JP2508001B2 - 耐塩性カタラ−ゼおよび過酸化水素の分解法 - Google Patents
耐塩性カタラ−ゼおよび過酸化水素の分解法Info
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- JP2508001B2 JP2508001B2 JP61147105A JP14710586A JP2508001B2 JP 2508001 B2 JP2508001 B2 JP 2508001B2 JP 61147105 A JP61147105 A JP 61147105A JP 14710586 A JP14710586 A JP 14710586A JP 2508001 B2 JP2508001 B2 JP 2508001B2
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- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、新規なカタラーゼに関し、さらに詳細には
耐塩性の大きいカタラーゼならびにその用途に関するも
のである。
耐塩性の大きいカタラーゼならびにその用途に関するも
のである。
カタラーゼは、生体内の種々の酵素反応などによつて
生成する過酸化水素を水と酸素とに分解する酸素であ
り、動物、植物および微生物などの体内に広く存在する
ことが良く知られている。
生成する過酸化水素を水と酸素とに分解する酸素であ
り、動物、植物および微生物などの体内に広く存在する
ことが良く知られている。
また、カタラーゼは、食品加工および臨床検査等に、
従来から広く実用に供されている酵素である。
従来から広く実用に供されている酵素である。
従来のカタラーゼとしては、特開昭55−135588、特開
昭60−83579および特公昭49−4956などのように、微生
物からのカタラーゼや、たとえば豚、牛の肝臓などの動
物臓器由来のカタラーゼなどが知られている。
昭60−83579および特公昭49−4956などのように、微生
物からのカタラーゼや、たとえば豚、牛の肝臓などの動
物臓器由来のカタラーゼなどが知られている。
しかし、従来のカタラーゼは耐塩性が比較的小さいも
のしか知られておらず、高い塩濃度の環境下で過酸化水
素を分解するためにカタラーゼは使用されず、カタラー
ゼの用途は限定されていた。
のしか知られておらず、高い塩濃度の環境下で過酸化水
素を分解するためにカタラーゼは使用されず、カタラー
ゼの用途は限定されていた。
ところで、たとえば、数の子などは塩蔵に先立つて過
酸化水素による漂白、残留過酸化水素の分解除去などの
一連の処理が行なわれているが、これらの処理は数の子
の風味を保つために高い塩濃度の水性液中で行なわれる
のが一般である。しかしながら、従来、市販されている
カタラーゼは一般に耐塩性が小さいために残留過酸化水
素の分解除去が困難であり乃至は多量のカタラーゼが必
要とされていた。このような見地から耐塩性の大きいカ
タラーゼの出現が期待されていた。
酸化水素による漂白、残留過酸化水素の分解除去などの
一連の処理が行なわれているが、これらの処理は数の子
の風味を保つために高い塩濃度の水性液中で行なわれる
のが一般である。しかしながら、従来、市販されている
カタラーゼは一般に耐塩性が小さいために残留過酸化水
素の分解除去が困難であり乃至は多量のカタラーゼが必
要とされていた。このような見地から耐塩性の大きいカ
タラーゼの出現が期待されていた。
本発明者らは、耐塩性カタラーゼについて鋭意検討を
行なつてきた。その結果、耐塩性の大きい新規なカタラ
ーゼを発見し、さらにこの新規なカタラーゼの用途を開
発するに至つた。
行なつてきた。その結果、耐塩性の大きい新規なカタラ
ーゼを発見し、さらにこの新規なカタラーゼの用途を開
発するに至つた。
すなわち、本発明は食塩濃度が7W/V％以上の水性溶液
中においても相対活性が50％以上である耐塩性の大きい
新規なカタラーゼである。
中においても相対活性が50％以上である耐塩性の大きい
新規なカタラーゼである。
本発明の耐塩性カタラーゼは、従来のカタラーゼと比
較して耐塩性が著しく大きいほかは大きく異る処はな
い。すなわち、 作用および基質特異性 高食塩濃度の水性溶液中に存在する過酸化水素を水と
