されていてもよい］で表
わされる化合物、およびペニシリウム属に属する生理活
性物質FA-4283生産能を有する微生物を培地に培養し、
培養液中に生理活性物質FA-4283を生成蓄積せしめ、こ
れを採取し、所望により得られたFA-4283をアルキル化
反応または（および）還元反応に付すことを特徴とする
化合物（Ｉ）の製造法を提供するものである。

化合物（Ｉ）に関し、Ｒで示される低級アルキルはC
_1-3アルキルが好ましい。とりわけＲとして水素または
メチルであることが好ましい。

３位と４位の炭素原子および３′位と４′位の炭素原
子は、それぞれ二重結合で結ばれていてもよく、またこ
れらの二重結合は飽和されていてもよい。

本発明で用いることができる微生物としては、ペニシ
リウム属に属し生理活性FA-4283を生産する菌であれば
いずれでもよい。たとえば、日本国愛知県蒲群市の草地
土壌より分離したかびに属するNo.4283株などは具体的
に使用しうる例であって、以下の菌学的性質を有する。

生育： １）麦芽エキス寒天培地 生育は旺盛で24℃,2週間後のコロニーの直径は5.0〜
6.0cmであった。表面はやや盛り上がったビロード状〜
綿状の菌糸体よりなり、周辺部はややうすく、外縁は規
則正しく縁取られている。気生菌糸の発達，分生子の形
成は非常によい。中央部は黄緑色〜暗緑色，周辺部はあ
ざやかな黄緑色を呈する。気生菌糸上部は淡褐色を呈す
る。裏面は淡黄褐色〜暗褐色を呈する。

可溶性色素の形成なし。

２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地 生育は旺盛で24℃,2週間後のコロニーの直径は4.2〜
5.0cmであった。表面はやや盛り上がった綿状〜羊毛状
の菌糸体よりなり、しばしば紐状菌糸体が発達する。外
縁は規則正しく縁取られている。気生菌糸の発達，分生
子の形成は非常によい。中央部は淡褐色〜暗緑色，周辺
部は黄緑色を呈する。気生菌糸表面に水滴を貯める。裏
面は淡黄褐色〜赤褐色を呈する。古くなると淡赤色の可
溶性色素をわずかに生成する。

pH3〜10のいずれでも生育は良好，生育温度範囲は14
〜37℃で20〜32℃が至適温度である。39℃では生育しな
い。

３）ツアペック寒天培地 生育は中程度で24℃,2週間後のコロニーの直径は3.2
〜4.0cmであった。中央部がやや盛り上がったビロード
状の菌糸体よりなり、外縁はやや不規則な波形であっ
た。気生菌糸の発達はよく、中央部は淡赤褐色がかった
黄色，周辺部は白色を呈する。分生子はほとんど形成さ
れない。裏面は淡黄褐色〜赤褐色を呈する。可溶性色素
の形成なし。

形態： 分生子柄：気生菌糸上，通常はよく発達した紐状菌糸
体上に形成される。100〜200×２〜３μ，隔壁あり、外
部は滑面，しばしば着色する。

ペニシリ：頂端生の複輪生体−対称体，時には不整形と
なる。

メトレ:7〜10×1.7〜2.2μ,4〜６本が輪生体となる。密
着性でほとんど平行状である。円筒形。

フイアランド:10〜12×1.5〜2.0μ,4〜６本がほとんど
密着してメトレ上で輪生体となる。円筒形で先端部が細
くなる。

分生子：だ円形〜亜球形,1.5〜２×２〜2.5μ，滑面，
フィアロ型に形成され、連鎖する。

以上の諸性質を、D.Malloch著、右田川俊一訳「かび
の分離・培養と同定」（昭和58年，医歯薬出版株式会
社）51頁記載の同定検索表と照合すると本菌株がペニシ
リウム属（Penicillium）に属することは明らかであ
る。さらにK.B.Raperら著「A Manual of the Penicilli
a」（1949,The Williams ＆ Wilkins Company）記載の
ペニシリウム属かびの諸性質と照合すると、本菌株はBi
verticillata-Symmetrica Sectionに属し、被子器の形
成は認められず、コロニー上の菌糸および分生子柄の状
態などから、Penicillium funiculosumに一致すると考
えられ、Penicillium funiculosum No.4283と同定し
た。又、本菌株とPenicillium funiculosum IFO 6585株
とを比較培養したところ、分類学的性質において差異が
認められなかった。

