JP2583257B2 - インシュリン向性ホルモン - Google Patents

インシュリン向性ホルモン

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JP2583257B2 JP62502896A JP50289687A JP2583257B2 JP 2583257 B2 JP2583257 B2 JP 2583257B2 JP 62502896 A JP62502896 A JP 62502896A JP 50289687 A JP50289687 A JP 50289687A JP 2583257 B2 JP2583257 B2 JP 2583257B2
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    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 産業上の利用分野 本発明は、プレホルモン、プログルカゴンのある種の
ペプチドフラグメントがホルモン様活性を有し、ホルモ
ン、即ちインシュリンの合成および分泌を刺激するのに
使用し得るという発見に関するものである。これらのペ
プチドフラグメントは、糖尿病の治療に有用である。
従来技術と発明が解決すべき課題 膵臓の島（ランゲルハンス島）細胞における内分泌は
血液−骨代謝（グルコース、アミノ酸、カテコールアミ
ン等）のみならず、局所のパラクリンの影響等、複雑な
コントロール下にある。主な膵島ホルモン（グルカゴ
ン、インシュリンおよびソマトスタチン）は、それらに
特異的な細胞型（夫々、Ａ、ＢおよびＤ型細胞）の間で
相互作用し、代謝物質によって伝達（mediate）される
分泌応答を変調（modulate）する。インシュリン分泌
は、血中の糖（グルコース）濃度によって優先的にコン
トロールされているが、グルカゴンおよびソマトスタチ
ンもグルコースによって伝達されるインシュリンの分泌
応答を、夫々、刺激および抑制する。既に提案されてい
るインシュリン分泌に対する島内のパラクリン制御以外
に、腸内にもインシュリン向性因子が存在することを示
す証拠がある。この概念は、経口摂取されたグルコース
のインシュリン分泌刺激作用が、同等量の静脈内投与さ
れたグルコースに比べてはるかに強いという観察結果に
基いている。
ヒトホルモン、グルカゴンは、膵Ａ細胞で産生される
29アミノ酸のペプチドホルモンである。このホルモン
は、セクレチン、胃酸抑制性ペプチド、血管作用性腸ペ
プチドおよびグリセンチン等、構造上、似通ったペプチ
ドの、マルチ遺伝子ファミリーに属している。これらの
ペプチドは、炭水化物代謝、胃腸の運動性、および分泌
工程等を様々に制御している。しかしながら、膵グルカ
ゴンの基本的な作用として認識されているのは、グリコ
ーゲン分解と糖新生の促進作用であり、その結果として
の血中糖濃度上昇作用である。このことに関連し、グル
カゴンの作用はインシュリンと反対の制御効果を顕し、
糖尿病を伴った高血糖症をもたらすことになる［Diabet
esmellitus、ルンドら（Lund,P.K.）Proc.Natl.Acad.Sc
i.,USA 79−349（1982）］。
グルカゴンは、インシュリン産生細胞の表面に存在す
る特異的リセプターと結合し得ることが見出された。こ
れらのリセプターと結合すると、グルカゴンは該細胞を
刺激してcAMPの迅速な合成をもたらす。次いで、cAMP
が、インシュリン発現を刺激することが見出された［コ
ーマンら（Korman,L.Y.）、Diabetes、34:717−722（19
85）］。インシュリンはグルカゴン合成阻害作用を有す
る［Review of Medical Physiology、ゲノング（Genon
g,W.F.）、1979、Lange出版、ロス・アトラス、カリフ
ォルニア、p.273］。このように、グルカゴンの発現
は、インシュリンにより、究極的には血中糖濃度によ
り、注意深く制御されている。
グルカゴンの遺伝子は、まず、630塩基対の前駆体が
翻訳されてポリペプチド、プレプログルカゴンとなる
（ルンドら、1982）。次いで、このポリペプチドがプロ
セッシングされてプログルカゴンになる。パツェルトら
（Patzelt,C.）、Nature,282:260−266（1979）は、プ
ログルカゴンがグルカゴンと第２のペプチドとに開裂さ
れることを示した。ルンドら（Lund,P.K.）、ロペツら
（Lopez,L.C.）およびベルら（Bell,G.I.）（Nature）3
02:716−718（1983）は、リジン−アルギニンジペプチ
ド残基の直ぐ後方でプログルカゴン分子が開裂されるこ
とを示した。海峡ナマズ（Ictalurus punctata）によっ
て産生されたプログルカゴンの研究において、この動物
のグルカゴンも隣接するアルギニン−リジンジペプチド
残基およびアルギニン−アルギニンジペプチド残基の直
ぐ後方で開裂されることが示された［アンドリューら
（Andrews,P.C.）J.Biol.Chem.、260:3910−3914（198
5）］。ロペツら（Lopez,L.C.）（Proc.Natl.Acad.Sci.
USA、80:5485−5489（1983）］およびベルら（Bell,G.