酸素とに分解する。
較して耐塩性が著しく大きいほかは大きく異る処はな
い。すなわち、 作用および基質特異性 高食塩濃度の水性溶液中に存在する過酸化水素を水と
酸素とに分解する。
耐塩性 食塩濃度が7W/V％以上の水性溶液−たとえば高濃度食
塩水および高濃度食塩含有緩衝液−中で相対活性（食塩
濃度零の水性溶液中におけるカタラーゼの活性に対する
割合−以下同様）は50％以上である。なお本発明の耐塩
性カタラーゼは、たとえば、食塩濃度が5W/V％の水性溶
液中では、相対活性80％程度の極めて高い活性を示す
が、食塩濃度10W/V％の水性溶液中でも相対活性が約60
％程度の高い活性を示し、食塩濃度13〜15W/V％で相対
活性が約50％程度を示す。勿論、食塩濃度が7W/V％未満
では食塩濃度7W/V％以上のときよりも活性が大きく、こ
の活性の大きさは市販品の活性よりもはるかに大きい。
塩水および高濃度食塩含有緩衝液−中で相対活性（食塩
濃度零の水性溶液中におけるカタラーゼの活性に対する
割合−以下同様）は50％以上である。なお本発明の耐塩
性カタラーゼは、たとえば、食塩濃度が5W/V％の水性溶
液中では、相対活性80％程度の極めて高い活性を示す
が、食塩濃度10W/V％の水性溶液中でも相対活性が約60
％程度の高い活性を示し、食塩濃度13〜15W/V％で相対
活性が約50％程度を示す。勿論、食塩濃度が7W/V％未満
では食塩濃度7W/V％以上のときよりも活性が大きく、こ
の活性の大きさは市販品の活性よりもはるかに大きい。
至適 pH りん酸緩衝液、トリス−塩酸緩衝液およびくえん酸緩
衝液を用いて調製したpH3〜９の各pH緩衝液中での活性
を30℃にて測定した。
衝液を用いて調製したpH3〜９の各pH緩衝液中での活性
を30℃にて測定した。
至適温度 30〜50℃ pH7で測定した。
pH安定性 pH6〜９ りん酸緩衝液、トリス−塩酸緩衝液およびくえん酸緩
衝液を用いて調製したpH3〜９の各pH緩衝液中に本発明
のカタラーゼを溶解し30℃で60分間加温した後、酵素の
残存活性を測定し、最大の活性に対して95％以上の活性
を示すpHをあらわす。
衝液を用いて調製したpH3〜９の各pH緩衝液中に本発明
のカタラーゼを溶解し30℃で60分間加温した後、酵素の
残存活性を測定し、最大の活性に対して95％以上の活性
を示すpHをあらわす。
耐熱性 50〜60℃ pH7の0.05Mりん酸緩衝液に本発明のカタラーゼを溶解
した溶液を所定の温度で30分間加熱した後、冷却した。
最大活性に対して50％になる温度を表示した。なお、活
性は30℃で測定した。
した溶液を所定の温度で30分間加熱した後、冷却した。
最大活性に対して50％になる温度を表示した。なお、活
性は30℃で測定した。
分子量 約20万〜26万 トヨパールHW−60S〔東洋醸造（株）製〕を用いたゲ
ルろ過法で測定した。
ルろ過法で測定した。
なお、カタラーゼの活性はエツチ・アエビらによる方
法〔H.Aebi et al.Method Enzyme Analysis Vol.2p.673
（1974）〕によつて測定した。すなわち、基質である過
酸化水素がカタラーゼによつて分解されて減少する程度
を240mmの吸光度の変化によつて追跡した。なお、カタ
ラーゼの活性は、１分間に分解される過酸化水素の１マ
イクロモルを１単位（Ｕ）とした（以下同様）。
法〔H.Aebi et al.Method Enzyme Analysis Vol.2p.673
（1974）〕によつて測定した。すなわち、基質である過
酸化水素がカタラーゼによつて分解されて減少する程度
を240mmの吸光度の変化によつて追跡した。なお、カタ
ラーゼの活性は、１分間に分解される過酸化水素の１マ
イクロモルを１単位（Ｕ）とした（以下同様）。
本発明の耐塩性カタラーゼは、一般に、耐塩性カタラ
ーゼ生産能を有する微生物を、好気的に培養して得られ
た菌体から、採取される。すなわち、耐塩性カタラーゼ
生産能を有する微生物としては、たとえば酵母がある。
酵母としてはハンセヌラ属、キヤンデイダ属およびトル
ロプシス属などのそれぞれに属する酵母が好ましく、就
中、ハンセヌラ属に属する酵母が好ましい。ハンセヌラ