上記Penicillium funiculosum No.4283株は財団法人
発酵研究所に昭和61年８月29日から寄託番号IFO-32058
として寄託されており、又本微生物は、日本国通商産業
省工業技術院微生物工業技術研究所（FRI,日本国茨城県
筑波郡谷田部町東１丁目１番３号）に昭和61年９月９日
から寄託番号FERM P-8966として寄託され、該寄託はブ
タペスト条約に基き寄託番号FERM BP-1420として保管さ
れている。

ペニシリウム属菌は、微生物の一般的性質として自然
的にまたは変異剤によって変異を起し得る。たとえばＸ
線，ガンマー線，紫外線等の放射線の照射，更には単胞
子分離、種々の薬剤による処理または薬剤を含有する培
地上での培養、その他の手段で変異させて得られる多く
の変異株、あるいは自然的に得られた突然変異株等であ
っても、FA-4283を生産する性質を有するものはすべて
本発明の方法に利用し得る。

本発明方法の培養に用いられる培地は用いられる菌株
が利用し得る栄養源を含むものなら、液状でも固状でも
よいが、大量を処理するときには液体培地を用いるのが
より適当である。培地には同化し得る炭素源，消化し得
る窒素源，無機物質，微量栄養素が適宜配合される。炭
素源としては、たとえばブドウ糖，乳糖，ショ糖，麦芽
糖，デキストリン，でん粉，グリセリン，マンニトー
ル，ソルビトール，油脂類（例、大豆油，オリーブ油，
ヌカ油，ゴマ油，ラード油，チキン油など）、各種脂肪
酸類（例、ラウリン酸，ミリスチン酸，パルミチン酸，
ステアリン酸，オレイン酸など）、窒素源としては、た
とえば肉エキス，酵母エキス，乾燥酵母，大豆粉，コー
ン・スチープ・リカー，ペプトン，綿実粉，廃糖密，尿
素，アンモニウム塩類（例、硫酸アンモニウム，塩化ア
ンモニウム，硝酸アンモニウム，酢酸アンモニウムな
ど）その他が用いられる。さらにナトリウム，カリウ
ム，ウルシウム，マグネシウムなどを含む塩類，鉄，マ
ンガン亜鉛，コバルト，ニッケルなどの金属塩類，リン
酸，ホウ酸などの塩類や酢酸，プロピオン酸などの有機
酸の塩類が適宜用いられる。その他、アミノ酸（例、グ
ルタミン酸，アスパラギン酸，アラニン，リジン，バリ
ン，メチオニン，プロリン等），ペプチド（例、ジペプ
チド，トリペプチド等），ビタミン類（例、B₁,B₂，ニ
コチン酸，B₁₂,C等），核酸類（例、プリン，ピリミジ
ンおよびその誘導体）等を含有させてもよい。もちろん
培地のpHを調節する目的で無機または有機の酸，アルカ
リ類，緩衝剤等を加え、あるいは消泡の目的で油脂類，
表面活性剤等の適量が添加される。

培養の手段は静置培養でも、振盪培養あるいは通気攪
拌培養法等の手段を用いてもよい。大量の処理には、い
わゆる深部通気攪拌培養によるのが望ましいことはいう
までもない。培養の条件は培地の状態，組成，菌株の種
類，培養の手段等によって一定しないのは当然である
が、それらは通常約15℃〜37℃の温度で、初発pH約３〜
10付近に選択するのがよい。とりわけ、培養中期の温度
は約20℃〜32℃，また初発pHは約４〜６の条件が望まし
い。培養期間も前記の諸条件により一定しないが、該生
理活性物質濃度が最大となるまで培養するのがよい。こ
れに要する時間は液体培地を用いる振盪培養または通気
攪拌培養の場合は通常約２〜14日間程度である。

