JP2023540771A - 炎症性腸疾患を治療する方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を治療及び／又は予防するための、薬学的方法、医薬品組成物、及び医薬品組み合わせに関する。本発明は特に、ＩＢＤを治療するための、式（Ｉ）の化合物、【化１】JPEG2023540771000018.jpg8496又はその製薬上許容される塩、を含む、方法及び組成物に関する。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年９月４日に出願されたＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１１３４６６号に対する優先権の利益を主張するものであり、その内容は全ての目的において参照によって本明細書に援用される。

本発明は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の治療法、並びにＩＢＤを治療するのに有用な組成物及び医薬に関する。前記方法及び組成物は、式（Ｉ）のレニン阻害剤がＩＢＤの症状及び徴候を軽減できることを示すデータに基づいている。

炎症性腸疾患は、多くの場合、クオリティ・オブ・ライフに劇的な影響を与え得る慢性状態である。ＩＢＤには、クローン病（ＣＤ）及び潰瘍性大腸炎（ＵＣ）が含まれる。十分には理解されていないが、ＩＢＤは一般的には、粘膜免疫系の過剰又は異常な活性化を伴うと考えられている。現行のＩＢＤ治療法としては、抗炎症性コルチコステロイド、アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）、免疫経路阻害薬（アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、メトトレキサート、ＴＮＦ－α阻害薬）などが挙げられる。しかしながら、一部の患者は、これらの利用可能な治療薬に反応せず、一部の患者は、公知の治療レジメンに最初は反応するものの、その後効力が失われる。このようなことから、ＩＢＤに対する新規の治療モダリティが依然として求められている。

レニン・アンジオテンシン系（ＲＡＳ）の活性化によって大腸炎が促されることが最近報告された。Ｙ． Ｓｈｉ， ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ （Ｎａｔｕｒｅ） ６， ２７５５２； ｄｏｉ： １０．１０３８／ｓｒｅｐ２７５５２ （２０１６）。活性型レニンを肝臓から過剰発現させるＲｅｎＴｇＭＫマウスは、２，４，６－トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）の直腸内点滴注入後の野生型コントロールよりも重度の大腸炎を発症した。ＲｅｎＴｇＭＫマウスは５０％超が死亡したが、野生型マウスは全て回復した。また、ＲｅｎＴｇＭＫマウスは、野生型コントロールと比較して、より頑健性の高い粘膜ＴＨ１７及びＴＨ１／ＴＨ１７反応と、より重度の結腸上皮細胞アポトーシスも示した。

これらのＲｅｎＴｇＭＫマウスを、レニン阻害剤であるアリスキレンの腹腔内注射による投与で治療したところ、このＲｅｎＴｇＭＫマウスにおける誘発性大腸炎は改善されたが、一方で、アリスキレンと同様に血圧を低下させる平滑筋弛緩薬であるヒドララジンによる治療では、大腸炎に影響は認められず、アリスキレン治療による大腸炎の軽減が、アリスキレン及びヒドララジンに共通の降圧効果とは無関係であることが示された。

アリスキレンは、高血圧の治療に承認された最初の直接的なレニン阻害剤である。アリスキレンはその目的で広く使われてきたが、腎毒性の可能性から、糖尿病患者及び腎機能障害患者に対しては一定のリスクとなっている。また、アリスキレンは、たったの２．５％という比較的低い生物学的利用能しか有しておらず（Ｔｅｋｔｕｒｎａ（登録商標）（アリスキレン）のラベル）、長々しい直鎖骨格に沿って４つのキラル中心が存在することから合成が複雑かつ高価である。

Ｓｈｉ研究の著者らは、使用された遺伝子導入試験動物がＲＡＳ阻害剤の効果を増幅しやすい性質であるため、Ｓｈｉらのモデル系が通常の代謝条件に必ずしも適用可能ではないことを認めている。著者らは、これらの発見が、内在性ＲＡＳが「通常の条件」下の大腸炎の発生に関与していることを意味していない可能性もあることを述べている。「ＲｅｎＴｇマウスモデルは、基本的には、研究のためにＲＡＳの作用を増幅している「人為的な」系である。通常の条件下で内在性ＲＡＳが大腸炎の発生に関与しているか否かについて取り組む必要がある．．．したがって、ＲＡＳの腸炎惹起作用に関する我々の結論を一般化することに対しては、慎重になる必要がある。」（Ｓｈｉ、ｐｐ７～８）。

本発明は、式（Ｉ）の直接的レニン阻害剤を用いた、新規のＩＢＤ治療法及び組成物を提供するものである。この化合物は、アリスキレンよりも優れた生物学的利用能を有し、レニンの阻害剤としてより強力な化合物である。本明細書のデータは、式（Ｉ）の化合物が、「正常」な（遺伝的にＲＡＳ活性にとりわけ敏感な体質ではない）ラット及びマウスの両方を用いたモデル系におけるＩＢＤの治療に有効であることを示している。加えて、式（Ｉ）の化合物は、ヒト潰瘍性大腸炎患者から、結腸組織における炎症性サイトカインの放出を低減することが示された。さらに、このラットのデータは、式（Ｉ）の化合物が経口投与された場合にＩＢＤの治療に有効であることを示している。

式（Ｉ）の化合物はレニン阻害剤であるが、式（Ｉ）の化合物がＩＬ－６を含むいくつかの重要な炎症性サイトカインの放出を阻害することが本明細書におけるデータによって示されていることから、ＩＢＤに対するその効果がレニンの阻害によるものであるかどうかは不明であり、すなわち、ＩＢＤにおける作用機序は未解明であり、多面的である可能性がある。しかし、本発明の方法は、現在承認されているＩＢＤ治療薬とは異なる機構で働くことが考えられるため、本発明の方法を現在の治療薬が効力を失う場合に使用することで、又は、本発明の方法を現在のＩＢＤ治療薬と組み合わせることで、ＩＢＤ患者に対し新しくより効果的な治療を得ることができる。

１つの態様では、本開示は、式（Ｉ）の化合物を用いて炎症性腸疾患を治療する方法を提供するものである。理論に制限されるものではないが、前記化合物は、レニンの強力な直接的阻害剤であることと、ＩＢＤ治療に対するその有効性をもたらす一因となり得る、炎症性サイトカインのレベルを減少させることが示されている。前記化合物は、経口投与を介した治療用途に適した薬物速度論的特性を有しており、現在では炎症性腸疾患のインビボ治療に有効であることが示されている。

理論に制限されるものではないが、式（Ｉ）の化合物は、新規の作用機序又は現在の治療法を補完できる機序の組み合わせを介して、ＩＢＤを治療すると考えられる。式（Ｉ）の化合物は、現在のＩＢＤ治療法と併せて、又は、現在のＩＢＤ治療法では問題がある患者や、現在のＩＢＤ治療法に対して十分な反応が得られない患者のための代替法として、使用することができる。これらの方法で治療できるＩＢＤとしては、クローン病及び潰瘍性大腸炎が挙げられる。これらの方法は、ＩＢＤ、例えば潰瘍性大腸炎又はクローン病と診断された対象の治療に有用である。

いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、典型的には錠剤又はカプセル剤などの固形剤として経口投与される。他の好適な製剤としては、経口投与用のソフトジェル剤、及び結腸への直接導入用の坐剤が挙げられる。投与は単回投与でも反復投与でもよく、式（Ｉ）の化合物の用量は、少なくとも１日１回、典型的には１つ又は２つ又は３つの錠剤又はカプセル剤で投与されてもよく、あるいは、１日おきに１回、又は少なくとも週１回の投与とすることもできる。いくつかの実施形態において、１回の服用量が、潰瘍性大腸炎又はクローン病の治療を必要としている対象に、少なくとも１日１回投与される。他の実施形態では、１回の服用量が、前記対象に、１日２回又は１日３回投与される。好ましい実施形態では、１日２回、典型的には経口投与で、服用量の投与が行なわれる。

別の態様において、本発明は、上記のような方法であって、前記式（Ｉ）の化合物が別のＩＢＤ治療法による治療も受けている対象に投与され、前記別のＩＢＤ治療法は、例えば、抗炎症性コルチコステロイド、アミノサリチル酸系薬、並びに、限定はされないが以下を含む他のＩＢＤ治療法から選択することができる、方法を提供するものである：
ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
ｇ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害剤（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
ｋ）アミノサリチル酸塩（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに
ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。

別の態様において、本発明は、ＩＢＤ治療用に製剤化され得る、式（Ｉ）の化合物を含む固形剤を提供する。前記固形剤は、典型的には、経口投与用に製剤化された単一単位剤形（ｓｉｎｇｌｅ ｕｎｉｔ ｄｏｓａｇｅ）で、２５ｍｇ～８００ｍｇの式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含有する。いくつかのそのような実施形態においては、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、抗炎症性コルチコステロイド、アミノサリチル酸系薬、並びに、以下のような他のＩＢＤ治療薬から選択される少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療薬を含む、錠剤、カプセル剤、ソフトジェル剤、又は坐剤などの剤形に製剤化される：
抗ＴＮＦα薬；
スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
抗接着（抗インテグリン）薬；
ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬；
トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；及び、
プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）。