I.）は、哺乳類のプログルカゴンは、リジン−アルギニ
ンペプチドまたはアルギニン−アルギニンジペプチドの
部位で開裂されること、並びに、プログルカゴン分子は
３つの異なった、高度にホモローガスなペプチド分子、
即ち、グルカゴン、グルカゴン様タンパク質１（GLP−
１）およびグルカゴン様タンパク質２（GLP−２）を含
有していることを示した。ロペツらは、グルカゴン様タ
ンパク質１は37アミノ酸残基の長さであってグルカゴン
様タンパク質２はアミノ酸残基34の長さであると結論し
た。ラットのプレプログルカゴンの構造に関する同様の
研究でも、タンパク分解的開裂のパターンについて、隣
接するリジン−アルギニンジペプチドか、アルギニン−
アルギニンジペプチドの間で開裂され、グルカゴン、GL
P−１、およびGLP−２が生成されることが分った［ハイ
ンリッヒら（Heinrich,G.）、Enderinol.115:2176−218
1（1984）］。ヒト、ラット、ウシおよびハムスターのG
LP−１の配列は同一であることが分った［ギグリオンら
（Ghiglione,M.）、Diabetologia、27:599−600（198
4）］。
ロペツらのGLP−１の大きさに関する結論はウテンタ
ルら（Uttenthal,L.O.）（J.Clin.Enderinol.Metabo
l.、61:472−479（1985））によって追認された。ウテ
ンタルらは、ヒト膵臓に存在するGLP−１の分子型を調
べた。彼等の研究により、GLP−１およびGLP−２は、夫
々、37アミノ酸および34アミノ酸からなるペプチドとし
て膵臓に存在していることが示された。
GLP−１とグルカゴンとの類似性は、多くの初期の研
究者に、GLP−１にも生物学的活性が存在し得るという
示唆を与えていた。ある研究者達は、GLP−１がラット
脳細胞のcAMP合成を誘発し得ることを見出した［フーサ
インら（Hoosein,N.M.）Febs.Lett.178:83−86（198
4）］が、他の研究者達はGLP−１になんらの生理学的作
用を同定することもできなかった（ロペツら）。GLP−
１の生理学的作用の同定における失敗は、研究者達に、
GLP−１が実際にホルモンであるか否か、およびグルカ
ゴンとGLP−１との近縁関係は人為的なものではないか
という疑問を抱かせた（ギグリオンら）。
結局、従来技術では、グルカゴンホルモンの前駆体が
プロセッシングされて、広範囲にわたってホモロジーな
１組のペプチドが生じることが認識されたことになる。
当該技術分野における多くの人々が、これらの高度に関
連しているグルカゴン様ペプチドには当然生物学的活性
があると考えていた。にもかかわらず、これら分子の生
物学的作用の解明を目指した多くの研究者が不成功に終
ったのである。
発明の要約 ホルモングルカゴンは、高分子量の前駆体として合成
され、それがタンパク分解的に開裂されて３つのペプチ
ド、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド１（GLP−１）
およびグルカゴン様ペプチド２（GLP−２）となること
が知られている。GLP−１は、プロセッシングされない
状態では37アミノ酸からなる。本発明は、未プロセッシ
ングGLP−１が自然に、GLP−１の７−37アミノ酸を有す
る31アミノ酸長のペプチド（７−37ペプチド）に変換さ
れることを開示するものである。このプロセッシング
は、膵臓および腸管内で起こる。この７−37ペプチドは
これまで報告されたことのないインシュリン向性（イン
シュリノトロピック）ホルモンである。このホルモンの
作用は膵β細胞に特異的であり、該細胞のインシュリン
生合成を誘導すると思われる。プロセッシングされてい
ないGLP−１は、本質的に、インシュリンの生合成の誘
発を伝達することができない。このインシュリン向性ホ
ルモンは、インシュリン分泌の動力学が異常になってい
る、成年期発現性の糖尿病の病因研究に有用である。
図面の簡単な説明 第１図は、ヒト、ラットおよびハムスターのプレプロ
グルカゴンのDNA構造および対応するアミノ酸配列を示
す模式図である。プレプログルカゴンは、丸で示した部
位でタンパク分解的に開裂される。
第２図はラットの島細胞種の細胞内mRNAレベルに対す
るGLP−１ペプチドの影響を示す図である。
第３図はラット島細胞種の細胞内アンギオテンシノー
ゲンmRNAレベルに対するGLP−１ペプチドの影響を示す
図である。
第４図はラット島細胞種の細胞内アクチンmRNAレベル
に対するGLP−１の影響を示す図である。
第５図は、GH4細胞内プロラクチンmRNAレベルに対す
るGLP−１（１−37）の影響を示すＸ線図である。
第６図は、AtL−20細胞内ACTHmRNAレベルに対するGLP
−１（１−37）の影響を示す図である。
好ましい実施態様 決定されたヒトGLP−１のアミノ酸配列から選択され
たペプチド部分（断片）は本発明を含む開発の出発物質
である。GLP−１のアミノ酸配列は、数人の研究者によ
って報告されている［ロペツら（1983）、ベルら（Bel
l,G.I.）Nature、302:716−718（1983）、ハインリッヒ
ら（1984）、ギグリオンら（1984）。］プレプログルカ
ゴン遺伝子の構造および対応するアミノ酸配列を第１図
に示す。この図面は、前駆体遺伝子がタンパク分解的プ
ロセッシングを受けてグルカゴンと２つのグルカゴン様
ペプチドが産生される状態をも示すものである。本明細
書中、GLP−１（１−37）という表記は１（Ｎ末端）か
ら37（Ｃ末端）までの全アミノ酸を含有するGLP−１ポ
リペプチドを指す。同様に、GLP−１（７−37）は、７
（Ｎ末端）から37（Ｃ末端）までの全アミノ酸を含有す
るGLP−１ポリペプチドを意味する。
１つの実施態様では、ペプチド断片は、メリフィール
ド（Merrifield,J.M.）［Chem.Soc.、85:2149（196