生成したFA-4283は培養ろ液及び菌体中に存在するの
で、培養物を遠心分離あるいはろ過によって上澄液と菌
体とに分離し、その上清液及び菌体から、それぞれ精製
することもできるが、培養物にメタノールなどの有機培
養を添加した後、培養物から、直接に精製する方がより
有利である。

化合物FA-4283を、培養液から採取するには、当該物
質が中性脂溶性物質であるので、このような微生物代謝
産物を採取する為に通常用いられる分離，精製の手段が
適宜利用される。例えば、不純物との溶解度の差を利用
する方法，活性炭，非イオン性ハイポーラス樹脂，シリ
カゲル，アルミナ等の各種担体を用いる吸着クロマトグ
ラフィーなどがそれぞれ単独又は組合わせて利用され
る。

培養物中に生産されるFA-4283物質を採取するには、
まず菌体と培養上清をろ過等により、分離してそれぞ
れ、有機溶媒で抽出するか又は、培養液に直接有機溶媒
例えは、メタノール，アセトン，酢酸エチル等化合物FA
-4283を溶解し得る有機溶媒を加えて攪拌抽出すること
により、当該物質を得ることもできる。

培養液，培養ろ液或いは菌体より当該物質を抽出する
のに用いられる有機溶媒としては、例えば、酢酸エチル
などの脂肪酸エステル類，ブタノールなどのアルコール
類，クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類，アセト
ンなどのケトン類などが挙げられる。化合物FA-4283を
含む抽出液は、濃縮後、シリカゲル等の吸着担体に吸着
させ、適当な溶媒で展開することにより精製される。

吸着剤として例えば、シリカゲル（Merck社,Kieselge
lなど）を用いる場合、展開溶媒として、一般に極性有
機溶媒と非極性溶媒の組合わせ、例えばメタノールとク
ロロホルム又は塩化メチレン，或いは酢酸エチルとｎ−
ヘキサンなどの混合溶媒が利用される。即ち、初めによ
り非極性の溶媒で展開した後、次第により極性の溶媒の
比率を増して溶出することにより、不純物と分離され
る。

不純物の量が多い場合、これら有機溶媒の組合わせを
変え、クロマトグラフィーを繰り返すことにより、精製
された化合物FA-4283を得ることができる。

かくして製造される生理活性物質FA-4283の物理化学
的性状は次に示す通りである。

１）形状：淡黄色結晶性固体 ２）融点:75℃〜95℃ ３）元素分析値％： C,74.09,H,8.27,N,5.44 ４）分子量:259（質量分析による） ５）推定分子式：C₁₆H₂₁NO₂ ６）比旋光度：▲［α］²² _D▼０°〜＋40°（ｃ＝1,エ
タノール） ７）紫外線吸収スペクトル： エタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは第１図
に示す通りで、 に極大吸収を有する。

８）赤外線吸収スペクトル： 臭化カリウム錠剤として測定した赤外線吸収スペクトル
は第２図に示す通りである。

９）¹³C‐NMRスペクトル： CDCl₃中で測定した¹³C NMRスペクトルの化学シフト値
（δppm）は次に示す通りである。

13.4,19.2,22.4,27.5,32.6,34.4,79.0,100.3,107.8,11
3.1,128.6,129.3,131.0,133.2,160.5,162.6 10）呈色反応： 陽性；リンモリブデン酸，ヨード反応 凝陽性；ニンヒドリン反応 陰性；坂口反応 11）溶解性： 不溶；水 難溶；石油エーテル,n−ヘキサン 可溶；酢酸エチル，ジエチルエーテル 易溶；クロロホルム，メタノール，エタノール，ジメチ
ルホルムアミド，ジメチルスルホキシド 12）薄層クロマトグラフィー： シリカゲルプレート（メルク社製 キーゼルゲル60
F₂₅₄） 溶媒系 Rf クロロホルム−メタノール（9:1）； 0.29 ｎ−プロパノール−水 （4:1）； 0.70 以上のような物理化学的性状から、化合物FA-4283
は、2H−ピラノ［3,2-C］ピリジン骨格を有する新規化
合物（II）である。