さらに別の態様において、本開示は、経口投与用の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含む遅延放出製剤を提供する。典型的には、前記遅延放出製剤は、胃を通過して腸内に入ってから、対象の腸、特に結腸において、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の大部分又は実質的に全てを放出するように構成又は設計される。本発明はまた、そのような遅延放出製剤をＩＢＤに対する治療を必要としている対象に投与することによりＩＢＤを治療する方法を提供する。

さらに別の態様において、本開示は、炎症性腸疾患を治療するための式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を提供する。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、炎症性腸疾患に対する治療を必要としている対象への経口投与用に製剤化される。いくつかのそのような実施形態において、前記化合物又はその製薬上許容される塩は、受容者の胃を通過した後、受容者の腸管内で式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の大部分又は実質的に全てを放出させるように設計された遅延放出製剤として製剤化される。いくつかのそのような実施形態において、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の大半は、治療を受けた対象の結腸において放出される。

さらに別の態様において、本発明は、炎症性腸疾患の治療に使用するための医薬の製造において式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を使用する方法を提供する。いくつかのそのような実施形態において、前記医薬は経口送達用に製剤化される。いくつかのそのような実施形態において、前記医薬は、対象の胃を通過した後、対象の腸内で式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の大部分又は実質的に全てを放出させる遅延放出製剤として製剤化される。

さらに別の態様において、本開示は、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を投与することと、それ加えて以下から選択され得る少なくとも１つの他のＩＢＤ治療法で対象を治療することとを含む、炎症性腸疾患を治療及び／又は予防するための組み合わせを提供する：
ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
ｇ） ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
ｋ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；及び、
ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。

図１は、実施例１における、試験動物（ＤＮＢＳ誘発大腸炎モデルのウィスター系ラット）の体重を示している。 図２は、効果の指標として群毎の曲線下面積（ＡＵＣ）を用いた、記載されたような７日間の試験中にスコアリングされた便の硬さを示している。 図３は、結腸の重量（ＣＷ）、結腸の長さ（ＣＬ）、及び潰瘍面積を含む、７日間の治療の終了時の、実施例１における結腸の肉眼評価を示している。 図４Ａは、ＴＮＢＳ処置で大腸炎を誘発したＣ５７ＢＬ／６マウスの結腸間の肉眼による形態的差異を示しており、トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）暴露後に、２０ｍｇ／ｋｇのリンゴ酸塩（「ＳＰＨ－Ｘ」）としての式（Ｉ）の化合物で１日２回処置した場合で、ＴＮＢＳによって引き起こされたダメージが大きく回復していることを示している。 図４Ｂは、ＴＮＢＳ処置で大腸炎を誘発したＣ５７ＢＬ／６マウスの結腸間の肉眼による形態的差異を示しており、トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）暴露後に、２０ｍｇ／ｋｇのリンゴ酸塩（「ＳＰＨ－Ｘ」）としての式（Ｉ）の化合物で１日２回処置した場合で、ＴＮＢＳによって引き起こされたダメージが大きく回復していることを示している。 図５Ａは、誘発性大腸炎モデルから得られた、結腸粘膜組織に対するダメージの微視的証拠を示しており、ＴＮＢＳへの暴露後の、腹腔内投与による、５ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇのＳＰＨ－Ｘ（リンゴ酸塩としての式（Ｉ）の化合物）の１日２回処置が、そのようなダメージを治療又は予防することを明らかにしている。 図５Ｂは、誘発性大腸炎モデルから得られた、結腸粘膜組織に対するダメージの微視的証拠を示しており、ＴＮＢＳへの暴露後の、腹腔内投与による、５ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇのＳＰＨ－Ｘ（リンゴ酸塩としての式（Ｉ）の化合物）の１日２回処置が、そのようなダメージを治療又は予防することを明らかにしている。 図６は、ＳＰＨ－Ｘ（リンゴ酸塩としての式（Ｉ）の化合物）が、ＴＮＢＳへの暴露後の結腸粘膜組織における、サイトカインであるＩＬ－１β及びＩＬ－６の過剰な産生を有意に低減することを示している。 図７は、結腸組織のＴＮＢＳによる処置が、ＴＮＦ－αレベルの上昇をもたらすこと、及び、ＳＰＨ－Ｘ（１０ｍｇ／ｋｇ、１日２回）による処置が、ＴＮＦ－αの形成を低減又は停止させることを示している、ウエスタンブロットである。 図８Ａ～図８Ｃは、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）患者のヒト結腸組織試料からのＩＬ－６放出に対するＢｉｒｂ７９６及びＣＦＮ００１／０１（これは、リンゴ酸塩としての式（Ｉ）の化合物であるＳＰＨ－Ｘの特定のバッチを特定するものである）の効果を示しており：図８Ａは、ドナーＡの場合のデータを示している。 図８Ａ～図８Ｃは、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）患者のヒト結腸組織試料からのＩＬ－６放出に対するＢｉｒｂ７９６及びＣＦＮ００１／０１（これは、リンゴ酸塩としての式（Ｉ）の化合物であるＳＰＨ－Ｘの特定のバッチを特定するものである）の効果を示しており：図８ＢはドナーＢの場合のデータを示している。 図８Ａ～図８Ｃは、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）患者のヒト結腸組織試料からのＩＬ－６放出に対するＢｉｒｂ７９６及びＣＦＮ００１／０１（これは、リンゴ酸塩としての式（Ｉ）の化合物であるＳＰＨ－Ｘの特定のバッチを特定するものである）の効果を示しており：図８ＣはドナーＣの場合のデータを示している。

［選択された実施形態の説明］
［全般的な定義］
特に記載がない限り、本明細書で使用される全ての専門用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で参照された全ての特許、出願、公開出願、及び他の刊行物は、それらの全体が参照によって援用される。本節に記載された定義が、参照によって本明細書に援用された特許、出願、又は他の刊行物に記載された定義に相違ないし矛盾している場合、本節に記載された定義が参照によって本明細書に援用された定義よりも優先される。

本明細書で使用される場合、「ａ」又は「ａｎ」は、「少なくとも１つ」又は「１つ又は複数」を意味する。

「製薬上許容される塩」という語は、患者、例えばヒトなどの哺乳動物への投与が許容される塩（所与の用法（ｄｏｓａｇｅ ｒｅｇｉｍｅ）において許容できる哺乳類安全性を有する、対イオンを有する塩）を意味する。このような塩は、薬剤的に許容できる無機又は有機塩基に由来するもの、及び、薬剤的に許容できる無機又は有機酸に由来するものとすることができる。「製薬上許容される塩」とは、化合物の製薬上許容される塩を指すが、この塩は、当該技術分野において周知の種々の有機及び無機対イオンに由来するものであり、例示のみを目的として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなど；並びに、分子が塩基性官能基を含む場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、ギ酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、ベシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などの有機又は無機酸の塩が挙げられる。

「その塩」という語は、酸の水素イオンが金属カチオン又は有機カチオンなどの陽イオンによって置換された場合に形成される化合物を意味する。適用可能な場合、この塩は製薬上許容される塩であるが、これは、患者への投与が意図されていない中間化合物の塩に要求されるものではない。例として、本化合物の塩としては、当該化合物が無機又は有機酸によってプロトン化されて陽イオンを形成し、当該無機又は有機酸の共役塩基が当該塩の陰イオン成分となっているものが挙げられる。

［式（Ｉ）の化合物］
式（Ｉ）の化合物の構造を以下に示す。この化合物は、レニン阻害剤として強力な活性と、経口投与に適した薬物動態的特徴を示す。ラットにおける生物学的利用能は約１１．５～２４．５％であり、サルにおいては約３．３～１１．３％であった。アリスキレンに対しての血漿レニン活性が０．６０ｎＭであるのに対し、式（Ｉ）の化合物に対しての血漿レニン活性は０．２８ｎＭであり、０．２ｍｇ／ｋｇという低投与量であっても活性は２４時間維持された。

式（Ｉ）の化合物は、中性化合物として、又は製薬上許容される塩として、製剤化及び投与することができる。本明細書に記載された実験の場合、式（Ｉ）の化合物はリンゴ酸塩として投与された。この化合物の合成及び特徴付けは、例えば米国特許第９，２７８，９４４号に開示されている。前記リンゴ酸塩の調製は、米国特許第１０，５１９，１５０号に記載されている。本明細書で開示される方法、組成物及び組み合わせにおいては、式（Ｉ）の化合物のリンゴ酸塩が好ましい。

別の態様において、本開示は、炎症性腸疾患の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物、又はそのリンゴ酸塩を提供する。

別の態様において、本発明は、炎症性腸疾患を治療するための医薬を製造するために、式（Ｉ）の化合物、又はそのリンゴ酸塩を使用する方法を提供する。

本発明のいくつかの態様は、以下に列挙された実施形態の一覧に要約される。
１． 炎症性腸疾患の治療を必要としている対象における炎症性腸疾患を治療する方法であって、式（Ｉ）の化合物、