2）］およびスチュワート（Stewart）およびヤング（Yo
ung）［Solid Phase Peptide Synthesis、（Freeman,Sa
n Francisco,1969）、27〜66頁］記載の周知の固相ペプ
チド合成法で合成する。しかしながら、タンパク分解的
な酵素を用い、天然に存在するアミノ酸を断片化してプ
ログルカゴンポリペプチドまたはGLP−１断片を得るこ
ともできる。さらに、マニアティスら（Manniatis,T.）
（Molecular Biology:A Laboratory Manual,Cold Sprin
g Harbor,NY 1982）の記載による組換えDNA技術を用い
てプログルカゴンペプチドの所望の断片を得ることもで
きる。
本発明は、天然に存在するアミノ酸配列から誘導され
た、インシュリン向性のペプチド断片を提供するもので
ある。
本発明は、式： His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp− Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala− Ala−Lys−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val− Lys−Gly−Arg−Gly で示される配列、または１またはそれ以上のアミノ酸
が該配列に付加されるか該配列から欠失されてなる配列
を有し、天然の不純物を実質的に含有せず、上記アミノ
酸配列を有するペプチドと、実質上同様のインシュリン
向性活性を有するペプチドまたはその化学的誘導体を提
供するものである。なお、ここで、化学的誘導体とは、
上記の式で示されるペプチドまたはそのアミノ酸の付加
または欠失による誘導体の両末端のアミノ酸残基が化学
的に修飾され、酸付加塩を形成しまたは保護されてなる
誘導体である。特に興味深い化学的誘導体は、式： H2Ｎ−Ｘ−CO−R1 ［式中、R1はOH、OMまたは−NR2R3であって、ここに
Ｍは薬学的に許容し得る陽イオンまたは低級の分枝鎖ま
たは非分枝鎖アルキル基、R3およびR2は水素および低級
の分枝鎖または非分枝鎖アルキル基からなる群から選択
される互いに同一または異なる基であり、Ｘは上記のア
ミノ酸配列またはペプチドを表す） で示されるペプチド誘導体、 （２）その酸付加塩、並びに （３）保護された、または部分的に保護された誘導体で
ある。
本発明は、インシュリンの発現を促進する方法であっ
て、哺乳類の膵Ｂ型島細胞に、有効量の上記インシュリ
ン向性ペプチドを与えることからなる方法を提供するも
のでもある。
本発明範囲には、インシュリン向性ホルモンとして機
能し得る上記ペプチド中のアミノ酸配列も含まれる。ま
た、担体タンパク質、またはインシュリン向性効果を向
上するために加えられるアミノ酸残基類との結合（カッ
プリング）を促進するのに用いられる付加的なアミノ酸
も包含される。ある物質は、正常な天然状態で該物質に
随伴して見出される物質から精製されていれば、それ
は、「実質上、天然の不純物を含有しない」と言われ
る。GLP−１（７−37）に伴う天然の不純物の例とし
て、他のペプチド、炭水化物、グリコシル化されたペプ
チド、脂質および膜物質等がある。また、ある物質の試
料（サンプル）中にこれらの不純物が含有されていない
ときにも、その物質は、実質上、天然の不純物を含有し
ないと表される。
相互に交換可能な語句、「ペプチド断片」と「ペプチ
ド部分」は、いずれも、天然に存在するアミノ酸配列か
ら導かれる、合成および天然に存在するアミノ酸配列誘
導体の両方を包含する意味で用いられる。
ペプチドは、それを天然に存在する配列を断片化して
得ることができる場合、あるいは天然に存在するアミノ
酸配列に関する知識、または該配列をコードしている遺
伝物質（DNAまたはRNA）に関する知識に基いて合成し得
る場合には、「天然に存在する配列から誘導された」と
表現される。
さらに本発明は、選択された配列のもの以外に、天然
に存在する配列中には含まれていない１またはそれ以上
のアミノ酸が付加された、あるいは欠失されたポリペプ
チドであって、選択されたポリペプチドと同様の機能を
有するポリペプチドにも関するものである。それら本発
明のポリペプチドはGLP−１（７−37）と実質上、同様
のインシュリン向性活性を示すことを条件として、「機
能的誘導体」と表現される。
「インシュリン向性活性（作用）」とは、ホルモンイ
ンシュリンの合成または発現を刺激する能力、あるい
は、刺激を引き起こす能力に関連する語句である。
当業者ならば分かることであるが、アミノ酸残基は、
適当なアミノ保護基またはカルボキシ保護基を用いて、
保護された形または保護されていない形のいずれをもと
り得る。有用な陽イオンは、アルカリ金属陽イオンまた
はアルカリ土類基陽イオン（例えば、Na、Ｋ、Li、1/2C
a、1/2Ba等である）、またはアミノ陽イオン（例えば、
アルキル基がC1−C12の、テトラアルキルアンモニウ
ム、トリアルキルアンモニウム等である）。
様々な長さのペプチドは、遊離アミノ形（Ｎ末端）ま
たはその酸付加塩の形であってもよい。一般的な酸付加
塩は、ハロゲン化水素の塩、即ち、HBr、HIより好まし
くは、HClの塩である。
化合物のインシュリン向性は、該化合物を動物細胞に
与えるか、動物に注射し、それぞれ、培地または動物の
循環系への免疫反応性のインシュリン（IRI）の放出を
監視することにより決定される。IRIの存在は、インシ
ュリンを特異的に検出し得るラジオイムノアッセイを用
いて検出することができる。IRIの存在を検出し得るラ
ジオイムノアッセイであれば、どれを採用してもよい
が、アルバノら（Albano,J.M.D.）［Acta Endocrinol.7
0:487−509（1972）］の分析法を改良した方法が好まし
い。この改良法では、ホスフェート／アルブミン（pH7.