また、化合物FA-4283はその構造上例えば式 など複数の互変異性体の存在が示唆され、上記物理化学
的性状の融点、比旋光度などにおいて見られるとおり、
その数値は一定せず、製造，精製方法等により変動す
る。

生理活性物質FA-4283は、アルキル化反応，還元反応
（水素化反応）など化学的変換により対応するその誘導
体に導くことができる。

これらの反応は、通常アルコール類（メタノール，エ
タノールなど），ケトン類（アセトン，メチルエチルケ
トンなど）などの有機溶媒または有機溶媒と水との混合
溶媒中で行う。

アルキル化反応においては、ハロゲン化アルキル（ヨ
ウ化メチル，ヨウ化エチルなど）などのアルキル化剤と
共に、ナトリウム塩（炭酸ナトリウムなど），カリウム
塩（炭酸カリウムなど）などの無機塩基を触媒として用
いることができる。アルキル化反応は通常加熱下（50〜
100℃）で行う。

接触還元などの水素化反応は、パラジウム黒，酸化白
金などの触媒の存在下水素気流中で行う。水素化反応は
通常室温で行う。

FA-4283はアルキル化反応により対応するアルキル誘
導体（Ｒ＝低級アルキル）に、還元反応により対応する
3,4−および３′,4′−テトラヒドロ誘導体に導くこと
ができる。

得られたFA-4283誘導体は、上記同様抽出，カラムク
ロマトグラフィー，再結晶など通常の方法で精製するこ
とができる。

本発明の化合物（Ｉ）は、脂肪酸合成阻害作用等を有
し、低毒性でたとえば哺乳動物（例、マウス，ラット，
ヒト）の糖・脂質代謝異常の予防・改善剤などとして有
用である。

FA-4283を、たとえば肥満，肥満を伴うII型糖尿病，
高脂血症などの糖・脂質代謝異常改善剤として用いる場
合、成人についてFA-4283の約２ないし400mg/kgを１日
投与量として投与する。また、FA-4283を投与するにあ
たっては、常套手段によって、たとえば錠剤，顆粒剤，
カプセル剤，液剤などの剤型として経口的に、またはた
とえば注射剤として非経口的に投与することができる。

本発明の化合物（Ｉ）は哺乳動物，かびおよび酵母に
おける脂肪酸代謝を解明する上での生化学的試薬として
使用することができる。

作用および実施例 以下に実験例および実施例を挙げて本発明をさらに具
体的に説明する。なお以下の実施例において、培地の組
成物のパーセントは重量／容量パーセントを示す。

実験例１（脂肪酸合成阻害活性） 脂肪酸合成阻害活性の測定は、ラット肝臓ホモジネー
トを用いて行なった。ラット肝臓ホモジネートの調製法
および阻害活性測定用反応液組成並びに測定方法は、J.
Iliffeらの方法［バイオケミカル・ジャーナル（Bioche
mical Journal），91,369（1964）］及びT.Kariyaらの
方法［バイオケミカル・アンド・バイオフィジカル・リ
サーチ・コミュニケーションズ（Biochem.Biophys.Res.
Comm.），80,1022（1978）］に準じて、以下に記載の方
法で行なった。すなわち、SD系ラット（６週令，雄）を
２日間絶食後、再び24時間餌を与えて飼育後、放血によ
って屠殺し、直ちに肝臓を取り出し、肝臓湿重量1gあた
り最終4mlになるように2mM EDTA,5mMニコチンアミド,1m
M 2−メルカプトエタノールを含む0.25M蔗糖溶液を加
え、テフロン棒付ホモジナイザーでホモジナイズした。
700×g,10分間の遠心上澄液を酵素標品として、その0.5
mlを反応に用いた。