又はその製薬上許容される塩、
の有効量を前記対象に投与すること、を含む、方法。好ましい実施形態では、前記式（Ｉ）の化合物はそのリンゴ酸塩として使用される。

２． 前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、実施形態１の方法。

３． 前記炎症性腸疾患がクローン病である、実施形態１の方法。

４． 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が経口投与される、実施形態１～３のいずれか一項に記載の方法。いくつかのそのような実施形態において、前記化合物は、錠剤、カプセル剤、又はソフトジェル剤の形態で投与される。

５． 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が坐剤として投与される、実施形態１～３のいずれか一項に記載の方法。

６． 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が少なくとも１日１回対象に投与される、実施形態１～５のいずれか一項に記載の方法。この実施形態の好ましい態様では、前記式（Ｉ）の化合物は１日２回投与される。

７． 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の少なくとも１用量が１日２回対象に投与される、実施形態６に記載の方法。

８． 前記対象に投与される前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の用量が２５ｍｇ～８００ｍｇである、請求項１～７のいずれか一項の方法。本実施形態の具体例では、前記用量は、約２５ｍｇ、又は約５０ｍｇ、又は約７５ｍｇ、又は約１００ｍｇ、又は約１２５ｍｇ、又は約１５０ｍｇ、又は約１７５ｍｇ、又は約２００ｍｇ、又は約２２５ｍｇ、又は約２５０ｍｇ、又は約２７５ｍｇ、又は約３００ｍｇ、又は約３５０ｍｇ、又は約４００ｍｇ、又は約４５０ｍｇ、又は約５００ｍｇ、又は約５５０ｍｇ、又は約６００ｍｇ、又は約６５０ｍｇ、又は約７００ｍｇ、又は約７５０ｍｇ、又は約８００ｍｇである。

９． 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が、遅延放出製剤として投与される、好ましくは、下部消化管における前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を促進するように構成された製剤、又は、胃における前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を低減するように構成された製剤として投与される、実施形態１～８のいずれか一項に記載の方法。

１０． 前記対象が少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療薬による治療も受ける、実施形態１～９のいずれか一項に記載の方法。前記追加のＩＢＤ治療薬は、前記式（Ｉ）の化合物と混合された状態で、又は、前記式（Ｉ）の化合物とは別々に投与することができ、同じ投与経路で投与しても、異なる投与経路で投与してもよい。

１１． 前記少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療が以下から選択される、実施形態１０の方法：
ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
ｇ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
ｋ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに、
ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。

１２． 炎症性腸疾患の治療に使用するための、前記式（Ｉ）の化合物、

又は、その製薬上許容される塩。好ましい実施形態では、前記式（Ｉ）の化合物はそのリンゴ酸塩として使用される。

１３． 前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、実施形態１２に記載の炎症性腸疾患の治療に使用するための前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。

１４． 前記炎症性腸疾患がクローン病である、実施形態１２に記載の炎症性腸疾患の治療に使用するための前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。

１５． 経口投与用に調製された、実施形態１２～１４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。

１６． 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が少なくとも週１回、典型的には少なくとも１日１回、好ましくは１日２回、対象に投与されるために調製された、実施形態１２～１５のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。

１７． 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が、少なくとも１日１回、好ましくは１日２回、対象に投与されるために調製された、実施形態１６に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。

１８． 投与用に調製された前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の用量が２５ｍｇ～８００ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、実施形態１２～１７のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。本実施形態の具体例では、前記用量は、約２５ｍｇ、又は約５０ｍｇ、又は約７５ｍｇ、又は約１００ｍｇ、又は約１２５ｍｇ、又は約１５０ｍｇ、又は約１７５ｍｇ、又は約２００ｍｇ、又は約２２５ｍｇ、又は約２５０ｍｇ、又は約２７５ｍｇ、又は約３００ｍｇ、又は約３５０ｍｇ、又は約４００ｍｇ、又は約４５０ｍｇ、又は約５００ｍｇ、又は約５５０ｍｇ、又は約６００ｍｇ、又は約６５０ｍｇ、又は約７００ｍｇ、又は約７５０ｍｇ、又は約８００ｍｇである。

１９． 前記化合物が遅延放出製剤として調製される、実施形態１２～１８のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。

２０． 前記遅延放出製剤が、下部消化管における前記化合物の放出を促進するように構成されている、又は、胃における前記化合物の放出を低減するように構成されている、実施形態１９に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。

２１． 前記化合物が追加のＩＢＤ治療との併用のために調製又は構成された、実施形態１２～２０のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。

２２． 前記少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療が以下から選択される、実施形態２１に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩：
ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
ｇ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
ｋ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに、
ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。

２３． 炎症性腸疾患の治療用医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物、

又はその製薬上許容される塩の使用。好ましい実施形態では、前記式（Ｉ）の化合物はそのリンゴ酸塩として使用される。

２４． 前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、実施形態２３に記載の使用。

２５． 前記炎症性腸疾患がクローン病である、実施形態２３に記載の使用。

２６． 前記医薬が経口投与用に又は坐剤として調製された、実施形態２３～２５のいずれか一項に記載の使用。

２７． 前記医薬が、２５ｍｇ～８００ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含有する丸剤、カプセル剤、錠剤、又はソフトジェル剤などの、投薬単位として調製された、実施形態２３～２６のいずれか一項 使用。

２８． 前記医薬が遅延放出製剤として調製された、好ましくは、下部消化管における前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を促進する、又は、胃における放出を低減する、製剤として調製された、実施形態２３～２７のいずれか一項に記載の使用。

２９． 前記医薬が少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療法と使用されるために調製又は構成された、実施形態２３～２８のいずれか一項に記載の使用。

３０． 前記少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療法が以下から選択される、実施形態２９に記載の使用：
ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
ｇ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
ｋ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに、
ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。

３１． 追加のＩＢＤ治療薬と混合された、式（Ｉ）の化合物、

又はその製薬上許容される塩を含む、医薬組成物。好ましい実施形態では、前記式（Ｉ）の化合物はそのリンゴ酸塩として使用される。

３２． 経口投与用の固形剤、ソフトジェル剤、又は坐剤である、請求項３１に記載の医薬組成物。

３３． ２５ｍｇ～８００ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、実施形態３１又は実施形態３２に記載の医薬組成物。

３４． 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が遅延放出製剤として調製された、実施形態３１～３３のいずれか一項に記載の医薬組成物。

３５． 下部消化管における式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を促進するように構成された、又は、胃における式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を低減するように構成された、実施形態３１～３４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

３６． 前記少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療薬が以下から選択される、実施形態３１～３５のいずれか一項に記載の医薬組成物：
ａ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
ｂ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
ｃ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
ｄ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
ｅ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
ｆ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
ｇ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに、
ｈ）免疫経路阻害薬（例えば、アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、メトトレキサート、ＴＮＦ－α阻害薬）。

上記実施形態のいずれにおいても、前記式（Ｉ）の化合物はリンゴ酸塩として使用又は投与することができる。

［医薬組成物、組み合わせ、及び他の関連した用途］
さらに別の態様において、本開示は、少なくとも１つの薬剤的に許容できる担体又は賦形剤と混合された、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含む医薬組成物であって、ＩＢＤを治療するための使用のために構成された、組成物を提供する。いくつかの実施形態において、前記組成物は、ＩＢＤの治療に有用である追加の治療薬をさらに含む。いくつかの実施形態において、前記医薬組成物は、前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を遅延させるように、特に、主に下部消化管における前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を促進するように、且つ／又は、胃における前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を低減するように、構成されている。

さらに別の態様において、本開示は、炎症性腸疾患の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を提供する。前記化合物はそのリンゴ酸塩として使用され得る。

さらに別の態様において、本開示は、炎症性腸疾患を治療するための医薬を製造するための、前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の使用を提供する。これらの実施形態のいくつかでは、前記式（Ｉ）の化合物のリンゴ酸塩が使用される。

［製剤］
前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩、又は前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩を含む組み合わせのいかなる好適な製剤も調製することができる。一般論としては、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， （２０００） Ｈｏｏｖｅｒ， Ｊ． Ｅ． ｅｄｉｔｏｒ， ２０ ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｅａｓｔｏｎ， Ｐａ．， ｐａｇｅｓ ７８０－８５７を参照されたい。適切な投与経路に好適であるように製剤は選択される。化合物が安定な非毒性の酸塩又は塩基塩を形成するのに十分に塩基性又は酸性である場合、当該化合物を塩として投与することが適切であり得る。製薬上許容される塩の例としては、生理的に許容できる陰イオンを形成する酸と形成された有機酸付加塩があり、例えば、トシル酸塩、メタンスルホン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、マロン酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、α－ケトグルタル酸塩、及びα－グリセロリン酸塩が挙げられる。好適な無機塩を形成させてもよく、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、炭酸水素塩、及び炭酸塩が挙げられる。製薬上許容される塩は、当該技術分野において周知の標準手順を用いて、例えば、アミンなどの十分な塩基性を有する化合物と、生理学的に許容される陰イオンを与える好適な酸とによって得られる。カルボン酸のアルカリ金属（例えば、ナトリウム、カリウム、又はリチウム）塩又はアルカリ土類金属（例えば、カルシウム）塩も調製される。