4）緩衝液を用いる。りん酸緩衝液500ul、パーフセエー
ト（perfusate）試料液50ulまたはパーフセエート中ラ
ットインシュリン標準液50ul、抗インシュリン抗血清10
0ul（Wellcome Laboratories、1:40,000希釈）、および
［125I］インシュリン100ulを、10×75mmの使い捨てガ
ラス管内で全量750ulとし、連続的な条件下でインキュ
ベーションを行った。４℃で２−３日間インキュベーシ
ョンした後、炭素分離法によって、遊離のインシュリン
を、抗体と結合したインシュリンから分離した。アッセ
イの感度は１−2uU/mlであった。組織培養中で培養した
細胞の培地中に放出されたIRIを測定するために、放射
活性に標識したプロインシュリンを導入することが好ま
しい。ポリペプチドをラベリング（標識すること）し得
る放射活性標識ならば何でも使用可能である、3Hロイシ
ンを用いて標識化プロインシュリンを調製することが好
ましい。ラベリングは、検出可能に標識されたプロイン
シュリン分子のプールを形成するのに充分な期間（時
間）をかけて行えばよいが、放射活性標識の存在下、細
胞を60分間インキュベートすることが好ましい。化合物
が、インシュリン向性作用を有するか否かの決定には、
インシュリンを発現し得る細胞ならば何でも用いること
ができるが、ラットの島細胞腫細胞、および、特に、RI
N−38ラット島細胞腫細胞を用いることが好ましい。そ
のような細胞は、適当なあらゆる培地で培養し得るが、
0.1％BSAおよび25mMグルコースを含有するDME培地を用
いることが好ましい。
化合物のインシュリン向性特性は、膵浸出によっても
求められる。灌流したラット膵標品を自体そのままで単
離して、改良ペンホス法（Penhos,J.C.）［Diabetes、1
8:733−738（1969）］とした。絶食させた雄性チャール
ス・リバー種白子ラット（体重350−600g）を、アミタ
ール・ナトリウム塩（Amita Sodium、Eli Lilly and C
o.、160ng/Kg）の腹腔内注射によって麻酔した。腎臓、
副腎、胃、および下方結腸の血管を桔紮した。十二指腸
約4cm,下行結腸および直腸以外の全腸管を摘出した。従
って、腸の小部分が灌流されたにすぎず、グルカゴン様
免疫反応性を有する腸性物質による干渉を最小限に止め
ることができた。灌流は、４％デキストランT70および
0.2％ウシ血清アルブミン（フラクションＶ）を含有す
る改良クレブス−リンゲル重炭酸塩緩衝液を用い、95％
O2および５％CO2を吹き込んで行った。非パルス（博
動）性液流の４流路（チャンネル）ローラーベアリング
ポンプ［バッチェラー・ポリスタティック（Buchler Po
lystatic）Buchler Instruments Division、Nuclear−C
hicago Corp.］を用い、一方の灌流源からもう一方への
切り替えを３方向コック（蛇口）で行った。灌流の完了
の様子を監視し、ワイアーらの方法（Weir,G.C.）［J.C
lin.Investigat.、54:1403−1412（1974）］に従って解
析した。
本発明の化合物は、既知の薬学的に有用な組成物調製
法に従い、GLP−１（７−37）またはその機能的な誘導
体を薬学的に許容し得る担体賦形剤と混合して製剤化す
ることができる。適当な賦形剤およびその製剤として
は、他のヒトペプチド、例えば、ヒト血清アルブミン等
がレミントンの薬学［Remington′s Pharmaceutical Sc
iences（第16版オスロ（A.Oslo）編、Mack,Easton PA
（1980）］に記載されている。効果的な投与に適した薬
学上許容し得る組成物が得られれば、そのような組成物
は、GLP−１（７−37）またはその機能的な誘導体を適
量の担体賦形剤と一緒に含有しているであろう。
GLP−１（７−37）またはその機能的な誘導体を含有
する組成物は、静脈内、筋肉内、または皮下から、約1p
g/kg（体重）〜1,000ug/kg（体重）の範囲の用量で投与
されるが、それ以下またはそれ以上の用量を用いること
もできる。必要とされる用量は、患者の症状の重篤度、
および患者の身長、体重、性、年令、および病歴等の判
断基準により左右される。
非経口投与のためには、GLP−１（７−37）含有組成
物を蒸留水に溶かし、pH値を約６−８に調節する。凍結
乾燥工程を促進して適当な生産物を得るためには、ラク
トースを溶液に加えるとよい。次いで、得られた溶液を
滅菌濾過し、バイアルに入れ、凍結乾燥する。これらの
組成物中のGLP−１（７−37）の濃度は10-12Ｍから10-5
Ｍの間で変化し得る。
さらに他の薬学的手法を用いて作用の持続性をコント
ロールすることもできる。放出コントロール製剤は、GL
P−１（７−37）またはその機能的な誘導体とコンプレ
ックスを形成するか、それを吸着するポリマーを用いて
得ることができる。到達のコントロールは、放出をコン
トロールするための、適当な高分子（例えば、ポリエス
テル、ポリアミノ酸、ポリビニルピロリドン、エチレン
酢酸ビニル、メチルセルロース、カルボキシメチルセル
ロース、および硫酸プロタミン等）、高分子の濃度、お
よび導入方法を選択することにより実行される。放出コ
ントロール製剤によって作用の持続性をコントロールす
るための別法は、ポリエステル、ポリアミノ酸、ヒドロ
ゲル、ポリ（乳酸）、またはエチレンと酢酸ビニルの共
重合体等のポリマー原料の粒子にGLP−１（７−37）を
導入することからなる。別法として、これらのポリマー
粒子にGLP−１（７−37）を導入する代りに、例えば、
夫々、ヒドロキシメチルセルロース、またはゼラチン−
マイクロカプセルおよび（メチルメタクリレート）マイ
クロカプセル等の、コアセルベーション技術または界面
重合法によって調製されたマイクロカプセルにGLP−１
（７−37）を捕獲させるか、あるいは、リポソーム、ア
ルブミン微粒子（マイクロスフェアー）、マイクロエマ
ルジョン、ナノ粒子、およびナノカプセル等のコロイド
状薬物供給系（デリバーリーシステム）、またはマクロ
エマルジョン中に取り込ませることができる。そのよう
な方法は、Remington′s Pharmaceutical Sciences（19
80）に記載されている。
具体的実施例 実施例１ 移植可能なラットの島細胞腫［ガザーら（Gazdar,A.