トリス−塩酸緩衝液（pH7.4）45mM,KHCO₃ 10mM,MgCl₂
4mM,KCl45mM,K₂HPO₄ 5mM,コハク酸カリウム15mM,NADP
1mM,ATP 2mM,クルコ−ス−６リン酸5mM,補酵素A 0.4mM,
ジチオスレイトール5mM,酵素溶液0.5mlからなる反応混
液1.85mlを含有する10ml容コルベンに（95％ O₂:5％
CO₂）混合ガスを吹き込んだ後密栓し37℃,60分間ゆるや
かに振盪しつつ保持した。その後、1-¹⁴C−酢酸（0.2μ
Ci）0.5mMおよびメタノール又は対象化合物を含有する
メタノール溶液50μｌを添加し、さらに37℃60分間ゆる
やかに振盪しつつ反応を行なった。反応液1mlを採取しK
OH−エタノール中でアルカリ加水分解し、加水分解液に
塩酸を添加し、酸性にした後、石油エーテルで抽出を行
ない、さらに水洗後石油エーテル層に抽出された放射活
性を測定した。化合物FA-4283の阻害活性は、阻害剤無
添加の場合に比較して、５×10^-4Mで97％，10^-3Mで98％
の阻害であった。

また同様に実験した、阻害剤無添加対象群の活性を50
％阻害するに必要な化合物の濃度は、テトラヒドロFA-4
283（実施例６）では85μg/ml、Ｎ−メチルFA-4283（実
施例７）では88μg/mlであった。

実験例２ 生理活性物質FA-4283の抗菌スペクトルは表１に示す
とおりである。

これらの実験結果は、酵母、かびに抗菌活性を示し、
抗かび抗酵母剤としての利用可能をも示すものである。
さらに、有利な脂肪酸合成阻害作用を示す化合物、又は
より強力な抗かび抗酵母作用を示す化合物並びにその他
の生理活性物質などの合成中間体としても有用な物質で
ある。

なお、FA-4283の急性毒性LD₅₀値は、マウス腹腔内単
回投与で400mg/kg以上であった。

実施例１ ポテト・シュークローズ寒天からなる斜面培地上に予
め十分に生育し胞子を形成したPenicillium funiculosu
m No.4283の一白金耳を、グルコース2.0％，マルトーズ
3.0％，生大豆粉1.5％，コーンスチープリカー1.0％，
ポリペプトン0.5％，酵母エキス0.3％及び食塩0.3％,pH
6.0からなる種培養培地500mlを分注滅菌した2l容坂口フ
ラスコに接種して、往復振盪機上で28℃で２日間培養し
た。この培養液500mlを、上記種培養培地30lを注入、滅
菌した50l容醗酵槽に移植し、28℃で２日間通気攪拌培
養を行なった。得られた培養液の5lを、グルコース１
％，デキストリン４％，生大豆粉0.5％，麦芽エキス0.5
％，ポリペプトン0.5％，酵母エキス0.2％，FeSO₄・7H₂
O 0.05％，MnSO₄・nH₂O 0.05％，MgSO₄・7H₂O 0.05％及
びKH₂PO₄ 0.1％,pH4.5からなる主培養培地100lを注入，
滅菌した200l容醗酵槽に移植し、温度28℃，内圧1.0kg/
cm²，通気100l/min,攪拌200rpmの条件下で４日間培養を
行なった。

実施例２ 実施例１で得られた培養液85lに170lのメタノールを
加えて１時間かきまぜた。ろ過して菌体を除去し、ろ液
を22lまで減圧濃縮した。濃縮液を11の酢酸エチルで
２回抽出し、酢酸エチル抽出液を合して、２％炭酸水素
ナトリウム10l,水10lの順に洗い、減圧濃縮して油状物
を得た。この油状物をシリカゲル（キーゼルゲル60,メ
ルク社）600gのカラムに吸着させた。カラムをジクロメ
タン3l,メタノール−ジクロルメタン（2:98）4.5lの順
で展開し、活性区分を濃縮して得られた油状物を再びシ
リカゲル600g（キーゼルゲル60,メルク社）のカラムに
吸着させクロロホルム6l,メタノール−クロロホルム
（1:99）3l,メタノール−クロロホルム（2:98）2.5lの
順で展開した。活性区分をあつめて減圧濃縮して31gの
油状物を得た。更にこの油状物を500gのシリカゲルのカ
ラムに吸着させ、ジクロルメタン14l,メタノール−ジク
ロルメタン（1:99）3l,メタノール−ジクロルメタン
（3:197）10lの順で展開した。活性区分をあつめて減圧
濃縮して得た油状物を石油ベンジンによって結晶化して
6.2gの粗結晶を得た。石油ベンジンより再結晶を行い、
4.6gのFA-4283物質を得た。