属に属する酵母の代表例としてハンセヌラ・ポリモルフ
アおよびハンセヌラ・フイロデンドラなどを挙げること
ができる。ハンセヌラ・ポリモルフアに属する代表的な
保存菌株としてはFERM P−2337、IFO1024、CBS 1977お
よびATCC14755などが挙げられる。また、ハンセヌラ・
フイロデンデラに属する代表的な保存菌株としては、CB
S 6088、CBS 6111およびCBS 6075などが挙げられる。
ーゼ生産能を有する微生物を、好気的に培養して得られ
た菌体から、採取される。すなわち、耐塩性カタラーゼ
生産能を有する微生物としては、たとえば酵母がある。
酵母としてはハンセヌラ属、キヤンデイダ属およびトル
ロプシス属などのそれぞれに属する酵母が好ましく、就
中、ハンセヌラ属に属する酵母が好ましい。ハンセヌラ
属に属する酵母の代表例としてハンセヌラ・ポリモルフ
アおよびハンセヌラ・フイロデンドラなどを挙げること
ができる。ハンセヌラ・ポリモルフアに属する代表的な
保存菌株としてはFERM P−2337、IFO1024、CBS 1977お
よびATCC14755などが挙げられる。また、ハンセヌラ・
フイロデンデラに属する代表的な保存菌株としては、CB
S 6088、CBS 6111およびCBS 6075などが挙げられる。
これらの微生物は、これらの微生物が活発に増殖しう
る条件下で、常法により培養される。
る条件下で、常法により培養される。
たとえば、炭素源としてこれらの微生物が資化し得る
ものであればいずれでも良いが、メタノールが最も好ま
しい。炭素源のほかに、ちつ素源や、ミネラル類および
ビタミン類などを培地に含有せしめることが好ましい。
ちつ素源としては、たとえばアンモニウム塩類、ペプト
ン、酵母エキス、コーン・ステイープ・リカーおよびカ
ザミノ酸などが好適に利用される。ミネラル類として
は、たとえばりん酸塩類、マグネシウム塩類、カリウム
塩類、カルシウム塩類、コバルト塩類、亜鉛塩類および
鉄塩類などを使用することができる。
ものであればいずれでも良いが、メタノールが最も好ま
しい。炭素源のほかに、ちつ素源や、ミネラル類および
ビタミン類などを培地に含有せしめることが好ましい。
ちつ素源としては、たとえばアンモニウム塩類、ペプト
ン、酵母エキス、コーン・ステイープ・リカーおよびカ
ザミノ酸などが好適に利用される。ミネラル類として
は、たとえばりん酸塩類、マグネシウム塩類、カリウム
塩類、カルシウム塩類、コバルト塩類、亜鉛塩類および
鉄塩類などを使用することができる。
培養方式としては回分培養、連続培養のいずれも可能
である。
である。
培養温度は微生物の種類によつて異なり、一概には特
定しえないが、通常20〜45℃、好ましくは30〜40℃であ
る。培養pHは通常は２〜６、好ましくは３〜５である。
実際の培養においては培養液のpHを一定に保つのが好ま
しく、pHの調製には苛性ソーダ、アンモニア水などのア
ルカリが用いられる。
定しえないが、通常20〜45℃、好ましくは30〜40℃であ
る。培養pHは通常は２〜６、好ましくは３〜５である。
実際の培養においては培養液のpHを一定に保つのが好ま
しく、pHの調製には苛性ソーダ、アンモニア水などのア
ルカリが用いられる。
培養終了後、培養液から耐塩性カタラーゼを採取する
には、通常の方法を用いることができる。すなわち、培
養液から、たとえば遠心分離またはろ過などにより培養
液から酵母菌体を濃縮分離する。得られた酵母菌体は超
音波、フレンチプレスまたは機械的な磨砕などによつて
菌体を破壊し、またはトルエンおよび酢酸エチルなどに
より自己消化させてカタラーゼを菌体外に排出、可溶化
させることにより粗酵素標品が得られる。
には、通常の方法を用いることができる。すなわち、培
養液から、たとえば遠心分離またはろ過などにより培養
液から酵母菌体を濃縮分離する。得られた酵母菌体は超
音波、フレンチプレスまたは機械的な磨砕などによつて
菌体を破壊し、またはトルエンおよび酢酸エチルなどに
より自己消化させてカタラーゼを菌体外に排出、可溶化
させることにより粗酵素標品が得られる。
これを、さらに精製するには、たとえばDEAE−セルロ
ースなどによるイオン交換クロマトグラフイー、ハイド
ロキシアパタイトによるクロマトグラフイーまたは各種