F.）、Proc.Nat′l.Acad.Sci.U.S.A.77:3519−3523（19
80）］から樹立された連続的な島細胞系統（セルライ
ン）、RIN−ｒから、細胞系統RIN−38、ラット島細胞腫
細胞を得た。この細胞を、10％熱不活化ウシ胎児血清
（Gibco）、ペニシリン100U/mlおよびストレプトマイシ
ン100ug/mlを補充した、グルコース濃度4,500mg/LのDME
M（Gibco）中に維持した。空気95％、二酸化炭素５％
中、37℃でインキュベーションを行った。上記の方法の
下で増殖した細胞を洗浄し、0.1％ウシ血清アルブミン
と25mMグルコースとを含有するDMEM（Gibco）に再懸濁
した。様々な濃度のGLP−１（１−37）、GLP−１（７−
37）またはGLP−１（１−36des−gly−arg）と一緒に６
時間インキュベートした後、これらの物質の内、どれが
インシュリンmRNAの発現に影響を及ぼすかを決定した。
以下のごとくにして、細胞性RNAをインシュリン特異的m
RNAにつき、分析した。固形腫瘍および細胞をグアニジ
ンチオシアネート中でホモジナイズし、塩化セシウムク
ッション中を沈降させることにより、細胞性RNAを抽出
した。オリゴdTセルロース・クロマトグラフィーによっ
てpoly A+RNAを単離した［アビブら（Aviv,H.）Proc.Na
tl.Acad.Sci.U.S.A.、69:1408−1412（1972）］。各試
料から得た全RNA20ugを、グリオキサール中で変性した
後、1.4％アガロースゲル電気泳動にかけてサイズ分画
し、次いで、ナイロン・メンブラン（Nytran;Schleiher
and Schull）に電気的に移した。ブロッティングした
（はん点の付いた）メンブランを減圧下、80℃で２時間
焼き、1M NaCl/1％SDS/10％硫酸デキストラン中、50℃
で一夜、プレハイブリダイズした後、標識したプローブ
（３−５×105cpm/ml）を加え、同温で24時間ハイブリ
ザイズさせた。次いで、１×SSC（0.15M NaCl/0.015Mク
エン酸Na）/1％SDS）中で55℃において２回洗浄し、−7
0℃において、様々な時間、強化スクリーンを用いてＸ
線フィルムに露出させた。全てのケースでペプチド濃度
は10-7Ｍであった。
この実験の結果を第２図に示す。レーン１−３（対照
細胞）、４−６（GLP−１（１−37））、７−９（GLP−
１（７−37））、10−12（GLP−１（１−36des−gly ar
g−amide））は、産生されたインシュリン特異的mRNAの
量を示している。各ペプチドについて、３回の繰り返し
実験の結果が示されている。
マイクロデンシトメーターを用い、インシュリン特異
的mRNAの相対量を求めた。この実験により、同一ペプチ
ド濃度において、GLP−１（７−37）は、対照（非処
理）細胞より３倍以上高く、インシュリン遺伝子の発現
を刺激することが分かった。
実施例２ 細胞系統RIN−38のラット島細胞腫細胞を実施例１記
載のごとく、DME培地中で培養した。10-7ＭのGLP−１
（１−37）、GLP−１（７−37）およびGLP−１（１−3
6）と一緒にインキュベートした後、細胞培養培地中の
インシュリン濃度をラジオイムノアッセイ（既述）によ
って測定した。６時間インキュベートした後、インシュ
リンタンパク質濃度を測定した。実験結果を表１に示
す。
実施例３ 生存ラットの膵臓を、上記のごとく、様々な濃度のGL
P−１（１−37）およびGLP−１（７−37）で灌流した。
１分間隔で、ラジオイムノアッセイ（上記）によってラ
ットの血清インシュリン濃度（ピコグラム/ml、pm/ml）
を測定した。この実験の結果を表２に示す。灌流は、ペ
プチド濃度、５×10-7Ｍ、５×10-8Ｍ、５×10-10Ｍ、
５×10-11Ｍ、および５×10-12Ｍで行った。０分の血清
中濃度測定後、ペプチドを加えた。
GLP−１（１−37）は、濃度５×10-7Ｍでラットの膵
臓に灌流すると、血清中のインシュリン濃度の3.4倍増
を伝達することが分かった。このペプチドは、濃度５×
10-8Ｍでは、血清中インシュリン濃度の３倍増を伝達し
得たにすぎない。また、濃度５×10-10Ｍでは、このペ
プチドは血清中インシュリン濃度を20％増加させただけ
である。
GLP−１（７−37）は、濃度５×10-7Ｍでラットの膵
臓に供給されると、血清中のインシュリン濃度の132倍
増を刺激することが分かった。10倍低い濃度（５×10-8
Ｍ）では、このペプチドは、インシュリンの血清中濃度
の21倍増を命令することができるにすぎなかった。濃度
10×10-10Ｍでは、GLP−１（７−37）は、血清中インシ
ュリン濃度の増加を伝達することができた（32倍）。５
×10-11Ｍでも、GLP−１（７−37）は、インシュリン濃
度を15倍増加させることができたが、GLP−１（１−3
7）は無効であった。
この実験は、GLP−１（７−37）が、インシュリンの
インビボ発現の刺激作用に関してGLP−１（１−37）の
1,000倍以上の効力を有することを示している。しか
も、これらの同じ実験において、GLP−１ペプチドは、
ペプチドホルモングルカゴンおよびソマトスタチンの放
出に何の作用も示さなかった。このように、GLP−１の
刺激作用は、ベータ細胞に特異的であり、膵臓のアルフ
ァまたはデルタ細胞には作用しないといえる。
実施例４ グルカゴン様タンパク質が細胞性cAMP濃度に影響を及
ぼし得るか否かを調べるために、RINS−38島細胞腫細胞
におけるcAMP濃度に対するGLP−１（７−37）およびGLP
−１（１−37）の影響を調べた。実施例１記載のごとく
にして26ウエルの培養皿中で細胞を培養した。培養ウエ
ルに、種々の量のグルカゴン様ペプチドを加え、３回繰
り返した。10分間インキュベーションを行った後、全細
胞培地をcAMPについて検査し、cAMP濃度を測定した。こ
の実験の結果を表３に示す。各培養液20ulを分析した。
この実験により、GLP−１（７−37）は、濃度10-11Ｍで
存在する場合にも、cAMP濃度を刺激することが分かっ
た。cAMP濃度の増加はGLP−１（７−37）が細胞リセプ
ターと相互作用し得ることを示唆するものである。
実施例５ GLP−１（１−37）、GLP−１（１−36）およびGLP−
１（７−37）の作用がインシュリンに特異的であるり、
非特異的な遺伝子発現を誘導または刺激することがない
ことを証明するために、これらのペプチドの、アクチン
およびアンギオテンシノーゲンのmRNAの濃度に対する影
響を調べた。実施例１に記載のごとくにしてRINS−38島
細胞腫細胞を培養し、GLP−１（１−37）、GLP−１（７
−37）、またはGLP−１（１−36）des−Gly arg（Penin
sula Laboratories）の存在下にインキュベートした。
ペプチド濃度は全て10-7Ｍであった。インキュベーショ
ン時間は６時間であった。インシュリン、アクチンまた
はアンギオテンシノーゲンに特異的なmRNAを実施例１記
載のごとく、ノーザンハイブリザイゼーションによって
同定した。この実験の結果を第２図（インシュリンmRN
A）、第３図（アンギオテンシノーゲンmRNA）および第
４図（アクチンmRNA）に示す。第２、３および４図のRN
Aゲルの走査（スキャニング）フィルムから得た人為的
な濃度計単位でmRNA濃度を決定した。mRNA濃度を表４に
示す。
実施例６ GLP−１（１−37）が、インシュリン以外のホルモン
の生合成を誘導するか否かを決定するために実験した。
即ち、GLP−１（１−37）（濃度10-7Ｍ）をラットのグ
ルカゴン産生性の島細胞系統および、夫々、ホルモンで
あるプロラクチンおよびACTHを産生する２つの脳下垂体
細胞系統（GH4およびAtT−20）に加え、実施例１記載の
ごとく、24時間後に産生されたホルモン特異的mRNAの量
を測定した。GLP−１ペプチドと一緒にインキュベーシ
ョンした後の、GH4脳下垂体細胞内のプロラクチンmRNA
濃度を第５図に示す。また、GLP−１ペプチドと一緒に
インキュベーションした後の、AtT−20脳下垂体細胞内
のACTHmRNA濃度を第６図に示す。これらの実験の結果、
GLP−１（１−37）は、これらのペプチドホルモンをコ
ードしているmRNAの量になんらの検出可能な影響を及ぼ
さないことが分かった。
実施例７ GLP−１（７−37）のRINS−38島細胞腫細胞における
インシュリン遺伝子およびアクチン遺伝子の転写に及ぼ
す影響を調べた。遺伝子の転写速度は、対照およびTPA
処理細胞由来の核内での発生期のグルカゴンおよびベー
ターアクチンのRNA転写物を定量することによって決定
された。核性RNAを、ニトロセルロースに結合させた、
過剰量のクローニングした特異的DNAとハイブリザイズ
させ、フィルターを洗浄した［マックナイトら（McKnig
ht,C.S.）、J.Biol.Chem.254:9050−9058（1979）］。
ラットグルカゴン［ハインリッヒら（Heinrich,G.）、E
ndcrinology,115:1−６（1984）］および、対照とし
て、ニワトリのベーターアクチンcDNA［クリーブランド
博士（Dr.D.Cleveland）、ジョーンホプキンス大学医学
部、ボルチモア、メアリーランドから提供されたもの］
を用いた。ハイブリザイゼーション効率を、［3H］UTP