融点:79-80℃。¹H‐NMR 90MHz（CDCl₃＋D₂O中，δpp
m）:0.86（3H,t）,1.35（2H,sext.）,1.6〜2.3（6H,
m）,1.81（3H,s）,4.77（1H,dd）,5.44（2H,m）,5.95
（1H,d）,6.40（1H,s）,7.17（1H,d） 比旋光度▲［α］²² _D▼＋38.3°（ｃ＝1,エタノール） 元素分析（％）実測値C 74.23,H 8.23,N 5.36 赤外線吸収スペクトルおよび紫外線吸収スペクトルは
第１図および第２図に示した。

実施例３ 実施例１と同様の方法で得たPenicillium funiculosu
m No.4283の培養液80lに160lのメタノールを加えて１時
間かきまぜた。ろ過して菌体を除去し、ろ液を23lまで
減圧濃縮した。濃縮液を14lの酢酸エチルで２回抽出
し、酢酸エチル抽出液を合して、２％炭酸水素ナトリウ
ム14l,水13lの順に洗い、減圧濃縮して油状物を得た。
この油状物をシリカゲル（キーゼルゲル60,メルク社）1
kgのカラムに吸着させた。カラムをジクロルメタン15l,
メタノール−ジクロルメタン（1:99）10l,メタノール−
ジクロルメタン（3:197）5lの順で展開し、活性区分を
濃縮して得られた油状物を再びシリカゲル500g（キーゼ
ルゲル60,メルク社）のカラムに吸着させジクロルメタ
ン8l,メタノール−ジクロルメタン（1:99）5l,メタノー
ル−ジクロルメタン（3:197）10lの順で展開し、活性区
分を濃縮して油状物を得た。更にこの油状物を250gのシ
リカゲルのカラムに吸着させ、ジクロルメタン7l,メタ
ノール−ジクロルメタン（1:99）3l,メタノール−ジク
ロルメタン（3:197）4lの順で展開して、活性区分を濃
縮して、得られた油状物を石油ベンジンで結晶化し2.9g
の粗結晶を得た。酢酸エチル−石油ベンジンより再結晶
して1.0gの淡黄色結晶を得た。

融点83-85℃，▲［α］²⁴ _D▼＋21.6°（ｃ＝1,エタノー
ル） 元素分析（％）：実測値:C 74.01,H 8.04,N 5.44 実施例４ 実施例１と同様の方法で得たPenicillium funiculosu
m No.4283の培養液80lにメタノール160lを加えて１時間
かきまぜた。ろ過して菌体を除去し、ろ液を25lまで減
圧濃縮した。濃縮液を13lの酢酸エチルで２回抽出し、
酢酸エチル抽出液を合して、２％炭酸水素ナトリウム13
l,水12lの順に洗い、減圧濃縮して油状物を得た。この
油状物をシリカゲル（キーゼルゲル60,メルク社）1kgの
カラムに吸着させた。カラムをジクロルメタン16l,メタ
ノール−ジクロルメタン（1:199）16l,メタノール−ジ
クロルメタン（1:99）6l,メタノール−ジクロルメタン
（3:197）8lの順で展開し、活性区分を濃縮して得られ
た油状物を石油ベンシンより結晶化して4.5gの粗結晶を
得た。この結晶を再びシリカゲル60gのカラムに吸着さ
せ、ジクロルメタン200ml,メタノール−ジクロルメタン
（1:199）800ml,メタノール−ジクロルメタン（1:99）5
00mlの順に展開し、活性区分を濃縮して得た結晶を石油
ベンジンより再結晶して2.2gの淡黄色結晶を得た。融点
85-87℃，▲［α］²⁴ _D▼＋17.3°（ｃ＝0.9,エタノー
ル） 元素分析（％）：実測値C 73.51,H 8.06,N 5.73 実施例５ 実施例3,4の石油ベンジンによる結晶化の際母液より
回収された油状物を合して（18.0g）シリカゲル150gに
吸着させ、クロロホルム2l,メタノール−クロロホルム
（1:199）1.5lの順で展開した。活性区分を濃縮して石
油ベンジンより結晶化し3.5gの粗結晶を得た。石油ベン
ジンより再結晶し行い2.7gの淡黄色結晶を得た。