のゲルを用いるゲル−過あるいは硫安などによる塩
析、エタノールおよびアセトンなどによる有機溶媒沈殿
などの通常の酵素精製技術から適宜選択した精製法を単
独でまたは組みあわせることにより、精製採取が可能で
ある。また、用途によつては精製を行なわない粗酵素製
品も、そのままカタラーゼ含有物としても使用が可能で
ある。
ースなどによるイオン交換クロマトグラフイー、ハイド
ロキシアパタイトによるクロマトグラフイーまたは各種
のゲルを用いるゲル−過あるいは硫安などによる塩
析、エタノールおよびアセトンなどによる有機溶媒沈殿
などの通常の酵素精製技術から適宜選択した精製法を単
独でまたは組みあわせることにより、精製採取が可能で
ある。また、用途によつては精製を行なわない粗酵素製
品も、そのままカタラーゼ含有物としても使用が可能で
ある。
このようにして得られた耐塩性カタラーゼは、食塩濃
度の高い水性溶液に含有されている過酸化水素を分解さ
せるために使用される。具体的には、たとえば、塩蔵前
に過酸化水素で漂白された数の子原卵に付着残存してい
る過酸化水素の分解除去に使用される。この処理は、通
常は漂白後の数の子を食塩水で洗浄しまたは洗浄しない
でそのまゝ、耐塩性カタラーゼ水性溶液に浸漬して行な
われる。このときの耐塩性カタラーゼの濃度および使用
量は、浸漬液の食塩の濃度、温度、pHなどにより異り、
適宜選択される。
度の高い水性溶液に含有されている過酸化水素を分解さ
せるために使用される。具体的には、たとえば、塩蔵前
に過酸化水素で漂白された数の子原卵に付着残存してい
る過酸化水素の分解除去に使用される。この処理は、通
常は漂白後の数の子を食塩水で洗浄しまたは洗浄しない
でそのまゝ、耐塩性カタラーゼ水性溶液に浸漬して行な
われる。このときの耐塩性カタラーゼの濃度および使用
量は、浸漬液の食塩の濃度、温度、pHなどにより異り、
適宜選択される。
また、使用条件は本発明の耐熱性カタラーゼが失活し
ない条件であればよく、前記の本発明の耐熱性カタラー
ゼの性質を勘案して決定される。
ない条件であればよく、前記の本発明の耐熱性カタラー
ゼの性質を勘案して決定される。
実施例により本発明をさらに具体的に説明する。な
お、本発明は実施例に限定されるものではない。
お、本発明は実施例に限定されるものではない。
実施例１ （NH4)2SO4 3g/l、KH2PO4 4g/l、MgSO4・7H2O 0.4g/
l、酵母エキス 0.2g/l、ビオチン 10μg/l、チアミン 5
mg/l、くえん酸鉄（含水物） 50mg/l、CaCl2・2H2O30mg
/l、ZnSO4・7H2O 10mg/l、MnCl2・4H2O 10mg/l、CuSO4
・5H2O 0.5mg/lおよびメタノール10ml/l含む培地を１
三角フラスコに150ml張りこみ、120℃で20分間加圧滅菌
した後、冷却した。同様な培地組成でハンセヌラ・フイ
ロデンドラ CBS 6088を100ml容三角フラスコで２日間、
30℃で振とう培養し、予め調製した種母をこの１三角
フラスコにフラスコあたり2mlずつ植菌した。培養温度3
0℃で、回転振とう培養機で培養し、培養開始後約60時
間経過し、基質のメタノールをほぼ消費しつくした時点
で培養を終了した。培養液１を遠心分離機にかけて集
菌した。
l、酵母エキス 0.2g/l、ビオチン 10μg/l、チアミン 5
mg/l、くえん酸鉄（含水物） 50mg/l、CaCl2・2H2O30mg
/l、ZnSO4・7H2O 10mg/l、MnCl2・4H2O 10mg/l、CuSO4
・5H2O 0.5mg/lおよびメタノール10ml/l含む培地を１
三角フラスコに150ml張りこみ、120℃で20分間加圧滅菌
した後、冷却した。同様な培地組成でハンセヌラ・フイ
ロデンドラ CBS 6088を100ml容三角フラスコで２日間、
30℃で振とう培養し、予め調製した種母をこの１三角
フラスコにフラスコあたり2mlずつ植菌した。培養温度3
0℃で、回転振とう培養機で培養し、培養開始後約60時
間経過し、基質のメタノールをほぼ消費しつくした時点
で培養を終了した。培養液１を遠心分離機にかけて集
菌した。
この菌体をpH7.0、0.05Mりん酸緩衝液で１回洗浄した
後、フレンチプレス（アミンコ社製）で菌体を破砕し