グルカゴンcDNAのハイブリザイゼーション溶液を加える
ことによってコントロールした。実験を２回行い、結果
をcDNA挿入体のppm/kbとして表し、ハイブリザイゼーシ
ョン効率について補正した（40−50％）。細胞を、濃度
10-7ＭのGLP−１（７−37）と一緒に４時間インキュベ
ートした。０、１、および４時間目に核を細胞から調製
し、発生期のインシュリン遺伝子転写物およびアクチン
遺伝子転写物の分析におけるニュークレアーラン（nucl
earrun）により評価した（McKnight,C.S.ら）。この実
験の結果を表５に示す。実験結果から、GLP−１（７−3
7）が、インシュリン遺伝子の転写率を増大させるが、
アクチン遺伝子の発現率には検出可能な効果を示さない
ことが分った。
表５ グルカゴン様ペプチドＩ（７−37）の、RINS−38島細
胞腫細胞中でのインシュリンおよびアクチン遺伝子の転
写に及ぼす影響時間（時間） インシュリン遺伝子 アクチン遺伝子 ０ 17.4 34.1 １ 76.2 29.9 ４ 9.0 25.0 本明細書には本発明の全容が記載されているので、当
該技術分野における通常の技術者が僅かな修飾を施して
同様のことを行うことができ、それらも本発明の技術思
想に包含されることは明らかである。

Claims (9)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】式： NH2−Ｘ−CO−R1 ［式中、Ｘは、式： His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp− Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala− Ala−Lys−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val− Lys−Gly−Arg−(Gly)n （式中、ｎは０又は１を表す） で示される配列を有しインシュリン向性活性を有する、
    実質上、天然の不純物を含有しないペプチドであって、
    Ｘの両側のNH2−及び−CO−の各基は、該ペプチドのア
    ミノ及びカルボキシ末端側に位置するアミノ酸に由来す
    る基を表している。R1はOH、OMまたはNR2R3であって、
    Ｍは薬学的に許容し得る陽イオンまたは低級の分枝鎖ま
    たは非分枝鎖アルキル基、R2およびR3は水素および低級
    の分枝鎖または非分枝鎖アルキル基からなる群から選択
    される互いに同一または異なる基を表す。） で示される化合物、その酸付加塩、並びに保護された、
    または部分的に保護されたペプチド化合物。
  2. 【請求項２】ｎが１である請求項１記載のペプチド化合
    物。
  3. 【請求項３】ｎが０である請求項１記載のペプチド化合
    物。
  4. 【請求項４】R1がOHである請求項１〜３のいずれかに記
    載のペプチド化合物。
  5. 【請求項５】式： NH2−Ｘ−CO−R1 ［式中、Ｘは、式： His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp− Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala− Ala−Lys−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val− Lys−Gly−Arg−(Gly)n （式中、ｎは０又は１を表す） で示される配列を有しインシュリン向性活性を有する、
    実質上、天然の不純物を含有しないペプチドであって、
    Ｘの両側のNH2−及び−CO−の各基は、該ペプチドのア
    ミノ及びカルボキシ末端側に位置するアミノ酸に由来す
    る基を表している。R1はOH、OMまたはNR2R3であって、
    Ｍは薬学的に許容し得る陽イオンまたは低級の分枝鎖ま
    たは非分枝鎖アルキル基、R2およびR3は水素および低級
    の分枝鎖または非分枝鎖アルキル基からなる群から選択
    される互いに同一または異なる基を表す。） で示される化合物、その酸付加塩、並びに保護された、
    または部分的に保護されたペプチド化合物の有効量と、
    インシュリン向性医薬としての使用に適した薬学上許容
    し得る担体とを含有する膵Ｂ型島細胞におけるインシュ
    リンの発現を刺激または促進するための医薬組成物。
  6. 【請求項６】糖尿病の治療に用いられるものである請求
    項５記載の医薬組成物。
  7. 【請求項７】ｎが１である請求項５または６記載の医薬
    組成物。
  8. 【請求項８】ｎが０である請求項５または６記載の医薬
    組成物。
  9. 【請求項９】R1がOHである請求項５〜８のいずれかに記
    載の医薬組成物。
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CA (1) CA1341320C (ja)
DE (1) DE3750402T3 (ja)
WO (1) WO1987006941A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7138486B2 (en) 1986-05-05 2006-11-21 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone derivatives and uses thereof

Families Citing this family (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5614492A (en) * 1986-05-05 1997-03-25 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone GLP-1 (7-36) and uses thereof
US6849708B1 (en) 1986-05-05 2005-02-01 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone and uses thereof
EP0587255A1 (en) 1986-05-05 1994-03-16 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone
DE68929217T2 (de) * 1989-03-20 2000-11-30 Gen Hospital Corp Insulinotropes hormon
ATE164852T1 (de) * 1990-01-24 1998-04-15 Douglas I Buckley Glp-1-analoga verwendbar in der diabetesbehandlung
US5545618A (en) * 1990-01-24 1996-08-13 Buckley; Douglas I. GLP-1 analogs useful for diabetes treatment
DK36392D0 (da) * 1992-03-19 1992-03-19 Novo Nordisk As Anvendelse af kemisk forbindelse
USRE37302E1 (en) * 1992-03-19 2001-07-31 Novo Nordisk A/S Peptide
US6284727B1 (en) 1993-04-07 2001-09-04 Scios, Inc. Prolonged delivery of peptides
CA2137206A1 (en) * 1993-12-09 1995-06-10 John A. Galloway Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
US5705483A (en) * 1993-12-09 1998-01-06 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
US5574008A (en) * 1994-08-30 1996-11-12 Eli Lilly And Company Biologically active fragments of glucagon-like insulinotropic peptide
US5512549A (en) * 1994-10-18 1996-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use
ATE234625T1 (de) * 1994-12-23 2003-04-15 Novo Nordisk As Glp-1 zusammensetzungen mit verlängerter wirkdauer
US6184201B1 (en) 1995-04-14 2001-02-06 Nps Allelix Corp. Intestinotrophic glucagon-like peptide-2 analogs
US5834428A (en) 1995-04-14 1998-11-10 1149336 Ontario Inc. Glucagon-like peptide-2 and its therapeutic use