好ましくは、前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、経口投与用に、典型的には錠剤又はカプセル剤として、製剤化される。いくつかの実施形態では、前記式（Ｉ）の化合物のリンゴ酸塩が使用される。

企図される化合物が薬理学的組成物の状態で投与される場合、当該化合物は薬剤的に許容できる賦形剤及び／又は担体と混合状態で製剤化され得ると考えられる。例えば、企図される化合物は、中性化合物として、若しくは製薬上許容される塩として経口的に、又は生理的食塩水中で静脈内に、投与され得る。リン酸塩、炭酸水素塩、又はクエン酸塩などの従来の緩衝液を、この目的のために使用することができる。当然ながら、当業者は、本明細書の教示の範囲内で製剤を改変することで、特定の投与経路用の多数の製剤を得てもよい。特に、企図される化合物を改変することで、水などの溶媒中の可溶性を高めてもよく、これは、例えば、当該技術分野における通常の技術の十分に範囲内である微細な変更（塩調製、エステル化など）により容易に達成できる。また、患者における有益な作用を最大化するために本化合物の薬物動態を管理することを目的として、特定の化合物の投与経路及び投与計画を変更することも、当該技術分野における通常の技術の十分に範囲内である。

本方法における使用のための水溶性有機溶剤の説明を目的とした例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルコール、アセトニトリル、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、又はこれらの組み合わせが挙げられ、これらに限定はされない。アルコールの例としては、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセロール、又はプロピレングリコールが挙げられるが、これらに限定はされない。

本方法における使用のための水溶性非イオン性界面活性剤の説明を目的とした例としては、クレモフォール（登録商標）ＥＬ、ポリエチレングリコール修飾クレモフォール（登録商標）（ポリオキシエチレングリセロールトリリシノレート（ｔｒｉｒｉｃｉｎｏｌｅａｔ）３５）、水素化クレモフォール（登録商標）ＲＨ４０、水素化クレモフォール（登録商標）ＲＨ６０、ＰＥＧ－サクシネート、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ソルトール（登録商標）ＨＳ（ポリエチレングリコール ６６０ １２－ヒドロキシステアレート）、ソルビタンモノオレート、ポロキサマー、ラブラフィル（登録商標）（エトキシ化杏仁油）、ラブラゾール（登録商標）（カプリル－カプロイルマクロゴール－８－グリセリド）、ゲルシア（登録商標）（グリセロールエステル）、ソフチゲン（登録商標）（ＰＥＧ６カプリン酸グリセリド）、グリセリン、グリコール－ポリソルベート、又はその組み合わせが挙げられるが、これらに限定はされない。

本方法における使用のための水溶性脂質の説明を目的とした例としては、野菜油、トリグリセリド、植物油、又はこれらの組み合わせが挙げられ、これらに限定はされない。脂肪油の例としては、ヒマシ油、ポリオキシルヒマシ油、トウモロコシ油、オリーブ油、綿実油、ピーナッツ油、ハッカ油、サフラワー油、ゴマ油、ダイズ油、硬化植物油、水素化ダイズ油、ヤシ油のトリグリセリド、パームシードオイル、及びこれらの水素化形態、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定はされない。

本方法における使用のための脂肪酸及び脂肪酸エステルの説明を目的とした例としては、オレイン酸、モノグリセリド、ジグリセリド、ＰＥＧの一若しくは二脂肪酸エステル、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定はされない。

本方法における使用のためのシクロデキストリンの説明を目的とした例としては、α－シクロデキストリン、β－シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン、又はスルホブチルエーテル－β－シクロデキストリンが挙げられるが、これらに限定はされない。

本方法における使用のためのリン脂質の説明を目的とした例としては、大豆ホスファチジルコリン、又はジステアロイルホスファチジルグリセロール、及びこれらの水素化形態、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定はされない。

［遅延放出製剤］
式（Ｉ）の化合物は、即時放出及び急速吸収用に製剤化されることがあり、又は、遅延放出用に製剤化されることがある。いくつかの実施形態において、前記化合物は、投与された製剤が胃を通過後、下部消化管で有効成分の送達を促進する方法及び組成物を用いる、遅延放出用に製剤化される。このような方法としては、公知の腸溶コーティングが挙げられ、これは、胃における式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の放出を遅くするか又は妨げることで、活性薬剤を主に腸で放出させ、ＩＢＤに最も影響を受ける組織への直接送達を増強するものである。遅延放出製剤に有用ないくつかの方法が、例えば、Ｂ． Ｓｉｎｇｈ， Ｍｏｄｉｆｉｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ ｓｏｌｉｄ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｃｏｌｏｎｉｃ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ， Ｒｅｃｅｎｔ Ｐａｔｅｎｔｓ ｏｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ ２００７， Ｖｏｌ． １（１）， ５３－６３に記載されている。式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、標的組織における活性薬剤の有効性を増加させることを目的として、胃における溶解を低減し、且つ／又は、下部消化（ＧＩ）管における溶解及び吸収を増加させる方法を用いて、製剤化されることがある。

遅延放出を達成する方法は、以下の１つ又は２つ以上の組み合わせを利用することがある：ｐＨ制御（又は遅延放出）系、時間制御（又は時間依存的）系、微生物制御系、及び圧力制御系。

当業者は、本明細書の教示の範囲内で製剤を改変することで、特定の投与経路用の多数の製剤を得てもよい。特に、前記化合物を改変することで、水などの溶媒中の可溶性を高めてもよい。また、患者における有益な作用を最大化するために本化合物の薬物動態を管理することを目的として、特定の化合物の投与経路及び投与計画を変更することも、当該技術分野における通常の技術の十分に範囲内である。

［製剤の組み合わせ］
各実施形態の方法は、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の有効量を、炎症性腸疾患に対する治療を必要としている対象に投与することを含む。前記式（Ｉ）の化合物は、中性化合物として投与されることがあり、又は、製薬上許容される塩として投与されることがある。いくつかの実施形態において、前記式（Ｉ）の化合物は、リンゴ酸塩として投与される。前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩は、単剤として投与されることがあり、又は、追加の治療薬と組み合わされてもよい。所望により、前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、１又は複数の追加の治療薬、特に、炎症性腸疾患の治療に有用であることが知られている治療薬と組み合わせて、投与されてもよい。これらの治療薬としては、以下が挙げられるが、これらに限定はされない：
ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
ｇ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
ｋ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに、
ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。

前記方法は、便微生物移植及び幹細胞移植などの治療法を含む、ＩＢＤを治療するための他の治療法と組み合わせた、前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の使用をさらに含む。

別のＩＢＤ治療薬又は治療法と組み合わせた前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の使用は、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩と別のＩＢＤ治療薬との同時投与、並びに、所与の患者における別のＩＢＤ治療薬又は治療法の同時使用であって、その他のＩＢＤ治療薬又は治療法が前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩とは別々に投与され、前記式（Ｉ）の化合物の投与と異なる日であってもよく、ただし、前記異なる治療的処置は順次に、且つ、その両方が対象に同時に治療効果を与えることが期待される時間枠に投与される、同時使用を含む。すなわち、前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、対象が、任意の期間に亘って、前記式（Ｉ）の化合物と、他のＩＢＤ治療薬又は治療法との両方からＩＢＤ治療の治療効果を受けることが期待される場合は常に、ＩＢＤ治療薬又は治療法と組み合わせて使用される。

前記追加のＩＢＤ治療薬は、前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩とは別々の医薬組成物において投与されてもよく、又は、両者の投与経路及び投与タイミングが単一医薬組成物中への含有に適合する場合は前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩と一緒に含まれてもよい。前記追加のＩＢＤ治療薬は、前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の投与と同時に、その前に、又はその後に、投与されてもよい。

［式（Ｉ）の化合物及びその医薬組成物の使用法］
本明細書中で提供された情報と併せて、式（Ｉ）の化合物の薬物速度論的特性及び化学的性質に関する当該技術分野において入手可能な情報に照らして、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を投与するための投与経路及び好適な製剤の選択は、医師の通常の技能の範囲内である。医師であれば、公知の方法を用いて、そのような処置の有効性をモニターし、投与量及び投与頻度を調整することができる。

本発明の方法を実施するために、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩、及びその医薬組成物は、経口投与、非経口投与、吸入投与、局所投与、経直腸投与、経鼻投与、頬側投与、経膣投与、埋め込み型リザーバーを介した投与、又は他の薬剤投与方法によって投与されてもよい。「非経口」という語は、本明細書で使用される場合、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑液包内、胸骨内、髄腔内、病巣内、及び頭蓋内への注射法又は点滴法を包含する。