融点89-91℃，▲［α］²³ _D▼＋6.6°（ｃ＝0.8,エタノ
ール） 元素分析（％）：実測値:C 74.11,H 8.24,N 5.41 実施例６ FA-4283 500mgをメタノール（80ml）と水（20ml）の
混合溶媒に溶かし、1gのPd−ブラックの存在下水素添加
を行った。触媒をろ別し、ろ液を減圧濃縮して残渣に水
（30ml）と酢酸エチル（50ml）を加えた。酢酸エチル層
を無水Na₂SO₄で乾燥後、減圧濃縮した。残渣を石油ベン
ジンで結晶化し、石油ベンジンで再結晶を行い、250mg
のテトラヒドロFA-4283を無色の結晶として得た。融点1
00-101℃。

▲［α］²⁵ _D▼＋3.8°（ｃ＝0.5,エタノール中）,SI-
MS:m/z:264（Ｍ＋１） 元素分析C₁₆H₂₅NO₂として 計算値C 72.97,H 9.57,N 5.32％ 実測値C 72.96,H 9.63,N 5.33％ PMR（400MHz,CDCl₃）δ:0.89（t,3H）,0.94（d,3H）,1.
3（m,10H）,1.49（m,1H）,1.65（m,1H）,2.15（m,1H）,
2.35（dd,1H）,2.64（dd,1H）,4.05（m,1H）,5.97（d,1
H）,7.23（d,1H）,12.49（bs,1H） 実施例７ FA-4283 500mgをアセトン50mlにとかし、無水炭酸カ
リウム2.0gとヨードメチル0.3mlを加え10時間加熱還流
した。不溶物をろ別してろ液を減圧濃縮し残渣に酢酸エ
チル50mlと５％NaCO₃ 50mlを加え、酢酸エチル層を５％
クエン酸，次に水で洗い無水Na₂SO₄で乾燥した。酢酸エ
チルを減圧留去して油状物600mgを得た。この油状物を1
1gのシリカゲルを用い、クロロホルムを展開溶媒として
カラムクロマトグラフィーを行い精製した。TLCで単一
なスポットを示す画分をあつめて減圧濃縮を行いＮ−メ
チルFA-4283を油状物として410mg得た。

▲［α］²⁵ _D▼＋４°（ｃ＝0.69,エタノール中）,EI-M
S:m/z:273（M⁺） 元素分析C₁₇H₂₃NO₂・0.2H₂Oとして 計算値C 73.72,H 8.51,N 5.06％ 実測値C 73.86,H 8.41,N 4.77％ PMR（100MHz,CDCl₃）：主たるシグナルのδ値を示す。
0.88（t,3H）,1.36（sext,2H）,1.80（bs,3H）,3.47
（s,3H）,4.72（dd,1H）,5.43（m,2H）,5.85（d,1H）,
6.45（bs,1H）7.03（d,1H） 発明の効果 本発明の化合物（Ｉ）は脂肪酸合成阻害作用を有し、
糖・脂質代謝異常の予防・改善剤などとして有用であ
る。

【図面の簡単な説明】

第１図および第２図は、FA-4283の紫外線吸収スペクト
ルおよび赤外線吸収スペクトルをそれぞれ示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:80）

Claims (2)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】（１）一般式 ［式中、Ｒは水素または低級アルキルを示し、3,4−お
   よび３′,4′−二重結合は飽和されていてもよい］で表
   わされる化合物、
2. 【請求項２】ペニシリウム属に属する生理活性物質FA-4
   283生理能を有する微生物を培地に培養し、培養液中に
   生理活性物質FA-4283を生成蓄積せしめ、これを採取
   し、所望により得られたFA-4283をアルキル化反応また
   は（および）還元反応に付すことを特徴とする一般式 ［式中、Ｒは水素または低級アルキルを示し、3,4−お
   よび３′,4′−二重結合は飽和されていてもよい］で表
   わされる化合物の製造法。