た。得られた菌体破砕液を遠心分離にかけ、不溶物を除
去して、カタラーゼの粗酵素液を得た。この粗酵素液中
には。カタラーゼが約70万単位含まれていた。
後、フレンチプレス（アミンコ社製）で菌体を破砕し
た。得られた菌体破砕液を遠心分離にかけ、不溶物を除
去して、カタラーゼの粗酵素液を得た。この粗酵素液中
には。カタラーゼが約70万単位含まれていた。
この液を５℃に保ちつゝ、この液にエタノール濃度が
60V/V％になるように、エタノールを徐々に添加してカ
タラーゼを沈殿させた。このカタラーゼ含有沈殿区分を
pH7.0、0.05Mりん酸緩衝液に再溶解した後、不溶物を遠
心分離で除き、上清液を採取して、アミコン社製YM−10
0の隅外ろ過膜で濃縮して部分精製カタラーゼを調製し
た。部分精製カタラーゼは2800単位/mg蛋白の比活性を
有し、菌体破砕液からの回収率は約85％であつた。
60V/V％になるように、エタノールを徐々に添加してカ
タラーゼを沈殿させた。このカタラーゼ含有沈殿区分を
pH7.0、0.05Mりん酸緩衝液に再溶解した後、不溶物を遠
心分離で除き、上清液を採取して、アミコン社製YM−10
0の隅外ろ過膜で濃縮して部分精製カタラーゼを調製し
た。部分精製カタラーゼは2800単位/mg蛋白の比活性を
有し、菌体破砕液からの回収率は約85％であつた。
得られたカタラーゼの耐塩性を第１図に、またそれ以
外の性質を第１表に示す。
外の性質を第１表に示す。
実施例２ 実施例１と同様にしてハンセヌラ・ポリモルフア FER
M P−2337を１容三角フラスコで30℃で約50時間培養
し、メタノールをほぼ消費した時点で培養を終了した。
得られた培養液１を遠心分離機にかけて集菌した。実
施例１と同様に菌体を破砕し、粗酵素液を得た。この粗
酵素液中にカタラーゼは約120万単位が含まれていた。
M P−2337を１容三角フラスコで30℃で約50時間培養
し、メタノールをほぼ消費した時点で培養を終了した。
得られた培養液１を遠心分離機にかけて集菌した。実
施例１と同様に菌体を破砕し、粗酵素液を得た。この粗
酵素液中にカタラーゼは約120万単位が含まれていた。
この液を５℃に保ちつゝ、この液にエタノール濃度が
60V/V％になるようにエタノールを徐々に添加してカタ
ラーゼを沈殿させ、さらにpH7.0、0.05Mりん酸緩衝液に
再溶解後、不溶残渣を遠心分離により除去して上清液を
採取した。この上清液をアミコン社製YM−100の限外ろ
過膜で濃縮し、部分精製カタラーゼを調製した。
60V/V％になるようにエタノールを徐々に添加してカタ
ラーゼを沈殿させ、さらにpH7.0、0.05Mりん酸緩衝液に
再溶解後、不溶残渣を遠心分離により除去して上清液を
採取した。この上清液をアミコン社製YM−100の限外ろ
過膜で濃縮し、部分精製カタラーゼを調製した。
部分精製カタラーゼ液から精製カタラーゼ液の調製は
次のように行なつた。すなわち、部分精製カタラーゼ約
80万単位を、pH7.0、0.1Mりん酸緩衝液であらかじめ平
衡化してあるDEAE−セフアデツクス（Ａ−25）（フアル
マシア社製品）に吸着せしめた後、０〜0.5Mの塩化カリ
ウムの直線濃度勾配にてカタラーゼを溶出させた。溶出
させたカタラーゼを、YM−100限外ろ過膜で濃縮した
後、セフアデツクス G−200で一回目のゲルろ過にかけ
た。カタラーゼ区分を再度セフアデツクスＧ−200でゲ
ルろ過して活性中心区分を集めたところ、蛋白質として
は2.8mg、酵素活性13万単位が得られ、その回収率は16
％であつた。
次のように行なつた。すなわち、部分精製カタラーゼ約
80万単位を、pH7.0、0.1Mりん酸緩衝液であらかじめ平
衡化してあるDEAE−セフアデツクス（Ａ−25）（フアル
マシア社製品）に吸着せしめた後、０〜0.5Mの塩化カリ
ウムの直線濃度勾配にてカタラーゼを溶出させた。溶出
させたカタラーゼを、YM−100限外ろ過膜で濃縮した
後、セフアデツクス G−200で一回目のゲルろ過にかけ
た。カタラーゼ区分を再度セフアデツクスＧ−200でゲ
ルろ過して活性中心区分を集めたところ、蛋白質として
は2.8mg、酵素活性13万単位が得られ、その回収率は16
％であつた。
得られたカタラーゼの耐塩性を第１図に、また他の性