本発明の方法の特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、経口投与される。経口投与用組成物としては、経口的に許容できるいかなる剤形であってもよく、錠剤、カプセル剤、乳剤、並びに水性懸濁剤、水性分散液、及び水溶液が挙げられるが、これらに限定はされない。経口用錠剤の場合、通常使用される担体としては、ラクトース及びコーンスターチが挙げられる。ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤も、添加することができる。カプセル剤の形態で経口投与する場合、有用な希釈剤としては、ラクトース及び乾燥コーンスターチが挙げられる。

式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の水性懸濁液又は水性乳濁液が経口投与される場合、当該化合物を、乳濁化剤又は懸濁化剤と組み合わされた油性相中に懸濁又は溶解させることがある。必要であれば、ある特定の甘味剤、香味剤、又は着色剤を添加することができる。点鼻エアロゾル又は吸入用組成物が、医薬製剤分野において周知の手法に従って調製されることがあり、好適な保存剤（例えば、ベンジルアルコール）、生物学的利用能を増強するための吸収促進剤、及び／又は当該技術分野において公知の他の可溶化剤若しくは分散剤を使用している、例えば生理食塩水中の溶液として、調製されることがある。

好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、典型的には１回量当たり２５ｍｇ～８００ｍｇの当該化合物（又は当該化合物のリンゴ酸塩）を含む、錠剤、カプセル剤、ソフトジェル剤、又は坐剤の形態で、経口投与される。１回量が、丸剤又はカプセル剤などの単一剤形中に含有されてもよいし、又は、１回量が、２、３、４、若しくはそれ以上の丸剤若しくはカプセル剤などの単一剤形の使用を要するものであってもよい。いくつかの実施形態において、丸剤、錠剤、又はカプセル剤などの単一剤形は、式（Ｉ）の化合物又はそのリンゴ酸塩を、１回量に適した量、例えば、約２５ｍｇ、又は約５０ｍｇ、又は約７５ｍｇ、又は約１００ｍｇ、又は約１２５ｍｇ、又は約１５０ｍｇ、又は約１７５ｍｇ、又は約２００ｍｇ、又は約２２５ｍｇ、又は約２５０ｍｇ、又は約２７５ｍｇ、又は約３００ｍｇ、又は約３５０ｍｇ、又は約４００ｍｇ、又は約４５０ｍｇ、又は約５００ｍｇ、又は約５５０ｍｇ、又は約６００ｍｇ、又は約６５０ｍｇ、又は約７００ｍｇ、又は約７５０ｍｇ、又は約８００ｍｇ含有する。いくつかの実施形態においては、所望の成人用１回量を含有する１錠の丸剤、錠剤、ソフトジェル剤、坐剤、又はカプセル剤が、ＩＢＤに対する治療を必要としている対象に少なくとも１日１回投与される。好ましい実施形態においては、式（Ｉ）の化合物を含む用量が、１日２回投与される。

また、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩は、単独で投与されてもよいし、本明細書において開示される他の治療薬と組み合わせて投与されてもよい。本発明における併用療法は、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩及びＩＢＤの治療に有用な少なくとも１つの他の薬剤的に活性な成分の少なくとも１用量の投与を含む。前記用量の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩及び他の薬剤的に活性な薬剤は、別々に投与されてもよいし、一緒に投与されてもよい。式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩及び他の薬剤的に活性な薬剤の各含有量と、相対的な投与タイミングは、所望の併用治療効果を達成することを目的として選択されることとなる。

以下の実施例は、大腸炎モデル系におけるその式（Ｉ）の化合物の生物活性を説明するために提供されたものであり、本発明の範囲を限定する意図はない。

実施例１．
誘導性大腸炎に対する式（Ｉ）リンゴ酸塩の効果
ＤＮＢＳの結腸内投与により、ウィスター系ラットにおいて大腸炎を誘導した。ラットは下記のような６群に分けられた。１つ目の群はＤＮＢＳ未処置（Ｎａｉｖｅ）群であり、群２～６はそれぞれ１日目にのみＤＮＢＳ処置を受けた。２つ目の群は、ＤＮＢＳによる処置を受け、治療薬による治療は受けていないものであり、疾病対照（ｄｉｓｅａｓｅｄ ｃｏｎｔｒｏｌ）として働く。３つ目の群は、陽性治療比較群として、潰瘍性大腸炎に対する公知の治療である、トファシチニブで治療されたものである。４つ目及び５つ目の群は、異なる投与量の式（Ｉ）の化合物のリンゴ酸塩で治療されたものであり、６つ目の群は、式（Ｉ）の化合物のリンゴ酸塩及びトファシチニブの組み合わせで治療されたものである。動物は、ＤＮＢＳが投与された直後から開始して、下記の通りに、毎日治療された。治療は７日間継続され、その間、便の硬さがモニターされた。７日後、動物を安楽死させ、それぞれの動物の結腸を、重量、長さ、及び潰瘍面積について評価した。

試験法及び結果を以下に要約する。

計８２匹のウィスター系ラットを、シャンハイ・ＳＬＡＣ・ラボラトリー・アニマル社から入手した。これらの動物は特定病原体除去動物であり、到着時におよそ４～５週齢であった。

各治療群への割付
ＢｉｏＢｏｏｋソフトウェアを用いた無作為化により、１日目の群平均体重が同様となるように、動物を各治療群に割り当て、偏りの制御を行った。

１日目、群２～６において、０．５ｍＬのＤＮＢＳ溶液（３０％エタノール中の５０ｍｇ／ｍＬ ＤＮＢＳ）の結腸内投与により、大腸炎をウィスター系ラットで誘導した。同時に、群１には、エタノール対照として、３０％エタノール（０．５ｍＬ）を結腸内投与した。計８２匹の雄ウィスター系ラットを、以下のように、６群に無作為に割り当てた：
第１群：未処置（エタノールのみの対照）、Ｎ＝１２
第２群：溶媒（ＤＮＢＳ対照）、Ｎ＝１４
第３群：トファシチニブ、３０ＭＰＫ、経口、１日２回、Ｎ＝１４
第４群：式Ｉリンゴ酸塩、３０ＭＰＫ、経口、１日１回、Ｎ＝１４
第５群：式Ｉリンゴ酸塩、１００ＭＰＫ、経口、１日１回、Ｎ＝１４
第６群：式Ｉリンゴ酸塩（１００ＭＰＫ、１日１回）＋トファシチニブ（３０ＭＰＫ、１日２回）、経口、Ｎ＝１４

全ての被験動物について、体重及び便の硬さを毎日記録した。７日目に動物を屠殺した。それぞれの結腸を採取した。潰瘍面積、遠位結腸重量、結腸の長さ、及び関連性のある結腸領域の写真を記録した。結腸組織を長軸方向に３片に割き、１片の結腸を１０％中性緩衝ホルマリン中で直ちに固定した。他の２片の結腸は採取後に液体窒素中で瞬間凍結し、－８０℃で保存した。

略語：
ＤＮＢＳ：２，４－ジニトロベンゼンスルホン酸
ＩＢＤ：炎症性腸疾患
ＣＭＣ－Ｎａ：カルボキシルメチルセルロースナトリウム

被験物質は以下の通りに調製した：式（Ｉ）リンゴ酸塩を電子はかりで秤量し、蒸留水に溶解させた後、ボルテックスにより完全に溶解させた。

対照化合物として、トファシチニブを式Ｉリンゴ酸塩の試験に含めた。トファシチニブは、関節リウマチ（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｉｔｈｒｉｔｉｓ）の治療用、及び中等症から重症の潰瘍性大腸炎の治療用に承認を受けたものである。

３ｍｇ／ｍＬトファシチニブ懸濁液を０．５％カルボキシルメチルセルロースナトリウム中で調製した：新鮮なサンプルを週毎に２回調製し品質を確保した。

ＤＮＢＳは３０％エタノール中に５０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。

参照薬液：トファシチニブを０．５％ＣＭＣ－Ｎａで３ｍｇ／ｍＬの濃度に希釈した。

大腸炎の誘導
１日目、動物を無作為に６群（表１の治療群を参照）に分け、４０時間絶食させた。絶食中、エネルギー摂取のために、生理食塩水中５％グルコース（１０ｍＬ／ｋｇ、皮下）を供給した。

試験の１日目に、これらの絶食動物を、ゾレチル（腹腔内、２５ｍｇ／ｋｇ）、ゾラゼパム（腹腔内、２５ｍｇ／ｋｇ）、及びキシラジン（腹腔内、５ｍｇ／ｋｇ）で麻酔した。

第２～６群においては、肛門を介して脾弯曲部（肛門から８ｃｍ）まで、結腸内に挿入したカテーテルを用いて、０．５ｍＬのＤＮＢＳを結腸内投与することにより、大腸炎を誘導した。第１群には、また結腸内投与により、３０％エタノールを投与した。ＤＮＢＳ又はエタノールに暴露した動物は、頭を下にした状態で１５分間保持した後、逆流を避けるために回復までトレンデレンブルク体位を維持した。