US5990077A (en) * 1995-04-14 1999-11-23 1149336 Ontario Inc. Glucagon-like peptide-2 and its therapeutic use
US6268343B1 (en) 1996-08-30 2001-07-31 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
US7235627B2 (en) 1996-08-30 2007-06-26 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
US6458924B2 (en) 1996-08-30 2002-10-01 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
CA2264243C (en) 1996-08-30 2004-10-05 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives
ATE466026T1 (de) 1998-02-27 2010-05-15 Novo Nordisk As Derivate von glp-1 und exendin mit verlängertem wirkdauer-profil
AU3247799A (en) 1998-02-27 1999-09-15 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives of glp-1 and exendin with protracted profile of action
JP2002506792A (ja) 1998-02-27 2002-03-05 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ Ｎ末端修飾ｇｌｐ−１誘導体
EP1061946B1 (en) * 1998-02-27 2004-04-28 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives with helix-content exceeding 25 %, forming partially structured micellar-like aggregates
ATE466027T1 (de) 1998-02-27 2010-05-15 Novo Nordisk As Abkömmlinge von glp-1 analogen
EP1932535A3 (en) 1998-07-31 2008-10-29 Novo Nordisk A/S Stimulation of beta cell profileration
CZ294029B6 (cs) 1998-12-07 2004-09-15 Societe De Conseils De Recherches Et D'application Analog GLP-1, jeho použití a farmaceutický prostředek jej obsahující
CA2358107C (en) * 1998-12-22 2011-08-23 Eli Lilly And Company Shelf-stable formulation of glucagon-like peptide-1
EP1600162A1 (en) * 1998-12-22 2005-11-30 Eli Lilly & Company Shelf-stable formulation of glucagon-like peptide-1
US6927214B1 (en) 1999-01-15 2005-08-09 Novo Nordisk A/S Non-peptide GLP-1 agonists
US6451987B1 (en) 1999-03-15 2002-09-17 Novo Nordisk A/S Ion exchange chromatography of proteins and peptides
JP4732590B2 (ja) 1999-03-15 2011-07-27 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ Ｇｌｐ−１及び近縁ペプチドのイオン交換クロマトグラフィー分離
US6444788B1 (en) 1999-03-15 2002-09-03 Novo Nordisk A/S Ion exchange chromatography of GLP-1, analogs and derivatives thereof
US6844321B2 (en) 2000-01-31 2005-01-18 Novo Nordisk A/S Crystallization of a GLP-1 analogue
DE60114996T2 (de) 2000-03-08 2006-08-10 Novo Nordisk A/S Senkung des serum cholesterols
AU2002213925A1 (en) 2000-09-18 2002-03-26 Osteometer Biotech As Use of glp-1 and flp-2 peptides for treatment of bone disorders
DE60136958D1 (de) 2000-12-01 2009-01-22 Takeda Pharmaceutical Verfahren zur herstellung einer zubereitung mit einer bioaktiven substanz
WO2002048192A2 (en) * 2000-12-13 2002-06-20 Eli Lilly And Company Amidated glucagon-like peptide-1
US7407955B2 (en) 2002-08-21 2008-08-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co., Kg 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, the preparation thereof and their use as pharmaceutical compositions
KR20060106812A (ko) 2003-08-21 2006-10-12 노보 노르디스크 에이/에스 라세미화 아미노산을 포함하는 폴리펩티드의 분리
US20070203058A1 (en) 2003-09-19 2007-08-30 Novo Nordisk A/S Novel Glp-1 Derivatives
SI1687019T1 (en) 2003-11-20 2018-04-30 Novo Nordisk A/S PROPILED GLIKO-CONTAINING PEPTIDAL FORMULATIONS OPTIMAL FOR MANUFACTURING AND FOR USE IN INJECTION DEVICES
WO2005056036A2 (en) 2003-12-09 2005-06-23 Novo Nordisk A/S Regulation of food preference using glp-1 agonists
AR047776A1 (es) 2003-12-16 2006-02-22 Sod Conseils Rech Applic Composiciones farmaceuticas glp - 1
ES2393335T3 (es) 2003-12-16 2012-12-20 Ipsen Pharma Análogos de GLP-1
US20050143303A1 (en) 2003-12-26 2005-06-30 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Intranasal administration of glucose-regulating peptides
EP1758575A1 (en) 2004-06-11 2007-03-07 Novo Nordisk A/S Counteracting drug-induced obesity using glp-1 agonists
DE102004054054A1 (de) 2004-11-05 2006-05-11 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Verfahren zur Herstellung chiraler 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine
EP2769990A3 (en) 2004-12-02 2015-02-25 Domantis Limited Bispecific domain antibodies targeting serum albumin and GLP-1 or PYY
MX2008013304A (es) 2006-04-20 2008-10-27 Amgen Inc Compuestos de peptido 1 tipo glucagon.