質を第１表に示す。
質を第１表に示す。
なお、比較のために市販の豚肝臓由来のカタラーゼの
耐塩性も第１図に示した。
耐塩性も第１図に示した。
第１表 実施例１ 実施例２ 至適pH ７〜８ ７〜８ 至適温度 35℃ 40℃ pH安定性 ７ ７ 耐熱性 50℃ 55℃ 分子量 約24万 約24万 耐塩性＊ 14W/V％以下 15W/V％以下 ＊ 相
対活性50％以上を示す食塩濃度で示す。
対活性50％以上を示す食塩濃度で示す。
使用例 塩蔵用数の子原卵5Kgずつを籠に入れて水洗した後、
1.0V/V％の過酸化水素を含む10W/V％の食塩水に５日間
浸漬して漂白した。この数の子を取出して6W/V％の食塩
水でさらに洗浄した後、実施例１および実施例２のそれ
ぞれで得られた耐塩性カタラーゼを約5U/mlになる様に
添加して、とかしたカタラーゼ水溶液に浸漬した。なお
この液の食塩濃度は約10W/V％であつた。浸漬は３日間
行ない、24時間後に１回、48時間目に１回、カタラーゼ
をそれぞれ5U/mlになる様に追加した。カタラーゼ処理
数の子を液から取り出し約５％食塩水で洗浄し、カタラ
ーゼを十分洗い流した。さらにこの数の子を飽和食塩水
に浸漬し、塩固めを行なつた。塩固めをした数の子中の
残留過酸化水素を衛生試験法（日本薬学会）のヨウ素法
で分析したが、過酸化水素は検出されなかつた。
1.0V/V％の過酸化水素を含む10W/V％の食塩水に５日間
浸漬して漂白した。この数の子を取出して6W/V％の食塩
水でさらに洗浄した後、実施例１および実施例２のそれ
ぞれで得られた耐塩性カタラーゼを約5U/mlになる様に
添加して、とかしたカタラーゼ水溶液に浸漬した。なお
この液の食塩濃度は約10W/V％であつた。浸漬は３日間
行ない、24時間後に１回、48時間目に１回、カタラーゼ
をそれぞれ5U/mlになる様に追加した。カタラーゼ処理
数の子を液から取り出し約５％食塩水で洗浄し、カタラ
ーゼを十分洗い流した。さらにこの数の子を飽和食塩水
に浸漬し、塩固めを行なつた。塩固めをした数の子中の
残留過酸化水素を衛生試験法（日本薬学会）のヨウ素法
で分析したが、過酸化水素は検出されなかつた。
本発明のカタラーゼは耐塩性が極めて大きく、従つて
その用途は拡大される。本発明の耐塩性カタラーゼを使
用することにより、たとえば、過酸化水素で漂白した後
の数の子に付着残留している過酸化水素の分解除去が容
易になる。
その用途は拡大される。本発明の耐塩性カタラーゼを使
用することにより、たとえば、過酸化水素で漂白した後
の数の子に付着残留している過酸化水素の分解除去が容
易になる。
第１図は本発明の耐塩性カタラーゼおよび市販品の豚の
肝臓由来のカタラーゼのそれぞれの耐塩性を示す。なお
図面において、曲線Ａ、ＢおよびＣはそれぞれ、ハンセ
ヌラ・ポリモルフア FERMP−2337、ハンセヌラ・フイロ
デンドラ CBS 6088および市販カタラーゼの耐塩性を示
す。
肝臓由来のカタラーゼのそれぞれの耐塩性を示す。なお
図面において、曲線Ａ、ＢおよびＣはそれぞれ、ハンセ
ヌラ・ポリモルフア FERMP−2337、ハンセヌラ・フイロ
デンドラ CBS 6088および市販カタラーゼの耐塩性を示
す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:78） Ｃ１２Ｒ 1:78）
Claims (2)
- 【請求項１】ハンセヌラ・ポリモルフア（Hansenula po
lymorpha）またはハンセヌラ・フイロデンドラ（Hansen
ula philodendra）に由来する、下記〜の理化学的
性質を有する耐塩性カタラーゼ、 作用：高食塩濃度の水性溶液中に存在する過酸化水
素を水と酸素に分解する； 基質特異性：過酸化水素を基質とする； 至適pH:pH7; 安定pH範囲：各種pHの緩衝液中にカタラーゼを溶解
し30℃で60分間加温したのち後の残存活性が、最大の活
性に対して95％以上の活性を示すpH範囲がpH6〜９であ
る； 至適温度:30〜50℃； 耐熱性:pH7の0.05Mりん酸緩衝液にカタラーゼを溶
解し所定の温度で30分間加熱した後30℃で測定した場合
の活性が、最大の活性に対して50％になる温度が50〜60
℃である； 耐塩性：食塩濃度が7W/V％以上の水性溶液中におい