治療
第１群：動物に、１日１回、１日目から７日目まで、３０％エタノールの４時間後に、蒸留水を経口投与した。

第２群：動物に、１日１回、１日目から７日目まで、３０％エタノールの４時間後に、蒸留水を経口投与した。

第３群：動物に、１日２回、１日目から７日目まで、ＤＮＢＳの４時間後に、３０ｍｇ／ｋｇ（ｍｐｋ）トファシチニブを経口投与した。

第４～５群：動物に、１日１回、１日目から７日目まで、ＤＮＢＳの４時間後に、異なる用量の式Ｉリンゴ酸塩を経口投与した。

第６群：動物に、１日目から７日目まで、ＤＮＢＳの４時間後に、１００ｍｐｋの式（Ｉ）の化合物のリンゴ酸塩（式Ｉリンゴ酸塩と称される）を１日１回、及び、３０ｍｐｋのトファシチニブを１日２回、経口投与した。

大腸炎の評価
体重
試験中、体重を毎日記録した。開始体重に対する１日毎の体重変化率を、下記式を用いて算出した：
［（Ｘ日目の体重－初期体重）／初期体重］×１００
治療過程の試験動物の体重を図１にまとめる。

便の硬さスコア
実験の間、大腸炎の重症度の指標として、便を毎日モニターし、硬さのスコアリング（０＝有形便、１＝湿性／粘着性便、２＝軟便、３＝液状便）を行った。

上記スコアリングを用いて、前記７日間の実験について、治療過程の各動物の便の硬さスコアリングをグラフ化し、そのグラフを用いて治療群毎に曲線下面積（ＡＵＣ）を算出した。治療群及び対照群毎のＡＵＣを図２に示す。

結腸の重量及び長さ、並びに潰瘍面積
７日目、全ての動物を、ＣＯ２で窒息させた後に頸椎脱臼することにより屠殺した。正中切開で開腹した。結腸から内容物を取り除いて空にし、すすいで、重量を測定した。結腸の長さ（盲腸末端から肛門まで）及び結腸内側の潰瘍化表面積を測定した。全ての治療群及び対照群について、結腸の長さ（ＣＬ）、結腸の重量（ＣＷ）、及び潰瘍化の程度（面積）の肉眼的な評価測定を行った。それらの結果を、ＣＷ／ＣＬ、ＣＷ／ＢＷ（体重）、及びＣＷ／ＣＬ／ＢＷと共に、図３に示す。

注：潰瘍化の形状が不規則である場合、潰瘍化した部分同士を繋ぎ合わせて長方形を形成させてから、その長方形の面積を測定した（面積＝長さ＊幅）。

試料採取
結腸の長さ及び重量の評価後、結腸全体を長軸方向に３等分し、２片分の結腸を液体窒素中で瞬間凍結し、－８０℃で保存した。もう１片は１０％中性緩衝ホルマリンで固定し、病理組織学評価を行った。

臨床観察
疾病の徴候、並びに手術及び治療に対する全身反応について、動物の観察を毎日行った。正常な健康的外観及び挙動に対する全ての例外を記録し、標準的なＰｈａｒｍａＬｅｇａｃｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社の臨床観察フォームに詳細に記載した。

［統計］
体重、結腸の長さ、結腸の重量、結腸の重量／長さ、結腸の重量／体重、潰瘍面積、及び他の懸案（ｐｅｎｄｉｎｇ）パラメーターについて、群平均値±平均値の標準誤差を算出した。統計解析はＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ、ＳＰＳＳ又はＳｉｇｍａｐｌｏｔを用いて行った。使用された特定の統計検定は図のレジェンドで特定される。ｐ値が０．０５未満である場合を統計的に有意と見なした。

［結果］
溶媒（エタノール）のみで処置された対照と比較した場合、ＤＮＢＳで処置された全ての群において、有意な体重の減少、便の硬さスコア及び便の硬さスコアのＡＵＣの増加、結腸の長さの減少、結腸の重量の増加、並びに潰瘍面積の増加が認められた。これにより、このモデル系が大腸炎の症状を誘導したことが示された。ＣＷ／ＣＬ比、ＣＷ／ＢＷ比、及びＣＷ／ＣＬ／ＢＷ比についても、ＤＮＢＳ未処置群と比べて、処置群の方が高かった。

トファシチニブは、大腸炎効果を低減するが、式Ｉリンゴ酸塩とは異なる機構を介して作用することを期待された陽性対照として含められた。３０ｍｇ／ｋｇを１日２回投与されたトファシチニブ治療群では、ＣＷ／ＣＬ比、ＣＷ／ＢＷ比、及びＣＷ／ＣＬ／ＢＷ比が、それぞれ３７％、９％、及び１４％だけ改善した。

３０ｍｇ／ｋｇの式Ｉリンゴ酸塩を１日１回投与された治療群の動物は、結腸の長さの有意な増加を示した。ＤＮＢＳで処置された対照群に対して、ＣＷ／ＣＬ、ＣＷ／ＢＷ、及びＣＷ／ＣＬ／ＢＷの各阻害比が、それぞれ３０％、６％、及び２９％だけ改善した。

１００ｍｇ／ｋｇ／日の式Ｉリンゴ酸塩で治療された群の動物では、ＣＷ／ＣＬ比、ＣＷ／ＢＷ比、及びＣＷ／ＣＬ／ＢＷ比が、それぞれ４４％、２９％、及び３９％だけ改善した。これは、式Ｉの化合物が、両方の用量で、また高用量であるほど、大腸炎により引き起こされる病変の程度及び／又は重症度を低減したことを明らかにするものであり、式Ｉリンゴ酸塩は、誘導性大腸炎の治療においては、対照薬であるトファシチニブよりも効果的であるようである。

式Ｉリンゴ酸塩とトファシチニブの併用は、便の硬さスコアのＡＵＣを有意に減少させた。このことは、式Ｉリンゴ酸塩とトファシチニブの組み合わせが、ＩＢＤ治療に有益である可能性があることを示唆している。

実施例２：Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるＴＮＢＳ誘導性大腸炎に対する式（Ｉ）リンゴ酸塩の効果
従来法に従った結腸内へのトリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）の点滴注入により、大腸炎をＣ５７ＢＬ／６マウスで誘導した。Ａｎｔｏｎｉｏｕ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ． Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｓｕｒｇｅｒｙ， ｖｏｌ． １１， ９－１５ （２０１６）を参照されたい。これらのマウスをその後、各試験について示されているように、５～２０ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ）リンゴ酸塩（「ＳＰＨ－Ｘ」）又はＰＢＳ（対照）で治療した。

［肉眼観察］
図４Ａは、ＴＮＢＳ点滴注入の７日後におけるマウス結腸の肉眼形態を示しており、腹腔内送達による２０ｍｇ／ｋｇのＳＰＨ－Ｘで１日２回治療されたマウスの結腸を、代わりに溶媒（ＰＢＳ）を投与されたマウスの結腸と比較している。溶媒（ＰＢＳ）治療マウスの結腸の方が短く且つ膨張しており、また、明確な糞ペレット形成を示しておらず；これは潰瘍性大腸炎モデルの場合で予測された通りである。ＳＰＨ－Ｘ（２０ｍｇ／ｋｇ、１日２回）で治療されたマウスの結腸の方がより正常に見え；これらの結腸は溶媒治療マウスの結腸よりも長く且つ薄く、明確な糞ペレットを示している。これは、ＳＰＨ－Ｘ治療が、大腸炎モデルにおいて、肉眼的な身体レベルで、ＴＮＢＳが通常であれば引き起こすはずの傷害を治療又は予防していることを示している。

図４Ｂは、長軸方向に切開されて結腸の内側を露出しているＴＮＢＳ処置結腸を示している。上記のようにＴＮＢＳのみで治療された結腸は遠位端で出血示しているが、一方、ＴＮＢＳの点滴注入後に１０ｍｇ／ｋｇのＳＰＨ－Ｘを腹腔内投与された動物の結腸はそのようなダメージを示していない。外側及び内側のどちらの肉眼観察も、ＴＮＢＳ処置が大腸炎と一致する明瞭な肉眼形態的傷害を引き起こしていること、及び、それらの傷害が、ＳＰＨ－Ｘ（式（Ｉ）リンゴ酸塩）の腹腔内処置により実質的に予防又は回復（ｒｅｖｅｒｓｅ）されていることを示している。

［顕微鏡観察］
図５Ａ～図５Ｂは、Ｃ５７ＢＬ／６マウスから得られた結腸切片の組織学的観察を示している。全ての動物は上記のように大腸炎を誘導するためのＴＮＢＳ点滴注入後３日目に屠殺し、組織はＨ＆Ｅ（ヘマトキシリン及びエオシン）染色で可視化されている。

図５Ａの１つ目のパネルは、エタノールのみ（ＴＮＢＳなし）を注入された結腸由来の組織を示しており、これはベースラインとして働く。図５Ａの２つ目のパネルは、ＴＮＢＳ注入後にＰＢＳを１日２回腹腔内処置された結腸（大腸炎対照）を示しており、これは、ＴＮＢＳによって引き起こされた大腸炎傷害に典型的な組織傷害を示している。