CN101437823B (zh) 2006-05-04 2014-12-10 勃林格殷格翰国际有限公司 多晶型
EP1852108A1 (en) 2006-05-04 2007-11-07 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG DPP IV inhibitor formulations
PE20110235A1 (es) 2006-05-04 2011-04-14 Boehringer Ingelheim Int Combinaciones farmaceuticas que comprenden linagliptina y metmorfina
PE20091730A1 (es) 2008-04-03 2009-12-10 Boehringer Ingelheim Int Formulaciones que comprenden un inhibidor de dpp4
BRPI0916997A2 (pt) 2008-08-06 2020-12-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Inibidor de dpp-4 e seu uso
US20200155558A1 (en) 2018-11-20 2020-05-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Treatment for diabetes in patients with insufficient glycemic control despite therapy with an oral antidiabetic drug
CN102271775A (zh) 2008-12-08 2011-12-07 诺沃-诺迪斯克有限公司 多肽的逆流提纯
EA034869B1 (ru) 2009-11-27 2020-03-31 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Лечение генотипированных пациентов с диабетом ингибиторами дпп-4, такими как линаглиптин
WO2011123943A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Mount Sinai Hospital Methods for treating disorders of the gastrointestinal tract using a glp-1 agonist
CA2797033C (en) 2010-04-22 2021-10-19 Longevity Biotech, Inc. Highly active polypeptides and methods of making and using the same
BR112012028136A2 (pt) 2010-05-05 2016-08-09 Boehringer Ingelheim Int terapia de combinaçao
US9034883B2 (en) 2010-11-15 2015-05-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Vasoprotective and cardioprotective antidiabetic therapy
UY34347A (es) 2011-09-26 2013-04-30 Novartis Ag Proteínas de función dual para tratar trastornos metabólicos
US20130172244A1 (en) * 2011-12-29 2013-07-04 Thomas Klein Subcutaneous therapeutic use of dpp-4 inhibitor
US9555001B2 (en) 2012-03-07 2017-01-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition and uses thereof
JP6224084B2 (ja) 2012-05-14 2017-11-01 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 糸球体上皮細胞関連障害及び／又はネフローゼ症候群の治療に用いるｄｐｐ−４阻害薬としてのキサンチン誘導体
WO2013174767A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh A xanthine derivative as dpp -4 inhibitor for use in modifying food intake and regulating food preference
WO2014010586A1 (ja) 2012-07-10 2014-01-16 武田薬品工業株式会社 注射用製剤
WO2014145718A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Longevity Biotech, Inc. Peptides comprising non-natural amino acids and methods of making and using the same
US20160235810A1 (en) 2013-10-18 2016-08-18 Novartis Ag Methods of treating diabetes and related disorders
ES2950384T3 (es) 2014-02-28 2023-10-09 Boehringer Ingelheim Int Uso médico de un inhibidor de DPP-4
US10155000B2 (en) 2016-06-10 2018-12-18 Boehringer Ingelheim International Gmbh Medical use of pharmaceutical combination or composition
EP4360651A2 (en) 2017-08-24 2024-05-01 Novo Nordisk A/S Glp-1 compositions and uses thereof
WO2019119673A1 (zh) 2017-12-19 2019-06-27 北京吉源生物科技有限公司 一种双基因修饰的干细胞及其用途
EP4106724A1 (en) 2020-02-18 2022-12-28 Novo Nordisk A/S Glp-1 compositions and uses thereof

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK283180A (da) * 1980-07-01 1982-01-02 Novo Industri As Polypeptider og derivater deraf
NZ202757A (en) * 1981-12-23 1985-11-08 Novo Industri As Peptides and medicaments
EP0587255A1 (en) 1986-05-05 1994-03-16 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone

Non-Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ACTA FNDOCRINOL\\\9701064=1972 *
DIABETELOGIA\\\9701061=1985 *
Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，２８，７０４−７０７（１９８５）
DIALETOLOGIA=1985 *
JOURNAL OF EXPERIMENJAL MEDICINE\\\9701067=1956 *
PEPTIDE CHEMISTRY\\\9701068=1985 *
ＲＥＧＵＬＡＴＯＲＹ ＰＥＰＴＩＤＥ，１３，Ｐ１０１（１９８５）
REGULATORY PEPTIDE=1985 *
REGULATORY PEPTIDES\\\9701062=1985 *
THE JOURNAL OF BIOLOGICAL\\\9701063=1985 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7138486B2 (en) 1986-05-05 2006-11-21 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone derivatives and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EP0305387A4 (en) 1990-04-10
EP1498425A1 (en) 2005-01-19
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DE3750402D1 (en) 1994-09-22

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