て相対活性が50％以上； 分子量：約20〜26万。 - 【請求項２】食塩含有水性溶液の含有されている過酸化
水素に、ハンセヌラ・ポリモルフア（Hansenula polymo
rpha）またはハンセヌラ・フイロデンドラ（Hansenula
philodendra）に由来し下記〜の理化学的性質を有
する耐塩性カタラーゼを接触させることを特徴とする過
酸化水素の分解法、 作用：高食塩濃度の水性溶液中に存在する過酸化水
素を水と酸素に分解する； 基質特異性：過酸化水素を基質とする； 至適pH:pH7; 安定pH範囲：各種pHの緩衝液中にカタラーゼを溶解
し30℃で60分間加温したのち後の残存活性が、最大の活
性に対して95％以上の活性を示すpH範囲がpH6〜９であ
る； 至適温度:30〜50℃； 耐熱性:pH7の0.05Mりん酸緩衝液にカタラーゼを溶
解し所定の温度で30分間加熱した後30℃で測定した場合
の活性が、最大の活性に対して50％になる温度が50〜60
℃である； 耐塩性：食塩濃度が7W/V％以上の水性容液中におい
て相対活性が50％以上； 分子量：約20〜26万。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61147105A JP2508001B2 (ja) | 1986-06-25 | 1986-06-25 | 耐塩性カタラ−ゼおよび過酸化水素の分解法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61147105A JP2508001B2 (ja) | 1986-06-25 | 1986-06-25 | 耐塩性カタラ−ゼおよび過酸化水素の分解法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS633788A JPS633788A (ja) | 1988-01-08 |
| JP2508001B2 true JP2508001B2 (ja) | 1996-06-19 |
Family
ID=15422627
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61147105A Expired - Lifetime JP2508001B2 (ja) | 1986-06-25 | 1986-06-25 | 耐塩性カタラ−ゼおよび過酸化水素の分解法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2508001B2 (ja) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| WO2009104622A1 (ja) | 2008-02-18 | 2009-08-27 | 明治製菓株式会社 | 耐熱性カタラーゼ |
| WO2014086659A2 (en) | 2012-12-06 | 2014-06-12 | Ahmedabad Textile Industry's Research Association | Method for enzymatical preparation of textiles |
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| US11214758B2 (en) | 2014-03-14 | 2022-01-04 | Lubrizol Advanced Materials, Inc. | Itaconic acid polymers and copolymers |
| CN116253421A (zh) * | 2022-11-29 | 2023-06-13 | 嘉兴沃特泰科环保科技股份有限公司 | 一种水处理用双氧水去除剂、制备方法和应用 |
-
1986
- 1986-06-25 JP JP61147105A patent/JP2508001B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS633788A (ja) | 1988-01-08 |
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