図５Ｂは、ＴＮＢＳを注入されたマウスにおける、１日２回の５ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇのＳＰＨ－Ｘの効果を示している。図５Ｂの１つ目のパネルは、ＴＮＢＳを注入され、５ｍｇ／ｋｇのＳＰＨ－Ｘで１日２回治療された結腸の組織であるが；このパネルは、この用量のＳＰＨ－Ｘが、ＴＮＢＳ点滴注入によって引き起こされるあらゆる傷害を実質的に予防又は治療することを示している。図５Ｂの２つ目のパネルは、ＴＮＢＳを注入され、腹腔内投与された１０ｍｇ／ｋｇのＳＰＨ－Ｘで１日２回治療された結腸由来の組織である。このパネルも、ＳＰＨ－Ｘによる治療が、ＴＮＢＳによって引き起こされる傷害から結腸を実質的に保護することを示している。これらの画像は、ＳＰＨ－Ｘが、マウス大腸炎モデルにおけるＴＮＢＳによって引き起こされた傷害を、治療又は予防することを、顕微鏡レベルで示している。

［生化学的観察］
このモデルにおけるＳＰＨ－Ｘの効果を分子レベルで評価するために、再度、大腸炎をＴＮＢＳ点滴注入によりマウスにおいて導入し（３匹／治療群）、エタノールを対照として用いた。ＴＮＢＳ傷害後、試験動物を、溶媒（ＰＢＳ）又はＳＰＨ－Ｘ（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内、１日２回）のいずれかで３日間治療し、その後屠殺した。各試験動物から結腸の粘膜を分離し、ｍＲＮＡの調製に用いた。そのｍＲＮＡを逆転写してｃＤＮＡを得た。サイトカインであるＩＬ－１β及びＩＬ－６をｑＲＴ－ＰＣＲにより定量した。表２は、エタノール対照（ＴＮＢＳ処置なし）に対して正規化された、ｑＲＴ－ＰＣＲから得られたデータを示しており、これらの結果をグラフとして図６に示す。

ＴＮＢＳ点滴注入は、大腸炎モデルにおいて予測されるような、エタノール対照に対する、ＩＬ－１β及びＩＬ－６の両サイトカインの有意な上昇を引き起こした。これらのＳＰＨ－Ｘマウス由来の試料は、これらのサイトカインの有意なレベル減少を示した。大腸炎傷害はこれらのサイトカイン（及び、おそらくは他のサイトカイン）を介していると考えられていることから、このことは、ＳＰＨ－Ｘが、ＴＮＢＳによって引き起こされる組織傷害を生化学的レベルで低減し、サイトカイン放出を低減することにより少なくとも部分的に作用する可能性があることを示すものである。

最後に、サイトカイン解析において記載されたように治療された試験動物由来の粘膜ライセートを調製し、ウエスタンブロットで分析したことで、ＳＰＨ－Ｘが大腸炎モデルにおけるＴＮＦ－αのタンパク質レベルにどのような影響を与えるかが分かった。図７は、上記分析の結果を示しており；各レーンは１匹のマウスを表しており、対照としてβアクチンを含めた。エタノール対照動物は検出可能なＴＮＦ－αタンパク質を示さなかった。対照的に、ＴＮＢＳ大腸炎モデル動物は容易に検出可能なレベルのＴＮＦ－αを示した。ＳＰＨ－Ｘで治療されたマウス由来の粘膜アイソレートにＴＮＦ－αタンパク質が見られないことから、１０ｍｇ／ｋｇのＳＰＨ－Ｘ（１日２回、３日間；図ではＳｐｈと標識）による治療は、このＴＮＢＳインスタレーション（ｉｎｓｔａｌｌａｔｉｏｎ）の効果を回復させた。

実施例３：ヒト潰瘍性大腸炎及び正常粘膜結腸組織に対する式（Ｉ）リンゴ酸塩（ＣＦＮ００１／０１）の効果
健常ドナー由来及び潰瘍性大腸炎（ＵＣ）を有するドナー由来のヒト結腸組織を、サイトカイン産生を生じさせるように設計された条件下で試験することにより、式（Ｉ）の化合物が、潰瘍性大腸炎を有するドナー由来の組織においてサイトカイン産生を低減するかどうかを確認した。

３人は正常であり、３人は潰瘍性大腸炎を有する、インフォームドコンセントが得られた６人のドナーの手術残余供給源から、ヒトＵＣ胃腸管組織とヒト正常胃腸管組織を得た。ドナーは、過去１か月以内にいずれかの抗サイトカイン治療薬を受けたことがある被験者を除外するための事前スクリーニングを受けた。試料毎に、平滑筋を粘膜及び付着粘膜下組織から分離した。メスを用いて各試料を切開し、およそ５ｍｍ×５ｍｍサイズの全層粘膜生検を１８個得た。培養プレートを準備する間、これらの試料を約１０分間、培地中で洗浄及び保持した。

［被験物質の調製］
黄色ブドウ球菌エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）（１００μｇ／ｍＬ原液）を、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中で調製した。次に、この１００μｇ／ｍＬ原液を濃度１０μｇ／ｍＬにＰＢＳで希釈して、５０μＬのこの溶液を９．９５ｍＬの培地に添加することで最終ウェル濃度５０ｎｇ／ｍＬのＳＥＢが得られるようにした。ＳＥＢを添加することで、ベースラインレベルが一貫したサイトカイン産生を得た。

Ｂｉｒｂ７９６（陽性対照、セレック・ケミカルズ社（Ｓｅｌｌｅｃｋ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）、カタログ番号：Ｓ１５７４）を粉末として購入した。Ｂｉｒｂ７９６は、サイトカイン形成を阻害することが知られているｐ３８ＭＡＰキナーゼの広域スペクトル阻害剤である。１０ｍＭ原液をＤＭＳＯ中で調製した。この溶液を次に、１０ｍＬの培地当たり体積１μＬとなるように培地に添加して、適切な濃度である１μＭのＢｉｒｂ７９６及びＤＭＳＯ濃度０．０１％を達成した。

ＣＦＮ００１／０１（式（Ｉ）リンゴ酸塩）を粉末として得て、１０ｍＭの原液を蒸留水中で調製し、－２０℃で保存した。実験日毎に、新鮮な１０ｍＭの分割量を使用した。蒸留水で１０ｍＭの分割量を３００μＭ、１００μＭ、３０μＭ、及び１０μＭの濃度に希釈することで、検量線用標準溶液を準備した。

次に各作用濃度を、培地１ｍＬ当たり１μｌだけ培地に添加して、各ウェルにおいて３００ｎＭ、１００ｎＭ、３０ｎＭ、及び１０ｎＭの最終濃度を得た。

ＣＭＲＬ培地は標準方法で調製した。溶媒は蒸留水とし、対照用に、試験化合物と合うように１ｍＬ当たり１μｌだけ培地に添加した。

試料を、気液界面のＮｅｔｗｅｌｌフィルター上にアピカル（粘膜）側を上に向けて配置した。次に、この生検標本を、適切な対照又は被験物質である式Ｉリンゴ酸塩（「ＣＦＮ００１／０１」）を添加した培地中、高Ｏ２雰囲気下、およそ３７℃でインキュベートした。ｐ３８ＭＡＰキナーゼ阻害剤Ｂｉｒｂ７９６（ＣＡＳ ２８５９８３－４８－４）を陽性対照として用いた。各試験条件は１ドナーにつきトリプリケート生検で評価された。また、各試料用の試験培地には５０ｎｇ／ｍＬの黄色ブドウ球菌エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）も含ませて、ベースラインレベルが一貫したサイトカイン産生を達成した。各試験条件は１ドナーにつきトリプリケート生検で評価された。

［試験条件：］
１．溶媒対照
２．ＢＩＲＢ７９６－１μＭ
３．ＣＦＮ００１／０１－３００ｎＭ
４．ＣＦＮ００１／０１－１００ｎＭ
５．ＣＦＮ００１／０１－３０ｎＭ
６．ＣＦＮ００１／０１－１０ｎＭ

培養開始からおよそ１８時間後、培地試料を収集し、液体窒素中で急速凍結し、ＥＬＩＳＡ分析用に調製されるまでおよそ－８０℃で保存した。

培地試料はその後、マルチプレックスＥＬＩＳＡを用いて、ＩＬ－１β、ＩＬ－１７Ａ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、及びＩＬ－２３についての分析を行った。使用されたマルチプレックスＥＬＩＳＡプラットフォームは、Ｌｕｍｉｎｅｘ ｘＭＡＰ（登録商標）適合性の磁気ビーズ技術を用いた、Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｍａｇｐｉｘ（登録商標）システムであった。各分析物は、同じ９６ウェル分析用プレートに関して作成された検量線に対する内挿によって定量化した。各試料はデュプリケートで分析し、その平均値を図８のグラフに用いた。

図８には、選択されたＥＬＩＳＡ結果がグラフ形式で示されているが、各グラフは１人のＵＣ被験者についてのデータを表しており；これらのグラフは、粘膜組織試料によるＩＬ－６放出に対するＣＦＮ００１／０１の効果を示している。図８の各グラフは、１人のＵＣ被験者からの結果をまとめたものであり、各ドットは、３つのレプリケート組織試料のうち１つからのサイトカイン放出を表している。試験条件毎の水平方向の実線は、当該試験条件においての、３つの個々のドナー平均値の平均値を示しており、溶媒対照のパーセンテージとして表されている。

図８Ａ～図８Ｃのグラフが示しているように、ＣＦＮ００１／０１治療は、３人中２人の被験者、ドナーＡ（図８Ａ）及びドナーＢ（図８Ｂ）において、陽性対照Ｂｉｒｂ７９６の効果と同等以上に、有意且つ用量依存的にＩＬ－６産生を減少させた。ドナーＣから得られた試料（図８Ｃ）は、Ｂｉｒｂ－７９６（陽性対照）によるＩＬ－６の減少を示しているが、ＳＰＨ－Ｘによる治療に対してはＩＬ－６の減少を示していない。

生物学的治療薬による効果的なＩＢＤ治療は、ＩＬ－６レベルの減少を伴うことが報告されており、生物学的ＩＢＤ治療薬による治療１０週間目の減少（ｐ＝０．０２２）は、当該治療の１２か月間後の臨床応答の持続を伴った。Ｃａｖｉｇｌｉａ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｅｄ．， ｖｏｌ． ９， ８００ （２０２０）。報告された最初の治療後試験であった１０週間目のマーク（ｍａｒｋ）では、非反応性患者がＩＬ－６産生の低下を示さなかった。すなわち、この報告が示唆するように、全てのＩＢＤ患者が、全ての治療薬に、あるいは同様に、反応するわけではない。同様に、図８のドナーＣも、ＣＦＮ００１／０１に反応しないＵＣを有する対象である可能性があるが、一方で、この対象はＢｉｒｂ７９６には反応しているようである。ＣＦＮ００１／０１はまた、一部のＵＣ患者において、炎症性サイトカインであるＩＬ－１７Ａ及び腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）の放出を、用量依存的に減少させた。

上記の詳細な説明は、本発明を実施する際に当業者を助ける目的で提供されている。しかし、本明細書で説明され特許請求された本発明は、開示された本明細書における特定の実施形態によって範囲が限定されることはなく、というのも、これらの実施形態は本発明のいくつかの態様の例示として意図されているためである。均等な実施形態はいずれも本発明の範囲内であることが意図される。実際に、本明細書に示され、説明されたものに加えて、本発明の発見の要旨から逸脱しない本発明の様々な変更が、上記の説明から当業者には明らかとなるであろう。そのような変更も、添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれることが意図される。

本願において引用された全ての刊行物、特許、特許出願、及び他の参考文献は、それぞれ個々の刊行物、特許、特許出願、又は他の参考文献が全ての目的においてその全体が参照によって援用されることが明確且つ個別に示されているのと同程度に、全ての目的においてそれらの全体が参照によって本明細書に援用される。本明細書における参考文献の引用は、そのような参考文献が本発明に対する先行技術であることの承認とは解釈されないものとする。

Claims (36)

1. 炎症性腸疾患の治療を必要としている対象における炎症性腸疾患を治療する方法であって、
   式（Ｉ）の化合物、
   
   又はその製薬上許容される塩の有効量を前記対象に投与すること、
   を含む、方法。
2. 前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項１に記載の方法。
3. 前記炎症性腸疾患がクローン病である、請求項１に記載の方法。
4. 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が経口投与される、請求項１～請求項３のいずれか一項に記載の方法。
5. 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が坐剤として投与される、請求項１～請求項３のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が少なくとも１日１回前記対象に投与される、請求項１～請求項４のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の少なくとも１用量が１日２回前記対象に投与される、請求項６に記載の方法。
8. 前記対象に投与される前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の用量が２５ｍｇ～８００ｍｇである、請求項１～請求項３のいずれか一項に記載の方法。
9. 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が、遅延放出製剤として投与される、好ましくは、下部消化管における前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を促進するように構成された製剤、又は、胃における前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を低減するように構成された製剤として投与される、請求項１～請求項３のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記対象が少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療による治療も受ける、請求項１～請求項３のいずれか一項に記載の方法。
11. 前記少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療が以下から選択される、請求項１０に記載の方法：
    ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
    ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
    ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
    ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
    ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
    ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
    ｇ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
    ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
    ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
    ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
    ｋ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
    ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに
    ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。
12. 炎症性腸疾患の治療に使用するための、前記式（Ｉ）の化合物、
    
    又は、その製薬上許容される塩。
13. 前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項１２に記載の炎症性腸疾患の治療に使用するための前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
14. 前記炎症性腸疾患がクローン病である、請求項１２に記載の炎症性腸疾患の治療に使用するための前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
15. 経口投与用に調製された、請求項１２～請求項１４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
16. 少なくとも１日１回対象に投与されるように調製された、請求項１２～請求項１４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
17. １日２回対象に投与されるように調製された、請求項１２～請求項１４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
18. 投与用に調製された前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の用量が２５ｍｇ～８００ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、請求項１２～請求項１４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
19. 前記化合物が遅延放出製剤として調製される、請求項１２～請求項１４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
20. 前記遅延放出製剤が、下部消化管における前記化合物の放出を促進するように構成されている、又は、胃における前記化合物の放出を低減するように構成されている、請求項１９に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
21. 前記化合物が追加のＩＢＤ治療との併用のために調製又は構成された、請求項１２～請求項１４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩。
22. 前記少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療が以下から選択される、請求項２１に記載の式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩：
    ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
    ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
    ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
    ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
    ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
    ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
    ｇ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
    ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
    ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
    ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
    ｋ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
    ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに
    ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。
23. 炎症性腸疾患の治療用医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物、
    
    又はその製薬上許容される塩の使用。
24. 前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項２３に記載の使用。
25. 前記炎症性腸疾患がクローン病である、請求項２３に記載の使用。
26. 前記医薬が経口投与用に又は坐剤として調製された、請求項２３～請求項２５のいずれか一項に記載の使用。
27. 前記医薬が、２５ｍｇ～８００ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含有する投薬単位、例えば丸剤、カプセル剤、錠剤、又はソフトジェル剤、として調製された、請求項２３～請求項２５のいずれか一項に記載の使用。
28. 前記医薬が遅延放出製剤として調製された、好ましくは、下部消化管における前記式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を促進する、又は、胃における放出を低減する、製剤として調製された、請求項２３～請求項２５のいずれか一項に記載の使用。
29. 前記医薬が少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療法と使用されるために調製又は構成された、請求項２３～請求項２５のいずれか一項に記載の使用。
30. 前記少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療法が以下から選択される、請求項２９に記載の使用：
    ａ）抗ＴＮＦα薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ、ゴリムマブ）；
    ｂ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
    ｃ）抗接着（抗インテグリン）薬（例えば、ナタリズマブ、ベドリズマブ、セルトリズマブ（ｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ））；
    ｄ）ＩＬ－１２／ＩＬ－２３阻害薬（例えば、ウステキヌマブ、リサンキズマブ）；
    ｅ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
    ｆ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
    ｇ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
    ｈ）幹細胞移植（例えば、造血幹細胞、脂肪由来幹細胞）；
    ｉ）糞便移植（ＦＭＴ）；
    ｊ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
    ｋ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
    ｌ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに
    ｍ）アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、及びメトトレキサートなどの免疫経路阻害薬。
31. 追加のＩＢＤ治療薬と混合された、式（Ｉ）の化合物、
    
    又はその製薬上許容される塩、
    を含む、医薬組成物。
32. 経口投与用の固形剤又は坐剤である、請求項３１に記載の医薬組成物。
33. ２５ｍｇ～８００ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、請求項３１に記載の医薬組成物。
34. 前記式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が遅延放出製剤として調製された、請求項３１～請求項３３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
35. 下部消化管における式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を促進するように構成された、又は、胃における式（Ｉ）の化合物若しくはその製薬上許容される塩の放出を低減するように構成された、請求項３１～請求項３３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
36. 前記少なくとも１つの追加のＩＢＤ治療薬が以下から選択される、請求項３１～請求項３３のいずれか一項に記載の医薬組成物：
    ａ）スフィンゴシン－１－リン酸（Ｓ１Ｐ）受容体調節薬（例えば、オザニモド）；
    ｂ）トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）阻害薬（例えば、モンジャーセン、ピルフェニドン）；
    ｃ）ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害薬（例えば、アプレミラスト（ａｐｒｉｍｅｌａｓｔ））；
    ｄ）ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）阻害薬（例えば、トファシチニブ、フィルゴチニブ）；
    ｅ）プラスミノーゲン活性化因子インヒビター１（ＰＡＩ－１）阻害薬（例えば、ＭＤＩ－２２６８、チプラクスチニン）；
    ｆ）アミノサリチル酸系薬（例えば、メサラミン、バルサラジド、オルサラジン）；
    ｇ）抗炎症性コルチコステロイド；並びに、
    ｈ）免疫経路阻害薬（例えば、アザチオプリン、メルカプトプリン、シクロスポリン、メトトレキサート、ＴＮＦ－α阻害薬）。